自然流产与抗精子抗体的相关性分析
延安大学医学院组胚教研室(延安716000)
王艳梅 杨加周 曹雪琦* 艾庆燕 赵豫凤 苗乃周
摘 要 目的:探讨抗精子抗体(A s A b)与自然流产的关系。方法:采用EL ISA检测血清A s A b。结果:116例自然流产者共检出A s A b阳性38例,阳性率23.76%,与对照组6.98%比较,有显著性差异。其中,自然流产1次的病例中,A s A b的阳性率为25.00%,2次的44.00%,3～4次的53.33%。三组之间有显著性差异。结论:A s A b的产生,能够导致自然性流产,甚至是多次流产。
主题词 流产,自然 病因学 @抗精子抗体 酶联免疫吸附测定
免疫因素与自然流产的关系越来越引起人们的重视。自然流产原因有解剖、内分泌、感染、染色体、遗传等,其中40%～80%原因不明的可能与免疫因素有关,是母体免疫排斥胎儿的结果。由于多种原因,使免疫活性细胞有机会接触精子,刺激女性免疫系统;或女性体内免疫功能紊乱;或女性对丈夫精子敏感,均可使女性产生抗精子抗体(A n tisper m an ibody,A s A b)[1]。精子作为一种独特抗原与机体免疫系统接触后,可引起自身或同种免疫反应,产生A s A b。本研究通过对116例自然流产妇女应用间接酶联免疫吸附试验(EL ISA)进行A s A b检测,以探讨其在自然流产中的作用,进一步阐明其与自然流产的关系。
材料与方法
1 研究对象 选择2004年3月～2005年9月自然流产妇女116例,年龄20～37岁,平均24.84岁;自然流产1～4次,其中自然流产1次的76例,2次的25例,3～4次的15例,所有病例排除遗传性疾病、生殖器畸形、染色体异常、内分泌异常及生殖道感染等因素。对照组129例为无流产史的正常生育妇女,21～38岁,平均25.31岁。
2 检测方法 采取早上空腹常规抽肘外周静脉血2m l,离心取血清,56℃灭活后立即置-20℃冰箱保存待测;A s A b检测试剂盒系德国SERA T EC公司产品,应用酶联免疫检测仪,采用EL ISA法检测。待测标本1∶100稀释后,取出酶标条将各孔用洗涤液洗涤1次,加阳、阴性对照物及待测标本于相应的板孔中(IgG、Ig M、IgA共3条),放入37℃水浴箱温浴1h,弃去孔中液体,每孔加(1∶250)洗涤液洗涤3次,吸干。每孔加酶标抗体2滴,放入37℃水浴箱温浴1h,弃去孔中液体,洗涤5次。每孔加四甲基联苯胺底物2滴,
*延安大学图书馆
避光置室温10～15m in后加终止液1滴,置酶标仪于波长450nm处读取吸光度值。A s2A b阳性判定标准,用阳性、阴性比例,即流产组待测标本吸光与同时受检的对照标本的吸光度比值≥211判定为阳性,反之为阴性。
3 统计学处理 率的比较采用?2检验,用SPSS10.0统计软件处理。
结 果
本组116例,A s A b的阳性率为23.76%,与对照组6.98%比较,有显著性差异(P<0.01),见表1。其中,自然流产1次的病例中,A s A b的阳性率为25. 00%,2次的44.00%,3～4次的53.33%。三组之间有显著性差异(P<0.05),见表2。
表1 实验组和对照组血清A s A b阳性率比较(%)
组 别n阳性阴性
实验组11638(32.76)78(67.24)
对照组1299(6.98)120(93.02)
阳性率与对照组比较,P<0.01
表2 实验组不同流产次数血清A s A b阳性率比较(%)组 别n阳性阴性
流产1次7619(25.00)57(75.00)
流产2次2511(44.00)14(56.00)
流产3～4次158(53.33)7(46.67)
阳性率在组间比较,P<0.01
讨 论
自然流产的原因十分复杂,免疫学因素的参与和某些患者的发病率有密切关系,多种自身抗体可导致自然流产。正常精液中含有前列腺素E和一种糖蛋白,具有免疫抑制作用,精液沉淀素具有抗补体活性。这些免疫抑制因素在正常情况下可抑制女方免疫活性细胞
248陕西医学杂志2008年7月第37卷第7期
抗核抗体谱检测的临床意义（1） 自身抗体：是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白。 抗细胞内抗原的抗体包括： 1、抗细胞核成分的抗体（抗核抗体）。 2、抗细胞浆内成分的抗体（抗中性粒细胞及其他细胞胞浆抗体、抗线粒体抗体、抗核糖体抗体等）。 3、抗细胞表面抗原的抗体。 抗细胞外抗原的抗体包括：类风湿因子、抗甲状腺球蛋白抗体等。 抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）:又称抗核酸抗原抗体，是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称，能与所有动物的细胞核发生反应，主要存在于血清中，也可存在于胸水、关节滑膜液和尿液中。抗核抗体是一组对细胞核内的DNA，RNA，蛋白或这些物质的分子复合物的自身抗体。按其核内各个分子的性能不同可将各ANA区分开来，如(一)抗DNA抗体，（二）抗组蛋白抗体，（三）抗非组蛋白抗体，（四）抗核仁抗体等。每一大类又因不同抗原特性而再分为许多种类。因此ANA在广义上是一组各有不同临床意义的自身抗体，更确切的名称应为抗核抗体谱。ANA 主要存在于IgG，也见于IgM、IgA，甚至LgD及LgE中。 常见的核免疫荧光杭核抗体试验有以下几种图形：（1）均质型：核质染色均匀一致，这种染色型常与抗组蛋白和抗DNA抗体有关；（2）斑点型：核质染色呈斑点状，抗可提取性核抗原（ENA）抗体常呈这种染色型；（3）周边型：荧光染色围绕在核膜周围，它与抗DNA抗体有关；（4）核仁型：仅有核仁染色，具有抗4-6sRNA抗体呈现这种染色型；（5）着丝点型：在体外培养的细胞株（喉癌细胞）在核分裂相期时，可见到荧光染色的着丝点排列成特殊图型，而在鼠肝做底物中看不到此类图型，而被遗漏。 抗核抗体在多种自身免疫病中均呈不同程度的阳性率，如系统性红斑狼疮（SLE，95%~100%）、类风湿性关节炎（RA，10%~20%）、混合性结缔组织病（MCTD，80%~100%）、干燥综合症（SjS,10%~40%）、全身性硬皮病（85%~90%）、狼疮性肝炎（95%~100%）、原发性胆汁性肝硬化（95%~100%）等，但经皮质激素治疗后，阳性率可降低。抗核抗体在类风湿病人中约有20％～50％IgG型ANA呈阳性，小儿类风湿ANA的阳性率约19％～35％，伴发虹膜睫状体炎者阳性率高（505~90%），故ANA 阳性预示类风湿有发生慢性睫状体炎的可能。已发现75％类风湿病人有多形核白细胞的特异性ANA或抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）可使白细胞核受到破坏。 ★抗核抗体谱（ANAs）
