实验动物疼痛程度之评价方法
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·基础论著·塞来昔布对骨关节炎大鼠疼痛评分和SP表达的影响郑颖常新刘存明范薇刘奕张钧【摘要】 目的探讨佐剂性诱导骨关节炎大鼠模型血清和脊髓背根神经节中SP表达变化,及其与痛觉评分的相关性和塞来昔布的干预效应。
方法将40只SD大鼠随机分为4组:A组(正常组10只)、B组(正常+塞来昔布组10只)、C组(骨关节炎组10只)、D组(骨关节炎+塞来昔布组10只),C和D组予以左膝和尾部皮内分别注射完全弗氏佐剂(CFA)诱导骨关节炎模型,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)塞来昔布对于血浆和脊髓背根神经节内SP含量的影响,采用痛觉评分分析塞来昔布对骨关节炎后疼痛行为的影响。
结果与对照组比较(A和B组),骨关节炎大鼠模型(C和D组)脊髓和脊髓背根神经节内SP含量明显升高(P<0.01),且SP含量与疼痛疼痛评分呈正相关(r=0.83,P<0.01;r=0.61,P<0.01);并且塞来昔布治疗组(D组)SP含量较C组显著降低(P<0.05)。
结论SP在骨关节炎痛的发生中具有重要作用,塞来昔布抑制SP的合成或释放,从而缓解疼痛。
【关键词】 骨关节炎;P物质;疼痛;塞来昔布The role of celecoxib to pain scores and substance P in osteoarthritis rat model ZHENG Ying, CHANG Xin,LIU Cun-ming, F AN Wei, LIU Yi, ZHANG Jun. Department of Anesthesiology, Huai’an First People’s Hospital,Nanjing Medical University, Huai’an 223300, ChinaCorresponding author: LIU Cun-ming, Email: changxin156@【Abstract】 Objective To explore the changes and significance of substance P in dorsal root ganglion andserum, analyze the correlation of substance P and pain score in complete Freund's adjuvant (CFA) inducedosteoarthritis rat model, and to detect the effect of celecoxib on substance P and pain score. Methods FortySprague Dawley rats were randomly divided into four groups with 10 rats in each group: Group A (control), GroupB (celecoxib), GroupC (osteoarthritis), GroupD (osteoarthritis+celecoxib). The osteoarthritis rat model in GroupC andD were established by using an injection of complete Freund’s adjuvant intradermally at the base of the tailand another intra-articularly (left tibiofemoral). Contents of substance P in dorsal root ganglion and serum weremeasured by ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay) and the pain were evaluated according to pain scoresystem. Results Contents of substance P in osteoarthritis group (Group