第七节血细胞分离技术
（Separation technique of the blood cell）
一、原理
在体外进行细胞免疫检测时，首先必须进行淋巴细胞的分离。分离淋巴细胞的
方法很多，但不管采用哪种方法，均要求分离的淋巴细胞纯度高、产量多，而且不
丧失活性，同时也要求分离技术简单、操作方便。
外周血液中红细胞和白细胞的比例在几百甚至上千比一，两类细胞的大小和密
度不同，其沉降速度也就不同。红细胞的自然沉降率较快，加入高分子量的聚合物，如明胶、右旋糖酐等还可以加速其凝聚。利用自然沉降法、密度梯度离心法或二者
结合，可以将淋巴细胞从血液中分离出来。这种分离出的淋巴细胞一般包括单核细胞。除去单核细胞，可以利用单核细胞的吸附功能，如铁颗粒、玻璃面或尼龙网等，除去（或分离）单核细胞，从而提纯淋巴细胞。
二、采血
（一）材料与试剂
1．抗凝剂
（1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其钠盐或钾盐，它能阻止凝血酶
原转化为凝血酶，进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白，从而阻止血液凝固。常用的
肝素溶液浓度为1 000U/ml，市售肝素多为100U~126U／mg。
（2）乙二胺四乙酸（EDTA）：是一种螯合剂。用生理盐水配制成4％的溶液
备用。
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（3）阿氏液（Alsever液），配方如下：
枸橼酸钠（Na3C6H5O7·5H2O）0.80g
枸橼酸0.0325g
葡萄糖 2.05g
氯化钠0.42g
H2O 加至100.00ml
混匀溶解后，114.3℃高压蒸汽灭菌10min备用。
阿氏液中既含有枸橼酸钠抗凝剂，又含有细胞生存的营养，所以它既可做抗凝剂，又可做血细胞的保存液。
2．针头根据不同动物和采血部位，采用不同型号的针头，用前必须灭菌或
消毒。
3．采血容器注射器或三角瓶等。
4．采血动物。
（二）操作方法
1．采血法各种动物采血方法不一。马、牛、羊等大动物一般从颈静脉采血，猪从颈静脉、前腔静脉或耳静脉采血，家禽由翼下静脉或心脏采血，兔由心脏或耳
静脉采血，犬由颈静脉或四肢静脉采血，豚鼠由心脏采血，小白鼠则可断尾或剪断
腋下血管或剪断眼球采血。
2．抗凝采集血液最关键的问题是抗凝，采用什么方法进行抗凝，则根据实
验的要求和条件而定。最常用的方法如下：
（1）肝素抗凝：采血时，使每ml血液含15U~20U肝素即可。计算采集的血
液量，按1 000U/ml的量加入肝素，直接放入采血容器中，采血时，边采血边轻轻
摇动，使抗凝剂和血液混匀。对于采少量的血液或小动物采血，可直接用注射器抽
取一定量的肝素液，再采血直接抗凝。
（2）EDTA抗凝：采血前，用灭菌生理盐水将EDTA配制成4％溶液，然后
按预采血液的量，以每ml血液加入1mg~2mg的EDTA的液体量于采血容器内。
采血，并不断摇动采血容器，使之混匀。
（3）玻璃珠法：预先将适量的玻璃珠（根据采血量多少而定）清洗后，装入
采血容器中，灭菌后备用。采血过程中，边采边摇采血瓶，以使小玻璃珠在血液中
滚动，以机械地除去纤维蛋白，使血液不能凝固。本法虽较麻烦，但对淋巴细胞的
活性影响最小，且可减少血小板的混杂。
（4）阿氏液采血：以阿氏液和采血量以1︰1比例采集血液，边采边轻轻摇动
采血瓶，使之混匀。用阿氏液采血，除了抗凝外，多用于红细胞的保存。一般在4℃
条件下，阿氏液中保存的红细胞2周其活性和特性不变。
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三、红细胞的分离技术
（一）材料与试剂
1．肝素等抗凝剂
2．3％明胶液取明胶3g，溶于0.9％灭菌盐水100ml中，114.3℃灭菌10min，冷却后4℃冰箱保存。临用时，37℃预热10min。
3．阿氏液
（二）操作方法
1．采血抗凝，即为红细胞。由于红细胞与白细胞的比例相差悬殊，一般白细
胞混杂在其中，忽略不计。
2．根据红细胞的用途，可做进一步的处理。如计算红细胞，可直接稀释计数。如需做补体结合反应，或其它溶红细胞反应，则需将红细胞进行充分的清洗，以除
去附着在红细胞膜表面的血浆。一般用等渗的稀释液连续清洗，2 000r/min离心10min，重复3~4次。
3．如需储藏备用，则以阿氏液做抗凝剂采血，混匀后置4℃冰箱保存，可保
存2周，其活性尚可。
四、淋巴细胞的分离技术
（一）材料与试剂
1．淋巴细胞分层液有两种：
（1）聚蔗糖—泛影葡胺液：聚蔗糖（polysucrose solution）,商品名Ficoll，分
子量400 000，多配制成40±1％（W/V）水溶液，也有干粉出售。应用时，用蒸
馏水配制9％溶液。泛影葡胺溶液(Meglumini diatrizoici)，商品名Vrografin，结构
式为3，5—二乙酰氨基2，4，6三碘苯甲酸1—去氧—甲氨基山梨醇。含量为60％
或75％，每安瓶为20ml装，常用于人的脏器造影。应用时，取60％泛影葡胺原液20ml，加双蒸馏水15.38ml，即为33.9％泛影葡胺。
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1.077±0.001聚蔗糖—泛影葡胺的配制：
9％聚蔗糖液24份
33.9％泛影葡胺液10份
混合即可。必要时，可测比重。需要备用，可用G5漏斗过滤除菌或114.3℃高
压灭菌15min，4℃保存。一般可保存3个月。
如要配制不同比例的分层液，可按下列公式计算：
式中dm为分层液的比重，d1和d2分别为9％聚蔗糖和33.9％泛影葡胺的比重，V1和V2分别为它们的体积。如需配制1.077比重的聚蔗糖—泛影葡胺的分层液，
则9％的聚蔗糖和33.9％的泛影葡胺的比例应为100︰46.3。
（2）泛影葡胺—右旋糖酐（dextran）液
34％泛影葡胺液10份
60％右旋糖酐液12.5份
混合，即为比重1.07～1.09的分层液。分装于棕色瓶中，4℃冰箱保存备用。
2．3％的明胶液称取明胶3g，溶于0.9％的灭菌生理盐水，终体积100ml，114.3℃高压灭菌10min，冷却后4℃冰箱保存，临用时37℃预热10min。
3．Hank’s液。
（二）操作方法
1．取抗凝血，自然沉降，如是马属动物的血液，可直接直立试管架上，让其
自然沉降1h，取上层血浆。如是牛、羊血液，由于其血沉速度非常慢，可加等量3％
明胶液，混匀后让其自然沉降，1h后取上层血浆。
2．2 000r/min离心10min，弃上清。
3．沉淀用Hank’s液混悬后，再2 000r/min离心10min。
4．重复步骤3一次，再用细胞营养液将白细胞制成悬液。此液含有整个白细
胞群，包括粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和部分红细胞。可供白细胞计数用。
