武平县部分鸡场禽白血病J亚群和A、B亚群抗体检测与分析

禽白血病J亚群病毒GP85蛋白单克隆抗体的制备与鉴定王彬;李晓齐;曹红;陈福勇;王永强;郑世军【摘要】为制备能够区分禽白血病A亚群和J亚群病毒的单克隆抗体,将J亚群病毒gp85基因构建到原核表达载体上,并在大肠杆菌BL21中表达携带His标签的禽白血病J亚群GP85融合蛋白,用复性纯化的融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c 小鼠.4次免疫后取免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,经过3次亚克隆后获得1株稳定分泌针对GP85蛋白的杂交瘤细胞株,命名为3B6.经间接ELISA 测定,小鼠腹水效价为6.4×105,亲和力解离常数(kD)为2.18×10-9,这株单抗的亚型为IgG1.通过Western Blot和IFA实验证实该株单抗是针对J亚群病毒蛋白GP85的特异性抗体.初步确定此株单克隆抗体的抗原识别区位于GP85蛋白N端的1-50位氨基酸.该株单抗的制备为ALV-J病毒抗原检测以及致病机理的研究奠定了基础.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2015(051)011【总页数】5页(P23-26,29)【关键词】禽白血病病毒;GP85;单克隆抗体【作者】王彬;李晓齐;曹红;陈福勇;王永强;郑世军【作者单位】中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193;中国农业大学动物医学院农业生物技术国家重点实验室,北京海淀100193【正文语种】中文【中图分类】S852.65+9.3J亚群禽白血病是由J亚群禽白血病病毒引起的一类以生长抑制、免疫抑制和骨髓细胞癌变为特征的传染性肿瘤性疾病[1]，主要引起肉鸡的骨髓细胞瘤[2]。

