＊通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｐｅｎｇｙａｎｌｅｅ＠１６３．ｃｏｍ收稿日期：２０１３－０６－１３；修回日期：２０１３－０９－
０９基金项目：“十二五”国家科技计划支撑项目（２０１１ＢＡＤ１７Ｂ０３）；四川省育种攻关项目（２０１１ＹＺＧＧ－１１－
１）作者简介：李州（１９８６－），男，云南文山人，在读博士生，从事牧草和草坪草育种及抗逆性研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｚｈｏｕ１９８６８１４＠１６３．ｃｏｍ．
文章编号：１６７３－５０２１（２０１４）０１－００３１－
０６亚精胺对ＰＥＧ胁迫下白三叶幼苗渗透调节物质积累的影响
李 州，彭 燕＊，潘明洪，马洪平，王晓娟
（四川农业大学动物科技学院，四川 雅安 ６２５０１４
）摘要：以拉丁诺白三叶为材料，研究亚精胺对ＰＥＧ（聚乙二醇６０００）渗透胁迫下白三叶幼苗相对含水量、膜相对透性、
膜脂过氧化、叶绿素含量、有机渗透调节物质积累和可溶性蛋白含量的影响。结果表明：外源亚精胺显著提高胁迫下叶片相对含水量，降低了胁迫下叶绿素的分解，维持了显著较低的电解质渗透率和丙二醛（ＭＤＡ）含量，缓解了胁迫对膜的伤害；
并能显著提高胁迫下可溶性糖、还原糖、游离脯氨酸、甜菜碱和可溶性蛋白的积累，对游离氨基酸含量影响不明显。外源亚精胺有效提高白三叶的抗渗透胁迫能力，与亚精胺诱导了胁迫下白三叶积累更多的有机渗透调节物质，同时稳定了细胞膜系统密切相关。
关键词：白三叶；亚精胺；渗透胁迫；抗旱性；渗透调节物质中图分类号：Ｑ９４５．７８ 文献标识码：Ａ
多胺（Ｐｏｌｙ
ａｍｉｎｅ，Ｐａｓ）是广泛分布于植物体内的一类具有强烈生物活性的小分子量脂肪族含氮碱，主要包括亚精胺（Ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ，Ｓｐ
ｄ）、精胺（Ｓｐｅｒｍｉｎｅ，Ｓｐｍ）和腐胺（Ｐｕｔｒｅｓｃｉｎｅ，Ｐｕｔ）等。近年来，许多研究发现多胺在提高植物的抗逆性方面有重要作用。植物体内源多胺含量的增加能够增强
对各种逆境胁迫的抗性［１］
，而适宜浓度的外源多胺也有助于提高植物的抗逆性［２］
。逆境胁迫下，多胺
具有稳定核酸、
细胞膜及蛋白质等大分子物质的作用［３］，还可能参与某些逆境信号的传导［４］
。此外，植
物在响应干旱胁迫的过程中会积累一些有机物（如可溶性糖、脯氨酸和甜菜碱等）和无机物（如Ｋ＋、
Ｃｌ－、Ｎａ＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋等）
，以此提高细胞液的浓度来维持渗透平衡，
从而保护细胞结构。本研究通过对渗透胁迫下的白三叶（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｒｅｐｅｎｓ）添加外源亚精胺来探索亚精胺是否通过调节白三叶叶片渗透调节物质从而提高白三叶的抗旱性，哪些渗透调节物质受到调控以及渗透调节物质积累与其相应保护作用的关系，以期为提高白三叶的耐旱性寻找新的途径。
１ 材料与方法
１．１ 供试材料
以干旱敏感型白三叶拉丁诺（Ｌａｄｉｎｏ）为供试材料，采用沙培的方法培育。将白三叶种子用０．１％的高锰酸钾溶液消毒后播种在石英砂上，于２４℃光照培养箱中发芽，待发芽７ｄ后用Ｈｏａｇｌａｎｄ全营养液继续培养，温度为白天２３℃、夜晚１９℃，时长为各１２ｈ，相对湿度６５％。当幼苗长至３０ｄ（２片成熟叶片）时选取长势一致的材料用聚乙二醇６０００（ＰＥＧ
－６０００）进行渗透胁迫处理。１．２ 试验设计
本试验共设两个处理，每处理３个重复，分别为：ＰＥＧ处理［加２０％（Ｗ／Ｖ）ＰＥＧ－６０００的Ｈｏａｇ
－ｌａｎｄ全营养液］、ＰＥＧ＋Ｓｐｄ［在加２０％（Ｗ／Ｖ）ＰＥＧ－６０００的Ｈｏａｇ
ｌａｎｄ全营养液中加入０．０５ｍｍｏｌ／Ｌ的亚精胺］。ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理在ＰＥＧ－６０００渗透胁迫之前先添加０．０５ｍｍｏｌ／Ｌ的外源亚精胺进行为期２ｄ的预处
理，以保证植株对亚精胺的吸收。分别于处理的３ｄ、６ｄ、９ｄ、１２ｄ测定相应生理生化指标，
为了保持各处理溶液中药品浓度一致，每３ｄ更换一次处理液。１．３ 测定指标与方法
相对含水量（ＲＷＣ）
采用烘干法测定［５］
；电解质渗透率（ＥＬ）采用电导仪测定［６］
；丙二醛（ＭＤＡ）采用硫代巴比妥酸法测定［７］
；可溶性糖含量采用蒽酮乙酸乙酯比色法测定［８］；还原糖采用３，５－二硝基水杨酸比色法测定［８］；游离氨基酸采用茚三酮溶液显色法测定［
９］
；游离脯氨酸采用茚三酮比色法测定［１０］；甜菜碱含量采用饱和雷氏盐比色法测定［１１］
；可溶性蛋白采用考马斯亮蓝比色法测定［
８］
。１．４ 统计分析
采用Ｅｘｃｅｌ ２００３绘图，ＳＡＳ ９．１软件进行方差分析和显著性分析（Ｐ＜０．０５
）。—
１３—第３６卷 第１期Ｖｏｌ．３６ Ｎｏ．１ 中 国 草 地 学 报Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｇｒａｓｓｌａｎｄ
２０１４年１月
Ｊａｎ．２０１４
２ 结果与分析
２．１ 亚精胺对渗透胁迫下白三叶叶片相对含水量的影响
植物叶片的相对含水量（ＲＷＣ）直接反映植物体在干旱环境下水分的亏缺程度。随着渗透胁迫时间的延长，两个处理的ＲＷＣ都呈明显下降趋势，渗透胁迫１２ｄ，ＰＥＧ处理和ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理分别下降了６６％和６２％。在整个胁迫过程中ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理维持了相对较高的ＲＷＣ，并且在胁迫后３ｄ显著高于ＰＥＧ处理（
图１）。 ＊表示处理间差异显著（
Ｐ＜０．０５），下图同＊ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｂｅｔｗｅｅｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ ｓａｍｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ
ｆｉｇｕｒｅ图１ 渗透胁迫下亚精胺对白三叶叶片相对含水量的影响Ｆｉｇ．１ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｐ
ｅｒｍｉｄｉｎｅ ｏｎ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｗａｔｅｒ ｃｏｎｔｅｎｔｕｎｄｅｒ ｏｓｍｏｔｉｃ
ｓｔｒｅｓｓ２．２ 亚精胺对渗透胁迫下白三叶叶片电解质渗透率和丙二醛含量的影响
渗透胁迫过程中，两个处理电解质渗透率（ＥＬ）和丙二醛（ＭＤＡ）含量反应一致，都是随着渗透胁迫时间的延长不断增大，
说明渗透胁迫过程中两处理质膜伤害程度不断加大，膜脂过氧化产物不断积累（图２）。ＰＥＧ处理在胁迫过程中两个指标的增幅更大，
说明该处理受到的胁迫伤害也更大。在胁迫的第３ｄ、第６ｄ和第９ｄ，ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理ＥＬ显著较低（图２－Ａ），而胁迫后３ｄ，ＰＥＧ＋Ｓｐ
ｄ处理ＭＤＡ含量也显著低于ＰＥＧ处理（图２－Ｂ），说明外源亚精胺提高了渗透胁迫下白三叶叶片膜的稳定性。
２．３ 亚精胺对渗透胁迫下白三叶叶片叶绿素含量的影响
持续渗透胁迫使得两个处理的叶绿素ａ、叶绿素ｂ和总叶绿素含量下降，但ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理在胁迫中后期保持了显著较高的水平（图３）。两个处理叶绿素ａ含量在胁迫过程中下降趋势一致，从胁迫开始到１２ｄ，ＰＥＧ和ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理叶绿素ａ含量分别下降了５０．４％和４２．９％，但ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理在胁迫第６ｄ和９ｄ维持了显著高的水平（图３－Ａ）。此外，胁迫下ＰＥＧ＋Ｓｐ
ｄ处理的叶绿素ｂ含量下降缓慢，０～９ｄ几乎处于同一水平，而ＰＥＧ处理下降幅度很大，胁迫第９ｄ时ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理的叶绿素ｂ含量比ＰＥＧ处理高１５％（图３－Ｂ）。因此，ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理的叶绿素总量在胁迫过程中也维持在了显著较高的水平（图３－
Ｃ）。图２ 渗透胁迫下亚精胺对白三叶叶片电解质渗透率和丙二醛含量的影响
Ｆｉｇ．２ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｏｎ ｅｌｅｃｔｒｏｌｙｔｅ ｌｅａｋａｇ
ｅ ａｎｄ ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ ｕｎｄｅｒ ｏｓｍｏｔｉｃ ｓｔｒｅｓｓ２．４ 亚精胺对渗透胁迫下白三叶叶片渗透调节物质和可溶性蛋白的影响
２．４．１ 亚精胺对渗透胁迫下白三叶叶片可溶性糖和还原糖含量的影响
如图４所示，两处理可溶性糖含量在渗透胁迫前期和中期逐渐积累，胁迫后期迅速下降。ＰＥＧ处
—
２３—中国草地学报 ２０１４年 第３６卷 第１
期
图３ 渗透胁迫下亚精胺对白三叶叶片叶绿素含量的影响
Ｆｉｇ．３ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｏｎ ｃｈｌｏｒｏｐｈｙ
ｌｌ ｃｏｎｔｅｎｔ ｕｎｄｅｒ ｏｓｍｏｔｉｃ ｓｔｒｅｓｓ图４ 渗透胁迫下亚精胺对白三叶叶片可溶性糖和还原糖含量的影响
Ｆｉｇ．４ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｏｎ ｔｏｔａｌ ｓｏｌｕｂｌｅ ｓｕｇａｒ ａｎｄ ｒｅｄｕｃｉｎｇ
ｓｕｇａｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ｕｎｄｅｒ ｏｓｍｏｔｉｃ ｓｔｒｅｓｓ理可溶性糖积累到第６ｄ后开始下降，而ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理可溶性糖持续积累到第９ｄ，且在胁迫３ｄ、６ｄ和９ｄ显著高于ＰＥＧ处理，
说明外源亚精胺增强了渗透胁迫下白三叶可溶性糖的积累。两处理还原糖含量在第３ｄ迅速增加，此时ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理积累了显著较多的还原糖，之后两处理还原糖含量逐渐下降，但ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理在第６ｄ和９ｄ较ＰＥＧ处理有显著高的还原糖含量，
积累优势明显。２．４．２ 亚精胺对渗透胁迫下白三叶叶片游离氨基酸和脯氨酸含量的影响
在响应渗透胁迫的过程中，游离氨基酸含量在两个处理中表现一致，胁迫前９ｄ含量迅速增加，之后出现小幅度降低。与０ｄ相比较，胁迫１２ｄ后ＰＥＧ和ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理游离氨基酸含量都增加了５５．７％，两处理在整个胁迫过程中游离氨基酸含量没有表现出显著差异（图５－Ａ）
。两处理游离脯图５ 渗透胁迫下亚精胺对白三叶叶片游离氨基酸和脯氨酸含量的影响
Ｆｉｇ．５ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｏｎ ｆｒｅｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ａｎｄ ｐ
ｒｏｌｉｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｕｎｄｅｒ ｏｓｍｏｔｉｃ ｓｔｒｅｓｓ—
３３—李 州 彭 燕 潘明洪 马洪平 王晓娟 亚精胺对ＰＥＧ
胁迫下白三叶幼苗渗透调节物质积累的影响
氨酸含量随着胁迫时间的延长逐步积累，前９ｄ增幅较大，第１２ｄ只有小幅上升且ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理在胁迫第３ｄ积累了显著较高的游离脯氨酸（图５－Ｂ）。２．４．３ 亚精胺对渗透胁迫下白三叶叶片甜菜碱含量的影响
渗透胁迫下两处理甜菜碱含量出现显著差异，达到显著水平（图６）。ＰＥＧ处理在渗透胁迫下甜菜碱含量增加，
但幅度较低，胁迫后期几乎处于同一水平；而ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理随着胁迫程度的加深出现大幅度上升，并在胁迫第９ｄ达到最大值，此时甜菜碱含量是ＰＥＧ处理的１．３倍，差异显著。可见，外源亚精胺诱导了渗透胁迫下白三叶积累更多的甜菜碱。
图６ 渗透胁迫下亚精胺对白三叶叶片甜菜碱含量的影响Ｆｉｇ．６ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｐ
ｅｒｍｉｄｉｎｅ ｏｎ ｂｅｔａｉｎｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｕｎｄｅｒｏｓｍｏｔｉｃ
ｓｔｒｅｓｓ２．４．４ 亚精胺对渗透胁迫下白三叶叶片可溶性蛋白含量的影响
胁迫前３ｄ，ＰＥＧ和ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理可溶性蛋白含量上升，之后一直处于下降趋势，ＰＥＧ处理下降更为明显。胁迫第６ｄ和第９ｄ，ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理维持了显著较高的可溶性蛋白含量，比ＰＥＧ处理高２９％和２２％，胁迫１２ｄ两处理可溶性蛋白含量基本
趋于一致（图７
）。３ 讨论
积累可溶性糖、脯氨酸和甜菜碱等物质是植物响应水分亏缺最主要的方式之一，
这些有机渗透调节物质对于植物体应对水分胁迫十分重要。渗透调节主要通过两种方式参与植物水分亏缺响应：一是当植物处于中度缺水的情况下，调节渗透压提高植物对于水分的吸收；二是通过渗透保护维持细胞成图７ 渗透胁迫下亚精胺对白三叶叶片可溶性蛋白含量的影响Ｆｉｇ．７ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｐ
ｅｒｍｉｄｉｎｅ ｏｎ ｓｏｌｕｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔｕｎｄｅｒ ｏｓｍｏｔｉｃ
ｓｔｒｅｓｓ分结构和功能的完整性［
１２］
。而当植物处于严重水分亏缺时，渗透保护是植物能否生存下来最主要的因素，耐旱性强的植物往往具有较强的渗透保护能
力［１３］
。Ｉａｎｎｕｃｃｉ等［１４］和Ｔｕｒｎｅｒ［１
５］研究发现，渗透调节物质在白三叶响应干旱胁迫过程中发挥着重要
作用，
其他一些研究也支持同样的观点［１６］
。本研究中，外源亚精胺能有效提高白三叶叶片可溶性糖、还原糖和甜菜碱含量，
特别是在渗透胁迫中期均达到显著高的水平（Ｐ＜０．０５），ＰＥＧ处理可溶性糖含量
在胁迫第９ｄ开始降低，而ＰＥＧ＋Ｓｐｄ处理却持续增加，并在第９ｄ达到峰值。相较于ＰＥＧ处理，ＰＥＧ
＋Ｓｐ
ｄ处理甜菜碱含量则在整个胁迫过程中都表现出了显著积累的优势。正如Ｍｉｃｈａｅｌ等［１７］
研究所得出的结论一样，水分亏缺下白三叶积累更多的碳水化合物等调节叶片渗透压，更好地应对干旱胁迫。虽然外源亚精胺对于渗透胁迫下白三叶叶片游离总氨基酸的积累没有显著影响，但外源亚精胺显著提高了胁迫前期白三叶叶片脯氨酸的积累。脯氨酸的积累是植物响应干旱胁迫最明显的反应，而耐旱性
强的品种往往在干旱胁迫下脯氨酸的代谢增强［
１８］
。此外，外源亚精胺处理也积累了更多的可溶性蛋白，可溶性蛋白的亲水性较强，能明显增强细胞的持水力，
因而可溶性蛋白的积累可以大大增强干旱胁迫下植物细胞束缚水的能力［１９］
。因此，可溶性蛋白能
与其他渗透调节物质一起增强渗透胁迫下白三叶的渗透调节能力，使其能够更好的吸水和保水，这可能是添加外源亚精胺处理的白三叶始终在渗透胁迫下保持较高相对含水量的主要原因。
当植物遭受如干旱等逆境时，体内会产生活性氧等自由基，从而使得生物膜发生过氧化作用，丙二
—
４３—中国草地学报 ２０１４年 第３６卷 第１
期
醛（ＭＤＡ）则是膜脂过氧化最主要的产物之一，ＭＤＡ含量的高低反映了植物膜脂过氧化的程度［２０～２１］。而干旱胁迫下膜脂过氧化程度增大必然引起膜脂分子结构发生紊乱，膜稳定性降低，电解质渗透率升高，植物受到的伤害程度随之加大［２２～２３］。本试验结果表明，外源亚精胺有效提高了渗透胁迫下白三叶细胞膜稳定性，显著降低了细胞膜过氧化产物在叶片内的积累，并使得叶绿素降解速度减慢，这与细胞中积累更多的可溶性糖和脯氨酸等渗透调节物质相对应。维持较高的叶绿素含量有利于白三叶在渗透胁迫下捕获更多的光能和合成更多的碳水化合物，同时显著增高的碳水化合物也能在细胞中起到渗透保护的作用，这对于维持细胞膜的稳定性十分重要。Ｃｒａｍｅｒ［２４］和Ｓｚａｂａｄｏｓ等［２５］认为，脯氨酸在干旱防御上的作用不仅仅是渗透调节，其在渗透保护功能上意义重大，它的积累和代谢可以维持干旱胁迫下细胞内结构和膜的稳定性，同时具有清除超氧阴离子等自由基维持膜稳定性的作用，这与本试验中亚精胺诱导渗透胁迫下白三叶积累更多的游离脯氨酸，同时提高白三叶细胞膜稳定性相一致。
４ 小结
外源亚精胺提高了渗透胁迫下白三叶叶片渗透调节物质和可溶性蛋白的含量，这些物质的积累一方面通过渗透调节功能降低白三叶叶片水势从而提高叶片相对含水量；另一方面通过渗透保护的作用维持胁迫下白三叶细胞结构和膜的稳定性，防止叶绿素等细胞器的过度降解，使其能在干旱胁迫下正常运转，最终增强了渗透胁迫下白三叶的耐受性。但亚精胺调控渗透胁迫下白三叶的耐受性是一个复杂而又系统的过程，研究还需进一步深入。
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［１５］ Ｔｕｒｎｅｒ Ｌ Ｂ．Ｔｈｅ ｅｘｔｅｎｔ ａｎｄ ｐａｔｔｅｒｎ ｏｆ ｏｓｍｏｔｉｃ ａｄｊｕｓｔｍｅｎｔ ｉｎｗｈｉｔｅ ｃｌｏｖｅｒ（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｒｅｐｅｎｓ Ｌ．）ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ
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１６６．
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５
３
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李 州 彭 燕 潘明洪 马洪平 王晓娟 亚精胺对ＰＥＧ胁迫下白三叶幼苗渗透调节物质积累的影响
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Ｍａｔｔｅｒ ｉｎ Ｌｅａｖｅｓ ｏｆ Ｗｈｉｔｅ Ｃｌｏｖｅｒ ｕｎｄｅｒ ＰＥＧ ＳｔｒｅｓｓＬＩ Ｚｈｏｕ，ＰＥＮＧ Ｙａｎ，ＰＡＮ Ｍｉｎｇ－ｈｏｎｇ，ＭＡ Ｈｏｎｇ
－ｐｉｎｇ，ＷＡＮＧ Ｘｉａｏ－ｊｕａｎ（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｉｃｈｕａｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
Ｙａ’