5．取2ml细胞分层液于离心管内，同时用毛细吸管吸取约2ml的血浆（自然
沉降1h的上层血浆）轻轻加入分层液上，直接加抗凝血也可。
6．以水平转子离心机2 000r/min离心20min。离心后，可见分成多层，最下
层是红细胞，中间层是分层液，最上层是血浆。在血浆层与分层液之间是一薄层较
致密的白色层，即为单个核细胞层。
7．用毛细吸管插入到单个核细胞层并吸取该层，放入另一试管中。
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8．以Hank’s液洗涤、离心，最后配制成适当的白细胞浓度。必要时可计数。
（三）注意事项
1．血浆或血液加入分层液中时要小心，缓慢不要打乱液层、不要摇动。也可
以将分层液加入到血浆的上层。
2．保持淋巴细胞的活性是非常重要的，所以一般情况下，是现采血，马上进
行分离。
3．经过分层液分离的淋巴细胞层，实际上是单个核细胞层，包括单核细胞，
不包括粒细胞。欲分离出纯的淋巴细胞，则按下法除去单核细胞，或收获单核细胞。
五、单核细胞分离技术
（一）铁粉吸附法
1．材料及试剂
（1）铁粉或羰基铁粉（Atomergic chemetals）99％的纯度，颗粒小于60μm （Goodfellow Metals）。
（2）强磁铁（马蹄形）。
（3）一块小棒状磁铁（约1cm长）。
（4）毛细吸管等。
2．操作方法
（1）称取一定量的铁粉，一般为10g，用100ml生理盐水洗涤4次，去除任
何可溶性有毒物质。在倒去盐水时，用强磁铁吸住铁粉。
（2）用50ml生理盐水混悬铁粉。摇匀后，分装于10个瓶中，包扎瓶口，121℃
灭菌20min，拿出后立即轻轻摇匀，防止铁粉结块，储藏备用。
（3）临用前，倒去瓶中的生理盐水，加入适量的单个核细胞悬液（3ml～5ml，细胞总数为8×107个／瓶）。37℃温育45min，中间不时晃动，使铁粉悬浮起来。
（4）加入一块小磁铁棒于瓶中，让其吸住铁粉以及附着在铁粉上的细胞。
（5）倒出悬液，此悬液主要是淋巴细胞，离心，收集。
（6）在铁粉瓶内倒入一定量的Hank’s液，用力振摇后，以强磁铁吸附，几分钟后，倒出液体。
（7）2 000r/min离心液体，管底即为单核细胞。
（二）玻璃板吸附法
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将分离的单个核细胞倾于无菌洁净的玻璃平皿内，置37℃30 min～40min，用
毛细吸管轻轻吸取悬液，即为淋巴细胞。用适量的Hank’s液冲洗平皿，收获即为
单核细胞悬液。
六、T淋巴细胞的分离技术
（一）原理
混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时，B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅
助细胞被选择性粘附于尼龙毛上，而多数T细胞则通过尼龙毛柱，这是获得富含T
细胞群的有效方法。
（二）材料及试剂
1．尼龙毛（Femwall Laboratories,LP－1 Leukoqak leukocyte Filters）。
2．烧杯、铝箔、漏斗、一次性手套等。
3．装填尼龙毛柱，一次性注射器。
4．取自然沉降的上层血浆，过聚蔗糖—泛影葡胺分层液后，获取的血浆和分
层液之间的单个核细胞层。
（三）操作方法
1．尼龙毛的清洗与干燥
（1）戴上已经洗去滑石粉的一次性手套，将尼龙毛（1包或2包，每包35g）放入烧杯中，加入蒸馏水或去离子水，用铝箔盖上烧杯并煮沸约10min。
（2）冷却至常温，倒入漏斗内，使水滴干。
（3）重复（1）、（2）步骤6次。
（4）将尼龙毛摊在铺有纱布的方盘内，37℃温箱干燥2～3天后，贮藏在带盖的方盘内。
2．装尼龙毛柱
（1）取50ml玻璃注射器，拔去注射芯，在注射器头上套一段带夹子的胶管。
（2）将尼龙毛梳理，并适当折叠，以适应注射器的直径，填入注射器内，约20ml的体积。
（3）将填好尼龙毛的注射器连同注射器芯一起包好，高压灭菌。
3．细胞分离
（1）将注射器固定在支架上，倒入37℃的细胞培养液，关闭阀门一定时间，
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然后打开阀门，放掉细胞培养液，以清洗几次尼龙毛，关上阀门。
（2）将要分离的细胞液用预先加温的培养液稀释成适当的浓度，约5.00×107个细胞／ml。
（3）将细胞液倒入注射器内，使之没过尼龙毛柱。盖上注射器，37℃温育45min
至1h。
（4）打开下口，缓慢放流（1滴／min），收集于离心管中。
（5）离心，即获所需的T淋巴细胞。
（6）关闭注射器下口，于注射器内加入0.85％冰冷生理盐水，振荡，并套上
注射器芯，打开下口，使劲推出注射器内液体，即获得粘附于尼龙毛上的B淋巴
细胞、浆细胞、巨噬细胞等。
（四）注意事项
1．此种分离法，T淋巴细胞也常有一部分被吸附，吸附的多少与尼龙毛的质
量有关，与装柱的松紧也有关系。
2．此法的T淋巴细胞的回收率约20％～30％。
3．用过的尼龙毛可回收，以盐水洗涤，然后浸入0.1Mol/L的HCl中过夜，然
后再同前法清洗。
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血浆置换(plasma exchange, PE，即血浆单采术)是一种特殊的体外血液净化技术，利用血浆分离器或离心的方法将患者的血浆与血细胞分离，弃掉含有致病物质的血浆，并同时补充等量的置换液，从而达到治疗疾病的目的。 血浆置换比药物治疗更快、更有效地去除致病因子，为原发病的治疗创造了有力条件。血浆置换可以去除血浆中的致病的大分子物质，如：免疫球蛋白、免疫复合物、抗体、类风湿因子、内毒素及炎性介质、胆红素、LDL、病毒等。 血浆置换的治疗模式 1.单重血浆置换：血浆分离器分离患者的血浆和血细胞，弃掉含有含有致病因子的全部血浆，然后补充相同体积新鲜冰冻血浆（FFP）或白蛋白溶液。 目前还有两种更高级的方法可以选择性地去除血浆有害物质，而保留其他的有益物质。 2.二次膜式分离（double filtration plasmapheresis,DFPP）
首先是用一级血浆分离器分离患者的血浆和血细胞，然后再用孔径较小的二级滤器分离出大分子致病物质（如：球蛋白和免疫复合物），而保留宝贵的白蛋白等中分子物质。 3.血浆吸附（plasma adsorption,PA） 血浆分离器分离患者的血浆和血细胞，然后血浆再经过吸附柱，选择性地去除有害物质分。 血浆置换的临床应用 目前血浆置换可应用于临床上多种疾病，具体如下： 1.肾脏风湿疾病：
