S013交叉配血试验标准化操作规程(盐水法)

交叉配血试验操作规程一、前期准备1.需准备的仪器和材料有：试剂盘、试剂套装、试管、离心机、试剂架、操作台、试剂粉末、负压孔盖垫、抗人免疫球蛋白（抗人IgG）、标注笔等。

2.确保实验室实验台面整洁干净，并消毒工作区。

3.检查试剂有效期，避免使用过期试剂。

4.根据需求确定所需血浆标本和酶抗全血标本。

二、实验步骤1.将所需血浆标本加入试管中，用离心机离心10分钟，以获得澄清的血浆。

2.将澄清的血浆转移到试剂盘中的相应位置，每个孔位加1mL。

3.将离心后的红细胞沉淀与抗人IgG直接接触15分钟，以充分吸附不特异抗体。

4.加入2mL盐水，搅拌均匀，离心5分钟，去除清液。

5.加入4mL盐水，振荡均匀，1分钟后离心5分钟，去除清液。

6.加入2mL盐水，振荡均匀，1分钟后离心5分钟，去除清液。

7.加入1mL试剂套装中所配的抗人IgG，共悬浮混合24次，再加入5mL盐水，振荡均匀。

8.加入2mL盐水，振荡均匀，1分钟后离心5分钟，去除清液。

9.加入2mL试剂套装中所配的抗人IgG，共悬浮混合24次，再加入5mL盐水，振荡均匀。

10.重复步骤9，使红细胞悬浮，在离心后去除清液。

三、结果判断1.观察试剂盘中悬浮混合的红细胞沉淀情况，判断是否存在凝集现象。

2.凝集现象表明供血者和受血者之间存在血型抗原-抗体反应。

四、安全注意事项1.实验操作过程中注意戴手套、口罩和护目镜，保证操作者和实验样品的安全。

2.在操作前检查仪器和试剂的完好性，并遵循试剂的保存和使用说明。

3.严禁口饮、抽烟和进食，确保操作环境清洁。

4.实验后及时清洗仪器和工作区域，妥善处理废弃物。

5.确保实验室通风良好，防止有害气体和防护物质的浓度超标。

6.在实验操作过程中，严格遵守相关的实验操作规程和实验室安全规定。

以上是交叉配血试验的操作规程，包括前期准备、实验步骤、结果判断和安全注意事项。

按照规程进行操作，可以确保实验结果的准确性和实验人员的安全。

交叉配血试验标准操作规程1目的检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。

2职责血库工作人员负责执行3适用范围适用于盐水介质法、手工凝聚胺法和手工微柱凝胶法交叉配血全过程。

4操作规程4.1原理4.1.1盐水介质法IgM类抗体可以在室温盐水介质中发生凝集反应，使用手工试管法可以判断供、受者间血液的相容性。

4.1.2凝聚胺法凝聚胺交叉配血试验就是利用多聚季胺盐类—凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。

无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集解散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能解散，以此来判断供、受者间血液的相容性。

4.1.3手工微柱凝胶法微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。

4.2 试剂与器材4.2.1试剂凝聚胺配套试剂、生理盐水、微柱凝胶卡。

4.2.2 器材血清学离心机、卡式专用离心机、光学显微镜、塑料软试管、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、玻片、移液器、一次性移液枪头。

4.3 标本要求4.3.1.患者样本 EDTA抗凝全血或血清，全血量3～5ml，在1760g条件下离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.3.2.供者标本枸橼酸盐抗凝全血，全血量3～5ml，在1760g条件下离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。

