合格的超薄切片样品应该达到以下基本要求: (1)切片的厚度应在50nm左右,不能超过 100nm,以获得较高的分辨率和较高的反差; (2)切片应能耐受电子束的强烈照射而不发 生破裂、变形;(3)细胞超微结构保持良好, 没有明显的物质凝聚和丢失。
电子显微镜技术: 细胞内的细胞器、细胞骨架或大分子水平的变化。
三.常用免疫组织化学染色方法
(一)直接法
将荧光素(免疫荧光法)或酶直接标记在第一 抗体上,以检查相应的抗原。直接法具有 特异性强的优点,但敏感性差,耗费抗体 多。
(二)间接法
先用荧光素或酶标记第二抗体,一抗为特异 性抗体, 二抗仅有种族特异性。 特点: ⑴ 预先标好二抗,较方便; ⑵ 比直接法敏感,但仍差。
⑵ Lysozyme少数阳性。
6.滑膜及间皮肿瘤及其标记物:双向分 化,无特异性标记物。
Keratin,EMA;Vimentin,FN,AAT,ACT,Lysoz
yme等均有可能阳性。
7.周围神经肿瘤及其标记物:
⑴ S-100:神经纤维肿瘤,神经鞘肿瘤。
⑵ 髓性碱性蛋白(Myelin basic protein,MBA); ⑶ 髓鞘相关蛋白(MAG);
⑷ 层粘连蛋白(Laminin)。
8.淋巴造血组织肿瘤及其标记物:
(1)LCA(Leucocyte Common Antigen,白细胞共同抗原);
(2)CD19,CD25,CD20--标记B淋巴细胞;
(3)CD4,CD8,CD3--标记T淋巴细胞;
(4)MAC387、Lysozyme--标记组织细胞; (5)CD15、CD30(Ki-antigen)--标记R-S细胞; (6)CD11,CD14--标记单核细胞、粒细胞。