迟缓爱德华氏菌论文：铁相关蛋白Dps对迟缓爱德华氏菌毒力影响的研究
【中文摘要】Dps(DNA-binding proteins from starved cells)属于铁蛋白超家族,是原核生物中特有的一类能结合铁离子、抗氧化损伤和保护DNA的重要功能蛋白。本研究在迟缓爱德华氏菌株TX01中克隆得到了Dps家族的两个基因dps1和dps2。将dps1和dps2基因在大肠杆菌中重组表达后,获得的可溶性蛋白rDps1和rDps2具有DNA结合功能和铁氧化酶活性。为了检测dps1和dps2的功能作用,我们构建了dps1和dps2的单基因缺失突变株TXDps1和TXDps2以及突变菌株TXDps2的dps1基因抑制表达菌株TXDps2RI。与野生型菌株TX01相比,TXDps1和TXDps2的生长没有显著性差异,但TXDps2RI 的逆境生长能力降低;TXDps1、TXDps2及TXDps2RI的抗氧化损伤、抗紫外线辐射能力皆明显减弱,但TXDps2RI的减弱程度较TXDps1和TXDps2更显著。毒力分析表明,与野生型菌株TX01以及TXDps1和TXDps2相比,TXDps2RI在牙鲆PBL中的生存复制能力显著降低,对牙鲆组织的感染能力大幅下降。综上所述,本研究证明了Dps1和Dps2具有保...
【英文摘要】DNA-binding protein from starved cells (Dps) is a member of ferritin-like proteins that exhibit properties of nonspecific DNA binding and iron oxidation and storage. In this study, we examined the biological property and function
of two Dps proteins, Dps1 and Dps2, from Edwardsiella tarda, an important fish bacterial pathogen. Recombinant Dps1 and Dps2 purified from Escherichia coli were able to mediate iron oxidation and bind DNA. To examine the functional importance of Dps1 and Dps2, three mutant E. tarda...
【关键词】迟缓爱德华氏菌铁蛋白 Dps(DNA-binding proteins from starved cells)
【英文关键词】Edwardsiella tarda ferritin Dps(DNA-binding proteins from starved cells)
【目录】铁相关蛋白Dps对迟缓爱德华氏菌毒力影响的研究
摘要4-5Abstract5第一章前言9-26 1.1 迟
缓爱德华氏菌研究概况9-15 1.1.1 迟缓爱德华氏菌生物学特征9 1.1.2 迟缓爱德华氏菌的危害9-10 1.1.3 迟缓爱德华氏菌致病因子的研究10-15 1.1.4 迟缓爱德华氏菌病的
防治15 1.2 细菌Dps家族的研究15-25 1.2.1 Dps蛋白的结构16-17 1.2.2 Dps蛋白的功能17-21 1.2.3 Dps 蛋白调控21-24 1.2.4 Dps蛋白与细菌毒性24-25 1.3 本论文的研究意义及目的25-26第二章迟缓爱德华氏菌Dps1 与Dps2 蛋白序列的生物信息学分析26-37 2.1 材料和方法
26-33 2.1.1 实验材料26-28 2.1.2 菌株TX01 基因组DNA的提取28-29 2.1.3 菌株TX01 Dps家族基因的获得
29-33 2.1.4 序列比对33 2.2 实验结果
33-35 2.2.1 基因组DNA提取结果33-34 2.2.2 基因
的PCR扩增结果34 2.2.3 序列比对结果34-35 2.3 分析与讨论35-37第三章重组蛋白rDps1 与rDps2 的表达纯
化和功能分析37-49 3.1 材料和方法37-44 3.1.1 实
验材料37-39 3.1.2 Dps1 与Dps2 蛋白的原核表达菌株的构建39-41 3.1.3 rDps1 与rDps2 蛋白的表达
41-42 3.1.4 rDps1 与rDps2 蛋白的纯化42-43 3.1.5 rDps1 与rDps2 蛋白的抗氧化活性检测43 3.1.6 rDps1 与rDps2 蛋白的结合DNA活性检测43-44 3.2 实验结果
