败酱草中肌醇含量测定

XXXXXXX有限公司原料质量标准及检验操作规程
1 品名：
1.1 中文名：北败酱草
1.2 汉语拼音：Beibaijiangcao
2 代码：
3 取样文件编号：
4 检验方法文件编号：
5 依据：《甘肃省中药炮制规范》（2009年版）。

6 质量标准：
7 检验操作规程：
7.1 试药与试剂：醋酐、浓硫酸、石油醚（30℃～60℃）、氨、甲醇。

7.2 仪器与用具：显微镜、电子天平、紫外光灯、白磁板、水浴锅。

7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。

7.4 鉴别：
7.4.1取本品粉末制片置10×10显微镜下做显微观察。

7.4.2取本品粉末0.1g，加醋酐2ml，冷浸过夜，吸取上清液1～2滴于白磁板上，滴加浓硫酸1～2滴，即显紫红色。

7.4.3取本品粉末2g，加石油醚（30℃～60℃）10ml，冷浸24小时，滤过，滤渣挥尽溶剂，加入甲醇10ml，70℃加热回流1小时，滤过。

取滤液点于滤纸上，挥去溶剂，置紫外光光灯（365nm）下检视，斑点显天蓝色；用氨熏后，日光下显亮黄色，置紫外光光灯（365nm）下观察，显黄绿色。

7.5 检查：
7.5.1总灰分：不得过15.0%（附录17）。

7.5.2酸不溶性灰分：不得过2.0%（附录17）。

7.5.3二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法（附录58）测定，不得过150mg/kg。