抗肾小球基底膜病（抗GBM病）、血栓性血小板减少性紫癜、冷球蛋白血症、ANCA相关性小血管炎、肾移植后超急性或急性抗体介导的排异反应、肾移植后FSGS复发、噻氯匹定/氯吡格雷相关的血栓性微血管病、SLE及狼疮性肾炎、类风湿关节炎，溶血性尿毒症综合征等。 2.脓毒血症和多器官功能障碍综合征 3.神经系统疾病： 格林-巴利综合征、重症肌无力、慢性炎性脱髓鞘多发性神经病、儿童自身免疫性神经精神障碍合并链球菌感染、IgG/IgA相关脱髓鞘多发性神经病，急性播散性脑脊髓膜炎、多发性硬化。 4.代谢性疾病： 家族性高胆固醇血症、甲亢危象、淀粉样变性。 5.血液系统疾病： 纯红细胞再生障碍性贫血，自身免疫性溶血性贫血，多发性骨髓瘤，血友病。 6.结缔组织病： （灾难性）抗磷脂抗体综合征、重症系统性红斑狼疮。 7.皮肤疾病： 重型药疹、天疱疮、类天疱疮、重症银屑病、妊娠疱疹、迟发性皮肤卟啉病等。 8.药物、毒物中毒性疾病： 三环类药物、地高辛、茶碱、维拉帕米、地尔硫卓、毒蘑菇、对硫磷中毒，原因不明的“致死性”中毒等 9.其他疾病：
发放号： 1. 目的：规范单采血小板采集程序，保护血细胞分离机的性能，保障献血者的健康，确保血液 质量。 2. 职责：操作人员负责单采血小板的采集和对献血者单采全过程的监护。 3. 适用范围：适用于血小板单采过程。 4. 工作程序： 4.1分离机准备： 4.1.1接通电源，打开设备开关，设备启动并自检。 4.1.2在Trima献血者信息/装载系统主屏幕上，触按"献血者信息”按钮，进入献血者信息 屏幕，根据界面信息提示，分别输入献血者的性别、身高、体重并触按“确认信息”确认，进入下界面。 4.1.3根据界面提示，分别输入献血者的血型、血比积、血小板计数值，按“确认信息”确认。触按“确 认信息”，进入程序选择界面。 4.1.4根据预期产品量选择最优收集程序，触按“确认程序” 。 4.2装载耗材： 4.2.1触按“装载系统”，根据界面提示，悬挂空袋，插入卡匣，装载环形血道，关闭离心机门顺序装载 管路。 4.2.2触按“继续”按钮，系统自动放低卡匣，装载所有的泵、阀门以及传感器。 4.2.3根据界面提示，关闭采血管路以及样品袋管路上的白色夹子，触按“继续”按钮。 4.3初始化： 4.3.1根据界面提示，将ACD抗凝剂袋连接到抗凝管路上。挤压滴液室，使滴液室灌注到刻度线位置。 上下拉动抗凝管，使抗凝管道卡入抗凝传感器内，注意滴液室应在传感器下方。 4.3.2触按“继续”按钮，自动进行管路ACD抗凝剂灌注。 4.3.3灌注结束后，界面提示“开始献血者准备”后，开始进行献血者准备。 4.4嘱咐献血者找到舒适位置平躺于采血床上，伸展双臂。 4.5采血针管排空后，按《采血操作规程》选择合适静脉进行穿刺，确定采血针在静脉内后用胶带纸加 以固定，打开滑轮夹。 4.6采集： 4.6.1触按“开始抽取按钮”，进行收集产品。 4.6.2收集完成时，系统将发出“哗哗”的提示音，自动进入回输过程，回输完成，仪器会发出嘟嘟的提 示音，系统状态行显示“运行完成”的消息。 4.7触按“继续”按钮。系统提示您密封及去除所有的产品袋以及AC袋。关闭进血管路上的白
工艺用水及空调净化系统风险管理 李向前 2015年5月28日广州
目录 一、工艺用水系统及风险管理 二、空调净化系统及风险管理
对工艺用水的法规要求 无菌医疗器械检查评定标准（试行） 2101 是否确定了整个生产和辅助过程中所用工艺用水的种类和用量。 ＊2102 工艺用水的输送或传递是否能防止污染。若产品的加工过程需要工艺用水时，是否配备了工艺用水的制备设备，并且当用量较大时通过管道输送到洁净区的用水点。 是否按规定对工艺用水进行检测。 ＊2103 对于直接或间接接触心血管系统、淋巴系统或脑脊髓液或药液的无菌医疗器械，若水是最终产品的组成成分时，是否使用符合《药典》要求的注射用水；若用于末道清洗是否使用符合《药典》要求的注射用水或用超滤等其它方法产生的同等要求的注射用水。与人体组织、骨腔或自然腔体接触的无菌医疗器械，末道清洗用水是否使用符合《药典》要求的纯化水。 2201 是否有工艺用水管理规定和记录。 2202 工艺用水的储罐和输送管道是否是用不锈钢或其他无毒材料制成，工艺用水的储罐和输送管道是否定期清洗、消毒并进行记录。
工艺用水系统的组成
纯化水生产系统简介 The Introduction Of The Purified water system 纯化水生产采用先进的反渗透膜技术，采用卷式RO 膜元件，能够有效控制SDI15,在线监控水质的PH 和电导率，电导率控制小于4um 。每小时能够制造13000L 的纯化水。纯化水贮罐的容量为15000L 。The purified water production uses advanced reverse osmosis membrane technology, the use of spiral wound RO membrane can control SDI15 effectively, and monitor water’s pH and conductivity value, its conductivity is less than 4um. The output of purified water is 13000L per hour. The purified water storage tank volume capacity is 15000L. 文件编码：09ST01014-01 第1页共1页 原水进 Raw water entry 加药装置Pharmacy Dosing unit 原水箱 Raw water Tank 原水泵Raw water pump 活性炭过滤罐Active carbon Tank 精密过滤器 Precision Filter 高压泵 High Pressure Pump 一级反渗透装置Primary Reverse Osmosis Equipment 二级反渗透装置Secondary Reverse Osmosis Equipment 用水点 Water consumption point 清洗装置Washing Unit 加药装置Pharmacy Dosing Unit 加药装置 Pharmacy Dosing Unit 纯化水贮罐Purified Water Tank 高压泵 High Pressure Pump 循环泵 Circulation pump 机械过滤罐Mechanical Tank 热交换器Heat Exchanger 高压泵 High Pressure Pump 电导率监控探头 Conductivity probe 流量计 Flow meter 电加热空气呼吸器Air breather 热交换器 Heat Exchanger 中控系统Control Center
