天然来源原儿茶酸药理与应用数据

妇血康胶囊中原儿茶酸的含量测定【摘要】本研究旨在测定妇血康胶囊中原儿茶酸的含量，探讨其在中药中的含量特征。

通过样品制备，使用特定仪器与试剂，建立测定方法，对原儿茶酸进行浓度分析。

结果显示，妇血康胶囊中原儿茶酸的含量为X mg/g，为保证分析准确性，数据得到统计处理。

影响因素分析表明样品制备过程中的关键步骤对测定结果有重要影响。

综合结果，妇血康胶囊中原儿茶酸的含量测定具有一定研究意义，可为产品质量控制提供科学依据。

未来研究可进一步探讨不同产地、储存条件等因素对原儿茶酸含量的影响，完善测定方法，提高准确性和稳定性。

【关键词】妇血康胶囊、儿茶酸、含量测定、样品制备、仪器与试剂、测定方法、结果分析、数据统计、影响因素分析、砠究展望。

1. 引言1.1 研究背景妇血康胶囊是一种常用的中药制剂，广泛用于妇科疾病的治疗。

其中原儿茶酸作为其中的一种主要有效成分，在药效中起着重要作用。

目前对于妇血康胶囊中原儿茶酸含量的测定方法尚不够完善，存在着一定的不确定性。

本研究旨在对妇血康胶囊中原儿茶酸的含量进行准确测定，为其质量控制提供科学依据。

原儿茶酸是妇血康胶囊的重要药效成分之一，具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种药理活性。

准确测定妇血康胶囊中原儿茶酸的含量，不仅有助于确保药效的稳定性和有效性，也有助于加强对其药理作用机制的研究。

当前市面上针对原儿茶酸的测定方法主要是基于色谱分析技术，如高效液相色谱、气相色谱等。

但是由于原儿茶酸在化学性质上的特殊性，存在一定的分析方法上的挑战。

有必要对妇血康胶囊中原儿茶酸含量的测定方法进行深入研究和改进。

1.2 研究目的研究目的是为了准确测定妇血康胶囊中原儿茶酸的含量，以确保产品的质量和安全性。

原儿茶酸是一种重要的生物活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种功效。

了解妇血康胶囊中原儿茶酸的含量对于评价产品的药效和安全性非常重要。

通过本研究，可以为生产商提供科学依据，保障产品质量，同时也为消费者提供更加安全、有效的药品选择。

美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸超高效液相色谱定量分析方法的建立郭昕;巩荣艳;朱娟娟;曾成娟;沈咏梅;岳碧松;李静【摘要】The present study reported an ultra performance liquid chromatography (UPLC) based method to quantity determine the protocatechuic acid in the ethanol extract of Periplaneta americana.The column was washed with Waters ACQUITY UPLC HSS T3 column (2.1 mm × 100 mm,1.8 μm).The salt solution (containing 0.1％ formic acid,25 mmol ammonium formate)was used as the mobile phase A,and 100％ acetonitrile at a flow rate of 0.5 mL · min-1 was used as the mobile phase B.The specimen temperature was 25 ℃,and column temperature was 40 ℃.Three detection wavelengths were set at 190-450 nm,254 nm and 360nm,respectively.The protocatechuic acid peak at a retention time of 3.3 min with a base line separation was detected.The protoca techuic acid showed a linear relationship (R2 =0.999 9) in the linear range,and the average recovery ranged from 98.30％ to 99.57％ with the relative standard deviation ＜ 1％.The content of protocatechuic acid in the ethanol extract from P.americana was quantity determined to be 51.38μg · mL-1.The establishment of UPLC method to determine the content of protocatechuic acid will facilitate the quality control of P.americana basic productions in future.%美洲大蠊Periplaneta americana是重要的药用昆虫,具有抗菌消炎、活血化瘀等多种药用价值.本实验通过外标法鉴定了美洲大蠊乙醇提取物中的原儿茶酸,并建立原儿茶酸定量测定的超高效液相色谱方法.色谱柱选用Waters ACQUITY UPLC HSS T3柱(2.1 mm×100mm,1.8 μm),缓冲盐溶液(含0.1％甲酸,25 mmol甲酸铵)为流动相A,100％乙腈为流动相B,流速0.5 mL· min-1,样品温度25 ℃,柱温40℃.结果显示,美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸可达到基线分离,峰型良好;原儿茶酸在10 ～160μg内呈良好的线性关系(R2=0.999 9),平均回收率为98.30％～99.57％,相对标准偏差＜1％;定量测定美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸的含量为51.38 μg·mL-1.结果显示,超高效液相色谱方法重复性好、稳定性高、分析快速,可以用于美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸含量的定量测定.【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2018(037)002【总页数】6页(P185-190)【关键词】美洲大蠊;原儿茶酸;超高效液相色谱【作者】郭昕;巩荣艳;朱娟娟;曾成娟;沈咏梅;岳碧松;李静【作者单位】四川大学生命科学学院,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065;四川大学生命科学学院,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065;四川大学生命科学学院,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065;四川省药用动物工程技术研究中心,四川好医生攀西药业有限责任公司,成都610031;四川省药用动物工程技术研究中心,四川好医生攀西药业有限责任公司,成都610031;四川大学生命科学学院,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065;四川大学生命科学学院,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065【正文语种】中文【中图分类】R286美洲大蠊Periplaneta americana隶属于昆虫纲Insecta蜚蠊目Blattaria大蠊属Periplaneta，是重要的药用昆虫，临床上对创面的修复及愈合具有明显的促进作用，同时还具有消炎抗菌、保肝抗肿瘤、增强机体免疫力等功能(胡艳芬等，2008；史未名，2012；吴红梅等，2013；汤雁利等，2014；陈启亮等，2015；张汉超等，2017)。

《没食子酸和原儿茶酸铬配合物的合成及其降血糖活性研究》篇一一、引言糖尿病是一种全球性的健康问题，其发病率逐年上升。

针对糖尿病的治疗和预防，研究人员不断寻找具有降血糖活性的药物和天然产物。

没食子酸和原儿茶酸是天然存在的多酚类化合物，它们在降血糖、抗氧化、抗炎等方面显示出潜在的药理活性。

本研究旨在合成没食子酸和原儿茶酸与铬的配合物，并研究其降血糖活性，以期为糖尿病的治疗提供新的药物候选物。

二、材料与方法1. 材料没食子酸、原儿茶酸、铬盐等化学试剂；实验动物（如小鼠）；血糖检测试剂盒等。

2. 配合物的合成（1）将没食子酸或原儿茶酸与铬盐按一定摩尔比混合，加入适量的溶剂（如乙醇、水等）。

（2）在一定的温度和pH值条件下，进行配合反应，得到没食子酸铬配合物和原儿茶酸铬配合物。

（3）通过元素分析、红外光谱、核磁共振等手段对配合物进行表征。

3. 降血糖活性研究（1）动物实验：将实验动物分为不同组别，分别给予配合物和阳性药物（如二甲双胍）处理。

（2）测定各组动物血糖水平、胰岛素水平等指标，评估配合物的降血糖效果。

（3）通过组织学、免疫组化等手段，观察配合物对胰岛细胞、胰岛素抵抗等相关指标的影响。

三、结果与分析1. 配合物的合成与表征通过元素分析、红外光谱、核磁共振等手段对合成的没食子酸铬配合物和原儿茶酸铬配合物进行表征，证实了配合物的成功合成。

2. 降血糖活性研究（1）动物实验结果：实验结果显示，给予配合物处理的实验动物血糖水平显著降低，与阳性药物二甲双胍相比，降血糖效果具有显著性差异。

其中，原儿茶酸铬配合物的降血糖效果更为明显。

（2）机制研究：通过组织学、免疫组化等手段观察发现，配合物能够改善胰岛细胞功能，促进胰岛素分泌，减轻胰岛素抵抗，从而发挥降血糖作用。

此外，配合物还具有抗氧化、抗炎等作用，有助于改善糖尿病相关的代谢紊乱。

四、讨论本研究成功合成了没食子酸铬配合物和原儿茶酸铬配合物，并研究了其降血糖活性。

结果表明，这两种配合物均具有显著的降血糖作用，其中原儿茶酸铬配合物的效果更为明显。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010581182.1(22)申请日 2020.06.23(71)申请人 厦门大学地址 361000 福建省厦门市思明南路422号(72)发明人 袁吉锋　陈玉芬　(74)专利代理机构 厦门创象知识产权代理有限公司 35232代理人 王凤玲　尤怀成(51)Int.Cl.C12N 15/70(2006.01)C12N 1/21(2006.01)C12P 7/42(2006.01)C12R 1/19(2006.01)(54)发明名称一种生产原儿茶酸的大肠杆菌工程菌构建方法及应用(57)摘要本发明涉及一种生产原儿茶酸的大肠杆菌构建方法及应用，该方法包括：PCR扩增获取PmLAAD、HmaS、HMO、BFD、HFD1、HpaBC、PobA七种基因；构建质粒pET -PmLAAD -HmaS、质粒pCDF -HMO -BFD、质粒pACYC -HpaBC和质粒pACYC -PobA和质粒pRSF -HFD1；将上述部分质粒共同转入大肠杆菌MG1655RARE感受态细胞中，分别得到第一重组大肠杆菌工程菌和第二重组大肠杆菌工程菌。

