药物分析总结

药物分析总结

药物分析学是⼀门研究药品及各种制剂的组成、理化性质、真伪鉴别、纯度检查及其有效成分的含量测定等的⼀门学科。我们在进⾏药物分析⽅⾯的复习时要注意以下⼏点，略述⼀下。在药物分析的基本知识⽅⾯的要求：对于药物分析⼯作者来说，在熟练掌握药物分析原理与操作技能的基础上，正确理解药典和药典中各项条⽂规定。例如药典的内容包括那些⽅⾯，各个条⽂的注意点，附录中规定的⽚剂通则中规定的重量差异是多少，对崩解时限有何规定，⾼效液相⾊谱中的⽤于反相层析的常⽤固定相，药典中标准品，对照品与试药的区别及选⽤原则；正⽂部分的主要内容，熟悉药品质量制定的原则和内容，凡例中内容，例如药典采⽤的计理单位，符号与专门术语，如溶解度中的⼀些概念，药典中法定计量单位应如何表⽰；黏度如何表⽰；压⼒如何表⽰；什么是恒重；原料药含量百分数如规定100%以上时，应如何理解，等等都要熟练掌握，以及中国药典和其他各国药典的差异如美国药典，美国国家处⽅集，英国药典，⽇本药局⽅等等以及有代表性的外国药典的基本内容和特点。熟悉误差理论，掌握常⽤的统计学处理⽅法和分析效能的评价指标（包括精密度、准确度、检测限、定量限、选择性、线性及范围以及耐⽤性）以及它们的意义。掌握药品质量标准的主要内容和要求。

杂质是药物中存在的⽆治疗作⽤或影响药物的稳定性和疗效，甚⾄对⼈们健康有害的物质。杂质按来源分为⼀般杂质和特殊杂质。在药物的⼀般杂质项⽬包括氯化物、硫酸盐、铁盐、重⾦属、砷盐、有机溶剂残留量、⼲燥失重等等，重点掌握砷盐、重⾦属检查⽅法的内容，操作过程中的注意点，⼲燥失重测定法的热分析法具体⽅法及应⽤范围。对⼀些公式的掌握，如⽐旋度的公式、标⽰量的公式、滴定度的公式等等。在药物制剂分析⽅⾯，我们重点掌握⽚剂、注射剂、滴眼剂的稳定性考查，以及它们的检查项⽬。掌握药物制剂分析的特点，掌握含量均匀度和溶出度检查法，掌握apc复⽅制剂分析法和乳酸格林注射液的含量测定法。

第⼆部分为各类药物分析：熟悉中国药典（2000版）收载的化学合成药和结构已经明确的天然药物，熟悉常⽤的鉴别反应和特殊杂质的检查⽅法；掌握主要含量测定⽅法。醇及其酯类中的杂质较多，如⼭梨醇的重要杂质是还原糖和总糖，苯甲醇的杂质是苯甲醛，盐酸苯海索的特殊杂质是吡啶苯丙酮，掌握盐酸苯海索⽚的所⽤的阴离⼦表⾯活性剂滴定法的原理，⽅法和条件。对巴⽐妥类药物分析要掌握常⽤的鉴别反应，掌握酸量法、银量法和紫外分光光度法等；对芳酸及其酯类药物的分析，掌握药物的鉴别法，阿司匹林、对氨基⽔杨酸钠和氯贝丁酯中特殊杂质及其检查⽅法，掌握酸碱滴定法、双相滴定法。有机含氮类药物的芳胺类药物的鉴别特征试验如重氮化——偶合反应，三氯化铁，重⾦属离⼦反应，杂环类药物的分析如吡啶类药物和⽣物碱类药物的特征鉴别反应，掌握容量分析法，⽐⾊分析法。对“三素”类药物的分析：1.维⽣素类药物va，ve ，vb，vc的特征鉴别反应以及各类的定量⽅法；2.甾体激素类药物：掌握本类药物的分类及基本结构以及可供分析的官能团，鉴别反应，掌握⽐⾊分析法（四氮唑⽐⾊法，异烟肼法，ko-ber反应-铁粉试剂法）3.抗⽣素类药物：掌握b-内酰胺类抗⽣素的化学结构特点与碘量法，酸碱滴定法和uv法，掌握四环素类药物鉴别反应，掌握氨基糖苷类药物的鉴别，并区别链霉素与庆⼤霉素鉴别法的异同点。抗⽣素的效价测定⽅法有哪⼏点。

第三部分是各种分析⽅法：要掌握各类分析⽅法的基本理论和基本知识并掌握它们在各类药品检定中的应⽤。如重量分析，容量分析：酸碱滴定法要求掌握酸碱的基本理论，酸碱的ph值的计算，酸碱滴定中常⽤的指⽰剂的名称；沉淀滴定法要求掌握铬酸钾法，铁铵矾法和吸附指⽰剂法的测定对象，测定条件及常⽤的指⽰剂；络合滴定法要求掌握基本原理及其影响因素。氧瓶燃烧法，脂肪与脂肪油的检验⽅法，黏度测定法，折光率测定法，旋光度测定法，紫外-可见分光光度法，荧光分析法，红外分光光度法，薄层⾊谱法，⽓相⾊谱法，⾼效液相⾊谱法，电泳法，ph值测定法，电位法与永停滴定法，⾮⽔滴定法等等。