正确看待精子畸形率. 来源：邓天勤 黄永汉 日期：2009-1-14 在泌尿、男科门诊，经常遇到病人拿着精子畸形率检查的报告单，问医生：从报告单上看，我的精子畸形率80%左右，那么高，会不会以后生的孩子可能是畸形的？跟患者解释这个跟孩子的畸形是无关的，是与生育及体外受精相关的，但是对这个解释患者还是半信半疑的。 那让我们先了解下，精子畸形率是如何来的？泌尿男科研究室是根据WHO第四版人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册，对精液常规推片，采用改良巴氏染色法进行染色，在光镜下计数200条精子，分析精子形态。WHO将经染色后畸形精子分为：头部缺陷、颈部和中段缺陷、尾部缺陷和胞浆小滴异常4类。我们检查报告通常分为：头部缺陷、中段缺陷、尾部缺陷。其计算例如以下过程： 计数的精子数：200 正常精子数：78 正常精子百分比：（78/200×100%）39% 缺陷精子数：（200-78） 122（61%） 头部缺陷精子数：110（55%） 中段缺陷精子数：18 （9%） 尾部缺陷精子数：16 （8%） 缺陷总数：（122+18+16） 144 畸形精子指数(TZI)（缺陷总数/缺陷精子数）=144/122 1.18 精子畸形指数(SDI)（缺陷总数/所数精子总数）=144/200 0.72
畸形精子指数（teratozoospermia index, TZI）的数值介于1.00（每个异常精子只有一种缺陷）和3.00（每个异常精子都有头、中段及尾部缺陷），有报道提示，TZI ＞1.6与未经治疗不育夫妇的低生育率有关，而且精子畸形指数(sperm deformity index,SDI )1.6是体外受精失败的阈值。TZI和 SDI预示精子在体内和体外的功能情况。 因为WHO第4版手册中未给出正常参考值，仅说明当正常形态精子率<15%时体外受精率显著降低，所以我们的报告的正常参考值为：正常精子形态>15%, TZI0~1.5, SDI 0~1.5。其临床意义：正常形态精子率>15%；精子畸形率越高，生育机会越低，而流产、死胎的可能性就越大，当精子畸形率>85%或TZI>1.6时，可引起生育障碍，导致不育症。如果正常形态<15%或SDI>1.6时体外受精降低。 通过上述分析，应该知道精子畸形率跟婴儿畸形是不相关，婴儿的畸形应该是与遗传相关。对于一份精子畸形率报告，我们所要看的是：精子正常形态、TZI、SDI，通过这几项指标及综合精液分析报告来说明精子在体内和体外的功能情况，对男性不育症的诊断及治疗具有辅助意义。
抗精子抗体IgA检测试剂盒（化学发光免疫分析法） 适用范围：用于体外定性检测人血清或血浆中的抗精子抗体IgA。 1.1 产品规格 试剂盒规格为48人份/盒、96人份/盒。 1.2 主要组成成分 表1 抗精子抗体IgA检测试剂盒（化学发光免疫分析法）主要组成成分 a) 酶结合物 以含3%牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲液（PH7.4）配制的联接HRP的抗人IgA单克隆抗体，其中含0.2%ProClin300做为防腐剂。 b) 对照品 对照品以1%牛血清白蛋白的0.9%Nacl为稀释液，其中含0.2%ProClin300做为防腐剂，阴性对照是用混合正常人血清配制的，阳性对照是用检测抗精子抗体IgA阳性的血清配制的。 c) 发光液
发光液A主要成份为鲁米诺，发光液B主要成份为过氧化脲，两者均以pH8.6的Tris-HCl缓冲液配制。 d) 包被微孔板 包被有人精子抗原的白色聚苯乙烯微孔板，用铝箔袋真空包装。 e) 洗涤剂 使用500ml的蒸馏水溶解后为0.02mol/L磷酸盐缓冲液，含0.5‰吐温。 f) 样本稀释液 含1%牛血清白蛋白的0.9%Nacl，0.1%ProClin300做为防腐剂。 g) 盖板膜 h) 试剂盒参数IC卡 不同批号试剂盒中的相同组分不能互换。 2.1 外观 a）液体组分应澄清，无沉淀或絮状物，实际装量应不小于标示装量； b）冻干组分呈白色或淡黄色疏松体，加水后应在3分钟内完全溶解； c）所有组分均无包装破损。 2.2 阳性对照与阴性对照的相对发光强度比 阳性对照与阴性对照的相对发光强度比大于3.5。 2.3 阴性参考品符合率 10份不同阴性参考品检测结果不得出现阳性。 2.4 阳性参考品符合率 5份不同阳性参考品检测结果不得出现阴性，其中1份为强阳性。 2.5 重复性
抗核抗体谱检测的临床意义 自身抗体：是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白。抗细胞内抗原的抗体 包括：1、抗细胞核成分的抗体（抗核抗体）。2、抗细胞浆内成分的抗体（抗中性粒细胞及 其他细胞胞浆抗体、抗线粒体抗体、抗核糖体抗体等）。3、抗细胞表面抗原的抗体。抗细 胞外抗原的抗体包括：类风湿因子、抗甲状腺球蛋白抗体等。 ★抗核抗体谱（ANAS （一）.抗DNA抗体 又可分为单链和双链DNA抗体： 1. 抗双链DNA（ double stranded DNA,ds-DNA抗体）：又称为天然DNA抗体,其靶抗原为双 螺旋dNA.对诊断SLE有较高的特异性，30%-90%勺活动期SLE患者此抗体阳性，且抗体滴度的消长与SLE的活动程度相关，随着疾病活动的控制，抗dsDNA抗体滴度可以下降或消失, 可作为治疗监测和预后评价的指标。抗dsDNA抗体与DNA结合成为免疫复合物在肾小球基底 膜沉积，或抗dsDNA抗体直接作用于肾小球抗原造成SLE患者的肾损害。抗dsDNA抗体阳性 的患者较阴性患者发生肾炎的危险性高12倍。 2. 抗单链DNA（ single strand DNA,ss-DNA ）抗体：又称为变性DNA抗体,其靶抗原为核搪或脱氧核糖?