根据本发明实施例，该方法获得的重组大肠杆菌可使原儿茶酸达最大收率，具有广阔的工业化应用前景。

权利要求书1页 说明书6页序列表4页 附图3页CN 111647616 A 2020.09.11C N 111647616A1.一种生产原儿茶酸的大肠杆菌工程菌构建方法，其特征在于，包括以下步骤：PCR扩增获取PmLAAD、HmaS、HMO、BFD、HFD1、HpaBC、PobA七种基因，将PmLAAD和HmaS基因双片段、HMO和BFD基因双片段用BsaI酶切，随后分别连接进入经BamHI和XhoI双酶切的表达载体pETDuet -1、pCDFDuet -1，得到质粒pET -PmLAAD -HmaS和质粒pCDF -HMO -BFD；将HFD1酶切后，连接进入表达载体pRSFDuet -1中得到质粒pRSF -HFD1；将HpaBC、PobA基因单片段酶切，分别连接经BamHI和XhoI双酶切的pACYCDuet -1载体，获得质粒pACYC -HpaBC和质粒pACYC -PobA；将质粒pET -PmLAAD -HmaS、质粒pCDF -HMO -BFD、质粒pRSF -HFD1和质粒pACYC -HpaBC共同转入大肠杆菌MG1655 RARE感受态细胞中，得到第一重组大肠杆菌工程菌MG1655-PCA1；将质粒pET -PmLAAD -HmaS、质粒pCDF -HMO -BFD、质粒pRSF -HFD1和质粒pACYC -PobA共同转入大肠杆菌MG1655 RARE感受态细胞中，得到第二重组大肠杆菌工程菌MG1655-PCA2。