中国麻鸡中发现禽J亚群白血病近年来，禽J亚群白血病在中国麻鸡中发病率不断攀升，给养殖业带来了严重的威胁。

本文将简要介绍禽J亚群白血病的流行趋势和临床特征，并探讨有效的预防措施和治疗方案。

禽J亚群白血病是一种淋巴细胞性白血病，主要在鸡群中传播。

在中国麻鸡中发现该疾病，提示我们需要重视并加强防治。

近年来，禽J亚群白血病在中国麻鸡中的发病率呈上升趋势。

通过对历史病例的分析，发现该疾病的传播主要与以下因素有关：遗传因素：部分品种的鸡对禽J亚群白血病易感，这提示该疾病可能与遗传有关。

环境污染：养殖环境中的有害物质，如重金属、有机污染物等，可能增加鸡群感染的风险。

免疫抑制因素：如其他疾病感染、营养缺乏等，会导致鸡群免疫力下降，从而易感染禽J亚群白血病。

禽J亚群白血病主要表现为淋巴细胞性白血病，病鸡常见症状包括贫血、消瘦、消化不良、食欲减退等。

病鸡还可能表现出神经症状，如震颤、瘫痪等。

为有效控制禽J亚群白血病的传播，以下预防措施值得：选育抗病品种：针对易感品种的鸡，应加强选育工作，提高其抗病能力。

严格控制环境污染：养殖过程中应减少环境污染，定期清理鸡舍，保持环境卫生。

强化免疫接种：针对其他疾病疫苗的接种，应制定科学合理的免疫程序，以提高鸡群的整体免疫力。

加强饲养管理：保证饲料营养全面，避免营养缺乏；同时，要给鸡群提供充足的饮水，以降低感染风险。

目前尚未有针对禽J亚群白血病的特效治疗方法。

一旦发现疑似病例，应立即隔离饲养，避免疾病传播。

同时，可采用以下辅助治疗方法：给予抗病毒药物：可使用干扰素、利巴韦林等抗病毒药物，减轻病毒对鸡群的侵害。

免疫调节：通过补充免疫球蛋白、维生素等物质，提高鸡群免疫力，增强抵抗力。

对症治疗：针对病鸡出现的贫血、消化不良等症状，可采用相应的对症治疗方案，提高病鸡的生存率。

中国麻鸡中的禽J亚群白血病是一种严重的疾病，对养殖业造成严重危害。

本文分析了该疾病的流行趋势和临床特征，并探讨了有效的预防措施和治疗方案。

J亚群禽白血病病毒表位疫苗候选抗原表位的筛选与鉴定开题报告一、研究背景和意义白血病病毒感染已成为影响家禽产业经济发展和动物健康的重要因素。

其中，亚群禽白血病病毒（JSRV）是一种具有高度传染性和致死性的病毒，能引起肿瘤和其他严重的呼吸系统疾病。

近年来，利用免疫学技术开发疫苗已成为控制JSRV的有效方法之一。

疫苗候选抗原表位的筛选与鉴定是疫苗研发的重要步骤。

表位是指一个抗原分子中所包含的能够与免疫系统中相应受体结合的部分。

因此，通过筛选和鉴定JSRV的表位，可以开发新的JSRV疫苗，提高JSRV的预防和治疗效果。

二、研究内容和方案本研究旨在通过基因工程技术筛选和鉴定亚群禽白血病病毒表位，为JSRV疫苗的开发提供支持。

具体内容和方案如下：1.亚群禽白血病病毒基因克隆和表达采用PCR方法从JSRV的宿主细胞中扩增JSRV基因，将其克隆进入表达载体中，构建JSRV基因的表达系统。

利用大肠杆菌表达JSRV基因，纯化JSRV基因产品，获得JSRV抗原。

2. JSRV抗原的扩增与表位筛选利用JSRV基因克隆扩增及大肠杆菌表达技术，制备JSRV天冬氨酸酶抗原（JSRV-AP）和噬菌体外被膜蛋白抗原（JSRV-Cap）。

通过ELISA 和Western blot等方法筛选和鉴定JSRV抗原的表位，筛选出JSRV抗原的重要表位序列。

3.构建JSRV表位疫苗根据筛选出的JSRV抗原表位，采用基因工程技术构建JSRV表位疫苗。

将JSRV表位序列插入相应载体构建表位疫苗，通过体内和体外实验检测JSRV表位疫苗的免疫原性和保护效果。

三、预期结果和意义通过上述方案，预期可实现以下结果：1.成功克隆和表达JSRV基因，制备JSRV抗原。

2.筛选出JSRV抗原的重要表位序列。

3.构建JSRV表位疫苗，评估其免疫原性和保护效果。

本研究结果将为JSRV疫苗开发提供候选抗原表位和理论基础，有助于提高JSRV的预防和治疗效果，缓解家禽产业的JSRV流行造成的经济损失。

山东省种鸡场禽白血病流行病学调查文│邢林林 李玉杰 徐聪 姜秀云 陈静（山东省动物疫病预防与控制中心）李佳璇（青岛农业大学海都学院）禽白血病（Avian Leukosis）是由禽白血病病毒（ALV）引起的禽类的多种传染性肿瘤疾病的统称，在我国禽类养殖场中广泛流行，给家禽业造成了较大的经济损失。

根据其宿主范围以及各病毒之间的干扰情况，ALV分为A、B、C、D、E和J等亚群，其中常见的外源性病毒是ALV-A和ALV-B，ALV-J最早是在19世纪80年代后期，从英国的商品肉鸡中分离出来的，也是商品鸡群中最常分离到的病毒。

外源性ALV主要有两种传播方式：经蛋的垂直传播以及通过直接接触或间接接触的水平传播，在流行病学上垂直传播是禽白血病主要传播方式，并能产生免疫耐受，接着排毒并通过种蛋产生垂直传播。

自2008年以来，我国逐步建立了全国禽白血病净化项目，在《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020年）》中，将禽白血病列为重点净化疫病，经过多年的实施，ALV 发病率明显降低，ALV感染得到有效控制，J亚群尤为明显。

然而，Yawen Zhang等通过对吉林省、辽宁省、天津市、河北省、山东省、江苏省以及其他省份的采样发现，2018年以来山东8个养殖场均出现ALV感染。

本研究利用商品化的ALV抗原检测试剂盒，对山东省内7个种禽场的ALV进行流行病学调查，统计分析ALV的阳性率、感染程度等，探讨山东省ALV净化情况，为制定禽白血病的防治措施奠定基础。