在SLE患者有较高的检出率（50%-60%），但结果缺乏疾病特异性，在其他风湿病如混合性结缔组织病，药物诱导的狼疮，硬皮病，皮肌炎，干燥综合征，类风湿性关节炎等也有10%-70%勺检出率?有些正常老年人也存在。 （二） .抗组蛋白抗体：具有H1、H2A H2B H3和H4四个亚单位，常以四聚体形式存在，与DNA构成的复合物称为染色质，染色质最基本的单位是核小体（nu cleosome）.所有组蛋白各 成分均可能成为自身抗体的靶抗原 1.SLE的阳性率约30%-80%并常伴有抗dsDNA抗体阳性，主要以抗H2A H2A-H2B复合物和抗H1的IgG型抗体为主. 2.药物性狼疮的阳性率达95%以上，但不伴有抗dsDNA抗体阳性，主要以抗H2A-H2B为主. 常见的药物有肼苯达嗪、异烟肼及氯丙嗪. （三）.抗非组蛋白抗体： 1. 抗可提取性核抗原抗体（Extractable Nuclear Antigen,ENA ）:此类抗蛋白可以溶于盐 水而被提取，故称为可提取性核抗原.对弥漫性结缔组织病的诊断尤为重要，但与疾病的严
抗精子IgG抗体检测试剂盒（胶体金免疫层析法） 适用范围：本试剂盒用于体外定性检测人血清或血浆中的抗精子IgG抗体水平。 1.1产品规格：20人份/盒。 1.2组成： 1.2.1检测卡/条： 1人份/袋×20袋，由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水纸组成。 硝酸纤维素膜上检测线包被重组精子抗原、质控线包被羊抗鼠IgG多抗，金标垫上固定胶体金标记的鼠抗人IgG单抗。 1.2.2样本稀释液：3mL/瓶×1瓶，20mM pH7.4 磷酸盐缓冲液。 2.1 物理检查 2.1.1 外观 外观平整，材料附着牢固，内容齐全，试剂无杂质，外包装完整无破损，标签清晰可辨。 2.1.2 样本稀释液净含量 样本稀释液的净含量应不少于3ml。 2.1.3 膜条宽度 膜条宽度应满足3.4～3.8 mm。 2.1.4 液体移行速度 液体移行速度应不低于10mm/min。 2.2 临界值 本试剂盒临界值为抗精子IgG抗体滴度1:12。
检测1份抗精子IgG抗体滴度为1:8的阳性企业参考品，重复检测20次，检测结果均为阳性反应。 检测1份抗精子IgG抗体滴度为1:16的阴性企业参考品，重复检测20次，检测结果均为阴性反应。 2.3 特异性 检测3份抗精子IgG抗体阴性血清，其中包括抗子宫内膜 IgG抗体阳性血清、抗透明带 IgG抗体阳性血清、抗心磷脂IgG抗体阳性血清各1份，每份阴性血清重复检测3次，检测结果均为阴性反应。 2.4 批间差 抽取三个批次的检测卡/检测条，每个批次20人份，按2.2临界值的检验方法，检测抗体滴度为1:8的阳性企业参考品，反应结果应显色均一，且均为阳性。抽取三个批次的检测卡/检测条，每个批次20人份，按2.2临界值的检验方法，检测抗体滴度为1:16的阴性企业参考品，反应结果均为阴性。 2.5 稳定性 2.5.1效期末稳定性 在4～30℃下试剂盒有效期为12个月，试剂盒在规定的条件下保存至有效期末，检测结果应符合2.2、2.3各项目要求。 2.5.2热稳定性 将试剂盒在37℃条件下放置20 天，检测结果应符合2.2、2.3各项目要求。
精子畸形指数sdi 【导读】正常的精液的质量是：正凡人精液中也存在异常精子，一般所占百分率低于30%，活力优+良的精子占有比率是>50%，假如畸形精子百分率高于50%，那么就称为精子畸形指数高。精子畸形率标准是检验精子是否健康的指标。精子畸形是临床比较常见的现象。精子畸形过多，常常是不孕不育中的某种疾病。 正常的精液的质量是：正凡人精液中也存在异常精子，一般所占百分率低于30%，活力优+良的精子占有比率是50%，假如畸形精子百分率高于50%，那么就称为精子畸形指数高。受精卵就像一颗种子，要经历精子和卵子相结合以及一系列复杂而奇妙的过程，才会最终成长为一个健康的宝贝。如果，在最初精子和卵子结合的时候，受精卵没有成长好，那么它很可能就会停止继续生长，我们把这种发生在孕早期的胚胎发育异常现象称为“胎停育”，出现这种现象其实就和流产差不多。 而精子畸形是临床比较常见的现象。精子畸形过多，常常是不孕不育中的某种疾病。精子畸形率高，胎停育出现的几率也会比较高。从优生优育的角度，精子畸形率过高，是需要治疗的，应该改善之后再生育，否则往往出现更多的麻烦。 精子畸形指数sdi正常指标 假如畸形精子百分率高于50%，那么就称为精子畸形率高。精子畸形率标准是检验精子是否健康的指标。精子畸形率标准，精子高畸形率出现的一般症状是正常形态的精子数明显少于50%，畸形精子超过了70%的时候，应进行染色体检查，一旦发现问题，就要及时治疗。精液中有支原体、衣原体感染时，精子活力就会降低，精子密度也会减少，畸形精子就会增多。畸形精子检查是对男性精子进行染色涂片然后根据它的形态，所做的诊断。男性精子头部、中部与尾部等，出现形态变异情况，其中，头部畸形主要表现有无定形、巨大头、双头等；中部畸形有体部粗大、折裂、不完整等；尾部畸形有双尾、卷尾、缺尾等。 精子畸形指数sdi高的原因 精子畸形指数高可能是有两种情况。如果形态异常的精子超过７０％，特别是妻子有习惯性流产时，就应该考虑进行染色体核型检查，男方很可能具有染色体异常，需要通过检查排除这种可能性。如果异常精子少于７０％，那么，也许是精索静脉曲张、职业或环境接触毒物、放射线、微波、服用药物、感染及应激等因素影响了睾丸生精过程。无论是哪种情况，都应该去检查并且分析原因，排除可能性，及时治疗。 而引起畸形精子症的原因主要是： 1、因为穿着的裤子、内裤导致阴囊局部长期高热，长期酗酒（特别是高浓度的烈性酒），均可使精子发生畸变； 2、泌尿生殖道感染、腮腺炎并发的睾丸炎、附睾结核、精索静脉曲张等； 3、使用激素或某些化学药物，如抗癌药、利血平、马利兰、呋喃类等，可使精子发育不成熟； 4、生殖腺受到放射线照射，可引起精子的突变。 精子畸形指数sdi高怎么办 精子畸形指数高会导致不育，如果消除可不利因素（药物、放射线、高温、酒等），就应该针对病因进行治疗。由生殖道感染引起的患者，要进行抗炎治疗；如果是内分泌异常所致的患者，就要作出内分泌功能调整；对精索静脉曲张的患者，应考虑手术治疗，并且越早越好。 当精子畸形率超过70%的时候，就应进行染色体检查，如有染色体病，治疗会相对困难。