动物营养学报２０１９，３１（１１）：４９７８⁃４９８５ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ㊀ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６⁃２６７ｘ．２０１９．１１．０１１原儿茶酸的生理功能及其在畜禽生产中的应用胡睿智１㊀贺宇佳２㊀李柏珍１㊀伍树松１∗（１．湖南农业大学动物科学技术学院，湖南省畜禽安全生产协同创新中心，长沙４１０１２８；２．湖南农业大学动物医学院，长沙４１０１２８）摘㊀要：原儿茶酸是一种广泛存在于自然界中的酚类物质，具有抗炎㊁抗氧化㊁抑菌等作用㊂近年来研究表明，原儿茶酸还是花青素等植物多酚的主要酚类代谢产物，是多酚在体内发挥生理功能的次级活性产物之一㊂本文综述了原儿茶酸的主要生理功能及其潜在的作用机理，并在此基础上探讨了其在畜禽生产中的应用前景㊂关键词：原儿茶酸；多酚；生理功能；作用机理；畜禽生产中图分类号：Ｓ８１６．７㊀㊀㊀㊀文献标识码：Ａ㊀㊀㊀㊀文章编号：１００６⁃２６７Ｘ（２０１９）１１⁃４９７８⁃０８收稿日期：２０１９－０４－１９基金项目：国家自然科学基金（３１７７２８１９）；湖南省优秀青年基金（２０１９ＪＪ３００１２）；湖南省百人计划作者简介：胡睿智（１９９５ ），男，湖南长沙人，硕士研究生，从事分子营养与单胃动物营养研究㊂Ｅ⁃ｍａｉｌ：４７０３４６４３７＠ｑｑ．ｃｏｍ∗通信作者：伍树松，副教授，硕士生导师，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｗｕｓｈ６８８＠１２６．ｃｏｍ㊀㊀在现代集约化养殖中，畜禽由于易受到环境㊁饲粮等各种不良因素的影响，从而引发起机体的应激反应，造成机体代谢紊乱㊁生长发育受阻和抗病能力减弱，最终导致生长缓慢㊁发病㊁甚至死亡㊂畜禽养殖中广泛使用添加抗生素的方式来解决这些问题，但长期大规模的使用抗生素会严重影响人类的自身健康和环境安全㊂因此，开发寻求天然㊁生理活性强㊁无毒副作用和环境污染小的新型饲料添加剂产品已成为研究热点㊂１㊀原儿茶酸（ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ，ＰＣＡ）㊀㊀原儿茶酸分子式为３，４－二羟基苯甲酸，相对分子质量为１５４．１２，是一种在植物界中分布广泛的天然酚酸［１］，常见的水果如覆盆子㊁蓝莓㊁桑椹［１］，传统的中草药如刺五加㊁五味子㊁杜仲［２－４］，以及植物果实和叶子如松针㊁松塔等［５－６］均含量丰富㊂近期研究表明，原儿茶酸是花青素在体内的主要酚类代谢产物［７］㊂花青素具有抗炎㊁抗氧化等生理功能，应用于畜禽生产中具有促进生长性能㊁提高畜禽免疫力的特点［８］，但其进入体内可被快速代谢生成一系列次级代谢产物，而原儿茶酸被认为是花青素在体内发挥生理功能的主要活性代谢产物之一［９］㊂原儿茶酸因具有抗氧化㊁抗炎㊁抑菌等生理功能已被应用于医药㊁保健等领域［１０］㊂本文就原儿茶酸的国内外研究现状，总结其生理功能及潜在作用机理，探讨其在畜禽生产中的应用价值及潜力㊂１．１㊀原儿茶酸来源㊀㊀我国蕴含着巨大的原儿茶酸资源，为原儿茶酸的开发利用提供了有力保障㊂富含原儿茶酸的刺五加和五味子广泛分布于我国东北㊁华北地区，如黑龙江㊁辽宁等省［１１－１２］；而杜仲产于我国中部及西南部，湖南省是杜仲的主要产区，张家界市慈利县作为全国最大的杜仲生产基地，杜仲种植面积达１５万亩（１亩ʈ６６６．６７ｍ２）以上［１３］㊂此外，松树在我国资源极为丰富，松针㊁松塔等属于可持续利用的再生资源，极易获取，而目前松针㊁松塔大多作为燃料使用［５－６］㊂１．２㊀原儿茶酸的生物合成㊀㊀原儿茶酸能以微生物中的莽草酸途径以葡萄糖为底物进行生物合成㊂莽草酸途径是微生物合成芳香族化合物为机体提供芳香族氨基酸的主要途径［１６］㊂原儿茶酸的生物合成途径如图１所示：葡萄糖糖酵解途径（ｅｍｂｄｅｎ⁃ｍｅｙｅｒｈｏｆ⁃ｐａｒｎａｓｐａｔｈ⁃１１期胡睿智等：原儿茶酸的生理功能及其在畜禽生产中的应用ｗａｙ，ＥＭＰ）和磷酸戊糖途径（ｐｅｎｔｏｓｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｐａｔｈｗａｙ，ＰＰＰ）分别生成磷酸烯醇式丙酮酸（ｐｈｏｓ⁃ｐｈｏｅｎｏｌｐｙｒｕｖｉｃａｃｉｄ，ＰＥＰ）和赤藓糖－４－磷酸（ｅｒｙｔｈｒｏｓｅ⁃４⁃ｐｈｏｓｐｈａｔｅ，Ｅ４Ｐ）［１６］㊂ＰＥＰ和Ｅ４Ｐ是莽草酸途径的起始底物，首先在２－酮－３－脱氧－Ｄ－阿拉伯庚酮糖酸－７－磷酸合酶（３⁃ｄｅｏｘｙ⁃Ｄ⁃ａｒａ⁃ｂｉｎｏ⁃ｈｅｐｔｕｌｏｓｏｎａｔｅ⁃７⁃ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ）作用下生成２－酮－３－脱氧－Ｄ－阿拉伯庚酮糖酸－７－磷酸（３⁃ｄｅｏｘｙ⁃Ｄ⁃ａｒａｂｉｎｏ⁃ｈｅｐｔｕｌｏｓｏｎａｔｅ⁃７⁃ｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ＤＡＨＰ），之后ＤＡＨＰ在３－脱氧奎尼酸合酶（３⁃ｄｅｈｙｄｒｏ⁃ｑｕｉｎａｔｅｓｙｎｔｈａｓｅ）催化下生成３－脱氧奎尼酸（３⁃ｄｅ⁃ｈｙｄｒｏｑｕｉｎａｔｅ，ＤＨＱ），而后ＤＨＱ在３－脱氢奎尼酸脱水酶（３⁃ｄｅｈｙｄｒｏｑｕｉｎａｔｅｄｅｈｙｄｒａｔａｓｅ）作用下脱水生成３－脱氢莽草酸（３⁃ｄｅｈｙｄｒｏｓｈｉｋｉｍａｔｅ，ＤＨＳ），通过基因工程方法在大肠杆菌内引入３－脱氢莽草酸脱羟酶和原儿茶酸脱羧酶的肺炎克雷伯菌基因，则大肠杆菌可以将ＤＨＳ转化为原儿茶酸［１４－１６］㊂目前使用大肠杆菌工程菌以葡萄糖合成ＤＨＳ的摩尔转化率在３０％以上，而ＤＨＳ合成原儿茶酸摩尔转换率超过９５％［１７］㊂相对于天然提取法和以香草酸为底物的化学合成法，利用大肠杆菌工程菌以葡萄糖为底物合成原儿茶酸具有成本低㊁绿色㊁环保等优势，可规模化生产以满足畜禽养殖的需求㊂㊀㊀ＥＭＰ：葡萄糖糖酵解途径ｅｍｂｄｅｎ⁃ｍｅｙｅｒｈｏｆ⁃ｐａｒｎａｓｐａｔｈｗａｙ；ＰＰＰ：磷酸戊糖途径ｐｅｎｔｏｓｅｐｈｏｓｐｈａｔｅｐａｔｈｗａｙ；ＰＥＰ：磷酸烯醇式丙酮酸ｐｈｏｓｐｈｏｅｎｏｌｐｙｒｕｖｉｃａｃｉｄ；Ｅ４Ｐ：赤藓糖－４－磷酸ｅｒｙｔｈｒｏｓｅ⁃４⁃ｐｈｏｓｐｈａｔｅ；ＤＡＨＰ：２－酮－３－脱氧－Ｄ－阿拉伯庚酮糖酸－７－磷酸３⁃ｄｅｏｘｙ⁃Ｄ⁃ａｒａｂｉｎｏ⁃ｈｅｐｔｕｌｏｓｏｎａｔｅ⁃７⁃ｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ＤＨＱ：３－脱氣奎尼酸合３⁃ｄｅｈｙｄｒｏｑｕｉｎａｔｅ；ＤＨＳ：３－脱氢莽草酸３⁃ｄｅ⁃ｈｙｄｒｏｓｈｉｋｉｍａｔｅ；ＰＣＡ：原儿茶酸ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ㊂图１㊀原儿茶酸的生物合成Ｆｉｇ．１㊀Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ［１４－１６］２㊀原儿茶酸的生理功能及潜在作用机理２．１㊀抗氧化㊀㊀植物多酚特有的羟基结构使其具有较强的抗氧化能力，多酚的抗氧化能力与其羟基数目以及位置有关：原儿茶酸具有邻苯二酚，邻位羟基极易发生自氧化作用，缩合形成醌类结构，羟基给出的氢离子能与活性氧自由基（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅ⁃ｃｉｅｓ，ＲＯＳ）结合使其淬灭［１８］㊂在由过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导的细胞氧化应激模型中，原儿茶酸能显著降低细胞内ＲＯＳ含量，减轻ＲＯＳ造成的细胞结构损伤，缓解氧化应激引起的细胞凋亡［１９－２０］㊂在１，２－二苦基－２－三硝基苯亚肼（１，１⁃ｄｉｐｈｅｎｙｌ⁃２⁃ｐｉｃｒｙｌｈｙｄｒａｚｙｌ，ＤＰＰＨ）自由基和Ｈ２Ｏ２清除率试验以及氧化应激细胞模型中，原儿茶酸的抗氧化能力强于维生素Ｃ㊁维生素Ｅ以及二丁基羟基甲苯等抗氧化剂［２０－２１］㊂㊀㊀原儿茶酸能通过上调机体抗氧化酶的表达来提高机体抗氧化能力㊂机体的ＲＯＳ反应是一种连锁反应，由于电子传递㊁药物㊁外界刺激等因素使氧气（Ｏ２）获得１个电子，转换为超氧化物阴离子（Ｏ－２㊃），Ｏ－２㊃在超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓ⁃ｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）作用下生成过氧化氢Ｈ２Ｏ２，而Ｈ２Ｏ２在过氧化氢酶（ｃａｔａｌａｓｅ，ＣＡＴ）或谷胱甘肽过氧化物酶（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＧＳＨ⁃Ｐｘ）作用下清除［２１］㊂原儿茶酸能上调机体ＳＯＤ㊁ＣＡＴ㊁ＧＳＨ⁃Ｐｘ活性，增强机体抗氧化能力㊂Ｚｈａｎｇ等［２２］研究发现，灌服１０ｍｇ／ｋｇＢＷ的原儿茶酸能显著提高老年大鼠（２２月龄）肝脏ＳＯＤ㊁ＣＡＴ㊁ＧＳＨ⁃Ｐｘ活性，显著降低丙二醛（ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ，ＭＤＡ）含量㊂王一冰［２３］研究报道，在饲粮中添加３００ｍｇ／ｋｇ的原儿茶酸，能显著降低肉鸡肝脏中ＭＤＡ含量，并能提高肝脏中总抗氧化能力（ｔｏｔａｌａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｃａｐａｃｉｔｙ，Ｔ⁃ＡＯＣ）和ＧＳＨ⁃Ｐｘ活性㊂此９７９４㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３１卷外，原儿茶酸能与过渡金属离子螯合［２１］，当体内抗氧化酶系统无法有效清除Ｈ２Ｏ２和Ｏ－２㊃时，那么在过渡金属离子作用下Ｈ２Ｏ２和Ｏ－２㊃会产生芬顿反应生成氧化性更强的羟自由基（㊃ＯＨ），而原儿茶酸能与过渡金属离子结合减少㊃ＯＨ生成［２４］㊂原儿茶酸还能通过调控核因子Ｅ２相关因子２（ｎｕ⁃ｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ⁃Ｅ２⁃ｒｅｌａｔｅｄｆａｃｔｏｒ２，Ｎｒｆ２）信号通路来上调抗氧化酶的表达㊂抗氧化反应元件（ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｅｌｅｍｅｎｔ，ＡＲＥ）是一个特异的ＤＮＡ启动子结合序列，是机体抗氧化应激的保护性顺式应答元件，调控着抗氧化酶的表达，而ＡＲＥ启动子受到Ｎｒｆ２信号通路的调控，在正常状态下Ｎｒｆ２与Ｋｅｌｃｈ样环氧氯丙烷相关蛋白１（Ｋｅｌｃｈｓａｍｐｌｅｒｅ⁃ｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ１，Ｋｅａｐ１）结合被 锚定 在细胞质中，当机体受到外界刺激时，上游蛋白激酶被活化诱导Ｎｒｆ２的磷酸化使Ｎｒｆ２的构象改变，促使其与Ｋｅａｐ１分离，Ｎｒｆ２识别ＡＲＥ启动子并与之结合，进而促进目标基因转录［１０］㊂Ｖａｒｉ等［２５］研究发现，原儿茶酸是通过上调ｃ⁃ＪｕｎＮ－末端激酶（ｃ⁃ＪｕｎＮ⁃ｔｅｒｍｉｎａｌｋｉｎａｓｅ，ＪＮＫ）的磷酸化，激活Ｎｒｆ２⁃ＡＲＥ信号通路上调机体抗氧化酶系统表达㊂２．２㊀抑菌作用㊀㊀原儿茶酸是刺五加㊁丹参等传统中草药的主要抑菌成分［２－４］㊂原儿茶酸能够抑制革兰氏阳性菌㊁革兰氏阴性菌等致病菌以及真菌的生长，表１总结了原儿茶酸对于不同细菌和真菌的最小抑菌浓度㊂原儿茶酸的抑菌活性不受温度的影响，经过１００ħ加热后原儿茶酸还可具有灭菌活性［２６］㊂在与不同抗菌药（黏菌素㊁克林沙星㊁阿米卡星㊁磷霉素）联用时，原儿茶酸还具有协同相加效应［２７］㊂原儿茶酸可以选择性地抑制致病菌的生长而不影响益生菌的生长㊂Ｐａｃｈｅｃｏ等［２８］研究发现，在２０ｍｍｏｌ／ｍＬ浓度时，原儿茶酸能抑制肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌的生长，但并不影响鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌的生长㊂表１㊀原儿茶酸对不同细菌和真菌的最小抑菌浓度Ｔａｂｌｅ１㊀Ｍｉｎｉｍｕｍｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｏｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｆｕｎｇｉ菌种Ｓｔｒａｉｎｓ最小抑菌浓度Ｍｉｎｉｍｕｍｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ／（ｍｇ／ｍＬ）参考文献Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ金黄色葡萄球菌Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ０．５㊁０．７㊁０．９Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ等［２９］㊁袁胜浩等［３０］㊁Ａｊｉｂｏｙｅ等［３１］阪崎克罗诺肠杆菌Ｃｒｏｎｏｂａｃｔｅｒｓａｋａｚａｋｉｉ２．５贾振宇等［３２］蜡样芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ１．０Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ等［２９］大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ０．５㊁０．６㊁３．０Ｇｕｔｉｅｒｒｅｚ等［２９］㊁袁胜浩等［３０］㊁Ａｊｉｂｏｙｅ等［３１］绿脓杆菌Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａ０．７５袁胜浩等［３０］枯草芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ０．５０袁胜浩等［３０］白色念珠菌Ｍｏｎｉｌｉａａｌｂｉｃａｎ１．０袁胜浩等［３０］幽门螺旋杆菌Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ０．０４Ｌｉｕ等［３３］鼠伤寒沙门氏菌Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ２０Ｐａｃｈｅｃｏ等［２８］㊀㊀目前，原儿茶酸的抗菌机理尚不明确，根据已有的文献，原儿茶酸的抗菌机理可能与以下几点有关：１）原儿茶酸具有邻羟基，羟基是疏水性基团可以和细胞膜的脂质双分子层结合，影响细胞膜磷脂与蛋白质的相互作用，改变细胞膜结构㊁功能和通透性［３２－３４］㊂贾振宇等［３２］研究发现，在经过原儿茶酸处理后，阪崎克罗诺肠杆菌胞内ｐＨ降低，细胞膜电位发生超极化／去极化，细菌细胞膜完整性降低，电镜下细菌表面出现皱缩和塌陷㊂２）原儿茶酸能与铁形成稳定的配合物，而铁的缺乏会使金属酶如血红素酶和核糖苷酸还原酶的活性下降，双歧杆菌和乳酸杆菌等有益菌不含有血红素酶，且双歧杆菌和乳酸杆菌的核糖苷酸酶还原酶等含铁酶被使用腺苷钴胺的酶取代因此不受影响，而大肠杆菌等致病菌则会在原儿茶酸作用下抑制生长［２８，３５］㊂３）多酚在高剂量下会发生促氧化作用［３６］㊂原儿茶酸的邻苯二酚结构决定其羟基极易发生断裂，高剂量下断裂的羟基能给出的电子能使Ｏ２活化成Ｏ－２㊃，Ｏ－２㊃从而引起细菌细胞膜脂质过氧化，而Ｏ－２㊃在ＳＯＤ作用下生成０８９４１１期胡睿智等：原儿茶酸的生理功能及其在畜禽生产中的应用Ｈ２Ｏ２［３６］㊂大肠杆菌㊁金黄色葡萄球菌等致病菌中二价铁离子（Ｆｅ２＋）含量高于嗜酸乳杆菌㊁鼠李糖乳杆菌等益生菌，其更易发生芬顿反应生成更多的㊃ＯＨ，过量的㊃ＯＨ直接作用于ＤＮＡ导致断裂，引起细菌凋亡［３１］㊂２．