一、名词解释
1.生物药物：是指以生物资源为原料或以生物技术为手段开发生产的用作疾病的预防、诊断和治疗的医药品。
2.基因文库：将供体生物的DNA用限制酶切成许多片段，在连接酶的作用下分别与克隆载体进行体外重组，这种含有供体生物全部不同基因的重组克隆载体的总体称供体生物的基因文库。
3.同裂酶：识别不同的核苷酸序列，但切割后产生相同的粘性末端，这样一类限制酶称同切口限制酶或同裂酶。
4.限制酶星活性：在标准条件下，每种限制酶都有严格的识别序列。在非标准条件下，会导致限制酶识别序列的特异性发生改变，在DNA内产生附加切割，称限制酶的第2活性或星活性。
5.PCR技术：聚合酶链式反应技术，简称PCR技术，是一种用于在体外扩增位于两段已知序列之间的DNA区段的分子生物学技术。应用该技术可在很短的时间内得到数百万个特异DNA序列的拷贝。
6.多克隆位点：（MCS）基因载体上由多种限制酶单一识别序列组成的序列，是插入外源目的基因DNA片段的位点。
7.McAb：采用B淋巴细胞杂交瘤技术，由纯一的单克隆细胞系产生的，针对一个抗原决定簇的，结构和特异性完全相同的高纯度抗体称单克隆抗体。
8.克隆化：单个细胞通过无性繁殖而获得的细胞集团的整个培养过程。
9.细胞分化：动物细胞不是靠一个细胞包办一切生理活动，各种细胞有明确的分工，相应有不同的形态。这种随功能不同所产生的形态变化称分化。
10.外植体：植物组织培养中，进行离体无菌培养的材料，可以是器官或组织的切段、原生质体、细胞等。
11、转导：将重组噬菌体DNA包装到噬菌体头部成为有感染力的噬菌体颗粒，再以此噬菌体为运载体，将头部重组DNA导入受体细胞的过程。
12、感受态细胞：细胞最易接受外源DNA片断，并能实现转化的一种生理状态。
13、回文结构：限制性酶的识别序列，如果都从5，末端向3，末端读其碱基序列，则在识别序列的两条核苷酸链中的碱基排列次序完全相同，这种结构称回文结构。
14、接触抑制：当细胞贴附在基质上分裂增殖，逐渐汇合成片时，即每个细胞相互接触时，细胞就停止增殖。若保持充足的营养，细胞仍可存活，但密度不再增加。若细胞转化为异倍体后，该现象随之消失，细胞可多层生长，密度也可大大增加。
15、cDNA基因文库：以供体生物的总mRNA为模板，在反转录酶作用下合成互补的DNA（cDNA），将全部cDNA分别与克隆载体进行体外重组，这些含有供体生物全部不同基因的重组克隆载体的总体称供体生物的cDNA基因文库。
16、第二抗体：能与抗原和抗体发生免疫反应后形成的复合物进行特异结合的抗体，又称抗抗体。
17、模板替换:制备改形抗体过程中，使用与鼠对应部分有较大同源性的人FR替换鼠FR区的方法称模板替换。
18、CDR移植抗体：用鼠源性单克隆抗体的CDR序列替换人Ig分子中CDR序列，使人的Ig 分子具有鼠源性单克隆抗体的抗原结合特异性，抗体分子中鼠源性部分只占很小比例，可基本消除免疫原性。这种改形抗体称CDR移植抗体。
19、噬菌体表面展示技术：噬菌体DNA中的基因Ⅲ（cp3基因）编码噬菌体的外壳小蛋白，其表达产物可稳定地存在于噬菌体颗粒的外壳上。利用该特性，当外源基因的cDNA片段与cp3基因连接组成DNA-cp3融合基因后，DNA的表达产物将被cp3的编码产物“带到”噬菌体颗粒表面，并可在其表面稳定显示，这种方法称为噬菌体表面展示技术。
20、植物抗毒素：指在植物防御系统内能对抗微生物进攻的某些次级代谢产物。
21、无限细胞系：细胞经自然或人为因素转化成为异倍体，细胞染色体断裂，失去正常细胞特点，获得的具有无限增殖能力的细胞系。
22、抗体：能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。
二、填空
1、利用寡聚脱氧胸苷酸（Oligo.dT）-纤维素柱亲和层析法从总RNA中分离纯化mRNA，其原理是真核生物细胞中mRNA的3′端具有poly（A）尾结构。
2、特定分化型的供体细胞中，编码目的产物的mRNA在总mRNA中占有
相当大的比例，这种mRNA称为高丰度mRNA。
3 、PCR技术通过30多次循环所扩增的特定DNA序列可增至百万倍，PCR
技术每次循环包括高温变性、低温退火、适温延伸三个步骤。
4、目的基因与质粒载体体外重组的定向克隆法是使用不同的限制性内切酶消化载体DNA和供体DNA，切下的同一DNA片段带有非互补的末段、不容易发生自身环化，目的基因与质粒载体的重组率较高。目的基因与质粒载体体外重组的粘性末段连接法是使用单一的限制性内切酶消化载体DNA和供体DNA，切下的同一DNA片段带有互补的粘性末段、容易发生自身环化，目的基因与质粒载体的重组率较低。
5、基因工程受体细胞的感受态是指细胞最易接受外源DNA片断，并能实现转化的一种生理状态。
6、杂交瘤细胞克隆化的目的是获得单细胞无性繁殖系方法有有限稀释法和软琼脂法。
7、贴壁依赖型动物细胞在离体培养时的形态类型有成纤维样细胞型和上皮样细胞型；其中前者来自动物器官组织的中胚层组织的细胞，后者来自动物器官组织的外胚层和内胚层组织的细胞。
8、动物细胞离体培养用的合成培养基除碳源、氮源、维生素和无机盐等
基本成分外，还需添加的特殊组分是血清。
9、植物激素是指植物代谢过程中天然形成的生长调节物质，在极低浓度（<1um）时即能调节植物的生育过程。
10、克隆化是指分离获得单细胞并将单细胞通过无性繁殖而获得细胞集团的整个过程。
11、具有抗体活性、及化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白。
12、饲养细胞具有促进融合细胞生长的特性。常用的饲养细胞有小鼠腹腔巨噬细胞、脾细胞、胸腺细胞。
13、植物组织和细胞培养过程中，影响次级代谢产物产生和积累的因素主要有-生物条件、物理条件、化学条件、工业培养条件。
14、动物细胞大规模培养的方法有悬浮培养、贴壁培养、贴壁-悬浮培养
15、通过培养和诱导，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合技术；B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过这一技术可得到杂交瘤细胞，通过这一技术可工业化生产单克隆抗体。
16、用于制备杂交瘤细胞的骨髓瘤细胞应具备以下特性自身不具备产生免疫球蛋白的能力、应为HGPRT缺陷的细胞、融合率高，容易培养，所产生的杂交瘤细胞分泌抗体的能力强且长期稳定。
17、异倍体转化细胞是指通过某个转化过程，由于染色体的断裂变成异倍体从而失去正常细胞的特点，具有无限增殖的能力。
18、1975年英国的Milstein和Kohler发明了杂交瘤技术，获得了杂交瘤细胞，用于单克隆抗体的生产，它具有高度均一性、高度特异性及来源稳定、可大量生产的特点。
19、基因工程中常采用一些方法处理细胞，使其处于最易接受外源DNA的状态，称为感受态细胞。常用冷的CaCl2处理法、电穿孔法等方法制备处于这种状态的细胞。
20、动物细胞培养时所用的器材和设备必须经严格的清洗，一般需经过浸泡、刷洗、泡酸、冲洗4步。
21、愈伤组织培养是指从植物各种器官的外植体增殖而形成的愈伤组织的培养。
22、酶化学修饰的方法有酶的表面化学修饰、酶分子内部修饰和结合定点突变的化学修饰。
23、影响外源基因在酵母细胞中表达的因素主要有外源基因拷贝数、外源基因的表达效率、外源蛋白的糖基化、宿主菌株的影响。
24、基因工程菌质粒的分裂不稳定指工程菌分裂时产生一定比例不含质粒的子代菌的现象，主要与两个因素有关，其一是含质粒菌产生不含质粒子代菌的频率，另一是含质粒菌与不含质粒菌比生长速率差异的大小。
25、真核基因在大肠杆菌中可以融合蛋白的形式表达，这样的蛋白由一条短的原核多肽和真核蛋白结合在一起组成。
26、在动物细胞培养时，与细胞接触的溶液一般需使用平衡盐溶液，平衡盐溶液指渗透压与胞浆渗透压平衡的溶液。
三、选择
1、PCR技术中进行聚合反应所用的酶是（）：
A、RNA聚合酶
B、DNA聚合酶Ⅰ
C、Taq DNA聚合酶
D、DNA聚合酶Ⅲ
2、目的基因DNA与载体DNA体外重组所用的酶是（）
A、RNA聚合酶
B、DNA连接酶
C、反转录酶
D、DNA聚合酶
3、制备基因工程感受态受体细胞的常用方法是（）
A、高温短时处理
B、化学诱变剂处理
C、紫外线照射
D、CaCl2冰浴处理
4、具有繁殖能力并能侵染受体细胞的重组载体是（）
A、重组质粒载体
B、经体外包装的重组噬菌体载体
C、重组噬菌体载体
D、重组λ噬菌体载体
5、基因工程受体细胞应具备的特性是（）
A、贴壁依赖性
B、接触抑制性
C、生长寿命有限
D、限制酶和修饰系统缺陷型
6、将重组噬菌体载体DNA导入受体细胞的过程称为（）
A、转化
B、转导
C、转染
D、感染
7、用于杂交瘤细胞制备的B淋巴细胞应具备的特性是（）
A、贴壁依赖性
B、具有分泌抗体的能力
C、接触抑制性