4.4 操作步骤4.4.1盐水介质法4.4.1.1取两支试管，1支标明“主侧”；另一支标明“次侧”。

4.4.1.2按标记“主侧”管加受血者血浆1滴和供血者2%红细胞悬液1滴；“次侧”管加供血者血浆1滴和受血者2%红细胞悬液1滴。

盐水介质法交叉配血试验操作规程一.【原理】红细胞上携带有ABO抗原，当和相应的抗体结合（如A型红细胞遇到含有抗A的B型血清）之后，就会产生肉眼可见的凝集。

所以当受血者和供血者细胞经混合并离心后，如有ABO不配合问题，就会很快显示出来，所以常称为“立即离心”（immediate spin，IS）配血试验。

用来检测供者红细胞与受血者血清之间的ABO相容性。

二.【器材】0.9％生理盐水，离心机，塑料小试管三.【操作】1．用生理盐水将受血者红细胞制备2％～5％盐水悬液。

（如取分离血清后受血者底层红细胞50ul与生理盐水1mL配成5％受血者盐水悬液）2．从供血者血液保存袋上的辫子中获取少量血样，分离血清，生理盐水三洗红细胞（取红细胞以后，往红细胞内加入无菌生理盐水混匀，离心去除残余白细胞，反复洗涤3次，去除上面的血浆和其他细胞，但是使用生理盐水洗涤红细胞时，不能用力摇晃试管，以免引起红细胞破裂，导致溶血等情况，溶血会影响红细胞的使用。

），并用生理盐将供血者红细胞制备2％-5％盐水悬液。

（如取分离血清后供血者底层红细胞50ul 与生理盐水1mL 配成5％供血者盐水悬液）3．取洁净塑料小试管2支，1支标明受血者血清（PS）＋供血者细胞（DC）或主侧：另1支标明供血者血清（Ds）＋受血者细胞（PC）或“次侧”。

4．按标记“主侧”管加受血者血清2滴（100uL），加供血者红细胞悬液1滴（50uL）。

“次侧”管放供血者血清2滴（100uL），加受血者红细胞悬液1滴（50uL）。

混匀，离心机离心1分钟，轻轻晃动试管，肉眼观察结果。

四.【结果判定】1．肉眼观察，如果试管中出现任何红细胞凝集或溶血，则判读为阳性，无凝集为阴性。

2．对于不能明显判定为阴性而并未达到阳性凝集的反应，可通过显微镜进一步判读，镜下有红细胞凝集的为阳性反应，无凝集的为阴性。

3．如果试验在室温进行，若有凝集产生，可置37℃放置2分钟后观察凝块是否散开，以排除冷凝集素造成的凝集影响测定结果。

落石出交叉配血试验标准化操作规程（盐水法）一、目的为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对全血、红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞、冰冻红细胞、机采浓缩白细胞悬液等血液成分进行交叉配血试验。

二、方法采用盐水介质试管法； 三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。

盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验，将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行，只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。

试验通常包括：主侧交叉配血试验：受血者血清对供血者红细胞，是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体；次侧交叉配血试验：受血者红细胞对供血者血清，是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体；自身对照试验：受血者红细胞对受血者血清，是检测受血者血清中是否存在抗自身红细胞抗体、直接抗球蛋白试验阳性及红细胞缗钱状假阳性的存在。

四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、试剂1、试剂名称：0.9%氯化钠注射液2、试剂生产厂家：湖南科伦制药有限公司；3、批准文号：国药准字H20050061；4、包装规格：500ml/瓶；5、贮藏条件；18-25℃避光保存。

6、有效期：自检定合格之日起二年；七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。

2、标本采集：见输血科标本管理标准化操作规程。

3、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。

4、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离；2、分别配制受血者与献血者红细胞配成2%盐水悬液；3、取洁净小试管（10mmx60mm）2支，1支标明主侧：受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）；另1支标明次侧：供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）。