C and D) were significantly greater thanthose in control group (P<0.01); Substance P content in dorsal root ganglion and serum in osteoarthritis group waspositively correlated with pain scores (r=0.83, P<0.01; r=0.61, P<0.01); The level of substance P content andpain scores were significantly decreased by celecoxib in Group D (P<0.05). Conclusion substance P plays animportant role in occurrence of pain in osteoarthritis. Celecoxib can inhibit the production of substance P in serumand DRG and ameliorate pain.【Key words】Osteoarthritis; Substance P; Pain; Celecoxib骨关节炎是一种退行性骨关节疾病,以关节软骨变性破坏、软骨下骨硬化、骨质和滑膜增生、关节囊挛缩等为病理特征,临床主要表现为关节疼痛和畸形[1-2]。
疼痛模型目录一、简介 1二、前言 1三、生理痛模型与常用的痛阈测定法 1(一) 概述 1(二) 热辐射-逃避法 21. 热辐射-甩尾法22. 热辐射-甩头法23. 热辐射-抬足法2(三) 冷水、热水刺激逃避法 3(四) 机械刺激-逃避法 3(五) 机械刺激-嘶叫法 3(六) 电刺激-嘶叫法 3四、急性病理性疼痛模型 3(一) 概述 3(二) 扭体模型 4(三) 福尔马林致痛模型 4(四) 白陶土-鹿角菜胶炎症模型 4五、慢性病理性疼痛模型 5(一) 概述 5(二) 炎症痛模型 51. 多发性佐剂关节炎模型 52. 单发性佐剂关节周围炎模型 63. 单发性佐剂关节腔炎模型 64. 小结 6(三) 神经痛模型71. 中枢神经系统损伤性神经源性痛模型72. 疾病导致的周围神经性疼痛模型73. 外伤导致的周围神经性疼痛模型84. 小结9六、结语9简介疼痛是机制非常复杂的神经活动。
疼痛研究已经成为当前神经科学研究的重要课题之一。
由于疼痛机制的复杂性,使得在患者身上研究与疼痛有关的神经机制成为不可能的事。
因而,我们的研究需要相应的动物模型。
本章介绍了在现代神经科学研究中常用的疼痛动物模型。
在概要介绍了疼痛研究的意义及其现状之后,重点介绍了在生理痛研究和急性、慢性病理痛研究中所应用的动物模型。
生理痛的模型即常用的动物伤害性感受阈测定法;急性病理痛的模型则主要是各种急性炎症模型模型;慢性病理痛的模型则包括慢性炎症模型和慢性神经损伤模型。
前言疼痛(pain)是人们一生中经常遇到的不愉快的感觉。
它提供躯体受到威胁的警报信号,是生命不可缺少的一种特殊保护功能。
另一方面,它又是各种疾病最常见的症状,也是当今困扰人类健康最严重的问题之一。
近年来,仅在美国就有三至四千万人患有慢性痛。
据估计,美国每年用于治疗慢性痛的费用约为400~600亿美元;澳大利亚每年用于治疗疼痛的费用占全部医疗费用的40%。
随着医学的进步和人类生活水平的提高,烈性传染病逐渐得到控制,疼痛在人的身心痛苦和医疗费用消耗上的相对地位将越来越重要。
4186 |中国组织工程研究|第25卷|第26期|2021年9月坐骨神经损伤实验动物的建模及评价方法与指标苏 静1,凌春燕1,雷龙鸣2文题释义:挤压伤法:是指利用不同性质的方法对神经进行挤压损伤的方法,有钳夹损伤、卡压损伤。
坐骨神经损伤:是最常见的周围神经损伤,该神经损伤后可出现支配区域功能部分缺失,造成运动、感觉功能障碍,损伤严重时可导致神经营养性改变,造成所支配肌肉瘫痪及关节功能的丧失,严重影响患者的生活质量。
摘要背景:坐骨神经损伤修复与再生的体外研究受到诸多条件限制,寻求更加符合人体坐骨神经损伤的动物模型以及切合实际的评价方法或指标因此显得尤为重要。
目的:以近10年发表文献为主,对关于坐骨神经损伤动物模型建立和评价指标的研究进展作出综述,为坐骨神经损伤发病机制的研究和探索新的治疗方法提供理论依据。
