离体家兔小肠运动及其影响因素
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【摘要】目的：观察乙酰胆碱对离体家兔小肠平滑肌的影响。方法：将离体小肠固定在离体小肠灌流装置里，在保证各影响因素不互相干扰的情况下,分别给予家兔离体小肠平滑肌标本0.2%生理盐水（NaCl）0.2mL、1：100000乙酰胆碱（Ach）0.2mL、0.5mg/1mL阿托品0.2mL、0.5mg/1mL阿托品0.2mL+1：100000乙酰胆碱0.2mL刺激，完成每次刺激并出现明显现象后用38℃的台氏液冲洗离体家兔小肠平滑肌标本，观察其收缩活动特点并记录。结果：结果显示当滴加0.2%生理盐水（NaCl）0.2mL刺激离体肠肌时，张力曲线没什么变化；当用1：100000乙酰胆碱（Ach）0.2mL刺激离体肠肌时，张力曲线则明显上升，且频率加快；当滴加0.5mg/1mL阿托品0.2mL刺激时，张力曲线明显下降，且频率减慢；当先滴加0.5mg/1mL阿托品0.2mL 再加上1：100000乙酰胆碱0.2mL刺激时，张力曲线变化不明显。结论：乙酰胆碱（Ach）有促进离体家兔小肠平滑肌运动的作用。
关键词：离体家兔小肠平滑肌；乙酰胆碱；张力曲线。
Abstract：Objective: to observe the acetylcholine on the influence of intestinal muscle of rabbit small intestine in vitro. Methods: in vitro small intestine in vitro intestinal perfusion device fixed, in guarantee under the condition of each influence factor does not interfere with each other, in vitro intestinal muscle specimens were given the rabbit0.2% saline (Nacl)0.2mL, 1：100000Ach0.2mL, 0.5mg/1mLatropine0.2mL, 0.5mg/1mLatropine0.2mL + acetylcholine 0.2mLstimulation, complete with 38 ℃after each stimulus and a significant phenomenon of Taiwan's fluid colonics muscle specimens and observe the characteristics of its contraction activities and record. Results: the results showed that when add saline (Nacl) stimulation in vitro intestinal muscle, nothing change tension curve; When using the acetylcholine stimulation in vitro intestinal muscle, tension curves are obvious rise, and the frequency to speed up; When add atropine stimulation, tension curve decreased obviously, and slow frequency; When add the acetylcholine and atropine on, tension curve is irregular. Conclusion: acetylcholine (Ach) on in vitro rabbit intestinal muscle has enhanced the role of the movement.
[Key words]：Isolated rabbit intestinal muscle;A cetyl choline；Tension curve.
引言：消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样，具有肌肉组织共有的特性，如兴奋性、传导性和收缩性等。但消化道平滑肌兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等特点。【1】给予离体肠肌以接近与在体情况的适宜环境，消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。本实验以台氏液作灌流液。其离子成分和pH与哺乳动物的体液相似。目前，国内外对乙酰胆碱的研究进展迅速，各方交流广泛，但其对小肠运动的影响却未见报道。故而拟此实验探讨乙酰胆碱对家兔离体小肠运动的影响，并初步探讨其机制，为乙酰胆碱的进一步研究提供参考依据。
1．材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物：健康家兔一只，体重适宜，雌雄不限，xxxxxx动物实验中心提供。
1.1.2 实验药品：4℃台式液，38℃台式液，0.9％ NaCl，1:100000 乙酰胆碱，0.5ml 阿托品。
1.1.3 实验仪器：RM6240微机生物信号采集处理系统，张力换能器，麦氏浴槽，恒温水泵，恒温水浴槽，空气泵；木锤，手术剪，手术刀，注射器，烧杯，不锈钢碗，铁架台，细线。
1.2 方法
1.2.1 实验装置准备准备4℃台式液，持续通入空气30min。调节超级恒温器温度至38℃，麦氏浴槽中加入10-15mL台式液。通气管接入空气泵管道，并调节空气流量至浴槽中气泡一个个逸出为止。换能器输出线连接微机生物信号处理系统并设置实验参数。
1.2.2 离体家兔小肠标本制作取家兔一只，用木槌击其头部至昏。立即剖开腹腔，找到十二指肠。剪取回肠2-3cm置于氧饱和的4℃台式液培养皿中。沿肠壁清除肠系膜，用注射器吸取台式液洗净肠内容物。在小肠标本两端对角壁处，分别用缝针穿线打结。
1.2.3 标本固定与调整取备好的肠管一段，一端固定于通气钩，置于盛有38℃的台式液的麦氏浴槽中；另一端连结张力换能器。调整连结张力换能器的绳子的松紧度，使其前负荷在2g左右。待离体肠肌张力稳定后，开始准备试剂并按序操作。
1.2.4 实验过程
1.2.4.1 平衡5min后，加入0.9%NaCl0.2mL，观察小肠张力变化，1min后换液2次，记录张力曲线图，并利用区间测量出小肠收缩幅度的变化。
1.2.4.2 平衡2min，待张力恢复用药前水平，加入1:100000Ach0.2mL，观察小肠张力变化1min，再换液2次，记录张力曲线图，并利用区间测量出小肠收缩幅度的变化。
1.2.4.3 平衡2min，待张力恢复用药前水平，加入0.5mg/mL阿托品0.2mL，观察小肠张力变化1min，再换液2次，记录张力曲线图，并利用区间测量出小肠收缩幅度的变化。1.2.4.4 平衡2min，待张力恢复用药前水平，先加入0.5mg/mL阿托品0.1mL，再加入1:100000Ach0.1mL，观察小肠张力变化1min，再换液2次，记录张力曲线图，并利用区间测量出小肠收缩幅度的变化。结束实验，处理数据。【1】
2.结果:在正常情况下，离体肠肌收缩的幅度、频率、张力、时间及间隔都相对稳定，波形没有明显的变化;加入0.9%NaCl0.2mL后，离体肠肌张力曲线没有什么变化;加入1:100000Ach0.2mL后，离体肠肌张力曲线明显上升，收缩幅度减小，频率加快;加入阿托品后，离体肠肌张力曲线下降，振幅减小，频率减慢;先加入0.5mg/mL阿托品0.1mL 后再加入1:100000Ach0.2mL后，离体肠肌张力曲线变化不明显。
2.1生理盐水对离体家兔小肠平滑肌运动的影响
2.2乙酰胆碱对离体家兔小肠平滑肌运动的影响
2.3阿托品对离体家兔小肠平滑肌运动的影响
2.4阿托品5个波后加乙酰胆碱对离体家兔小肠平滑肌运动的影响
3.讨论
3.1在恒温通气并加入0.2%生理盐水（NaCl）0.2mL情况下，离体家兔小肠平滑肌能自发地进行节律地收缩，其收缩幅度、频率、张力、时间以及间隔都相对稳定，波形无明显变化。在此条件下，离体家兔小肠肠段生活的环境与在家兔体内的环境相似，所以它的表现正常；
3.2加入1:100000Ach0.2mL后，曲线快速上升，收缩频率变快，收缩幅度变大，离体小肠活动增强。乙酰胆碱（Ach）对离体家兔小肠运动有影响，Ach是一种神经递质，它能特异性的作用于各类胆碱能受体【2】。所以Ach具有促进离体家兔小肠平滑肌运动的作用；
3.3加入0.5mg/mL阿托品0.2mL后，曲线快速下降，收缩频率变慢，收缩幅度减小，离体
小肠活动减弱。肠道主要受副交感神经支配，小肠有一个复杂的壁内神经丛，它的终末神经元属于胆碱能，主要与运动有关，可被阿托品阻断，从而使运动受到抑制。阿托品抑制受体节后胆碱能神经支配的平滑肌与腺体活动，并根据该品剂量大小，有刺激或抑制中枢神经系统作用【3】。阿托品对胆碱受体都有高度亲和力，都可以和受体产生可逆性结合，产生竞争性拮抗作用，阿托品与受体结合后，对节后胆碱能神经支配的效应细胞上的Ｍ受体有阻断作用，所以平滑肌收缩频率和收缩张力都减小。所以阿托品具有抑制离体家兔小肠平滑肌运动的作用。
3.4因为阿托品阻碍了Ach与M受体的作用，导致肠肌收缩的变化不明显。实验的过程中，在先滴加阿托品后加入Ach时，离体肠肌的张力曲线没有明显的变化，
4.结论
一定浓度的乙酰胆碱（Ach）有促进离体家兔小肠平滑肌运动的作用。
5．参考文献
【1】陆源，林国华，杨午鸣.机能学实验教程[M].第二版.北京:科学出版社,2010.6:179. 【2】流雲伴月.词条乙酰胆碱[DB/OL].
