实训五饲料粗脂肪的测定
【教学目标】
1.学会各种饲料样本的粗脂肪的方法。
2.学会仪器的使用
【教学重点】样本的测定方法。
【教学方法】操作指导
【课时分配】6学时
【原理】索氏脂肪提取器中用乙醚提取试样，称提取物的重量，除脂肪外还有有机酸，磷脂、脂溶性Vit，叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。
【分析步骤】
1）仲裁法使用索氏脂肪提取器测定。
索氏提取器应干燥无水。抽提瓶(内有沸石数粒)在105℃±2℃烘箱中烘干60min，干燥器中冷却30min，称重。再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于0.0008g为恒重。
称取试样1～5g(准确至0.0002g)，于滤纸筒中，或用滤纸包好，放入105℃±2℃烘箱中，烘干120min(或称测水分后的干试样，折算成风干样重)，滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度，滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醚中为准。将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚60～100mL，在60～75℃的水浴(用蒸馏水)上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约10次，共回流约50次(含油高的试样约70次)或检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。
取出试样，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去残余乙醚。擦净瓶外壁。将抽提瓶放入105℃±2℃烘箱中烘干120min，干燥器中冷却30min 称重，再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于O.OOlg为恒重。
2）结果计算
式中：m ——风干试样重量，g。
m1 ——已恒重的抽提瓶重量，g。
m2——己恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g。
3）推荐法
⑴鲁氏残留法
①操作步骤
a.将脱脂滤纸裁成10×10cm2大小，叠成一边不封口的纸包，用铅笔编号，按顺序排列于培养皿上，置于105℃土2℃烘箱中烘2h，取出放于干燥器中冷却至室温，分别放入同一称量瓶中称重(m0，g)。
b.将2～5g风干样品(通过40目筛)用小药匙小心装入已经称重的纸包中，封上包口。
按顺序排列于培养皿中。置于105℃±2℃烘箱中烘3h，取出放入干燥器中冷却至室温，分别放入原称量瓶中，称至恒重(m1，g)。将样品包放入抽提管中，倒入无水乙醚，使之刚超过样品包高度，浸泡过夜。然后将浸泡过样品的无水乙醚放入抽提瓶中，再重新向抽提管中倒入无水乙醚，使之完全浸没样品包。连接装置，接通冷凝水，在70～80℃水浴锅中回流6～8h，回流速度以每分钟20mL左右为宜。抽提完毕，取出样品包，在通风处挥干乙醚．剩余乙醚可进行回收。
c.将样品包仍按原序号排列在培养皿中，置于105℃±2℃烘箱中烘2h，取出放入干燥器中冷却至室温，再将样品包放原称量瓶中，称至恒重(m2，g)。
②结果计算
粗脂肪＝ m1－m2×100%
m1－m0
式中，m0——滤纸＋称量瓶重（g）；
m1——提取前样品包＋称量瓶重（g）；
m2——提取后样品包＋称量瓶重（g）。
上述两种方法都是以乙醚为溶剂的提取方法，其优点是具有较好的准确度和精密度，尤其是测定粗脂肪含量在5%以下的样品，用此法比较可靠。缺点是费工费时，反复提取需8～16h；另外乙醚不能将样品中的全部脂肪提尽。这是因为部分脂肪常与蛋白质或碳水化合物等非脂肪成分结合。成为结合态脂类，如脂蛋白、糖脂、磷酯等，同时样品也必须是烘干的，
因乙醚难以渗入含水样品的组织内部。在烘干样品时，又应考虑到脂肪在高温下易被空气氧化等情况。
⑵脂肪测定仪
①操作步骤
a.打开恒温加热装置开关，控制工作温度为75℃。
b.用万分之一分析天平称2g左右的样品(准确至0.0002g) (m1)，放入滤纸筒内烘干。
c.用套筒夹将6个滤纸套筒装入浸提冷凝管内，当确信套筒已被磁铁吸牢后取下套简夹。
d.用分析天平称浸提杯重量(m2)，然后加入约50mL无水乙醚，用杯托将6个浸提杯放在加热板上，再将冷凝管提升机构搬下，使浸提怀与冷凝管连接好。
e.事先接通浸提冷凝管的冷却水，将滤纸筒置于“沸腾”位置。冷凝管应有良好的冷凝作用；
f.无水乙醚沸腾15min或30min(依样品含油量而异)后，将滤纸筒提升到“冲洗”位置，冲洗30min或45min。
g.冲洗结束后，关闭冷凝管旋塞阀，回收乙醚。
h.松开冷凝管提升机构，取下浸提杯，并放入烘箱烘干。
i.在干燥器中冷却浸提杯，然后用分析天平称重(m3)。
j.按以下公式计算样品中粗脂肪含量。
②测定结果的计算
粗脂肪＝W3－W2×100%
W1
式中：W1——风干试样重量，g。
W2 ——已恒重的浸提杯重量，g。
W3——己恒重的盛有脂肪的浸提杯重量，g。
6.3.3.7 重复性每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。粗脂肪含量在10%以上(含10%)允许相对偏差为3%。粗脂肪含量在10%以下时，允许相对偏差为5%。
【实训作业及思考题】
1.测定混合饲料、配合饲料、浓缩饲料或单一饲料中粗脂肪的含量，并写出实训报告。
2.脂肪包的高度超过虹吸高度对测定结果有何影响？为什么？
3.脂肪测定仪对饲料脂肪的测定有何优点?
4.对测定最后放入105℃±2℃烘箱中需干燥的包、瓶或杯有何要求？
5.测定最后包、瓶或杯在105℃±2℃烘箱内的干燥时间为什么不能过长?过长是否会影响测
定结果?