D、DNA合成的补救途径缺失
8、从动物机体直接取出进行第一次离体培养的细胞称为（）
A、二倍体有限细胞系
B、异倍体无限细胞系
C、原代细胞
D、异倍体转化细胞系
9、动物细胞培养用的异倍体转化细胞系具有的特性是（）
A、贴壁依赖性
B、抗剪切力高
C、接触抑制性
D、体外培养有无限增殖能力
10、植物细胞离体悬浮培养的特性是（）
A、需氧水平高
B、抗剪切力高
C、易聚集成团
D、生长寿命有限
11、基因工程中最常用的质粒载体为（）
A、pBR322
B、pUC18
C、λ噬菌体载体
D、柯斯质粒(Cosmid)载体
12、下面那种方法和试剂不能够引起细胞融合（）
A、仙台病毒
B、聚乙二醇（PEG）
C、电击和激光
D、脂质体
13、从动物机体直接取出细胞进行培养的细胞方式称为（）
A、贴壁培养
B、悬浮培养
C、原代培养
D、传代培养
14、将质粒DNA及其重组体导入细菌称为（）
A、转化
B、转导
C、转染
D、感染
15、脑磷脂、卵磷脂属于（）生物保健品
A、氨基酸类
B、多肽或蛋白质类
C、磷脂类
D、多糖类
16、基因工程中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是（）
A、DNA聚合酶
B、RNA聚合酶
C、DNA连接酶
D、RNA连接酶
17、不能用作克隆载体的DNA分子是（）
A、噬菌体DNA
B、质粒DNA
C、染色体DNA
D、柯斯质粒或粘粒DNA
18、下列关于大肠杆菌DNA聚合酶的叙述哪一项是正确的? （）
A、具有3'-->5'核酸外切酶活性
B、不需要引物
C、需要4种不同的三磷酸核苷
D、可将两个DNA片断连起来
19、下列关于逆转录过程的叙述哪一项是错误的? （）
A、以RNA为模板合成DNA
B、RNA-DNA杂交体是其中间产物
C、不能用于克隆真核基因
D、底物是四种dNTP
20、催化聚合酶联反应（PCR反应）的酶是（）
A、DNA聚合酶
B、RNA聚合酶
C、TaqDNA聚合酶
D、限制性核酸内切酶
21、将供体生物的DNA用限制酶切割为许多片段，再用运载体将这些片段都运载
到受体生物的不同细胞中表达是（）的技术原理。
A、PCR法
B、cDNA文库
C、基因文库法获得目的基因
D、噬菌体抗体库
四、简答
1、限制酶有哪些特性？
答：限制酶有以下特性：
①不同的限制酶能专一地识别不同的特异核苷酸序列。
②各种限制酶的识别序列具有回文结构。
③各种限制酶的切割类型各式各样，切后形成各种粘性末端和平整末端。
④在非标准条件下，可能导致酶识别序列的特异性发生改变。
2、简述基因文库构建的基本步骤。
答：①首先从含有目的基因的供体生物的细胞或组织中提纯获得高质量的基因组DNA。
②用特定的限制性内切酶将含有目的基因的供体基因组DNA切割成许多片段。
③用能产生互补粘性末端的限制性内切酶将载体（噬菌体）DNA切开并去除其中的填充片段。
④用专一性强的DNA连接酶将供体DNA片段分别与载体DNA连接（供体DNA片段克隆到载体中）。
⑤经包装繁殖而产生重组噬菌体克隆（DNA重组体），建成供体基因组DNA文库成员。
⑥当制备的克隆数多到足以把某种供体生物的全部基因都包含在内时，这些克隆的总体就称为该生物的基因文库。
⑦有了基因文库，在分离带有目的基因的DNA重组体时就可以从文库中筛选而不必重复地进行全部操作。
3、基因工程使用的理想受体细胞应具有哪些特性？
答：①具有接受外源DNA的能力，能发展成感受态细胞。
②应为限制酶和修饰系统缺陷型，即外源DNA导入后不致被降解或修饰。
③其遗传型应是抗重组的，以保持外源DNA在受体细胞中的完整性。
④不适于在人体内或非培养条件下生存。⑤重组体DNA不易转移，只在受体细胞中复制。
4、动物细胞的生理特点有哪些？
答：动物细胞的生理特点:
①细胞分裂周期长。
②细胞生长常常贴附于基质，并有接触抑制现象。
③正常二倍体细胞生长寿命是有限的。
④动物细胞对周围环境十分敏感。
⑤对培养基要求高。
⑥蛋白质的合成途径和修饰功能与细菌不能。
5、PCR反应体系的条件和步骤是什么？
答：PCR反应体系的条件和步骤如下：
条件：
①DNA引物（大约20个碱基左右），②Taq DNA聚合酶，③dNTP，
④模板：目的DNA序列。
步骤：
①解链。使双链DNA在反应液中热变性而分开成单链，95℃，30秒。
②退火。在低温下与两个引物退火（55℃，30-60秒），使部分引物与模板的单链DNA 的特定互补部位相配对和结合。
③延伸。中温下利用Taq DNA聚合酶的聚合活性进行延伸反应（72℃，5分钟）。4℃冷却终止反应。
每经过一次解链、退火、延伸为一个循环，通过不同温度的循环，对DNA链进行扩增。
6、简述杂交瘤细胞克隆化的基本方法。
答：常用的克隆化方法有有限稀释法和软琼脂法。
（1）有限稀释法
将杂交瘤细胞集落制成单细胞悬浮液，经稀释到一定细胞浓度后，加入到96孔细胞培养板中，使每个孔中在理论上只含有一个细胞。经培养、检测和鉴定后进一步分离筛选。
①第一次克隆化时要应用HT培养液，以后的克隆化可用不含HT的RPMI1640培养液。
②由于单个细胞难以存活，克隆化培养时需加入饲养细胞辅助其生长。
③抗体的检测、鉴别。
（2）软琼脂法
是在培养液中加入0.5%左右的琼脂糖凝胶，将杂交瘤集落的单细胞悬浮液加入其中，细胞分裂后形成小球样团块。
由于培养基是半固体状态，可用毛细吸管将小球吸出，团块经打碎后再制成单细胞悬浮液，移入96孔板中继续培养和鉴定。
用这种方法可以吸出大量克隆细胞进行培养，因初代细胞很不易增殖，所以用软琼脂法进行克隆化容易成功。
7、简述动物细胞的培养特性。
答：动物细胞培养过程中具有以下特性：
①生长缓慢，易受杂菌污染，培养时需加抗生素。
②较微生物细胞大得多，无细胞壁，机械强度低，适应环境能力差；
③培养过程需氧量少，不耐受强力通风搅拌。
④在机体中，细胞相互粘连以集群形式存在，培养过程具有群体效应，锚地依赖性，接触抑制性及功能全能性。
⑤培养过程产生分泌于细胞内外，反应过程成本高，但产品价格昂贵。
⑥大规模培养时，不可套用微生物反应的经验。
⑦原代细胞和二倍体细胞系一般繁殖50代即退化死亡。
8、什么是二倍体细胞系？二倍体细胞系有哪些特点？
答：原代细胞经过传代、筛选、克隆，从多种细胞成分的组织中挑选并纯化出某种具有一定特征的细胞株。
该细胞仍具备“正常”细胞的特点。
①、它的染色体组型仍然是2n的核型；
②、具有明显的贴壁依赖和接触抑制的特性。
③、增殖能力有限，一般可连续传代50代。
④、无致癌性。
9、说明噬菌体抗体库技术的基本方法？
答：①获得目的基因：提取B淋巴细胞mRNA，逆转录获得cDNA，PCR技术扩增全套V 区编码基因。
②抗体库技术的载体：分别将V H和V L基因克隆入同一噬菌体（phagemid）载体，在噬菌体cp3基因与抗体V区编码基因间插入琥珀终止密码子。
③淘筛：抗原固定化后，对噬菌粒群的吸附、洗涤和洗脱后再感染扩增，与辅助噬菌体超感染获得大容量次级文库，再反复与抗原吸附，经几轮淘筛后，淘汰了非目的克隆，且使目的克隆大量扩增。
④表达与鉴定：目的克隆经过鉴定后，再导入感受态菌株，进行可溶性表达，其产物用western blot分析确定后，就完成了全过程。
五、问答
1、基因载体有哪些特性？如何将天然的原始载体改造成理想的基因载体？
答：基因载体的特性：
①要有复制子功能，且复制起始区中没有限制酶的酶切位点。
②要含有强启动子，要有能促进外源DNA高水平表达的调控区。
③要有多种限制酶的单一切点，以适用于多种限制酶产生的DNA片段的插入。
④具有两种以上易被检测的选择性遗传标记，作为对重组与非重组转化体的选择标记。
⑤载体DNA的分子量要尽可能小，以利于容纳较长区段的外源DNA片段。
⑥应属于松弛型复制，能在氯霉素存在下扩增其拷贝数。
⑦从安全防治考虑，载体应为非传递性，有较小的宿主范围，不为传递性载体所诱导。
将天然的原始载体改造成理想的基因载体：
①引入强启动子。
②引入选择性标记基因。
③切除大部分多余序列段，以提高容纳外源DNA片段的能力。
④引入由多种限制酶单一识别序列组成的多克隆位点。
⑤引入多种用途的辅助序列。
2、抗生素抗性基因失活法筛选含目的基因重组菌的原理和方法。
答：原理：
很多质粒载体都带有一个或多个抗生素抗性基因标记，在这些抗药性基因内有酶的
识别位点，当用某种限制酶消化并在此位点插入外源目的DNA时，抗药性基因不再被表达。
用于转化大肠杆菌的PBR322质粒是应用广泛的一种质粒载体，该质粒载体上带有Amp r和Tet r的双抗药性标记。Amp r抗药性基因内有PstⅠ酶切位点，Tet r抗药性基因内有Bam HⅠ酶切位点。若用Bam HⅠ酶切割，且外源目的基因插入后，造成Tet r基因失活，转化后的重组细胞不能在含有Tet的培养基上生长，只能在含有Amp的培养基上生长，以此选择Amp r，Tet s的重组细胞。反之，若在重组时用PstⅠ酶切割质粒PBR322，则目的基因插入后，Amp r基因失活，转化后可选择Tet r、Amp s。