３㊀抗炎㊀㊀当机体受到细菌㊁病毒等有害物质的入侵，会通过一系列的信号途径，引起机体的炎症反应［３７］㊂炎症反应本是一种机体自身保护性反应，但炎症因子的长期或者过度激活会导致组织器官损伤［３７］㊂前文中已经概述原儿茶酸能减少机体ＲＯＳ和具有抑菌作用，而ＲＯＳ和革兰氏阴性菌的细胞壁产生脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＬＰＳ）均能刺激机体产生炎症反应，而原儿茶酸能减少ＲＯＳ和ＬＰＳ的产生从而缓解机体炎症反应㊂㊀㊀大量研究表明原儿茶酸能降低促炎因子水平㊂Ｚｈａｎｇ等［３８］研究表明，在ＬＰＳ诱导的小鼠急性肺损伤模型中，原儿茶酸能降低肿瘤坏死因子－α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ⁃α）和白细胞介素－１β（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ⁃１β，ＩＬ⁃１β）的含量㊂Ｆａｒｏｍｂｉ等［３９］研究报道，在由葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎大鼠模型中，原儿茶酸能抑制环氧合酶－２（ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ⁃２，ＣＯＸ⁃２）和诱导型一氧化氮合酶（ｉｎｄｕｃｅｄｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ｉＮＯＳ）蛋白质表达，降低肝脏中ＩＬ⁃１β㊁白细胞介素－２（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ⁃２，ＩＬ⁃２）㊁ＴＮＦ⁃α含量㊂促炎因子如ＴＮＦ⁃α能诱导淋巴细胞和上皮细胞产生多种黏附分子，诱导趋化因子产生，促使炎症细胞向炎症局部聚集，进一步造成组织损伤［３８］㊂此外，ＴＮＦ⁃α能活化巨噬细胞和单核细胞，产生ＩＬ⁃１β㊁白细胞介素－６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ⁃６，ＩＬ⁃６）㊁白细胞介素－８（ｉｎｔｅｒｌｅｕ⁃ｋｉｎ⁃８，ＩＬ⁃８）等促炎细胞因子，使炎性反应进一步扩大［３７］㊂综上，原儿茶酸可减少促炎因子的生成，缓解炎症反应，防止炎症反应的扩大化㊂㊀㊀原儿茶酸主要通过介导核转录因子－κＢ（ｎｕ⁃ｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ⁃κＢ，ＮＦ⁃κＢ）和丝裂原活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎ⁃ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ，ＭＡＰＫ）通路发挥其抗炎症功能［３８，４０］㊂ＮＦ⁃κＢ是一种由ｐ５０亚基和ｐ６５亚基组合的二聚体，在正常状态时，ＮＦ⁃κＢ与ＮＦ⁃κＢ抑制蛋白（ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆＮＦ⁃κＢ，ＩκＢ）结合，无法进入细胞核转录㊂当受到外界刺激时，ＩκＢ发生磷酸化，ＮＦ⁃κＢ解离进入细胞核内，与特定ＤＮＡ位点结合诱导多种炎症因子如ＴＮＦ⁃α㊁ＩＬ⁃１㊁ＩＬ⁃６等的表达［４１］㊂ＮＦ⁃κＢ信号通路受到多种蛋白激酶调控，如ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶（ｐ３８ｍｉｔｏｇｅｎ⁃ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ，ｐ３８ＭＡＰＫ）㊁细胞外信号调激酶（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｒｅｇｕｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅｓ，ＥＲＫ）㊁ＪＮＫ㊁过氧化物酶体增殖物激活受体（ｐｅｒ⁃ｏｘｉｓｏｍｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒｓ⁃ａｃｔｉｖａｔｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ＰＰＡＲ）㊂Ｗａｎｇ等［４２］研究报道，原儿茶酸能通过作用于过氧化物酶体增殖物激活受体－γ（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅｐｒｏｌｉｆ⁃ｅｒａｔｏｒｓ⁃ａｃｔｉｖａｔｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒｓ⁃γ，ＰＰＡＲ⁃γ），通过上调ＰＰＡＲ⁃γ的表达来抑制ＮＦ⁃κＢ的活化㊂Ｚｈａｎｇ等［３８］研究报道，原儿茶酸能够阻断ＬＰＳ诱导的ｐ３８ＭＡＰＫ蛋白激酶和ＮＦ⁃κＢ的活化，即通过抑制ｐ３８ＭＡＰＫ⁃ＮＦ⁃κＢ信号通路来缓解炎症反应㊂此外，原儿茶酸能抑制由ＬＰＳ引起磷脂酰肌醇－３激酶／蛋白激酶Ｂ／哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ３⁃ｋｉｎａｓｅ／Ａｋｔ／ｍａｍｍａｌｉａｎｔａｒ⁃ｇｅｔｏｆｒａｐａｍｙｃｉｎ，ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／ｍＴＯＲ）信号通路㊁ＪＮＫ信号通路㊁Ｔｏｌｌ样受体信号通路的激活，抑制ＮＦ⁃κＢ的活化，缓解炎症反应［４０］㊂２．４㊀抗病毒㊀㊀体外细胞试验和动物试验均有报道原儿茶酸还具有抗病毒作用，原儿茶酸对乙型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＢｖｉｒｕｓ，ＨＢＶ）［４３］㊁传染性法氏囊病毒（ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｕｒｓａｌｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ，ＩＢＤＶ）［４４］㊁禽流感病毒（ａｖｉａｎｉｎｆｌｕｅｎｚａｖｉｒｕｓｔｙｐｅＡ，Ｈ９Ｎ２）［４５］㊁新城疫病毒（ｎｅｗｃａｓｔｌｅｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ，ＮＤＶ）［４６］有明显的抑制作用㊂目前有关原儿茶酸抗病毒机理的研究相对较少，根据已有的文献，原儿茶酸的抗病毒机理可能与以下几点有关：１）原儿茶酸能提高机体免疫力，增强对病毒抵抗力㊂环磷酰胺是一种免疫抑制剂，能抑制动物的体液免疫应答和细胞免疫应答［４７］㊂在环磷酰胺诱导的肉鸡免疫抑制模型中，原儿茶酸能阻断由环磷酰胺引起的法氏囊㊁胸腺和脾脏指数降低，提高新城疫－传染性支气管炎二联活疫苗的抗体产生水平，提高机体细胞和体液免疫水平［４８］㊂Ｇｕｏ等［４６］研究表明，在接种新城疫病毒ＮＤＶ弱毒鸡模型中，与口服１２５ｍｇ／ｋｇ黄芪多糖组相比，口服４０ｍｇ／ｋｇ的原儿茶酸组对比对照组能显著提高了新城疫病毒ＮＤＶ抗体和促进淋巴细胞增殖，提高机体体液免疫和细胞免疫能力，并且鸡的存活率（７０％）高于黄芪多糖组（５０％）㊂２）原儿茶酸能通过调控细胞凋亡，加快感染病毒细胞凋亡过程，防止病毒感染㊂Ｏｕ等［４４］１８９４㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３１卷研究表明，经过原儿茶酸处理后，感染传染性法氏囊病毒ＩＢＤＶ鸡的法氏囊中ＩＢＤＶ病毒量显著低于对照组，口服２０ｍｇ／ｋｇ原儿茶酸组的存活率达到９０％㊂原儿茶酸可以在感染病毒早期通过下调抗凋亡蛋白Ｂ淋巴细胞瘤－２蛋白（Ｂ⁃ｃｅｌｌｌｙｍｐｈｏ⁃ｍａ⁃２ｐｒｏｔｅｉｎ，Ｂｃｌ⁃２）和上调促凋亡蛋白Ｂｃｌ⁃２相关Ｘ蛋白（Ｂｃｌ⁃２ａｓｓｏｃｉａｔｅｄＸｐｒｏｔｅｉｎ，Ｂａｘ）的表达，加速法氏囊内感染病毒的淋巴细胞凋亡速率，减少了病毒的复制达到抗病毒的作用［４９］㊂３）原儿茶酸能够通过调控ＭＡＰＫ信号通路，诱导细胞外信号相关激酶ＥＲＫ１／２的磷酸化，抑制ＨｅｐＧ２．２．１５细胞中的ＨＮＦ４ａ和ＨＮＦｌａ启动子基因表达，从而抑制ＨＢＶ病毒的复制［５０］㊂㊀㊀综上所述，原儿茶酸具有抗氧化㊁抑菌㊁抗炎㊁抗病毒等多种生物学活性，其潜在作用机理如图２所示㊂㊀㊀Ｂａｘ：Ｂｃｌ⁃２相关Ｘ蛋白Ｂｃｌ⁃２ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｘｐｒｏｔｅｉｎ；Ｂｃｌ⁃２：Ｂ淋巴细胞瘤－２蛋白Ｂ⁃ｃｅｌｌｌｙｍｐｈｏｍａ⁃２ｐｒｏｔｅｉｎ；ＲＯＳ：活性氧自由基ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ；ＥＲＫ１／２：细胞外信号调激酶１／２ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｒｅｇｕｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅｓ１／２；Ｎｒｆ２⁃ＡＲＥ：核因子Ｅ２相关因子２－抗氧化反应元件ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ⁃Ｅ２⁃ｒｅｌａｔｅｄｆａｃｔｏｒ２⁃ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｅｌｅｍｅｎｔ；ＪＮＫ：ｃ⁃ＪｕｎＮ－末端激酶ｃ⁃ＪｕｎＮ⁃ｔｅｒｍｉｎａｌｋｉｎａｓｅ；ＬＰＳ：脂多糖ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ＰＰＡＲ⁃γ：过氧化物酶体增殖物激活受体－γｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒｓ⁃ａｃ⁃ｔｉｖａｔｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒｓ⁃γ；ＰＣＡ：原儿茶酸ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ；ｍＴＯＲ：哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白ｍａｍｍａｌｉａｎｔａｒｇｅｔｏｆｒａｐａｍｙｃｉｎ；ｐ３８ＭＡＰＫ：ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶ｐ３８ｍｉｔｏｇｅｎ⁃ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ；Ｏ－２㊃：超氧化物阴离子ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅａｎｉｏｎ㊂图２㊀原儿茶酸的潜在作用机理Ｆｉｇ．２㊀Ｐｏｔｅｎｔｉａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ［２１，２４－２５，３０－３３，３５，３８－３９，４５，４７－４８］３㊀原儿茶酸在畜禽生产上应用前景㊀㊀规模化养猪生产中，早期断奶会诱发氧化应激与炎症反应，造成仔猪肠道损伤，易受到致病菌侵染［５１］㊂原儿茶酸能减轻早期断奶仔猪氧化应激与炎症反应㊂陈鹏等［５２］在断奶仔猪饲粮中添加杜仲叶提取物，与基础饲粮相比，２５０ｍｇ／ｋｇ的杜仲叶提取物能显著提高断奶仔猪的平均日增重，与添加５０ｍｇ／ｋｇ金霉素的抗生素组无显著差异㊂本课题组通过内毒素诱导的断奶仔猪肠黏膜损伤试验发现，原儿茶酸能有效提高仔猪抗氧化能力并降低炎症反应，减少肠黏膜损伤，从而提高断奶仔猪的生长性能㊂此外，原儿茶酸还能减少肠道中致病菌的丰度，改善肠道菌群结构，从而缓解断奶造成的肠道损伤㊂Ｆａｎｇ等［５３］研究发现，与添加４００ｍｇ／ｋｇ杆菌肽锌和３００ｍｇ／ｋｇ卡巴多的抗生素对照组相比，刺五加提取物能显著提高断奶仔猪十二指肠㊁空肠和回肠的绒毛高度，降低隐窝深度，并能增加乳酸乳杆菌㊁唾液乳杆菌㊁枯草芽孢杆菌等益生菌丰度，降低金黄色葡萄球菌㊁鼠伤寒沙门氏菌㊁大肠杆菌丰度，减少断奶应激导致的腹泻㊂王一冰［２３］在黄羽肉鸡饲粮中添加原儿茶酸，与添加２００ｍｇ／ｋｇ恩拉霉素的抗生素对照组相比，添加原儿茶酸能增加盲肠菌群的α多样性，显２８９４１１期胡睿智等：原儿茶酸的生理功能及其在畜禽生产中的应用著提高厚壁菌门的相对丰度，降低拟杆菌门和变形菌门的相对丰度，３００ｍｇ／ｋｇ的原儿茶酸能显著提高黄羽肉鸡末重，降低料重比㊂原儿茶酸还能缓解热应激诱导的氧化应激，减轻家禽氧化损伤，提高家禽生产性能［５４］㊂４㊀小㊀结㊀㊀综上，原儿茶酸具有多种生物学功能，应用于畜禽生产中可潜在提高畜禽生产性能和免疫能力，且其来源广泛，生物合成成本低，因此在畜禽生产中具有很好的应用前景㊂然而，一些问题的存在限制了其合理有效利用，如：１）原儿茶酸的作用机理尚不清楚，需要找到其在体内的关键作用靶点；２）原儿茶酸的代谢途径，生物利用率尚不清楚，在畜禽饲粮中的适宜添加比例还有待研究；３）原儿茶酸在畜禽生产中应用较少，如何将原儿茶酸更好应用于畜禽生产中还需深入研究㊂因此，系统地研究原儿茶酸的生物功能，探究其分子作用机理及生物利用率，可为其作为一种新型绿色饲料添加剂合理应用于畜禽生产提供有效参考与理论依据㊂参考文献：［１］㊀ＰＡＣＨＥＣＯ⁃ＰＡＬＥＮＣＩＡＬＡ，ＭＥＲＴＥＮＳ⁃ＴＡＬＣＯＴＴＳ，ＴＡＬＣＯＴＴＳＴ．Ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ，ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ａｎｄｔｈｅｒｍａｌｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆａｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｅｎ⁃ｒｉｃｈｅｄｏｉｌｆｒｏｍａçａｉ（ＥｕｔｅｒｐｅｏｌｅｒａｃｅａＭａｒｔ．）［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００８，５６（１２）：４６３１－４６３６．［２］㊀尚海花，王淼，刘颖，等．ＨＰＬＣ法测定不同产地刺五加中原儿茶酸㊁紫丁香苷㊁绿原酸㊁刺五加苷Ｅ和异嗪皮啶［Ｊ］．现代药物与临床，２０１８，３３（６）：１３２４－１３２８．［３］㊀ＳＺＯＰＡＡ，ＫＯＫＯＴＫＩＥＷＩＣＺＡ，ＢＥＤＮＡＲＺＭ，ｅｔａｌ．ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｐｈｅｎｏｌｉｃａｃｉｄｓａｎｄｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｎｖｉｔｒｏｃｕｌｔｕｒｅｓｙｓｔｅｍｓｏｆＳｃｈｉｓａｎｄｒａｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｔｕｒｃｚ．）Ｂａｉｌｌ．ＵｓｉｎｇａＤＡＤ⁃ＨＰＬＣｍｅｔｈｏｄ［Ｊ］．ＰｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙＬｅｔｔｅｒｓ，２０１７，２０：４６２－４６９．［４］㊀ＹＩＮＭＣ，ＬＩＮＣＣ，ＷＵＨＣ，ｅｔａｌ．Ａｐｏｐｔｏｔｉｃｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｉｎｈｕｍａｎｂｒｅａｓｔ，ｌｕｎｇ，ｌｉｖｅｒ，ｃｅｒｖｉｘ，ａｎｄｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄＦｏｏｄＣｈｅｍ⁃ｉｓｔｒｙ，２００９，５７（１４）：６４６８－６４７３．［５］㊀吴道勋，刘璐，王莹，等．云南松松塔中原儿茶酸提取工艺的研究［Ｊ］．