吡啶类药物

异烟肼的鉴别试验：还原反应。异烟肼的酰肼基有还原性，可还原硝酸银中的Ag+成单质银，肼基则被氧化⽣成氮⽓。加氨制硝酸银试液1ml，即产⽣⽓泡与⿊⾊浑浊，并在试管壁上⽣成银镜。

缩合反应。异烟肼的酰肼基可以和含羰基的试剂（如芳醛）发⽣缩合反应。异烟肼与⾹草醛反应，⽣成异烟腙，测定熔点供鉴别。

沉淀反应。异烟肼分⼦中的吡啶环具有碱性，可以和重⾦属盐类（如氯化汞、硫酸铜、碘化铋钾）⼄基苦味酸形成沉淀。异烟肼和氯化汞可⽣成⽩⾊沉淀。和硫酸铜-枸橼酸试液反应，先产⽣绿⾊沉淀，加热，沉淀变为红棕⾊。

尼克刹⽶的鉴别：戊烯⼆醛反应。属吡啶环的开环反应。尼克刹⽶分⼦中的吡啶环与溴化氰反应，开环形

与苯胺缩合形成黄⾊⾄棕黄⾊产物，与联苯胺紫外分光光度法形成淡红⾄红⾊产物。

⽔解反应。尼克刹⽶分⼦中的酰胺基在碱性条件下可⽔解，加氢氧化钠试液，加热，即有⼆⼄胺臭味逸出，能使湿润的红⾊⽯蕊试纸变成蓝⾊。

沉淀反应。尼克刹⽶分⼦中的吡啶环也可以和重⾦属离⼦反应。尼克刹⽶和硫酸铜及硫氰酸铵作⽤，⽣成草绿⾊配位化合物的沉淀。

异烟肼中游离肼的检查：薄层⾊谱法。肼的检测限为0.1µg，控制限量为0.02%.

异烟肼的含量测定：异烟肼分⼦中的酰肼基具有还原性，可采⽤氧化还原滴定法测定其含量。溴酸钾法。甲基橙作指⽰剂，溴酸钾滴定⽌粉红⾊消失。每1ml的溴酸钾滴定液（0.1667mol/l）相当于3.429mg的C6H7N3O。异烟肼的⽚剂、注射剂均采⽤溴酸钾法测定含量。

还可使⽤溴量法、剩余碘量法测定含量，也可⽤⾮⽔溶液滴定法。

尼克刹⽶含量测定：⾮⽔溶液滴定法。溶剂：冰醋酸，指⽰剂：结晶紫，滴定液：⾼氯酸。⾄溶液蓝绿⾊。每1ml⾼氯酸滴定液（0.1mol/l）相当于17.82mg的C10H14N2O。

紫外分光光度法。测定尼克刹⽶注射剂含量。注射剂的溶剂对⾮⽔溶液滴定法有⼲扰，所以采⽤本法。使⽤0.5%硫酸溶液溶解样品，是为了使药物呈离解状态，易溶于⽔。

⾮⽔滴定法：在⾮⽔溶剂（有机溶剂与不含⽔的⽆机溶剂）中进⾏滴定分析的⽅法。

⾮⽔滴定法包括⾮⽔碱量法和⾮⽔酸量法。

在⾮⽔溶剂中滴定，不仅能增⼤有机药物的溶解度，还能改变药物的化学性质（如药物的酸碱性及其强度），使原来在⽔中不能进⾏完全的滴定反应能够顺利进⾏，从⽽扩⼤了酸碱滴定分析的应⽤范围。

⾮⽔滴定法

⼀、碱的滴定

（⼀）溶剂：酸性溶剂，冰醋酸

（⼆）标准溶液：基准物质HClO4 冰醋酸溶液，邻苯⼆甲酸氢钾

（三）指⽰剂：结晶紫、喹哪啶红、a－萘酚苯甲醇、电位法

（四）测定药物：碱性基团药物、胺类、氨基酸类、含氮杂环、有机碱盐弱酸盐

有机弱碱：胺类、⽣物碱类咖啡因

有机酸碱⾦属盐：枸橼酸钾

有机碱的氢卤酸盐：盐酸⿇黄碱

有机碱的有机酸盐：扑尔敏

⼆、酸的滴定

（⼀）溶剂：1、弱酸、极弱酸⼄⼆胺、DMF

2、不太弱羧酸醇类，⼄醇

3、混合酸甲基异丁酮，区分性溶剂

甲醇－苯混合溶剂

溴酚蓝：黄蓝（碱）

偶氮紫：红蓝（碱）

百⾥酚蓝：黄蓝（碱）

（四）测定的药物：酸性基团的药物

羧酸类：苯甲酸

酚类：苯酚

磺酰胺类：磺胺嘧啶

旋光度测定法的应⽤主要包括以下⼏个⽅⾯：1．药物鉴别

具有旋光性的药物，在“性状”项下，⼀般都收载有“⽐旋度”的检验项⽬。测定⽐旋度值可⽤来鉴别药物或判断药物的纯杂程度。《中国药典》要求测定⽐旋度的药物很多，如肾上腺素、硫酸奎宁、葡萄糖、丁溴东莨菪碱、头孢噻吩钠等。2．杂质检查

