新型圆环苗上市,养猪又现新希望——国内首个应用悬浮培养工艺生

积跬步致千里,创新疫苗显威力r——金宇生物股份猪圆环和猪瘟疫苗上市发布会圆满落幕佚名【期刊名称】《兽医导刊》【年(卷),期】2016(000)007【总页数】2页(P34-35)【正文语种】中文(本刊讯)3月27日，由金宇生物技术股份有限公司(生物股份，股票代码：600201)主办的，以“创新，引领未来”为主题的“金宇猪业高峰论坛暨新产品发布会”在扬州香格里拉大酒店隆重召开。

全国生猪养殖龙头企业代表、各大经销商和多位国内知名专家、教授及学者受邀参加了此次会议，与会人员达到300余人。

共同见证了金宇生物重磅创新产品圆立优（猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗（CP08株））和猪瘟耐热保护剂活疫苗（细胞源）上市的历史性时刻。

金宇生物技术股份有限公司推出“猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗（CP08株）”和“猪瘟耐热保护剂活疫苗（细胞源）”两个全新产品。

猪圆环病毒疫苗的生产系沿用金宇成熟的多级全悬浮培养技术实现抗原的高效表达，猪圆环病毒Cap蛋白含量≥50 ug/头份，真核表达病毒样颗粒，真实展现猪圆环病毒核衣壳空间结构及大小，具有与全病毒同样的免疫原性，病毒培养物经先进的多级纯化工艺后获得精制抗原，杂蛋白清除率超过99％，配苗选用美国进口专利佐剂，兼顾高效和缓释作用，免疫后快速产生免疫保护，且保护期超过22周，是目前国内市场上控制猪圆环病毒2型感染的首个达到甚至超过国际同类疫苗免疫效果的产品。

猪瘟疫苗系采用世界上公认的猪瘟兔化弱毒株C株，经生物反应器高密度悬浮培养，加耐热保护剂冷冻干燥制成猪瘟弱毒活疫苗，其病毒含量稳定在20 000 RID/头份以上，生产过程中通过采用实时荧光定量PCR方法检测病毒的拷贝数来实现产品的精准定量，该产品效价高，安全性好，批间差小，可快速产生免疫应答，田间试验二免后4周抗体合格率达90％以上，抗体持续时间长、合格率高，是目前市场上有效预防猪瘟的最佳选择。

在发布会现场，金宇生物股份公司首先通过宣传片向来宾及各大媒介展示了其动保产业品牌内涵以及新上市产品的开发历程及制造工艺等，体现出生物股份至臻完美的品质。

养殖与饲料2020年第05期悬浮培养技术在猪圆环疫苗生产中的应用李少丽*邵攀峰朱国坡尹忠良杭州佑本动物疫苗有限公司，杭州310018摘要猪圆环病毒病是猪的一种非常重要的免疫抑制性疾病，可直接破坏猪的免疫系统，并引起其他疾病的并发或继发感染。

针对该病的疫苗主要为全病毒灭活疫苗和基因工程亚单位疫苗，基因工程亚单位疫苗一般利用生物反应器生产，而国内猪圆环全病毒灭活疫苗的微载体悬浮培养生产的工艺目前还处于研究阶段。

关键词悬浮培养；猪圆环病毒；疫苗收稿日期：2020-03-05*通讯作者李少丽，女，1983年生，博士，高级兽医师。

1猪圆环病毒概况猪圆环病毒（porcine circovirus ，PCV ）是目前发现的脊椎动物中最小的一种动物病毒，该病毒可分为PCV1和PCV2两种血清型。

PCV1对猪无致病性，广泛存在于猪体内和猪源传代细胞系中，PCV2可在猪群内引发多种传染病，如断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS ）、猪皮炎肾病综合征（PDNS ）等。

