《血库操作规程》word版
- 格式：doc
- 大小：116.00 KB
- 文档页数：14
可编辑
精选模板
北川羌族自治县人民医院
血库标准操作规程
文件编号：BC-2-2013
编制：吕强
审核：施伟
批准：施伟
生效日期：2013年4月14日可编辑
精选模板 北川县人民医院血库作业指导书 文件编号： BC-2-2013
版本/修订号：BC/2
主题内容 目 录 生效日期：20130414
第 1页 共13页
目 录
序号 主 题 内 容 页 号
目录 1
1 ABO 血型鉴定（正定型）
1
2 Rh（抗D）血型鉴定
3 凝聚胺介质交叉配血
4 离心机操作标准操作程序
5 离心机维护保养操作程序
6 血库冰箱维护保养操作程序
7 移动紫外消毒车使用操作程序
8 电热恒温水浴箱操作规程
9
10
11
12
可编辑
精选模板 北川县人民医院血库作业指导书 文件编号： BC-2-2013
版本/修订号：BC/2
主题内容 ABO 血型鉴定（正定型） 生效日期：20130414
第2页 共13页
ABO 血型鉴定（正定型）
1、实验原理
根据红细胞上有或无A 抗原或（和）B 抗原，将血型分为A型、B型、AB型和O型四种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定A B O 血型。所谓正定型，是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原；所谓反定型，是用已知A红细胞B红细胞来测定血清中有无相应的抗A或（和）抗B。
2、使用的标本种类和收集方法
2.1、受检者5％红细胞悬液
红细胞悬液制备：采取受检者的红细胞，经盐水洗涤3次，取压积红细胞1滴加入生理盐水16滴（0.8ml）配成5％的红细胞悬液。
2.2、受检者血清
采取受检着静脉血2-3ml，置水浴箱中至完全凝固，3000转/分钟离心5分钟，分离上层血清备用。
2.3、标本接收
2.3.1、血型鉴定不接收临床送检标本（除外2.3.2规定内容）。
2.3.2、特殊急诊检验人员无法采血时，接收临床送检标本需登记采血护士姓名及送检护士姓名、并查对标本标签和检验单内容是否相符，如有不符可以拒收标本。
2.4、标本容器要求：洁净一次性塑料试管
3、使用的试剂
3.1、抗A 、抗B定型试剂（单克隆抗体）
3.1.1、批准文号：国药准字S10980059
3.1.2、生产厂家：上海血液生物医药有限公司
3.1.3、保存条件：2-8℃避光保存，有效期内使用。
2．5 ％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液
2.5.1、制备方法
分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞，经盐水洗涤3 次，经盐水洗涤3次，取压积红细胞1滴加入生理盐水16滴（0.8ml）配成5％的红细胞悬液。
2.5.2、保存条件：配制好的5％的红细胞悬液在试管上注明红细胞血型及配制时间，2-8℃避光保存，有效期3天。
4、仪器：
4.1、仪器型号：ＴＤＬ－５Ｃ型医用离心机
4.2、仪器厂家：北京菲恰尔医疗器械有限公司
4.3、许可证号：京药管械（试）字2001第2030436号 可编辑
精选模板 北川县人民医院血库作业指导书 文件编号： BC-2-2013
版本/修订号：BC/2
主题内容 ABO 血型鉴定（正定型）
生效日期：20130414
第3页 共13页
4.4、仪器使用具体要求见离心机使用维护程序。
5、操作步骤、报告结果
5.1、 正定型：取清洁试管2支作好标记，分别加入抗A（蓝色）和抗B（黄色）标准血清各2滴。每管加入被检者5％红细胞悬液各2滴，混匀，1000转/分钟离心一分钟或在室温放置1小时，轻轻摇匀，涂至载玻片上，用显微镜观察是否凝集。
5.2、反定型：取清洁试管2支作好标记。用滴管分别加入被检者血清各2滴，A和B型5％标准红细胞悬液各2滴。混合。立即以1000转/分钟离心1分钟，轻轻摇匀，涂至载玻片上，用显微镜观察是否凝集。
5.3、结果见下表：
抗A 抗B 血型 A细胞 B细胞
+ - A - +
- + B + -
- - O + +
+ + AB - -
注：（＋） 凝集（－） 不凝集
6、注意事项
6.1、标准血清质量应符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。如出现混浊或变色则不能使用。
6.2、试剂红细胞以3 个健康者同型新鲜红细胞混合，用生理盐水洗涤3 次，以除去存在于血清中的抗体及可溶性抗原。
6.3、试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。
6.4、操作方法应按规定，一般应先加血清， 然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。
6.5、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。
6.6、观察时应注意区别真假凝集。
6.7、判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。
7、临床意义
输血已成为临床上必不可少的治疗手段，输血必须输入A B O 同型血，如输入异型血，输入的红细胞可能迅速破坏，导致严重的溶血反应， 常常威胁生命甚至造成死亡。
8、方法的局限性：本方法不能检测出亚型。
可编辑
精选模板 北川县人民医院血库作业指导书 文件编号： BC-2-2013
版本/修订号：BC/2
主题内容 Rh（抗D）血型鉴定
生效日期：20130414
第4页 共13页
Rh（抗D）血型鉴定
1.原理：