方法（以外源基因插入Bam HⅠ位点为例）：
由于外源基因插入，使Tet r基因失活，变为对四环素敏感，但对氨苄青霉素的抗性没有失活。先将转化后的细胞涂布在含有Amp的培养基上，淘汰大部分非转化子细胞，再将长出的菌落（一些含有重组质粒，另一些只含自身环化的质粒）用无菌环挑至含有Tet的培养基上，在此培养基上不能生长的菌落，即为外源基因插入质粒Tet r基因的Bam HⅠ位点的重组质粒。
3、杂交瘤细胞选择性培养的原理。
答：选择性培养基为HAT培养基，它是用次黄嘌呤（H）、氨基喋呤（A）和胸腺嘧啶（T）配制的。其中氨基喋呤（A）能阻断DNA合成的主要途径。
骨髓瘤细胞因是HGPRT缺失型，无DNA合成的补偿途径，因此瘤细胞和瘤-瘤融合细胞因不能合成DNA而死亡。
而B细胞和B-B融合细胞在这样的离体培养条件下，无法生存几天内亦迅速死亡。骨髓瘤细胞是HGPRT（磷酸核糖转移酶）缺陷型，但B细胞中有这种酶，因此B-瘤融合的杂交瘤细胞含有HGPRT酶，可利用次黄嘌呤和胸腺嘧啶（T）来合成DNA，使杂交瘤细胞得以生长。
4、说明β-半乳糖苷酶插入失活法筛选含目的基因工程细胞株的原理和方法。
答：许多质粒载体（如PUC系列）都带有一个来自大肠杆菌的Lac操纵子的部分DNA区段（Lac Z‵和调控序列Lac R），这一区段编码β-半乳糖苷酶N端的一个片段（但无酶活力）。宿主细胞可编码β-半乳糖苷酶C端的部分片段（也无酶活力），但两者之间可通过基因互补（称α互补），从而融为一体形成具有酶活力的β-半乳糖苷酶。
由α互补而产生的Lac+细菌在有诱导物异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）和生色底物5-溴-4-氯-3‵-吲哚-β-D-半乳糖苷（X-gal）的培养基上形成蓝色菌落。
当外源DNA片段插入到质粒载体的多克隆位点后，Lac Z‵片段失活，破坏了α互补作用。因此，带有外源目的DNA重组质粒的细菌将产生白色菌落，从而仅通过目测就可识别并筛选出带有重组质粒的转化子菌落。
5、目的基因DNA与载体DNA体外重组的定向克隆法和粘性末端连接法各有何特点？如何克服酶切后同一DNA片段自身环化？
答：（1）定向克隆法：当用两种不同的限制酶（如用Bam HⅠ和Hin dⅢ）消化同一DNA基因组时，切下来的同一DNA片段带有非互补的突出末端，这样供体DNA片段只能以一个方向很容易地连接到同样用Bam HⅠ和Hin dⅢ进行消化而产生相匹配粘性末端的载体DNA当中。特点：该法的优点是由于载体DNA片段两突出末端不互补，不能自身环化，但与目的基因DNA片段定向重组率却较高。
（2）粘性末端连接法：用一种限制酶酶切，会产生带有相同粘性末端的外源目的DNA片段，必须与用同一种限制酶消化而形成具有相同匹配末端的质粒载体相连接。
特点：质粒载体DNA和外源DNA片段都可能发生自身环化，也有可能形成串联寡聚物。（3）用碱性磷酸酶去除载体DNA两端的5‵磷酸基团以尽量减少载体DNA的自身环化或连接。经去磷酸化的载体DNA仍然可有效地与具有5‵末端磷酸的外源DNA相连接。
6、什么是单克隆抗体？单克隆抗体有什么特点？请简述单克隆抗体制备的技术路线。答：①由于一个B 细胞只会生产一种抗体。若能把能产生某种所需要的抗体的B 细胞由脾脏中挑出來，单独培养成细胞株，则可得只会对一种抗原决定基反应的专一性极高的单一种类的抗体，大量培养此细胞株，即可得品质一定、纯度均一的抗体，即为单克隆抗体（Monoclonal antibody，McAb）。
②特点：
高度均一性：纯度很高的均一性抗体
高度专一性：只对抗原分子上某一抗原决定簇起反应
大量产生及稳定性：杂交瘤细胞能在体内外无限繁殖传代，可工业化培养。
③技术路线：
将淋巴细胞（B细胞）和骨髓瘤细胞经过PEG融合，得到融合细胞，然后通过HAT培养
基的筛选得杂交瘤细胞，再将杂交瘤细胞单克隆化得到不同的杂交瘤细胞克隆，再通过ELISA法筛选到能产生所需抗体的阳性克隆，最后工业化生产或免疫小鼠得到单克隆抗体。
7、如何用逆转录法获取含有目的基因的双链DNA？
答：逆转录法获取含有目的基因的双链DNA：①从供体细胞中提取纯化总RNA。②从总RNA中分离获得mRNA。真核细胞中mRNA的3，末端常含有一多聚腺嘌呤核苷酸组成的末端polyA，当总RNA的高盐缓冲溶液流经含有寡聚脱氧胸腺嘧啶核苷酸-纤维素材料的层析柱时，根据碱基配对原则（A-T配对），mRNA被特异性地结合在柱上，用蒸馏水洗脱时，mRNA被洗脱下来。重复两次即可得到较高纯度的mRNA。③cDNA第一链的合成。以mRNA为模板，寡聚脱氧胸腺嘧啶核苷酸为引物，在逆转录酶作用下，以四种脱氧核苷三磷酸为材料，合成cDNA第一链。④cDNA第二链的合成。用碱解或酶解的方法除去cDNA-mRNA杂交链中的mRNA链，然后以cDNA第一链为模板，在DNA聚合酶Ⅰ作用下合成第二链。用核酸酶Sl专一性地切除双链末端形成的发夹结构。
8、什么是基因插入失活？以转化大肠杆菌的PBR322质粒为载体，如何用抗生素抗性基因插入失活法选择Amp r，Tet s的重组细胞？
答：基因插入失活：很多质粒载体都带有一个或多个抗生素抗性基因标记，在这些抗药性基因内有酶的识别位点，当用某种限制酶消化并在此位点插入外源目的DNA时，抗药性基因不再被表达，称基因插入失活。
用于转化大肠杆菌的PBR322质粒是应用广泛的一种质粒载体，该质粒载体上带有Amp r和Tet r的双抗药性标记。Amp r抗药性基因内有PstⅠ酶切位点，Tet r抗药性基因内有Bam HⅠ酶切位点。若用Bam HⅠ酶切割，且外源目的基因插入后，造成Tet r基因失活，转化后的重组细胞不能在含有Tet的培养基上生长，只能在含有Amp的培养基上生长。
先将转化后的细胞涂布在含有Amp的培养基上，淘汰大部分非转化子细胞，再将长出的菌落用无菌环挑至含有Tet的培养基上，在此培养基上不能生长的菌落，即为Amp r，Tet s的重组细胞。
9、植物细胞培养的生理特点有哪些？
答：植物细胞培养的生理特点：①培养过程中细胞重量的增加主要取决于对数期，而次级代谢产生的累积则主要在稳定期完成。
②很少以单一细胞悬浮生长，而多以非均相集合体的细胞团形式存在。
细胞团的细胞数目通常在2~200之间，直径为2mm左右。
③随着培养时间的延长（对数生长后期）
细胞数量呈指数上升，开始分泌粘多糖和蛋白质，细胞密度高，培养基粘度大，易产生混合和循环不良的问题。
④其纤维素的细胞壁使得其外骨架相当脆弱，抗张力强度大，抗剪切能力小，传统的搅拌或生物反应器容易损坏其细胞壁。
⑤所有植物细胞都是好氧的，需要连续供氧但不需要很高的气液传质速率，要控制供氧量，以保持较低的溶氧水平。
⑥植物细胞培养过程中有一少部分碳源是通过光合作用实现的，通气速率过高会驱除二氧化碳而抑制细胞生长，可在通气中加入一定二氧化碳来解决。
⑦植物细胞培养中泡沫问题不像微生物细胞培养那么严重。泡沫的性质也不一样且较大，细胞极易包埋在泡沫中而从循环培养液中带出，而造成非均相培养，通常要采用化学或机械方法加以控制。
10、什么是酶联免疫吸附试验？简述双抗体夹心ELISA的过程。
答：酶联免疫分析法是将酶作为标记物质，使之和抗原（或抗体）结合形成酶与抗原（或抗体）复合物，然后再根据待测抗体（或抗原）与复合物专一且定量的结合关系，通过测定待测抗体（或抗原）结合的标记酶活力，从而计算出抗原或抗体的量的技术方法。
方法：①将抗体包被在固相载体上。
②样品中含有抗原，则结合为抗原抗体复合物。
③加入酶标记抗体，则结合为抗体-抗原-酶标记抗体复合物。
④加底物并显色，比色法进行定性或定量分析。
选择 ABC分子印迹可以应用于下列哪些方面：模拟抗体，生物传感器的构建，手性药物的分离，新药的构建 ABD酶促反应的特点包括：催化效率高，酶的催化活性不受调节和控制，专一性强，反应条件温和 ABCD体细胞基因治疗常用的靶细胞主要有：造血干细胞成纤维细胞肌细胞、肾细胞肝细胞、淋巴组织 B世界上第一个基因工程药物是：人白细胞干扰素INFa 重组人胰岛素人鼠源性单克隆抗体尿激酶 C下列不属于脂类药物的是：胆酸固醇灵芝大豆异黄酮 C下列能够产生抗体的细胞是：肝细胞，巨噬细胞，浆细胞，血红细胞 ABCD下列属于细胞代谢过程中的生理活性物质的是：维生素，植物激素，抗生素，生物碱 C下列属于细胞工程内容的是：染色体改造的理论和技术，酶改造的理论和技术，细胞融合的理论和技术，有关产物提取纯化的理论和技术 ABD工业上下列哪些是使用大肠杆菌生产的：谷氨酸脱羧酶，天门冬氨酸酶，丙酮酸脱羧酶，青霉素酰化酶 D被称为药剂学鼻祖的是：张仲景，希波克拉底，华佗，格林 AB造血生长因子的作用是：促进骨髓造血细胞分化，促进骨髓造血细胞增殖和定向成熟，动员祖细胞从骨髓移动到外周血，促进血液生产和血液循环 D下列不属于按分子大小分离的方法是：有超滤法，凝胶过滤法，超速离心法，沉淀法 ABCD下列可以作为生物药物的是：氨基酸及其衍生物，酶与辅酶，糖类，细胞生长因子 D基因工程中，载体的本质是：DNA，RNA ，蛋白质，DNA或RNA ABCD能够用作蛋白质药品冷冻干燥保护剂的是：糖类/多元醇，表面活性剂，氨基酸、盐和胺，聚合物 ABC才才下列属于酶反应器的是：鼓泡塔反应器，填充床反应器，流化床反应器，淤浆反应器
