川续断的染色体研究

药材川续断的研究进展丁莉;李慧;武芸;孙鹏【摘要】从基础研究、天然化学成分及药理作用、提取工艺及药材质量评价方面综述了川续断的研究概况.该植物主要含皂苷、生物碱、挥发油等活性成分,在增强机体免疫功能、抗氧化、促进骨愈合等方面显示了较好的作用.提出了目前川续断以及其他药材质量评价方面存在的问题,以及今后的研究趋势.【期刊名称】《湖北民族学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(028)003【总页数】5页(P320-324)【关键词】药材;川续断;化学成分;药理作用;质量评价【作者】丁莉;李慧;武芸;孙鹏【作者单位】湖北民族学院,生物科学与技术学院,湖北,恩施,445000;湖北民族学院,生物科学与技术学院,湖北,恩施,445000;湖北省生物资源保护与利用重点实验室(湖北民族学院),湖北,恩施,445000;湖北民族学院,生物科学与技术学院,湖北,恩施,445000【正文语种】中文【中图分类】R284续断为中国传统中药材之一，是川续断科川续断属植物川续断(Dipsacus asperoides)的干燥根.主要含有皂苷、生物碱、挥发油及其它生物活性成分.临床上主要用于腰背酸痛，肢节痪痹，跌扑创伤，损筋折骨，胎动漏红，血崩下血，以及遗精、带下、痈疽疮肿[1].其中，产于湖北鹤峰县和宜昌五峰县的续断由于其加工后具根条粗、无头尾、质柔软、墨绿色(俗称乌梅色)菊花心、气微、味微苦、微甜而涩的品质特征，而被冠以“五鹤续断”之名.其“乌梅花心”的特征闻名国内外，是湖北省恩施州的道地药材之一[2].近年来，随着全球范围内“回归自然”浪潮的涌起以及人们对化学药品毒副作用的深入认识，国际市场对天然中药材的重视程度正在不断加强，川续断作为一种重要的中药原料，蕴涵着巨大的市场潜力.因此本文现对川续断的国内外研究现状进行总结，以期为进一步开发利用川续断并为其它药材的研究提供一定的参考和基础，以充分利用生物资源.1 生物学基础研究1.1 生活习性植物的生活习性是判断和选择植物生长最适地域、耕种者因地制宜的重要依据.观察并研究总结，五鹤续断喜温暖而较凉爽的气候，宜在海拔1 200～2 500 m的山区种植，能耐寒，对土壤要求不严，但以土层深厚、疏松肥沃、含腐殖质丰富的沙壤土成粘壤土为佳，凡气侯炎热、干燥、土壤粘重、板结的地方均生长不良[3].1.2 形态特征形态特征作为植物最表观的性状，能够直观的识别植物种类及基本生长情况，对五鹤续断进行部分生物学特征研究时，通过定期测量并记录其外部形态进行部分显微结构观察，可知五鹤续断在营养器官上主要包括多年生草木、基生叶丛生、茎生叶对生三种类型，并在叶片大小及形状等方面存在差异.其花序类型为顶生头状，果实类型为瘦果.1.3 细胞结构植物染色体是植物遗传物质DNA的载体，支配植物的遗传和变异，并控制植物的发育.陈训[4]和丁莉[5]分别研究了贵州的野生川续断以及五鹤续断的染色体.研究表明，二者的核型公式都为2n=18=12m+4sm+2st，即染色体由12个中部着丝粒染色体、4个近中着丝粒染色体和2个近端着丝粒染色体组成，核型类型为2A.但是在染色体的臂比上略有不同，可能是由于不同的生境会使物种有不同的适应性．其染色体结构会发生一定程度的变异.显微结构及解离组织方面的研究发现，尽管有的续断在亲缘关系上较近，且在分布区有交叉，但在根部组织结构及组成的分子特征等方面仍有许多差异[6].1.4 花粉形态种子植物成熟花粉形态结构稳定并具特异性，因此研究花粉形态结构可为植物的起源、演化、鉴别及植物分类等方面提供重要的依据.冯学锋等用光学显微镜和扫描电镜对我国续断属的17种2变种的花粉形态进行了分析.发现17种2变种的种间差异较小，川续断与大理续断在形态上相似，区别为川续断叶疏被白色短毛或仅沿脉被刺毛，小苞片倒卵楔形；后者茎叶多被黄白色乳突状刺毛，小苞片长方倒卵形，且花粉较大[7].1.5 繁殖方式繁殖是植物繁衍后代、延续物种的一种自然现象，也是植物生命的基本特征之一.植物种类繁多，繁殖方法不一，主要有营养繁殖、种子繁殖、孢子繁殖.续断的人工家植通常采用种子繁殖，林先明等[8]探讨了不同的贮藏温度对续断种子发芽率的影响，发现随着贮藏温度的升高，种子发芽率降低，贮藏温度为0℃时发芽率最高，达到74.5%.近年来，随着科学技术的发展，运用组织培养的方法来繁殖植物新个体成为热点.在研究不同植物生长调节物质及其组合对五鹤续断愈伤组织的诱导效应时发现，NAA、6-BA、2,4-D对五鹤续断愈伤组织诱导效果较好，KT的诱导效果不明显；诱导愈伤组织最好的培养基为：MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L[9].诱导丛生芽的最优培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L；诱导生根的最佳培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg/L+PP3330.4 mg/L[10].2 天然产物化学成分研究药用植物的化学成分是其药效的重要因素之一.研究药用植物的化学成分对全面了解和进一步开发利用它具有重要意义.川续断作为传统药用植物，主要含有生物碱、皂苷、挥发油、多糖及其它生物活性成分.2.1 皂苷类续断皂苷为续断的主要有效成分，据现有研究统计，从川续断科植物中共分离出29种三萜皂苷类化合物[11].皂苷主要具抗骨质疏松、增加骨密度的作用，其提取物是促进骨损伤愈合的作用的活性成分[12],并可显著性提高斑马鱼的认知和学习能力，显著性提高Na+,K+-ATP酶的活力[13].其他作用方面，研究续断皂苷VI(ASAVI)在抗心肌萎缩中起的作用时发现，ASA VI能降低血浆中乳酸脱氢酶(LDH)等酶的含量，提高心脏中过氧化氢酶等，线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)等酶的含量，降低急性心肌梗塞小鼠的丙二醛(MDA)含量和Ca2+浓度[14].另外，川续断总皂苷和人参皂苷都有保护神经元细胞，中和β-淀粉蛋白神经毒性的作用，可增加神经元细胞的存活率，减少因β-淀粉蛋白引起的细胞凋亡[15].木通皂苷D通过活化主要的含氮氧化物以及表达细胞凋亡相关的P53、Bax基因来诱导细胞凋亡，可用于对抗人类组织细胞U937白血病细胞[16].提取工艺方面，选取提取方法、提取溶剂以及提取时间这3个因素，运用正交实验，得到五鹤续断总皂苷最佳提取条件：以甲醇作为提取溶剂，采用超声波提取1 h，此时提取效率较高[17].2.2 生物碱类川续断总生物碱能显著抑制妊娠大鼠在体子宫平滑肌的自发收缩活动，降低幅度和张力，并可对抗催产素引起的妊娠大鼠在体子宫收缩幅度和张力的增加，对抗大鼠因摘除卵巢而导致的流产[18].