一、材料与方法2019年12月至2020年1月，对山东省内7个种禽场进行血清及蛋清的随机抽检，抽样不小于以下方式计算数量，具体根据养殖场现况调整。

种鸡群抗体检测采样数量：采集血清。

生产公鸡存栏100只以下，100%采样；生产公鸡100只以上，按照发现疫情公式计算（置信度95%，预期流行率3%），将采样数量按照存栏比例分配到不同栋舍后随机抽样；其他鸡只按照发现疫情公式计算采样数量（置信度95%，预期流行率3%），将采样数量按照存栏比例分配到不同群体和栋舍后随机抽样。

禽白血病J亚群病毒特性的研究杨卉新;李冰【摘要】禽白血病引起以造血细胞恶性增生为主的肿瘤,引起养禽业较大的经济损失,其致病病毒一禽白血病病毒(ALV)的J亚群是目前危害鸡群的最主要亚群.gp85决定了ALV-J的亚群特异性,其基因具有极高变异,目前尚未有应用于临床的疫苗和防制药物.本文介绍了ALV的基因组结构、ALV-J亚群的致病特点和流行特点,以及ALV-J gp85的基因变异、单克隆抗体和疫苗的研究进展,为进一步深入研究ALV-J gp85的致病机理、研究开发诊断试剂盒和有效的预防疫苗提供了参考.【期刊名称】《现代畜牧兽医》【年(卷),期】2017(000)012【总页数】5页(P36-40)【关键词】ALV-J;gp85;流行病学;基因变异;预防【作者】杨卉新;李冰【作者单位】南京农业大学动物医学院,江苏南京210095;锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁锦州 121001【正文语种】中文【中图分类】S852.659.3禽白血病，又称禽白血病/肉瘤，临床上种类很多，分为淋巴细胞性白血病、髓细胞样白血病、结缔组织性肿瘤、成红细胞性白血病、成髓细胞白血病、骨硬化病等。

其中，对养禽业危害最大的是禽淋巴细胞性白血病。

从传播特点看，既有垂直传播，又有水平传播，但以垂直传播为主。

禽白血病是由反转录病毒科、正反转录病毒亚科、a反转录病毒属的禽白血病病毒（Avian leucosis/sarcoma virus，ALV）引起，以造血细胞恶性增生为主的良性及恶性肿瘤性疾病。

禽白血病增加了家禽死亡率，降低了生产性能，造成了养禽业巨大的经济损失。

ALV具有典型反转录病毒科C型肿瘤病毒的共同特征，病毒粒子近似球形，外部具有囊膜，其上有放射状突起，内部是电子致密的核心，ALV以出芽的方式从包膜中释放出来。

由于病毒囊膜含有丰富的脂类，因此对脂溶性溶剂、去污剂和甲醛敏感，可以抵抗一定的紫外线。

ALV病毒对热敏感，可以在-60℃以下保持数年感染力。

农业部办公厅关于开展种鸡场禽白血病等免疫抑制性疾病监测与流行病学调查工作的通知文章属性•【制定机关】农业部(已撤销)•【公布日期】2010.11.01•【文号】农办医[2010]91号•【施行日期】2010.11.01•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】农业管理综合规定正文农业部办公厅关于开展种鸡场禽白血病等免疫抑制性疾病监测与流行病学调查工作的通知（农办医[2010]91号）各省、自治区、直辖市及计划单列市畜牧兽医（农牧、农业、农村经济）厅（局、办），新疆生产建设兵团畜牧兽医局，中国动物疫病预防控制中心，山东农业大学、中国农业大学：为切实了解全国种鸡场禽白血病等免疫抑制性疾病流行状况，进一步加强种禽和SPF鸡的防疫管理，经研究，我部决定近期在全国范围开展种鸡场禽白血病等免疫抑制性疾病监测和流行病学调查工作。