不孕不育抗体检测有哪些 目前临床所指免疫性不孕不育多数指抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、抗卵巢抗体和抗心磷脂抗体性免疫性不孕。 免疫性不孕不育是指不孕夫妇性生活正常，男方精液常规及女方生殖道功能均在正常范围，除免疫外无致病因素可寻，占不育夫妇的10%—30%。重庆现代女子医院专家近年来对免疫因素研究认为有抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、抗卵巢抗体、抗心磷脂抗体和抗透明带抗体(抗HCG抗体对激素有影响而致不孕，此处不归此类)，这五种抗体可存在于血清、宫颈黏液及卵泡液等处。重庆现代女子医院专家表示，目前对抗透明带抗体的发病机理还不太清楚，因而，目前临床所指免疫性不孕不育多数指抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、抗卵巢抗体和抗心磷脂抗体性免疫性不孕。 不孕不育抗体检测一、抗精子抗体 精子作为一种独特抗原，与机体免疫系统接触后引起自身或同种异体的免疫反应，产生抗精子抗体。精子抗原习惯称其为隐蔽性抗原，男性正常情况下除了有血睾屏障阻碍精子抗原与机体免疫系统接触外，精浆中的免疫抑制因子也起一定的生殖保护作用，但当前列腺炎、精囊腺炎、输精管炎或睾丸受腮腺炎病毒感染、受外伤或化学药物的毒害时，都可以破坏血睾屏障的完整性，以及精浆中的免疫抑制作用降低时，精子或其可溶性抗原逸出，流入血循环，导致机体产生自身抗体(an·tisperiumantibody，AsAb)，造成男性不育。女性生殖道具有酶系统，能降解进入的精子抗原，使其不能到达免疫系统，此种酶系统的缺陷或精浆中的免疫抑制作用降低或由于微生物感染引起阴道炎、盆腔炎或经期性交，精子通过女性生殖道破损的黏膜进入血流，可使精子抗原保持完整而刺激同种抗精子抗体或交叉抗体产生，从而干扰了精子的正常运动，造成生育障碍。大约10%~30%原因不明的女性不孕症可能由于AsAb所致。 抗精子抗体对生殖的影响： (1)影响精子在女性生殖道内转送：抗精子抗体与精子表面抗原结合改变精子运动的特征使其原地颤动、制动、凝集，甚至无法通过宫颈黏液，能够到达受精部位的精子寥寥无几，使受精几乎不可能发生。精子结合卵子前，行程长达17cm，是精子自身长度的3000倍，抗精子抗体如果与精子相遇，精子的自身运动就要受到影响，在通过子宫颈时会发生震动，甚至无法通过宫颈黏液，而且精子穿透卵子的能力也大大减弱，影响受孕。 (2)影响精子的获能及顶体反应。 (3)干扰精子穿透卵丘、透明带以及与卵子结合，即使受孕，往往胚胎发育不良，只有胚囊而无胚芽等，乃至流产或不孕。
文章编号:1007-4287(2007)10-1370-02 抗精子抗体对不孕不育和流产患者的影响 杨冬梅1,赵丽红2 (首都医科大学附属北京妇产医院检验中心,北京100026) 摘要:目的为探讨抗精子抗体(AsAb)在不孕不育流产中的作用。方法采用快速抗精子抗体ELISA试剂盒检测不孕不育流产患者AsAb。结果在不孕不育患者中As Ab阳性率女性明显高于男性,其中,原发不孕不育患者中男性阳性率为12.59%(34/270),女性检出率29.62%(32/108);继发不育患者中男性阳性率为21.42%(3/14),女性检出率37.5%(6/16);多次流产患者中,男性检出率18.51%(5/27),女性为31.25%(5/16)。与对照组比较(P<0.05),具有显著性差异。结论AsAb检测对不孕不育的诊断具有重要意义。 关键词:不孕不育;抗精子抗体;免疫性 中图分类号:R711.6文献标识码:A Effect of Ant-i sperm Antibodies on Infertile Sterile and M iscarriage Patients YANG Dong-mei,Z HAO Li-hong1(Laboratory o f Beijing Obstetrical and Gynecological Hospital,Capita l University o f Medical Sciences Beijing100026,P.R.China) Abstract:Objective To investigate the effect of ant-i sperm antibodies(AsAb)on infertile sterile and miscarriage patient. Methods We examine infertile sterile and miscarriage patient.s AsAb with the method of fast ant-i sperm an tibody ELISA reagent box.Results Women AsAb.s posi tive rate is obviously higher than men among infertile sterile patient.M en AsAb.s positive rate i s 12.59%(34/270),and women.s is29.62%(32/108)among primary infertile sterile patients,and men.s is21.42%(3/14),while women.s is37.5%(6/16)among secondary infertile sterile patients.Among the patients who have aborted more than one time,men As Ab.s positive rate is19.51%(5/27),and women.s is31.25%(5/16).Compared with contrasting groups,there are signif-i cance differences(P<0.05).C onclusion It is significant to infertile sterile diagnosis to examine AsAb. Key words:infertile sterile;AsAb;i mmuni ty (Chin J Lab Diagn,2007,11:1370) 受精是生育过程中的一个核心环节,免疫性因素影响精卵结合是导致不孕不育的重要方面,抗精子抗体是最常见的免疫因素之一,在男性中,AsAb属于自身抗体,它通过影响精液的质量而降低生育能力。