生物制药设备知识点 （我知道的就是这些了，仅供参考。但还是以老师的给的PPT为主吧。） 一、生物反应器是利用生物体所具有的生物功能，在体外或体内通过生化反应或生物自身的 代谢获得目标产物的装置系统、细胞、组织器官等等。（进行生物化学反应的空间统称为生物反应器） 二、生物反应器（bioreactor）经历了三个发展阶段：细菌基因工程、细胞基因工程、转基 因动物生物反应器（最引人注目）。 三、生物反应器分类： 四、（1）图解说明典型生物制药过程涉及的设备(重点)
（2）各工序所包含的基本设备： ①、原料前处理设备：如除杂、粉碎、输送、培养基制备（灭菌、液化、糖化）； ②、生物反应器：种子罐、发酵罐； ③、后处理设备：过滤、浓缩、干燥、结晶、蒸馏、离交、脱色、萃取等； ④、辅助生产设备：无菌空气系统、冷冻系统、水处理系统、蒸汽系统； （3）发酵设备分类 ①、专业设备：只用在生物工程专业上，如：、生物反应器（发酵罐、种子罐）、液化、糖化设备、连消设备； ②、通用设备：除在本专业上使用外，在其他工业上也使用，如：泵、风机、粉碎机、管件、阀门、过滤、换热设备。 ③、非标准设备：根据实际工艺需要定做的，无统一标准，如：储罐、计量罐等； （4）发酵工程设备的特点及要求 ①、设备特点： a、在常温、常压或低压下操作 b、无菌下操作，设备应考虑死角的消除，保证不被污染。 c、设备的结构应满足工艺的要求 d、制作材料应保证它耐受酸碱的腐蚀。 ②、基本要求： 在满足工艺要求、保证产品质量和收得率的前提下，生产成本最低。 a、强度和刚度 b、加工费用、运行费用（能耗、原料生产消耗、设备折旧） c、生产能力：罐越大，投资越省、运行越稳定，但不能染菌，否则损失惨重。 d、设备利用率：利用率高，设备投资越省、设备生产能力越大、生产成本越低。 五、机械搅拌： 六、1、蒸发：用加热的方法将溶液中部分水分或溶剂气化并去除，提高溶液浓度；又称蒸发浓缩。 2、蒸发浓缩过程中节能的解决方法：①、多效蒸发②、热泵蒸发（选择题） 沸点上升是由于溶质的存在导致分子运动阻力增加以及溶液粘滞和液柱高度阻碍溶剂气化和蒸汽的排出。沸点上升是影响热能重复利用增大能耗的重要原因。 解决措施： (一)热能循环利用即多效蒸发 （二）热泵蒸发：利用机械泵或蒸汽喷射泵将低压二次蒸汽压缩成较高压力之后使用。
生物技术制药试卷A 一、名词解释：（本题共10小题，每小题5分，共计50分） 1、生物药物：是指利用各种生物材料，综合采用各种生物技术的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。 2、抗生素：由微生物产生，在低浓度下能杀灭和抑制病原体，但对宿主不会产生严重的副作用的物质，或使用化学方法半合成的衍生物和全合成的仿制品。广义的抗生素还包括一些抗肿瘤药、杀虫剂和除草剂。 3、补料分批发酵：是指将种子接入发酵反应器进行培养，经过一段时间之后，间歇式地、或者连续地补加新鲜培养基，使菌体进一步生长的方法。 4、限制性内切酶：生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。由于这种切割作用是在DNA 分子内部进行的，故名限制性内切酶。 5、载体：将外源目的DNA导入受体细胞，并能自我复制和增殖的工具。 6、转化细胞系：正常细胞经过某个转化过程，失去正常细胞的特点而获得无限增殖能力的细胞系。 7、微载体培养：将细胞吸附于微载体表面，再在培养液中进行悬浮培养，使细胞在微载体表面生长成单层的方法称为微载体培养法。 8、毛状根：受到发根农杆菌感染后形成的根组织，易于培养，改变了植物的次生代谢。毛状根生长快速和次级代谢产物含量高，特别适用于从木本植物和难于培养的植物中得到较高含量的次级代谢产物。
9、气升式反应器：没有搅拌，气体通过喷管进入剪切力更小，主要用于悬浮细胞的分批式培养，近年开发用于贴壁细胞的微载体培养，并进行半连续、连续和灌流式培养。 10. 酶固定化：指经物理或化学方法处理，使酶（细胞）限制或固定于特定空间位置，使之不但能连续发挥催化作用，而且反应后酶又可以反复利用的技术。 二、简答题（本题共5小题，每小题8分，共40分） 1. 简述生物药物新药的研发流程。 答：新药研究和开发的主要过程： (1)确定研究计划； (2) 准备候选菌株； (3) 选择合适药理模型初筛（摇瓶）、复筛（小型发酵）体外试验、细胞试验； (4) 提纯有效成分进行化学分析； (5) 精制样品（中型发酵）； (6) 临床前Ⅱ期(Preclinical Ⅱ) ； (7) Ⅰ期临床(Preclinical I)； (8) Ⅱ期临床(Preclinical Ⅱ)； (9) Ⅲ期临床(Preclinical Ⅲ)； (10) 注册申请上市、试生产； (11) 售后监测(Post－marketing surveillance)。 2.简述生物药物的优点和缺点。 答：生物药物是指利用各种生物材料，综合采用各种生物技术的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。 优点：
生物技术制药考试题复 习 Document number【980KGB-6898YT-769T8CB-246UT-18GG08】
一：选择题 1、酶的主要来源是（C） A、生物体中分离纯化 B、化学合成 C、微生物生产 D、动/植物细胞与组织培养 2、所谓“第三代生物技术”是指 (A) A、海洋生物技术 B、细胞融合技术 C、单克隆技术 D、干细胞技术 3、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体往往会产生代谢副产物乙酸：(A) A、大于 B、等于 C、小于 D、无关 4、促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：（E） A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用? B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定? C、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活 D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感 E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化 5、目前基因治疗最常用的载体是：(B) A、腺病毒? B、反转录病毒 C、腺相关病毒 D、痘苗病毒 E、疱疹病毒 6、cDNA第一链合成所需的引物是：（D） A、Poly?A B、PolyC C、PolyG D、PolyT E、发夹结构 7、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措施有：(A) A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段 B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达? C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达? D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制 8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A) A、表达产物的功能 B、表达产物的产量C.表达产物的稳定性 D.表达产物分离纯化的难易? 9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和（安全性鉴定）。 10、基因工程药物的化学本质属于：(C) A.糖类 B.脂类 C.蛋白质和多肽类 D.氨基酸类 11、用聚二乙醇（PEG）诱导细胞融合时，下列错误的是：(C) A、PEG的相对分子量大，促进融合率高 B、PEG的浓度高，促进融合率高 C、PEG的相对分子量小，促进融合率高 D、PEG的最佳相对分子量为4000 12、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C) A、表达产物为糖基化蛋白质 B、表达产物存在的部位是在菌体内