ａｎ６２５０１４，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｏｎ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｗａｔｅｒ ｃｏｎｔｅｎｔ，ｅｌｅｃｔｒｏｌｙｔｅ ｌｅａｋａｇ
ｅ，ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ，ｃｈｌｏｒｏ－ｐｈｙｌｌ ｃｏｎｔｅｎｔ，ｏｓｍｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ
ｓｏｌｕｔｅｓ ａｎｄ ｓｏｌｕｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｗｈｉｔｅ ｃｌｏｖｅｒ（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｒｅｐｅｎｓ）ｉｎｌｅａｖｅｓ ｕｎｄｅｒ ＰＥＧ ｓｔｒｅｓｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｕｎｄｅｒ ｏｓｍｏｔｉｃ ｓｔｒｅｓｓ，ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｍ－ｐｒｏｖｅｄ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｗａｔｅｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｒｅｄｕｃｅｄ ｔｈｅ ｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌ ｉｎ ｌｅａｖｅｓ；ｔｈｅ ｔｒｅａｔ－ｍｅｎｔ ｏｆ ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｌｏｗｅｒ ｅｌｅｃｔｒｏｌｙｔｅ ｌｅａｋａｇｅ ａｎｄ ＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ｅｘｏｇ
－ｅｎｏｕｓ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｒｅｌｉｅｖｅｄ ｔｈｅ ｉｎｊｕｒｙ ｔｏ ｍｅｍｂｒａｎｅ；ｔｈｅ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｌｕｂｌｅ ｓｕｇａｒ，ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｓｕｇａｒ，ｆｒｅｅｐｒｏｌｉｎｅ，ｂｅｔａｉｎｅ ａｎｄ ｓｏｌｕｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ，ｂｕｔｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｆｒｅｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ ｃａｎ ｅｆｆｅｃ－ｔｉｖｅｌｙ ｉｍｐｒｏｖｅ ｏｓｍｏｔｉｃ ｓｔｒｅｓｓ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｏｆ ｗｈｉｔｅ ｃｌｏｖｅｒ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｏｓｍｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｓｏｌｕｔｅｓ ｗｈｉｃｈ ｈａｖｅ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｏｓｍｏｔｉｃ ａｄｊｕｓｔｍｅｎｔ ａｎｄ ｏｓｍｏｐ
ｒｏｔｅｃｔｉｏｎ．Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｗｈｉｔｅ ｃｌｏｖｅｒ（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｒｅｐｅｎｓ）；Ｓｐｅｒｍｉｄｉｎｅ；Ｏｓｍｏｔｉｃ ｓｔｒｅｓｓ；Ｄｒｏｕｇｈｔ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ；Ｏｓ－ｍｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ
ｓｏｌｕｔｅ—
６３—中国草地学报 ２０１４年 第３６卷 第１期
实验八植物细胞悬浮培养 实验目的：学习和掌握植物细胞悬浮培养的操作技术与方法。 实验器材： 超净工作台、恒温培养室、高压灭菌器、冰箱、恒温培养箱、培养瓶、250 mL 、500 mL三角瓶、镊子、酒精灯等。 配置MS液体培养基（2，4-D 2 mg/L+1%甘露醇 +3% 蔗糖，pH 5.8）分装于250ml的三角瓶中，每瓶50ml。 实验材料：烟草叶片愈伤组织。 实验方法： 1.70%乙醇净化工作台并擦洗干净，将所用的材料、工具、培养基等 放入工作台。打开紫外灯和风机，15分钟后关闭紫外灯开始方可操作。 2. 在超净台上用无菌镊子夹取出生长旺盛的松软愈伤组织，放入 150ml三角瓶中并轻轻夹碎,每个三角瓶加入培养基20-30ml，每瓶接种1-2g愈伤组织，按愈伤组织与液体培养基1∶10的比例，以保证最初培养物中有足够量的细胞。 3.接种后的三角瓶用天平称取重量并记载，然后置于摇床上，在转速 100-120rpm，25℃下培养以及散射光条件下，进行振荡悬浮培养。 4.每周更换新鲜液体培养基两次，每次更换1/3。每次更换新鲜培养 基时称取重量。 5. 每个人接种悬浮培养细胞1瓶，观察并记录细胞生长情况。 6. 培养7天后，制作细胞生长曲线：为了解县浮培养细胞的生长动态，可用以下方法绘制生长曲线图： 鲜重法：在转代培养的不同时间，取一定体积的悬浮培养物，离心收集后，称量细胞的鲜重，以鲜重为纵座标，培养时间为横座标，绘制鲜重增长曲线。