在女性中,AsAb属于异体抗体,是女性免疫不孕的重要原因,为了探讨AsAb在不孕不育中的作用,我们对441例不孕不育流产患者进行相关的检测,现报告如下。 1材料和方法 111对象2005年11月-2006年11月北京妇产医院不孕门诊就诊病人441例,年龄24-40岁,婚两年以上不孕病史,近两年未采取避孕措施,性生活正常,妇科检查正常,丈夫精液正常,对照组为我院产科门诊正常孕检妇女及其配偶。112方法 112.1仪器美国宝特酶标仪 112.2试剂美国Biotrin公司生产的快速抗精抗体ELIS A 试剂盒 112.3方法研究组与对照组均采用清晨空腹静脉血,及时分离血清,-20e冰箱保存,具体操作步骤参照盒内说明进行。 112.4统计处理测定结果采用V2检验。 2结果 表1不孕不育流产患者AsAb测定结果组别 n 男女 阳性数 男女 阳性率(%) 男女 原发不孕270108343212.5929.62 继发不孕14163621.4237.50 多次流产27165518.5131.25 对照组505021 4.0 2.0与女性对照组比较P<0.05,与男性对照组比较P<0.05 3讨论 不孕不育是当前生殖医学研究的一个热点,我国已婚妇女中约有10%-15%不能生育,而相当一部分与免疫因素有关,AsAb产生的主要原因是由于感染、外伤或男方精浆中免疫抑制因子减少,产生的AsAb可活化巨噬细胞破坏配子胚胎而引起不孕及早期流产[1]。AsAb可与精子粘合后活化补体和抗体信赖性细胞毒活性,加重局部炎症,使输精管堵塞加重,我们检测的男性不育患者As Ab阳性率平均约有12. 29%,与王苏梅[2]报告的AsAb致不育占不育患者的10%-30%结果一致。提示精液液化时间长的患者有必要检测AsAb。 AsAb对女性而言,在正常情况下,精浆中存在的免疫抑制物可以抑制对其配偶精子抗原的免疫应答而使女方形成 ) 1370 )Chin J Lab Diagn,October,2007,Vol11,No.10
十三、精子畸形试验 Sperm Malformation Test 1 范围 本规范规定了动物精子畸形试验的基本原则、要求和方法。 本规范适用于化妆品原料的遗传毒性检测。 2 引用标准 GB 14924 试验动物与饲料标准 GB 15193·94 食品安全性毒理学评价程序 3 定义 精子畸形（sperm malformation） 指精子形态的异常改变。 4 原理 已知精子畸形是决定精子形成的基因发生突变的结果。常染色体和Y-性连锁基因突变及某些染色体重排，如性-常染色体易位，也可使精子发生畸形。 小鼠精子畸形试验能评价受试物对精子生成、发育的影响，可检测受试物在体内对生殖细胞的遗传毒性作用。 5 试验的基本原则 通过适当的途径使动物接触受试物，经过一定时间后处死动物，取其附睾，制备涂片，经固定、染色，在显微镜下计数畸形精子。 6 仪器和器械 生物显微镜、解剖剪、镊子、表面皿、离心管、小漏斗、吸管、滴管、载玻片、擦镜纸等。 7试剂 7.1 1%伊红染色液 称取伊红1g溶于100mL蒸馏水中。 7.2 生理盐水、甲醇（A.R） 8 实验动物和饲养环境 常规使用动物是雄性小鼠。6周~8周龄，体重为30g ~35g。 实验动物及实验动物房应符合国家相应规定。 9 剂量分组 受试物至少设三个剂量组。分别取1/2、1/5、1/10或1/20LD50剂量。当受试物的LD50大于5g/kg体重时，可取5g/kg体重为最高剂量。另外设阴性（溶剂）对照组和阳性物对照组。常用溶剂为水、生理盐水、植物油（玉米油、花生油）等。阳性物对照组可采用环磷酰胺40mg/kg/
日。每组至少有5只存活动物。 10 染毒途径和方式 染毒途径视实验目的而定。常用途径为经口灌胃方式。受试物各剂量组、阴性对照组和阳性物对照组的动物，均连续染毒5d，每日一次。一般于首次染毒后的第35d处死动物。 11 试验方法 11.1 制片 用颈椎脱臼法处死小鼠，剖开腹腔，暴露睾丸，分离两侧附睾，用眼科剪剖开附睾组织，与适量生理盐水混匀，涂片。 11.2 固定 待涂片干燥后，放入甲醇（A.R）液中固定5min。取出晾干。 11.3 染色 将涂片于1%伊红染液中染色1h，然后用蒸馏水轻轻冲洗，晾干。 11.4 观察与计数 首先，在低倍镜下选择背景清晰、精子分布均匀、重叠较少的区域，然后，在高倍镜下观察结构完整的1000个精子，计数其中畸形的精子。精子畸形主要表现在头部。按Wyrobeks 的分类标准，主要类型有：无钩、香蕉形、无定形、胖头、尾折叠、双头及双尾。无尾精子、头部重叠的或整个与另一个重叠的精子均不计数。判断双头、双尾精子时，要注意与两条精子的部分重叠相区别。 12 数据处理和结果判断 每只动物应按精子畸形类型分别记录，以便计算各实验组的精子畸形发生率和精子畸形类型的构成比。 利用Wilcoxon秩和检验法和其他适当的统计学方法。将受试物各剂量组精子畸形发生率分别与阴性对照组进行比较。 精子畸形试验阳性的判断标准是畸形发生率至少为阴性对照组的倍量或经统计学处理有显著性差异，并存在剂量-反应关系者。 一般正常小鼠的精子畸形率为0.8%~3.4%，但每个实验室应有自己稳定的精子自发畸形率。 13 试验报告 试验报告应包括以下内容： （1）受试物名称、理化性状、配制方法、所用溶剂； （2）动物种属和品系、体重、数量、来源（注明合格证号和动物级别）； （3）实验动物饲养环境，包括饲料来源、室温、相对湿度、实验动物室合格证号； （4）剂量分组，染毒途径和方式； （5）试验方法：简述操作步骤，所用统计学方法； （6）结果：以列表方式报告受试物对动物精子畸形发生率和精子畸形类型分析的结果（表1和表2）； （7）结论。