中国药科大学生物制药工艺学期末试卷（A 卷） 一、填空题（每空0.5分，共30 分） 1．酶转化法与直接发酵法生产氨基酸的反应本质相同，均属酶转化反应。但两者相 比，酶转化法所需设备及工艺简单，产物浓度高，转化率高，生产周期短，副产物少，酶的利用率也高。 2．多肽的化学合成有液相合成和固相合成，常用的氨基保护基有苄氧羰基、叔丁氧羰基（BOC）和9-芴甲氧羰基(Fmoc) 。其中Fmoc 最常用。3．到目前为止，多糖的构效关系方面的研究还是很不完善的，但可以确定多糖的活 性与其高级结构、分支度及其侧链、分子量、及多糖中的取代基等密切 相关。 4、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括分子扩散、涡流扩散、流动相中传 质阻力、固定相中传质阻力。 5、写出下列离子交换剂类型：732 强酸型阳离子交换树脂，724 弱酸型阳离子 交换树脂，717 强碱型阴离子交换树脂，CM-C 阳离子交换纤维 素,DEAE-C 阴离子交换纤维素，PBE94 阴离子交换剂。 6、常用的吸附剂有活性炭，硅胶和大孔吸附树脂等。 7、过饱和溶液的形成方法有蒸发法、温度诱导法、盐析结晶法、有机溶剂结晶法、 等电点法、微量扩散法、化学反应结晶、共沸蒸馏结晶（八选七）。 8、根据色谱机理，色谱柱分为：反相色谱、正相色谱、离子交换色谱、凝胶过滤色 谱（或亲和色谱）。 10、透析的方法有：旋转透析器，平面透析器，连续透析器，浅流透析器。 11、常用的制备型离心机转子有角度转子，水平转子，区带转子，垂直转子。 12、克服浓差极化现象的措施有搅拌，震动，错流，切流。 13、供体，受体和载体是重组DNA技术的三大基本元件 14、写出下列英文缩写的中文名称：IFN 干扰素；IL-2 白介素－2 ；TNF 肿瘤坏死因子。 15、青霉素属于β-内酰胺类抗生素，它的性质很不稳定，用溶剂萃取法分离时整个提炼过程应在低温，快速，准确调节pH 值下进行。 16、四环类抗生素是一类以四并苯（萘并萘）为母核的一族抗生素；链霉素是氨基糖苷类抗生素；红霉素是分子内含有14 元环大环内酯类抗生素。 二、名词解释（每小题3 分，共24分） 1、基因药物：核酸类药物，以遗传物质DNA、RNA 为治疗物质基础的药物（1 分），如核酸疫苗、反义药物。（1 分）与基因工程类药物不同，基因工程药物化学组成上主要是蛋白质或多肽，但基因药物组成上主要为核酸（1 分）。
《制药工艺学》试卷 班级：学号：姓名： 得分： 一、单选题。（每题2分，共30分）是（）。 A.药品生产质量管理规范 B.药品经营质量管理规范 C.新药审批办法 D.标准操作规程 2.药品是特殊商品，特殊性在于 （）。 A.按等次定价 B.根据质量分为一、二、三等 C.只有合格品和不合格品 D.清仓在甩卖 3.终点控制方法不包括（）。 A.显色法 B. 计算收率法 C.比重 法 D. 沉淀法 4.温度对催化剂活性的影响是（）。 A.温度升高，活性增大 B.温度升高，活性降低 C.温度降低，活性增大 D.开始温度升高，活性增大，到最高速度后，温度升高，活性降低 5.中试一般比小试放大的位数是 （）倍。 ~10 ~30 C.30~50 ~100 6.利用小分子物质在溶液中可通过半 透膜，而大分子物质不能通过的性质，借以达到分离的一种方法是（）。 A.透析法 B.盐析法 C.离心法 D.萃取法 7.液体在一个大气压下进行的浓缩称 为（）A. 高压浓缩 B.减压浓缩 C. 常压浓缩 D.真空浓缩 8.下列不属于氨基酸类药物的是 （） A.天冬氨酸 B.多肽 C.半胱氨酸 D.赖氨酸 9.下列不属于多肽、蛋白质含量测定方法的是（） A.抽提法 B.凯氏定氮法 C.紫外分光光度法 D.福林-酚试剂法 10.下列属于脂类药物的是（）。 A.多肽 B. 胆酸类 C.胰脂酶 D 亮氨酸 11.（）抗生素的急性毒性很低，但副作用较多，另外，对胎儿有致畸作用。 A.四环素类 B.大环内酯类 C.氨基糖苷类 D. β-内酰胺类 12.生产抗生素类药物发酵条件不包括（）。 A.培养基及种子 B.培养温度及时间及通气量 D.萃取及过滤 13.下列不属于动物细胞培养方法的是（）。 A.贴壁培养 B.悬浮培养 C.直接培养 D.固定化培养 14.抗生素类药物生产菌种的主要来源是（）。 A.细菌 B.放线菌 C.霉菌 D.酵母菌 15.将霉菌或放线菌接种到灭菌后的大米或小米颗粒上，恒温培养一定时间后产生的分生孢子称为（）。 A. 米孢子 B.种子罐 C.发酵 D. 试管斜面
生物技术制药习题 WEIHUA system office room 【WEIHUA 16H-WEIHUA WEIHUA8Q8-
第三章基因工程—工程技术 一．填空 1、基因工程操作流程主要包括（）（）（）（） （）。 2、分离目的基因常采用（）从基因组DNA中扩增含目的具有的DNA片断， 或者 用分子杂交等方法从构建的（）或（）中获得含目的基因的克隆子。 3、克隆载体有（）和（）等，供不同实验要求选择使用。 4、在（）的作用下，含（）的DNA片断与（）连接成为重组 DNA 分子。 二．判断 1、无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体。（） 2、cDNA是以DNA为起始材料，经过复制得到的互补DNA。（） 3、只有粘性末端才可以被连接起来。（） 4、任何细胞都可用作受体细胞。（） 5、原核生物细胞是最理想的受体细胞。（） 6、Western杂交是DNA-RNA之间的杂交。（） 7、 DNA连接酶只能催化双链DNA片断互补黏性末端之间的连接。（） 第四章细胞工程技术概论 一．选择 1、植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是（） A. 植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁 B. 细胞壁使原生质体失去活力 C. 细胞壁阻碍了原生质体的融合? D. 细胞壁不是原生质的组成部分 2、动物细胞融合的说法不正确的是（） A. 细胞融合首先用酶解法（胰蛋白酶）分散成单个细胞 B. 细胞融合是个细胞识别过程
C. 融合细胞能表现出两个亲本的特点 D. 原生质体自然条件下常自发融合 3、单克隆抗体的生产方法中错误的是（） A. 发酵罐中培养 B. 小鼠的腹腔繁殖 C. 培养成组织移植到动物体内 D. 牛的体腔培养 4、不能人工诱导原生质体融合的方法是（） A. 高pH B. 电刺激 C. PEG（聚乙二醇）试剂 D. 重压 5、植物细胞融合常用的诱导剂是（） A. PEP B. PEG C. ATP D. 大肠杆菌质粒 6、目前有一种蔬菜新品种“白菜—甘蓝”,只是将两个来自不同植物的体细胞融合成一 个杂种细胞，并将其培养成新的植物体。这是利用了现代生物技术中的什么？ A.细胞工程 B.基因工程 C.蛋白质工程 D.酶工程 二. 填空 下图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答： (1)步骤?是_______________________，最常用的方法是_______________________。 (2)步骤?一般常用的化学试剂是_______________,目的是______________________。 第六章发酵工程技术概论 一．选择 1、发酵工程以培养微生物为主，所以又称为（）。 A．细胞工程B．微生物工程 C．细菌工程 2、发酵工程的主要内容包括（）。 A．生产菌种的选育B．发酵条件的优化与控制反应器的设计及产物的分离 C．提取与精制 D．以上都是 3、下列哪些是目前具有生产价值的发酵类型（）。 A．微生物菌体发酵 B．微生物菌体代谢产物发酵 C．微生物的转化发酵D．以上都是 4、下列哪些是发酵技术独有的特点（）。 A．多个反应不能在发酵设备中一次完成 B．条件温和、能耗少、设备简单 C．不容易产生高分子化合物D．发酵过程中不需要防止杂菌污染 5、发酵过程中，PH值取决于（）。 A．菌种B．培养基 C．培养条件D．以上都是 6、下列生产工艺属于固体发酵的是（）。 A．酿酒B．制酱C．天培（大豆发酵食品） D．以上都是 7、下列哪些是发酵的主要操作方式（）。 A．分批发酵B．连续发酵C．补料分批发酵D．全部都是 8、气升式发酵罐与搅拌式发酵罐相比，下列不属于前者特点的是（）。 A．发酵罐内没有搅拌装置，结构简单 B．发酵罐内有搅拌装置，混合速度快 C．耗能少，利于生产 二、填空 1、根据搅拌的方式不同，好氧发酵设备又可分为（）、（）。 2、根据操作方式的不同，液体深层发酵主要有（）、（）、 （）。 3、当前发酵工业所用的菌种总趋势是从野生菌转向（），从自然选育转 向（），从诱发基因突变转向（）。