具有光学异构体的药物，⼀般具有相同的理化性质，但其旋光性能不同，⼀般有左旋体、右旋体和消旋体之分，通过测定药物中杂质的旋光度，可以对药物的纯度进⾏检查。3．含量测定

具有旋光性的药物，特别是在⽆其他更好的⽅法测定其含量时，可采⽤旋光度法测定。《中国药典》采⽤旋光度法测定含量的药物有葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液、右旋糖酐氯化钠注射液、右旋糖酐葡萄糖注射液等。

分析⽅法的验证1.精密度：⾄少9次测定结果进⾏评价，⽤相对标准偏差（RSD）和可信限报告。

2.准确度：由回收率体现，⾄少9次测定结果进⾏评价，可制备3个不同浓度样品，各测3次。

3.专属性：⼀种⽅法仅对⼀种分析成分产⽣唯⼀信号

鉴别反应、杂质检查、含量测定⽅法，均应考察其专属性，如⽅法不够专属，应采⽤多个⽅法补充。4.检测限（%、ppm或ppb）：试样中被测物能被测出的最低量，不必定量测定，只需指出⾼于或低于该规定浓度即可。

常⽤⽅法：

①⽬视法；

②信噪⽐法（3：1）；

③附上测试图谱

5.定量限：样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具⼀定准确度和精密度。进⾏杂质和降解产物定量测定⽅法研究时，应确定定量限。常以信噪⽐为10：1时相应浓度或注⼊仪器的量来确定。6.线性：实验结果与试样中被测物浓度直接呈正⽐关系的程度。要求列出回归⽅程、相关系数和线性图。

7.范围：能达到⼀定精密度、准确度和线性的条件下，实验⽅法适⽤的⾼低限浓度区间。

8.耐⽤性：在条件稍有变动时，测定结果不受影响的承受程度。

变动因素：溶液的稳定性、提取次数、时间

酸碱滴定法在药品检验中的应⽤⼗分⼴泛。常⽤的滴定⽅式有直接滴定法、间接滴定法等。1.直接滴定法

2.间接滴定法

若药物难溶于⽔或有其他原因不宜采⽤直接滴定法时，可采⽤间接法测定。间接滴定法有剩余滴定法、置换滴定法等。如阿司匹林⽚的含量测定。

沉淀法的基本原理主要内容包括以下⼏点：

沉淀法是利⽤沉淀反应，将被测组分转化为难溶物，以沉淀形式从溶液中分离出来，并转化为称量形式，最后称定其重量进⾏测定的⽅法。沉淀法是重量分析法中最常⽤的⼀种分析⽅法。

沉淀法的操作步骤是：取样⼀溶解⼀加沉淀剂使其沉淀⼀过滤⼀洗涤⼀⼲燥⾄恒重⼀称量⼀计算。

为了确保分析结果的准确，沉淀法对沉淀形式和称量形式都有⼀定的要求。在试液中加⼊适当的沉淀剂，使被测组分沉淀出来，这样获得的沉淀称为沉淀形式。当沉淀形式经过滤、洗涤、烘⼲或灼烧后所得的物质形态，是最后供称量时物质的化学组成，故称为称量形式。沉淀形式与称量形式可以相同，也可以不同。1．对沉淀形式的要求

（1）沉淀的溶解度要⼩，以保证被测组分能沉淀完全。

（2）沉淀要纯净，不应带⼊沉淀剂和其他杂质。

（3）沉淀易于过滤和洗涤，以便于操作和提⾼沉淀的纯度。（4）沉淀易于转化为称量形式。2．对称量形式的要求

（1）称量形式应具有确定的化学组成，否则⽆法计算分析结果。

（2）称量形式应具有⾜够的化学稳定性。

（3）称量形式的分⼦量应尽可能⼤，这样可使称量的物质质量较⼤，从⽽减⼩称量误差，提⾼⽅法的准确度。

氧化还原滴定法是以氧化还原反应为基础的⼀类滴定⽅法。

氧化还原反应的实质是电⼦得失，物质得失电⼦的能⼒与其氧化还原电对的电位⾼低有关，电位越⾼，其氧化态越易得到电⼦，是较强的氧化剂；电位越低，则其还原态越易失去电⼦，是较强的还原剂。

氧化还原滴定法在药物分析中应⽤⼴泛，既可直接测定许多具有氧化性或还原性的物质，⼜可间接测定⼀些不具有氧化还原性的物质。

亚硝酸钠滴定法是利⽤亚硝酸钠滴定液在盐酸溶液中与芳伯氨基化合物发⽣重氮化反应，定量⽣成重氮盐，来测定药物含量的⽅法。其滴定反应如下：Ar-NH2+NaN02+2HCl→Ar-N2+C1-+NaCI+2H20