现将有关事宜通知如下：一、监测时间2010年11月1日-2011年3月30日。

二、监测范围全国蛋种鸡祖代以上鸡场和SPF种鸡场，主要包括21家祖代蛋鸡场、5家曾祖代蛋鸡场和15家SPF鸡蛋生产单位，以及国家级地方鸡种基因库。

主要病种：禽白血病、禽网状内皮组织增殖症、鸡白痢、鸡传染性贫血病、禽呼肠弧病毒病等垂直传播的免疫抑制性疫病。

三、监测承担单位中国动物疫病预防控制中心牵头、山东农业大学和中国农业大学共同参与。

所有血清样品的鸡白痢抗体检测由中国农业大学承担，其他疫病检测由中国动物疫病预防控制中心和山东农业大学承担。

采样工作由中国动物疫病预防控制中心和山东农业大学承担，具体分工见附件1、2、3。

各有关省份协助做好监测和流行病学调查工作。

四、监测比例与数量（一）祖代蛋鸡场据统计全国祖代蛋鸡场21家，按照在产祖代蛋鸡存栏量的1.5%比例抽检，各场抽检血清和种蛋数量不足100份（枚）时，按照各自100份（枚）抽取，抽检样品数见附件1。

其中血清样品检测禽白血病J亚型抗体（ALV-J亚群-Ab）、禽白血病A/B亚群抗体（A/B亚群-Ab）、禽网状内皮组织增殖症病毒抗体（REV-Ab）和鸡白痢抗体（SP-Ab）。

禽白血病病毒（A亚群和B亚群）抗体检测酶联免疫吸附法1. 目的范围检测鸡血清中禽白血病病毒（A亚群和B亚群）抗体，为禽白血病综合防控提供依据和参考。

适用于鸡血清中禽白血病病毒（A亚群和B亚群）抗体的检测。

2.依据《禽白血病诊断技术》（GB/T 26436-2010）;禽白血病病毒抗体检测试剂盒说明书（美国IDEXX公司）。

3.检测原理将病毒抗原包被在96孔酶联免疫反应板上，加入被检样品后，如样品中含禽白血病病毒（A亚群和B亚群）的抗体，就会与病毒抗原结合形成抗原抗体复合物。

加入洗板液后，洗掉没有反应结合的物质。

在孔中加入可与鸡禽白血病病毒（A亚群和B亚群）的抗体结合的酶标二抗，通过洗板后，将没有结合的酶标二抗洗掉。

加入底物后，通过孵育显色，显色强度与被检样品中禽白血病病毒抗体（A亚群和B亚群）含量正相关。

4.仪器设备4.1 量程为100μL的单道移液器和300μL的八道或十二道移液器；4.2 酶标仪；4.3 自动或手动洗板系统；4.4 稀释用96孔板；4.5 一次性移液器吸头；4.6 1000mL量筒；4.7 吸水纸。

5.试剂和样品5.1 试剂盒组成5.1.1 酶标板：ALV抗原包被板 5块（96孔/块）5.1.2 酶标抗体：辣根过氧化物酶标记的（羊抗）鸡抗体 1瓶（50mL）5.1.3 阳性对照：稀释的鸡抗ALV抗体，叠氮钠防腐 1瓶（1.9mL）5.1.4 阴性对照：稀释的鸡血清，不与ALV反应，叠氮钠防腐 1瓶（1.9mL）5.1.5 样品稀释缓冲液，叠氮钠防腐 1瓶（235mL）5.1.6 TMB底物溶液 1瓶（60mL）5.1.7 终止液 1瓶（60mL）5.2 纯水或超纯水5.3 样品准备：检测前用样品稀释液将被检样品进行500倍稀释（如：1μL的样品用样品稀释液稀释到500μL）。

6.操作步骤使用前所有试剂应恢复至室温（20~25℃），将其振摇混匀后再进行使用。

6.1 取出酶标板并标记好被检样品的位置。

禽白血病病毒J亚群(ALV-J)的攻毒试验成子强;赵振华;张利;高娃【期刊名称】《中国兽医学报》【年(卷),期】2004(24)3【摘要】将禽白血病病毒 J亚群 (AL V- J)内蒙株 NM876 1和 NM9996人工接种于 1日龄爱维茵肉种鸡 ,通过眼观、病理组织学检查观察了攻毒鸡的病理学特征 ;通过 PCR和 EL ISA技术检测了病毒感染率、抗体变化规律以及病毒和抗体的相关性。