在提取工艺方面，武芸采用索氏提取法，并选取料液比、提取酸碱度以及提取时间这3个因素，运用单因素及正交实验，得到五鹤续断总生物碱最佳提取条件，即：料液比为1∶20，提取时间为10 h，酸度值为3～3.5[19].2.3 多糖类研究表明，续断根的热水提取物中存在着抗补体多糖和具免疫调节活性的高分子活性成分[20].采用石油醚脱脂、热水浸提、乙醇沉淀分离、sevage脱蛋白、冷冻干燥等方法研究多糖的提取及动态分布规律，结果在提取2次、加料液比为1∶20、提取时间2 h、提取温度为95℃时，续断多糖得率最高，且3年生续断根多糖分布最高[21].2.4 酸类Tian等用95%乙醇对续断进行分馏，得到一些酚酸类化合物：咖啡酸、2,6-二羟基桂皮酸、香草醛酸、2-O-咖啡酸-D-吡喃葡萄糖苷酯和咖啡酰奎尼酸,还包括一些环烯醚萜配糖物单体和二聚体[22].从川续断根中提取出来的6种咖啡酰奎宁酸的派生物可用来预防动脉粥样硬化疾病[23].2.5 挥发油类吴知行等[24]用GC/MS和GC/IR方法对续断根部的挥发油进行了提取，得到41种化合物，其中酚类化合物种类较多而萜类化合物种类较少.还发现川续断的挥发油对金黄色葡萄球菌有较强抑菌能力.2.6 天然产物成分除了以上有效成分外，续断的其他成分同样被研究证明具有一定的药理作用.续断能提高抗氧化酶的表达作用，是一种强抗氧化药物[25].类似研究表明，续断的粗提物及35%、50%、65%的乙醇洗脱液对自由基有显著清除作用[26].用大鼠进行试验研究续断对老年痴呆症的作用时发现其对海马结构β-AP的沉积有抑制和清除的作用[27]，而β-淀粉样蛋白(β-AP)在神经元和突触间沉积是Alzheimer患者痴呆的主要原因.程志安等[28]发现续断可有效提高卵巢切除大鼠的全身骨密度、骨矿含量和骨钙的含量，并可增加血清胰岛素样生长因子的表达，可用于骨质疏松的防治.研究切除卵巢的小鼠还发现，经过16个星期的续断提取液处理，续断能通过改变骨头重塑效率来预防骨质流失，还能提高骨头强度，预防有带微体系结构的退化[29].Sung-Soo Kim等[30]发现从续断中提取的咖啡酰奎尼酸衍生物3,5-diCQA对于预防氧化胁迫产生的神经细胞疾病具有潜在医用价值.DR处理对于坐骨神经损伤造成的肌肉凋亡具有抗肌肉萎缩、抗细胞凋亡的作用[31].续断还在糖性白内障发病中起重要作用[32].3 续断质量研究3.1 不同产地续断质量差异《神农本草经·序录》中，对于药物产地选择有“土地所生，真伪陈新”的论述.因此中药产地是否适宜，对于药材质量的影响是很重要的.因而天然中药材的生产多有一定的地域性，且产地与其产量、质量有密切关系.在对37个不同产地的川续断的HPLC图谱进行相似性分析时，发现不同产地川续断种质存在着明显的差异[33].胥秀英[34]、王秀军等[35]建立了续断的HPLC指纹图谱分析方法，并发现云南续断中川续断皂苷Ⅵ含量最低，质量相对较差，而恩施、贵州、四川产的续断中川续断皂苷Ⅵ含量均超过或达到40%.类似的研究，对全国四川、湖北、云南等9个省、市的37个续断进行总皂苷含量测定，结果表明产地对含量的影响较显著，其中湖北鹤峰县野生续断总皂苷含量最高[36].比较野生续断和GAP规范化种植基地在总各项生理特性方面存在的差异发现，野生续断中的镉、汞、铅等有害元素含量明显高于GAP人工种植的续断；而GAP人工种植的续断在总生物碱、糖类、蛋白质类、总灰分元素含量上均高于野生续断[37,38].探讨五鹤续断不同生长时期有效成分时发现，随着生长年限的增加，其根中可溶性糖的含量呈现出明显的递减趋势，总生物碱和多糖的含量积累呈现出递增趋势；其叶中总生物碱、多糖及水溶性的含量均较低[39，40].杨中林[41]比较来自不同产地的续断在木通皂甙D含量的差别发现，四川木里和盐源的含量最高，湖北五峰和长阳的次之.卫莹芳[42]对23个不同产地的续断总生物碱进行了比较分析，发现四川攀枝花米易县的总生物碱含量最高，达到0.121 2%，其次为湖北鹤峰县和四川越西县，最低的为四川荥经县，仅为0.010 6%.3.2 续断质量评价方法传统上，对于中药材质量的评价主要采取两种方法：表观形态的甄别和对其所含个别的“有效或指标成分或部位”进行定性定量分析.表观形态的评价方法虽然直观，但是存在主观意识强、标准无法统一的缺点；有效成分的评价方法缺乏考虑化学成分协同作用这一影响.而且，药材的特殊品质也就是药材的质量主要是生态环境，栽培技术以及种质资源共同作用的结果.只考虑某一因素或某两个因素的影响，都是不全面的.近年来，随着蛋白质技术和分子生物学技术的迅速发展，药材的质量评价方法也越来越多元化，同工酶技术、分子标记技术等都应用于药材的质量评价中.4 展望在植物的分类与系统演化的研究中，核型分析、显微结构以及花粉形态是分析类群之间关系、探索种群发育与演化的重要依据.而植物繁殖是植物繁衍后代、延续物种的一种自然现象，也是植物生命的基本特征之一.天然化学成分及药理作用是中药材质量的主要影响因素之一.但是，只局限于成分分析及药理作用以及少量的对其不同生境的成分差异的研究，而缺乏从生理生化以及种质资源等更深入更系统的研究，尤其缺少中药材质量的内在影响因素，即分子层面的研究探讨，是很片面且不科学的.再者，药材的质量是药材的根本，它直接影响药材的药理作用以及临床应用.近年来，随着中药材发展前景的趋好，经济价值的攀升，一些不法分子以次充好，将不合格的产品带入市场，致使中药材的质量参差不齐，不仅给人们的健康带来了不利的影响，还严重影响了中药材的长久发展.因此，提高药材的质量，制定中药材的质量评价标准是非常重要且有意义的.而且由于历代本草记载、地区用药名称和使用习惯的不同，类同品、代用品和民间用药不断出现，中药材的同名异物、品种混乱普遍存在，其种质退化，抗性降低，质量下降现象严重.获得优良的种质资源是提高药材质量的关键，对药材的产量和质量有决定性的作用.所以对中药材进行遗传多样性分析，从表观性态、生理生化指标以及分子水平上综合研究是非常有意义的.所以，建立中药材质量优劣的客观评价方法和相应合理的质控指标将会是中药界以后工作的重点.参考文献:[1]王家葵,王一涛.续断功效与临床应用历史沿革考[J].中医杂志,1992，33(6):49-50.[2]张万福.五鹤续断的地道历史考证[J].中国中药杂志,2003,28(11):1 100-1 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中药续断的研究进展该研究从化学成分、炮制工艺、产地研究、药理作用和临床应用五方面综述了中药续断的研究进展，为续断的进一步研究和开发提供了参考。