https://www.doczj.com/doc/f112734083.html,/subview/1471085/15167361.htm#viewPageContent,
2015-06-25/2015-11-15
【3】requiem_de.词条阿托品[DB/OL].
https://www.doczj.com/doc/f112734083.html,/doc/4974000-5196693.html,2015-08-24/2015-11-15
6．附加实验
6.1材料和方法
6.1.1 实验动物：家兔、浙江中医药大学动物实验中心提供
6.1.2实验药品：0.9%NaCl溶液、1：100000肾上腺素、1mol/L盐酸、1mol/L NaOH溶液
室温台式液
6.1.3实验仪器（同1.1.3）
6.2.1实验装备准备（同1.2.1）
6.2.2离体家兔小肠标本制备（同1.2.2）
6.2.3 标本固定与调整（同1.2.3）
6.2.4 实验过程
6.2.4.1 待标本平衡2min后，向麦式浴槽中的台式液中加入0.9%NaCl0.2mL，观察并记录小肠张力变化，1min后换液2次，记录张力曲线图，并利用区间测量出小肠收缩幅度的变化。
6.2.4.2 待标本平衡2min，待张力恢复用药前水平，向麦式浴槽中的台式液中加入1:100000肾上腺素0.2mL，观察并记录小肠张力变化1min，再换液2次，记录张力曲线图，并利用区间测量出小肠收缩幅度的变化。
6.2.4.3 待标本平衡2min，待张力恢复用药前水平，向麦式浴槽中的台式液中加入1mol/L 盐酸0.2mL，观察小肠张力变化1min，再换液2次，记录张力曲线图，并利用区间测量出小肠收缩幅度的变化。
6.2.4.4 待标本平衡2min，待张力恢复用药前水平，向麦式浴槽中的台式液中加入1mol/L NaOH溶液0.2mL，观察小肠张力变化1min，再换液2次，记录张力曲线图，并利用区间测量出小肠收缩幅度的变化。
6.2.4.5 待标本平衡2min，待张力恢复用药前水平，放出麦式浴槽中的台式液，加入室温台式液，观察小肠张力变化1min，再换液2次，记录张力曲线图，并利用区间测量出小肠收缩幅度的变化。
6.2.4.6 待标本平衡2min，待张力恢复用药前水平，停止空气泵，观察小肠张力变化1min，记录张力曲线图，并利用区间测量出小肠收缩幅度的变化。结束实验，处理数据。
结果
生理盐水对离体家兔小肠平滑肌运动的影响
氢氧化钠对离体家兔小肠平滑肌运动的影响
缺空气对离体家兔小肠平滑肌运动的影响
肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌运动的影响
室温台氏液对离体家兔小肠平滑肌运动的影响
盐酸对离体家兔小肠平滑肌运动的影响
实验4 离体家兔肠肌运动 [摘要] 目的：观察HCl、NaOH、18摄氏度台氏液和肾上腺素乙酰胆碱对离体家兔肠肌运动的影响。方法：利用RM6240系统采集实验数据，并进行统计分析。结果：统计分析得最大张力较对照组的P<0.01,最小张力的P<0.05,张力差值>0.05, 说明8个小组的最大张力和最小张力较对照组差异显著，张力差值差异不显著。结论：肠肌易受到离子环境、神经递质、激素和温度影响，HCl、乙酰胆碱对肠肌收缩有加强作用，NaOH、肾上腺素、18℃台氏液对肠肌收缩有抑制作用。 [关键词] 离体家兔肠肌；张力； 1材料 1.1实验动物家兔。 1.2主要仪器张力换能器，微机生物信号采集处理系统，麦氏浴槽，超级恒温器；兔手术台，通气管，手术器械。 1.3主要试剂台氏液，HCl,NaOH,肾上腺素，乙酰胆碱溶液。 2方法 2.1体家兔肠肌标本制备：取健康家兔一只，用木槌击其头部致昏，立即剖开腹部，找到十二指肠取出15cm左右一段，置于氧饱和的台氏液培养皿中，，沿肠壁除去肠系膜，用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，然后将十二指肠剪成1.5cm8段，在台氏液培养皿中将每段肠肌在其两端对角壁处缝针穿线并打结。注意保持肠管通畅，勿使其封闭。 2.2标本固定：肠管一端连线系于张力换能器的悬臂梁上，然后放入37氏度麦氏浴槽中，再将肠管另一端系于与曹固定钩上，调节肌张力至2-3g。 2.3实验系统连接及参数设置: （1）麦氏浴槽中加15ml台氏液，调节超级恒温器的温度，使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5摄氏度。通气管接百分之95氧气+百分之5的二氧化碳混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量，调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。 （2）能器接输出线接微机生物信号处理系统，仪器参数：开启RM6240系统，点击第一通道，选择“张力”。 3 实验观察 3.1 滴加HCl，观察并记录其收缩幅度，反应稳定后换液冲洗。 3.2 滴加NaOH，观察并记录其收缩幅度，待曲线恢复至基线或基本稳定后换液冲洗。 3.3用18摄氏度的台氏液灌流肠肌，观察并记录其收缩幅度，待恢复正常。 3.4加入肾上腺素溶液后，观察其反应。反应稳定后换液冲洗。 3.5 加入乙酰胆碱溶液，观察并记录其反应。 3.6 统计方法结果以+ S 表示，用Excel统计函数进行数据统计。 4. 实验结果 数据分析统计结果如下表： 得结果当p<0.05差异显著；p>0.05差异不显著。 与对照组比较：*P<0.01 , **P<0.05 , ***P>0.05，前两者差异显著，后一者差异不显著。 5.讨论 1正常情况下,我们观察到离体十二指肠平滑肌在台氏液中可以自动地、缓慢地收
. 实验目的一 、学习离体小肠平滑肌灌流的实验方法；1 、证明小肠平滑肌具有自动节律性和紧张性活动，观察若干刺激对离体小肠运动的影响。2 实验原理二 动物的胃肠道由平滑肌组成，胃肠道平滑肌除具有肌肉的共性，如兴奋性、传导性和收可以形成多种形式的运主要表现为紧张性和自动节律性收缩，缩性之外，尚有自己的特性，小肠还有分节运动及摆动。胃还有明显的容受性舒张，主要有紧张性收缩，蠕动。此外，动，、温度以及气体供应等pH如果将动物的小肠平滑肌离体，放置在各种化学成分、渗透压、并可以观察可保持离体小肠段长时间地存活下来，因子十分接近机体的内环境的溶液中时，温度刺激、化学刺激十分到小肠平滑肌的自动节律性、紧张收缩性、伸展性和对机械牵拉、将小肠的一端通常用台式液做灌流液，敏感，而对电刺激和切割刺激不敏感等一系列特性。固定，另一端连张力换能器，即可通过一定的记录装置记录下小肠肌的收缩曲线。使用仪器、材料三 仪器：细线，注射器，恒温平滑肌槽，计算机生物信号采集处理系统，张力换能器，万1、能支架，螺旋夹，双凹夹，温度计，橡胶管，制氧机等。溶液，溶液，1mol/LHCl：10000乙酰胆碱，1êCl1:50002、材料：台氏液，肾上腺素，12 1mol/LNaOH溶液，阿托品等。. 