结果显示 ,攻毒鸡从第 3周开始即可检出病毒 ,NM876 1株和 NM9996株病毒感染率分别为 71.4 %和6 4 .3% ;从第 5周开始 ,出现较明显的病理学变化 ,病变特征以骨髓、肝脏、心脏、脾、卵巢等组织内髓细胞增生为主 ,而法氏囊、脑、坐骨神经无变化 ;攻毒鸡抗体消长变化有一定的规律 ,一般在 7～ 8周龄和 18～ 2 0周龄时分别出现 1次高峰 ,而在 4～ 6周龄、10周龄和 2 3周龄分别出现 1次低谷 ,提示鸡场进行 EL ISA检测时要避开这一时期 ;攻毒鸡产生耐受性病毒血症 ,即病毒阳性而抗体阴性 (V+A- )的比例较高 (7/14 ,9/14 )。

通过以上的研究证明 ,AL V- J内蒙株疾病模型复制成功 ,NM876 1。

【总页数】4页(P219-222)【关键词】禽白血病病毒;J亚群;ALV-J;感染率;抗体;病理学特征;攻毒试验【作者】成子强;赵振华;张利;高娃【作者单位】山东农业大学动物科技学院;内蒙古农业大学动物科学与医学学院【正文语种】中文【中图分类】S852.65【相关文献】1.禽白血病病毒J亚群(ALV-J)的血清学调查及PCR诊断 [J], 成子强;赵振华;郝永清;赵心力;哈斯阿古拉2.禽白血病病毒J亚群(ALV-J)免疫抑制特性研究 [J], 张利;刘青;王晓伟;王峰;陈洪博;成子强3.禽白血病病毒J亚群(ALV-J)基因表达与抗原定位的研究 [J], 成子强;刘思当;张利;赵振华4.从病鸡肿瘤组织中同时检测出网状内皮组织增生症病毒(REV)和J亚群禽白血病病毒(ALV-J) [J], 陆桂平;陆熹5.J亚群禽白血病病毒(ALV-J)ELISA检测方法的建立 [J], 叶建强;秦爱建;邵红霞;金文杰;刘岳龙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

B亚群禽白血病病毒单克隆抗体的筛选及应用中期报
告
本报告旨在介绍B亚群禽白血病病毒单克隆抗体的筛选及应用的中期进展情况。

在该研究中，我们旨在筛选出能够特异性识别B亚群禽白血病病毒的单克隆抗体，并进一步探究其在疫情防控和病毒学研究方面的应用潜力。

在研究的初期阶段，我们首先针对B亚群禽白血病病毒感染的细胞株和原代细胞进行了抗原制备和动物免疫。

通过ELISA筛选，我们获得了一批阳性克隆细胞并进行单克隆化。

进一步的Western blot和间接免疫荧光实验表明，这些单克隆抗体具有良好的特异性和亲和力。

接下来，我们对这些单克隆抗体进行了进一步的体外和体内实验验证。

在体外实验中，我们使用免疫印迹和免疫沉淀等技术确认了这些单克隆抗体对于B亚群禽白血病病毒各个蛋白的识别能力，并进一步鉴定了它们与其他禽病毒的交叉反应性。

在体内实验中，我们进一步探究了这些单克隆抗体在禽体内的应用潜力，研究表明这些抗体可通过免疫印迹和免疫荧光技术识别和定位感染B亚群禽白血病病毒的细胞和组织。

结论：本研究成功地筛选出了对B亚群禽白血病病毒特异及高亲和力的单克隆抗体，并初步验证了这些抗体在病毒学研究和疫情防控等领域的应用潜力。

我们将进一步进行抗体特异性和亲和力优化，并完善相关应用实验。

A、B、J亚群禽白血病病毒混合感染的鉴定及gp85基因序列分析窦俊峰;汪最;李丽;卢琴;金鑫鑫;凌小淳;罗青平;翟新国【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2024(51)1【摘要】【目的】了解湖北地区禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)亚群之间混合感染及其gp85基因遗传变异情况,为进一步研究ALV混合感染的流行病学提供参考。