抗精子抗体检查时间 【导读】抗精子抗体检查时间没有明确的限制，成年的男性朋友只要觉得自己身体有异样，都可以随时去检查。不过对女性朋友来说，抗精子抗体检查时间最好不要赶在月经期，经期检查会造成不必要的麻烦。 抗精子抗体检查没有明确的时间限制，只要您觉得身体异常，随时都可以去检查，疾病当然是越早发现越早治疗是最好的。 但是女性最好不要在月经期去检查，经期不建议做任何检查，如果非要去的话只会给自己和医生造成不必要的麻烦。 做抗精子抗体检查一定要精确，要坚信“早治早好”，这样才能确保治疗的针对性和有效性。对于不同程度的抗精子抗体，在检查和治疗上也是有区分的；如果男性女性朋友发现有抗精子抗体的异常情况时，一定要去医院做好诊断工作，以免错过最佳的治疗时间，给自身带来伤害。 抗精子抗体检查方法有什么 抗精子抗体是人体出现免疫性不育症的征兆，所以对于抗精子抗体来说，检查血液是比较有效的，因为血液中较容易发现抗精子抗体的因子存在。 此外，男性抗精子抗体检查方法还有睾丸活检、体外细胞检验、免疫鉴定等方法。 睾丸活检就是检查男性睾丸生精功能是否受损，是否因外伤或疾病等影响，造成男性朋友患有无精症、严重少精症等精子精液异常。 体外细胞检验是看精子是否受到其他因素的干扰。由于凝集素、制动因子和精子细胞毒抗体的作用，精子可能会出现凝集、抗体，精子一旦失去了向前运动能力，将无法完成精卵结合，造成不育。 免疫鉴定就是确定免疫球蛋白类型，男性女性都可以采用此检查方法，但免疫球蛋白的类型不同，所选择的治疗方法也会不同。 对于女性患者的抗精子抗体检查，主要是检查女性的生殖道是否有妇科炎症感染，炎症感染是很容易产生抗精子抗体的。 抗精子抗体检查可以看出什么 抗精子抗体检查可以看出患者抗精子抗体是呈阳性、弱阳性还是阴性。通过抗精子抗体检查，还可以了解这个免疫性的不孕不育是属于男性因素，还是女性因素，从而对医生确定治疗方案提供可靠的依据。 由于抗精子抗体的隐蔽，在结婚前是无法发现的，只有到了结婚后想要孩子的时候，需要抗精子抗体检查之后才会发现它的存在。 正常情况下，睾丸有着免疫屏障，当炎症或细菌感染，致使精子外溢，引起其组织的免疫反应，进而自身产生抗精子抗体。如果在进行抗精子抗体检查之后，发现抗精子抗体呈阳性或者弱阳性，则有很大的几率会导致不孕不育。 抗精子抗体是一种免疫因素，这种因素使生育力降低，从而导致不孕。患者可以根据免疫性不孕的具体原因，采取相应的治疗措施。在消除病源的基础上采用隔离，免疫抑制，中医辩证治疗的方法进行治疗，治愈率和受孕率均保持较高水平。 抗精子抗体检查的费用 抗精子抗体的检查费用是需要根据各个医院、患者接受的不同检查项目来决定的，有的仅需几十元，有的则需要几百元。但是大多数抗精子抗体的检查费用会在200元左右，这只是某个医院的参考价，具体价格可以咨询所在当地的医院。
小鼠精子畸形试验 一、目的与要求 1、熟悉精子畸形的概念及类型、精子畸形试验的实验设计、试验检测的遗传学终点。 2、学习与掌握小鼠精子畸形试验的基本方法步骤,正常精子及畸形精子的镜下观察。 3、了解精子畸形试验数据整理、分析方法及结果的评价。 二、实验原理 精子的畸形主要就是指精子形态的异常改变,大、小鼠精子畸形受基因控制,具有高度遗传性,许多常染色体及X、Y性染色体基因直接或间接地决定精子形态。因此精子形态的改变提示有关基因及其蛋白质产物的改变。大、小鼠精子畸形试验可检测受试物对于精子生成、发育的影响,而且对已知的生殖细胞致突变物有高度敏感性,故精子畸形试验可用作检测受试物在体内对生殖细胞的致突变 作用。 三、实验设计 1、动物选择:一般采用小鼠,因为小鼠比较经济,且有大量的实验结果证实小鼠在该实验系统中对受试物最为敏感。6~8周龄(体重25~35g),雄性。每组应保证至少有5只存活小鼠。 2、染毒途径:多用腹腔注射,也可采用与人体实际接触化学毒物相同的途径,如经口、吸入及皮肤接触等。 3、染毒次数及取样时间:可采用1次或每天1次连续5天的方法进行染毒。 各种化学毒物作用于精子的不同发育阶段,可在接触某种化学毒物后不同时间出 现精子畸形,故有条件时,可于给受试物后第1、4、10周处死动物,检查精子形态。因为大部分化学毒物对精原细胞后期或初级精母细胞早期的生殖细胞较为敏感,故一般均就是于首次给受试物后的第35天处死。 4、剂量选择:至少设置3个剂量组。最高剂量组5天总剂量应能使部分动物死亡,一般可取1/2 LD50为高剂量组,然后以1/2~1/4递减作为中、低剂量组。另设溶剂对照组(阴性对照组)与阳性对照组。阳性对照组可用环磷酰胺(20 mg/kg)或甲基磺酸甲酯(75 mg/kg)或甲基磺酸乙酯(60 mg/kg)进行腹腔注射,每天1次,连续5
性与健康 医药经济报/2002年/03月/29日/第A04版/ 抗精子抗体检测(MAR法)试剂盒问世 可简便、快速、准确地检测免疫性不孕不育症 汪灶标 一种能迅速而准确地诊断免疫性不育症的新型试剂盒 抗精子抗体检测(MAR法)试剂盒最近在我国研制成功。它的问世将为广大免疫性不孕症患者提供一种更经济、简便、快速、直观的临床诊断方法。 据统计,目前,全世界育龄妇女中,不孕症的发生率约占8%~17%,总人数约为8000万至1.1亿人。我国的不孕不育症患者已有2000万左右。特别是近年来,由于全球的工业化所带来的污染日益严重,以及人类的生活习惯、工作方式的改变,不孕不育症的发病率呈逐年上升趋势。据世界卫生组织(WHO)预测,在21世纪,不孕不育将成为仅次于肿瘤和心脑血管病的第三大疾病。 引起不孕不育的原因很多,免疫性因素是其中重要的原因之一,而血清和生殖道局部的抗精子抗体(AsAb)又是引起免疫性不孕不育的主要原因。混合球蛋白反应(MAR法)试验,又称混合凝集试验,主要用于诊断免疫性不孕患者体内是否有抗精子抗体存在。它以经典的Coombs试验为理论基础,能够直接检测出新鲜精子表面附着的以及体液中能同精子表面结构发生特异性结合的抗精子抗体,以活动精子与标记颗粒间的混合凝集作为精子表面存在精子抗体的指征,对临床诊断及疗效的观察具有重要的指导意义。 目前,国内临床上用于抗精子抗体检测的主要方法是酶标(ELISA)法,由于只能检查出游离抗体的存在,因此,对免疫性不育的诊断不具有足够的临床意义。 MAR法是世界卫生组织(WHO)和美国生育学会(AFS)推荐用于精子抗体检测的首选方法。该法能够直观地观察到抗体附着于活动精子的比率、部位,从而反映抗体对生育的影响。而且操作简便,无须血清,仅需精液标本,可与精液常规检查同步进行。同时,还具有快速、准确率高的优点,10分钟即可观察到结果。另外,还可观察计数活动精子附着的抗体比率是否下降,以了解治疗效果。