续断在我国分布广泛，主要含有三萜皂苷类的化合物，还有挥发油、环烯醚萜类等成分，具有增强免疫功能、抗衰老、抗骨质疏松等药理作用，同时在临床上也应用于骨折、腰椎骨质增生、跌打损伤等症状。

当然，续断也曾有报导出现过敏性红斑等不良反应。

所以进一步开展续断的研究，对更好的发展和利用其药用活性成分有重要意义。

标签：续断；化学成分；炮制工艺；药理作用；临床应用续断为川续断科川续断属（Dipsacus）多年生植物川续断（C.Y.Chenget T.M.Ai.）的根，主要分布在江西、湖北、湖南、广西、四川等地，因能“续折接骨”而得名。

续断性微温，味苦辛，入肝、肾经，具有续筋骨、补肝肾、调血脉的功效。

常用于治疗足膝无力、跌打损伤、崩漏带下、腰背酸痛、痈疽疮肿等症。

笔者归纳了近年来的一些资料、文献，对续断的化学成分、产地研究、药理作用、炮制工艺和临床应用做一概述。

1 化学成分1.1 三萜皂苷类川续断中的主要成分是三萜皂苷类，共计22种，分别于C-23，C-28位连接不同的糖链，苷元均为齐墩果烯型五环三萜皂苷，还有一种是从川续断醇提液的酸水解液中分离得到了常春藤皂苷元[1]。

1.2 生物碱类在川续断的研究中，对于生物碱类的成分仅发现两个，是用薄层层析的方法，经分离鉴定确定为喜树碱Venoterpine和Catttleyine[2]。

1.3 环烯醚萜类从川续断中得到了6种环烯醚萜类的化合物，包括从川续断根的乙醇提取物中分离得到的林生续断苷Ⅲ（SytvestrosideⅢ），还有马钱子苷（Loganin）、双环烯醚萜葡萄糖苷、茶茱萸苷（Cantleyoside）、熊果酸（Ursolicacid）、当药苷（Sweroside）。