44-46 3.2.1 rDps1 与rDps2 蛋白的表达纯化
44 3.2.2 rDps1 与rDps2 蛋白的铁氧化酶活性
44-45 3.2.3 rDps1 与rDps2 蛋白的结合DNA功能
45-46 3.3 分析与讨论46-49第四章 dps1 与dps2 基因缺失突变株的构建和功能分析49-76 4.1 材料和方法
49-65 4.1.1 实验材料49-51 4.1.2 迟缓爱德华氏菌TX01 dps1 与dps2 缺失突变片段的克隆51-52 4.1.3 基因缺失突变体TXDps1 和TXDps2 的获得52-54 4.1.4 突变型菌株TXDps2 中dps1 基因的抑制表达菌株TXDp52RI的建立
54-55 4.1.5 菌株生长状况的分析55-56 4.1.6 菌株
抗血清杀菌能力（Serum resistance activity）的测定
56 4.1.7 菌株抗H_20_2的测定56-57 4.1.8 菌株抗
紫外线辐射的测定57 4.1.9 菌株对牙鲆累计死亡率的测定
57-58 4.1.10 菌株组织侵染能力的测定58 4.1.11 菌株对牙鲆PBL呼吸爆发影响的测定58-59 4.1.12 菌株在牙鲆PBL细胞中复制能力的测定59-60 4.1.13 牙鲆PBL感染不同菌株后免疫相关基因的变化60-63 4.1.14 野生型菌株TX01 在不同阶段的dps1，dps2 基因表达变化63-65 4.2 实验结果65-73 4.2.1 突变型菌株的构建65-66 4.2.2 菌株生长情况的比较66-67 4.2.3 菌株抗血清杀菌活性的比较
67 4.2.4 菌株抗H_20_2氧化损伤的比较67-68 4.2.5 菌株抗紫外线辐射能力的比较68 4.2.6 菌株对牙鲆侵染能力的比较68-70 4.2.7 菌株对牙鲆PBL免疫指标影响的比较
70-71 4.2.8 菌株在牙鲆PBL细胞中的复制能力的比较
71 4.2.9 菌株刺激牙鲆PBL细胞免疫相关基因表达的比较
71-72 4.2.10 野生型TX01 在不同生长时期dps1 与dps2 基因的表达情况72-73 4.3 分析与讨论73-76结论
76-77参考文献77-84硕士期间发表的文章
84-85致谢85
斑点叉尾鮰 一、养殖品种简介 斑点叉尾鮰天然分布于北美中部流域或者大西洋沿岸地区，由湖北省水产科学研究所于1984年引进入中国。体型较长，体表光滑无鳞，鱼体两侧有明显而不规则的斑点。最适宜的生长温度为18-34℃，在溶氧高于2.5mg/L时能正常生长，在低于0.8mg/L时开始浮头。 二、主要养殖技术要点 1.清塘消毒 老塘要做好清塘消毒工作，放水前要充分晒塘，放水后使用生石灰或者漂白粉清塘消毒，在5~7天后可放水培肥。 2.鱼苗放养 放入鱼苗前要做好试水工作，选择天气晴好的早上放苗。放苗密度为水花5~8万尾/亩，夏花6000尾/亩，白鲢夏花500尾/亩，鳙鱼夏花200尾/亩。 3.饵料投喂 饵料投喂以人工配合饲料为主，日投喂率在3~5%左右，投喂的时间一般是在早上8:00和下午18:00，同时根据天气和季节做适当的提前和推迟，主要的原则就是保证鮰鱼摄食积极。同时，投喂要做好内服保健，定期拌喂“五黄精华液”+“应激维C”。 4.水质管理 斑点叉尾鮰对于低氧的耐受力较差，为防止浮头，有条件的要经常换水，保持水质的清爽，池中的溶氧要保持在3mg/L以上。没有条件换水的就要适时使用粤海“EM调水王”和“富水美”来调节水质，以保持水质的稳定。 三、疾病防控 1.出血性败血症：主要症状为病鱼在水中呈抽搐状游动，停止摄食，体表溃烂，腹部肿胀，眼球突出，肾、脾肿大，此病多发于春季和初夏。主要防治措施：二氧化氯全池泼洒消毒，内服大蒜素+“应激维C”。 2.爱德华氏菌病：病原为爱德华氏菌，初期病鱼胸鳍侧有直径为3～5毫米的损伤，外部如针状的创伤，并深入到肌肉。在10～15天内损伤面积逐渐扩大，病菌频繁入侵病鱼血液或感染肾脏，患病的成鱼在损伤的肌肉内有恶臭的气体。
欧洲鳗鱼败血症症状及防治方法 [病原] 欧鳗败血症的病原为温和气单胞菌。 [症状及病理变化] 患病鳗体弱，缓游于池角水面或水流平稳处，部分病鳗喜吊挂于池内桩柱或栖息台。鳃盖、臀鳍及整个腹部皮肤充血、水肿，鳃丝水肿、失血，腹部膨胀，肛门红肿突出。剖解可见，病鳗腹腔积水，肝脏呈苍白色，胆囊肿大，肾脏肿大呈棕褐色，消化道充血、无食物。从病鳗的腹腔积水；肝脏、肾脏中均能分离到温和气单胞菌。 [流行情况] 欧鳗败血症主要危害养殖中的黑仔及幼鳗，是近年来我国欧鳗养殖过程中新发现的一种细菌病。流行季节为夏季高温期。感染率在10％以上，病鳗的死亡率达80％～90％。 [防治方法] 预防 1．高温季节尤其要保持池水及池底清洁，定期（约5天1次）使用消毒剂，以降低池水中的病原菌。 2．高温季节定期投喂新霉素、氟哌酸、庆大霉素及菌毒清等敏感抗菌药。 3．流行高峰期增加维生素C的添加量。 治疗 1．全池泼洒氟哌酸（用酸或碱溶液助溶），使池水浓度为6～10毫克