方法:通过对CNKI 、万方、维普、Sinomed 及PubMed 、Web o f Science 数据库进行检索,检索的时间范围以2010至2020年为主;中文检索关键词为“坐骨神经损伤”“动物模型”;英文检索关键词为“sciatic nerve injury ”“animal models ”。
选择权威杂志文章,共纳入58篇文章。
结果与结论:坐骨神经损伤动物模型的建立方法包括物理损伤、化学损伤。
钳夹压力损伤法因神经的连续性未被中断,所以更适合对神经的形态学和行为学的观察;横断损伤法则更适合对神经营养因子和相关蛋白促进神经再生的指标观察;卡压伤法适合对炎性因子的指标观察。
根据实验目的及临床研究需求,选择合适的动物模型,并对动物模型进行优化总结,同时开展切合实际的相关研究指标是促进对本病病理和发病机制的深入性研究,也是动物实验的关键。
关键词:坐骨神经;损伤;动物模型;评价指标;综述An overview of modeling and evaluation indexes of experimental animals with sciatic nerve injurySu Jing 1, Ling Chunyan 1, Lei Longming 21Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530022, Guangxi Zhuang Autonomous Region, China; 2First Affiliated Hospital of Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530023, Guangxi Zhuang Autonomous Region, ChinaSu Jing, Master candidate, Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530022, Guangxi Zhuang Autonomous Region, ChinaCorresponding author: Lei Longming, MD, Professor, Master’s supervisor, First Affiliated Hospital of Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530023, Guangxi Zhuang Autonomous Region, ChinaAbstractBACKGROUND: There are various limitations for in vitro research regarding nerve repair and regeneration following sciatic nerve injury. Therefore, it is particularly important to seek animal models that are more suitable for research on human sciatic nerve injury and to develop practical evaluation methods or indicators.OBJECTIVE: To review the research progress on the establishment and evaluation indexes of sciatic nerve injury in animal models in the past 10 years byretrieving the relevant literature on sciatic nerve injury, so as to provide a theoretical basis for the research on the pathogenesis of sciatic nerve injury and for the exploration on new treatment methods.METHODS: Databases of CNKI, WanFang, VIP , Sinomed, PubMed