4 一、填空题（每空1分，共20分） 1、生物反应器按操作方式分可分为间歇式、半连续式及连续式三种类型。 2、常用的灭菌方法有化学药剂灭菌、干热灭菌、湿热灭菌、射线灭菌及过滤除菌。 3、发酵罐管道连接方式有螺纹连接、焊接、法兰连接及承插连接。 4、纤维介质截获颗粒的机理包括惯性撞击截留作用、拦截截留作用、布朗扩散截留作 用以及重力沉降作用、静电吸附作用。 5、过滤介质按孔隙大小分两类，一类是孔隙小于微生物的绝对过滤介质；另一类是孔隙大于微生物的深层过滤介质。 6、常用的气-液分离设备有旋风分离器及丝网除雾器，前者的分离原理是利用离心力进行分 离，后者的分离原理是利用惯性拦截原理进行分离。 二、名词解释（每小题2分，共10分） 1、返混：反应器中停留时间不同的料液之间的混和。 2、公称体积：罐的筒身（圆柱）体积和底封头体积之和。 3、相对热阻：相同条件下，两种微生物热死时间的比值。 4、灌注式操作：是指细胞接种后进行培养，一方面新鲜培养基不断加入反应器，一方面又将反应液连续不断地取出，但细胞留在反应器内，使细胞处于一种不断的营养状态。 5、全挡板条件：指在搅拌罐中增加挡板时，搅拌功率不再增加，而漩涡基本消失。 三、不定项选择题（每题2分，共20分） 1、下列属于染菌引起的危害有（ABCD ） A、底物损耗 B、培养液pH异常 C、产物分解 D、产物提取困难 2、压缩空气预处理时，取气口应（ABCD ） A、放在较高的位置 B、远离发酵罐尾气的放风口 C、远离循环水的冷却塔 D、远离锅炉烟道气排出口 3、液相主体中若混合良好则（ B ）
A、内扩散可忽略不计 B、外扩散可忽略不计 C、内、外扩散均可忽略不计 D、内、外扩散均不可忽略不计 4、空气过滤器设计时应取K多大时的流速以保证空气过滤器有良好的除菌效率（ B ） A、最高 B、最低 C、中等 D、无所谓 5、抗生素发酵生产中染菌最主要的原因是（ D ） A、培养基灭菌不彻底 B、种子带菌 C、接种子罐压跌零 D、设备穿孔与渗漏 6、空气冷却至露点以上的流程适合于下列何种地区（AC ） A、北方及内陆较干燥的地区 B、沿海地区的夏季 C、沿海的冬季 D、中等湿含量的地区 7、下列哪些符合涡轮式空压机的特点（BD ） A、气流不稳 B、占地小 C、含油量高 D、噪音大 8、下列哪些符合涡轮式搅拌器的特点（AD ） A、结构简单 B、作用范围大 C、气体分散能力弱 D、功耗较大 9、下列反应器中可用于底物抑制反应的有（AC ） A、CSTR B、填充床 C、流化床 D、PFR 10、下列反应器中可采用间歇操作方式的有（ACD ） A、搅拌罐 B、填充床 C、流化床 D、鼓泡塔 三、问答题（共30分） 1、固定化酶反应器有哪些型式？酶反应器选型要考虑哪些因素？（8分） 答：固定化酶反应器的主要型式有：搅拌罐、填充床、流化床、膜式酶反应器、鼓泡塔（任意写出4种即可，每种1分）。 酶反应器选型要考虑的因素有：固定化酶的形状、底物的物理性质、酶反应动力学特性、酶的稳定性、操作要求及反应器成本（任意写出4条即可，每条1分）。 2、下图为一条连续灭菌的流程图，请指出该灭菌流程有哪些缺陷，若要你对该流程进行改进，请说明你会采用何种设备来进行改进并说明理由。（8分）
第一章绪论 填空题 1. 生物技术制药的特征高技术、高投入、高风险、高收益、长周期。 2. 生物药物广泛应用于医学各领域，按功能用途可分为三类，分别是治疗药物、预防药物、诊断药物。 3.现代生物药物已形成四大类型：一是应用DNA重组技术制造的基因重组多肽、蛋白质类治疗剂；二是基因药物；三是来自动物植物和微生物的天然生物药物；四是合成与部分合成的生物药物； 4.生物技术的发展按其技术特征来看，可分为三个不同的发展阶段，传统生物技术阶段；近代生物技术阶段；现代生物技术阶段。 5.生物技术所含的主要技术范畴有基因工程；细胞工程；酶工程；发酵工程；蛋白质核酸工程和生化工程； 选择题 1.生物技术的核心和关键是（A ） A 细胞工程 B 蛋白质工程 C 酶工程 D 基因工程 2. 第三代生物技术（ A ）的出现，大大扩大了现在生物技术的研究范围 A 基因工程技术 B 蛋白质工程技术 C 海洋生物技术D细胞工程技术 3.下列哪个产品不是用生物技术生产的（D ） A 青霉素 B 淀粉酶 C 乙醇 D 氯化钠 4. 下列哪组描述（A ）符合是生物技术制药的特征 A高技术、高投入、高风险、高收益、长周期 B高技术、高投入、低风险、高收益、长周期 C高技术、低投入、高风险、高收益、长周期 D高技术、高投入、高风险、低收益、短周期 5. 我国科学家承担了人类基因组计划（C ）的测序工作 A10% B5% C 1% D 7% 名词解释 1.生物技术制药 采用现代生物技术可以人为的创造一些条件，借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医学药品，称为生物技术制药。 2.生物技术药物 一般说来，采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸来药物称为生物技术药物。 3.生物药物
2 一、填空题（每空1分，共20分） 1、板框压滤机的滤液流出方式有及 两种，洗涤方式有及 两种。 2、常用的空气过滤介质有棉花、、 及烧结材料过滤介质、微孔聚合物等。 3、空压机可分为往复式、、 三种类型。 4、常用的灭菌方法有、、 、。 5、生物反应器按操作方式分类可分为间歇式、、 三类。 6、影响固定化酶动力学的因素有
及。 7、常用的气-液分离设备有及 。 8、溶媒萃取设备有分级式萃取设备、 、三种类型。 二、名词解释（每小题2分，共20分） 1、相对热阻 2、返混 3、分批灭菌 4、相对湿度 5、通用式发酵罐 6、公称体积
7、全挡板条件 8、固定化酶 9、填充床 10、总体设计 三、问答题（共40分） 1、下图为一条连续灭菌的流程图，请指出该灭菌流程有哪些缺陷，若要你对该流程进行改进，请说明你会采用何种设备来进行改进并说明理由。（8分） 2、试列举出用于发酵罐的管道的主要连接方式，并指出每种连接方式适用于何种管道。（8分） 3、试列举出动物细胞培养的特点，并写出至少三种用于动物细胞培养的生物反应器。（8分） 4、通用式发酵罐的主要部件有哪些，并分别说明其作用。（10分）
5、假设要你对某一发酵车间进行改造，请写出你实施该项目的主要步骤。（6分） 四、计算题（共20分） 1、现有一10 m3的发酵罐，装料系数为0.8，培养基中细菌的浓度为1000个/ml，试计算间歇灭菌所需的时间（（灭菌温度为121℃））。培养时所需的通气量VVM为0.9，空气中微生物浓度约为1.2×103个/ m3，发酵周期为72 h，通过空气过滤器的气体流速为0.12 m/s，除菌常数为120 m-1，试求空气过滤器直径和过滤介质层厚度。（设高温灭菌和空气除菌失败的几率均为千分之一）（10分） 2、现有一罐径为3.2 m，装料液量为40 m3的发酵罐（通用式发酵罐），液柱高度为5.4 m，装料系数为0.75，在该发酵罐内装有三层六弯叶涡轮搅拌器（滞流和湍流时的K值分别为71和4.8），直径为1 m，搅拌转速为150 r/min，采用以下指标，通气量为25 m3/min（标准状态），罐压为0.4个大气压（表压），液体密度为1100 kg/m3，粘度为50 cP （1cP=10-3 Pa?s），求不通气和通气时的搅拌功率各为多少？（10分）
名词解释 1、生物技术制药：是指利用生物系统或通过生物反应过程生产药物的技术。 2、生物药物：是指以生物资源为原料或以生物技术为手段开发生产的用作疾病的预防、诊断和治疗的医药品。 2.5、限制酶：及其特性限制性核酸内切酶，是一类专一性很强的核酸内切酶，专一地识别和作用于DNA分子上特定的核苷酸序列，切断DNA双链。 3、连接酶：能将两段DNA拼接起来的酶叫DNA连接酶。这类酶的发现和分离纯化，使两个DNA片段在体外连接形成重组DNA分子成为可能。 4、限制酶星活性：在标准条件下，每种限制酶都有严格的识别序列。在非标准条件下，会导致限制酶识别序列的特异性发生改变，在DNA内产生附加切割，称限制酶的第2活性或星活性。 5、基因载体：在细胞内具有能进行自我复制的独立DNA分子作为外源DNA片段的运载体，简称基因载体，又称分子克隆载体或无性繁殖载体。 6、粘粒：是一种有λ噬菌体粘性末端的杂种质粒，由λDNA的cos区段与质粒DNA重组构建而成。 7、基因文库：将供体生物的DNA用限制酶切成许多片段，在连接酶的作用下分别与克隆载体进行体外重组，这种含有供体生物全部不同基因的重组克隆载体的总体称供体生物的基因文库。 8、cDNA基因文库：以供体生物的总mRNA为模板，在反转录酶作用下合成核苷酸序列互补的DNA（cDNA），将全部cDNA分别与克隆载体进行体外重组，这些含有供体生物全部不同基因的重组克隆载体的总体称供体生物的cDNA基因文库。 9、PCR技术：聚合酶链式反应（Polymerose chain reaction）技术，简称PCR技术，是一种用于在体外扩增位于两段已知序列之间的DNA区段的分子生物学技术。应用该技术可在很短的时间内得到数百万个特异DNA序列的拷贝。 10、转化：将携带目的基因的重组质粒导入受体细胞的过程称为转化。 11、转染：将重组噬菌体DNA直接导入受体细胞的过程称为转染。 12、感染：将重组噬菌体DNA包装到噬菌体头部成为有感染力的噬菌体颗粒，再导入受体细胞的过程。 13、多克隆位点：基因载体上由多种限制酶单一识别序列组成的序列，是插入外源目的基因DNA片段的位点。 14、高丰度mRNA：从某些特定型分化细胞分离的细胞质中，编码某特种蛋白质的目的mRNA占总mRNA的50~90%。称为高丰度mRNA。 15、抗体：指能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 16、单克隆抗体：采用B淋巴细胞杂交瘤技术，由纯一的单克隆细胞系产生的，针对一个抗原决定簇的，结构和特异性完全相同的高纯度抗体称单克隆抗体。