1.4 挥发油类川续断中含有41种挥发油成分，萜类种类较少，而酚类化合物种类较多，其中含量最高的组分为莳罗艾菊酮Carrotamaeeton，达8.54%。

川续断的作用与功效川续断，又称川续春、川续兰，是一种很受欢迎的中药材，主要生长在中国川西高山地区。

它的学名是Epimedium，属于多年生草本植物，具有很高的药用价值。

川续断主要含有淫羊藿素、黄酮类化合物、有机酸和多种氨基酸等有效成分。

它被广泛用于治疗男性阳痿、早泄等性功能障碍，并且具有提高免疫力、抗肿瘤、抗衰老等多种功效。

下面就让我们详细了解一下川续断的作用与功效。

首先，川续断在调节男性性功能方面有着显著的功效。

淫羊藿素是川续断中最重要的有效成分之一，它能够刺激骨髓细胞的生成，从而提高精子的数量和质量。

除此之外，川续断中的黄酮类化合物也具有抗氧化的作用，能够保护精子免受自由基的损伤，从而提高精子的活力。

此外，川续断还能够被身体迅速吸收，并作用于生殖器官，促进血液循环，改善勃起功能，提高性欲和房事时间。

因此，川续断被广泛应用于治疗男性阳痿、早泄等性功能障碍，并取得了显著的疗效。

其次，川续断还具有提高免疫力的作用。

川续断中富含多种氨基酸，这些氨基酸是维持身体正常免疫功能所必需的。

通过补充川续断，可以提高免疫细胞的数量和活性，增强机体对抗疾病的能力。

此外，川续断还具有抗炎作用，能够抑制炎症反应的发生和发展，减轻炎症引起的不适和损伤。

因此，川续断对于提高免疫力、预防感冒和其他疾病具有重要的健康意义。

此外，川续断还具有抗肿瘤的作用。

川续断中的黄酮类化合物是一种天然的抗氧化剂，能够清除体内的自由基，减少细胞膜的氧化损伤，从而抑制肿瘤的发生和发展。

研究发现，川续断中的黄酮类化合物还能够调节细胞生长因子的水平，抑制肿瘤细胞的增殖和转移，具有很好的抗肿瘤效果。

因此，川续断被广泛应用于辅助治疗肿瘤，提高化疗和放疗的疗效，并减轻相关的副作用。

此外，川续断还具有抗衰老的作用。

川续断中的黄酮类化合物能够清除体内的自由基，减少细胞的氧化损伤，延缓细胞的衰老进程。

此外，川续断还能够促进胶原蛋白的合成，增加皮肤的弹性和光泽，减少皱纹和色斑的生成，保持皮肤的健康和年轻。

道地药材川续断指纹图谱模糊模式识别研究
胥秀英;郑一敏;傅善权;韩玉梅
【期刊名称】《中国药业》
【年(卷),期】2008(017)005
【摘要】目的建立道地药材川续断的指纹图谱测定方法.方法采用反相高效液相色谱法建立川续断指纹图谱,色谱柱为Shimadzu C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇一水梯度洗脱,流速为1.0 Ml/min,检测波长为210 nm,柱温为25℃.结果建立了川续断指纹图谱标准.结论指纹图谱方法简便、快速、重现性好,可作为川续断的一项质量控制指标.
【总页数】2页(P8-9)
【作者】胥秀英;郑一敏;傅善权;韩玉梅
【作者单位】重庆工学院生物工程学院,重庆,400050;重庆工学院生物工程学院,重庆,400050;重庆工学院生物工程学院,重庆,400050;重庆工学院生物工程学院,重庆,400050
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1:R282.71
【相关文献】
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3.道地药材川续断的产地考 [J], 刘华宝
4.中华中医药道地药材系列汇讲(5)道地药材川续断的研究近况 [J], 杨建宇;刘冠军;刘白云;张举昌;刘桂香;朱珺丽;仪忠宝;祝之友;唐祖宣
5.中华中医药道地药材系列汇讲(5)道地药材川续断的研究近况 [J], 杨建宇;刘冠军;刘白云;张举昌;刘桂香;朱珺丽;仪忠宝;祝之友;唐祖宣
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2020年第4卷第5期2020Vol.4No.5现代医学与健康研究Modem Medicine and Health Research□综述/Review中华中医药道地药材系列汇讲（5）道地药材川续断的研究近况杨建宇刘冠军IQ,刘白云1，2,3,张举昌1,2,3,刘桂香1,2,3,朱聒丽1，2,仪忠宝役祝之友5,唐祖宣°（1.中国中医药信息学会道地药材分会，北京100700; 2.北京医景堂疑难病研究院，北京100210; 3.河南省汉帝药业有限公司，河南平顶山467000; 4.北京中科康保医学研究院，北京100096; 5.国家中医药管理局全国名老中医药专家祝之友传承工作室，四川眉山620360; 6.国家中医药管理局国医大师唐祖宣工作室，河南邓州474150）摘要：川续断作为一种传统的道地药材，具有活血化瘀、接骨强腰的功效，可治疗骨折、腰膝酸痛、阳气不足、妇人胎不稳等疾病， 在中医临床诊疗中具有重要作用。

通过对川续断的历史沿革、采集、炮制方法、品鉴方式、产地变迁等方面进行综述，分析川续断的药理 作用和应用效果，旨在为道地药材川续断的更多药用研究提供借鉴。

关键词：川续断；道地药材；研究近况；药理作用；应用价值中图分类号：R282 文献标识码：A 文章编号：2096-3718.2020.05.0100.03川续断，又名川续断然、刺芹儿等，属被子植物门， 双子叶植物纲，合瓣花亚纲茜草目，川续断科，川续断属。