交叉配血操作规程交叉配血是一种常用的动物繁殖方法，通过将两个不同的个体进行交叉配对，以获得具有理想遗传特征的后代。

下面是一份交叉配血操作规程，详细介绍了交叉配血的具体步骤和注意事项。

一、前期准备1.确定需要交叉配血的两个个体，分别为雄性和雌性个体。

2.对选定的个体进行健康检查和基因型鉴定，确保它们身体健康且没有携带任何遗传疾病或缺陷。

3.确定交叉配血的时间和地点，保持环境整洁，避免外部因素对实验造成干扰。

4.准备必要的实验器材和试剂，包括培养皿、显微镜、匀浆器、移液器、生理盐水等。

二、交叉配血操作步骤1.检查个体性别：使用显微镜或基因鉴定方法，确认选定个体的性别。

2.打开个体体腔：以手术刀或麻醉剂等方法，在个体体腔中打开一个小孔，以便于之后的操作。

3.收集个体血液：用匀浆器缓慢吸取个体血液，将其置于培养皿中。

4.检查血液凝固情况：观察个体血液是否凝固，若已凝固则将其舍弃，重新收集血液。

5.将雄性血液与雌性血液混合：将取自雄性个体的血液与取自雌性个体的血液混合，保持培养皿中的血液充分混合。

6.观察交配反应：观察混合后的血液是否发生凝集或聚集，若出现凝集或聚集现象，说明雄性与雌性个体之间存在交配反应。

7.鉴定交配结果：使用显微镜或试纸等方法，对交配结果进行鉴定和记录。

8.存储交配后的血液：若需要保存交配后的血液供后续研究使用，将其分装于合适的容器中，并存放于低温环境中。

9.清理实验现场：将使用过的器材和材料进行清理和消毒，保持实验现场整洁。

三、注意事项1.交叉配血操作需要在无菌环境下进行，以避免外部微生物对实验的污染。

2.个体血液的收集应该尽量避免暴露在空气中，以免造成血液的凝固或氧化。

3.操作过程中要注意个体的安全，减少对个体的伤害。

4.需要保持操作的准确性和规范性，避免实验中出现误差。

5.实验后要对结果进行及时记录和分析，以便下一步的研究。

6.学习和了解相关法规和伦理要求，确保在动物实验中符合相关规定。

盐水法交叉配血试验标准操作规程1、目的为规范输血科交叉配血试验的技术操作，确保鉴定结果准确及临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7条款的要求制定本规程。

2、适用范围本文件适用于本院输血科进行交叉配血的操作技术的规范化管理。

3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。

4、试验方法及原理：4.1试验方法：盐水介质配血法4.2原理：天然类血型抗体与对应红细胞抗原相遇，在室温下的盐水介质中出现凝集反应。

通过离心，观察受血者血清与供血者红细胞以及受血者红细胞与供血者清之间有无凝集现象，判断供血、受血者之间有无ABO血型不合的情况。

5、样本采集及处理血样本为血浆（EDTA-K2抗凝）。

抽取受血者静脉血3~4ml，3000转/分离心2分钟，分离出血浆，并将红细胞配成2%盐水悬液。

将供血者血样以同样方法分离血清（血浆），并配制2%红细胞悬液。

配血所用受血者血样必需是输血前3天内的。

6、操作步骤：6.1 取洁净小试管2支，1支标明受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）；另1支标明供血清（DS）+受血者细胞（PC）。

6.2 按标记主侧管放受血者血清1滴，加供血者红细胞悬液1滴。

次侧管放供血者血清1滴，加受血者红细胞悬液1滴，混匀，以1000r/min离心1min，轻轻侧动试管，观察结果。

6.3观察结果：先观察试管上层液有无溶血，再斜持试管轻轻侧动或轻轻弹动，观察管底反应物有无凝集（必要时用显微镜观察）。

冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起的凝集反应。

7、结果判断：ABO同型配血，主侧和次侧均无溶血、无凝集表示无输血禁忌，可以输血。

异型配血时，主测无凝集，次测凝集，无溶血，可以输给少量。

输异型血时，如次测不凝集，不可以输血，应重新复查血型或追查其原因。

8、质量控制：每天常规实验前先做室内质控（具体执行《输血科室内质量控制的标准操作规程》），结果在控后方可将常规检查的报告发出。

9、注意事项：9.1季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起的凝集反应。

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交叉配血操作规程交叉配血操作规程交叉配血是一项重要的医学检验技术，用于确保输血的安全和有效性。