7.6 浸出物：照水溶性浸出物测定项下的热浸法（附录19）测定，不得少于20.0%。

GC-MS法检测白花败酱草与黄花败酱草挥发性成分刘伟;贾绍华;项峥【摘要】利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析白花败酱草与黄花败酱草中挥发性成分.采用水蒸气蒸馏法提取败酱草中挥发性成分,利用气质联用技术对成分进行分析并应用NIST 05a.L标准质谱图库检索鉴定各成分、采用面积归一化法计算各成分的相对百分含量.结果表明:黄花败酱草挥发油中鉴定54个成分,占总量的94.56％.白花败酱草挥发油中共鉴定36种成分,占总量的89.87％.两种挥发油共同含有成分9种,分别为hexanal,2-Pentylfuran,benzeneacetaldehyde,α-Ionene,1,2,3,4 -Tetrahydro-1,6,8-trimthylnaphthalene,1,2,3,4-Tetrahydro-1,5,7-trimethylnaphth alene,β-Damascenone,hexahydrofarnesylacetone,palmitic acid.首次对白花败酱草与黄花败酱草挥发性成分进行对比分析,为白花败酱草与黄花败酱草的鉴别、质量评价以及挥发性成分开发利用提供基础.【期刊名称】《哈尔滨商业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(032)001【总页数】5页(P6-10)【关键词】白花败酱草;黄花败酱草;挥发油;气相色谱-质谱;单萜;倍半萜【作者】刘伟;贾绍华;项峥【作者单位】哈尔滨商业大学药学院,黑龙江哈尔滨150076;哈尔滨商业大学药学院,黑龙江哈尔滨150076;生命科学与环境科学研究中心,哈尔滨商业大学,黑龙江哈尔滨150076【正文语种】中文【中图分类】R284败酱草为败酱科多年生草本植物白花败酱草(Patrinia villosa (Thunb.) Juss.)和黄花败酱草(Patrinia scabiosaefolia Fisch)的带根全草，广泛分布于东亚及北美地区[1].《神农本草经》中列为中品，味辛、苦，性寒，它具有清热解毒，消痈排脓，活血化瘀，清心安神等功效，曾被《中国药典》收载.在临床上常用于阑尾炎、疟疾等疾病的治疗.现代医学研究发现败酱草具有良好的抗炎、镇静催眠、抗病毒、抗肿瘤的药理活性，败酱草主要含有三萜皂苷类、环烯醚萜类、挥发油类、黄酮类以及多糖类等成分[2-7].败酱草具有刺激性气味，这种特殊的挥发性气味与其挥发油的含量和种类有明显的相关性，而有关败酱草挥发油类成分的研究较少，文献报道从白花败酱草根茎鉴定5种挥发性成分，从叶中鉴定20种成分[8]，而从黄花败酱草中则鉴定9个成分[9].由于挥发油类成分普遍具有较强的抗肿瘤、抗菌、抗氧化活性.为了深入研究这二者败酱草的药理活性，本文首次对比白花败酱草与黄花败酱草中挥发性成分进行比较.Agilent 6890 气相-质谱联用仪(安捷伦科技有限公司)，FW- 80高速万能粉碎机(北京市永光明医疗器械仪器厂)，CS-2001分析天平(Globe公司)白花败酱草购于河北新祁中药饮品公司，黄花败酱草购于安徽永刚中药饮品公司.药材经哈尔滨商业大学吴健博士鉴定为白花败酱草Patrinia villosa (Thunb.) Juss.和黄花败酱草Patrinia scabiosaefolia Fisch正品.石油醚(30～60 ℃)、无水硫酸钠购于天津科密欧化学试剂有限公司，水为纯净水.2.1 挥发油的提取白花败酱与黄花败酱分别粉碎，取粗粉30 g，精密称定，置于500 mL圆底烧瓶中，加纯净水300 mL，浸泡30 min，参照2010版《中国药典》挥发油测定法进行提取：连接挥发油提取器与回流冷凝管，加水充满挥发油提取器的刻度部分，并溢流入圆底烧瓶时为止.置电热套中缓缓加热至微沸、保持3 h至测定器中油量不再增加，停止加热，放置片刻.开启提取器下端的活塞，将水缓缓放出，至油层上端到达刻度0线上面5 mm处为止.放置1 h以上，吸取挥发油，过无水硫酸钠，即得.2.2 色谱与质谱条件色谱柱：Elite-1弹性石英毛细管柱(30 m × 0.32 mm × 0.25 mm)；进样口温度220 ℃；检测器温度250 ℃；传输线温度290 ℃；载气为氦气，体积流量1.0 mL/min；分流比60∶1，进样量1 μL；升温程序柱温55 ℃，以5 ℃/min升至265 ℃.质谱条件: 电离方式EI；电子轰击能量70 eV；离子源温度250 ℃；加速电压34.6 V；分辨率2 500；倍增器电压1 388 V；扫描范围40～450 amu；扫描次数4.45次/s.2.3 数据分析根据保留时间并应用NIST05a.L标准质谱图库检索鉴定各成分，采用面积归一化法计算各成分的相对百分含量.通过GC/MS对白花败酱草与黄花败酱草中挥发油类化学成分进行分析，总离子流图见图1、2，应用GC-MS从黄花败酱草挥发油中鉴定54个化学成分，占挥发油总量的94.56%.其中3-Methylbutanoic acid为最主要成分，占总量的25.11%，Palmitic acid，Hexanoic acid以及cis-Anethol也是主要成分，分别占总量的10.84%，9.25%及7.51%.此外，白花败酱草挥发性成分中还含有8种单萜以及6种倍半萜类成分，分别占总量的12.20%和7.09%.白花败酱草中共鉴定36种成分，占总量的89.87%.含量较高的分别是Camphogen (10.72%)，2-Methyl-6-hydroxyquinoline (7.03%)，β-Damascenone (6.75%)以及β-Ionone (6.26%).黄花败酱草挥发性成分中共含有6种单萜类成分以及1种倍半萜类成分，分别占总量的27.87%及2.67%.根据保留时间并应用NIST 05a.L标准质谱图库检索鉴定各成分，并采用面积归一化法计算各成分的相对百分含量，白花败酱草与黄花败酱草挥发性成分及百分含量结果见表1.白花败酱草和黄花败酱草是败酱属植物的两个主要品种，这两个品种曾共同作为“败酱”而被《中国药典》收载，具有相同的药理作用.但是由于败酱属植物品种较多，鉴定较为困难，本实验首次将白花败酱草与黄花败酱草中挥发油成分进行鉴定，分别鉴定出33种和51种成分，经过进一步分析，确定9个共有成分，具体名称及百分含量见表2.该结果对白花败酱草与黄花败酱草的鉴别、质量评价以及挥发性成分开发利用奠定工作基础.【相关文献】[1]XIE Y, PENG J Y, G R FAN, et al. Chemical composition and antioxidant activity of volatiles f rom Patrinia Villosa Juss obtained by optimized supercritical fluid extraction [J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2008(48): 796-801.[2]GAO L, Zhang L, LI N, et al. New triterpenoid saponins from Patrinia scabiosaefolia [J]. Car bohydrate Research, 2011(346): 2881-2885.[3]XU J C, ZENG X Y, YU D Q. Studies on the chemical constituents of Patrinia villosa Juss[J]. Acta Pharmacologica Sinica, 1985(20): 652-656.[4]ZHANG T, LI Q W, LI K, et al. Antitumor effects of saponin extract from Patrinia villosa (Thu nb.) Juss on mice bearing U14 cervical cancer [J]. Phytotherapy Research, 2008(22): 640-645.[5]CHIU L C M, HO T S,WONG E Y L, et al. Ethyl acetate extract of Patrinia scabiosaefolia dow nregulates anti-apoptotic Bcl-2/Bcl-XL expression, and induces apoptosis in human breast carcinoma MCF-7 cells independent of caspase-9 activation [J]. Journal of Ethnopharmacology, 2006(105): 263-268.[6]PENG J Y, YANG G J, FAN G R, et al. Preparative isolation and separation of a novel and tw o known flavonoids from Patrinia villosa Juss by high-speed counter-current chromatography[J]. Journal of Chromatography A, 2005(1092): 235-240.[7]TAGACHI H,YOKOKAWA Y,ENDO T. Studies on the constituents of Patrinia villosa Juss [J]. Yakugaku Zasshi, 1973(93): 607-611.[8] 黄晓冬, 黄晓昆, 李洁桢, 等. 白花败酱叶挥发物化学成分及其DPPH自由基清除活性[J]. 食品科技, 2012, 37(10): 187-190.[9] 田智勇, 曹继华. 黄花败酱和异叶败酱挥发油的研究[J]. 河南大学学报：医学版, 2004, 23(1): 35-38.。