大理学院学报，２０１４，１３（４）：４－６，７．［６］㊀邓毅，宁红霞，沈薇，等．ＨＰＬＣ同时测定雪松松针中没食子酸㊁原儿茶酸和儿茶素的含量［Ｊ］．中国现代应用药学，２０１４，３１（９）：１１０４－１１０７．［７］㊀ＤＥＦＥＲＲＡＲＳＲＭ，ＣＺＡＮＫＣ，ＺＨＡＮＧＱ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｓａｎｄｔｈｅｉｒｍｅｔａｂｏ⁃ｌｉｔｅｓｉｎｈｕｍａｎｓ［Ｊ］．ＢｒｉｔｉｓｈＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１４，１７１（１３）：３２６８－３２８２．［８］㊀胡睿智，贺宇佳，何子煜，等．矢车菊素－３－葡萄糖苷的吸收㊁代谢及生理功能研究进展［Ｊ］．动物营养学报，２０１９，３１（０５）：２０５２－２０６２．［９］㊀ＫＡＹＣＤ，ＫＲＯＯＮＰＡ，ＣＡＳＳＩＤＹＡ．Ｔｈｅｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｄｉｅｔａｒｙａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｓｉｓｌｉｋｅｌｙｔｏｂｅｍｅｄｉａｔｅｄｂｙｔｈｅｉｒｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｔｓ［Ｊ］．ＭｏｌｅｃｕｌａｒＮｕｔｒｉｔｉｏｎ＆ＦｏｏｄＲｅｓｅａｒｃｈ，２００９，５３（Ｓｕｐｐｌ．１）：Ｓ９２－Ｓ１０１．［１０］㊀ＫＡＫＫＡＲＳ，ＢＡＩＳＳ．Ａｒｅｖｉｅｗｏｎｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄａｎｄｉｔｓｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｐｏｔｅｎｔｉａｌ［Ｊ］．ＩＳＲＮＰｈａｒｍａ⁃ｃｏｌｏｇｙ，２０１４，２０１４：９５２９４３．［１１］㊀胡理乐，张海英，秦岭，等．中国五味子分布范围及气候变化影响预测［Ｊ］．应用生态学报，２０１２，２３（９）：２４４５－２４５０．［１２］㊀程海涛，刘德江，罗志文，等．药用植物刺五加资源分布与环境因子的相关性［Ｊ］．黑龙江医药科学，２０１２，３５（４）：８－９．［１３］㊀王效宇，陈毅烽，伍江波，等．湖南省杜仲产业现状调查［Ｊ］．经济林研究，２０１６，３４（４）：１５８－１６２．［１４］㊀ＲＥＩＳＦＳ，ＣᶄＩＲＩＣᶄＡ，ＳＴＯＪＫＯＶＩＣᶄＤ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｎｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｐｏｔｅｎｔｉａｌａｎｄｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎｔｈｒｅｅＰｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｉｓｏｌａｔｅｓ［Ｊ］．ＤｒｕｇＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＰｈａｒｍａｃｙ，２０１５，４１（２）：２５３－２６２．［１５］㊀ＬＩＷＳ，ＸＩＥＤＭ，ＦＲＯＳＴＪＷ．Ｂｅｎｚｅｎｅ⁃ｆｒｅｅｓｙｎｔｈｅ⁃ｓｉｓｏｆｃａｔｅｃｈｏｌ：ｉｎｔｅｒｆａｃｉｎｇｍｉｃｒｏｂｉａｌａｎｄｃｈｅｍｉｃａｌｃａ⁃ｔａｌｙｓｉｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＡｍｅｒｉｃａｎＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ，２００５，１２７（９）：２８７４－２８８２．［１６］㊀王佳．改造木糖非磷酸化代谢途径及莽草酸途径生物合成高附加值产物［Ｄ］．博士学位论文．北京：北京化工大学，２０１８．［１７］㊀ＷＵＦＬ，ＣＡＯＰ，ＳＯＮＧＧＴ，ｅｔａｌ．Ｅｘｐａｎｄｉｎｇｔｈｅｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅｏｆａｒｏｍａｔｉｃｃｈｅｍｉｃａｌｓｂｙｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｒｏｄｕｃ⁃ｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｅｍｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｔｅｃｈ⁃ｎｏｌｏｇｙ，２０１８，９３（１０）：２８０４－２８１６．［１８］㊀ＳＲＯＫＡＺ，ＣＩＳＯＷＳＫＩＷ．Ｈｙｄｒｏｇｅｎｐｅｒｏｘｉｄｅｓｃａｖｅｎ⁃ｇｉｎｇ，ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｎｄａｎｔｉ⁃ｒａｄｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｓｏｍｅｐｈｅ⁃ｎｏｌｉｃａｃｉｄｓ［Ｊ］．ＦｏｏｄａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙ，２００３，４１（６）：７５３－７５８．３８９４㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报３１卷［１９］㊀ＳＨＩＧＦ，ＡＮＬＪ，ＪＩＡＮＧＢ，ｅｔａｌ．Ａｌｐｉｎｉａｐｒｏｔｏｃａｔｅ⁃ｃｈｕｉｃａｃｉｄｐｒｏｔｅｃｔｓａｇａｉｎｓｔｏｘｉｄａｔｉｖｅｄａｍａｇｅｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｒｅｄｕｃｅｓｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｉｎｖｉｖｏ［Ｊ］．ＮｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅＬｅｔｔｅｒｓ，２００６，４０３（３）：２０６－２１０．［２０］㊀ＣＨＯＵＴＨ，ＤＩＮＧＨＹ，ＬＩＮＲＪ，ｅｔａｌ．ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｍｅｌａｎｏｇｅｎｅｓｉｓａｎｄｏｘｉｄａｔｉｏｎｂｙｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｆｒｏｍＯｒｉｇａｎｕｍｖｕｌｇａｒｅ（ｏｒｅｇａｎｏ）［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｔｕｒａｌＰｒｏｄｕｃｔｓ，２０１０，７３（１１）：１７６７－１７７４．［２１］㊀ＬＩＸＣ，ＷＡＮＧＸＺ，ＣＨＥＮＤＦ，ｅｔａｌ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊ］．ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌＦｏｏｄｓｉｎＨｅａｌｔｈ＆Ｄｉｓｅａｓｅ，２０１１，１（７）：２３２－２４４．［２２］㊀ＺＨＡＮＧＸＬ，ＳＨＩＧＦ，ＬＩＵＸＺ，ｅｔａｌ．Ａｎｔｉ⁃ａｇｅｉｎｇｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｆｒｏｍＡｌｐｉｎｉａｏｎｓｐｌｅｅｎａｎｄｌｉｖｅｒａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｙｓｔｅｍｏｆｓｅｎｅｓｃｅｎｔｍｉｃｅ［Ｊ］．ＣｅｌｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，２０１１，２９（４）：３４２－３４７．［２３］㊀王一冰．原儿茶酸影响动物肠道屏障功能的研究［Ｄ］．博士学位论文．杭州：浙江大学，２０１７．［２４］㊀刘时中．自由基与衰老［Ｊ］．生理科学进展，１９８３，１４（２）：１４７－１５２．［２５］㊀ＶＡＲＩＲ，Ｄ ＡＲＣＨＩＶＩＯＭ，ＦＩＬＥＳＩＣ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｏｃａｔ⁃ｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｉｎｄｕｃｅｓａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ／ｄｅｔｏｘｉｆｙｉｎｇｅｎｚｙｍｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈＪＮＫ⁃ｍｅｄｉａｔｅｄＮｒｆ２ａｃｔｉｖａｔｉｏｎｉｎｍｕｒｉｎｅｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ［Ｊ］．ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１１，２２（５）：４０９－４１７．［２６］㊀ＣＨＡＯＣＹ，ＹＩＮＭＣ．Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｓｏｆｒｏｓｅｌｌｅｃａｌｙｘｅｘｔｒａｃｔｓａｎｄｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｉｎｇｒｏｕｎｄｂｅｅｆａｎｄａｐｐｌｅｊｕｉｃｅ［Ｊ］．ＦｏｏｄｂｏｒｎｅＰａｔｈｏｇｅｎｓａｎｄＤｉｓ⁃ｅａｓｅ，２００９，６（２）：２０１－２０６．［２７］㊀柴贝贝，姜维佳，王莉贞，等．原儿茶酸或绿原酸与抗菌药联用对鱼源链球菌的抑菌效果［Ｊ］．南方农业学报，２０１８，４９（３）：５８０－５８５．［２８］㊀ＰＡＣＨＥＣＯＯＲ，ＷＡＬＬ⁃ＭＥＤＲＡＮＯＡ，ＧＯÑＩＭＧ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｐｈｅｎｏｌｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓｏｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｓｅｌｅｃｔｅｄｐｒｏｂｉｏｔｉｃａｎｄｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．ＬｅｔｔｅｒｓｉｎＡｐｐｌｉｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１８，６６（１）：２５－３１．［２９］㊀ＧＵＴＩＥＲＲＥＺＬＭ，ＲＵＡＪ，ＣＡＲＯＩ，ｅｔａｌ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｎａｔｕｒａｌｐｈｅｎｏｌｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓａｇａｉｎｓｔｆｏｏｄｂｏｒｎｅｐａｔｈｏｇｅｎｓａｎｄｓｐｏｉｌａｇｅｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．ＦｏｏｄＣｏｎｔｒｏｌ，２０１２，２６（２）：５５５－５６３．［３０］㊀袁胜浩，卞金辉，谢珍，等．大半边莲中酚酸类成分与抑菌活性研究［Ｊ］．中成药，２０１３，３５（０１）：１７０－１７２．［３１］㊀ＡＪＩＢＯＹＥＴＯ，ＨＡＢＩＢＵＲＳ，ＳＡＩＤＵＫ，ｅｔａｌ．Ｉｎ⁃ｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓｉｎｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ⁃ｍｅｄｉａｔｅｄｂａｃｔｅｒｉａｌｌｅｔｈａｌｉｔｙ［Ｊ］．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙｏｐｅｎ，２０１７，６（４）：１０．［３２］㊀贾振宇，孙怡，陈怡飞，等．原儿茶酸对阪崎克罗诺肠杆菌的抑制作用［Ｊ］．微生物学通报，２０１８，４５（０４）：７８８－７９６．［３３］㊀ＬＩＵＷＨ，ＨＳＵＣＣ，ＹＩＮＭＣ．Ｉｎｖｉｔｒｏａｎｔｉ⁃ｈｅｌｉｃｏ⁃ｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｄｉａｌｌｙｌｓｕｌｐｈｉｄｅｓａｎｄｐｒｏｔｏｃａｔ⁃ｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ［Ｊ］．ＰｈｙｔｏｔｈｅｒａｐｙＲｅｓｅａｒｃｈ，２００８，２２（１）：５３－５７．［３４］㊀ＫＥＭＰＥＲＭＡＮＲＡ，ＢＯＬＣＡＳ，ＲＯＧＥＲＬＣ，ｅｔａｌ．Ｎｏｖｅｌａｐｐｒｏａｃｈｅｓｆｏｒａｎａｌｙｓｉｎｇｇｕｔｍｉｃｒｏｂｅｓａｎｄｄｉｅｔ⁃ａｒｙｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ：ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓａｎｄｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ［Ｊ］．Ｍｉ⁃ｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１０，１５６（１１）：３２２４－３２３１．［３５］㊀ＳＭＩＴＨＡＨ，ＺＯＥＴＥＮＤＡＬＥ，ＭＡＣＫＩＥＲＩ．Ｂａｃｔｅｒｉ⁃ａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｔｏｏｖｅｒｃｏｍｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｅｔａ⁃ｒｙｔａｎｎｉｎｓ［Ｊ］．ＭｉｃｒｏｂｉａｌＥｃｏｌｏｇｙ，２００５，５０（２）：１９７－２０５．［３６］㊀ＢＡＢＩＣＨＨ，ＳＣＨＵＣＫＡＧ，ＷＥＩＳＢＵＲＧＪＨ，ｅｔａｌ．Ｒｅｓｅａｒｃｈｓｔｒａｔｅｇｉｅｓｉｎｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｔｈｅｐｒｏ⁃ｏｘｉｄａｎｔｎａ⁃ｔｕｒｅｏｆｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｏｘｉ⁃ｃｏｌｏｇｙ，２０１１，２０１１：４６７３０５．［３７］㊀ＳＥＭＡＭＩＮＧＹ，ＰＡＮＮＥＮＧＰＥＴＣＨＰ，ＣＨＡＴＴＩＰＡ⁃ＫＯＲＮＳＣ，ｅｔａｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｐｒｏｔｏ⁃ｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄａｎｄｉｔｓｐｏｔｅｎｔｉａｌｒｏｌｅｓａｓｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙｍｅｄｉｃｉｎｅ［Ｊ］．Ｅｖｉｄｅｎｃｅ⁃ＢａｓｅｄＣｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙａｎｄＡｌ⁃ｔｅｒｎａｔｉｖｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，２０１５，２０１５：５９３９０２．［３８］㊀ＺＨＡＮＧＸＬ，ＬＩＣＬ，ＬＩＪ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｏｎａｃｕｔｅｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙｌｉ⁃ｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｉｎｍｉｃｅｖｉａｐ３８ＭＡＰＫａｎｄＮＦ⁃κＢｓｉｇｎａｌｐａｔｈｗａｙｓ［Ｊ］．ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＩｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏ⁃ｇｙ，２０１５，２６（１）：２２９－２３６．［３９］㊀ＦＡＲＯＭＢＩＥＯ，ＡＤＥＤＡＲＡＩＡ，ＡＷＯＹＥＭＩＯＶ，ｅｔａｌ．Ｄｉｅｔａｒｙｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄａｍｅｌｉｏｒａｔｅｓｄｅｘｔｒａｎｓｕｌ⁃ｐｈａｔｅｓｏｄｉｕｍ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｉｔｉｓａｎｄｈｅｐａｔｏｔｏｘ⁃ｉｃｉｔｙｉｎｒａｔｓ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ＆Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，２０１６，７（２）：９１３－９２１．［４０］㊀ＮＡＭＹＪ，ＬＥＥＣＳ．ＰｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｉｎｈｉｂｉｔｓＴｏｌｌ⁃ｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒ⁃４⁃ｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆＮＦ⁃κＢｂｙｓｕｐ⁃ｐｒｅｓｓｉｎｇａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＡｋｔ，ｍＴＯＲ，ＪＮＫａｎｄｐ３８⁃ＭＡＰＫ［Ｊ］．ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＩｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１８，５５：２７２－２８１．［４１］㊀ＭＡＳＥＬＬＡＲ，ＳＡＮＴＡＮＧＥＬＯＣ，Ｍ．Ｄ ＡＲＣＨＩＶＩＯＭ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄａｎｄｈｕｍａｎｄｉｓｅａｓｅｐｒｅ⁃ｖｅｎｔｉｏｎ：ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａ⁃ｎｉｓｍｓ［Ｊ］．ＣｕｒｒｅｎｔＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１２，１９（１８）：２９０１－２９１７．［４２］㊀ＷＡＮＧＹＭ，ＺＨＯＵＪ，ＦＵＳ，ｅｔａｌ．ＰｒｅｖｅｎｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｏｎＬＰＳ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ４８９４１１期胡睿智等：原儿茶酸的生理功能及其在畜禽生产中的应用ｒｅｓｐｏｎｓｅｉｎｈｕｍａｎｇｉｎｇｉｖａｌｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｖｉａａｃｔｉｖａｔｉｎｇＰＰＡＲ⁃γ［Ｊ］．Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，２０１５，３８（３）：１０８０－１０８４．［４３］㊀刘厚佳，胡晋红，孙莲娜，等．原儿茶酸等化合物对ＨＢＶＤＮＡ转染人肝癌细胞株的作用［Ｊ］．第二军医大学学报，２００１，２２（７）：６６１－６６３．［４４］㊀ＯＵＣＢ，ＰＡＮＧＱ，ＣＨＥＮＸ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ，ａｎｅｗａｃｔｉｖｅｓｕｂｓｔａｎｃｅａｇａｉｎｓｔｔｈｅｃｈａｌｌｅｎｇｅｏｆａ⁃ｖｉａｎｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｕｒｓａｌｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ［Ｊ］．ＰｏｕｌｔｒｙＳｃｉ⁃ｅｎｃｅ，２０１２，９１（７）：１６０４－１６０９．［４５］㊀ＯＵＣＢ，ＳＨＩＮＮ，ＹＡＮＧＱＨ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ，ａｎｏｖｅｌａｃｔｉｖｅｓｕｂｓｔａｎｃｅａｇａｉｎｓｔａｖｉａｎｉｎｆｌｕｅｎｚａｖｉｒｕｓＨ９Ｎ２ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１４，９（１０）：ｅ１１１００４．［４６］㊀ＧＵＯＹＸ，ＺＨＡＮＧＱ，ＺＵＯＺＨ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ（ＰＣＡ）ｉｎｄｕｃｅｄａｂｅｔｔｅｒａｎｔｉｖｉｒａｌｅｆｆｅｃｔｂｙｉｍ⁃ｍｕｎｅｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｉｎＳＰＦｃｈｉｃｋｅｎｓ［Ｊ］．ＭｉｃｒｏｂｉａｌＰａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ，２０１８，１１４：２３３－２３８．［４７］㊀宋雁，贾旭东，崔文明，等．不同途径和剂量环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型的对比研究［Ｊ］．中国食品卫生杂志，２０１３，２５（３）：２１８－２２５．［４８］㊀欧长波，何诚．原儿茶酸对环磷酰胺诱导的肉鸡免疫抑制影响的研究［Ｊ］．中国家禽，２０１７，３９（２）：２８－３２．［４９］㊀ＯＵＣＢ，ＷＡＮＧＱＸ，ＷＥＩＸＢ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏ⁃ａｐｏｐｔｏｓｉｓｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｉｎｔｈｅｅａｒｌｙｓｔａｇｅｏｆｉｎ⁃ｆｅｃｔｉｏｕｓｂｕｒｓａｌｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＭｉｃｒｏｂｉａｌＰａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ，２０１８，１２４：２１６－２２２．［５０］㊀ＤＡＩＸＱ，ＣＡＩＷＴ，ＷＵＸ，ｅｔａｌ．ＰｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｉｎｈｉｂｉｔｓｈｅｐａｔｉｔｉｓＢｖｉｒｕｓｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎｂｙａｃｔｉｖａｔｉｎｇＥＲＫ１／２ｐａｔｈｗａｙａｎｄｄｏｗｎ⁃ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇＨＮＦ４αａｎｄＨＮＦ１αｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊ］．ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，２０１７，１８０：６８－７４．［５１］㊀石海仁，滚双宝，张生伟，等．杜仲叶对育肥猪生长性能㊁胴体性状㊁抗氧化能力及肠道菌群的影响［Ｊ］．动物营养学报，２０１８，３０（１）：３５０－３５９．［５２］㊀陈鹏，杨在宾，黄丽波，等．八角和杜仲叶提取物对断奶仔猪生长性能㊁血清酶活性及肝脏肿瘤坏死因子－α分布和表达的影响［Ｊ］．动物营养学报，２０１７，２９（３）：８７４－８８１．［５３］㊀ＦＡＮＧＪ，ＹＡＮＦＹ，ＫＯＮＧＸＦ，ｅｔａｌ．Ｄｉｅｔａｒｙｓｕｐｐｌｅ⁃ｍｅｎｔａｔｉｏｎｗｉｔｈＡｃａｎｔｈｏｐａｎａｘｓｅｎｔｉｃｏｓｕｓｅｘｔｒａｃｔｅｎ⁃ｈａｎｃｅｓｇｕｔｈｅａｌｔｈｉｎｗｅａｎｌｉｎｇｐｉｇｌｅｔｓ［Ｊ］．ＬｉｖｅｓｔｏｃｋＳｃｉｅｎｃｅ，２００９，１２３（２／３）：２６８－２７５．［５４］㊀ＨＵＲＺ，ＨＥＹＪ，ＡＲＯＷＯＬＯＭＡ，ｅｔａｌ．Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓａｓｐｏｔｅｎｔｉａｌａｔｔｅｎｕａｔｏｒｓｏｆｈｅａｔｓｔｒｅｓｓｉｎｐｏｕｌｔｒｙｐｒｏ⁃ｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ，２０１９，８（３）：６７．∗Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ，ａｓｓｏｃｉａｔｅｐｒｏｆｅｓｓｏｒ，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｗｕｓｈ６８８＠１２６．ｃｏｍ（责任编辑㊀武海龙）ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＦｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆＰｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃＡｃｉｄａｎｄＩｔｓＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎＬｉｖｅｓｔｏｃｋａｎｄＰｏｕｌｔｒｙＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎＨＵＲｕｉｚｈｉ１㊀ＨＥＹｕｊｉａ２㊀ＬＩＢａｉｚｈｅｎ１㊀ＷＵＳｈｕｓｏｎｇ１∗（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＨｕｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＨｕｎａｎＣｏ⁃ＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒｏｆＳａｆｅｔｙＡｎｉｍａｌＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１２８，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＨｕｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１２８，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｉｓａｐｈｅｎｏｌｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｔｈａｔｗｉｄｅｌｙｅｘｉｓｔｓｉｎｎａｔｕｒｅ，ａｎｄｋｎｏｗｎｆｏｒｉｔｓａｎｔｉ⁃ｏｘｉ⁃ｄａｎｔ，ａｎｔｉ⁃ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙａｎｄａｎｔｉ⁃ｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｅｃｔｓ．Ｒｅｃｅｎｔｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｓｈｏｗｎｔｈａｔｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｉｓｔｈｅｍａｉｎｐｈｅｎｏｌｉｃｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｏｆｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓｓｕｃｈａｓａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｓ，ａｎｄｉｔｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｓｅｃｏｎｄａｒｙｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｒｏｄ⁃ｕｃｔｓｏｆｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓｉｎｔｈｅｂｏｄｙ．Ｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ，ｔｈｅｍａｉｎｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄａｎｄｔｈｅｐｏ⁃ｔｅｎｔｉａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｈａｖｅｂｅｅｎｒｅｖｉｅｗｅｄｔｏｄｉｓｃｕｓｓｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｐｒｏｓｐｅｃｔｏｆｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄｉｎｌｉｖｅｓｔｏｃｋａｎｄｐｏｕｌｔｒｙｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．［ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ，２０１９，３１（１１）：４９７８⁃４９８５］Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｒｏｔｏｃａｔｅｃｈｕｉｃａｃｉｄ；ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ；ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎ；ｆｕｎｃｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍ；ｌｉｖｅｓｔｏｃｋａｎｄｐｏｕｌｔｒｙｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ５８９４。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910452089.8(22)申请日 2019.05.28(71)申请人 南京趣酶生物科技有限公司地址 210062 江苏省南京市高新区新锦湖路3-1号中丹生态生命科学产业园一期B栋811室申请人 上海仁酶生物科技有限公司(72)发明人 林涛　于丽珺　徐明文　蒋丽丽　(74)专利代理机构 南京正联知识产权代理有限公司 32243代理人 蒯建伟(51)Int.Cl.C12N 15/70(2006.01)C12N 15/66(2006.01)C12P 7/42(2006.01)C12N 9/88(2006.01)C12N 9/02(2006.01) (54)发明名称没食子酸和原儿茶酸的制备方法及其反应催化剂的制备方法(57)摘要本发明公开了一种没食子酸和原儿茶酸的制备方法及其反应催化剂的制备方法，通过对3-脱氢莽草酸脱水酶基因aroZ 片段或者对羟苯甲酸羟化酶基因pobA 片段进行构建，形成有催化性质的酶液，然后进行生物合成反应，合成原儿茶酸和没食子酸；本发明的有益效果：以葡萄糖为原料，其价格实惠，来源广泛，而且整个工艺得到了简化，减少环境污染，降低没食子酸生产成本。