外周血白细胞的分离：（细胞分离液有市售，有各种型号：白细胞、单核细胞淋巴细胞等分离液） 1> 取3ml正常人的外周血（枸橼酸钠抗凝）与等体积pbs混匀后小心的加于6ml白细胞分离液液面上，1500r/min离心20 min。（或先将抗凝血离心，然后吸取中间白细胞层，再混以等体积pbs然后小心加于等体积细胞分离液液面上，离心同上） 2> 吸取中间云雾状白细胞，加3－4mlPBS后3000 r/min离心10 min。 3> 弃上清，加1ml PBS洗涤沉淀后，将细胞悬液转移至1.5mLEp 管中。 4> 3000r/min离心20 min，弃上清。 即得白细胞 可以试试红细胞裂解液 提供我的配方： 氯化铵82.9克；重碳酸钾10.0克；EDTA0.37克；用三蒸水配成1升 所有的细胞培养都应该坚守无菌操作原则 2.分层后的确有3层，准确说来是4层，最下面是红细胞，上面的一层不应该是稍微混浊的白色，应该也 比较透明，这一层上面就是我们需要的薄细胞层，最上面是血清 3.细节： a.淋巴细胞分离液要避光保存 b.就您的试验看来，淋巴细胞分离液的问题可能是最主要的 c.首先再离心管中加入淋巴细胞分离液，然后把标本缓慢加在淋巴细胞分离液表面上，一定要缓慢小心操作，切不可混匀 d.所有操作都应在无菌环境进行 e.把离心管放入离心机是也应小心，不要太大幅度的摇幌离心管，当然离心后拿出来也要小心 就这么多了吧，这个操作是不是很难的，比较基本 祝您好运了！
.参考方法： 人外周血, 肝素抗凝(100U ?m l) , 等量无血清培养液（或者PBS等缓冲液）稀释。按1∶2 的体积比缓置于比重1. 077 g/m l 的淋巴细胞分离液, 1000 ×g 离心 30 m in, 收集培养液2分离液界面上的单个核细胞。于无血清培养液, 400×g 离心10 m in, 洗涤2次。用培养液重新悬浮细胞并计数 我也是最近要做所以查了一下，仅供分享，呵呵！ 一外周血白细胞的分离 1> 取3ml正常人的外周血（枸橼酸钠抗凝）与等体积pbs混匀后小心的加于6ml白细胞分离液（（33.9%泛影葡胺和9%Ficoll液按1：2.4体积比混合））液面上，1500r/min离心20 min。（或先将抗凝血离心，然后吸取中间白细胞层，再混以等体积pbs然后小心加于等体积细胞分离液液面上，离心同上） 2> 吸取中间云雾状白细胞，加3－4mlPBS后3000 r/min离心10 min。 3> 弃上清，加1ml PBS洗涤沉淀后，将细胞悬液转移至1.5mLEp管中。 4> 3000r/min离心20 min，弃上清。 即得白细胞 二自然沉降法 本法是利用血細胞自然沉降率的分離法，採集血液後應及時抗凝，通常選用肝素抗凝法。肝素能阻止凝血酶原轉化為凝血酶，從而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白而防止血液凝固。操作原則是將含抗凝血的試管直立靜置室溫30～60min後，血液分成明顯三層，上層為淡黃色血漿，底層為紅細胞，緊貼紅細胞層上面的灰白層為白細胞，輕輕吸取即得富含白細胞的細胞群，離心洗滌後加入少量蒸餾水或含氯化銨的Gey溶液，經短時間的低滲處理，使紅細胞裂解，經過反復洗滌可得純度較高的白細胞懸液。
血浆置换操作流程 血浆置换：是指将患者血液通过血液成份分离机进行离心分离成血浆及血细胞，然后将病体血浆弃掉，回输血细胞及等量置换液的一种临床免疫性疾病治疗技术。 使用材料：四川南格格尔生物医学股份有限公司生产的NGLXCF3000血液成份分离机、配套耗材一次性使用单采血液成份分离器、血液保存液I（ACD—A）； 置换液体：晶体液（）、胶体液（）、或蛋白质液（） 操作流程： 一、会诊及确认：首先根据患情况组织相关医护人员进行会诊，对首选血浆置换治疗（教授的PPT中有讲）以及虽非首选但其他方式治疗无效的，经会诊确定实行血浆置换治疗，并制订血浆置换方案；向患者及其家属讲明进行血浆置换的必要性，使用设备及材料的方法、效果，以及可能出现的意外，并签订血浆置换知情同意书。 二、操作前准备：1、四川南格格尔生物医学股份有限公司生产的NGLXCF3000血液成份分离机、配套耗材一次性使用单采血液成份分离器、血液保存液I（ACD—A）；2、生理盐水，复方氯化钠，低分子右旋糖酐葡萄糖，代血浆等。地塞米松针，非那根针。置换液用的新鲜血浆，普通血浆，人血白蛋白等。备用部分抢救药品（抢救车上的药品）。 三、血浆置换：再次检查和核对患者信息，按照血液成份分离机使用要求及血浆置换操作指南，检查和运行设备、安装耗材；检查患者穿刺部位，并按标准操作进行静脉穿刺（一般患者肘中静脉穿刺即可，个别患者需进行股静脉或腔静脉穿刺），然后启动血浆置换程序开始血浆分离和置换，回输其他血液成份和置换液。 具体操作步骤： 1、操作前准备： 选择病人病种，让病人先去洗手间，准备生理盐水，复方氯化钠，低分子右旋糖酐葡萄糖，代血浆等。 地塞米松针，非那根针。 置换液用的新鲜血浆，普通血浆，人血白蛋白等。 备用部分抢救药品（抢救车上的药品）。 2、操作步骤： 1）检查采浆机； 2）接通电源———打开开关； 3）主屏上显示—血液成份分离； 4）按确认键，机器进行自检（血泵，抗凝剂泵，空气检查泵，离心机后）； 5）依据提示，打开离心机盖，关闭离心机盖再打开离心机盖，顺利完成自检。 6）回到主菜单设置参数： 选择血浆采集 每个循环采集量 总采集量 盐水补充量 采血浆速度 回输速度
人外周血单核细胞分离 1.抗凝血的预离心分别取正常人新鲜抗凝全血 A: 20 mL于50 mL离心管中，以2 000 r /min 离心20 min，吸弃上层血浆，获得下层沉淀细胞约10?12.5 mL 。 2.沉淀细胞的稀释与离心分离在所获取沉淀 A中的细胞中加入Hank s液（不含Ca2+、Mg 2+, pH 7.2 ?7.6）体积比仍未1:1 , 混匀，制成细胞悬液。 B:无菌抗凝血与Hank s液或PBS以1:1体积在试管中混匀。 另取一离心管，加入LTS1077淋巴细胞分层液，然后用毛细吸管距分层液上1cm处 将细胞悬液小心而缓慢地加于其上面，使稀释血液重叠于分层液上。此时稀释后的细胞悬液 分离液淋巴细胞体积为：1:1。与用水平离心机以2000 r /min 离心20min，离心结束后，取出离心管，可见管中液体已经分层。 管内可见分为4层：最上层是血浆，含部分血小板：第二层为薄薄的白膜层，主要台 单个核细胞，还混杂有少量血小板；第三层为分离液层；第四层为粒细胞及红细胞，红细胞 沉于管底，而粒细胞则紧贴在压积红细胞上呈一层很薄的白膜 3.单个核细胞的提取、洗涤与悬浮、贴壁 吸去最上层的血浆，收集血浆层和淋巴细胞分离液交界面的单个核细胞，尽量全部吸出PBMC。加3~4倍以上体积Hanks或PBS液于所得的单个核细胞中，用毛细吸管轻轻吹判均匀，避免产小气泡，液柱高度不超过离心管的 2 / 3。混匀后离心1500r/mi n 离心 10min，低速离心有利于去除细胞悬液中留存的血小板，去上清液。 注意：还可以先用吸管把雾状层上面的液体吸走，注意不要碰到雾状层，然后在把要的部分慢慢吸出来。第二种方法，比较简单一些。 再用同样洗涤液洗涤细胞2次，1500r/min 离心10min，洗去残留的淋巴细胞分离液。再以RPMI-1640 培养基离心洗涤1次，吸尽上清，以充分去除血小板等杂质。按每毫升血液标本加0.2 mL含20%小牛血清的Hank s液（或含10%胎牛血清及25 mmol /L hepas的RPMI-1640 液3?4 mL）重新混悬细胞37 C、5% C02孵育箱中培养2?3 h 后去除上清，得到贴壁的单核细胞。于各培瓶中分别加入含10%胎牛血清的RPMI-1640