/千克，连续处理2～3天。 2．全池泼洒庆大霉素，剂量为每立方米水体100万～200万国际单位，连用2～3天。 3．全池泼洒含氯消毒剂，使池水有效氯浓度达0.2～0.3毫克/千克，连用2～3天。 4．全池泼洒有机碘（如宝碘、龙碘等），使池水浓度为2～3毫克/千克，连用3天。于外消毒的同时，每月在饵料中添加维生素C及敏感抗生素，连喂7～10天。 鳗鱼烂鳃病的防治 夏秋季节我国南方水温多在20-30℃之间，且天气变化异常，气温、气压变化较大。而养鳗池受天气影响，水质变化波动较大，不易控制，这就导致了致病菌在水体的滋生和生长。在水温为15-30℃的范围内，水温越高，水质越差，鱼的密度越大，则越易暴发流行。 1.病原：致病菌主要有两种，一种为柱状嗜纤维菌，另一种为嗜纤维菌。带菌鱼是最主要的传染源，其次是被污染的水及塘泥。气温异常、水质不稳是诱发疾病的外因。 2.症状：病鱼体色发黑，尤其以头部为甚；游动缓慢，对外界刺激的反应迟钝，呼吸困难，食欲减退；病情严重时，离群独游水面，不吃食，对外界刺激失去反应。发病缓慢，病程较长者，鱼体消瘦。解剖
人体正常菌群及常见细菌的分类
革兰氏阴性杆菌（G－杆菌）肠杆菌科弧菌科非发酵菌群罕见发酵型其它 一、肠杆菌科： 1、埃希菌属（埃希氏－志贺氏菌属）： 大肠埃希菌弗格森氏埃希菌赫尔曼埃希菌伤口埃希菌蟑螂埃希菌 2、志贺菌属： 痢疾志贺菌福氏志贺菌鲍氏志贺菌宋内氏志贺菌 3、爱德华氏菌属： 迟钝爱德华氏菌保科爱德华氏菌鲶鱼爱德华氏菌 4、沙门氏菌属： 伤寒沙门氏菌猪霍乱沙门氏菌肠炎沙门氏菌 5、枸橼酸杆菌属： 弗劳地枸橼酸杆菌异型枸橼酸杆菌无丙二酸盐枸橼酸杆菌丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌生物Ⅰ群6、肠杆菌属： 阴沟肠杆菌产气肠杆菌中间肠杆菌坂崎肠杆菌聚团肠杆菌日勾肠杆菌 河生肠杆菌溶解肠杆菌超压肠杆菌泰洛肠杆菌阿氏肠杆菌何氏肠杆菌致癌肠杆菌 7、克雷伯菌属： 肺炎克雷伯菌臭鼻克雷伯菌鼻硬结克雷伯菌产酸克雷伯菌解乌氨酸克雷伯菌植生克雷伯菌土生克雷伯菌 8、变形杆菌属： 普通变形杆菌奇异变形杆菌产粘变形杆菌潘氏变形杆菌 9、普罗威登斯菌属： 产碱普罗威登斯菌斯氏普罗威登斯菌雷氏普罗威登斯菌海氏普罗威登斯菌 拉氏普罗威登斯菌 10、摩根菌属：
摩氏摩根菌摩氏摩根菌生物Ⅰ群 11、沙雷菌属： 粘质沙雷菌液化沙雷菌深红沙雷菌普城沙雷菌芳香沙雷菌无花果沙雷菌 居泉沙雷菌嗜昆虫沙雷菌 12、耶尔森菌属： 小肠结肠炎耶氏菌弗氏耶氏菌中间型耶氏菌克氏耶氏菌假结膜耶氏菌 鼠疫耶氏菌拉氏耶氏菌毛氏耶氏菌白氏耶氏菌罗氏耶氏菌奥氏耶氏菌 13、其它： 哈夫尼亚菌属西地西菌属爱文氏菌属勒克氏菌属勒米诺氏菌属兰恩氏菌属塔特姆氏菌属致病杆菌属克卢瓦氏菌属克泽氏菌属 二、弧菌科： 1、弧菌属： 霍乱弧菌麦氏弧菌拟态弧菌霍氏弧菌海鱼弧菌河弧菌弗氏弧菌创伤弧菌溶藻性弧菌副溶血性弧菌 2、气单胞菌属： 嗜水气单胞菌温和气单胞菌豚鼠气单胞菌脆弱气单胞菌杀鲑气单胞菌 3、邻单胞菌： 类志贺单胞菌 4、发光杆菌属：对人无致病性 三、非发酵菌群：指不发酵糖类、专性需氧、不产生芽胞的革兰氏阴性杆菌 1、假单胞菌属： Ⅰ群：铜绿假单胞菌荧光假单胞菌恶臭假单胞菌产碱假单胞菌假产碱假单胞菌斯氏假单胞菌曼多辛假假单胞菌
迟缓爱德华氏菌对牙鲆免疫器官的影响 刘 云 姜 明 姜国良 杨 栋 张士璀 (青岛海洋大学266003) 提要当经口腔灌注大量迟缓爱德华氏菌后,牙鲆的头肾和脾脏内的免疫细胞活性增强,表现为单核细胞数量增加,颗粒细胞内产生大量的颗粒以及颗粒吞噬作用的增强。研究结果还表明,病菌也会对免疫器官产生损害,可造成细胞水肿,膜性结构破坏及细胞坏死。本文详细观察了牙鲆肾、脾、肝、肠及血液的显微结构和肾、脾、肝的超微结构的变化,研究结果对疫苗的应用提供了良好的细胞学基础。关键词 迟缓爱德华氏菌,牙鲆,免疫器官 国家重点基础研究发展规划(973)项目课题G1999012006 号;国家海洋863项目819 02 06号。收稿日期:2000 06 28;修回日期:2000 07 18 随着鱼类人工养殖规模的不断扩大,鱼类病害也逐渐增多。据Plumb J.A.1994年报道,迟缓爱德华氏菌病(Edwardsiella tarda )是流行于淡水和海水鱼类的一种常见细菌病。