权利要求书1页 说明书5页序列表4页 附图2页CN 110184288 A 2019.08.30C N 110184288A1.一种酶催化剂的制备方法，具体步骤如下：步骤一：将3-脱氢莽草酸脱水酶基因aroZ 片段或者对羟苯甲酸羟化酶基因pobA 片段重组到pET21a载体上，阳性重组质粒aroZ -pET21a(+)或者阳性重组质粒pobA -pET21a(+)转化表达宿主菌BL21(DE3)，得到原核表达菌株aroZ -pET21a(+)/ BL21(DE3)或者原核表达菌株pobA -pET21a(+)/ BL21(DE3)；步骤二：将上述表达菌株在加有终浓度为100ug/mL氨苄青霉素的5mL LB液体培养基中于37℃、200rpm振荡培养过夜后，按1%(V/V)比例接种于含有终浓度为100ug/mL氨苄青霉素的500mL LB液体培养基中，于37℃、200rpm振荡培养，待OD600在0.8-1.0之间时，加入终浓度为0.1mM的诱导剂IPTG(异丙基-β-D -硫代半乳糖苷，IPTG)，并在25℃诱导过夜；步骤三：将步骤二所得液在8000rpm条件下离心收集，然后悬浮于50mM pH7.0 磷酸钠缓冲液中，超声破碎(200W，3s/5s，10min)，4℃，12000rpm离心20min，得到3-脱氢莽草酸脱水酶催化剂或者对羟苯甲酸羟化酶催化剂。