and Web of Science were searched for relevant literature published from 2010 to 2020. The search words were “sciatic nerve injury” and “animal models” in Chinese and English, respectively. Authoritative journal articles were preferred, and finally 58 articles were included.https:///10.12307/2021.119投稿日期:2020-08-18送审日期:2020-08-21采用日期:2020-09-19在线日期:2020-11-26中图分类号: R446;R496;R318文章编号:2095-4344(2021)26-04186-06文献标识码:A1广西中医药大学,广西壮族自治区南宁市 530022;2广西中医药大学第一附属医院,广西壮族自治区南宁市 530023第一作者:苏静,女,1986年生,广西壮族自治区河池市人,广西中医药大学在读硕士,主要从事针灸推拿在神经系统疾病康复中应用的研究。
动物疼痛模型的建立方法及注意事项(2):鼠尾光照测痛实验尾闪试验( tail-flick test)也叫鼠尾光照测痛实验,是一种用热作刺激的急性伤害性知觉疼痛的实验,即用热刺激动物(鼠类)的尾巴,当其尾部受到伤害性刺激时会产生明显的躲避反应,这是一种脊髓的屈曲反射。
该疼痛模型最早由D'Amour和Smith在1941年描述,它可测试轻度麻醉的动物而且不受动物运动协调性的影响,因而比热板试验具有一定的优越性,但是尾闪试验的尾巴温度可能会影响实验结果,容易造成假阳性或假阴性,试验最终的行为反应也较为复杂(如舔其后爪)。
Janssen等(1963)根据尾闪试验用温水(49度)替代热光源来刺激动物的尾巴测试其反应时间,更新的实验装置则可用较局限的热点刺激,专门刺激菜一个单一的脚爪,然后测定其反应潜伏期,这比热板试验刺激的4个全部的脚爪或尾闪试验刺激的尾部更为精细。
(一)实验材料1.实验动物健康成年雄性小鼠(30 - 35g)或大鼠(200 - 250g),分组饲养。
2.实验药物生理盐水(对照)与镇痛药物(如吗啡,lOmg/kg,皮下注射)。
3.带27((大鼠)或30G(小鼠)针头的1.Oml注射器。
4.带自动计时器或秒表的尾闪试验装置。
5.限制大鼠或小鼠活动的包括毛巾或塑料小筒。
(二)实验步骤1、从动物房取出实验动物,称重后,让动物在实验室适应30min,将对照组与实验组分开;2、药物准备对照组(生理盐水等)及给药组(如吗啡等,计算药物浓度,如大鼠按2mg,kg绐药,小鼠按1Omg/kg给药);3、测定动物的基础反应潜伏期( baseline latencies) 用尾闪试验测试仪(即在一小孔的平板下有一个发热光源,将大鼠(尾尖部前50mm左右)或小鼠(尾尖部前约15mm)的尾部放在小孔的上方,启动发热光源开始计时,直到尾巴躲避为止,调整光源的强度,设大多数鼠的尾部躲闪时间在3- 4s,如果没有躲避反射则把试验终止时间设定为1Os,以免烧伤;4、药物注射将不同的药物包括对照溶液,随机顺序注射到实验动物体内。
cia动物模型领床评分标准全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:CIA动物模型常见于生物医学研究领域,是一种模拟人类疾病或药物治疗效果的实验动物。
在进行医学研究时,我们需要对这些动物模型进行评分,以便对研究结果进行准确的评估和分析。
本文将讨论关于CIA动物模型领床评分标准的相关内容。
我们需要明确CIA动物模型是指哪种动物模型。
CIA即Collagen-Induced Arthritis,是一种模拟类风湿性关节炎的动物模型。
该模型通过注射胶原蛋白等物质来诱发小鼠或大鼠出现类风湿性关节炎的症状,包括关节肿胀、关节疼痛和炎症等。
在评分CIA动物模型时,我们需要关注这些与类风湿性关节炎相关的症状。
评分标准应包括动物的一般健康状况、体重变化、关节肿胀程度、关节疼痛程度、关节炎指数、行为变化等方面。
在进行评分时,可以根据这些指标给动物模型打分,以便更好地评估研究结果。
下面将对这些评分指标逐一进行展开介绍。