有关鳗鲡的迟缓爱德华氏菌病病原学和组织病理学研究已见郭琼林等1995年,韩先朴等1995年的报道,而海水鱼类牙鲆的迟缓爱德华氏菌病是由Yasunaga 等于1982年首次报道,主要表现为腹水,肝、肾出血、肥大,现在这种病已经成为海水 人工养殖牙鲆的危害较重的三大疾病之一[1] 。据李亚南等1995年报道,由于鱼病的产生是鱼体本身免疫机能受抑制的结果,因此研究病菌与鱼体免疫之间的关系、疫苗与鱼体免疫之间的关系极具理论和应用价 研究报告R EPORTS STUDIES ON THE MORPHOLOGICAL CHARACTERISTICS AND THE ECOLOGY OF Lateolabrax j a p onicus LARVAL,JUVENILE FISH ZHU Jun q uan LI Min g y un SHAO Quan li JI A Din g w u (Departm ent of Fisheries,Ningbo Un iversity,315211) Receiv ed:Feb.28,2000 Ke y W ords:Lateolabrax jap on icu s ,Larvae j uveni le fish ,M orph ology ,Ecology Abstract The p resent p a p er deals with the larval and j uvenile fish of Lateolabrax j a p onicus.The mor p holo g ical characteristics and the ecolo g ical habits were observed under the condition of artificial seed breedin g in the p rocess of its larval and j uvenile fish develo p ment.The results show that,about ninth da y s after hatchin g ,the y olk sac disa pp eared.About thirt y sixth da y s after hatchin g ,median fin ra y s were differentiated.About fift y sixth da y s after hatchin g ,the scales weve formed.About eighty fifth days after hatching,the body was covered completely by scales.With the development of its morphology,its ecological habits were also changed accordingly.(本文编辑:刘珊珊)
爱德华氏菌属1. 迟缓爱德华氏菌 特征：迟缓爱德华氏菌为革兰氏阴性病原菌，短杆菌，大小多在（0.5 ～1）μｍ×（1-3）μｍ，无荚膜，亦不形成芽孢，为周毛菌，能运动。生长温度范围为15-42℃，最适为37℃，适宜pH值范围为5.5-9.0。但以pH 7.2较好，耐食盐浓度为0-4%， 培养：该菌在普通营养琼脂培养基上25℃培养24，能形成圆形隆起灰白色湿润并带有光泽呈半透明状的菌落直径约为0.5-1mm，在含5%-10%血液的普通营养琼脂培养基平板 。 2.鲇鱼爱德华氏菌 特征：鲇鱼爱德华氏菌属于爱德华氏菌属，在该属细菌中最难培养。菌体大小约1um×（2-3）um，为小直杆菌，革兰氏染色阴性，无荚膜，不形成芽孢，兼性厌氧，25℃时有动力，在37℃时无动力。菌落大小为0.5mm 左右，圆形光滑、边缘整齐、稍隆起。由鲇鱼爱德华氏菌所引起的鱼类爱德华氏菌病主要是鲇鱼肠道败血症。该病有季节性，常发生于春季和秋季，鳙等可被感染发病，病鱼在咽部及口腔附近出现皮肤出血或淤血、鳃色变淡、突眼症状，解剖可见肾脏和脾脏肿胀，肝脏出血且有坏死灶，腹膜内有血性腹水。
培养：鲇鱼爱德华氏菌除为该属细菌中难养的。在培养基平板上生长较缓慢常需培养约48h才能形成直径1-2mm圆形光滑边缘整齐稍隆起的无色小菌落；二是尽管爱德华氏菌的生化特性都是以37℃培养为明显，但鲇鱼爱德华氏菌则更喜欢较低的温度其最适一般为25-30℃，在37℃时生长缓慢或完全不能生长，尤其是运动力只有在约28℃时才能表现出来且是微弱的。 弧菌属 特征：河流弧菌属于弧菌属，菌体大小为（0.5-0.8）μｍ×（1.8-2.5 ）μｍ，为革 。 24h) 1. 嗜水气单胞菌 嗜水气单胞菌属于气单胞菌属，革兰氏染色阴性；兼性厌氧，具有呼吸和发酵代谢类型；能利用葡萄糖和其它糖类产酸，常产气无芽孢，不产生荚膜，散在或成双排列，端生单鞭毛（有运动性）的短杆菌，两端钝圆，大小多在（0.6-0.7）μｍ×1.4μｍ。菌落特征为圆形光滑、边缘整齐、较隆起、不透明的浅灰黄白色。 嗜水气单胞菌寄主广泛，可引起大宗淡水鱼等发生相应的细菌性败血症，危害鱼的种类最多、地区最广、损失最大。