川续断主要分布于中国湖北、湖南、江西、广西、云南、 贵州、四川、西藏等地，生于沟边、草丛、林缘及田野路 旁叭川续断的药用历史悠久，其味苦、辛，性微温。

归肝，肾经，可行血消肿、生肌止痛、续筋接骨、补肝肾、 强腰膝、安胎，具有通达、止痛等功效［叫通过川续断的 相关知识进行检索，综述川续断的历史沿革、采集、炮制方法、品鉴方式、产地变迁、药理作用及应用效果，以期 在指导临床治疗的同时，为川续断的新应用提供参考依据，现综述如下。

收稿日期:2009-07-29基金项目:科技部国际合作项目(2008DFB30070);天津市重点项目(06TXTJJ CB600)作者简介:吴帅(1983-),男,辽宁辽阳人,2007级硕士研究生,研究方向:中药分析。

通讯作者:刘二伟(1976-),男,河北安国人,助理研究员,硕士,研究方向:中药化学及中药新药开发。

益卫,得防风之善行善走者,相畏相使,其功益彰,则黄芪自不虑其固邪,防风亦不虑其散表,此散中寓补,补内兼疏,顾名思义之妙,实为后学所不及耳。

0(5成方便读6卷1)。

煎药时加入大枣1枚,意在加强本方益气补虚之力。

综上所述,玉屏风散源自宋代张松的5究原方6,主治表需自汗和腠理不固,易感风邪。

虚弱之体,不但易受外邪侵扰,而且以风药驱之,每又复来,以致邪气流连,终无解期之理,进而明确本方立法在于托里固表,扶正祛邪。

脾主运化,生化气血而为后天之本。

脾气健运,化源充足,气血旺盛,脏腑形体四肢百骸得养,正气充盛,抗病力强,腠理固密,则生机勃勃;反之,脾虚失运,化源匮乏,气血无由以生,脏腑形体四肢百骸失养,正气亏衰,抗病力弱,腠理疏松,不耐邪侵而患诸疾。

以此为据,深刻认识玉屏风散的健脾作用,并广泛应用于临床,可取得令人满意的疗效。

第27卷 第12期2009年12月中 华 中 医 药 学 刊CH I NESE ARCH I VES O F TRAD I T I O NAL CH I NESE M E D I C I NEVo.l 27N o .12Dec .2009中华中医药学刊川续断属植物化学成分的研究概况吴 帅,刘 虹,刘二伟,郝 彧,朱晓月(天津中医药大学中医药研究院,教育部方剂学重点实验室,天津300193)摘 要:目的:了解川续断属植物中化学成分的研究现状以及开发和利用川续断属植物资源。

方法:对44篇有关川续断属植物的文献进行整理和归纳。

结果:在川续断属植物中发现了三萜类、环稀醚萜类、生物碱、酚酸类、黄酮类和挥发油类化合物。

川续断属（Dipsacus L．）植物全世界共有30种，中国有18种，2变种，其中有2种为栽培种，全国各地都有分布。

分布最广的物种是日本续断（Djaponicus．Miq ），其次为川续断（D．asperoides ），后者为最重要的基源植物。

川续断的根川续断为常用中药，具有补肝肾、强筋骨、通血脉、利关节、破癖、止痛解毒的功效[1]。

川续断中的化学成分主要包括三萜及其苷类化合物、环烯醚萜苷类化合物、生物碱类化合物和挥发油类化合物等，现代研究表明主要有抗骨质疏松、促进骨损伤愈合、降低妊娠时子宫收缩活性、提高免疫作用和抗维生素E 缺乏症等药理作用[2]。

笔者对川续断乙醇提取物进行了系统的化学研究，分离并鉴定了4个三萜皂苷，2个环烯醚萜，进一步对川续断乙醇提取物的中极性部位进行了化学研究，并获得了4个化合物，其中化合物乙二醇为首次从川续断属中分离得到。

1材料仪器和试剂1.1材料川续断采于河南省信阳市，经天津中医药大学教研室李天祥老师鉴定为川续断（Dipsacus asperoides C．Y．Cheng et Z．T．Yin ）。

样本存于天津中医药大学中药学院标本实验室。

1.2仪器Varian 400MR 超导核磁共振波谱仪；B üCHI B-545显微熔点测定仪(未经校正)；EYELA N-1001旋转蒸发仪。

*基金项目：科技部国际合作项目（2008DFB30070），天津市重点项目（06TXTJJCB600）。

作者单位：300193天津中医药大学作者简介：吴帅（1983－），男，硕士研究生，研究方向为中药分析。

通讯作者：刘虹。

川续断中化学成分的研究*吴帅，刘二伟，张祎，韩立峰，刘虹摘要：[目的]研究川续断（Dipsacus asperoides ）的化学成分。

[方法]采用溶剂提取、重结晶和硅胶色谱方法分离纯化，根据氢谱、碳谱以及与对照品共薄层色谱鉴定化合物的结构。

[结果]从川续断的70％乙醇提取物中分离鉴定了10个化合物：β－谷甾醇（1），蔗糖（2），胡萝卜苷（3），乙二醇（4），3－O－α－L－吡喃阿拉伯糖－常春藤皂苷元（5），3－O－α－L－吡喃阿拉伯糖－齐墩果酸－28－O－β－D－吡喃葡萄糖－（1→6）－β－D－吡喃葡萄糖苷（6），木通皂苷D （7），3－O－α－L－吡喃阿拉伯糖－常春藤皂苷元－28－O－β－D－吡喃葡萄糖苷（8），马钱子苷（9），Triplostoside A （10）。