烟草遗传转化实验 实验目的 烟草是遗传转化的模式植物，已经建立了一套完善的转化再生体系。本实验以烟草为实验材料，了解根癌农杆菌介导法的基本原理和一般步骤，掌握遗传转化的基本操作技术。实验要求： 掌握根癌农杆菌侵染植物获取转基因材料的方法；理解农杆菌介导途径进行基因转化的机理；了解转基因植物筛选的方法。 实验原理 根癌农杆菌是一种能诱发植物产生肿瘤的细菌，根癌农杆菌中诱导植物产生肿瘤的质粒，简称为Ti质粒。野生型农杆菌的Ti质粒，含有两个与致瘤有关的区域：一个是T－DNA 区，含致瘤基因；另一个是毒性区，在T－DNA的切割、转移与整合过程中起作用。用于植物基因转化的农杆菌Ti质粒载体系统的构建，是将野生Ti质粒中的致瘤基因删除，并在T－DNA区域内插入适当的选择标记和多克隆位点。 p BI121载体是常用的植物表达载体，载体的骨架是pUC18，以CaMV35S启动子驱动的新霉素磷酸转移酶基因NPTII为卡那霉素（kan）抗性选择标记基因，含有卡那霉素抗性基因作为筛选基因。β－葡萄糖苷酶gus基因作为报告基因，转化的获得的转基因细胞、组织或植株，具有抗卡那霉素的特性，经组织化学染色呈蓝色。 实验器材 摇床、超净工作台、小型离心机、冰箱、移液抢、镊子、手术刀、酒精灯、棉球、培养皿、三角瓶、滤纸、牛皮纸、牙签。 实验材料 植物材料：烟草无菌苗 农杆菌与载体：农杆菌LBA4404 p BI121 YEB培养基：牛肉膏(5 g/L)、蛋白胨(5 g/L)、酵母提取物(1 g/L)、蔗糖(5 g/L)、MgSO4 (0.5 g/L)、pH 7.0 烟草分化培养基：MS + 2mg/L 6-BA + 0.5mg/L IAA 烟草生根培养基：MS + 0.5mg/L IAA 卡那霉素（Kan）母液：50mg/ml，过滤除菌，分装，－20℃保存。 头孢霉素（cef）母液：300mg/ml，过滤除菌，分装，－20℃保存。 利福平(rif): 50mg/ml，过滤除菌，分装，－20℃保存。
农杆菌介导的烟草转基因技术 一、实验目的 了解转基因的基本原理及操作方法。 二、基本原理 根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）是一种能诱发植物产生肿瘤的细菌，根癌农杆菌中含有诱导植物产生肿瘤的质粒（Tumor inducing plasmid），简称为Ti质粒。野生型农杆菌的Ti质粒，含有两个与致瘤有关的区域：一个是T-DNA区（transferred DNA region），含致瘤基因；另一个是毒性区（Virulence region），在T-DNA的切割、转移与整合过程中起作用。农杆菌可将T-DNA插入到植物基因组中，并且可以通过减数分裂稳定地遗传给后代。我们将目的基因插入到经过改在的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株。 三、材料 1、植物材料：烟草无菌苗 2、农杆菌与载体：EHA105；PBI121 四、方法步骤 1、试剂的配制 （1）LB固体培养基：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L，琼脂8g/L。（2）液体MS/MT培养基PH：5.8-6.0 （3）烟草共培养培养基：固体MS培养基 （4）烟草筛选培养基： MS +（2.0mg/L）6-BA + （0.3mg/L）NAA + （30g/L）蔗糖+ （400mg/L）头孢霉素+ （50mg/L）卡那霉素+ （7.5g/L）琼脂PH：5.8-6.0 （5）烟草生根培养基：固体MS培养基 2、农杆菌侵染菌液的制备方法： （1）超净工作台紫外灯灭菌15min，接种环酒精灯灼烧灭菌备用 （2）铺皿：LB（50mg/L卡那霉素+25mg/L利福平） （3）划线：用接种环沾取预转化的农杆菌菌液于铺好的培养基划“之”字或者“#”字（4）封皿，做标记 （5）28℃恒温培养1d-2d
白三叶 白车轴草（Trifolium repens L）又名白三叶、白花三叶草、白三草、车轴草、荷兰翘摇等，原产于欧洲和北非，并广泛分布于亚、非、澳、美各洲。在中国亚热带及暖温带地区分布较广泛。在中国西南、东南、东北等地均有野生种分布.在东北、华北、华中、西南、华南各地均有栽培种。 特性 白三叶为短期多年生草本，生长期达5年，高10-30cm，茎匍匐蔓生。主根短，侧根和须根发达。掌状三出复叶，托叶卵状披针形。花序球形，顶生，具花20-50朵，密集，花冠白色、乳黄色或淡红色，具香气。荚果长圆形，含3-4粒阔卵形种子，千粒重0.5-0.7克。 白三叶为长日照植物，不耐荫蔽，具有明显的向光性运动。具有一定的耐旱性，35℃左右的高温不会萎蔫，其生长的最适温度为16-24℃，在积雪厚度达 20cm、积雪时间长达1个月、气温在-15℃的条件下能安全越冬。在平均温度≥35℃、短暂极端高温达39℃时也能安全越夏。而且其对土壤要求不高，喜酸不耐盐，也可在砂质土中生长，最适pH值5.5-7，甚至4.5也能生长。 栽培技术 1、整地施肥：白车轴草种子细小，播前要精细整地，除净杂草。在土壤黏重、降水量多的地方种植，应开沟作畦以利排水。整地同时施足基肥，一般每亩施钙、镁、磷肥20-25千克，加入适当的农家肥。 2、种子处理： 1千克白车轴草种子混10克根瘤菌种，用少量水拌匀后播种。 3、播种时间：春、秋均可播种。中国南方春播在3月中旬前，秋播宜在10月中旬前。播种量为0.25-0.5千克/亩。 4、田间管理：注意苗期防除杂草，其耐涝性稍差，雨水过多时及时排涝降渍，以利于生长。成坪后除了出现极端干旱的情况，一般不浇水，浇水宜本着少次多量的原则。 经济价值 白车轴草适口性优良，消化率高，为各种畜禽所喜食，适宜养殖牛、羊、食草鱼等。同时，随草龄的增长，其消化率的下降速度也比其他牧草慢。具有耐践
烟草的价值 烟草的食用价值、药用价值、工业价值 烟草是一种经济价值较高的作物，烟草除主要用于吸食外，还有较为广泛的用途。 一、烟草是重要的模式植物 对于植物学科的发展来说，无论是基础研究还是应用研究，烟草作为模式植物都起了很大的作用，尤其是在遗传、繁育、生理、生化和后期采收代谢方面。烟草种子数量多，品系之间特别容易杂交，尤其是它的染色体里有许多标记性基因，因此，是一种进行遗传学研究的绝佳研究材料。它的许多明显的化学、物理学和植物学特征，也为科学研究提供了许多便利。 二、烟草蛋白的食用价值 烟叶富含蛋白质，烤烟烟叶在10％左右，晒烟和白肋烟可高达20％。烟叶提取的蛋白可制作多种食品，有广泛用途，剩下的烟叶仍可用作卷烟原料。烟叶中的蛋白质分为可溶性蛋白和不溶性蛋白。可溶性蛋白中一半左右是叶绿体蛋白质（FractionIprotein,FI蛋白），另一半为其他可溶性蛋白质的复合物（FractionIIprotein,FII蛋白）。一些研究结果表明，植物叶蛋白尤以烟草叶片中可溶性蛋白含量高，FI蛋白中的各种必需氨基酸含量不仅均高于世界粮农组织（FAO）制定的蛋白制品中必需氨基酸含量标准，而且其中的酪氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸和亮氨酸都超过该标准1倍左右，比一些主要粮食作物如水稻、小麦、玉米、大豆蛋白质中的必需氨基酸含量都高，表明烟叶中FI蛋白具有较高的营养价值。烟叶蛋白质比鸡蛋、乳酪和牛奶更适合人体吸收利用。而且烟草再生能力强，一年可多次收获，烟叶产量高，利用鲜烟叶提取蛋白，其亩产量可超过大豆，其他作物更无法相比。 三、烟草有重要的药用价值 烟草中所含的泛琨10是目前治疗心肌梗塞等心脏病的特效药物。从烟叶中提取烟碱烟碱具有使精神兴奋和镇静两方面的温和作用。最近的医学研究又发现，烟碱可以缓解托瑞特综合症，阿尔茨海默病、帕金森氏综合症、溃疡性结肠炎和注意力缺乏症；而且烟碱制成农药可防治农作物害虫，剩余物质可用作饲料和肥料，其前景也很可观。由于烟草叶蛋白具有高纯度、低盐分、氨基酸组成平衡和利用率优于酪蛋白的特性，所以非常适用于肾脏病人和烧伤病人的使用。而且烟叶含硒的硒化蛋白质除了FI蛋白的应用价值外，重要的是在医疗和维护人体健