PCV2不仅可造成仔猪生长缓慢，而且还会侵害猪的免疫系统，导致猪群免疫抑制，影响其他疫苗的免疫效果，并引发其他病原的继发感染。

PCV2基因组大小为1766~1768bp ，共包括ORF1和ORF2在内的11个ORF 。

ORF2编码病毒衣壳蛋白（Cap 蛋白），Cap 蛋白为病毒的主要结构蛋白，是刺激机体产生免疫应答的主要抗原，也是基因工程亚单位疫苗研究的热点。

目前，针对圆环病的商品化疫苗国内已有30多家，主要为全病毒灭活疫苗和亚单位疫苗。

目前，国内疫苗企业上市的全病毒灭活疫苗均为转瓶工艺。

2悬浮培养技术在猪用疫苗生产中的应用随着细胞培养技术的不断发展成熟，许多细胞已从传统的转瓶培养被驯化为悬浮培养。

悬浮培养技术具有病毒产量高、生产周期短、污染小、批间稳定、操作方便、可自动化控制、劳动成本低等优势，其可分为微载体悬浮培养和全悬浮培养2种方式。

微载体培养是以细小的颗粒作为细胞载体，通过搅拌使细胞悬浮在培养液内，细胞在载体表面生长成单层的一种细胞培养方式。

12241卷第3热点聚焦HEAT FOCUSING第十八届全国猪人工授精大会成功召开本刊编辑/甄梦莹2024年3月8—10日，由中国博鳌高端猪业科技论坛组委会主办、宁波第二激素厂独家联合主办的第十八届全国猪人工授精大会在海南临高碧桂园金沙滩温泉酒店成功召开。

来自全国各地近400位参会嘉宾汇聚一堂，共襄盛会。

首届全国猪人工授精大会于2007年在北京召开，一路走来，大会坚持对猪人工授精关键技术及实践操作进行深入研讨，见证及推动着我国猪人工授精事业的健康、有序发展，第十八届全国猪人工授精大会的成功召开给予行业发展新动能。

大会现场见图1。

图1 大会现场图1 开幕式盛况大会开幕式嘉宾汇聚。

原天津市农业科学院党委书记、天津市农学会第六届专家委员会主任傅润亭，中国博鳌高端猪业科技论坛秘书长、中国种猪信息网总编辑孙德林教授，华南农业大学张守全教授，北京市农林科学院畜牧兽医研究所刘彦研究员，河北农业大学李俊杰教授，上海交通大学李新红教授、四川农业大学林燕教授、浙江大学张金枝研究员、吉林农业大学张树敏研究员、佛山科学技术学院王丙云教授等专家出席大会开幕式。

宁波第二激素厂总裁岑桂英、上海卡苏生物科技有限公司市场部经理马帅、威隆·亚士可国际制药集团技术总监郭承建、默沙东动物保健品（上海）有限公司亚太猪市场技术总监Lenoardo Ellerma 、天津现代天骄农业科技股份有限公司董事长孙超、杭州越丰生物科技有限公司董事长王维洪、BEAGRO 碧农总经理殷晓东、北京伟杰信生物科技有限公司营销总监黄正、四川德康农牧食品集团股份有限公司副总裁胡伟、防非生物科技（北京）有限公司董事长李政、深圳市鑫钻农牧科技有限公司总经理赵阳、济南约克农牧器械有限公司经理李 旭、广西贵港秀博基因科技股份有限公司扬翔秀博南方销售公司总经理魏光宇、广东中农联生物制药有限公司总经理吴洪浩、广州集牧农牧科技股份有限公司销售总监张凤连、广州威生医药科技有限公司副总经理谢显泰、北京中科基因技术股份有限公司副董事长朱连德、北京中农劲腾生物技术股份有限公司总经理张玉鹏等企业嘉宾出席大会开幕式。

11国内首支圆支二联苗问世，合国情减应激杨佳颖/本刊规模化猪场混合感染增多，联苗成为趋势近年来，随着我国农牧业产业化改革的不断深入，有利地带动了我国畜牧业的持续发展，畜禽品种和数量有了很大幅度的增加，同时畜禽疾病的种类和发生频率也大大增加。

临床发病中，混合感染是常见现象，特别是圆环病毒2型极易与其他病毒发生混合感染。

据统计，猪圆环病毒2型（PCV2）感染相关的断奶衰竭综合征（PMWS）病例中，最为常见的混合感染首先是高致病性蓝耳病毒占比51.9%，其次便是猪肺炎支原体占比35.5%，还有细菌和猪流感病毒，分别占比21.6%和5.4%。

经过数据统计结果显示，威胁规模化猪场最为突出的问题就是猪呼吸道疾病综合征（PRDC），而猪圆环病毒2型（PCV2）和肺炎支原体（Mhp）是2个重要的原发病原，临床调查，由它们引起的混合感染极为常见。

猪圆环病毒2型（PCV2）能引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎与肾病综合征（PDNS）、猪呼吸道复合体病（PRDC）、母猪繁殖障碍（PRF）、仔猪先天震颤（CT）等一系列疾病，同时易与其他病原混合感染或导致继发感染，增加了临床的复杂性，从而给猪场带来巨大的经济损失，对全球养猪业造成了严重影响。