一、一般健康状况:在评分CIA动物模型时,首先需要关注动物的一般健康状况。
一般健康状况的评分可以根据动物的精神状态、食欲、毛发光泽等方面进行评估。
健康状态良好的动物得分较高,而健康状态较差的动物得分较低。
二、体重变化:体重是评估动物健康状况的重要指标之一。
在CIA 动物模型中,关节炎引起的疼痛可能导致动物进食减少,从而导致体重下降。
体重变化的评分标准应包括动物的体重变化情况,体重下降越明显的动物得分越低。
三、关节肿胀程度:关节肿胀是类风湿性关节炎的主要症状之一。
在评分CIA动物模型时,需要关注动物关节的肿胀程度。
关节肿胀程度的评分可根据动物关节的肿胀程度进行评估,肿胀程度越明显的动物得分越高。
六、行为变化:关节炎可能导致动物的行为发生改变,例如活动减少、行走困难等。
在评分CIA动物模型时,需要关注动物的行为变化情况。
行为变化的评分可以根据动物的活动度、运动能力等方面进行评估,行为变化越显著的动物得分越低。
总结:在评分CIA动物模型时,我们需要综合考虑动物的一般健康状况、体重变化、关节肿胀程度、关节疼痛程度、关节炎指数、行为变化等方面的指标,以便更好地评估动物模型的临床表现和疾病程度。
疼痛实验动物模型科研探索2007-04-25 23:11:36 阅读147 评论0 字号:大中小订阅疼痛是机制非常复杂的神经活动。
疼痛研究已经成为当前神经科学研究的重要课题之一。
由于疼痛机制的复杂性,使得在患者身上研究与疼痛有关的神经机制成为不可能的事。
因而,我们的研究需要相应的动物模型。
本章介绍了在现代神经科学研究中常用的疼痛动物模型。
在概要介绍了疼痛研究的意义及其现状之后,重点介绍了在生理痛研究和急性、慢性病理痛研究中所应用的动物模型。
生理痛的模型即常用的动物伤害性感受阈测定法;急性病理痛的模型则主要是各种急性炎症模型模型;慢性病理痛的模型则包括慢性炎症模型和慢性神经损伤模型。
前言疼痛(pain)是人们一生中经常遇到的不愉快的感觉。
它提供躯体受到威胁的警报信号,是生命不可缺少的一种特殊保护功能。
另一方面,它又是各种疾病最常见的症状,也是当今困扰人类健康最严重的问题之一。
近年来,仅在美国就有三至四千万人患有慢性痛。
据估计,美国每年用于治疗慢性痛的费用约为400~600亿美元;澳大利亚每年用于治疗疼痛的费用占全部医疗费用的40%。
随着医学的进步和人类生活水平的提高,烈性传染病逐渐得到控制,疼痛在人的身心痛苦和医疗费用消耗上的相对地位将越来越重要。
由于难以在人体对疼痛进行深入的机制研究,有必要建立疼痛的动物模型。
但疼痛是是包括性质、强度和程度各不相同的多种感觉的复合,并往往与自主神经系统、运动反应、心理和情绪反应交织在一起,它既不是简单地与躯体某一部分的变化有关,也不是由神经系统某个单一的传导束、神经核和神经递质进行传递的,所以很难将某种客观指标与疼痛直接联系起来。
因而,我们只能根据模型动物对伤害性刺激的保护反应和保护性行为来推测它们的疼痛程度。
伤害性感受(nociception)和痛觉是两个有密切关系但又不相同的概念。
前者是指中枢神经系统对由于伤害性感受器的激活而引起的传入信息的加工和反应,以提供组织损伤的信息;痛觉则是指上升到感觉水平的疼痛感觉。
急性眼刺激试验急性毒性试验动物急性毒性试验研究动物在24小时内服用一次或多次后在一定时间内产生的毒性反应人类使用的药物通常需要动物急性毒性试验。
需要啮齿动物或非啮齿动物通常小鼠或大鼠通过口腔、吸入或皮肤暴露于药物。
急性毒性试验主要测量LD50(浓度),观察急性中毒性能、经皮吸收能力以及对皮肤、粘膜和眼睛是否有局部刺激等。
急性毒性试验处于药物毒理学研究的早期阶段,对阐明药物的毒性作用和了解其毒性靶器官具有重要意义。
急性毒性试验获得的信息对某些药物的长期毒性试验剂量的设计和一期临床试验初始剂量的选择具有重要的参考价值,并能提供一些与人类用药过量所致急性中毒有关的信息。
急性眼刺激/眼腐蚀试验(巴豆油或甲醛)定义:眼刺激:指眼球表面接触试样后可逆的炎症变化眼睛腐蚀性:指眼球表面与被测样品接触造成的不可逆组织损伤。
试验的基本原理:将1个试验样品一次滴入每只实验动物一只眼的结膜囊,另一只未处理的眼作为自身对照。
2在规定的时间间隔内,观察对动物眼睛的刺激和腐蚀程度及评分,从而评价试样对眼睛的刺激观察时间应足以评估刺激效应的可逆性和不可逆性。