Rh血型系统通过输血或妊娠可产生免疫性抗体，当遇有相应抗原，可致溶血反应或新生儿溶血病。若误诊误治，可导致患者残废或死亡。有条件者应作此检查。目前，一般应用5种分型血清来检查红细胞抗原。临床上，凡带有D抗原者，称为Rh阳性，不带D抗原者，称为Rh阴性。
2、使用的标本种类和收集方法
2.1、受检者2-3％红细胞悬液
红细胞悬液制备：采取受检者的红细胞，经盐水洗涤3次，取压积红细胞1滴加入生理盐水32滴（1.6ml）配成2-3％的红细胞悬液。
2.2、标本接收
2.2.1、血型鉴定不接收临床送检标本（除外2.3.2规定内容）。
2.2.2、特殊急诊检验人员无法采血时，接收临床送检标本需登记采血护士姓名及送检护士姓名、并查对标本标签和检验单内容是否相符，如有不符可以拒收标本。
2.3、标本容器要求：洁净一次性塑料试管
3. 仪器和试剂：
3.1、仪器型号：ＴＤＬ－５Ｃ型医用离心机
3.2、仪器厂家：北京菲恰尔医疗器械有限公司
3.3、许可证号：京药管械（试）字2001第2030436号
3.4、仪器使用具体要求见离心机使用维护程序
3.5、Rh抗血清本科使用上海血液生物医药有限公司生产的Rh抗血清试剂产品注册号:国食药监械(准)字2009第3400648号
4. 操作
4.1 取小试管2支,用蜡笔标记，分别加上述Rh抗血清1滴,再加2-3%受检者红细胞盐水悬液2滴,混匀。离心：3200-3400转/min,15--30秒
4.2结果判断:轻摇试管，观察结果：如受检管凝集,即表示阳性；受检管不凝集,即表示阴性。
5、注意事项
5.1、Rh抗血清质量应符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。如出现混浊或变色则不能使用。
5.2、。试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。
5.3、操作方法应按规定，一般应先加血清， 然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。
5.4、离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。
5.5、观察时应注意区别真假凝集。可编辑
精选模板 北川县人民医院血库作业指导书 文件编号： BC-2-2013
版本/修订号：BC/2
主题内容 Rh（抗D）血型鉴定
生效日期：20130414
第5页 共13页
5.6、判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。
5.7、当用未经洗涤的细胞作试验时，试样中的自身凝集和异常蛋白质可能引起假阳性结果。
可编辑
精选模板 北川县人民医院血库作业指导书 文件编号： BC-2-2013
版本/修订号：BC/2
主题内容 凝聚胺介质交叉配血
生效日期：20130414
第6页 共13页
凝聚胺介质交叉配血
原理
红细胞表面带有大量的负电荷，以避免其产生自发生聚集，当红细胞悬浮在电解质时，阳离子会被红细胞的负电荷所吸引，此时红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，而形成Zeta电位，决定红细胞之间的排斥作用。
凝聚胺技术首先利用低离子溶液（LIM），降低介质的离子强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。
其后，加入凝聚胺（溶液，它是一种高阶阳离子多聚物，肝素中和剂，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表面带有的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间的距离，使红细胞产生非特异性的凝聚。
最后，加入凝聚胺(Resuspending),Resuspending具有中和凝聚胺（Polybrene）的作用，使正常的红细胞非特异性凝集散开，试验旨果为阴性；但如果红细胞被相应的抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会散开，试验结果为阳性。
试剂本科使用珠海贝索生物技术有限公司生产的凝聚胺介质试剂产品注册号:国食药监械(准)字2004第3400397号
套组内容： 150T装量（BA-1003） 主要成份
1．LIM(Low Ionic Mediun) 1瓶×55ml 葡萄糖、EDTA（2Na）
2、Polybrene Solution 1瓶×7.5ml Polybrene、氯化钠
3.Resuspending Solution 1瓶×7.5ml 柠檬酸钠、葡萄糖
3、试验步骤
3.1取试管二支，标主次侧，主侧管加病人血清（血浆）2滴，加供血者3-5%红细胞悬液（洗涤或不洗涤均可）1滴，次侧管反之。
3.2各加LIM０．６５ml,混合均匀后,再各加Polybrene2滴,并混合均匀.
3.3用血库离心机3400转/分离心10秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约液体.
3.4轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做.
3.5最后加入Resuspending2滴,轻轻转动试管混合并涂片,显微镜下观察结果：在30秒-1分钟内凝集散开,代表是由Polybrene引起的非特异性聚集,配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。
3.6。配学相合后，认真填写配血纪录单和登记本，并通知临床取血。
4、注意事项：
4.1可以用含EDTA之血浆代替血清使用。
4.2若病人血清（血浆）含肝素，如洗肾患者，须多加4-6滴Polybrene溶液以中和肝素。