川续断为川续断科川续断属植物川续断ＤｉｐｓａｃｕｓａｓｐｅｒＷａｔｌ的根，又名川断。

广泛分布于四川、湖北、湖南、云南、西藏等地，资源极为丰富，在《神农本草经》中被列为上品。

具有补肝肾、强筋骨、续折伤、止崩漏、安胎等功效［１］。

用于胎漏、胎动不安、滑胎、腰膝酸软、跌打损伤、骨折等症。

笔者对近年来有关川续断化学成分、质量辨别、染色体研究、药理作用及临床应用方面的研究进展做一概述。

１化学成分１．１三萜皂苷粪从川续断中共分出了２２种三萜皂苷类成分［２－９］均为齐墩果烷型，分别于Ｃ－２３，Ｃ－２８位连接不同的糖链。

１．２生物碱类曾有文献［１０］记载川续断中含有龙胆碱（ｇｅｎ－ｔｉａｎ－ｉｎｅ），但未见从中分得并鉴定具体结构的报道。

杨尚军等对川续断中的生物碱成分进行了研究，薄层层析仅发现两个生物碱斑点，并经分离，鉴定为ｖｅｎｏｔｅｒｐｉｎｅ和ｅａｔｔｔｌｅｙｉｎｅ［１１］。

１．３环烯醚萜类从川续断中首次分得一环烯醚萜苷类成分林生续断苷Ｉ（ｓｙｔｖｅｓｔｒｏｓｉｄｅⅡ）［１２］。

ｌ．４挥发油类采用ＧＣ／ＭＳ和ＧＣ／ＦＴＩＲ双联机分析法对川续断挥发油进行了成分分析，共鉴定出４１种化合物，其中含量最高的组分为ｃａｒｒｏｔａｍａｅｅｔｏｎ，达８．５４％。

萜类种类较少，而酚类化合物种类较多［１２］。

１．５其它成分从川续断中分到蔗糖，β－谷甾醇、胡萝苷［１３－１４］。

此外还含Ｃａ，Ｆｅ，Ｍｇ，Ｍａ，Ｚｎ，Ｃｕ等微量元素［１５］。

２质量辨别谭洪根［１６］等采用反相高效液相色谱法从所测的结果来看，发现湖北长阳和四川灌县川续断皂苷Ⅵ的含量最高，文献记载也认为湖北和四川续断的质量较好［１７］，药效学实验也表明：川续断皂苷Ⅵ具有增加骨密度的作用，与中医临床应用续断“补肝肾，强筋骨，续折断”的主治和功能相吻合。

因此，认为可以把川续断皂苷Ⅵ的含量变化作为评价续断药材优劣的标准。

３染色体研究川续断的染色体数目为２ｎ＝１８，与国外学者报道［１８－２１］的川续断属染色体的数目相同，但川续断的染色体数目２ｎ＝１８及核型Ｋ（２ｎ）＝１８＝１２ｍ＋４ｓｍ＋２ｓｔ为陈训等首次报道［２２］。

2种续断属植物的染色体核型分析李晓玲;王雪松;程岁寒;艾成;杨进【期刊名称】《河南农业科学》【年(卷),期】2015(044)007【摘要】对金佛山川续断和日本续断染色体进行核型分析,初步探索川续断和日本续断的起源进化与遗传亲缘关系.以川续断和日本续断根尖为材料,采用染色体常规制片方法,进行染色体核型分析.结果表明,川续断的染色体相对长度组成为2n=18=10M1 +8M2,核型公式为2n=18=2st+4sm+12m,染色体基数x=9;日本续断的染色体相对长度组成为2n=18 =2S +6M1+10M2,染色体基数x=9,核型公式为2n=18 =10m +4sm+4st.川续断和日本续断两者不对称系数分别为61.32％和64.34％,均属于“2A”型.表明川续断和日本续断均属于较原始的物种,日本续断比川续断进化程度要高一些,两者核型相似表明亲缘关系比较近,可能两者基因交流比较频繁.【总页数】4页(P115-118)【作者】李晓玲;王雪松;程岁寒;艾成;杨进【作者单位】三峡大学生物与制药学院,湖北宜昌443002;三峡库区生态环境教育部工程研究中心(三峡大学),湖北宜昌443002;三峡大学生物与制药学院,湖北宜昌443002;三峡库区生态环境教育部工程研究中心(三峡大学),湖北宜昌443002;三峡大学生物与制药学院,湖北宜昌443002;三峡库区生态环境教育部工程研究中心(三峡大学),湖北宜昌443002;三峡大学生物与制药学院,湖北宜昌443002;三峡库区生态环境教育部工程研究中心(三峡大学),湖北宜昌443002;三峡大学生物与制药学院,湖北宜昌443002;天然产物研究与利用湖北省重点实验室(三峡大学),湖北宜昌443002【正文语种】中文【中图分类】Q243【相关文献】1.3种香薷属植物染色体数目与核型分析 [J], 巴罗菊;李志敏;陈光富;邓洪平2.3种安息香属植物的根尖染色体核型分析 [J], 石从广;高燕会;柳新红;李因刚;杨少宗;蒋冬月;朱光权3.3种萱草属植物染色体核型分析 [J], 李永平; 贾民隆; 梁峥; 曹冬梅4.中国部分野生黄精属植物的染色体核型分析 [J], 周建金;罗晓锋;江金兰;叶炜5.金光菊属植物染色体核型分析 [J], 王鑫;田琳;李明阳;刘冬云因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