XXXX药业有限公司成品质量标准与检验操作规程
1 品名：
1.1 中文名：北败酱草
1.2 汉语拼音：Beibaijiangcao
2 代码：
3 取样文件编号：
4 检验方法文件编号：
5 依据：《甘肃省中药炮制规范》（2009年版）。

6 质量标准：
7 检验操作规程：
7.1 试药与试剂：试药与试剂：醋酐、浓硫酸、石油醚（30℃～60℃）、氨、甲醇、甲基红乙醇指示液、氢氧化钠滴定液。

7.2 仪器与用具：显微镜、电子天平、紫外光灯、白磁板、水浴锅、中药二氧化硫测定仪。

7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。

7.4 鉴别：
7.4.1取本品横切面制片显微镜（10×10）观察组织结构特征。

7.4.2取本品粉末0.1g，加醋酐2ml，冷浸过夜，吸取上清液1～2滴于白磁板上，滴加浓硫酸1～2滴，即显紫红色。

7.4.3取本品粉末2g，加石油醚（30℃～60℃）10ml，冷浸24小时，滤过，滤渣挥尽溶剂，加入甲醇10ml，70℃加热回流1小时，滤过。

取滤液点于滤纸上，挥去溶剂，置紫外光光灯（365nm）下检视，斑点显天蓝色；用氨熏后，日光下显亮黄色，置紫外光光灯（365nm）下观察，显黄绿色。

7.5 检查：
7.5.1总灰分：不得过15.0%（附录17）。

7.5.2酸不溶性灰分：不得过2.0%（附录17）。

7.5.3二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法（附录58）测定，不得过150mg/kg。

