实验诊断学—止血凝血实验(双语版)
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凝血实验实验报告凝血实验实验报告凝血实验是一种常见的临床实验,用于评估人体的凝血功能。
通过测量凝血时间、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间和纤维蛋白原浓度等指标,可以了解患者的凝血系统是否正常工作。
本次实验旨在探究凝血实验的原理和方法,并通过实验结果分析凝血功能的变化。
实验材料与方法:材料:1. 血浆样本:采集自健康志愿者的静脉血,使用抗凝剂离心分离血浆。
2. 凝血试剂:常用的凝血试剂包括凝血酶原时间试剂、活化部分凝血活酶时间试剂和纤维蛋白原试剂。
方法:1. 凝血时间测定:将适量的血浆样本加入试管中,加入凝血时间试剂,记录加入试剂后开始凝结的时间。
2. 凝血酶原时间测定:将适量的血浆样本加入试管中,加入凝血酶原时间试剂,记录加入试剂后开始凝结的时间。
3. 活化部分凝血活酶时间测定:将适量的血浆样本加入试管中,加入活化部分凝血活酶时间试剂,记录加入试剂后开始凝结的时间。
4. 纤维蛋白原浓度测定:将适量的血浆样本加入试管中,加入纤维蛋白原试剂,根据试剂的变色反应判断纤维蛋白原浓度。
实验结果与分析:在本次实验中,我们对三名健康志愿者的血浆样本进行了凝血实验。
实验结果如下:凝血时间测定:志愿者A的凝血时间为5分钟,志愿者B的凝血时间为7分钟,志愿者C的凝血时间为4分钟。
凝血酶原时间测定:志愿者A的凝血酶原时间为12秒,志愿者B的凝血酶原时间为15秒,志愿者C的凝血酶原时间为10秒。
活化部分凝血活酶时间测定:志愿者A的活化部分凝血活酶时间为30秒,志愿者B的活化部分凝血活酶时间为35秒,志愿者C的活化部分凝血活酶时间为28秒。
纤维蛋白原浓度测定:志愿者A的纤维蛋白原浓度为2g/L,志愿者B的纤维蛋白原浓度为1.8g/L,志愿者C的纤维蛋白原浓度为2.2g/L。
通过对实验结果的分析,我们可以得出以下结论:1. 凝血时间是血液凝结所需的时间,反映了血浆中凝血因子的活性和数量。
志愿者C的凝血时间最短,说明其凝血系统功能较为正常。
一、实验目的1. 了解血液凝固的基本过程。
2. 探究影响血液凝固的因素。
3. 掌握凝血实验的基本操作方法。
二、实验原理血液凝固是血液由流动状态转变为凝胶状态的过程,主要包括内源性凝血途径和外源性凝血途径。
内源性凝血途径是指血液中凝血因子在血管内激活,逐渐形成凝血酶,最终使纤维蛋白原转化为纤维蛋白,使血液凝固。
外源性凝血途径是指由组织损伤释放的组织因子激活凝血因子,进而引发凝血过程。
三、实验材料1. 家兔血液2. 凝血酶3. 纤维蛋白原4. 氯化钙溶液5. 生理盐水6. 秒表7. 试管8. 移液器9. 玻璃棒10. 温度计四、实验方法1. 取家兔血液,置于试管中,加入适量生理盐水,搅拌均匀。
2. 将凝血酶和纤维蛋白原分别加入两个试管中,加入适量生理盐水,搅拌均匀。
3. 将混合后的家兔血液分为两组,一组加入凝血酶,另一组加入纤维蛋白原。
4. 将两组血液分别置于37℃恒温箱中,观察并记录血液凝固时间。
5. 分别将氯化钙溶液和生理盐水加入两组血液中,观察并记录血液凝固时间。
五、实验步骤1. 将家兔血液置于试管中,加入适量生理盐水,搅拌均匀。
2. 将凝血酶和纤维蛋白原分别加入两个试管中,加入适量生理盐水,搅拌均匀。
3. 将混合后的家兔血液分为两组,一组加入凝血酶,另一组加入纤维蛋白原。
4. 将两组血液分别置于37℃恒温箱中,观察并记录血液凝固时间。
5. 分别将氯化钙溶液和生理盐水加入两组血液中,观察并记录血液凝固时间。
六、实验结果1. 加入凝血酶的血液凝固时间为2分钟。
2. 加入纤维蛋白原的血液凝固时间为3分钟。
3. 加入氯化钙溶液的血液凝固时间为1分钟。
4. 加入生理盐水的血液凝固时间为5分钟。
七、实验分析1. 通过实验可知,凝血酶和纤维蛋白原均可使血液凝固,但凝固时间不同。
凝血酶的凝固时间短于纤维蛋白原,这可能是因为凝血酶在凝血过程中起到催化剂的作用,加速了凝血反应。
2. 加入氯化钙溶液的血液凝固时间短于加入生理盐水的血液凝固时间,说明氯化钙在凝血过程中起到促进作用。
实验诊断学—止血凝血实验(双语版)止血凝血2013年3月7日19:32血管壁止血作用:1.收缩反应:neurohumoral regulation→endothelial cells contract→slow blood flow→bleeding stops2.激活血小板Collagen exposed →activate vWF →collagen-vWF-platelet complex →platelet adheresion3.促进血液凝固过程Endothelial cells →tissue factor →extrinsic pathway of blood coagulationEndothelial cells →activate FXII →intrinsic pathway of blood coagulation4.抑制纤维蛋白溶解Endothelial cells →PAI(plasminogen a ctivator inhibitor)一、血管壁检测——screening test1.BT2.CRT1.bleeding time, BT测定皮肤受特定条件的外伤后,出血自然停止所需的时间——反应毛细血管壁和血小板止血功能参考值:6.9±2.1minabnormal:>9minClinical significance:Influenced by the amount of platelet and the condition ofthe vascular wallBT increase:1.Abnormal function or amount of the platelet: thrombasthenia血小板无力症2.abnormal condition of the vascular wall: hereditary capillary rise syndrome3.intergrated factors: VWD、DICBT decrease:Severe hypercoagulable state and thrombotic diseases:Cerebral thrombosis、cardiac infarction、diabetes mellitus、hyperlipidemia、DVT、hypercoagulable state of DIC2.Capillary resistance test, CRT毛细血管的完整性与其本身的结构、功能,血小板的质、量,以及一些体液因素有关。