抗精子抗体（AsAb）检测标准操作规程(胶体金法) 1.目的 规范抗精子抗体检测的操作标准，确保检测结果的准确性 2.原理 斑点反应板上固相精子抗原与血清中的抗精子抗体形成复合物，胶体金标记的抗人IgG单抗再与复合物结合，形成肉眼可见的红色圆斑点，即为阳性结果，否则为阴性结果。 3. 标本要求： （1）标本采集：静脉抽血3ml，不抗凝。 （2）标本保存：2-8℃可保存3天，不易反复冻融。 （3）特殊样本：溶血，高脂血等特殊样本在检测时会使背景偏深影响结果判断，可尝试用生理盐水稀释血清样本后检测。 4. 检验方法 （1）将待测血清样本和试剂盒恢复室温； （2）取出反应板，与反应板中滴入试剂A二滴，静置，待试剂A完全吸入； （3）用吸管吸取待测血清样本，滴四滴（约150微升）于反应板孔中，静置，待血清完全吸入； （4）取下反应板上的蓝色耳盖，滴入试剂B三滴，静置，待试剂B 完全吸入；
（5）再滴入试剂A二滴，静置，待试剂A完全吸入，在5分钟内观察反应板孔中的现象； 5. 结果判断 （1）阳性：反应孔中显现清晰的红色质控线和红色圆斑的为阳性；（2）阴性：反应孔中只显现清晰的红色质控线为阴性； （3）无效：反应孔中未显现红色质控线，表示操作失误或试剂无效。 6. 检验结果的解释 检验结果为阳性者即为抗精子抗体检出阳性，阴性者即为抗精子抗体未检出。若检测为无效结果，则应进行重复检测，并及时与生产厂家联系。 7.注意事项 （1）本品仅用于体外诊断。 （2）本品的检测结果仅可作为疾病的辅助诊断指标。 8.临床意义 精子作为一种独特的抗原，与机体免疫系统接触后，可引起自身或同种免疫反应，产生抗精子抗体（AsAb），AsAb可通过不同的环节影响生殖过程导致不孕。抗精子抗体无论存在男方还是女方，都可导致不育。因此，AsAb的检测有助于临床上对疑为不孕症患者的诊断，也有助于临床上已诊断为阳性引起的不孕症患者的疗效观察。
精子畸形指数 导致男性不孕不育的情况有很多，其中精子畸形就是一种。畸形精子，顾名思义，就是指精子发育出现异常，发育不好。而精子畸形指数就是判断精子是否正常的标准之一啦！下面我们一起来了解一下精子畸形指数是什么吧！ 畸形精子是什么 一般畸形精子表现为头、体、尾的形态变异，头部畸形有巨大头、无定形、双头等；体部畸形有体部粗大、折裂、不完整等；尾部畸形有卷尾、双尾、缺尾等。畸形精子过多症是指在生育年龄的男性畸形精子症使男性不育的常见原因之一。 精子形态大小的正常范围 1、头部 头长3.5-5.0微米，宽2.0-3.0微米；精子头呈规则椭圆形。当精子头的长宽分别超过5和3微米时，称为大头；分别小于3和2微米时，称为小头。具有临床意义的精子头部异常，包括圆椎形（长宽分别小于5和2微米）、不规则形、双头、和梨形头。朽迈型精子头部则出现空泡。 2、体部（中段） 体部长5-7.0微米，宽1.0微米。宽超过2微米多反映胞桨小滴末完全退化，其对不育的影响尚待探讨。假如泡桨小滴大于精子头的一半，意味着精子不成熟，属于异常。 3、尾部 精子尾长45微米。尾部卷曲常与支原体感染有关。也有人报告，精子尾部出现卷曲与锌元素有关。双尾、尾断裂等畸形可能与无症状生殖系统感染有关。因此，出现这一现象可作精液微生物学检查。 畸形精子指数 畸形精子指数（teratozoospermia index，TZI）和精子畸形指数（spenn deformity index，SDI）与不育症男性患者精子密度、活动率、精子形态的关系。畸形精子指数（teratozoospermia index，TZI）的数值介于1.00（每个异常精子只有一种缺陷）和3.00（每个异常精子都有头、中段和尾部缺陷）。有报道提示，TZI 1.6与未经治疗不育夫妻的低生育率有关，而精子畸形指数（spenn deformity index，SDI）1.6是体外受精失败的阈值。因此，畸形精子指数TZI或精子畸形指数SDI小于1.6就属于正常，它代表的是精子在体内积体外受精的能力。 当然，男性朋友们如果发现自己出现了精子畸形的情况，也不用羞于见人，要及时到医院治疗，才能得到尽早有效的帮助。
抗精子抗体的产生及检测原理 抗精子抗体（antispermatozoa antibody, AsAb）既可在男性又可在女性体内产生。 男性产生的主要机制是血睾屏障因疾病或创伤受损，使隐蔽的精子或其可溶性膜抗原溢出，刺激机体免疫系统产生抗精子自身抗体。抗精子抗体的产生可以抑制精子的活动和受精，造成男性不育。 女性产生的主要机制是正常生殖道中能降解精子抗原的酶系统缺陷，致使进入的精子抗原得以保持完整，而作为同种异体抗原刺激女性免疫系统产生抗精子抗体影响生育。 抗精子抗体按对精子的作用分为凝集性、制动性、和结合型三类。据这些特点设计了多种方法，目前常用的方法有： 1. 试管－玻片凝集试验测定抗精子抗体： 原理：精子悬液与待测血清在缓冲盐水中反应，待测血清中的AsAb与精子表面抗原结合，使精子出现头对头，尾对尾或头对尾的凝集现象。 2. 精子制动试验测定抗精子抗体： 原理：在补体存在的条件下，精子制动抗体与精子表面抗原反应，使补体火花，导致精子失去活动能力。 3. ELISA法测抗体： 原理：以特异性精子可溶性抗原包被反应板微孔，待测血清中如存在AsAb，则可与之结合，再加入酶标抗人IgG抗体和酶底物/色原溶液，出现呈色反应。呈色强度可反应AsAb的水平。 4. 间接免疫荧光法测定抗精子抗体： 原理：将正常人精子充分洗涤后，包被于载玻片上，依次加待测血清河异硫氰酸荧光素标记得抗人IgG、IgA、IgM多价或单价抗体，反应后洗涤，置荧光显微镜下观察。 5. 免疫珠试验测定抗精子抗体： 原理：免疫珠试验是WHO推荐用于检测精子表面IgG、IgA、IgM类抗精子抗体（直接免疫珠试验）或检测待测血清（精浆，宫颈粘液）中抗精子抗体（间接免疫珠试验）的一种方法。直接法是将待测精子悬液与包被有兔抗人Ig（总免疫球蛋白）或包被有抗人IgG、抗人IgA、抗人IgM的聚丙烯酰胺微珠悬液混合，如精子表面有抗精子抗体，则可粘附相应的免疫珠。包被有兔抗人Ig多价抗体的免疫珠可用于筛查试验，而包被有抗Ig不同类别糠秕的免疫珠则可用于精子表面抗体的分类。间接法是将待测血清与正常精子悬液和免疫珠悬液混合，如待测血清中有抗精子抗体，可与精子结合，精子即可黏附免疫珠。用包被的抗人总Ig或包被抗人IgG、IgA、IgM抗体的免疫珠试验，可达到待测血清中AsAb筛查和分类的目的。