7.6 物：照水溶性浸出物测定项下的热浸法（中国药典2005年版一部附录
19）测定，不得少于20.0%。

败酱草中总黄酮的提取工艺优化及含量动态变化摘要：以败酱草为原料，分析提取时间、料液比、提取温度、乙醇体积分数等因素对败酱草总黄酮含量的影响，以Ｌ９（３４）正交试验方法优化总黄酮的提取工艺，然后在该工艺条件下考察了不同部位、不同采摘时期败酱草中总黄酮含量的动态变化，同时也对超声波在提取败酱草中总黄酮的效果进行了探索。

结果表明，提取时间、料液比、提取温度、乙醇体积分数对败酱草总黄酮含量均有影响；败酱草中总黄酮提取的最佳工艺组合为体积分数为5０％的乙醇以１∶２０的料液比在6０℃条件下提取２.0 ｈ；引入超声波技术后，提取总黄酮的含量有所提高；同时发现败酱草嫩叶中总黄酮的含量最高。

关键词：败酱草；总黄酮；超声波；含量变化Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｐａｔｒｉｎａｗａｓｕｓｅｄａｓｔｈｅｒａｗｍａｔｅｒｉａｌｔｏｅｘｔｒａｃｔｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ａｎｄｔｈｅｄｙｎａｍｉｃｃｈａｎｇｅｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｐａｔｒｉｎａｄｕｒｉｎｇｇｒｏｗｔｈｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄ．Ｔｏｏｐｔｉｍｉｚｅｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｏｆｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌｐａｒａｍｅｔｅｒｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ，ｓｏｌｉｄto ｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｅｔｈａｎｏｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｂｙｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｍｅｔｈｏｄｃｏｕｐｌｉｎｇｗｉｔｈＬ９（３４）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌａｒｒａｙｄｅｓｉｇｎ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｗａｓａｌｓｏｓｔｕｄｉｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｍａｘｉｍｕｍｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｉｏｏｆｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｂｙｕｓｉｎｇ5０％ｅｔｈａｎｏｌｗｉｔｈａｓｏｌｉｄto ｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏｏｆ１∶２０ａｎｄｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｆｏｒ２.0 ｈａｔ6０℃．Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｗａｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｂｙｕｓｉｎｇｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｔｅｃｈｎｉｑｕｅ，ａｎｄｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｉｎｔｅｎｄｅｒｌｅｖｅｌｓｏｆｐａｔｒｉｎａ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐａｔｒｉｎａ；ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ；content variation败酱草（Ｈｅｒｂａｐａｒｔｉｎｉａｅ），又称泽败、苦菜等，属败酱科多年生草本植物。

败酱草中多糖提取和鉴定的研究作者：王雅丽徐长隆张春宇张晓蕊来源：《食品安全导刊·下旬刊》2019年第02期摘要：目的：通过设计试验从中药材败酱草中提取有效成分多糖，并对其进行纯化鉴定。

方法：通过超声波综合热浸提法提取败酱草中的粗多糖溶液，经过醇沉及Sevag法除蛋白并对其进行纯化，经莫利许（Molish）反应和苯酚-硫酸反应鉴定是否存在多糖。

结论：本实验条件下确定了败酱草多糖的提取工艺为：提取温度为100℃，料液比为1：25，超声波震碎2h，浸提时间为3h，败酱草的多糖提取率为3.14%，经过莫利许（Molish）反应和苯酚-硫酸反应证实提取的有效成分为多糖。