猪支原体肺炎是由于感染猪肺炎支原体而引发的慢性呼吸道疾病，又称“猪气喘”或“猪地方性肺炎”。

猪肺炎支原体进入猪呼吸道后，逐步的定植感染引发严重的炎症损伤，部分肺部区域表现肉变、硬化和坏死，导致肺脏功能失调，出现呼吸困难，饲料转化率下降。

仔猪感染颇多，该病具有感染率高、传染性高的特点，给世界养猪业带来巨大的经济损失。

因此能够预防多种疾病的混合感染是目前兽用生物制品发展的趋势。

虽然针对这两种病原的防控都有成熟的商品化单苗，但其种类较多，且免疫程序复杂，引发机体应激明显，因此研发圆环病毒2型和猪肺炎支原体的联苗势在必行。

国内首发圆支二联苗，突破三大技术难题目前猪用疫苗市场上二联疫苗，仅有10种，其中以猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗的产品占主导。

圆环病毒为什么必须要悬浮培养圆环病毒为什么要要悬浮培养？近年来，猪圆环病毒正在被越来越多的人认识和关注，圆环病毒相关性祸害疾病对猪场的毒害也在逐年凸显。

圆环疫苗的除非免疫不再是考虑是否应该接种，而是已经成为猪场的刚性需求！人们不再仅仅关注是否该打疫苗，而是更多的关注圆环疫苗究竟该如何注目选择！王美岩旨在探讨圆环全病毒在培养上的难点及高品质圆环全病毒阐述灭活疫苗应具备的基本特征！首先，我们回顾来回顾一下圆环寄生虫的基本特征。

猪圆环病毒（PCV）属于圆环病毒科圆形圆环病毒属于，是迄今为止发现的最小的动物之一，病毒平均直径17nm，基因组为漳绒环状DNA，对外界现状抵抗力较强，对氯仿不敏感，在pH为3的酸性环境中很长时间不不能被灭活，在56摄氏度或70摄氏度处理一段时间不被灭活。

看到这里，可能有读者会想，圆环病毒在环境中如此难以消除，抵抗力这么强，将它放在体外的细胞培养生产应该是一件非常容易用事情吧？事实不是这样的！据笔者多年的张老师工艺改进与生产经验，由于夹层病毒自身毒力弱，要想蠕虫在圆环病毒培养上获得理想效价的抗原是非常困难的。

现有制备猪圆环病毒灭活疫苗新工艺的生产工艺大多采用转瓶培养为主，转瓶培养工艺车间需要大面积温室培养条件及相对多的技术人员、且污染概率增加，产品效价不可控制，病毒含量低，最终导致配制疫苗流感疫苗时抗原需要浓缩，最受抗生素制约的一点是转瓶培养神经元生长状态的差异容易导致疫苗批次间参差不齐等问题。

到微载体悬浮培养工艺相比于方瓶和转瓶工艺，具有生产量大、生产周期短、批次稳定、可自动化控制与监视等特性。

成都天邦从2021年开始启动微载体悬浮培养技术的研究攻关。

已筛选到适合悬浮培养的细胞，在微载体悬浮培养工艺上表现良好，细胞活力、增殖速度等指标都非常优异，并赢得了悬浮培养专利证书。

实现了在瑞士比欧有机体反应器上上的悬浮培养三级放大，从病毒血清素数量计算，使用微载体悬浮培养途径制备的PCV2效价比传统转瓶工艺提高10至100倍。

特写Feature64对话2017年3月1-2日，勃林格殷格翰FLEXcombo 圆梦福莱中国上市会在武汉世茂希尔顿大酒店隆重召开。

本次发布会就勃林格殷格翰旗下猪圆环疫苗IngelvacCircoFLEX 圆福莱和猪支原体疫苗IngelvacMycoFLEX 梦福莱的混合使用做了详细的报道。

《今日养猪业》记者在发布会期间有幸采访文 ⊙ 满少鹏 本刊记者早在2010年，美国就开始着手尝试混合注射，此次勃林格殷格翰历经数年精心研发、首次在中国推出疫苗混合注射，此举有效地提高了一线生产工作效率，同时混合注射也为中国动保企业提供一个新的研究思路。

化繁为简—猪圆环和支原体疫苗首次合体到勃林格殷格翰动物保健大中华区副总裁郎世峰、勃林格殷格翰动物保健全球技术经理Bernd Grosse Liesner和勃林格殷格翰动物保健中国商业运营负责人李万猛，本刊记者向负责新品发布的勃林格殷格翰团队请教诸多疫苗混合注射的相关问题。

本刊记者与勃林格殷格翰高层合影PIGS TODAYApril 201765《今日养猪业》：一款新的动物保健产品上市需要完整的理论依据，疫苗混合使用在我国从未有过先例，此次打破常规将两种已注册上市疫苗混合在一起，您觉得符合免疫学理论吗？Bernd Grosse Liesner：中国是世界范围内混合注射上市较落后的几个国家之一，这是中国国内首次提出混合注射的概念。