【方法】对来自湖北宜昌疑似感染ALV的一只病死鸡进行病理剖检,无菌采集病变组织接种DF-1细胞进行病毒分离,通过PCR、ELISA及间接免疫荧光试验(IFA)等方法进行亚群鉴定,进一步对分离株gp85基因的相似性和变异情况进行分析。

【结果】剖检结果可见病死鸡肾脏、脾脏肿大,肺脏出血,表面可见灰白色肿瘤结节;组织匀浆接种DF-1细胞后,ELISA检测发现细胞上清P27抗原呈阳性;IFA检测发现,感染细胞里有特异性绿色荧光;PCR鉴定能同时扩增出A(692 bp)、B(847 bp)和J(545 bp)亚群的特异性条带。

鉴定结果表明,从该病死鸡中分离到A、B和J亚群ALV毒株,分别命名为HBYC2022-A、HBYC2022-B和HBYC2022-J。

分离株gp85基因核苷酸相似性分析显示,HBYC2022-A与江苏株JS-A1201相似性最高,为99.6%;HBYC2022-B与江苏株JS-B1204相似性最高,为99.7%;而HBYC2022-J与黑龙江株PK19FA01、广西株GX20YL12 J及安徽株AHaq02相似性均为100%。

此外,分离株gp85基因高突变区域(hr1、hr2)氨基酸序列并未出现特殊点突变。

【结论】鸡群存在A、B和J不同亚群ALV的混合感染情况,提示国内养禽场需提高警惕并加强针对ALV各亚群的流行病学调查。

【总页数】10页(P302-311)【作者】窦俊峰;汪最;李丽;卢琴;金鑫鑫;凌小淳;罗青平;翟新国【作者单位】河北工程大学生命科学与食品工程学院动物医学系;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所;湖北洪山实验室【正文语种】中文【中图分类】S852.65【相关文献】1.鸡内源性类J亚群禽白血病病毒gp85基因的序列分析2.A亚群禽白血病病毒QC6281株的分离与gp85基因序列分析3.J亚群禽白血病病毒安徽分离株的鉴定及其gp85基因序列分析4.一株J亚型禽白血病病毒的分离鉴定及其gp85基因的序列分析5.三株J亚群禽白血病病毒的分离及其gp85基因序列分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

种鸡场ELISA数据分析浅析作者：薛晓阳来源：《当代畜禽养殖业》 2018年第4期ELISA检测已成为种鸡场评估鸡群健康状况的一种常用手段，主要用于垂直传播性疾病感染水平、疫苗免疫后效果的评价，以及雏鸡产品质量的评估等。

目前常用试剂为IDEXX产品，但在检测过程中会对数据产生质疑，故对此进行简单的分析，也希望与同行进行交流。

1 白血病检测简称ALV，属于肿瘤性疾病，可以垂直和水平传播，ALV-Ag检测采用双抗体捕获法检测抗原，也就是我们常说的P27抗原检测，为IDEXX家禽产品ELI检测唯一的抗原检测方法。