抗体 抗体（英语：antibody），（免疫球蛋白不仅仅只是抗体）是一种由浆细胞（效应B细胞）分泌，被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质，仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中，及其B细胞的细胞膜表面[1] 。抗体能识别特定外来物的一个独特特征，该外来目标被称为抗原。 抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒素、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。按抗体产生的来源分为正常抗体(天然抗体)，如血型ABO型中的抗A和抗B的抗体，和免疫抗体如抗微生物的抗体。按反应抗原的来源分为异种抗体，异嗜性抗体，同种抗体和自身抗体。按抗原反应的凝集状态分为完全抗体IgM和不完全抗体IgG 等。抗体在医疗实践中应用甚为广泛。如用于疾病的预防、诊断和治疗方面都有一定的作用。临床上用丙种球蛋白预防病毒性肝炎、麻疹、风疹等，国际上用抗Rh免疫球蛋白预防因Rh血型不合引起的溶血症。诊断上如类风湿因子用于类风湿性关节炎，抗核抗体(ANA)、抗DNA抗体用于系统性红斑狼疮，抗精子抗体用于原发性不孕症的诊断等;治疗上如毒素中毒用抗毒治疗以及免疫缺陷性疾病的治疗等。 19世纪后期，V on Behring及其同事Kitasato研究发现，用白喉或破伤风毒素免疫动物后可产生具有中和毒素作用的物质，称之为抗毒素(antitoxin)，随后引入“抗体”一词来泛指抗毒素类物质。抗体(antibody，Ab)是B细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的糖蛋白，主要存在于血清等体液中，是介导体液免疫的重要效应分子，能与相应抗原特异性结合，发挥免疫功能。1937年，Tiselius 和Kabat用电泳方法将血清蛋白分为白蛋白、α1、α2、β及γ球蛋白等组分，并
自然流产与抗精子抗体的相关性分析 延安大学医学院组胚教研室(延安716000) 王艳梅 杨加周 曹雪琦* 艾庆燕 赵豫凤 苗乃周 摘 要 目的:探讨抗精子抗体(A s A b)与自然流产的关系。方法:采用EL ISA检测血清A s A b。结果:116例自然流产者共检出A s A b阳性38例,阳性率23.76%,与对照组6.98%比较,有显著性差异。其中,自然流产1次的病例中,A s A b的阳性率为25.00%,2次的44.00%,3～4次的53.33%。三组之间有显著性差异。结论:A s A b的产生,能够导致自然性流产,甚至是多次流产。 主题词 流产,自然 病因学 @抗精子抗体 酶联免疫吸附测定 免疫因素与自然流产的关系越来越引起人们的重视。自然流产原因有解剖、内分泌、感染、染色体、遗传等,其中40%～80%原因不明的可能与免疫因素有关,是母体免疫排斥胎儿的结果。由于多种原因,使免疫活性细胞有机会接触精子,刺激女性免疫系统;或女性体内免疫功能紊乱;或女性对丈夫精子敏感,均可使女性产生抗精子抗体(A n tisper m an ibody,A s A b)[1]。精子作为一种独特抗原与机体免疫系统接触后,可引起自身或同种免疫反应,产生A s A b。本研究通过对116例自然流产妇女应用间接酶联免疫吸附试验(EL ISA)进行A s A b检测,以探讨其在自然流产中的作用,进一步阐明其与自然流产的关系。 材料与方法 1 研究对象 选择2004年3月～2005年9月自然流产妇女116例,年龄20～37岁,平均24.84岁;自然流产1～4次,其中自然流产1次的76例,2次的25例,3～4次的15例,所有病例排除遗传性疾病、生殖器畸形、染色体异常、内分泌异常及生殖道感染等因素。对照组129例为无流产史的正常生育妇女,21～38岁,平均25.31岁。 2 检测方法 采取早上空腹常规抽肘外周静脉血2m l,离心取血清,56℃灭活后立即置-20℃冰箱保存待测;A s A b检测试剂盒系德国SERA T EC公司产品,应用酶联免疫检测仪,采用EL ISA法检测。待测标本1∶100稀释后,取出酶标条将各孔用洗涤液洗涤1次,加阳、阴性对照物及待测标本于相应的板孔中(IgG、Ig M、IgA共3条),放入37℃水浴箱温浴1h,弃去孔中液体,每孔加(1∶250)洗涤液洗涤3次,吸干。每孔加酶标抗体2滴,放入37℃水浴箱温浴1h,弃去孔中液体,洗涤5次。每孔加四甲基联苯胺底物2滴, *延安大学图书馆 避光置室温10～15m in后加终止液1滴,置酶标仪于波长450nm处读取吸光度值。A s2A b阳性判定标准,用阳性、阴性比例,即流产组待测标本吸光与同时受检的对照标本的吸光度比值≥211判定为阳性,反之为阴性。 3 统计学处理 率的比较采用?2检验,用SPSS10.0统计软件处理。 结 果 本组116例,A s A b的阳性率为23.76%,与对照组6.98%比较,有显著性差异(P<0.01),见表1。其中,自然流产1次的病例中,A s A b的阳性率为25. 00%,2次的44.00%,3～4次的53.33%。三组之间有显著性差异(P<0.05),见表2。 表1 实验组和对照组血清A s A b阳性率比较(%) 组 别n阳性阴性 实验组11638(32.76)78(67.24) 对照组1299(6.98)120(93.02) 阳性率与对照组比较,P<0.01 表2 实验组不同流产次数血清A s A b阳性率比较(%)组 别n阳性阴性 流产1次7619(25.00)57(75.00) 流产2次2511(44.00)14(56.00) 流产3～4次158(53.33)7(46.67) 阳性率在组间比较,P<0.01 讨 论 自然流产的原因十分复杂,免疫学因素的参与和某些患者的发病率有密切关系,多种自身抗体可导致自然流产。正常精液中含有前列腺素E和一种糖蛋白,具有免疫抑制作用,精液沉淀素具有抗补体活性。这些免疫抑制因素在正常情况下可抑制女方免疫活性细胞 248陕西医学杂志2008年7月第37卷第7期