人体正常菌群及常见细菌的分类人体各部位的正常菌群
一、肠杆菌科: 阴沟肠杆菌产气肠杆菌中间肠杆菌坂崎肠杆菌聚团肠杆菌日勾肠杆菌河生肠杆菌溶解肠杆菌超压肠杆菌泰洛肠杆菌阿氏肠杆菌何氏肠杆菌致癌肠杆菌克雷伯菌属： 肺炎克雷伯菌臭鼻克雷伯菌鼻硬结克雷伯菌产酸克雷伯菌解乌氨酸克雷伯菌植生克雷伯菌土生克雷伯菌 变形杆菌属： 普通变形杆菌奇异变形杆菌产粘变形杆菌潘氏变形杆菌 普罗威登斯菌属： 产碱普罗威登斯菌斯氏普罗威登斯菌雷氏普罗威登斯菌海氏普罗威登斯菌拉氏普罗威登斯菌10、摩根菌属： 摩氏摩根菌 11、沙雷菌属： 粘质沙雷菌 居泉沙雷菌 12、耶尔森菌属： 小肠结肠炎耶氏菌 鼠疫耶氏菌 13、其它： 哈夫尼亚菌属 塔特姆氏菌属弗氏耶氏菌中间型耶氏菌克氏耶氏菌拉氏耶 氏菌 西地西菌属 致病杆菌属假结膜耶氏菌毛氏耶氏菌白氏耶氏菌罗氏耶氏菌奥氏耶氏 菌 爱文氏菌属勒克氏菌属勒米诺氏菌属兰恩氏菌属克卢瓦氏菌属克泽氏菌属 肠杆菌科革兰氏阴性杆菌（G-L 杆—A. 弧菌科非发酵菌群罕见发酵型其它 1埃希菌属（埃希氏一志贺氏菌属）： 大肠埃希菌弗格森氏埃希菌赫尔曼埃希菌伤口埃希菌蟑螂埃希菌2、志贺菌属： 痢疾志贺菌福氏志贺菌鲍氏志贺菌 3、爱德华氏菌属： 迟钝爱德华氏菌4、沙门氏菌属： 伤寒沙门氏菌5、枸橼酸杆菌属： 弗劳地枸橼酸杆菌 肠杆菌属：保科爱德华氏菌猪霍乱沙门氏菌 6、 宋内氏志贺菌 鲶鱼爱德华氏菌 肠炎沙门氏菌 异型枸橼酸杆菌无丙二酸盐枸橼酸杆菌丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌生物I群 7、 9、 摩氏摩根菌生物I群 液化沙雷菌深红沙雷菌普城沙雷菌芳香沙雷菌无花果沙雷菌嗜昆虫沙雷菌
爱德华氏菌属 1. 迟缓爱德华氏菌 特征：迟缓爱德华氏菌为革兰氏阴性病原菌，短杆菌，大小多在（0.5?1）X（1-3） g，无荚膜，亦不形成芽孢，为周毛菌，能运动。生长温度范围为15-42 C,最适为37C, 适宜pH值范围为5.5-9.0。但以pH 7.2较好，耐食盐浓度为 0-4% , 培养：该菌在普通营养琼脂培养基上25 C培养24,能形成圆形隆起灰白色湿润并带有 光泽呈半透明状的菌落直径约为0.5-1mm ,在含5%-10%血液的普通营养琼脂培养基平板 常用绵羊或家兔脱纤血液上的菌落与在普通营养琼脂上的基本一致，但稍大些。在麦康凯琼脂、SS琼脂、胆盐硫化氢乳糖琼脂（DHL ）、木糖-赖氨酸-去氧胆酸盐（XLD ）琼脂等肠 道菌选择性培养基上可形成较小菌落因其产生硫化氢能使菌落中央为黑色。在普通营养肉汤 中呈均匀混浊生长。 危害：德华氏菌感染症，鳖发生白板病，鳗鲡红头病，鳝鱼的红病和渠道鮎鱼的气肿性 腐烂病等 感染：感染可发生于全年缺乏明显的季节性，在水温20C以上时均可发生，但一般认 为水温在15C时，就能发生高峰期多出现在水温25-30 C时，一般于春季和夏季易发流行。 人工养殖的淡水鱼和海水鱼中均发现有该菌感染的发生如鲫、金鱼、虹鱒、大鳞大马哈鱼、黑鲈、真鲷、丽鲷、黑鲷、鲻鱼、川鲽、牙鲆等均可被感染发病，实验性可感染鲤鱼和青蛙。 分离培养：对于迟钝爱德华氏菌的分离培养，常见的临床标本材料是表皮肌肉坏死组织 及内脏器官组织等。通常将被检材料接种于普通营养琼脂血液琼脂及某种肠道菌选择性培养基（如SS 琼脂、DHL琼脂、XLD琼脂、麦康凯琼脂等）平板，置28C或37C恒温培养18-24h。 形态特征检查：包括对标本材料中及纯培养物的爱德华氏菌形态检查，常采用革兰氏染 色镜检，按该菌相应形态特征予以判定。 2. 鲇鱼爱德华氏菌 特征：鮎鱼爱德华氏菌属于爱德华氏菌属，在该属细菌中最难培养。菌体大小约1umx （2-3） um,为小直杆菌，革兰氏染色阴性，无荚膜，不形成芽孢，兼性厌氧，25C时有 动力，在37 C时无动力。菌落大小为 0.5mm左右，圆形光滑、边缘整齐、稍隆起。由鮎鱼爱德华氏菌所引起的鱼类爱德华氏菌病主要是鲇鱼肠道败血症。该病有季节性，常发生于春 季和秋季，鳙等可被感染发病，病鱼在咽部及口腔附近出现皮肤出血或淤血、鳃色变淡、突 眼症状，解剖可见肾脏和脾脏肿胀，肝脏出血且有坏死灶，腹膜内有血性腹水。 培养：鲇鱼爱德华氏菌除为该属细菌中难养的。在培养基平板上生长较缓慢常需培养约