实验步骤四37摄氏度。、开启恒温平滑肌槽电源，使其恒温工作点定在1 2-3cm长的十二指肠，用台氏液漂洗，置于低温台氏液中备用。、猝死兔子，剪取2连接各种仪器，将小肠的两端分别与标本固定钩和张力换能器连接，让制氧机正常为台3、氏液供氧，进入计算机生物信号采集处理系统。摄氏度台氏液中的肠段节律性收缩曲线，待中央标本槽内的台氏液37、先后观察、记录4待台氏液中恢复供氧，停氧1min ,记录肠段节律性收缩曲线，温度稳定在37摄氏度后，℃37记录肠段节律性收缩曲线。再灌流分别换成22℃，45℃的台氏液，的小肠稳定后，溶溶液，1êCl溶液，台氏液待肠段活动恢复后，依次滴加1mol/LNaOH1mol/LHCl2乙酰胆碱，阿托品观察肠段收缩曲线的改变。每次实验：100005000肾上腺素，1：液1 次。37在观察到明显变化后，都应用预先准备好的℃台氏液冲洗3实验结果及分析五 ）缺氧对离体小肠活动的影响（1收缩张力最小值为/min,17次从图一可以看出，正常情况下，离体家兔肠段收缩频率为对浴槽内的离体小肠停氧的瞬间可以看到基线明显上移接着又下降回35g。26.8g，最大值为34.6g，最大值为。收缩张力最小值为原来状态，其节律为16次/min, 23.7g 张力：g 图一缺氧对离体小肠活动的影响（12.5s/Div）s 单位：1 / 5 . 分析：在缺氧情况下，家兔离体肠段收缩频率和强度都略有下降，但在缺氧瞬间上移的基线是小肠对生理需要的适应，故收缩有所加强但时间很短。从实验得到的数据可以说明，氧气也是影响小肠活动的因素，缺氧时对小肠收缩活动有抑制作用。）低温对离体小肠活动的影响（2最大张力次/min，小肠收缩张力最小为16g,离体小肠在适宜的温度下，其节律为17℃的台氏液后，
不同因素对家兔离体肠肌收缩的影响 浙江中医药大学 【摘要】目的观察乙酰胆碱（Ach）、肾上腺素（E）、氢氧化钠溶液（NaOH）、盐酸溶液（HCl）、温度以及缺空气条件对家兔离体肠肌运动的因素。方法使用RM6240生物信号采集处理系统，通过不同因素（Ach、E、NaOH、HCl、温度（25℃）以及缺空气条件）对家兔离体肠肌进行作用，记录肠肌收缩幅度变化曲线及数据结果并分析机理。结果Ach、NaOH可使肠肌收缩明显，E、HCl、25℃条件、缺空气使肠肌收缩变弱。结论Ach、NaOH兴奋肠肌，促进肠肌收缩活动，E、HCl、25℃条件、缺空气抑制肠肌收缩活动。 【关键词】离体肠肌；家兔；收缩运动 【Abstract】 Objective Observation acetylcholine (Ach) and epinephrine (E), sodium hydroxide solution (NaOH), hydrochloric acid solution (HCl), temperature and lack of air condition of rabbit in vitro intestinal muscle movement factors. Methods Use RM6240 biological signal collection and disposal system, through the different factors (Ach, E, NaOH, HCl, temperature (25℃) and lack of air condition) of rabbit in vitro intestinal muscle for effect, record intestinal muscle contraction amplitude variation curve and data results and analysis mechanism. Results Ach, NaOH can make the intestinal muscle contraction obvious, E, HCl, 25℃condition, lack of air make intestinal muscle contraction become weak. Conclusions Ach, NaOH excited intestinal muscle, promote intestinal muscle contraction activities, E, HCl, 25℃condition, lack of air inhibit intestinal muscle contraction activities. 【Key Words】In vitro intestinal muscle; Rabbit; Contraction movement 1.材料与方法 1.1实验对象：家兔1只，浙江中医药大学动物实验中心提供。 1.2实验药品：台式液、乙酰胆碱、肾上腺素、氢氧化钠溶液、盐酸溶液。 1.3实验仪器：恒温浴槽、木槌、麦氏浴槽、棉线若干、手术剪、氧气泵、微机生物信号采集处理系统、张力传感器、缝针、培养皿。 1.4实验方法与步骤 1.4.1安装好实验装置，将恒温浴槽调至38℃。 1.4.2用木棰猛击家兔后脑延髓部，致其昏迷后立即打开腹腔，找到胃幽门与十二指肠交界处，取出十二指肠回肠，放入冷台式液内。先用20ml注射器冲洗内容物，冲洗干净后剪成若干长约2cm的小肠段（每一实验小组一段）在其两端结扎，一端做一短环固定在通气麦氏浴槽内，另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在38℃的加有台式液的麦氏浴槽内，并调整好台式液充气量（小气泡连接不断）。 1.4.3实验准备：调节扎线与张力换能器，开启张力换能器，启动计算机RM6240生物信号采集系统，启用一通道，调节参数，使基线归零，使图形位于屏幕中央，便于观察。1.4.4 实验观察项目： （1）在屏幕曲线显示正常时，向麦氏浴槽中滴入两滴乙酰胆碱，观察并记录其收缩幅度，记录足够波形后换液冲洗。 （2）向麦氏浴槽中滴入两滴肾上腺素，观察并记录其收缩幅度，记录足够波形后换液冲洗。
传出神经系统药物对家兔离体肠管平滑肌的影响 实验目的 1、掌握离体平滑肌的实验方法。 2、观察传出神经系统药物对离体家兔小肠平滑肌的作用 教学时数2学时 实验原理 一、离体实验 1、所用组织：心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验 2、特点：实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间，可进行大量 药物的筛选。 3、要求：离体实验需在一定生理环境下进行，模拟体内环境。 （1）温度：38±0.5℃ （2）通氧气：1－2气泡/s （3）营养液：含有一定离子和葡萄糖的溶液，不同的组织所选用的营养液不同。 二、离体肠管实验 1、肠管的选择：根据实验目的的不同进行选择 （1）小肠：十二指肠、空肠、回肠 （2）自律性：频率较慢，起博点位于十二指肠，自律性自上而下渐弱。 （3）空肠多做定性实验，回肠多做定量实验 2、肠内受体及作用原理 （1）受体：家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。 （2）作用：α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张；M受体兴奋可使小肠平滑肌兴奋而收缩。 （3）药品对受体的作用：