北京地区冷地型草坪草之外的常用优良地被植物简介 园林地被植物是指适用于园林绿化的一些能覆盖地表面的低矮植物，不仅包括一年生、二年生和多年生草本植物，还包括一些适应性较强的苔藓、蕨类植物、常绿和落叶木本地被、攀缘藤本植物和宿根花卉。地被植物都容易生长、定居成为群落，可在大块地面种植成为单一的群体，或进行恰当的混植。目前国内外利用的地被植物很多，约有200多种，其中在北京地区种植或应用过的有90多种，除去我们常见的冷地型草坪草外，主要的地被植物有以下几种： 1.荚果蕨（Matleuccia struthiopteris/M. pensylvanica） 为蕨类植物，观叶，耐荫能力极强，可植于林下或散植于草坪绿地中作点缀。 2.平枝栒子（Cotoneaster horizontalis Decne.） 为蔷薇科落叶或半常绿匐枝灌木，5月开花，花粉白色，9月结球形鲜红色的果实，经冬不落。耐旱耐瘠薄，抗病虫害能力强，适于护坡和遮挡不良环境，也能用于疏林草坪做装饰地被。 3.砂地柏(Sabina vulgaris Ant.) 为柏科匍匐常绿灌木，极耐干旱，耐寒，稍耐荫。生长势旺，适宜于在坡地、河堤和林缘作地被成片栽植，或在建筑物的周围作基础种植，亦可在岩石园中与山石配置。由于极耐干旱，故也是屋顶绿化的极好材料。
4. 迎春花 (Jasminum nudiflorum Lindl.) 为木樨科落叶灌木，春节前后开花，花鲜黄色。耐旱、耐碱、适应性强，适于栽植在庭院、绿地之中或草坪的边缘，在宅旁、池旁与假山石配置，十分雅致美观；由于其根蘖萌发能力很强，作为堤岸护坡材料也非常理想。 5. 常春藤 (Hedera nepalensis K. Koch var.sinensis (Tobl.) Rehd.) 为五加科常绿藤本，叶型美观，花淡黄色或淡绿白色，果实球形，成熟时红色或黄色。耐荫、耐旱，适于作庭园中的立体绿化材料，也可作立交桥、墙壁、岩石以及斜坡等的覆盖地被。
白三叶介绍及种植技术 白三叶又称白车轴草，原产欧洲，广泛分布于温带及亚热带高海拔地区。我国云南、贵州、四川、湖南、湖北、新疆等地都有野生分布，长江以南各省有大面积栽培。白三叶在我国一直作为牧草，近几年采用做草坪草，并逐渐得到人们的认可。它形成的草坪美观、整洁，具有很好的观赏价值。 1.植物学特征 多年生草本。茎匍匐，长30-60cm，无毛，节上生根。掌状复叶，互生，具长柄；小叶3，宽椭圆形、倒卵形至近倒心脏形，长1.2-3cm，宽0.8-2cm，先端圆或凹陷，基部榷形，边缘有细锯齿，两面几乎无毛；小叶无柄或极短；托叶卵装披针形，抱茎。花密集成球形的头状花序，从匍匐茎伸出，总花梗长15-30cm；花萼筒状，萼齿三角状披针形，较萼管稍短；花冠白色或淡红色；子房线形，花柱长而稍弯。荚果卵状长圆形，长约3mm，包被于膜质、膨大、长约1cm的宿萼内，含种子2-4粒；种子褐色，近圆形。 2.生态适应性 喜温凉湿润气候。生长最适温度为19-24℃，适应性较其他三叶草广。耐热耐寒性比红三叶、杂三叶强，也耐荫，在部分遮荫的条件下生长良好。为簇生草坪草，靠匍匐茎蔓延。对土壤要求不严，耐贫瘠，耐酸，最适排水量好、富含钙质及腐殖质的黏质土壤，不耐盐碱。 3.建植与管理措施 主要为种子直播建坪。种子细小，播前须精细整地，并且要保持一定的土壤湿度。白三叶不耐践踏，应以观赏为主。它再生能力强，较耐修剪，修剪高度一般为7.5-10cm。苗期生长缓慢，易受杂草侵害，应注意及时除草。 4.使用特点
选择种子中国的优质草种作为观赏草坪或作为水土保持植被，也可用于草坪的混播种，可以固氮，为与其一起生长的草坪草提供氮素营养。 白三叶种植技术 --------------------------------------------------------------------- 白三叶（White Clover）为豆科车轴草属多年生草坪植物，植株低矮，根系发达，寿命一般均在10年以上。主茎短，由茎节上长出匍匐茎，节上向下产生不定根，向上长叶，具有很强的侵占性，成坪迅速。根部具有较强的分蘖能力和再生能力，保持和豆科根瘤菌共生的特性。三小叶着生于长柄顶端，故名“三叶草”。头形总状花序，于夏秋两季陆续不断抽出花序。种子成熟后具有自播繁衍能力。 白三叶喜光及温暖湿润气候，生长最适宜温度为20℃左右，能耐半荫，有较强的适应性。在我国长江流域的广大地区栽培，冬季可保持常绿不枯。对土壤要求不严，只要排水良好，各种土壤皆可生长，尤喜富于钙质及腐殖质粘质土壤。 近几年来由于园林绿化事业被日益重视，白三叶在园林绿化和水土保持方面起到越来越多的作用。因其繁殖容易且管理粗放，与杂草有很强的竞争力，因而被广泛地应用到机场、高速公路、江堤湖岸等固土护坡绿化中去，起到良好的地面覆盖和绿化美化效果。 目前多采用种子直播法繁殖。种子主要来源于新西兰和澳大利亚，市场上流行的品种分别为产于新西兰的惠亚（Huia）及产于澳大利亚的海发（Haifa）等。在我国贵州省牧区亦有大量种质资源可供开发利用。 种子黄褐色,有光泽,千粒重为0.5-0.7克,种子发芽率高,出苗率95%以上。因种子细小，要求土地平整、精细，采用人工撒播或机械撒播的方式进行播种。每平方米种量为10-15克左右。春秋季均可播种，但秋播宜早，迟则越冬困难。春播稍迟则易受杂草侵害。播后保持土壤湿润，3-5天即可出苗，10天全苗。幼苗期生长缓慢，怕干旱，并注意除杂草。白三叶能固定空气中的氮素，用根瘤菌合成氮肥，因而成株可不施或少施氮肥。 白三叶不耐践踏，因而以观赏为主。在大面积机场绿地及固土护坡等粗放型养护管理绿地中，白三叶是一个极好的园林绿化草种。目前，选择种子中国的优质草种，上海的浦东国际机场已播种近百万平方米，而外环线及太浦河两侧均大面积选择了白三叶，颜色碧绿均一，长势喜人，为城市建设增添了一道亮丽的风景线。