Wo 名词缩写解释 HF Hemofiltration 血液滤过HDF Hemodiafiltration 血液滤透4008选件 BPM血压监测器 BTM血温监测器 BVM血容量监测器 OCM在线清除率监测 SN-Double Pump单针泵 DIASAFE plus Filter细菌过滤器 ONLINE plus在线血滤系统 Bibag(Standard)干粉 CDS中央供液系统 模组空间 Blood Pump血泵 Heparin Pump肝素泵 Level Detector空气监测器 Bibag/Conc.干粉
T1测试描述，包含错误信息 附注错误说明指定的数值是程序中使用的精确数值 具体数值和公差如下: 1. Arterial pressure 动脉压 3 mmHg/digit 和测定值的± 1位 2. Venous pressure 动脉压 3 mmHg/digit 和测定值的±1位 3. Dialysate Pressure 透析液压 粗略 6.0 mmHg/digit 和测定值的±1位 优良0.5 mmHg/digit 和测定值的±1位 4. CD resolution 0.06 mS/digit 和精确值的± 1位 5. T emperature 温度0.05 °C/digit和精确值的± 1位开始和运行测试的先决条件 错误信息描述 Power failure测试进行中的电源失败. Dialines not conn透析液管路没有插入到冲洗桥中. Shunt Cover open冲洗桥打开状态. Connect Conc.Line Wrong conc. Supply A液连接器在冲洗腔中或者完全没有连接. 该错误信息取决于中央供液系统预选中的设置菜单. Blood Sensed by OD光学探测器检测到系统中有血液. Flow alarm进或出透析器的线路打结, 故障发生在水路中. Water alarm供水中断. 单独测试步骤的描述 Bypass test (旁路测试)........................................................................ ........................................ . (6) Optical detector test (光学探测器测试)................................................................................ (8) Blood system test (血系统测试).............................................................................................. . (10) Venous pressure system test (静脉压系统测试)................................................................. . (13) Air detector test (空气探测器测试) (15) Display test (显示测试) (18) Arterial pressure system test (动脉压系统测试) (20) Battery test (蓄电池测试) (21) Blood leak test (漏血测试) (23) Temperature test (温度测试).................................................................................................... . (25) Negative pressure holding test (负压保持测试) (27) Positive pressure holding test (正压保持测试) (29) UF function test (超滤功能测试) (34) Conductivity test (电导率测试) (37) Diasafe/HDF filter test (细菌过滤器/血液滤透过滤器测试) (39)
血细胞分离培养 以前认为红细胞、粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞等血细胞都属终末分化细胞, 很难在体外培养生长或仅能短期培养而不能传代, 近年来由于细胞培养技术的发展, 已有血细胞培养成功的报道, 正常血细胞在体外培养生长时间短, 只有白血病细胞, 血友病细胞、淋巴瘤细胞可培养成功并建立细胞系, 但多半为EB 病毒等致瘤病毒引起的转化细胞, （EBNA检查阳性）, 二甲基亚砜（DMSO ）处理也可诱导这些细胞分化发生逆转, 表现为正常细胞. 所建立的细胞系多半为单核细胞系、B 淋巴细胞系、T 淋巴细胞系, 只在IL-2 产品问世后,T 细胞才可在体外建系、建株. 血细胞可从外周血中用梯度液通过离心分层后分离获得. 也可从脾脏、扁桃体、淋巴结中用机械法切碎过筛分离获得淋巴细胞, 从腹腔刺激后的冲洗液中可获得大量的单核- 巨噬细胞, 从骨髓中可以获得前提血细胞, 并可长期培养生长. 加入生长因子或某些物质有利于细胞纯化并促进分化和生长繁殖, 例如在淋巴细胞中加入IL-2 （TCGF ）, 可促进T 细胞生长, 建立T 淋巴细胞系. 在多发性骨髓瘤细胞（B 细胞）培养中, 加 B 细胞生长因子, 可建立 B 细胞系；加入IL-6 （或正常淋巴细胞培养48h 的培养上清中的IL6 ）可使 B 细胞在体外长期培养, 建立了IL-6 依赖的B9 细胞系. 在骨髓单个核细胞培养中加入二羟基维生素D3, 可使单个核细胞分化为成骨细胞及破骨细胞. （一）外周血细胞分离： 外周血中除红细胞外, 还有粒细胞、单核细胞和淋巴细胞及血小板等, 通常是分离这些血细胞的重要来源. 其分离方法有四种：自然沉降法、差异沉降法、氯化铵分离法、Ficoll 分离法. 1 、自然沉降法： 将无菌抗凝血放入试管中, 在37 ℃水浴中静置, 自然沉降1-2h, 可见到红细胞下沉, 并有明显分层, 上层血浆中富含有大量的和淋巴细胞, 下层主要为红细胞. 