1、氯化乙酰胆碱（Ach）：M受体激动剂，乙酰胆碱可兴奋M受体，使小肠收缩幅度 增加，蠕动加强。 2、阿托品(Atro)：M受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无作用，可阻断 M受体，对抗乙酰胆碱的M样作用，使肠管收缩幅度降低。 3、肾上腺素(Ad)：α、β受体激动剂，可激活α、β受体（主要是β2受体），α、β 受体激动可产生与M受体激动相反的效应，表现为肠管舒张，小肠蠕动减弱。 4、氯化钙（Bacl2）：①Ba2+进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩，②Ba2+可使细 胞膜发生去极化。所以加入Bacl2肠管会发生强直性收缩，Bacl2并非作用于受体，所以阿托品不能对抗这一作用。 实验材料 1．动物：家兔 2．药品①5X10-4氯化乙酰胆碱 ②0.5％硫酸阿托品 ③0.1%盐酸肾上腺素 ④20％BaCL2 3、器材：RM6240多媒体化生物信号记录分析系统、PC80586计算机、张 力传感器、保温式麦氏浴槽、超级恒温水浴、“L”型通气钩、高位吊瓶、量 筒、烧杯、培养器、氧气瓶、外科剪刀、眼科剪刀、眼科镊子、缝衣针、棉线、注射器、台式营养器。 实验方法 一、首先调试RM6240系统，使进入肌张力测定状态． 1．在主菜单中用鼠标选择<实验>中的<消化>，选择系统显示<平滑肌生理特性>。 2．在界面右侧控制参数区选择<张力>,〈选择3g〉,扫描速度1.0s/div,确定信号输入，选择〈通道2〉，在工具菜单选择快速归零（空载时钩上无任何东西）。 3．在主菜单中选择〈示波〉，进入示波状态。
一实验目的 1学习离体小肠平滑肌灌流的实验方法； 2、证明小肠平滑肌具有自动节律性和紧张性活动，观察若干刺激对离体小肠运动的影响。二实验原理 动物的胃肠道由平滑肌组成，胃肠道平滑肌除具有肌肉的共性，如兴奋性、传导性和收缩性之外，尚有自己的特性，主要表现为紧张性和自动节律性收缩，可以形成多种形式的运 动，主要有紧张性收缩，蠕动。此外，胃还有明显的容受性舒张，小肠还有分节运动及摆动。 如果将动物的小肠平滑肌离体，放置在各种化学成分、渗透压、pH、温度以及气体供应等 因子十分接近机体的内环境的溶液中时，可保持离体小肠段长时间地存活下来，并可以观察 到小肠平滑肌的自动节律性、紧张收缩性、伸展性和对机械牵拉、温度刺激、化学刺激十分 敏感，而对电刺激和切割刺激不敏感等一系列特性。通常用台式液做灌流液，将小肠的一端 固定，另一端连张力换能器，即可通过一定的记录装置记录下小肠肌的收缩曲线。 三使用仪器、材料 1 仪器：细线，注射器，恒温平滑肌槽，计算机生物信号采集处理系统，张力换能器，万 能支架，螺旋夹，双凹夹，温度计，橡胶管，制氧机等。 2、材料：台氏液，1:5000肾上腺素，1 : 10000乙酰胆碱，1%CaCl2溶液，1mol/LHCI溶液，1mol/LNaOH 溶液，阿托品等。 四.实验步骤 1、开启恒温平滑肌槽电源，使其恒温工作点定在37摄氏度。 2、猝死兔子，剪取2-3cm长的十二指肠，用台氏液漂洗，置于低温台氏液中备用。 3、连接各种仪器，将小肠的两端分别与标本固定钩和张力换能器连接，让制氧机正常为台 氏液供氧，进入计算机生物信号采集处理系统。 4、先后观察、记录37摄氏度台氏液中的肠段节律性收缩曲线，待中央标本槽内的台氏液 温度稳定在37摄氏度后，停氧1min，记录肠段节律性收缩曲线，恢复供氧，待台氏液中 的小肠稳定后，分别换成22 C, 45 C的台氏液，记录肠段节律性收缩曲线。再灌流37 C 台氏液待肠段活动恢复后，依次滴加1moI/LNaOH溶液，1moI/LHCI溶液，1%CaCI2溶液1: 5000肾上腺素，1: 10000乙酰胆碱，阿托品观察肠段收缩曲线的改变。每次实验在观察到明显变化后，都应用预先准备好的37 C台氏液冲洗3次。 五实验结果及分析 (1)缺氧对离体小肠活动的影响 从图一可以看出，正常情况下，离体家兔肠段收缩频率为17次/min,收缩张力最小值为 26.8g,最大值为35g。对浴槽内的离体小肠停氧的瞬间可以看到基线明显上移接着又下降回原来状态，其节律为16次/min,收缩张力最小值为23.7g，最大值为34.6g。 张力：g ■0 图一缺氧对离体小肠活动的影响(12.5s/Div) 单位：s
不同因素对家兔离体肠肌运动的影响 姓名：浙江中医药大学200*级********专业 * 班 * 组学号：摘要：目的研究0.01%乙酰胆碱（Ach）、0.01%肾上腺素(E)、1当量NaOH、1当量HCl、25℃台氏液、缺氧等条件对家兔离体肠肌运动的影响。方法本实验取家兔离体肠肌，并用生物信号采集处理系统记录其在不同因素作用下的张力曲线。结果实验结果显示当滴加0.01%乙酰胆碱、NaOH刺激离体肠肌时，张力曲线明显上升，且频率加快，当用0.01%肾上腺素、HCl、25℃台氏液、缺氧等条件刺激离体肠肌时，张力曲线则下降，且频率减慢。结论0.01%乙酰胆碱、NaOH能促进肠肌的运动，而0.01%肾上腺素、HCl、25℃台氏液、缺氧等因素则抑制肠肌的运动。 前言 肠道平滑肌有壁内神经丛，因此有自动节律性收缩的特性，其特性起源于肌肉自身并受中枢神经系统和体液因素的调节[1]。平滑肌对某些化学物质（如：酸、碱等）及消化道神经释放的递质的刺激具有较强的敏感性。离体肠段虽然失去外来神经的支配，但肠壁神经丛仍存在，在适宜的条件下，仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。小肠平滑肌的电活动有快波和慢波两种基本形式。慢波是平滑肌本身所具有的自发的缓慢电变化，是一种肌源性的电活动，不依赖植物神经系统的支配[2]，慢波的存在是使平滑肌保持一种起步的机能状态。 本文在肠段表面依次给予0.01%乙酰胆碱（Ach）、0.01%肾上腺素(E)、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、25℃台氏液、缺氧等因素刺激，观察、记录其对小肠收缩情况的影响，为探讨某些体液因素对小肠平滑肌的收缩活动的影响，提供理论依据。 关键词：不同因素、离体肠肌、运动 材料和方法[1] 1．材料 家兔；麦氏浴槽、超级恒温箱、张力换能器、生物信号采集处理系统；台式溶液、0.01%乙酰胆碱、0.01%肾上腺素、1mol/L NaOH、1mol/L HCl、25℃台氏液。
《医学机能实验学》学院： 专业：针灸推拿学 班级： 学号： 姓名： ******大学 2013/11/9