观察时间至少为72小时,但一般不超过21d几天。
3当动物表现出严重而持久的疼痛迹象时,应以适当的方式处死动物;4强酸或强碱物质,如酸碱度32或酸碱度N11.5,由于其可预测的腐蚀特性,不需要测试。
5.在皮肤试验中被证明具有腐蚀性或严重刺激毒性的物质不需要进行眼睛刺激试验,可以假定这些物质会对眼睛造成类似的严重后果;6在充分和公认的体外试验结果确定可能产生刺激性或腐蚀性物质时无需进行体内试验目的:检测外来化合物对实验动物眼睛和粘膜的主要刺激和腐蚀作用的急性试验,以提供与受试物质接触的人眼和粘膜的潜在危险信息实验动物:优选成年白兔(如果使用其他哺乳动物进行实验,实验者应提供选择依据),选择对人皮肤和粘膜反应相对相似的[动物,常用动物包括兔和豚鼠动物种类的选择应基于待观察的指标和模型的合理性。
详细介绍对动物进行安乐死方法实验动物安乐死问题一直困扰着动物实验工作者,什么是安乐死技术或方法? 如何实施安乐死?怎样的安乐死方法才能既保证动物福利、符合伦理道德准则,又对实验者方便实用? 本文根据美国兽医学会(A VMA) 关于安乐死的评价准则阐述实验动物实施安乐死的若干问题。
1 什么是安乐死安乐死一词来源于希腊文“eu”,意思是“平安和有意义的死亡”。
平安死亡意味着微量的疼痛和痛苦(pain and distress)。
实验动物科学中的安乐死指的是对实验动物实施的人道处死( humane death)。
因为实验动物作为人类的替难者用于各种科学实验,人类有义务给予实验动物足够的尊敬,处死动物时尽可能减少动物的疼痛和痛苦。
安乐死技术很难做到完全没有疼痛和痛苦,但通过改善实施安乐死的环境条件和熟练掌握技术可以减少动物的痛苦。
从定义中可以看出,安乐死技术包含两个方面的内容,一是减少疼痛,二是减轻痛苦。
减少疼痛要求建立无疼痛死亡技术,减轻痛苦要求尽量减少动物感知(丧失意识)。
2 安乐死技术( 方法) 介绍药物方法:药物安乐死技术方法的原理有:直接或间接缺氧、生命功能的神经元抑制和大脑活动或生命功能神经元的直接破坏。
直接或间接缺氧。
可以在任何地方完成,并且可以依不同速率造成动物意识丧失。
没有疼痛和痛苦的死亡一定是意识丧失先于动作消失(肌肉活动消失),而动作消失不等于意识丧失和没有痛苦发生。
因此,导致肌肉麻痹而不能造成意识丧失的安乐死药物(例如去极化或非去极化的肌肉松弛剂,士的宁、烟碱、镁盐等)不能作为安乐死的单一方法。
生命功能的神经元抑制。
药物首先抑制大脑神经元随后导致动物死亡。
某些药物在实施过程中会使动物处于一种所谓激动躁狂期,可能发出叫声或肌肉收缩。
但这不是有目的的,随着意识丧失马上死亡,原因是心脏停止跳动造成呼吸中枢供氧不足。
大脑活动或生命功能神经元的直接破坏。
来源于直接冲击破坏大脑或大脑神经元去极化可以使动物马上丧失意识。
试剂0.6%醋酸阿司匹林(配成50mg/ml)2 方法牛磺酸镇痛作用研究小鼠40 只( 雌雄各半) , 随机分为5 组, 其中第1 组为对照组,灌胃生理盐水; 第2 组为阿司匹林组, 灌胃阿司匹林; 第3、4、5组为牛磺酸组, 分别灌胃含20、10、5 g/ L 牛磺酸的生理盐水。
各组给药剂量均为0. 1 mL/ 10 g 体重。
各组小鼠给药45 min( 阿司匹林组1 h) 后, 腹腔注射0. 5 g/ L 0.6%醋酸( 0. 2 mL/ 只) , 观察小鼠产生扭体反应( 腹部凹陷, 躯后腿伸直, 臀部高起) , 记录15 min 内扭体次数, 将给药组与对照组相比,以给药后扭体次数减少50% 为有效镇痛作用指标, 计算药物对扭体反应的抑制率。
抑制率= ( 对照组平均扭体次数- 给药组平均扭体次数) / 对照组平均扭体次数×100%【实验结果】将结果记录于下表中,综合数据,计算抑制率牛磺酸颗粒对醋酸诱发小鼠扭体反应的镇痛效果,见下表:组别N扭体次数(均值±标准差)标准误生理盐水8 29.38±14.918 16.90阿司匹林组8 14.625±7.463 8.3920g/L牛磺酸组8 28.75±18.622 13.1810g/L牛磺酸组8 44±19.228 27.935g/L牛磺酸组8 49±12.271 38.74*注:与空白对照组比较,P<0.05P=0.001 方差不齐 Tamhane分析②③④⑤与①无显著性差异,②与④②与⑤有显著性差异【结果分析】:从实验所得的数据看出给药组与生理盐水组之间没有显著性差异也就是所给的药没有作用,作为阳性对照的阿司匹林也没有镇痛作用,而阿司匹林是经典的解热镇痛药,说明实验从在较大的误差。