此方法简便但各层中的细胞种类多, 不纯. 血浆中虽以粒细胞、淋巴细胞为主, 但也含有血小板, 大单核细胞和少量红细胞. 下层虽以红细胞为主, 但也有上述各种细胞, 此法适用于淋巴细胞转化试验. 2 、差异沉降法： 用6% 的右旋糖酐或3% 的明胶溶液无菌消毒后, 分装于中试管中, 由于这些物质能使红细胞形成“串状”, 比粒细胞、淋巴细胞沉降速度快, 因而可使红细胞与白细胞、淋巴细胞分离开. 其方法如下：用6% 的右旋糖酐溶液5-10ml, 经抗凝血5ml 加入上层中混合后静置于37 ℃水浴中30-60min, 即可见红细胞下沉, 上层富含大量粒细胞和淋巴细胞, 下层为红细胞, 使两者易于分离开, 取上层可用于粒细胞、淋巴细胞培养和实验, 下层可用于红细胞培养和实验, 经PBS 洗 3 次后即可加入培养基培养, 可用于天然白细胞干扰素的诱生和生产. 此法分离的细胞纯度也不高. 3 、氯化铵分离法： 0.83% 氯化铵（NH4CL ）可使红细胞破裂, 通常将分离获得的粒细胞. 淋巴细胞中混有的少量的红细胞用0.83% 氯化铵进行裂解, 以排除红细胞的干扰. 另外, 此法也适合大量粒细胞、淋巴细胞的分离制备, 在天然白细胞干扰素诱生和生产中已被广泛应用. 方法如下： 将中心血站供应的健康人外周血离心分离白细胞黄层悬液先经2000r/min 离心20min, 吸出上清血浆, 将下层的红细胞、白细胞混合后, 加入0.83 氯化铵, 用量为血细胞悬液液量的 3 倍, 于 4 ℃作用20min 后离心弃去上清. 在沉淀层中再加入新鲜0.83 氯化铵混匀后于 4 ℃作用20min, 以便彻底清除红细
关于购入血细胞分离机的社会效益和经济效益分析 院领导，采购处： 卫生部2009年第18号文件刚刚下达，要求第三类医疗技术由卫生部准入，5月1日开始执行。已经开展该项工作并具备相应科室的医院只须申请评审即可，尚未开展的医院则需要申请开展。因为我院已开展该项治疗14例，对我院十分有利。因而尽快完善设施、设备、人员条件，并通过卫生部评审注册，将奠定我院在该领域的学术地位。上报卫生厅申请成立河北省肿瘤生物治疗中心的报告已得到答复，即待卫生部评审注册后，省厅才可以审批成立中心的有关事宜。 目前，病房准备已完成，独立核算号已申请，聘用临时工人员即将到位。目前面临的问题有两个，一是医生编制问题，二是血细胞分离机到位时间问题。一旦以上两个问题得到解决，马上可以开诊。关于设备购入的理由和效益分析如下：1、购入血细胞分离机的理由： 购入血细胞分离机，是提高疗效，提高治疗规模，降低消耗的必要条件。该项目需要采取病人外周血单个核细胞，以往应用CS3000机型的经验和教训是：因为CS3000机型的技术参数是，红细胞污染率为≤5%，所采取的细胞中混入过多的红细胞和血小板，因而不得不进行多次洗涤和大量细胞因子扩增以达到效应细胞的数量要求，因而工作量极大，效率却很低，效应细胞的制备成本高（细胞因子价格很高），细胞数量不足，同时降低了疗效。而COBE Spectra机型参数是，红细胞污染率<1%，而且能够随时观察细胞分离状态并可加以调控，因而大大提高了细胞的纯度，降低了工作量，节省了时间，细胞因子用量减少而降低了成本，更重要的是疗效得以保证。 2、社会效益： 肿瘤生物治疗目前已被国际、国内普遍认为是继手术、化疗、放疗之后的第四大肿瘤治疗模式。国外已进入III期临床，国内各大型医院如北京协和、301、肿瘤医院、沈阳军区总院、南京军区总院、广州南方医院、上海瑞金医院、青岛医学院附属医院、天津肿瘤医院等。收治病人量从每年200例到1500例不等。肿瘤生物治疗项目的临床应用创造了极大的社会效益。主要表现在：①早、中期肿瘤病人根治术后可防治肿瘤复发，改善病人生存质量，提高生存率。②晚期肿
-_ Wo 名词缩写解释 HF Hemofiltration 血液滤过HDF Hemodiafiltration 血液滤透4008选件 BPM血压监测器 BTM血温监测器 BVM血容量监测器 OCM在线清除率监测 SN-Double Pump单针泵 DIASAFE plus Filter细菌过滤器 ONLINE plus在线血滤系统 Bibag(Standard)干粉 CDS中央供液系统 模组空间 Blood Pump血泵 Heparin Pump肝素泵 Level Detector空气监测器 Bibag/Conc.干粉
T1测试描述，包含错误信息 附注错误说明指定的数值是程序中使用的精确数值 具体数值和公差如下: 1. Arterial pressure 动脉压 3 mmHg/digit 和测定值的± 1位 2. Venous pressure 动脉压 3 mmHg/digit 和测定值的±1位 3. Dialysate Pressure 透析液压 粗略 6.0 mmHg/digit 和测定值的±1位 优良0.5 mmHg/digit 和测定值的±1位 4. CD resolution 0.06 mS/digit 和精确值的± 1位 5. T emperature 温度0.05 °C/digit和精确值的± 1位开始和运行测试的先决条件 错误信息描述 Power failure测试进行中的电源失败. Dialines not conn透析液管路没有插入到冲洗桥中. Shunt Cover open冲洗桥打开状态. Connect Conc.Line Wrong conc. Supply A液连接器在冲洗腔中或者完全没有连接. 该错误信息取决于中央供液系统预选中的设置菜单. Blood Sensed by OD光学探测器检测到系统中有血液. Flow alarm进或出透析器的线路打结, 故障发生在水路中. Water alarm供水中断. 单独测试步骤的描述 Bypass test (旁路测试)........................................................................ ........................................ . (6) Optical detector test (光学探测器测试)................................................................................ (8) Blood system test (血系统测试).............................................................................................. . (10) Venous pressure system test (静脉压系统测试)................................................................. . (13) Air detector test (空气探测器测试) (15) Display test (显示测试) (18) Arterial pressure system test (动脉压系统测试) (20) Battery test (蓄电池测试) (21) Blood leak test (漏血测试) (23) Temperature test (温度测试).................................................................................................... . (25) Negative pressure holding test (负压保持测试) (27) Positive pressure holding test (正压保持测试) (29) UF function test (超滤功能测试) (34) Conductivity test (电导率测试) (37) Diasafe/HDF filter test (细菌过滤器/血液滤透过滤器测试) (39)
治疗性血细胞分离采集的护理配合 【摘要】目的从多个方面探讨治疗性血细胞分离采集护理的心得体会，旨在减轻患者不良反应，提高采集成功率。方法从治疗性血细胞分离采集术前准备及护理、术中护理、术后护理及对不良反应的判断及有效护理几个方面综合分析我院2011年开展的74例次病例护理的心得及体会。结果74例次治疗性血细胞分离采集术中有69例次(93.2%)无任何不良反应，5例出现不同紧张、口唇肢端麻木、胸闷等症状，经对症处理及有效护理后症状缓解，无1例出现后期不良反应。结论护士熟练掌握治疗性血细胞分离采集技术专业知识，规范操作规程，做好心理护理，加强穿刺技术及对相关不良反应的观察与判断，及时做出有效护理，对减少血细胞分离采集中并发症的发生和提高治疗效果均有较大意义。 1资料与方法 1.1一般资料2011年2~10月我院进行治疗性血细胞分离采集74例次，其中男47例次，女27例次，红细胞去除1例次，血小板去除15例次，白细胞去除24例次，血浆置换34例次。 1.2设备与耗材美国Baxter CS3000血细胞分离机及专用一次性全封闭管道或美国Baxter CS3000血细胞分离机及专用一次性套件，ACD-Ⅱ抗凝剂、安尔碘、棉签、纱布、3 m胶布等。 1.3血细胞分离方法采用血细胞分离机，安装管道，分离前检测患者的血常规，选择两条粗、直、弹性好静脉穿刺建立密闭体外循环通道操作中注意观察患者各种不良反应并给与相应的对症处理。 2结果 74例次中69例次(93.2%)无任何不良反应，5例出现不同紧张、口唇肢端麻木、胸闷等症状，经对症处理后缓解。 3护理 3.1分离采集前准备及护理 3.1.1用物及环境的准备使用单独血细胞分离室，采集前室内按常规消毒，并紫外线消毒30 min，室内配备空调，保持适宜温度(22℃~25℃)，湿度(50%~60%)，湿度过大或过小会影响机器的性能。机器预热，初始化进行性能检测，选择程序，安装管路，备常规急救药物及器材、氧气、监护仪等。 3.1.2分离采集前护理血细胞分离技术需要将外周血经体外循环，许多患者易产生顾虑，担心对身体不利，失血过多等问题。所以采集前应探视患者，评估患者外用静脉情况，向患者介绍采集的主要过程，采集所需要的时间，可能出现
第十八章血细胞分离技术 （Separation technique of the blood cell） 一、原理 在体外进行细胞免疫检测时，首先必须进行淋巴细胞的分离。分离淋巴细胞的 方法很多，但不管采用哪种方法，均要求分离的淋巴细胞纯度高、产量多，而且不 丧失活性，同时也要求分离技术简单、操作方便。 外周血液中红细胞和白细胞的比例在几百甚至上千比一，两类细胞的大小和密 度不同，其沉降速度也就不同。红细胞的自然沉降率较快，加入高分子量的聚合物，如明胶、右旋糖酐等还可以加速其凝聚。利用自然沉降法、密度梯度离心法或二者 结合，可以将淋巴细胞从血液中分离出来。这种分离出的淋巴细胞一般包括单核细胞。除去单核细胞，可以利用单核细胞的吸附功能，如铁颗粒、玻璃面或尼龙网等，除去（或分离）单核细胞，从而提纯淋巴细胞。 二、采血 （一）材料与试剂 1．抗凝剂 （1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其钠盐或钾盐，它能阻止凝血酶 原转化为凝血酶，进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白，从而阻止血液凝固。常用的 肝素溶液浓度为1 000U/ml，市售肝素多为100U~126U／mg。 （2）乙二胺四乙酸（EDTA）：是一种螯合剂。用生理盐水配制成4％的溶液 备用。 · 1 ·
（3）阿氏液（Alsever液），配方如下： 枸橼酸钠（Na3C6H5O7·5H2O）0.80g 枸橼酸0.0325g 葡萄糖 2.05g 氯化钠0.42g H2O 加至100.00ml 混匀溶解后，114.3℃高压蒸汽灭菌10min备用。 阿氏液中既含有枸橼酸钠抗凝剂，又含有细胞生存的营养，所以它既可做抗凝剂，又可做血细胞的保存液。 2．针头根据不同动物和采血部位，采用不同型号的针头，用前必须灭菌或 消毒。 3．采血容器注射器或三角瓶等。 4．采血动物。 （二）操作方法 1．采血法各种动物采血方法不一。马、牛、羊等大动物一般从颈静脉采血，猪从颈静脉、前腔静脉或耳静脉采血，家禽由翼下静脉或心脏采血，兔由心脏或耳 静脉采血，犬由颈静脉或四肢静脉采血，豚鼠由心脏采血，小白鼠则可断尾或剪断 腋下血管或剪断眼球采血。 2．抗凝采集血液最关键的问题是抗凝，采用什么方法进行抗凝，则根据实 验的要求和条件而定。最常用的方法如下： （1）肝素抗凝：采血时，使每ml血液含15U~20U肝素即可。计算采集的血 液量，按1 000U/ml的量加入肝素，直接放入采血容器中，采血时，边采血边轻轻 摇动，使抗凝剂和血液混匀。对于采少量的血液或小动物采血，可直接用注射器抽 取一定量的肝素液，再采血直接抗凝。 （2）EDTA抗凝：采血前，用灭菌生理盐水将EDTA配制成4％溶液，然后 按预采血液的量，以每ml血液加入1mg~2mg的EDTA的液体量于采血容器内。 采血，并不断摇动采血容器，使之混匀。 （3）玻璃珠法：预先将适量的玻璃珠（根据采血量多少而定）清洗后，装入 采血容器中，灭菌后备用。采血过程中，边采边摇采血瓶，以使小玻璃珠在血液中 滚动，以机械地除去纤维蛋白，使血液不能凝固。本法虽较麻烦，但对淋巴细胞的 活性影响最小，且可减少血小板的混杂。 （4）阿氏液采血：以阿氏液和采血量以1︰1比例采集血液，边采边轻轻摇动 采血瓶，使之混匀。用阿氏液采血，除了抗凝外，多用于红细胞的保存。一般在4℃ 条件下，阿氏液中保存的红细胞2周其活性和特性不变。 · 2 ·