某些因素对家兔离体肠肌影响 姓名 （******大学**级针灸推拿专业1班6组，**学号） 摘要目的：观察不同因素（HCl、NaOH、室温台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱）对家兔离体十二指肠活动的影响。方法：采用常规小肠平滑肌标本离体灌流的实验方法，观察不同剂量、浓度的HCl、NaOH、室温台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱的对小肠平滑肌自发收缩活动的影响及其变化规律。结果：HCl、18℃台氏液、乙酰胆碱对十二指肠平滑肌自发收缩活动有增强效应，其收缩幅度与对照组比较差异有统计学意义，NaOH、肾上腺素对小肠平滑肌自发收缩活动有抑制效应，其幅度变化与对照组比较差异有统计学意义。结沦：HCl、18℃台氏液、乙酰胆碱对大鼠十二指肠平滑肌自发收缩活动有增强作用，NaOH、肾上腺素则有减弱作用。【1】。 关键词家兔离体肠肌 肠道平滑肌有壁内神经丛，因此有自动节律性收缩的特性，其特性起源于肌肉自身并受中枢神经系统和体液因素的调节。离体肠段虽然失去外来神经的支配，但肠壁神经丛仍存在，在适宜的条件下，仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。本实验加入药物HCl NaOH 乙酰胆碱台氏液肾上腺素观察记录其对小肠收缩情况的影响，为探讨某些体液因素对小肠平滑肌的收缩活动的影响，提供理论依据。【2】 1.材料 实验动物：选用体重为2～3kg的健康家兔1只，雌雄不限。 主要试剂与仪器：麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能器、HCL、NaOH、乙酰胆碱、台氏液、肾上腺素、RM6240系统生物机能实验系统等。 2．方法 2.1标本制备:击昏家兔，剖腹取长约2 cm十二指肠肠管；将肠管放入室温的台氏液中轻轻漂洗。肠内容物洗净后，肠段两端各系一条线，一端固定在标本钩上，另一端缚线连接张力传感器，整个肠管置于37 ℃台氏液中，台氏液内持续供95%O2与5%CO2混合气体，其间更换台氏液1次，待收缩活动平稳后用RM6420生物机能实验系统记录平滑肌收缩活动曲线。 2.2灌液10ml，离体小肠稳定10min，记录一张对照张力曲线，滴加HCl溶液两滴，观察小肠张力变化，反应稳定后，换液两遍。 2.3灌液10ml，记录一张对照张力曲线，滴加NaOH溶液两滴，观察小肠张力变化，反应稳定后，换液两遍。 2.4灌液10ml，记录一张对照张力曲线，滴加18℃台氏液溶液两滴，观察小肠张力变化，反应稳定后，换液两遍。 2.5灌液10ml，，记录一张对照张力曲线，滴加1：10000肾上腺素溶液两滴，观察小肠张力变化，反应稳定后，换液两遍。 2.6灌液10ml，记录一张对照张力曲线，滴加1：100000乙酰胆碱溶液两滴，观察小肠张力变化，反应稳定后，换液两遍。 2.7数据采集:计算给药前小肠平滑肌肠段的张力、收缩波平均振幅、平均张力作为对照值，采集给药后的相应值。
一实验目的 1、学习离体小肠平滑肌灌流的实验方法； 2、证明小肠平滑肌具有自动节律性和紧张性活动，观察若干刺激对离体小肠运动的影响。 二实验原理 动物的胃肠道由平滑肌组成，胃肠道平滑肌除具有肌肉的共性，如兴奋性、传导性和收缩性之外，尚有自己的特性，主要表现为紧张性和自动节律性收缩，可以形成多种形式的运动，主要有紧张性收缩，蠕动。此外，胃还有明显的容受性舒张，小肠还有分节运动及摆动。如果将动物的小肠平滑肌离体，放置在各种化学成分、渗透压、pH、温度以及气体供应等因子十分接近机体的内环境的溶液中时，可保持离体小肠段长时间地存活下来，并可以观察到小肠平滑肌的自动节律性、紧张收缩性、伸展性和对机械牵拉、温度刺激、化学刺激十分敏感，而对电刺激和切割刺激不敏感等一系列特性。通常用台式液做灌流液，将小肠的一端固定，另一端连张力换能器，即可通过一定的记录装置记录下小肠肌的收缩曲线。 三使用仪器、材料 1、仪器：细线，注射器，恒温平滑肌槽，计算机生物信号采集处理系统，张力换能器，万 能支架，螺旋夹，双凹夹，温度计，橡胶管，制氧机等。 2、材料：台氏液，1:5000肾上腺素，1：10000乙酰胆碱，1%CaCl2溶液，1mol/LHCl溶液， 1mol/LNaOH溶液，阿托品等。 四. 实验步骤 1、开启恒温平滑肌槽电源，使其恒温工作点定在37摄氏度。 2、猝死兔子，剪取2-3cm长的十二指肠，用台氏液漂洗，置于低温台氏液中备用。 3、连接各种仪器，将小肠的两端分别与标本固定钩和张力换能器连接，让制氧机正常为台 氏液供氧，进入计算机生物信号采集处理系统。 4、先后观察、记录37摄氏度台氏液中的肠段节律性收缩曲线，待中央标本槽内的台氏液 温度稳定在37摄氏度后，停氧1min ,记录肠段节律性收缩曲线，恢复供氧，待台氏液中的小肠稳定后，分别换成22℃，45℃的台氏液，记录肠段节律性收缩曲线。再灌流37℃台氏液待肠段活动恢复后，依次滴加1mol/LNaOH溶液，1mol/LHCl溶液，1%CaCl2溶液1：5000肾上腺素，1：10000乙酰胆碱，阿托品观察肠段收缩曲线的改变。每次实验在观察到明显变化后，都应用预先准备好的37℃台氏液冲洗3次。 五实验结果及分析 （1）缺氧对离体小肠活动的影响 从图一可以看出，正常情况下，离体家兔肠段收缩频率为17次/min,收缩张力最小值为26.8g，最大值为35g。对浴槽内的离体小肠停氧的瞬间可以看到基线明显上移接着又下降回原来状态，其节律为16次/min, 收缩张力最小值为23.7g，最大值为34.6g。 张力：g
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察实 验报告精编 Document number：WTT-LKK-GBB-08921-EIGG-22986
离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用观察 一、实验目的: ①进一步熟悉BL-410/420多媒体生物信号记录分析系统； ②学习离体肠肌的实验装置和使用方 法； ③观察并记录传出神经系统药物以及酸 碱对离体小肠平滑肌收缩的影响 二、实验对象：家兔离体小肠肠管。 三、实验原理：消化道平滑肌具有自动节律性运动的特性，其产生机理源于其肌肉细胞本身的自发缓慢放电并受中枢神经系统及体液因素的调节，所以可以取离体的小肠肠管并放置于人工创造的正常生理环境下，利用BL- 410/420多媒体生物信号记录分析系统和换能器系统分别研究传出神经系统药物以及酸碱对小肠平滑肌收缩的影响。 四、实验记录与分析 ㈠
图（一） 图（一)表示小肠由38度台氏液到室温下其平滑肌收缩曲 线变化情况 从图（一)可以看出小肠所处温度降到室温时明显减弱，因为平滑肌收缩需要酶催化，而温度在一定范围内下降时钠钾泵及离子通道的酶的催化活性也会降低，这就可以影响钠钾钙等离子的转运，继而影响去极化和复极化的速度，进而动作电位的产生速率和幅度就会下降，所以平滑肌的收缩程度会减弱。 ㈡