人体正常菌群及常见细 菌的分类 Document serial number【UU89WT-UU98YT-UU8CB-UUUT-UUT108】
人体正常菌群及常见细菌的分类 革兰氏阴性杆菌（G－杆菌）
肠杆菌科弧菌科非发酵菌群罕见发酵型其它 一、肠杆菌科： 1、埃希菌属（埃希氏－志贺氏菌属）： 大肠埃希菌弗格森氏埃希菌赫尔曼埃希菌伤口埃希菌蟑螂埃希菌2、志贺菌属： 痢疾志贺菌福氏志贺菌鲍氏志贺菌宋内氏志贺菌 3、爱德华氏菌属： 迟钝爱德华氏菌保科爱德华氏菌鲶鱼爱德华氏菌 4、沙门氏菌属： 伤寒沙门氏菌猪霍乱沙门氏菌肠炎沙门氏菌 5、枸橼酸杆菌属： 弗劳地枸橼酸杆菌异型枸橼酸杆菌无丙二酸盐枸橼酸杆菌丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌生物Ⅰ群 6、肠杆菌属： 阴沟肠杆菌产气肠杆菌中间肠杆菌坂崎肠杆菌聚团肠杆菌日勾肠杆菌 河生肠杆菌溶解肠杆菌超压肠杆菌泰洛肠杆菌阿氏肠杆菌何氏肠杆菌致癌肠杆菌 7、克雷伯菌属： 肺炎克雷伯菌臭鼻克雷伯菌鼻硬结克雷伯菌产酸克雷伯菌解乌氨酸克雷伯菌 植生克雷伯菌土生克雷伯菌
8、变形杆菌属： 普通变形杆菌奇异变形杆菌产粘变形杆菌潘氏变形杆菌 9、普罗威登斯菌属： 产碱普罗威登斯菌斯氏普罗威登斯菌雷氏普罗威登斯菌海氏普罗威登斯菌 拉氏普罗威登斯菌 10、摩根菌属： 摩氏摩根菌摩氏摩根菌生物Ⅰ群 11、沙雷菌属： 粘质沙雷菌液化沙雷菌深红沙雷菌普城沙雷菌芳香沙雷菌无花果沙雷菌 居泉沙雷菌嗜昆虫沙雷菌 12、耶尔森菌属： 小肠结肠炎耶氏菌弗氏耶氏菌中间型耶氏菌克氏耶氏菌假结膜耶氏菌 鼠疫耶氏菌拉氏耶氏菌毛氏耶氏菌白氏耶氏菌罗氏耶氏菌奥氏耶氏菌 13、其它： 哈夫尼亚菌属西地西菌属爱文氏菌属勒克氏菌属勒米诺氏菌属兰恩氏菌属 塔特姆氏菌属致病杆菌属克卢瓦氏菌属克泽氏菌属 二、弧菌科：
斑点叉尾鮰肠道败血病 病原：鮰爱德华氏菌 症状：病鱼游动缓慢，时有头朝上，尾向下呈垂直飘浮状态。腹部肿胀，有浅色小血斑、突眼、大部分成鱼和亲鱼头顶部出现一条隆起瘤状物，溃破后，露出头骨，鳃丝严重贫血、腹腔内含腹水，全肠充血，肝、肾肿大并呈暗红色，严重时肝脏溃疡出现蜂窝状空洞，鳔外壁有血丝。 防治方法：1、在捕捞、运输、放养的过程中勿让鱼体受伤，在放养前进行消毒； 2、改水：水质解毒保护剂500-1000g/亩； 3、外用：鱼用出血停10-15ml米/亩（鱼水宁２00-250ml）、第二代菌毒清100g 米/亩； 4、内服：聚维酮碘【或肠鳃康】+排毒护肝散+五黄粉+黄芪多糖； 斑点叉尾鮰养殖出血性腐败症的防治技术 病原：嗜水气单胞菌。 症状：病鱼在水中呈呆滞的抽搐状游动，停止摄食，体表有圆形稀疏的溃疡（皮肤、肌肉坏死），腹部肿胀，眼球突出，下颌出血，体腔内充满带血的液体，肾脏变软、肿大，肝脏灰白带有小的出血点，肠内充满带血的或淡红色的黏液，后肠及肛门常有出血症状、肿大。此病在养殖高温季节发病率较高，危害严重且不易控制、疗程长。 防治方法：使用50毫克/升的生石灰或1毫克/升的漂白粉全池泼洒，连续2～3天。同时按25毫克/千克鱼体重的用药量，将盐酸土霉素拌和在饲料中，连续投喂5～7天。 斑点叉尾鮰疱疹病毒病及其防治技术 斑点叉尾鮰疱疹病毒病是由鮰疱疹病毒I型感染引起斑点叉尾鮰的鱼苗、鱼种大批死亡一种鱼病。由于其爆发的最适温度为25～30℃，在近期南方普降暴雨，气温升高慢，对于该病的防治不能掉以轻心。
病原：鮰疱疹病毒I型，属疱疹病毒科，通称斑点叉尾鮰病毒(CCV)。病毒生长温度为10～35℃，最适温度为25～30℃。25℃时，病毒在池水中能生存2天，在曝过气的自来水中生活11天；4℃时，病毒在池水中能存活近1个月，在曝过气的自来水中生活近2个月；病毒在池底淤泥中迅速失活。病毒只有1种血清型。 流行情况：斑点叉尾鮰疱疹病毒病自然暴发仅仅是鱼苗和鱼种。流行适温为28～30℃，在28℃时14天内死亡率达94％，19℃时死亡率仅14％。斑点叉尾鮰成鱼带有病毒是传播源，带毒鱼可能通过尿排毒，该病主要危害当年鱼，感染鱼的规格多为体长小于10厘米或体重在10克以下的鱼苗或鱼种。当1～3周龄的鱼苗自然感染上该病时，3～7天内死亡率可达100％。3～4月龄的鱼种染病后死亡率可达40～60％。水温在25℃以上会突然发生较高的死亡率，7～10天内大多数鱼暴发流行，属急性型。 症状：病鱼中通常有20％～30％的鱼垂直游动，尾向下、头浮在水面；有些鱼尤其在惊动时常出现痉挛式旋转游动，沉入水底衰竭而亡；临死前病鱼反应迟钝，侧卧。