盐碱地植物品种简介 高羊茅是盐碱地草坪发展首选品种。首先，高羊茅有较强的耐盐碱能力，具有成坪速度快，抗旱、耐热、耐涝、耐贫瘠、耐践踏、病虫危害轻、枯草层不明显等特点，草坪相应使用寿命较长。草坪质地上只是略逊于早熟禾，但近年来随着育种工作的发展，一些细叶品种相继问世，如新秀、快乐岛、锐部、TF－66、盆景等，缩小了差距；匍匐剪股颖耐盐碱能力较强，生长迅速。但也有不抗旱性、需肥较多、修剪频繁的特点，养护一不及时，底部草黄枯，易形成草甸层，影响草坪美观和寿命； 红花槐、白蜡、美国黑杨以及高羊茅草、狗牙根草 低洼盐碱地，由于地势低平，排水不畅，加之强烈蒸发，盐分不断积累于地表，水文地质条件恶化。所以，在低洼盐碱地造林，要慎重选择树种，现将适宜低洼盐碱地种植的树种介绍如下，供参考。 一、乔木树种 刺槐：:刺槐的根可直接固定氮素，是沙碱地造林的先锋树种。注意不宜在排水不良的低洼地种植。 旱柳是沙碱地速生树种之一。性耐水湿，宜于扦插繁殖，适宜在轻度硫酸盐土地上生长。在涝碱相随地区的河渠两侧及盐碱洼地可种植，宜作为先锋树种及沙丘前挡林带和薪炭林。亦是农田防护林的良好树种。 垂柳：又名水柳，喜生湿地和水边，中度耐盐碱，可作盐碱地重要防护林树种。可采用扦插或埋干繁殖。 臭椿：生长迅速，繁殖容易。应选为盐碱地初期造林的先锋树种，并可护岸防风，可在渠道两侧及地势较高处的道路两侧种植。 苦楝耐盐力仅次于刺槐，能在干燥瘠薄的盐碱地上生长，虫害少、生长快、萌芽力强。 乌桕耐盐性中等，木材品质较好。 毛白杨：在肥沃湿润的地方生长良好，在轻盐碱地也能生长正常，并能耐短期水淹，适宜作速生丰产林、农田防护林以及四旁绿化的优良树种。 杂交杨：如中林46杨、72杨、69杨等，在土壤含盐量0.5％，雨季有积水的情况下生长正常，为用材林、防护林、四旁绿化的良好速生树种。 白榆：较耐盐碱，土壤含盐量不超过0.4％时生长良好。可作用材林、农田防护林及四旁绿化的优良树种。
园林绿化中盐碱地土壤改良方法 园林绿化中盐碱地土壤改良方法 摘要：盐碱土的物理、化学性质，对树木生长造成生理障碍，植物群落不易形成，对建设城市生态园林带来很多困难。将盐碱土的改良措施与造园艺紧密结合，既为园林绿化建设创造了丰富多彩的山水景观，又达到了改土治盐的目的，从而可使环境达到绿化、美化， 城市生态效益、经济效益等方面得到改善。 关键词：园林绿化、盐碱环境、盐碱土、改良措施。 一、土壤简介 所谓盐碱环境是指在水体、土壤、地层、大气、各种宏观或微观环境中含有较高的盐分。盐碱环境不能适合园林绿化植物的生长需要，从而使园林绿化建设难以满足当代城市经济和生态经济发展的需要。因此，盐碱土的改良和利用，对生态环境的保护，城市经济的发 展都是一个极其重要的问题。 盐碱土地区由于土壤含盐量较高，大多为不毛之地，迫切需要改善绿化环境面貌。因此，在排盐的基础上，用乔、灌木和草本植物组建群落，形成新的生态系统。有效的减少地表水分的蒸发，抑制盐碱的上移和积累。同时乔、灌、草所形成的强大根系，吸收水分进行蒸腾，起到了降低地下水位作用，有效的防止土壤盐渍化，形成良好 的生态循环。 植物和环境是统一的整体，它既受环境的制约，又反过来对环境以重大的影响。在土壤粘重、含盐量高、地下水位高的盐碱地上，应选择耐水湿，抗盐碱的树木花草。如绒毛白蜡、柳树、国槐、柽柳,草坪草如白三叶等。这些树种在生命活动中，需要大量的水分，在管理中也可大量浇水，这些水除部分被植物吸收消耗外，绝大部分将成为重力水，携盐碱渗入土壤或通过渗管排出土体以外，使土壤脱盐淡化。同时植物在其生命活动中，借助它发达的根系，释放出大量的二氧化碳和有机酸，从而降低土壤中的pH值，置换土壤表面所吸附的钠离子，随水排出土体以外，使土壤的化学、物理性质都得
绪论 一、人与自然的关系 人类依附于自然（原始氏族社会及聚落时代）、 人类依赖于自然（渔猎时代由聚群而定居） 人类开始离开自然（农耕时代及城邑的建立） 人类破坏自然（工业化时代及大规模的建设） 人与自然的和谐相处（后工业化及信息化时代） 二、城市与园林的关系 ※城市公园运动（The City Park Movement） 奥姆斯特德主持建造了纽约中央公园既开了现代景观设计之先河，更为重要的是，它标志着普通人生活景观的到来，美国的现代景观设计从中央公园起就不再是少数人所赏玩的奢侈品，而是普通公众身心愉悦的空间。（图） ※田园城市构思（The Garden City） ?农田环抱城市，面积比城市大5倍； ?人口控制在3.2万人左右； ?城市直径不超过2公里； ?中心公共绿地面积多达60公顷； ?宽阔的林荫道、放射状的林间小径、住宅、庭院、菜园等。（图） ※雅典宪章（1933年） ?现代城市要解决居住、工作、游憩和交通四大功能。 ?明确提出要在城市中建造公园、运动场和儿童游戏场； ?要求把城市附近的河流、海滩、森林和湖泊等自然景观优美地段开辟为公共绿地。※马丘比丘宪章（1977年） ※世界环境宣言（1992年） 三、中国传统园林的历史发展和特色 1、历史轨迹 古典园林的萌芽——囿 饲养禽兽供帝王狩猎活动 开凿池沼作养殖灌溉之用 筑高台供祭祀之需 建简单建筑为休息观赏之备 皇家园林的形成——秦汉宫苑（图） 自然山水园的兴起——魏晋南北朝的园林 自然山水园的发展——唐宋园林
古典园林的辉煌时期——明清园林（多图） 2、中国园林的分类 皇家宫苑——壮丽精巧 私家园林——简朴淡雅 寺庙园林——天然幽致 3、中国传统园林的特色 效法自然的布局 诗情画意的构思 园中有园的手法 建筑为主的主景 因地制宜的处理 四、国外的园林历史发展与特色 世界园林体系：东方园林体系 欧洲园林体系 西亚园林体系 ?日本庭园（图：枯山水） ?西亚园林的特色（图：阿尔罕布拉宫、泰姬陵）院落式的布局 设有中庭 整形的人工水池和喷泉 各种植物 ?文艺复兴时期意大利台地园特色（图：埃斯特别墅）恰当地运用地形辟出台地、 整齐地格局和建筑设计的原则、 结合地形组织多种理水形式、 模样绿丛植坛、运用明暗浓淡不同的绿色配置、 运用大小比例的不同引起对规则布局感的消失?法国古典园林的形成及特色（图：凡尔赛宫） 勒诺特： 在丛林中辟出风景线 运用原野上自然的水体形式 构图中心的雕塑喷泉 乡土树种 ?英国自然风景园林特色
水生植物方案 1 2020年4月19日
浙江宁波奉化亭下灌区续建配套节水改造 三期工程生态挡墙工程 绿化初案 宁波高新区怡洋三维边坡绿化技术开发有限公司 二〇一一年八月