分析可能的原因有以下几点:1)小鼠本身的个体差异,不同的小鼠对醋酸的反应程度和对药物的吸收速度及程度都有所差异导致误差。
动物病理检测评分1. 引言动物病理检测评分是一种用于评估动物组织病变程度和严重程度的方法。
它是一种重要的工具,用于帮助研究人员和兽医确定动物是否患有特定疾病,以及了解该疾病在组织水平上的影响。
本文将介绍动物病理检测评分的背景和意义,并详细探讨其在不同动物模型中的应用。
2. 动物模型2.1 实验室小鼠实验室小鼠是最常用的实验动物模型之一,广泛应用于各种基础医学和临床医学领域。
在小鼠模型中,常见的组织样本包括肝脏、肺、肾脏等。
通过对这些组织样本进行病理检测,并根据特定标准进行评分,可以了解小鼠是否患有特定疾病以及该疾病对其组织造成了何种影响。
2.2 大鼠大鼠也是常见的实验动物模型之一,在许多领域都有广泛的应用。
大鼠的组织样本与小鼠类似,包括肝脏、肺、肾脏等。
通过对大鼠组织样本进行病理检测评分,可以了解疾病对大鼠组织的损害程度,从而进一步研究该疾病的发生机制和治疗方法。
2.3 其他动物模型除了小鼠和大鼠,还有许多其他动物模型被广泛应用于生物医学领域。
例如,兔子模型常用于心血管系统和皮肤相关的疾病研究;豚鼠模型常用于呼吸系统相关的疾病;非人灵长类动物模型常用于神经系统相关的疾病等。
对这些动物模型进行动物病理检测评分可以为各种领域的科学家提供有价值的数据。
3. 动物组织样本处理在进行动物组织样本处理之前,需要遵循一定的实验室操作规范。
首先,需要确保实验环境清洁,并采取适当措施防止交叉污染。
其次,在处理组织样本前,需要正确选择适当的固定剂,以保持组织的形态结构和细胞学特性。
最常用的固定剂是10%中性缓冲福尔马林。
此外,还需要正确选择适当的切片技术和染色方法。
4. 动物病理检测评分方法4.1 病理学特征评分病理学特征评分是一种常用的动物病理检测评分方法。
它通过对组织切片中出现的不同病变特征进行定量评估,以确定动物是否患有某种疾病以及其严重程度。
常见的病理学特征包括细胞变性、坏死、出血、纤维化等。
4.2 炎症评分炎症是许多动物模型中常见的组织反应之一。
實驗動物疼痛程度之評估方法
一、前言
在執行及設計動物實驗時,動物疼痛程度的評估對實驗者和動物福利保護者而言,一直是個最難以解決的問題。
一般較為簡單而有意義的方法是評估實驗操作中動物疾病的發生率及死亡率,但是這樣的方法卻無法提供對於動物在進行實驗中所需承受疼痛的狀況。
因此在1985年,由Moron & Griffiths 建立了一套可作為依據的評估方法,此種方法
用了5種資料來評估動物於實驗中所可能遭受的疼痛狀況,這5種資料包含有:體重、外觀、臨床症狀、先天性的行為及對刺激的反應等。
在英國,對於動物在實驗進行中所需承受的疼痛、緊迫、持續性傷害等等作了一些規範,並希望實驗者可以在對動物最小的傷害之下得到所需的實驗數值,而實驗者亦需了解動物的疼痛狀況會由輕微逐漸變為中等,中等程度亦有可能會變為嚴重程度的,因此訂定一個依據,來減低對實驗動物可能造成的傷害。
在下列表中,列出6種常用實驗動物的疼痛程度評估資料,(表格中所列並非最新資訊,卻是最廣為大家所使用的),藉由臨床上動物觀察來判定動物所處的狀況。
本表格由國外研究人員、獸醫師及動物保護學會人員一同研究討論後擬定之。
動物疼痛之一般症狀:
∙不清理皮毛(皮毛粗糙無光澤)
∙食物及水分攝取量下降、尿液及糞便量減少
∙對人類觸碰的物理性反應異常(退縮,跛行,異常攻擊性,尖叫,夾緊腹部,脈搏和呼吸次數上升)
∙體重下降(原體重之20-25% ), 生長停滯(增重遲緩), 或體質改變(惡病質cachexia) ∙脫水
∙體溫異常(上升或下降)
∙脈搏和呼吸異常(上升或下降)
∙磨牙(常見於兔子及大型農場動物),流汗(馬)
∙自我攻擊,自我傷害疼痛部位
∙疼痛部位之炎症反應
∙懼光
∙嘔吐或下痢
∙器官衰竭之具體證據(血液生化,超音波,生檢,..肉眼病變等)
動物體各部位對疼痛之反應:
二、各種實驗可能造成的動物疼痛、緊迫及臨床症狀分類表
三、各種實驗動物之疼痛程度評估表
(一)大鼠疼痛程度評估表
(六)米格魯犬疼痛程度評估表
資料來源:國防醫學院動物中心/使用相關規定/動物疼痛程度之評估方法。