川续断科植物的研究进展【摘要】从化学成分、药理作用和临床应用三方面综述了川续断科植物最近的研究进展。

该科植物主要含三萜皂苷、环烯醚萜苷、黄酮、挥发油等类型的化合物。

一些种类所含成分在增强机体免疫功能、抗氧化、抗炎、镇静等方面显示了较好的活性。

进一步开展川续断科植物的研究，对更好的发现新的药用活性成分有重要意义。

【关键词】川续断科；化学成分；药理作用；临床应用【Abstract】 The review focused on recent developments concerning the chemical constituents of dipsacaceae species，their biological activities and clinical application.The main chemical constituents from dipsacaceae species were triterpenoid saponins，iridoidal glycosides，flavonoids，essential oils，etc.They possess strong bioactivities including enhancing immune function，antioxidant，antiinflamatory，sedation activities.Further research on dipsacaceae species will be necessary for better understanding of its new active constituents.【Key words】 dipsacaceae； chemical constituents； biological activities； clinical applications川续断科植物（Dipsacaceae）包括12属约300种，主要分布地中海区、亚洲及非洲南部。

引文格式：杨润, 胡倩倩, 张晓东, 等. 川续断传粉生物学特征研究[J]. 云南农业大学学报(自然科学), 2023, 38(4): 644−651.DOI: 10.12101/j.issn.1004-390X(n).202211012川续断传粉生物学特征研究*杨　润1， 胡倩倩2， 张晓东3， 王　硕4， 段绍凤1， 杨和团4， 杨秋雄1， 梁艳丽1 **(1. 云南农业大学 农学与生物技术学院，西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心，云南省药用植物生物学重点实验室，云南 昆明 650201；2. 中山市中智药业集团有限公司，广东 中山 528437；3. 寻甸县农业技术推广站，云南 昆明 655299；4. 保山市农业科学研究所，云南 保山 678099)摘要: 【目的】研究川续断的花粉活力、柱头可授性、访花昆虫和花粉粒的形态结构，确定其传粉生物学特征。

【方法】以白色和紫色花药的川续断为试验材料，利用TTC 法、I 2-KI 法和过氧化物酶法测定花粉活力；采用联苯胺—过氧化氢法测定柱头可授性；人工记录和观察柱头的发育变化，统计访花昆虫的种类和数量；利用电子显微镜观察花粉粒的形态结构。

【结果】川续断的花粉活力在开花当天最高，14： 00花粉活力最大，之后花粉活力逐渐降低。

开花第3 天柱头开始具有可授性，第5~6 天柱头可授性达到最大，说明川续断为雌雄异熟、雄性先熟类型。

访花昆虫主要有蜂类、蝶类和蝇类等10余种昆虫，蜜蜂类为主要传粉者，访花高峰期出现在11： 30—12： 30和16： 00。

川续断花药为条状，花粉粒具有3个萌发孔，为近球形的等极花粉粒，属于大花粉粒，花粉表面布满刺状突起。

【结论】研究结果可为川续断的良种繁育、杂交育种及高效栽培措施奠定理论基础。

关键词: 川续断；花粉活力；柱头可授性；访花昆虫中图分类号: S567.239.01 文献标志码: A 文章编号: 1004–390X (2023) 04−0644−08Study on the Characteristics of PollinationBiology of Dipsacus asperoidesYANG Run 1，HU Qianqian 2，ZHANG Xiaodong 3，WANG Shuo 4，DUAN Shaofeng 1，YANG Hetuan 4，YANG Qiuxiong 1，LIANG Yanli 1(1. College of Agronomy and Biotechnology, Yunnan Agricultural University, National & Local Joint Engineering Re-search Center on Germplasms Utilization & Innovation of Chinese Medicinal Materials in Southwest, Yunnan Provin-cial Key Laboratory of Medicinal Plant Biology, Kunming 650201, China; 2. Zhongshan Zhongzhi Pharmaceutical Group Co., Ltd., Zhongshan 528437, China; 3. Agricultural Technology Extension Station of Xundian County,Kunming 655299, China; 4. Baoshan Institute of Agricultural Sciences, Baoshan 678099, China)Abstract: ［Purpose ］To study the pollen viability, stigma receptivity, flower visiting insects and pollen grain shape of Dipsacus asperoides , and to determine the pollination biology of it.［Methods ］Using two kinds of D. asperoides with white and purple anther as experimental materi-als, the pollen viability was determined by TTC method, I 2-KI method and peroxidase method; the stigma receptivity was determined by benzidine-hydrogen peroxide method; the developmental云南农业大学学报（自然科学），2023，38(4)：644−651Journal of Yunnan Agricultural University (Natural Science)E-mail: ********************收稿日期：2022-11-10 修回日期：2023-07-11 网络首发日期：2023-08-18*基金项目：云南省重大专项(202102AA310045)。

川续断(学名:Dipsacus asperoides C.Y.Cheng et T.M.Ai )为多年生草本,双子叶植物纲菊亚纲川续断目川续断科植物,高达2m 左右,生长在海拔1200~2500m 的高寒地区,具有耐寒喜湿等特点,为优良的中药原料;产于湖北、湖南、江西、广西、云南、贵州、四川和西藏等省区;根入药,有行血消肿、生肌止痛、续筋接骨、补肝肾、强腰膝、安胎的功效。

目前有关川续断分子生物学方面的研究报道较少,尤其是对于川续断基因组DNA 的提取报道不多。

高质量的基因组DNA 提取对于下游的分子生物学实验至关重要,提取过程中为了获取纯度高、降解少以及浓度高的DNA 样品通常在研究中根据不同的需要,采取相应的策略尽量排除其他大分子成分如蛋白质、多糖等的污染[1]。