疫苗混合使用，通过国家兽药监督局正式注册上市，在正式注册时要提交很多材料，中国农业部很慎重地衡量注册标准，所以花费时间更久。

我们提交的材料包含许多实验数据和原理，新的疫苗研发和注射方式改变都要向官方证明其符合免疫学理论。

除注册新品上市需要的数据之外，我们还进行了大规模的临床实验、实验室实验、田间实验以及国外养殖场的现场试验，我们所得到的数据反馈均表明这两种疫苗混合使用和单独使用的效果没有差异。

我们通过养殖企业之间交流和邀请养殖企业出国学习，让他们知道混合注射的操作方法。

洛阳晋莱柯猪圆环病毒疫苗成功上市赵晓【摘要】@@ 9月12日上午10时,由河南省科技厅主办、洛阳普莱柯生物工程有限公司承办的河南省"十一五"重大科技专项成果--猪圆环病毒疫苗研制成功新闻发布会在洛阳市举行.猪圆环病毒疫苗的研制成功结束了长期困扰我国养猪业猪圆环病毒病无疫苗可用的历史,解决了我国养猪业之急需,对农民增收、农业增效具重大战略意义.【期刊名称】《兽医导刊》【年(卷),期】2010(000)010【总页数】1页(P70)【作者】赵晓【作者单位】【正文语种】中文9月12日上午10时，由河南省科技厅主办、洛阳普莱柯生物工程有限公司承办的河南省“十一五”重大科技专项成果——猪圆环病毒疫苗研制成功新闻发布会在洛阳市举行。

猪圆环病毒疫苗的研制成功结束了长期困扰我国养猪业猪圆环病毒病无疫苗可用的历史，解决了我国养猪业之急需，对农民增收、农业增效具重大战略意义。

据介绍，猪圆环病毒疫苗是洛阳普莱柯生物工程有限公司承担实施的河南省“十一五”重大科技专项——“猪主要疫病新型诊断技术及新型疫苗研究与开发”项目取得的首个重大科技成果。

该项目由洛阳普莱柯生物工程有限公司与南京农业大学、美国SBC生物技术公司联合攻关，凭借良好的科研基础与技术储备，历时6年终于研制成功猪圆环病毒疫苗。

该疫苗拥有自主知识产权，并已取得中华人民共和国新兽药注册证书（国家级二类新兽药［（2010）新兽药证字25号］）及批准生产文号［兽药生字（2010）160021069］，并获农业部批准独家上市。

临床试验表明：该疫苗可显著改善猪场的生产性能与效益，各阶段成活率及饲料报酬提高，养殖周期缩短，疫苗投入产出比高，主要性能指标与进口疫苗相当，性价比明显高于进口疫苗。

2005年，洛阳普莱柯生物工程有限公司筹巨资启动猪圆环病毒疫苗研究项目，汇集张许科研究员、姜平教授等国内一流的生物制品专家组建了研发团队，建造高水平的绝对负压生物安全3级实验室和A级资质的实验动物房，引进国际先进的仪器设备，夜以继日地推进项目研究工作。

圆环疫苗悬浮培养？有专家指其炒作
佚名
【期刊名称】《北方牧业》
【年(卷),期】2012(000)016
【摘要】近年来,细胞悬浮培养技术逐渐被世人所知。

不少生产厂家以此作为疫苗卖点,宣称采用悬浮培养新工艺,较之转瓶培养抗原含量更高、效果更好。

不过不少专家指出,悬浮培养技术难点在于细胞驯化,
【总页数】1页(P11-11)
【正文语种】中文
【中图分类】S858.315.3
【相关文献】
1.新型圆环苗上市，养猪又现新希望--国内首个应用悬浮培养工艺生产的猪圆环病毒基因工程苗上市 [J], 李雨慈
2.2010中国养猪经济论坛之猪圆环病毒疫苗的应用——猪圆环病毒疫苗应用中的有关问题解答 [J], 无
3.悬浮培养技术在猪圆环疫苗生产中的应用 [J], 李少丽;邵攀峰;朱国坡;尹忠良
4.猪瘟活疫苗、猪圆环病毒2型基因工程疫苗和猪肺炎支原体灭活疫苗三种疫苗联合免疫效果的评估 [J], 张召;马红伟;魏烨;李均平;阮坤祥;王世旗
5.湖南专家完成猪圆环病毒突变株疫苗研究工作 [J], 刘志瑜
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