病鱼的鳍基部(尤其是腹鳍基部)、腹部和尾柄处出血，腹部膨大，腹水增多，眼球突出，有时肛门突出；鳃苍白，有些病鱼的鳃出血，腹腔内有黄色或淡红色液体，内脏通常贫血，消化道内通常无食物，肠道内有淡黄色黏液样物，脾脏通常肿大变黑，肾脏、肝脏、胃肠道、脾脏、骨骼肌出血，或有淤斑。 诊断：根据症状及流行情况做出初步诊断：病鱼游泳异常，又旋转、又抽搐，不久便沉入水底，接着垂直地浮于水面，最终死亡；眼球突出，鳃显著褪色；皮肤和鳍有出血现象；晚期腹部膨胀，肛门突出。解剖发现胃扩张，内有粘液状液体，肌肉、肾、肝、脾等处可见出血。 预防措施：目前尚无有效的治疗方法，主要是进行预防。 1、加强综合预防措施，严格执行检疫制度，严禁在加水时带入野杂鱼。 2、发病地区，养殖对斑点叉尾鮰疱疹病毒病有抵抗力的长鳍叉尾刨和斑点叉尾鮰杂交种、白叉尾鮰、长鳍及尾鮰等。
草鱼出血病 草鱼出血病 病因呼肠孤病毒感染引起。 病症体内外各部位(体表、肌肉、肠道）点状或片状出血。鳃丝出血或苍白，有时有腹水，肠道无食物，充血。主要危害草鱼鱼种。 防治使用“鱼康”适量加大用量全池泼洒或使用“鱼康水中宝”全池泼洒。 烂腮病 病因柱状曲挠杆菌感染引起。 病症鳃丝腐烂带污泥，鳃丝末端有许多粘液。鳃盖骨内表中央部分被腐蚀成一个不规则的透明圆形。 防治使用“鱼康”或“鱼康水中宝”或“速效鱼康”泼洒或浸洗。 肠炎病 病因肠形点状气单孢杆菌感染引起。 病症肛门外产红肿，用手轻按腹部， 有脓状液体出；腹腔骨有腹水，肠道明显充血，尤其以后肠充血发红最为明显。 防治使用“鱼康内服灵”或“鱼康水中宝”拌食投喂. 赤皮病 病因荧光极毛杆菌感染引起。 病症体表局部或大部份出血发炎，鳞片脱落，以鱼体两侧及腹部最为明显；鳍条基部充血，末端腐烂。 防治使用“鱼康”或“鱼康水中宝”或“速效鱼康”全池均匀泼洒。 细菌性败血病 病因嗜水气单胞菌感染引起。
病症病鱼体表、肌肉和内脏器官充血，肝脾、肾肿胀，体腔 腹水，鳍条基部充血，末端腐烂。 防治使用“鱼康水中宝”配以0.5ppm的硫酸铜均匀泼洒，病情严重的连用两天。 白头白嘴病 病因粘球菌感染引起。 病症鱼体表尾端至眼球皮肤变成乳白色，唇肿胀，口周围皮肤溃烂，有絮状物粘附。” 防治使用“鱼康”或“速效鱼康 白皮病 病因白皮极毛杆菌感染引起。 病症发病初期，尾柄处出现一个白点或白斑，并蔓延扩大直至尾部体表全部呈现白色；皮肤无充血、发红症状。 防治使用“鱼康水中宝”“鱼康”分两天各泼洒一次。或“鱼康水中宝”配0.2ppm的食盐外用或内服。 打印病 病因点状气单孢杆菌感染引起 病症通常在肛门两侧皮肤出现红斑，似脓泡状，之后鳞片脱落，肌肉腐烂穿孔，病灶呈圆形，边缘充血且发红。 防治使用“鱼康水中宝”或“速效鱼康”加大用量泼洒全池或将病情严重的进行浸洗。疖疮病 病因疖疮型点状气单胞菌感染引起。 病症发病部位通常在鱼体背鳍基部两侧，呈现脓肿和稍微突起，脓疮内部充满血脓，鳍基充血，鳍条裂开。 防治使用“鱼康”配以0.5ppm的硫酸铜全池泼洒或连用两天“鱼康水中宝”均匀泼洒
迟缓爱德华氏菌论文：铁相关蛋白Dps对迟缓爱德华氏菌毒力影响的研究 【中文摘要】Dps(DNA-binding proteins from starved cells)属于铁蛋白超家族,是原核生物中特有的一类能结合铁离子、抗氧化损伤和保护DNA的重要功能蛋白。本研究在迟缓爱德华氏菌株TX01中克隆得到了Dps家族的两个基因dps1和dps2。将dps1和dps2基因在大肠杆菌中重组表达后,获得的可溶性蛋白rDps1和rDps2具有DNA结合功能和铁氧化酶活性。为了检测dps1和dps2的功能作用,我们构建了dps1和dps2的单基因缺失突变株TXDps1和TXDps2以及突变菌株TXDps2的dps1基因抑制表达菌株TXDps2RI。与野生型菌株TX01相比,TXDps1和TXDps2的生长没有显著性差异,但TXDps2RI 的逆境生长能力降低;TXDps1、TXDps2及TXDps2RI的抗氧化损伤、抗紫外线辐射能力皆明显减弱,但TXDps2RI的减弱程度较TXDps1和TXDps2更显著。毒力分析表明,与野生型菌株TX01以及TXDps1和TXDps2相比,TXDps2RI在牙鲆PBL中的生存复制能力显著降低,对牙鲆组织的感染能力大幅下降。综上所述,本研究证明了Dps1和Dps2具有保... 【英文摘要】DNA-binding protein from starved cells (Dps) is a member of ferritin-like proteins that exhibit properties of nonspecific DNA binding and iron oxidation and storage. In this study, we examined the biological property and function