样本为蛋清、肛拭子等，该检测阳性不能区分是否为内源性白血病。

血清检测方面主要包括ALV-J亚型抗体及ALV-A/B亚型，目前通常日龄较大的鸡群会有抗体阳性检出，但ALV-Ag检测多为阴性，表明鸡群还在安全状态。

很多公司现在把血清学检测作为一个参考，重点是把P27抗原结果和抗凝全血病原分离结果作为最终判定。

目前常用的病原分离细胞为DF-1 细胞，病原分离也是公认的白血病检测标准。

2 网状内皮组织增生症抗体检测简称REV，与季节性有很大关系，和蚊虫传播相关。

现在国内报道会有抗体阳性检出的结论，但抗体阳性率普遍较低，维持在3%以内。

验证是否存在野毒感染，也常用到病毒分离的方法，一般会用到DF-1细胞，样品是抗凝全血，最终用PCR或免疫荧光手段进行鉴定。

阳性场区要加强种鸡管理，注意病毒性疾病的发生，同时也要关注种鸡下一代的抗体水平。

REV在大日龄鸡中会有检出，但鸡群不会有临床症状。

目前普遍认为10%以内为安全范围，但是小日龄阳性率较高可能会出现肿瘤疾病的发生，可以跟踪检测抗体阳性率及抗体滴度变化做动态观测。

3 滑液囊支原体抗体检测简称MS，为眼下困扰种鸡养殖的主要疾病之一。

IDEXX公司认为，无灭活苗免疫转阳前6周为感染日龄，而且在MS灭活苗免疫后抗体滴度超过6000，就存在野毒感染。

现在普遍认为抗体滴度高于6000，表明关节腔内已经感染，再用药物防控效果不会很好。

应用荧光定量RT-PCR检测J亚群禽白血病病毒屈素洁;邹联斌;陈芳芳;张步娴;胡杰;莫胜兰;施开创;李军;尹彦文【摘要】针对J亚群禽白血病病毒（ALV-J）基因序列保守区域设计一对特异性引物和一条特异性探针，通过构建重组阳性标准质粒作为阳性标准品，建立了检测ALV-J核酸的荧光定量PCR方法。

优化反应体系和条件后进行特异性、敏感性、重复性试验。

结果显示，该检测方法特异性强，与其它禽源病毒如A亚群禽白血病病毒（ALV-A）、B亚群禽白血病病毒（ALV-B）、新城疫病毒（ NDV）、禽流感病毒（AIV）、鸡传染性贫血病毒（CIAV）和马立克病病毒（MDV）均不发生交叉反应；该方法可检测到3.2×102拷贝/μL的病毒核酸，与常规RT-PCR相比，敏感性高100倍；重复性试验的变异系数小于2%。

研究结果表明，建立的Real-time RT-PCR 检测方法特异性强、灵敏度高、可重复性好，可用于ALV-J的定量检测。

%A pair of specific primers and a specific probe was designed according to the ALV-J conserved gene sequence and a plasmid containing the target gene was constructed as a standard control. A real-time PCR assay was developed for detection of ALV-J. After optimization of the reaction conditions,the assay was tested for its specificity,sensitiv-ity and repeatability. Result showed that the assay was highly specific and there were no cross-reactions with other avian pathogens including ALV-A,ALV-B,NDV,AIV,CIAV and MDV. The assay had a detection limit of3.2×102 cop-ies/μL viral RNA,100 times more sensitive than the conventional PCR,and its coefficient of variations was less than 2%in the reproducible test. The results indicated that this real-time RT-PCR assaywas of high specificity,sensitivity and reproducibility,and could be used for the quantitative detection of ALV-J.【期刊名称】《中国动物检疫》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】5页(P56-59,63)【关键词】J亚群禽白血病病毒;Taqman探针;荧光定量PCR【作者】屈素洁;邹联斌;陈芳芳;张步娴;胡杰;莫胜兰;施开创;李军;尹彦文【作者单位】广西壮族自治区动物疫病预防控制中心，广西南宁 530001;广西壮族自治区动物疫病预防控制中心，广西南宁 530001;广西壮族自治区动物疫病预防控制中心，广西南宁 530001;广西壮族自治区动物疫病预防控制中心，广西南宁 530001;广西壮族自治区动物疫病预防控制中心，广西南宁 530001;广西壮族自治区动物疫病预防控制中心，广西南宁 530001;广西壮族自治区动物疫病预防控制中心，广西南宁 530001;广西壮族自治区动物疫病预防控制中心，广西南宁530001;广西壮族自治区动物疫病预防控制中心，广西南宁 530001【正文语种】中文【中图分类】S8562.65+7禽白血病（avian leukosis，AL）是由禽白血病病毒（ALV）和禽肉瘤病病毒群病毒引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称[1]。

J亚群禽白血病病毒JS09GY3株感染特性及感染鸡法氏囊转录组学分析的开题报告
题目：J亚群禽白血病病毒JS09GY3株感染特性及感染鸡法氏囊转
录组学分析
研究背景：
禽白血病是一种由禽白血病病毒引起的疾病，严重危害着家禽的健
康和养殖业的发展。