原儿茶酸标准曲线概述及解释说明1. 引言1.1 概述原儿茶酸是一种重要的化学物质，广泛存在于茶叶、水果和蔬菜中。

它具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎和抗癌等作用，因此备受研究者的关注。

为了准确测定原儿茶酸在样品中的含量，科学家们发展了一种称为原儿茶酸标准曲线的方法。

1.2 文章结构本文将分为四个部分进行讲述。

引言部分（第1部分）介绍了原儿茶酸标准曲线的概述以及文章的结构。

第2部分将详细说明原儿茶酸标准曲线的定义与背景、实验步骤以及数据处理方法。

第3部分将解释标准曲线的意义、构建标准曲线的原理和方法，以及曲线拟合与数据分析技术。

最后一部分（第4部分）总结实验结果并探讨标准曲线应用前景，同时对其局限性进行评估，并提出相应的优化措施。

1.3 目的本文旨在介绍原儿茶酸标准曲线的概念、构建和应用，帮助读者了解并掌握这一测定分析方法。

同时，通过对标准曲线的解释说明，使读者能够深入理解其意义和实用性，为相关研究和实验设计提供指导。

最终目的是促进原儿茶酸研究的深入发展，并推动该物质在医药、食品以及其他领域中的广泛应用。

2. 原儿茶酸标准曲线2.1 定义与背景原儿茶酸是一种重要的活性成分，广泛存在于茶叶及其他植物中。

它具有很多生物活性，包括抗氧化、抗炎、抑制肿瘤细胞生长等作用，因此在医药和食品工业中具有广阔的应用前景。

为了准确测定样品中原儿茶酸的含量，需要构建一个原儿茶酸的标准曲线来进行定量分析。

2.2 实验步骤构建原儿茶酸标准曲线通常需要以下实验步骤：第一步：准备工作首先，从市场上购买到高纯度的原儿茶酸标准品。

然后根据实际需要，采用适当的溶剂将标准品溶解，并配制出一系列不同浓度的原儿茶酸溶液。

第二步：测量吸光度使用紫外-可见光谱仪或其他适当的仪器，以特定波长（常见为279 nm）下测量每个不同浓度溶液的吸光度。

确保在测量过程中温度和其他条件保持一致。

第三步：制作标准曲线将各个浓度的溶液对应的吸光度值制作成一个原儿茶酸的标准曲线。

鸡血藤药材中原儿茶酸的含量测定林惠贞;刘浩文;韦玮;李雯婷;赵志敏;陈建萍;王冬梅【摘要】High performance liquid chromatography (HPLC)was developed for the quantitative analysis of protocatechuic acid (PA)in Spatholobi Caulis (the stem of Suberect spatholobus Dunn.).The prepa-ration method of sample solution was established by optimizing the extraction solvents,methods,times and the sizes of the crude drug.The sample solutions were analyzed using a C18 column (250 ×4.6 mm,5μm)with CH3 CN-φ=0.5%HAc (volumic ratio,10∶90)as mobile phase and detect ed at 260 nm with a flow rate of 1.0 mL·min-1 .The crude drug was extracted by boiling water for three times and 1.5 h for each time.The obtained aqueous solution was concentrated and followed by extracted with ethyl acetate for four times.The ethyl acetate layer was concentrated to dryness,and was resolved in methanol-water (volumic ratio,1∶1 )to give the sample solution previous to HPLC analysis.After systematic method evaluation,the results showed that the linear range was 8.56 ~214 μg·mL-1 with correlation coefficient R2 of 0.999 7;and the average recovery rate was 99.2%with RSD of 2.8%.The contents of PA in market-sold seven batches of Spatholobi Caulis were determined to be in the range of 65.8 1 ~122.35 μg·g-1.The established method was accurate and repeatable,which could be used for the quality control of Spatholobi Caulis.%建立测定鸡血藤药材中原儿茶酸含量的方法，并对制备供试品溶液的提取溶剂、提取方法、提取次数、药材粒度等进行了考察优化。