人体正常菌群及常见细菌的分类 革兰氏阴性杆菌（G－杆菌）
肠杆菌科弧菌科非发酵菌群罕见发酵型其它 一、肠杆菌科： 1、埃希菌属（埃希氏－志贺氏菌属）： 大肠埃希菌弗格森氏埃希菌赫尔曼埃希菌伤口埃希菌蟑螂埃希菌2、志贺菌属： 痢疾志贺菌福氏志贺菌鲍氏志贺菌宋内氏志贺菌 3、爱德华氏菌属： 迟钝爱德华氏菌保科爱德华氏菌鲶鱼爱德华氏菌 4、沙门氏菌属： 伤寒沙门氏菌猪霍乱沙门氏菌肠炎沙门氏菌 5、枸橼酸杆菌属： 弗劳地枸橼酸杆菌异型枸橼酸杆菌无丙二酸盐枸橼酸杆菌丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌生物Ⅰ群 6、肠杆菌属： 阴沟肠杆菌产气肠杆菌中间肠杆菌坂崎肠杆菌聚团肠杆菌日勾肠杆菌 河生肠杆菌溶解肠杆菌超压肠杆菌泰洛肠杆菌阿氏肠杆菌何氏肠杆菌致癌肠杆菌 7、克雷伯菌属： 肺炎克雷伯菌臭鼻克雷伯菌鼻硬结克雷伯菌产酸克雷伯菌解乌氨酸克雷伯菌 植生克雷伯菌土生克雷伯菌
8、变形杆菌属： 普通变形杆菌奇异变形杆菌产粘变形杆菌潘氏变形杆菌 9、普罗威登斯菌属： 产碱普罗威登斯菌斯氏普罗威登斯菌雷氏普罗威登斯菌海氏普罗威登斯菌 拉氏普罗威登斯菌 10、摩根菌属： 摩氏摩根菌摩氏摩根菌生物Ⅰ群 11、沙雷菌属： 粘质沙雷菌液化沙雷菌深红沙雷菌普城沙雷菌芳香沙雷菌无花果沙雷菌 居泉沙雷菌嗜昆虫沙雷菌 12、耶尔森菌属： 小肠结肠炎耶氏菌弗氏耶氏菌中间型耶氏菌克氏耶氏菌假结膜耶氏菌 鼠疫耶氏菌拉氏耶氏菌毛氏耶氏菌白氏耶氏菌罗氏耶氏菌奥氏耶氏菌 13、其它： 哈夫尼亚菌属西地西菌属爱文氏菌属勒克氏菌属勒米诺氏菌属兰恩氏菌属 塔特姆氏菌属致病杆菌属克卢瓦氏菌属克泽氏菌属 二、弧菌科：
~ 人体正常菌群及常见细菌的分类
革兰氏阴性杆菌（G－杆菌） 肠杆菌科弧菌科非发酵菌群罕见发酵型其它 ； 一、肠杆菌科： 1、埃希菌属（埃希氏－志贺氏菌属）： 大肠埃希菌弗格森氏埃希菌赫尔曼埃希菌伤口埃希菌蟑螂埃希菌 2、志贺菌属： 痢疾志贺菌福氏志贺菌鲍氏志贺菌宋内氏志贺菌 3、爱德华氏菌属： 迟钝爱德华氏菌保科爱德华氏菌鲶鱼爱德华氏菌 : 4、沙门氏菌属： 伤寒沙门氏菌猪霍乱沙门氏菌肠炎沙门氏菌 5、枸橼酸杆菌属： 弗劳地枸橼酸杆菌异型枸橼酸杆菌无丙二酸盐枸橼酸杆菌丙二酸盐阴性枸橼酸杆菌生物Ⅰ群6、肠杆菌属： 阴沟肠杆菌产气肠杆菌中间肠杆菌坂崎肠杆菌聚团肠杆菌日勾肠杆菌 河生肠杆菌溶解肠杆菌超压肠杆菌泰洛肠杆菌阿氏肠杆菌何氏肠杆菌致癌肠杆菌 7、克雷伯菌属： ^ 肺炎克雷伯菌臭鼻克雷伯菌鼻硬结克雷伯菌产酸克雷伯菌解乌氨酸克雷伯菌植生克雷伯菌土生克雷伯菌 8、变形杆菌属： 普通变形杆菌奇异变形杆菌产粘变形杆菌潘氏变形杆菌 9、普罗威登斯菌属： 产碱普罗威登斯菌斯氏普罗威登斯菌雷氏普罗威登斯菌海氏普罗威登斯菌 拉氏普罗威登斯菌 10、摩根菌属： $ 摩氏摩根菌摩氏摩根菌生物Ⅰ群 11、沙雷菌属： 粘质沙雷菌液化沙雷菌深红沙雷菌普城沙雷菌芳香沙雷菌无花果沙雷菌居泉沙雷菌嗜昆虫沙雷菌 12、耶尔森菌属： 小肠结肠炎耶氏菌弗氏耶氏菌中间型耶氏菌克氏耶氏菌假结膜耶氏菌
鼠疫耶氏菌拉氏耶氏菌毛氏耶氏菌白氏耶氏菌罗氏耶氏菌奥氏耶氏菌 13、其它： - 哈夫尼亚菌属西地西菌属爱文氏菌属勒克氏菌属勒米诺氏菌属兰恩氏菌属塔特姆氏菌属致病杆菌属克卢瓦氏菌属克泽氏菌属 二、弧菌科： $ 1、弧菌属： 霍乱弧菌麦氏弧菌拟态弧菌霍氏弧菌海鱼弧菌河弧菌弗氏弧菌创伤弧菌溶藻性弧菌副溶血性弧菌 2、气单胞菌属： 嗜水气单胞菌温和气单胞菌豚鼠气单胞菌脆弱气单胞菌杀鲑气单胞菌 3、邻单胞菌： 类志贺单胞菌 4、发光杆菌属：对人无致病性 ) 三、非发酵菌群：指不发酵糖类、专性需氧、不产生芽胞的革兰氏阴性杆菌 1、假单胞菌属： Ⅰ群：铜绿假单胞菌荧光假单胞菌恶臭假单胞菌产碱假单胞菌假产碱假单胞菌斯氏假单胞菌曼多辛假假单胞菌 Ⅱ群：洋葱假单胞菌鼻疽假单胞菌假鼻疽假单胞菌皮氏假单胞菌 Ⅲ群：食酸假单胞菌睾丸酮假单胞菌 Ⅳ群：微小假单胞菌泡囊假单胞菌 # Ⅴ群：嗜麦芽假单胞菌 未定：嗜中温假单胞菌少动假单胞菌腐败假单胞菌Ve群假单胞菌 2、不动杆菌属： 醋酸钙不动杆菌鲍曼不动杆菌溶血不动杆菌琼氏不动杆菌洛菲氏不动杆菌 约翰逊氏不动杆菌 3、产碱杆菌属： 粪产碱杆菌脱硝产碱杆菌芳香产碱杆菌 4、无色杆菌属： " 木糖氧化无色杆菌无色杆菌Vd群 5、黄杆菌及相关菌： 脑膜炎败血性黄杆菌黄杆菌Ⅱb群短小黄杆菌芳香黄杆菌多食黄杆菌类黄杆菌