以下是交叉配血操作的规程，以确保正确而高效的操作过程。

1.准备工作：(1)确保操作室内环境整洁、无菌，并保持适宜的温度和湿度。

(2)检查所需仪器和试剂的完整性和有效期，并进行必要的校准和验证。

(3)配备所需的个人防护装备，包括手套、口罩、护目镜和无菌衣物。

2.确定受试者和供者的身份：(1)核对受试者和供者的身份信息，包括姓名、年龄、性别和住院号等。

(2)核对受试者和供者的血样标本标签与申请单上的信息是否一致。

3.采集血样：(1)选择适当的采血方式，如肘窝采血或掌指采血。

(2)使用无菌操作的方法，采集受试者和供者的血样，遵循正确的采血顺序和技术要求。

4.制备试验材料：(1)准备所需的试剂和试管，并检查其完整性和有效期。

(2)按照操作要求，将试剂重新悬浮或稀释至规定的浓度，并确保无菌操作。

(3)标记试管上的信息以及反应区域。

5.进行试验操作：(1)取适量的受试者和供者的血液样本，加入相应试管中，并进行试管的混匀。

(2)将试管置于恒温水浴中进行适当的孵育和反应时间，注意控制温度和时间。

(3)根据试管的反应结果，判断受试者和供者的血型是否相符，即是否适宜进行输血。

6.记录和报告结果：(1)将试验结果准确记录在相应的记录表中，包括受试者和供者的血型信息和交叉配血结果。

(2)及时向临床医生报告交叉配血结果，并协助其进行输血决策和操作。

7.清理消毒：(1)完成试验后，及时清理试验台面和使用的试剂和试管。

(2)将用过的试剂和试管进行正确的分类，处理或清洗消毒。

(3)将工作台面进行清洁消毒，保持操作室内的卫生和无菌状态。

8.质量控制和评估：(1)建立严格的质量控制和质量评估制度，对交叉配血操作过程进行监控和评估。

(2)定期检查和校准操作所使用的仪器和试剂，确保其准确性和可靠性。

(3)进行内部和外部质量控制试验，并根据结果进行必要的改进和调整。

交叉配血试验标准化操作规程（盐水法）一、目的为保证临床输血的相容性，确保临床输血安全，对红细胞悬液、洗涤红细胞、浓缩红细胞、少白细胞红细胞等进行交叉配血试验。

二、方法采用盐水介质试管法；三、原理交叉配血试验也称配合性试验,只是检查不配合性,使受、供者血液间没有可测的不相配合的抗原、抗体成分。

盐水介质交叉配血试验常称立即离心配血试验，将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在盐水介质中进行，只有在任何步骤中不产生溶液血或凝集时方可将供血者的血液或血液成分给受血者输注。

试验通常包括：（一、）主侧交叉配血试验：受血者血清对供血者红细胞，是检测受血者血清中是否存在与供血者红细胞发生反应的抗体；（二、）次侧交叉配血试验：受血者红细胞对供血者血清，是检测供血者血清中是否存在与受血者红细胞发生反应的抗体；四、适用范围适用于输血前需进行交叉配血试验的血液及血液成分。

五、仪器设备普通离心机；血型专用离心机；六、0.9%氯化钠注射液（四川科伦药业股份有限公司）批准文号：国药准字H51021158；有效期：自生产日期之日起三年；七、检测样本要求1、标本类型：静脉血(EDTA－K2真空紫头采血管1支+ 普通红头真空采血管1支)。

2、标本储存和运输：新鲜血2～8℃贮存时间不超过72小时。

3、标本拒收状态：标识不准确、标本稀释、细菌污染，严重溶血等不能测定。

八、操作步骤1、将受血者与献血者的红细胞血清分离；2、分别配制受血者与献血者红细胞配成3 % RBC悬液3% RBC悬液配制：1滴压积RBC + 1.6 ml（40滴）生理盐水3、取一次性试管2支，1支标明主侧：受血者血清（PS）+供血者细胞（DC）；另1支标明次侧：供血者血清（DS）+受血者细胞（PC）。

4、主侧管加受血者血清5滴和供血者红细胞悬液5滴。

次侧管加供血者血清5滴和受血者红细胞悬液5滴。

混匀，以1000r/min离心2min，轻轻侧动试管，观察结果。

冬季室温较低，应将试管保温，以防冷凝集素引起凝集反应影响结果判断。