图（二） 图（二）表示在38度台氏液加入肾上腺素后小肠平滑肌收 缩曲线的变化情况 由图（二）可知加入肾上腺素后小肠平滑肌收缩明显减弱，这是因为肾上腺素与小肠平滑肌肌膜上的β肾上腺素能受体结合，可导致使膜超极化，从而使膜去极化达到阈电位的幅度增加，所以其动作电位的产生频率下降，所以小肠平滑肌的收缩幅度减弱。 ㈢
不同因素对家兔离体肠肌收缩的影响 摘要 :目的研究 0.01%乙酰胆碱 (Ach 、 0.01%肾上腺素 (NE 、 1当量 NaOH 、 1当量 HCl 、 20℃台氏液及缺氧等条件对家兔离体肠肌运动的影响。方法向浸有离体家兔肠肌的 37℃的台氏液依次滴加 0.01%Ach、 0.01%NE、 1当量NaOH 、 1当量 HCl 、停止供氧及迅速换成 17℃的台氏液,并用生物信号采集处理系统记录肠肌的收缩情况。结果滴加 0.01%Ach、 1当量 NaOH 后,肠肌运动张力和频率都增大;滴加 0.01%NE、 1当量 HCl 肠肌运动张力与频率迅速降低; 将 37℃的台氏液迅速换成 20℃的台氏液后, 肠肌运动肠肌运动张力与频率先迅速降低后逐渐增大。停止通氧后, 肠肌运动张力和频率逐渐降低;恢复通氧后,肠肌运动张力和频率逐渐升高。结论一定浓度 Ach 、 NaOH 可促进肠肌的运动;一定浓度的 NE 、HCl 可以抑制肠肌的运动;低温能使肠肌运动暂时减弱;短时缺氧使肠肌运动在一开始有增强的现象,而后减弱。 关键词不同因素;离体肠肌;运动 1. 材料和方法 [1] 1.1实验材料:家兔。 1.2实验仪器:麦氏浴槽、超级恒温箱、空气泵、恒温离体小肠灌流装置、微调固定器、张力换能器、生物信号采集处理系统、木锤、止血钳、手术刀、 20ml 注射器、手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘、钢碗。 1.3实验药品和试剂:台氏液、 0.01%乙酰胆碱 (Ach 、 0.01%肾上腺素 (NE 、NaOH 、 HCl 。 1.4离体家兔肠肌制备:取家兔一只,将其倒提,用木锤猛击后脑勺,使之昏迷,将其仰卧位固定,用手术剪从剑突下沿腹部白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm 长,打开腹壁,暴露腹腔,顺着胃找到与胃相连的十二指肠, 沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约 30cm , 放入一小手术盘中,用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物,直至冲洗干净为止。将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中, 用
实验5 家兔离体肠肌活动得影响实验 【摘要】目得研究0、01%乙酰胆碱(Ach)、0、01%肾上腺素(E)、NaOH溶液、HCl溶液、25℃台氏液及缺氧条件对家兔离体肠肌运动得影响。方法家兔离体小肠平滑肌标本得制备,生物信号采集处理系统记录在不同因素作用下张力曲线。常用统计学方法与统计学指标。结果滴加0、01%乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH 溶液后,肠肌运动张力与频率都增大;滴加0、01%肾上腺素(E)、1NHCl、肠肌运动张力与频率迅速降低;25℃台氏液刺激离体肠肌时,肠肌运动张力与频率先迅速下降后逐渐增大;停止通氧后,肠肌运动张力与频率逐渐降低。结论0、01%乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH溶液刺激能促进肠肌运动,0、01%肾上腺素(E)、1NHCl能抑制肠肌运动,短时低温能使肠肌运动稍降后又加强直至正常,缺氧使肠肌运动减弱。关键词:HCl、NaOH、离体肠肌、乙酰胆碱、肾上腺素 目录 1、实验材料与方法 (1) 1、1、实验材料 1 1、2、实验方法: 2 2、实验结果: (3) 3、实验讨论(见附页) (4) 4、实验结论: (4) 5、参考文献: (4) 附页 (4) 1.实验材料与方法 1.1.实验材料 1.1.1.实验动物:兔子(浙江中医药大学动物实验中心) 1.1. 2.实验材料与器械:家兔,麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能器、铁支架、 电脑、、木锤、止血钳、手术刀、20ml注射器、手术剪、持针器、手术 圆针、缝线、烧杯、手术盘、搪瓷碗等。 1.1.3.实验药品:台氏液:(0、8%NaCl、0、02%KCl、0、026%MgSO477H2O、0、0065% NaH2PO4、0、02%CaCl2、0、1%NaHCO3)、0、1%葡萄糖溶液。1:10 000 肾上腺素、1:10 000乙酰胆碱、1NHCl、1NNaOH溶液。
实验十二消化实验 家兔离体小肠平滑肌生理特性 [目的要求] 1、学习离体肠段平滑肌的实验方法。 ２、了解肠段平滑肌的生理特性。 [基本原理] 哺乳动物消化管平滑肌与肌肉组织共有的特性,如兴奋性、传导性与收缩性等。但消化管平滑肌又有其特点,即兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度与机械牵张刺激较敏感等。这些特性可维持消化管内一定压力,保持胃肠等一定的形态与位置,适合于消化管内容物的理化变化,在体内受中枢神经系统与体液因素的调节。将离体组织器官置于摸拟体内环境的溶液中,可在一定时间内保持其功能。本实验以台式液作灌流液,在体外观察及记录哺乳动物离体肠段的一般生理特性。 ［动物与器材] 兔、恒温平滑肌槽、支架、烧杯、20ｍｌ注射器、张力传感器、生物机能实验系统、温度计、台式液、肾上腺素(1:1000０)、乙酰胆碱(1:10０00)、阿托品针剂(1支)。 [方法与步骤] １、装好实验装置,平滑肌槽恒温调至3７℃。 ２、制备离体兔肠段 用木槌猛击兔后头延髓部,致其昏迷后立即剖开腹腔,找到胃幽门与十二指肠交界处。在十二指肠起始端扎一线,取出十二指肠、空肠、放入冷台式液内。先用20ml注射器冲洗内容物,冲洗干净后剪成若干约1、5cm长的小肠段(每一实验小组一段)在其两端结扎,一端做一短线环固定在通气的浴皿内,另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在调好温度的平滑肌槽中,并调整好台式液充气量(小气泡接连不断)。 3、开启生物机能实验系统,接通与张力传感器相连的通道。固定管并调节扎线与张力传感器,使肠段运动自如又能牵动传感器(注意:扎线不可贴壁或过紧过
离体小肠平滑肌的生理特性 一、实验结果 1.37℃时小肠平滑肌的正常收缩曲线： 2.停止供氧1min： 恢复供氧： : 3.加BaCl 2 : 4.加CaCl 2 5.加Adr:
6.加Ach ： 7.加阿托品、Ach(仪器故障，取自其他组) 二、分析与讨论 哺乳动物小肠平滑肌具有其特点，即兴奋性较低，收缩缓慢，富有伸展性，具有紧张性、自动节律性，对化学、温度和机械牵张刺激较敏感等。将离体小肠置于模拟内环境（如本实验使用的台氏液）中，可在一定时间内保持其功能可，以此来研究肠段的一般生理特性。 1.37℃正常情况下 可以观察到离体小肠段在台式液中缓慢地节律性收缩。 分析：肌肉本身具有一种自发的节律性去极化波，它受神经、体液调节。 2.缺氧 由图可知，停止供氧后，小肠的收缩减弱，直至恢复供氧，小肠的收缩恢复正常。 分析：停止供氧，肠肌细胞新陈代谢减弱，ATP 产量下降，能量缺乏，收缩减弱。 3.加BaCl 2 由图可知，加入BaCl 2后，小肠的收缩加强。 分析：①Ba 2+刺激肠壁的化学感受器，通过壁内神经丛短途反射，使收缩加强。 ②Ba 2+进入细胞与钙调蛋白结合，使平滑肌收缩。③Ba 2+可使细胞膜发生去极化，直接兴奋肠肌。 4.加CaCl 2 由图可知，加入CaCl 2后，小肠的收缩先增强后减弱。 分析：平滑肌动作电位发生主要是由于Ca 2+内流。由于胞外Ca 2+浓度升高，胞内Ca 2+随之升高，激活平滑肌收缩系统，收缩增强。 5.加Adr 由图可知，加入Adr 后，小肠的收缩减弱。 分析：肠肌膜上存在α和β受体，Adr 作用于α受体，引起肠肌膜上K +外流增多，细胞膜发生超极化，膜去极化达到阈电位的电位幅度增加，所以其动作电位的产阿托品 Ach
实验5不同因素对家兔离体肠肌运动的影响 浙江中医药大学第二临床医学院 【摘要】目的：观察盐酸(HCl)、氢氧化钠(NaOH )、温度、肾上腺素(E)、乙酰胆碱(Ach)、缺空气对家兔离体肠肌运动的影响。 方法：分别给予离体家兔肠肌标本HCl、NaOH、低温、肾上腺素、乙酰胆碱、缺氧刺激，完成每次刺激并出现明显现象后用37℃台氏液冲洗肠肌标本，观察其收缩活动的特点并记录。 结果：滴加Ach、NaOH 后，肠肌运动张力和频率都增大；滴加E、HCl、阿托品后肠肌运动张力与频率迅速降低；停止通空气后，肠肌运动张力先迅速增强后逐渐降低和频率逐渐降低。 结论：HCl和肾上腺素可抑制离体肠肌的运动,NaOH、乙酰胆碱和阿托品可增强离体肠肌的运动。 1.材料和方法 1.1实验材料：家兔。 1.2实验仪器：恒温浴槽、木槌、麦氏浴槽、棉线若干、手术剪、氧气泵、微 机生物信号采集处理系统、张力传感器、缝针、培养皿。 1.3实验药品：台式液、乙酰胆碱、肾上腺素、氢氧化钠溶液、盐酸溶液。1.4离体家兔肠肌制备： 取家兔一只，将其倒提，用木锤猛击后脑勺，使之昏迷，将其仰卧位固定，用手术剪从剑突下沿腹部白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长，打开腹壁，暴露腹腔，顺着胃找到与胃相连的十二指肠，沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约30cm，放入一小手术盘中，用注射器抽取预冷台氏液冲洗肠内容物，直至冲洗干净为止。将干净的小肠段放入另一盛有预冷台氏液的小手术盘中，用手术刀刮去肠管外的血管和系膜，将小肠段切割成小段，每小段肠约2cm 长，并在小段肠的两端、距断端约1mm处各穿约30cm长的线。 1.5标本固定 1.5.1取出固定架，将肠段的下端的线头尽量靠近并牢固地绑紧在固定架的 小钩，将固定架放回内槽，使小钩尽量靠近槽底（尽量减少台式液 的使用），重新用张力微调器固定固定架，将空气泵重新连接至固 定架，并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。 1.5.2将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调器缓慢 升降拉线，保持线有一定紧张度，肠段、线应与地平面垂直，同时， 肠段及上端的线头不得碰及槽壁和固定架。 1.5.3换液：打开灌流槽的内槽排水阀门，排去原来的台氏液，用20ml注 射器从恒温水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽 中，其每次用量以淹过肠段的量为准。调节位于固定架尾部的空气流 量调节旋钮，使气泡即细小、均匀，又不影响肠段的运动。 1.6实验观察 1.6.1记录一段37℃的台氏液环境中小肠平滑肌收缩活动曲线，观察其收缩 活动的特点。 1.6.2待肠活动恢复后，向台氏液中加入0.01%乙酰胆碱（Ach）1滴，观察 小肠收缩活动的改变, 待反应稳定后冲洗1遍，再加入等量的37℃的 台氏液。
实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察 【实验目的】 学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用；分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。 【实验原理】 消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性，对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。 【实验材料】 实验动物：家兔，2.0-2.5kg 实验药品：台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。 实验器材：恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。 【实验步骤】 1.恒温浴槽的准备工作； 2.标本制备； 3.仪器连接与设置； 4.启动计算机，打开BL-420生物信号系统，调节参数，开始记录。 观察项目 1.自动节律性收缩，描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线，观察其节律性 收缩及张力水平。 2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。 （1）乙酰胆碱的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴，观察肠管张力和收缩有何变化。作用产生后，洗涤三次，进 行下一项实验。 （2）阿托品的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的阿托品溶液2~3滴， 两分钟后，再加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴，观察肠管张力和收缩 有何变化。与（1）比较结果后，洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一