关键词：败酱草;多糖;莫利许（Molish）反应;苯酚-硫酸反应败酱草为败酱科多年生草本植物，始载于《神农本草经》，具有祛瘀止痛、消痈排脓、清热解毒等功效，应用历史悠久。

研究表明，败酱草的黄酮、皂甙、多糖等活性物质的含量较高，败酱草叶粗提物具有明显的抗老化、抗肿瘤及抗菌等药理功效[1]。

多糖是存在于自然界的醛糖和（或）酮糖通过糖苷键连接在一起的聚合物（一般10个以上）。

多糖包括活性多糖和膳食纤维两大类。

活性多糖专指具有某种生物活性的多糖化合物。

这些多糖具有复杂的、多方面的生理活性和功能，如：免疫调节功能、抗肿瘤作用、抗病毒作用等[2-4]。

败酱草有效成分AP4（败酱草多糖）具有明显抑制呼吸道合胞病毒（RSV）增殖的作用，其治疗指数为114，且其抗病毒指数也远远高于病毒唑。

1 材料与设备1.1 材料败酱草全草，购买于沈阳市国大药房。

1.2 试剂和设备1.2.1 主要实验试剂α-萘酚、苯酚、浓硫酸、纯水、乙醇、氯仿、异戊醇等。

1.2.2 主要实验设备粉碎机、电热鼓风干燥箱、超声波清洗器、电子分析天平、冰箱、蒸馏装置、浓缩装置、冻干机、离心机、电热炉等。

2 实验方法2.1 粗多糖的提取2.1.1 预实验称取败酱草全草经50℃烘箱烘干，于粉碎机中粉碎，得到败酱草干粉。

保健食品中肌醇的测定一、样品前处理1.1 样品采集与保存：选取具有代表性的保健食品样品，按照不同种类和品牌进行分类保存。

确保样品在采集、运输和保存过程中不受污染。

1.2 样品处理：将保健食品样品进行粉碎或研磨，以充分释放其中的肌醇成分。

同时，应避免使用金属器具接触样品，以防止引入杂质。

二、提取分离2.1 提取：采用合适的溶剂（如乙醇、丙酮等）对处理后的样品进行浸泡或超声波辅助提取，以充分提取其中的肌醇成分。

根据样品的不同性质，选择合适的溶剂和提取条件。

2.2 分离：采用柱色谱、薄层色谱或高效液相色谱等方法对提取液进行分离纯化。

通过选择合适的吸附剂和洗脱液，将肌醇与其他杂质进行有效分离。

三、测定方法3.1 紫外可见分光光度法：将分离纯化后的肌醇配制成一定浓度的溶液，在紫外可见光谱仪上测定其在特定波长下的吸光度。

根据吸光度计算肌醇的浓度，并确定其含量。

3.2 气相色谱法：将分离纯化后的肌醇配制成一定浓度的溶液，采用气相色谱仪进行测定。

通过对比标准品保留时间和峰面积，确定肌醇的含量。

3.3 质谱法：将分离纯化后的肌醇配制成一定浓度的溶液，采用质谱仪进行测定。

通过对比标准品分子量和离子碎片信息，确定肌醇的含量。

四、检测仪器4.1 紫外可见分光光度计：用于测定肌醇的吸光度。

4.2 气相色谱仪：用于测定肌醇的含量。

4.3 质谱仪：用于测定肌醇的分子量和离子碎片信息。

五、准确度与精密度5.1 准确度：采用标准品或已知含量的样品对测定方法进行验证，以评估方法的准确度。

可以采用加标回收率等方法进行评估。

5.2 精密度：通过多次重复测定同一批次样品，以评估方法的精密度。

可以采用相对标准偏差（RSD）等方法进行评估。

六、干扰与排除6.1 干扰物质：分析过程中应考虑可能存在的干扰物质，如其他色素、添加剂等，以避免对肌醇测定的干扰。

6.2 排除干扰：采用合适的方法对干扰物质进行排除，如采用特定的吸附剂、洗脱液等，以消除其对肌醇测定的影响。