生物制品制度培训试题及答案 1. S 2. 连锁总部 3.收集、分析、汇总 4.专职，兼职，随到随验，半。 5.品名、规格、数量、有效期、生产企业、批号，外观。 6.冷藏柜 7.冷藏柜 8.阳光 9.养护 10. 2-10℃
11.核对 12.劣药 13. 6个月，1个月。 14.不良反应 15.未注明 16.询问，药品说明书。 17.质量管理负责人 18.拒收 19.下柜 20.连锁总部 西安藻露堂药业集团藻露堂药业连锁有限公司
《生物制品制度》培训试题 单位: 姓名: 成绩: 1.生物制品是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发 酵等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织或液体等生物材料制备，用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品。在药品的批准文号中用( )英文字母表示 2.门店购进生物制品必须从( 其它渠道采购生物制品。 3.门店应当( )、( )、( )所经营生物制品的适销情 况和质量情况，收集消费者对生物制品质量及疗效的反映，及时向配送储运部反馈，为优化生物制品结构提供依据。 4.连锁门店应设置( )或( )的质量验收人员，负责总部配
送生物制品的质量验收工作，做到( )，需冷藏生物制品应在到货后( )小时内验收完毕。 5.质量验收员必须依据总部配送储运部的生物制品配送清单，对购进 生物制品的( )、( )、( )、( )、( )、( )等逐一进行核对，并对其包装进行(外观)检查。 6.验收合格的，验收员在配送单上签字，通知营业员收货，如需冷藏 的生物制品立即将放入( )储存。 7.经营需冷藏储存生物制品的门店，应配备相应的( )设施。 8.陈列生物制品应避免( )直射。 )配送储运部购进，不得自行从 9门店配备专职或兼职养护员，对陈列生物制品进行( )检查，
2017—2018学年 第二学期 2015级 专业《现代生物制药技术》期末考试试卷 一、名词解释：（本大题共5小题，每小题3分，共15分） 1. 生物反应： 2. 发酵： 3. 种子制备： 4. 愈伤组织： 5. 免疫原性： 二、选择题：（本大题共50小题，每小题0.5分，共25 分） （请将正确答案填写在下面表格内） 1.壳聚糖是（ ）。 A.普通多糖 B ．酸性多糖 C ．氨基多糖 D ．络合多糖 2.（ ）是医药工业合成甾体激素的原料。 A.薯蓣皂苷元 B.多糖 C ．黄酮 D ．蛋白质 3.具有强致泻、止血、影响血小板细胞和肝细胞及脑细胞内游离钙浓度等多种活性的番泻苷 A 及其类似物属于（ ）药物。 A.皂苷类 B.多糖 C ．二蒽酮 D ．蛋白质 4. 软紫草根中分离的抗菌、抗炎、抗癌的活性成分紫草素及其衍生物属于（ ）药物。 A.皂苷类 B.多糖类 C ．苯醌类 D ．蛋白质类 5.当归根挥发油中分离当归内酯属于( )，具有抗肿瘤、调节免疫的功能。 A.萘醌类 B ．萜类 C ．香豆素类 D ．植物甾醇类 6. 海洋生物( )含有丰富的伊胡萝卜素。 A.虾蟹 B ．海绵 C ．珊瑚 D.盐藻 7. 许多陆地植物含有皂苷，而目前在动物界中只发现海洋棘皮动物的海参和海星含有皂苷，皂苷是它们的毒性成分，均具有( )功能。 A.抗血栓 B ．抗肿瘤 C ．降血压 D.改善微循环 8. 透明质酸可以从( )中获得。 A ．鲸鱼 B ．扇贝 C ．海星 D ．蓝藻 9.人体必需的氨基酸有（ ）种。 A.8 B.9 C.10 D.12 10.从（ ）中分离出新的甾醇硫酸盐A 和B ，都具有体外抗猫白血病毒作用。 A.海绵 B.海藻 C.鲸鱼 D.螺旋藻 11.苔藓虫素是从海洋苔藓虫中分离的新型（ ）衍生物 A.多肽类 B.青霉类 C.四环类 D. 大环内酯类 12.用于面包制作的酵母发酵属于（ ）。 部 班级 姓名 学号 考场 ----------------------------------------------密----------------------------------封------------------------------------------线----------------------------------------
生物制药设备文献综述 综述题目微反应器及固定化酶微反应器的研究与进展 英文题目Current situation and development trend of microreactor and immobilized enzyme microreactor 专业生物制药（卓越工程师） 院部生命科学与技术学院 学号14404806 姓名龙益如
目录 微反应器及固定化酶微反应器的研究与进展 (3) 前言 (4) 1微反应器的概念、分类及结构 (5) 1.1微反应器的概念 (5) 1.2微反应器的分类 (5) 1.3微反应器的结构 (5) 2微反应器的特点 (6) 2.1比表面积的增大和体积的减小 (6) 2.2对反应温度的精确控制 (7) 2.3对反应时间的精确控制 (7) 2.4物料以精确比例瞬间均匀混和 (7) 2.5结构保证安全 (7) 2.6无放大效应 (7) 3固定化酶微反应器 (8) 3.1固定化酶微反应器概述 (8) 3.2固定化酶微反应器的制备 (8) 3.2.1共价键合法 (9) 3.2.2物理吸附法 (10) 3.2.3配位络合法 (11) 3.2.4生物固定法 (11) 3.2.5包埋法 (12) 3.3固定化酶微反应器的应用 (12) 4微反应器的应用 (15) 4.1精细化工和制药工业 (15) 4.2生物化学 (15) 4.3多功能集于一体的微反应器 (16) 5微反应器研究概况及存在的问题 (16) 6展望 (18) 参考文献 (19)
微反应器及固定化酶微反应器的研究与进展 14404806 龙益如 摘要：微反应器是微化工技术的核心之一，是一类新型反应设备，在微结构的作用下，可形成微米尺度分散的单相或多相体系的强化反应过程，从而具有反应温度和时间精确控制等优点。固定化酶微反应器是将生物分子固定技术与生化微反应相结合制备的一种固定化催化装置。这种微型化的反应系统由于兼具固定化酶的特异性催化、可重复利用及微分析的低消耗、易分离等优点，在生命科学如蛋白质组学、酶抑制剂的筛选、生物催化等领域具有非常重要的作用。主要介绍微反应器的特点和研究进展以及固定化酶微反应器的制备和应用等内容。 关键词：微反应器；固定化酶微反应器;微反应器放大；微反应器应用。
第一章绪论1、生化药物：从生物体分离纯化所得的一类结构上十分接近人体内正常生理活性物质的，能调节人体生理功能以达到预防和治疗疾病目的的物质。 P1 2、按照药物的化学本质，把生物药物分为氨基酸类、蛋白质类、酶类、 核酸类、多糖类、脂类、维生素及辅酶类。P3-5 3、生物药物的原料来源分为动物、植物、微生物、海洋生物、人体五大类。P5 4、肝素的化学成分属于一种多糖，其最常见的用途是抗血凝。P4 5、SOD的中文全称是超氧化物歧化酶，能专一性清除氧自由基。P4 6、辅酶在人体内的酶促反应中起重要的递H、递e等作用，有药用价值，人体生化反应中重要的辅酶：NAD、NADP、FMN和FAD 。P4 7、前列腺素的成分是一大类含五元环的不饱和脂肪酸，重要的天然前列腺素有PGE1、PGE2、PGF2α等。P5 8、请说明酶类药物主要有几类，并分别举例。P4 第二章生物药物的质量管理与控制 1、中试：是把已取得的实验室研究成果进行放大的研究过程。P28 2、热原：是指在药品中污染有能引起动物及人的体温升高的物质。P42 3、生物检定法：利用药物对生物体的作用以测定其效价或生物活性的一种方法。 4、生物药物质量检验的程序包括取样、鉴别、检查、含量测定、写出检验报告。 5、药物的ADME表示药物在体内的整个过程，它们分别是吸收Absorption、 分布Distribution、代谢Metabolism、排泄Excretion。 6、生物药物在表示含量的时候有百分含量和活性效价两种。 7、英美等国在药品的质量管理上采取典型的主副典机制，其中美国的药典和副药典分别简称为 USP 和 NF 。 8、在生物药物的质量管理规范中，GMP、GLP、GCP分别指良好药品生产规范、 良好药品实验研究规范、良好药品临床试验规范。 9、为了对新兴的基因工程药物进行质量管理，中国在2000年编制并颁布了中国生物制品规程。 10、基因工程生产的重组蛋白药物，须进行蛋白纯度检查，按WHOG规定，须用 HPLC 和