项实验。 3.观察肾上腺素能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。 去甲肾上腺素的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素2~3 滴，观察肠管张力和收缩有何变化。然后洗涤三次，待其活动稳定后， 进行下一项实验。 4．观察钙离子对肠断收缩的影响 向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液2~3滴，观察肠管平滑肌的反应。然后洗涤三次，待其活动稳定后，进行下一项实验。 5．观察酸碱度对肠断收缩的影响 向浴槽标本管中加入1mol/l的盐酸溶液1~2滴，观察平滑肌的反应，待作用出现明显后，在此基础上，加入1mol/l的NaOH溶液1~2滴，观察平滑肌的反应。 【实验结果】 1.乙酰胆碱对肠断收缩的影响：小肠平滑肌收缩活动加强。 2.阿托品和乙酰胆碱对肠断收缩的影响：小肠平滑肌收缩活动不受影响。 3.去甲肾上腺素对肠断收缩的影响：小肠平滑肌收缩活动减弱。 4.钙离子对肠断收缩的影响：小肠平滑肌收缩活动加强。 5.酸碱度对肠断收缩的影响：小肠平滑肌收缩活动先减弱后恢复。 【注意事项】 1.肠管勿牵拉过紧或过松，且连线必须垂直 ,且不得与浴槽的管壁等接触，以 免摩擦。 2.浴槽中的液体的量应以高过肠断为准，并保持液面高度一致。 3.药物应滴在肠管附近，药物作用若不明显，可以不加药物，但不可一次过多。 4.每次加药出现反应后，应必须立即更换浴槽内的台式液至少三次，待肠管恢 复稳定活动后，再观察下一个项目。 【实验思考】 1.哺乳动物离体器官或组织在灌流液中保持良好状态应具备的条件？ 温度：本实验控制恒定温度37度；湿度：要时刻记住用相应的润湿液润湿，本次试验用哺乳动物的台氏液；PH：要与哺乳动物体液相似；避免不必要的刺激：不要用手或者是金属触碰；离子成分与浓度：要与相关的动物体液相似，本实验是台氏液。
人体机能学实验报告 离体小肠平滑肌肌的生理特性 实验结果：实验讨论： 1、我们可以看到小肠从17℃转移到38℃的台氏液中，小肠平滑肌的收缩幅度、 基线上移和频率增加，产生上述的主要原因是：小肠肠管的台氏液温度以38℃~40℃为宜，低于或高于这个温度，都会影响结果。由于小肠管平滑肌对温度改变极为敏感，当温度降到30℃以下时，故代谢水平的降低，兴奋性减弱，可出现收缩曲线基线下移，频率变慢，收缩幅度变小。 2、在浴槽中加入乙酰胆碱后，可见离体肠管活动增强，幅度增加。出现上述现 象的机理，目前认为乙酰胆碱可与肌膜上的M受体 结合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+ 专用通道，另一类为特异性受体活化Ca2+ 专用通道。前一类通道对Ach敏感，小剂量Ach即引起开放；后一类通道对Ach 相对不敏感，只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。 3、在浴槽标本管中加入阿品托溶液，2分钟后再加入乙酰胆碱（Ach ），发现 小肠管张力和收缩力没有明显 的变化，原因是阿托品是乙酰 胆碱阻断剂，使乙酰胆碱的作用消失。故加入乙酰胆碱后没有作用。所以两者都加入观察到曲线无明显变化。
4、在浴槽中加入肾上腺素后，可见离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩频率 变慢，幅度减小以及基线下移。出现上述现象的机理， 目前认为与肠肌细胞膜上存在α和β两中受体，α受 体又分为α抑制型受体和α兴奋型受体有关。肾上腺 素作用于α抑制型受体，引起肠肌膜上一种特异性受体活化，使K+外流增多，细胞膜发生超极化，肠肌兴奋性降低，肌张力下降。同时，肾上腺素还作用于β受体，①它的激活引起肠肌细胞膜中的cAMP 合成增多，cAMP激活肠肌膜及肌浆网上Ca2+泵活动，使肌浆中Ca2+浓度降低，亦使肌张力降低；②β 受体激活后还促使K+及Ca2+外流增加，加速膜的超极化，促进了肠肌肌张力的减低。 5、在浴槽中加入盐酸溶液后，离体肠管活动减弱，描记曲线出现收缩幅度降低， 频率变慢。出现这一现象，目前认为其原 因在于：①细胞外H+升高时，Ca2+通道 的活性受到抑制，使得Ca2+内流减少。 ② H+升高能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行 的生化过程：H+能与Ca2+竞争钙调蛋白的结合位点而使肌球蛋白ATP酶活性降低（近期有理论认为是直接抑制作用而非竞争作用）；使肌原纤维对Ca2+的敏感性和Ca2+从肌质网的释放量减少。在加盐酸使平滑肌收缩减弱的基础上，再加NaOH于浴槽中，则肠管活动出现相反的情况，即肠管活动增强。原因在于NaOH可以中和H+，改变了细胞外液的PH值，PH过高、过低，收缩幅度及张力都会降低，故小肠平滑肌的收缩又恢复正常。由于此次试验加入的量过多，出现收缩的下降，和恢复收缩的不明显。
实验4：某些因素对离体家兔肠肌的影响 （浙江中医药大学第一临床医学院） 关键词：离体家兔肠肌因素 一、实验目的 学习麦氏浴槽的使用方法及离体肠肌的实验方法。观察酸、碱、低温、肾上腺素、乙酰胆碱对离体肠肌的影响，并分析作用机制。 二、实验材料 （1）动物：家兔 （2）器械：动物手术器材（手术刀、手术剪、止血钳、弹簧夹、丝线、皿、注射器、手术缝针）供氧器、麦氏浴槽、张力换能器、RM6240微机生物信号采集处理系统。 （3）药品和试剂：HCl、NaOH、（25度）台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱溶液 三、实验方法 （1）实验装置准备和仪器参数设置：麦氏浴槽中加固定量（10~15ml）的台氏液，调节超级恒温器的温度，使麦氏浴槽内温度稳定在37.5度。通气管接空气管道。用螺丝夹调节气体 管道的气体流量，调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。换能器输出线接微机生物信号采 集处理系统：打开RM6240系统，“实验”-“药理学专用试验”-“离体家兔肠肌运动” （2）离体家兔肠肌标本制备：取家兔一只，用木槌击其头部致昏，立即剖开腹腔，找到回盲部，然后，在回盲部1cm处剪断，取出回肠约10cm左右一段，置于氧饱和的台氏液培 养皿中，沿肠壁除去肠系膜，用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净，然后将回 肠剪成数段（约1~1.5cm），换以新鲜的台氏液备用。取小段肠管置于盛有台氏液的培养 皿中，在其两端对角壁处，分别用缝针穿线并打结。 （3）实验观察： 1）加入乙酰胆碱溶液2~5滴左右，观察其收缩幅度，反应稳定后换液冲洗。 2）加入肾上腺素溶液2~5滴左右，观察其收缩幅度，反应稳定后换液冲洗。 3）滴加NaOH后，观察其收缩幅度，反应稳定后换液冲洗。 4）滴加HCl后，观察其收缩幅度，反应稳定后换液冲洗。 5）用25度台氏液灌流肠肌，观察其收缩幅度。 四、实验结果： 某些因素对家兔离体肠肌的影响 实验结论