浙江宁波奉化亭下灌区续建配套节水改造 三期工程生态挡墙工程 一、三维排水柔性生态边坡工程绿化施工方案选择 .... 错误!未定义书签。 1、立地条件分析 .......................................................... 错误!未定义书签。 2、绿化方案编制原则 .................................................. 错误!未定义书签。 4、绿化方案简介 .......................................................... 错误!未定义书签。 二、三维排水柔性生态边坡工程喷播施工规范 ............ 错误!未定义书签。 1、喷播施工主要材料 .................................................. 错误!未定义书签。 2、喷播技术.................................................................. 错误!未定义书签。 3、喷播施工工艺 .......................................................... 错误!未定义书签。 三、三维排水柔性生态边坡工程压播施工规范 ............ 错误!未定义书签。 1、压播植物选择 .......................................................... 错误!未定义书签。 2、压播施工工艺 .......................................................... 错误!未定义书签。 四、三维排水柔性生态边坡工程植物选择.................... 错误!未定义书签。 1、植物选择制约因素 .................................................. 错误!未定义书签。 2、生态边坡植物应具备的条件................................... 错误!未定义书签。 3、本项目的植物配比及简介 ...................................... 错误!未定义书签。 五、三维排水柔性生态边坡工程管理养护.................... 错误!未定义书签。 1、草坪植物的管养 ...................................................... 错误!未定义书签。 2、水生植物的管养 ...................................................... 错误!未定义书签。
目录 1、申报省级园林单位的请示 2、河南省园林单位申报表 3、单位简介 4、创建省级园林单位工作汇报 5、创建省级园林单位领导小组 6、创建省级园林单位工作实施方案 7、绿化卫生管理制度 8、办公院园林绿化建设管理情况报告 9、绿化养护标准 10、绿化景观设计图纸及图纸说明
XXX〔2012〕39号签发人：XXX XX局 关于申报省级园林单位的请示 省园林局： 根据《河南省园林小区、园林单位评选办法》和《河南省园林小区、园林单位评选标准》及有关文件精神，为加强我局绿化建设，提高单位整体绿化水平，推动我县创建省级园林城市活动的深入开展，经过全体干部职工的共同努力，我局机关庭院绿化
面积达1106平方米，绿地率达42%，绿化覆盖率达到了53%，在绿地管理、安全管理、卫生保洁等方面都达到一定标准，成功创建了省级文明单位、省级卫生先进单位和市级园林单位。通过认真自查，对照河南省园林单位申报条件，认为符合省级园林单位的基本条件，特予以呈报，恳请上级主管部门审批! 特此请示。 XX局 二O一二年五月八日 主题词：省级园林单位请示 XX局办公室2011年5月8日印发
河南省园林单位申报表 申报单位：XX局申报时间：2012年5月 联系人姓名XXX 联系电话XXXXXXXXXXX 详细地址X县新区金堤路123号邮政编码XXXXX 园林绿化规划设 计图纸有 规划设计单位名 称 河南森卉园林工程有限公司 园林绿化管理及 养护机构队伍有 管理、养护职工 人数 管理人员6人，养护职工10人 单位占地 总面积（亩）3.92 绿地占地面积 （亩） 1.52绿地率（%）42 绿化覆盖率（%） 53 墙体垂直绿化面 积（平方米）341 屋顶绿化面积 （平方米） 单位沿街围墙长度沿街透空围墙长度（M） 门前“三包”责 任落实情况 落实 上级分配的义务 植树完成指标 100% 实际完成情况100% 单位的环境卫生管理制度有 有 管理与保护职 工人数 48 无 园林绿化管理、 养护的资金经费来源上级拨付与自筹 近三年平均每 年绿化养护投 入经费（元） 13万 申报材料目录 有备注
高羊茅是盐碱地草坪发展首选品种。首先，高羊茅有较强的耐盐碱能力，具有成坪速度快， 抗旱、耐热、耐涝、耐贫瘠、耐践踏、病虫危害轻、枯草层不明显等特点，草坪相应使用寿命较长。草坪质地上只是略逊于早熟禾，但近年来随着育种工作的发展，一些细叶品种相继问世，如新秀、快乐岛、锐部、TF－66、盆景等，缩小了差距；匍匐剪股颖耐盐碱能力较强，生长迅速。但也有不抗旱性、需肥较多、修剪频繁的特点，养护一不及时，底部草黄枯，易形成草甸层，影响草坪美观和寿命； 红花槐、白蜡、美国黑杨以及高羊茅草、狗牙根草 低洼盐碱地，由于地势低平，排水不畅，加之强烈蒸发，盐分不断积累于地表，水文地质条件恶化。所以，在低洼盐碱地造林，要慎重选择树种，现将适宜低洼盐碱地种植的树种介绍如下，供参考。 一、乔木树种 刺槐刺槐的根可直接固定氮素，是沙碱地造林的先锋树种。注意不宜在排水不良的低洼地种植。 旱柳是沙碱地速生树种之一。性耐水湿，宜于扦插繁殖，适宜在轻度硫酸盐土地上生 长。在涝碱相随地区的河渠两侧及盐碱洼地可种植，宜作为先锋树种及沙丘前挡林带和薪炭林。亦是农田防护林的良好树种。 垂柳又名水柳，喜生湿地和水边，中度耐盐碱，可作盐碱地重要防护林树种。可采用扦插或埋干繁殖。 臭椿生长迅速，繁殖容易。应选为盐碱地初期造林的先锋树种，并可护岸防风，可在渠道两侧及地势较高处的道路两侧种植。 苦楝耐盐力仅次于刺槐，能在干燥瘠薄的盐碱地上生长，虫害少、生长快、萌芽力强。 乌桕耐盐性中等，木材品质较好。 毛白杨在肥沃湿润的地方生长良好，在轻盐碱地也能生长正常，并能耐短期水淹，适 宜作速生丰产林、农田防护林以及四旁绿化的优良树种。 杂交杨如中林46杨、72杨、69杨等，在土壤含盐量0.5％，雨季有积水的情况下生长正常，为用材林、防护林、四旁绿化的良好速生树种。 白榆较耐盐碱，土壤含盐量不超过0.4％时生长良好。可作用材林、农田防护林及四旁 绿化的优良树种。 桑树耐盐、耐水性都很强，可在农田防护林两侧种植。 梨树为耐寒、耐涝、中度耐盐性果木树种之一。如用杜梨作为嫁接梨树的砧木，耐涝 碱性更强。能在含盐量0.6％土壤中生长。