生物技术制药试题及答案 一、名词解释 1. 生物技术（biotechnology）：有时也称为生物工程（bioengineering），是指人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，利用生物得体或其体系或它们的衍生物来制造人类所需要的各种产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。 2．基因工程（gene enginerring）：是指在基因水平上的操作并改变生物遗传特性的技术。即按照人们的需要，用类似工程设计的方法将不同来源的基因（DNA 分子）在体外构建成杂种DNA分子，然后导入受体细胞，并在受体细胞内复制、转录和表达的操作，也称DNA重组技术。 3．细胞工程（cell engineering）：是指在细胞为基本单位，在体外条件下进行培养、繁殖或人为地使细胞某些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而达到改良生物品种和创造新品种的目的，加速繁育动植物个体，或获得某种有用物质的技术。 4．酶工程（enzyme engineering）：是利用酶、细胞器或细胞所具有的特异催化功能或对酶进行修饰改造，并借助生物反应器和工艺过程来生产人类所需产品的技术。 5．发酵工程（fermentation engineering）：是指利用包括工程微生物在内的某些微生物或动、植物细胞及其特定功能，通过现代工程技术手段（主要是发酵罐或生物反应品的自动化、高效化、功能多样化、大型化）生产各种特定的有用物质；或把微生物直接用于某些工业化生产的一种技术。由于发酵多与微生物密切联系在一起，所以又称之为微生物工程或微生物发酵工程。 6. 生物反应器（bioreactor）：主要包括微生物反应器、植物细胞培养反应器，动物细胞培养反应器以及新发展起来的有活体生物反应器之称的转基因植物生物反应器，转基因动物生物反应器等。 7. 转基因动物：是指在基因组中稳定地整合有导入的外源基因的动物。 8. 转基因植物：是指通过体外重组DNA技术将外源基因转入到植物细胞或组织，从而获得新遗传特性的再生植物。 9. 细胞培养（cell culture）：是指微生物细胞或动物细胞、植物细胞在体外无
一，名词解释（5*4=20.） 1.高密度发酵:是在单个菌体对目标基因的表达水平基本不变的前提下，通过单位体积的菌体数量的增加来实现部分表达量的提高的发酵方式。 2.干扰素：人体细胞分泌的一种活性蛋白，具有广泛的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节活性，是人体防御系统的重要组成部分。 3.人鼠嵌合体抗体：将抗A抗原的抗体的重链和轻链可变区分离出来，分别于人工的重链和轻链的稳定区基因连接成人鼠嵌合体的重链和轻链基因，再转染骨髓瘤细胞，就能表达出完整的人鼠嵌合体抗体。 4.亲和层析:利用固定化配体与目的蛋白之间非常特异的生物亲和力进行吸附，这种结合既是特异的又是可逆的，改变条件可以使这种结合解除。 5.原代细胞:直接取自动物组织，器官，经过粉碎，消化而获得的细胞悬液。 二，填空题（1*20=20） 1.质粒不稳定分（分裂不稳定）和（结构不稳定）。 2.影响高密度发酵的因素包括（溶氧浓度）、（培养基）、（PH）、（温度）、（代谢副产物） 3.目的基因的获取方法:（反转录法），（反转录-聚合酶链式反应法），（人工合成） 4.动物细胞在培养过程，会产生一些有害的代谢副产物，这些物质的积累会抑制细胞的生长和蛋白的表达，这些代谢副产物主要是（乳酸）和（氨） 5.基因工程药物制造的主要程序有 （目的基因的克隆），（构建DNA重组体），（构建工程菌），（目的基因的表达），（外源基因表达产物的分离纯化），（产品的检验）等。 6.离体培养的动物细胞分为两类:（贴壁依赖型）和（贴壁非依赖型） 三，选择题。（2*10=20） 1.细胞破碎不属于化学法的是（D） A渗透冲击法B增溶法C脂溶法D裂解法 2. 青霉素的主要作用（A） A、抑制细胞壁合成 B、抑制细胞膜功能 C、干扰蛋白质合成 D、抑制核酸合成 3. 下列可以用于蛋白质分子量的测定的技术是（A） A、凝胶过滤层析 B、亲和层析 C、离子交换层析 D、免疫吸附层析 4.细胞融合后，其常用的选择培养基中，没有下列哪种成分（B） A 氨基喋呤B，鸟嘌呤C次黄嘌呤 D 胸腺嘧啶 5.高密度发酵的理论最高值可达到（C） gDCM/L A50 B100 C 200 D 500 6.发酵培养基的成分不包括（B） A 碳源 B 维生素 C 氮源 D无机盐 7.真核生物在大肠杆菌中的表达方式不包括（D） A 融合蛋白 B 非融合蛋白 C 分泌型表达蛋白 D非分泌型表达蛋白 8.二倍体细胞的寿命一般不会超过（C）代 A 20 B 40 C 50 D100 9.动物细胞在进行离心纯化时一般采用（A）
生物制药的发展概述 Prepared on 22 November 2020
生物制药的发展概述 摘要 本文主要讲述了生物制药的发展历史,指出了如今生物制药的一些发展的现状,并提出了未来可能出现的趋势。对近年来生物制药领域里的一些发展,做一个简单的概述,对目前的生物制药领域的现状进行了简单分析和发展的建议。 关键词：生物制药发展历史现状趋势 前言 生物制药主要是指运用了生物学、医学等领域的研究成果及其技术,从微生物、人体、动物、植物、海洋生物等自然界的生物材料中提取原料或者人工合成与其相同成分的原料制作出的用于预防、治疗、诊断的医药用品。本文将简单的介绍生物制药的发展历史和我国生物制药的发展现状并对此现状做出简单的分析及对我国生物制药产业的未来发展的小建议[1]。 1.生物制药的发展历史 生物制药的世界发展历史 生物制药可以说是在上世纪的80年代开始迅猛发展。下面,我就来介绍一下生物制药历史上的一些重大药品的发明: 1986年,第一个治疗性单克隆抗体药物允许上市, 此药物是用来防止肾移植排斥的,于同一年第一个基因重组的疫苗即乙肝疫苗和第一个抗肿瘤生物技术的药物干扰素也开始上市。1987年,第一个用动物细胞表达的基因工程产品开始上市。1989年,生物技术药物EPO 被允许上市。1990年的人源抗体制备技术的创立,让世界惊叹。1994年,第一
个基因重组嵌合抗体匆匆上市。1997年,第一个肿瘤治疗的治疗性抗体上市,同年第一个组织工程产品组织工程软骨也开始上市。1998年,既是第一个也是唯一一个反义寡核苷酸药物上市,此药品是给AIDS 病人治疗由于巨细胞病毒引起的视网膜炎,获得了巨大成功。同时 Neupogen 成为生物技术药物中的重要研究,这一年甚至出现了第一次分离培养了人胚胎干细胞,极大推动了生物制药产业的发展。2000年,人类基因组草图的绘就,代表着对人类基因组的初步探索成功。2002年,第一个治疗性人源抗体获准上市。2004年,中国允许了第一个基因治疗药物的重组人腺病毒[2]。 这些药物的开发与研究使生物制药产业蓬勃发展起来,为生物制药的发展做出了重大的贡献。 我国在生物制药领域的发展史 我国的发展历史 生物制药最早在我国出现的时候是第一个五年计划,在随后的计划经济之中相对滞后,但在20世纪80年代后,我国开始重视起来生物制药产业的发展。我国的生物制药产业虽然起步较晚但在改革开放以后也取得了飞快的进步。并且在国家发布的政策的支持下,使生物制药领域的发展迅猛,并且逐渐缩短了与先进国家之间的差距。不仅如此,我国在现代生物制药产业技术上的发展也越来越少,甚至开始改善传统的生物制药技术方面也已经取得了不差的成绩。并且我国拥有自主知识产权的生物制药产品也在不断增加。不仅打破了一部分国外的技术封锁,缩小了与其他发达国家在生物制药领域方面的技术水平上的差距。更重要的是培养了一批可以进行独立专业研究的工程人员,为未来的发展做好技术储备[3]。 发展中的弊端与不足 但是我国在生物制药方面的发展过程中也产生了弊端与不足,目前面临的一些问题