一、实验目的1. 了解血液凝固的基本过程。
2. 掌握影响血液凝固的因素。
3. 学习使用凝血实验器材,提高实验操作技能。
二、实验原理血液凝固是指血液由液态变为固态的过程,是人体重要的生理功能之一。
血液凝固过程分为三个阶段:凝血酶原激活、凝血酶生成和纤维蛋白形成。
本实验通过观察血液凝固过程,分析影响血液凝固的因素。
三、实验器材1. 家兔(实验动物)2. 采血针3. 采血管4. 移液器5. 移液管6. 混匀器7. 血凝仪8. 计时器9. 玻璃板10. 滤纸11. 37℃恒温水浴12. 实验记录表四、实验步骤1. 准备实验动物:选取健康的家兔一只,将其固定在实验台上。
2. 采血:使用采血针对家兔耳缘静脉进行采血,将血液收集在采血管中。
3. 分组:将采集到的血液按照实验设计要求分成若干组,每组血液量相同。
4. 设置实验组:a. 对照组:不添加任何物质,直接观察血液凝固过程。
b. 实验组:向血液中加入不同物质,如抗凝剂、肝素钠等,观察其对血液凝固的影响。
5. 血液混合:使用移液器将不同组别的血液进行混合,确保实验条件一致。
6. 血液凝固观察:a. 将混合好的血液滴在玻璃板上,使用计时器记录血液凝固时间。
b. 观察血液凝固过程中的现象,如凝固速度、凝固形态等。
7. 数据记录:将实验过程中观察到的现象和凝固时间记录在实验记录表上。
8. 实验重复:为确保实验结果的准确性,对每组血液进行重复实验。
9. 数据分析:对实验数据进行统计分析,比较不同实验组间的差异。
10. 实验结束:将实验动物放回笼中,清理实验场地。
五、实验注意事项1. 实验操作过程中,注意无菌操作,防止细菌污染。
2. 实验过程中,避免剧烈摇晃或振动实验器材,以免影响实验结果。
3. 实验过程中,注意观察实验现象,确保实验结果的准确性。
4. 实验结束后,对实验动物进行护理,确保其健康。
六、实验结果与分析根据实验记录表中的数据,对实验结果进行分析。
比较不同实验组间的凝固时间、凝固形态等指标,分析不同物质对血液凝固的影响。
止血凝血2013年3月7日19:32血管壁止血作用:1.收缩反应:neurohumoral regulation→endothelial cells contract→slow blood flow→bleeding stops2.激活血小板Collagen exposed →activate vWF →collagen-vWF-platelet complex →platelet adheresion3.促进血液凝固过程Endothelial cells →tissue factor →extrinsic pathway of blood coagulationEndothelial cells →activate FXII →intrinsic pathway of blood coagulation4.抑制纤维蛋白溶解Endothelial cells →PAI(plasminogen activator inhibitor)一、血管壁检测——screening test1.BT2.CRT1.bleeding time, BT测定皮肤受特定条件的外伤后,出血自然停止所需的时间——反应毛细血管壁和血小板止血功能参考值:6.9±2.1minabnormal:>9minClinical significance:Influenced by the amount of platelet and the condition of the vascular wallBT increase:1.Abnormal function or amount of the platelet: thrombasthenia血小板无力症2.abnormal condition of the vascular wall: hereditary capillary rise syndrome3.intergrated factors: VWD、DICBT decrease:Severe hypercoagulable state and thrombotic diseases:Cerebral thrombosis、cardiac infarction、diabetes mellitus、hyperlipidemia、DVT、hypercoagulable state of DIC2.Capillary resistance test, CRT毛细血管的完整性与其本身的结构、功能,血小板的质、量,以及一些体液因素有关。
用加压的方法来部分阻止静脉血液回流,可以根据一定范围内新出血点的数目及大小来估计毛细血管的脆性。
Reference value: in the diameter of 5cmMale: less than 5 spotsFemale and Children: less than 10 spotsClinical significance:Positive when the amount of spots is more than the normal levelstructural or functional defect of the vascular wall:hereditary capillary rise syndrome、angiohemophiliaQuality and quantity defect of platelet:Thrombocytopenia 血小板减少症Platelet dysfunction syndrome 血小板功能缺陷症二、血小板检测1.keep the integrity of vascular wall and the permeability of capillary2.coagulationprimary hemostasis:Aggregation→adheresion→release→contractsecondary hemostasis:Provide the catalytic surface of the coagulation with PF3's participationScreening test:1.platelet countReference value: (100-300)×10^9/LClinical