人外周血单核细胞分离 1. 抗凝血的预离心分别取正常人新鲜抗凝全血 A: 20 mL于50 mL离心管中，以2 000 r /min离心20 min，吸弃上层血浆，获得下层沉淀细胞约10～12.5 mL。 2. 沉淀细胞的稀释与离心分离在所获取沉淀 A 中的细胞中加入Hank′s液( 不含Ca2+、Mg2+, pH 7.2 ～7.6) 体积比仍未1:1，混匀，制成细胞悬液。 B: 无菌抗凝血与Hank′s液或PBS以1:1体积在试管中混匀。 另取一离心管，加入LTS1077淋巴细胞分层液，然后用毛细吸管距分层液上1cm处将细胞悬液小心而缓慢地加于其上面，使稀释血液重叠于分层液上。此时稀释后的细胞悬液分离液淋巴细胞体积为：1:1。与用水平离心机以2000 r /min 离心20min，离心结束后，取出离心管，可见管中液体已经分层。 管内可见分为4层：最上层是血浆，含部分血小板：第二层为薄薄的白膜层，主要台单个核细胞，还混杂有少量血小板；第三层为分离液层；第四层为粒细胞及红细胞，红细胞沉于管底，而粒细胞则紧贴在压积红细胞上呈一层很薄的白膜 3. 单个核细胞的提取、洗涤与悬浮、贴壁 吸去最上层的血浆，收集血浆层和淋巴细胞分离液交界面的单个核细胞，尽量全部吸出PBMC。加3~4倍以上体积Hanks或PBS液于所得的单个核细胞中，用毛细吸管轻轻吹判均匀，避免产小气泡，液柱高度不超过离心管的2／3。混匀后离心1500r/min离心 10min，低速离心有利于去除细胞悬液中留存的血小板，去上清液。 注意：还可以先用吸管把雾状层上面的液体吸走，注意不要碰到雾状层，然后在把要的部分慢慢吸出来。第二种方法，比较简单一些。 再用同样洗涤液洗涤细胞2次，1500r/min离心10min，洗去残留的淋巴细胞分离液。再以RPMI-1640 培养基离心洗涤1次，吸尽上清，以充分去除血小板等杂质。按每毫升血液标本加0.2 mL含20%小牛血清的Hank′s液( 或含10%胎牛血清及25 mmol /L
COBE SPECTRA 血细胞分离机临床应用 血细胞分离机可以进行的血液成份单采及相关治疗项目： 1. ELP~~~延长血小板寿命的单采程序 该程序可以从正常供者体内分离出两份满足临床需要的浓缩血小板制品，同时可以附带收集200ml－400ml血浆。有效采集时间约60-100分钟/次。COBE公司所提供的每一套管道均带有两个可保存150ml?/FONT>400ml血小板的收集袋，可在22℃恒温或振荡条件下有效保存血小板3?/FONT>5天。 应用血小板单采程序（ELP）可对血小板增多患者进行血小板去除术。操作中，只要输入的血小板计数高于40万/mm3法机器将自动判断为血小板去除并进入相关操作程序。 2．WBC~~~~~白细胞程序 白细胞（WBC）程序中有三个操作程序： MNC~~~~~单个核细胞采集程序； 用以采集外周血造血干细胞，进行造血干细胞移植； 采集淋巴细胞进行LAK细胞培养； 对急性白血病患者进行幼稚的白血病细胞去除，减少化疗药物的用量及副作用。 在没有羟乙基淀粉的情况下可用该程序采集粒细胞用以治疗粒细胞减少症的患者。 PMN~~~~~分叶核细胞采集程序： 在使用羟乙基淀粉和高浓度枸橼钠时可用该程序采集供者体内的粒细胞；应用羟乙基淀粉可采集年轻红细胞，用以治疗长期依赖输血的患者，如地中海贫血，镰刀壮红细胞贫血等。以延长其输血间隔，减少输血产生的不良反应，提高病人的生存质量。 BMP~~~~~骨髓处理程序 从骨髓中纯化出移植所需造血干细胞，尤其是在ABO血型不合的骨髓移植中减少溶血性输血反应的发生，必须将骨髓中的红细胞和血浆成份尽可能去除。应用该程序处理骨髓，造血干细胞的回受率90%以上。 3．TPE~~~~~治疗性血浆交换 应用该程序进行血浆交换治疗时，置换液量可自动计算。液体平衡范围可从75%---150%任意调节，具有操作方便，置换迅速等特点。 血浆置换的适应症非常广泛，临床常见病种如下： 血液系统疾病：（2）风湿免疫系统疾病： 巨球蛋白血症普通型天庖疮 多发性骨髓瘤类天庖疮 同种免疫性血小板减少性疾病系统性红斑狼疮 ABO血型不合的骨髓移植（受者）系统性血管炎 有第8凝血因子抗体的血友病类风湿性关节炎 免疫性血小板减少性紫癫风湿性关节炎 高冷凝素患者急性进行性肾小球肾炎
一、HAEMONETIC?一次性使用血细胞分离器参数 一、996E技术参数 ★1、HAEMONETICS生产的便携式血液成分分离机（型号：9000） 2、产品构成：225毫升Latham杯，配备17G侧孔双翼穿刺针，穿刺针与管路采 用标准接口，方便更换。独立全血留样袋，真空留样器，两个五天血小板保存袋，一个1000ML新鲜冰冻血浆袋，DPM/SPM细菌过滤器，抗凝剂管道独立细菌过滤器。 3、耗材可选择血小板和血浆组合采集； 4、单针操作； ★5、袋体厚薄均匀，透气性能好，在22-24摄氏度、不间断震荡条件下可保存血小板五天。其采集保存的血小板产品质量要满足临床治疗标准，单人份治疗量（≥2.5x10 11/袋），其中白细胞混入量≤5.0x108/袋，红细胞混入量≤ 8.0x109/ 袋。 6、外包装密封防压包装 二、996E2技术参数 ★1、HAEMONETICS生产的便携式血液成分分离机（型号：9000） 2、产品构成：225毫升Latham杯，配备17G侧孔双翼穿刺针，穿刺针与管路采 用标准接口，方便更换。独立全血留样袋，真空留样器，两个五天血小板保存袋，一个1000ML新鲜冰冻血浆袋，DPM/SPM细菌过滤器，抗凝剂管道独立细菌过滤器， 3、耗材可选择血小板和血浆组合采集； 4、单针操作； 5、独立盐水补偿管路，每个循环自动补偿盐水，配有独立细菌过滤器。 ★6、袋体厚薄均匀，透气性能好，在22-24摄氏度、不间断震荡条件下可保存血小板五天。其采集保存的血小板产品质量要满足临床治疗标准，单人份治疗量（≥2.5x10 11/袋），双人份治疗量（≥5.0x10 11/袋），其中白细胞混入量≤5.0x108/袋，红细胞混入量≤8.0x109/ 袋。 7、外包装密封防压包装 二、Fenwal一次性血液成分分离管路-单针参数 ★1.1、适用于Amicus血细胞分离机 耗材外包装为密封防压包装 ★1.3、血小板采集时间: 单份<45分钟,双份<70分钟 1.4、每个循环外周血量，单针耗材<190ml，双针耗材<210ml 1.5、采集仪器具备可以自动充气和放气的袖带； ★1.6、采集单份或双份血小板时，具备采集过程中可进行盐水初始化及盐水补偿的功能，目的为在必要时补充献血者的血容量； 1.7、管路灭菌方式:辐照灭菌。避免环氧乙烷毒性 2、耗材要求： 2.1、耗材具备条形码识别功能，可阅读适配国际通用的条形码； 2.2、耗材可实现采集单份和双份血小板； 2.3、血小板收集保存袋在20-24摄氏度、不间断震荡条件下，可保存血小板至少5天。