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紫外可见分光光度法测定纯度
紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法，可以用于测定化合物的纯度。
它基于物质对于紫外或可见光的吸收特性进行测量。
测定纯度的步骤如下：
1. 准备样品：将待测物质按照标准操作程序进行样品制备，例如溶解、稀释等。
2. 调节分光光度计：根据待测物质的吸收特性，选择合适的波长和光程进行测量。
通常使用紫外和可见光区域的波长，常用波长为200-800nm。
3. 调节参比溶液：选择一个已知纯度的参比物质制备参比溶液，并使用它校准仪器。
选择合适的波长和光程进行校准。
4. 测定样品吸光度：使用校准后的仪器，将待测溶液放入样品池中，测量吸光度。
注意要保持仪器和溶液的温度和湿度恒定。
5. 计算纯度：根据测得的吸光度，使用已知浓度对应的校准曲线或定量计算方法，计算出样品的纯度。
需要注意的是，测定精度和准确度与样品制备和仪器校准的好坏以及操作流程的控制有关。
为确保结果的准确性，建议进行多次重复实验并计算平均值。
另外，不同的化合物和溶剂可能存在吸收特性或背景吸光的干扰，需要根据具体情况进行考虑和处理。
紫外—可见分光光度分析法一、基本要求掌握：本章要求掌握分光光度法的特点、基本原理、测定方法及计算方法；分子吸收光谱与电子跃迁类型，物质对光的选择吸收与吸收光谱曲线，摩尔吸收系数与吸收系数，吸光度与透光度，偏离朗伯-比尔定律的原因；掌握显色反应条件及光度测量条件的选择；掌握紫外—可见分光光度计的主要部件，各部件的作用及仪器原理，主要类型及特点；掌握差示分光光度法的原理、特点。
理解：物质分子结构与紫外吸收光谱的关系，吸收波长位移与分子结构变化的关系；紫外—可见分光光度定量分析影响结果准确度的各种因素。
了解：了解紫外—可见分光光度法测定灵敏度和选择性的途径；双波长分光光度法等其它分光光度法定量测定的方法；紫外—可见分光光度法在有机化合物的结构解析方面的作用及在其他方面的应用。
二、基本概念与重点内容A概述1．紫外—可见分光光度法的特点灵敏度与准确度较高；选择性较好；设备简单、操作简便。
2．分光光度法的发展过程目视比色法光电比色法分光光度法3．分子的紫外—可见吸收光谱分子的紫外—可见吸收光谱是基于物质分子吸收紫外辐射或可见光，其外层电子跃迁而成，又称分子的电子跃迁光谱。
紫外—可见分光光度法是基于物质分子的紫外—可见吸收光谱而建立的一种定性、定量分析方法。
4．光的基本性质5．物质对光的吸收及吸收光谱6．紫外—可见吸收光谱与电子跃迁类型7．生色团与助色团B 光的吸收定律1．光吸收的基本定律（朗伯-比尔定律）2．吸光度与透光率、百分透光率之间的关系3．工作曲线的绘制与应用4．吸光系数、摩尔吸光系数和桑德尔灵敏度5．偏离朗伯-比尔定律的因素C紫外-可见分光光度计1．分光光度计的主要部件2．在紫外和可见光区进行测量时，分别选择何种光源3．单色器的主要元件光栅；棱镜4．分光光度计中的检测器类型早期：光电池；光电管；光电倍增管。
5．紫外-可见分光光度计的类型及特点D显色测定试样的制备和光度测定条件的选择1．显色反应及其影响因素2．测定读数误差和测定条件的选择5．入射波长的选择E 分光光度定量测定方法与其他应用1．单组分的测定通常采用 A-C 标准曲线法定量测定。
紫外-可见分光光度法是在190～800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。
当光穿过被测物质溶液时，物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。
因此，通过测定物质在不同波长处的吸光度，并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。
从吸收光谱中，可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmin。
物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。
因此，可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较，或通过确定最大吸收波长，或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。
用于定量时，在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度，并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。