禽白血病病毒是一类复杂的细胞因子，具有高度的
变异性，不同亚群间的病毒基因组序列相差很大。

目前已发现的禽白血
病病毒主要分为亚群A、B、C、D、E、J等亚群。

其中，J亚群禽白血病病毒的感染范围、致病性及分布情况引起了广泛关注。

因此，对J亚群禽白血病病毒的感染特性及感染机制进行深入研究具有重要意义。

研究内容：
本研究选取J亚群禽白血病病毒中的JS09GY3株进行研究，通过病
毒复制指标的检测，分析其在不同细胞系中的生长特性、复制效率以及
敏感性。

同时，将病毒接种于鸡法氏囊，观察其对囊上皮细胞、囊内细
胞等组织结构的影响。

在感染鸡法氏囊的同时，对样本进行转录组测序，分析感染过程中基因表达的变化，从而深入了解特定亚群禽白血病病毒
的致病机制和免疫防御反应。

研究意义：
本研究将有助于深入了解J亚群禽白血病病毒的感染特性、传播规
律及致病机制，为预防和控制禽白血病提供重要的理论依据。

此外，本
研究还将有助于挖掘感染期间的关键基因及其调节网络，从而为开发新
型的疫苗和治疗药物提供理论基础。

J亚群鸡白血病是一种由J亚群禽白血病病毒引起的鸡的疾病，这种病毒主要影响鸡群的免疫系统，导致鸡的生产性能下降，甚至死亡。

下面是对J亚群鸡白血病的详细论述。

一、病原学
J亚群禽白血病病毒属于反转录病毒科，是一种具有复杂生命周期的病毒。

这种病毒主要存在于病鸡的血液、内脏器官、泄殖腔和卵清中，通过水平传播和垂直传播方式在鸡群中扩散。

二、临床症状
J亚群鸡白血病的主要临床症状包括贫血、消瘦、腹泻、产蛋量下降和免疫抑制。

受感染的鸡还可能出现神经症状，如共济失调和瘫痪。

随着病情的恶化，鸡的死亡率会逐渐上升。

三、病理变化
J亚群鸡白血病的病理变化主要表现为免疫器官的损害，如胸腺、脾脏和法氏囊的萎缩和淋巴瘤病变。

此外，受感染的鸡还可能出现骨髓细胞瘤、成红细胞瘤和成髓细胞瘤等肿瘤。

四、诊断和防治
J亚群鸡白血病的诊断主要依据临床症状、病理变化和病原学检测。

为了预防和控制J 亚群鸡白血病，首先要加强鸡群的饲养管理，提高鸡的免疫力。

其次，要定期对鸡群进行检测，及时发现和淘汰病鸡。

最后，可以使用疫苗进行免疫预防。

总之，J亚群鸡白血病是一种严重的禽类疾病，对养鸡业造成了巨大的经济损失。

为了降低这种疾病对养鸡业的影响，必须采取有效的预防和控制措施。

J亚群禽白血病病毒gp85重组亚单位疫苗对鸡群的
免疫保护作用的开题报告
一、课题背景和研究意义
禽白血病是一种由J亚群禽白血病病毒（J subgroup avian leukosis virus，JALV）引起的急性、慢性、原生质和淋巴瘤性疾病，对家禽业造成了极大的经济损失。

目前，防控禽白血病的主要手段是疫苗预防，其中JALV gp85是禽白血病病毒的重要外膜糖蛋白。

因此，通过利用JALV gp85研制禽白血病病毒重组亚单位疫苗，对鸡群免疫，提高抗病能力，具有重要的研究意义和应用价值。

二、研究内容和方案
本研究旨在构建JALV gp85重组亚单位疫苗，通过实验分析其对鸡群的免疫保护作用，为禽白血病的防控提供理论和实践依据。

本研究中，首先利用PCR技术从JALV RNA提取gp85基因，构建重组质粒并进行测序检验。

随后，将重组质粒转染至CHO细胞株中，通过Western blot检测重组亚单位疫苗表达情况。

最后，将重组亚单位疫苗接种于鸡群中，通过ELISA检测其体液免疫应答和病毒感染保护率，探讨其在禽白血病的预防中的应用前景。

三、预期结果及意义
预计本研究将成功构建JALV gp85重组亚单位疫苗，并证实其对鸡群的免疫保护作用，从而在禽白血病的预防和治疗方面有重要的应用前景。

本研究结果可为禽类免疫疫苗的设计和研发提供经验和理论基础。