significance:Thrombopenia:Production dysfunction:Hematopoietic dysfunctionOver damage and consumption of platelet:ITP、DIC、TTPAbnormal distribution of platelet:Splenomegaly、dilution of bloodThrombocytosis:Primary increase: bone marrow incremental diseases( polycythemia vera真性红细胞增多症、primary thrombocythemia、early stage of Myelofibrosis、hemorrhage )Secondary increse: acute infection、hemolysis、certain kind of CA2.clot retraction test, CRT血液凝固后,由于血小板释放的PF4(血栓收缩蛋白),使血块收缩,血清析出。
测定析出血清量占全血量的百分数来表示血块收缩的程度,可间接了解血小板功能情况。
Reference value:定量法(凝块法):37℃1小时其血块收率为65.8%±11.0%定性试验:37℃2小时开始收缩,18-24小时完全收缩(血清占全血1/3-1/2)。
Clinical significance:Clot retracting ability is based on the platelet、fribinogen,Fg、amount of RBCIncomplete retraction:→Quantity disorder of platelet:Thrombasthenia、ITP、thrombocytosis→disorder of fribinogen:Hypofribinogenosis→increase of RBC: erythrocytosisOver retraction:Congenital/acquired FXIII deficiency syndromeDiagnostic test3.platelet associated immunoglobulin, PAIg本试验是免疫性血小板减少性紫癜诊断、疗效及预后估计的重要指标,也有助于其他血小板疾病的免疫机制研究。
Reference value:PAIgG:(0~78.8)ng/10^7血小板PAIgM:(0~7.0)ng/10^7血小板PAIgA:(0~2.0)ng/10^7血小板Increase of PAIg:ITP、immune thrombocytopenic purpura4.platelet adhension test, PAdT血小板具有体内粘附于内膜下组织或体外粘附于带负电荷物质的性质。
当血液通过玻珠柱时,血小板可粘附在充满玻珠的塑料管内,血中血小板数会因此而降低。
Increase:Thrombotic diseaseDecrease:→Platelet factor: thromboasthenia→intergrated hemostasis factor: vWD→others: uremia、cirrhosis、MDS、AL、exotic protein increases5.platelet aggregation test, PAgT根据血小板聚集曲线的变化了解血小板聚集的程度和速度。
Increase: thrombotic diseasesDecrese:Congenital: thromboasthenia、vWDAcquired: myeloproliferative disorders、antiplatelet drugs三、凝血因子检测Screening test1.activated partial thromboplastin time, APTT( sensitive screening test of the intrinsive coagulation system)在受检血浆中加入活化的部分凝血活酶时间试剂和Ca2+,观察血浆凝固所需的时间Reference value:1、(31-43)秒2、与对照相差在10秒以内APTT increase:→congenital coagulation factor disorder1.intrinsic:VIII、IX、XI eg. Hemophilia2. common: X、V、II、FgI→acquirced coagulation factor disorder1.liver damage2.Vit K deficiency : obstructive jaundice3.hyperfribinolysis: DIC4.anti-coagulation drugs: warfarin heparinAPTT decreseThrombotic diseaseAPTT is the primary factor the monitor the use of heparin treatment2.clotting time,CT3.prothrombin time, PT在受检血浆中加入钙离子和组织因子(TF或组织凝血活酶),观察血浆的凝固时间即为凝血酶原时间Reference value:① PT秒数:直接测定的时间(12±1)s (超过对照3s 以上为异常)② PT比值(PTR) :待测血浆PT/对照PTPTR :1.0±0.05③国际正常化比值(INR):INR=PTRISI(ISI=国际敏感指数)INR:1.0±0.1PT increase:→congenital coagulation factor disorder1.extrinsic:VII2. common: X、V、II、FgI→acquirced coagulation factor disorder1.liver damage2.Vit K deficiency : obstructive jaundice3.hyperfribinolysis: DIC4.anti-coagulation drugs: warfarin heparinPT decreseThrombotic disease4.fribrinogen, Fg凝血酶比浊法:在受检血浆中加入一定量的凝血酶,使血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白,通过比浊原理计算Fg的含量。