川续断属植物酚类、多糖类物质含量较高,难以获取高质量的DNA 。

采用传统的CTAB 法提取的基因组DNA ,产量低易降解,酚类物质不能有效地去除,无法达到预期要求。

为此,在本研究中,在经典的CTAB 法基础上,做了一定的调整优化,旨在获得提取高质量川续断DNA 的方法,为后续的分子生物学研究奠定基础。

1材料与方法1.1试验材料以川续断幼嫩新鲜的叶片为材料,其采集于恩施三岔乡、新塘乡以及石窑等地,采集的样品立即放入冰袋保存,带回室内-20℃冰箱备用。

1.2主要仪器与试剂PCR 仪(Bio-Rad )、研钵、电泳仪(北京六一)、凝胶成像仪(北京六一)、-20℃冰箱、超纯水系统、制冰机、超速冷冻离心机(SIGMA )以及其他相关设备。

DNA 提取相关试剂均为国产,购自上海生工。

1.3试验方法1.3.1川续断总DNA 的提取以及纯度浓度检测分析。

在参照各文献报道的DNA 提取和改进方法[2-3]的基础上,采用改良CTAB 法[4]提取9个产地川续断叶片的总DNA ,其具体试验步骤如下:取2~3g 叶片,放入液氮预冷的研钵,迅速研磨至粉末状,转移至10mL 离心管,加入6mL 的除酚缓冲液[100mmol/L Tris-HCl (pH 值8.0),50mmol/L EDTA-Na (pH 值8.0),0.7mol/L NaCl ,2%(w/v )PVP40,用前添加2%(W/V )β-巯基乙醇],涡旋振荡2~3min 后冰浴30min ,随后5500r/min 离心15min ;弃上清液后,再次加入6mL 除酚缓冲液,涡旋混匀后冰浴静置15min ,5500r/min 离心15min ,弃掉上清液;向沉淀中加入4mL 预热的CTAB 提取缓冲液[3%(w/v )CTAB ,100mmol/L Tris-HCl (pH 值8.0),20mmol/L EDTA ,1.4mol/L NaC1,1%(w/v )PVP40,用前加β-巯基乙醇至终浓度为2%],65℃水浴1.5h ,期间颠倒混合2~3次,取出冷却至室温,加入等体积的氯仿∶异戊醇(24∶1),颠倒混匀2min ,11000r/min 离心10min ,若上清液比较黏稠,可重复该步骤1次;离心后,小心吸取上清液至新的离心管中,加入1/2体积的5mmol/L NaCl 以及2倍体积-20℃预冷的无水乙醇,混匀;-20℃静置2.5h 后,11000r/min 离心10min ,弃掉上清液,用70%乙醇以及无水乙醇各洗1次后,将离心管重新放入离心机,4℃12000r/min 离心5min ,用移液器吸取残留的乙醇,将含有沉淀的离心管放入超净工作台吹干5~10min ,以无乙醇气味为止。

川续断issr反应体系的建立与优化
近来，细胞分子生物学中非常重要的一个研究方向之一是进化基因组学。

Issr (Inter Simple Sequence Repeat) 反应可以提供一种简单而强大的方式来进行进化基因组学研究，在许多研究中Issr反应被广泛用于识别物种边界，系统发育和遗传多样性等。

Issr反应是一个快速、灵敏的技术，可以用来检测植物材料中的内源性互补序列重复（SSCR），其特异性检测可以识别物种，并可以用来抵御环境挑战和重要生物性状的变异。

Issr反应体系由两个步骤组成，第一步是特性模板探针的检测，第二步则是对克隆片段进行PCR 扩增，以收集特异性信号。

因此，续断Issr反应体系的建立和优化成为当前研究的重要课题，以提高Issr反应的准确性和灵敏度。

首先，克隆的特异性片段需要通过特定的模板接头DNA来获得更高的灵敏度。

此外，一些特殊的反应体系也可以大大提升Issr反应的特异性，比如Y-Taq等。

最后，PCR产物可以经过适当的内切酶以及适当的混合条件来控制，从而尽可能减少无特异性反应产物的产生，提高Issr反应的灵敏度。

综上所述，续断Issr的反应体系的建立和优化是一项复杂的任务，但可以显著提高反应的准确性和灵敏度，从而为进化基因组学的研究提供更多的迅速而可靠的结果。

(文献综述 (川续断的研究进展王岩 , 周莉玲 , 李锐(广州中医药大学中药学院 , 广东广州 510405摘要 :从化学成分、药理作用及临床应用等方面综述了川续断的研究进展 , 为进一步研究和开发川续断提供了参考。

关键词 :川续断 ; 化学成分 ; 药理作用 ; 临床应用中图分类号 :R 282. 71文献标识码 :B 文章编号 :100820805(2002 0420233202The Study Progress i n D ipsacus asper W a llW AN G Y an , ZHOU L i 2ling , L I R ui(Guang zhou U niversity of T M M ed ica , Guang zhou 510405, Ch inaAbstract :T h is in of the che m ical compo siti on s 、phar m aco l ogical acti on s and clin ical p ractices of D ip W It rovided a reference fo r the further devel opm en t and utilizati on of D ip sacus asp er W all . Key words :D ip sacus asp er W all ; Che m ical compo siti on ; Phar m aco l ogical acti on ; C lin ical p ractice川续断为川续断科川续断属植物川续断 D ip sacus asp erW all. 的根。

又名川断。

广泛分布于四川、湖北、湖南、云南、西藏等地 , 资源极为丰富。

在《神农本草经》中被列为上品 , 具有补肝肾、强筋骨、续折伤、止崩漏、安胎等功效 [1], 用于腰膝酸软、跌打损伤、骨折等症。