脂肪测定仪的操作步骤及注意事项 一、脂肪测定仪简介概述： 托普云农脂肪测定仪/脂肪测量仪SZF-06C根据索氏抽提原理、用重量测定方法来测定脂肪含量。即在有机溶剂下溶解脂肪，用抽提法使脂肪从溶剂中分离出来，然后烘干，称量，计算出脂肪含量。 二、脂肪测定仪的原理： 托普云农脂肪测定仪是根据重量测定方法、用索氏抽提原理来测定脂肪含量。即在有机溶剂下溶解脂肪，用抽提法脂肪从溶剂中分离出来，然后称量，烘干，计算出脂肪含量。脂肪测定仪主要有加热浸泡抽提，溶剂回收和冷却三大部分组成。操作时可以根据试剂沸点和环境温度不同而调节加热温度，试样在抽提过程中反复浸泡及抽提、从而达到快速测定目的。 仪器具有索氏标准法（国标法）、索氏热萃取、热萃取、连续流动及CH 标准热萃取等五种萃取方式；可自动实现萃取、淋洗、溶剂回收和预干燥四大功能；仪器采用一体式金属浴加热，升温效果更加完善；触摸彩色显示屏及其简约的界面设计风格给人全新感受；采用外置操作面板和外置打印系统；内置乙醚泄漏检测装置有效防止空气污染，充分保障了实验的安全性。 三、托普云农脂肪测定仪分类： 托普云农脂肪测定仪一般可分为脂肪快速测定仪、粗脂肪测定仪、全自动脂肪测定仪等类别。 四、托普云农脂肪测定仪技术参数： 测定范围：含油量在0.5%～60%范围内的粮食、饲料、油料及各种脂肪制品 测定样品数量：同时6个 升温时间：10分钟内 回收系统：自动 熔剂回收率：≧80%
控温范围：室温~100℃ 电源：AC220V/50Hz 功率：1000W 脂肪测量仪功能特点： 体积小巧，水浴加热升温快，加热均匀 仪器全部采用玻璃磨口接合，避免乙醚泄漏问题 数显控温，控温准，操作简单方便 五、托普云农脂肪测定仪测定脂肪含量时的注意事项： 脂肪含量的测定在食品油脂饲料等行业都常有应用，利用专门测定脂肪含量的粗脂肪测定仪进行测定是现在的主要方法。其测定结果也十分准确可靠。粗脂肪测定仪是应用索氏抽提法，用乙醚或者其他有机溶剂将脂肪从样品中溶解出来，然后对其烘干、称重，最后得到脂肪的含量。通过索氏抽提法，溶解出的物质不仅仅是脂肪，还有叶绿素、胡萝卜素、有机酸等其他物质，因此脂肪抽提仪有时又被叫做粗脂肪测定仪。 脂肪测定仪索氏抽提法是测定脂肪含量最经典的方法。随着仪器技术的进步，索氏抽提法大大提高了测样效率。我们来分析下用粗脂肪测定仪测样时的注意事项： 1.首先在进行溶解前，先对样品进行研磨，研磨的充分程度，可以直接影响到脂肪的提取速度，研磨充分可以使脂肪更好的溶解在石油醚、乙醚等有机溶剂中。 2.当样品被研磨后，将样品装入滤纸筒，此时滤纸筒一定要紧密，而且滤纸筒的高度不能超过回流弯管，否则溶剂不易穿透样品。 3.提取时是用乙醚作为脂肪的溶剂，乙醚的沸点为40℃左右，因此温度不要太过，一般的70-85℃左右即可。 4.实验中使用的试剂必须是无水试剂，例如：如果实验中用到的是乙醚，那么乙醚必须使无水乙醚，因为如果含有其他的物质，如水，就可能将样品中的糖分或者无机物抽出，影响脂肪的测定结果。因此，也要保证实验中用到的溶剂
粗脂肪测定方法 1、简述：本标准适用于各种单一、混合饲料和预混料中粗脂肪的测定方法。 2、方法原理：索氏脂肪提取器中用乙醚提取试样，称提取物的重量，除脂肪外还有有机酸，磷脂、脂溶性维生素，叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。 3、试剂与仪器 2) 无水乙醚（AR） 3) 索氏脂肪提取器（带球形冷凝管）：100或150ml。 4) 索氏脂肪提取仪。 4、使用索氏脂肪提取器测定： 索氏提取器应干燥无水。抽提瓶（内有沸石数粒）在105±2℃烘箱中烘干60min，干燥器中冷却30min，称重，再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于0.0008g为恒重。（可直接烘1.5-2h，冷却后将抽提瓶称重编号） 称取试样1-5g，于滤纸筒中，或用滤纸包好，放入105℃烘箱中，烘干120min（或称测水分后的干试样，折算成风干样重），滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度，滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醚中为准。将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚 60--100ml，在60--75℃的水浴（用蒸馏水）上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约10次，共回流约50次（含油高的试
样约70次）或检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。（将试样在无水乙醚中浸泡三小时，效果更佳） 取出试样，仍用原提取器回收乙醚直到抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去残余乙醚，擦净瓶外壁。将抽提瓶放入105+-2℃烘箱中烘干120min，干燥器中冷却30min称重，再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于0.001g这恒重。（延长烘干时间至3h，称重一次即可） 5、计算： 粗脂肪（%）= 式中：m--风干试样重量，g m1--已恒重的抽提瓶重量，g； m2--已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g. 6、重复性 每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。 粗脂肪含量在10%以上（含10%）允许相对偏差为3%。 粗脂肪含量在10%以下时，允许相对偏差为5%。
食品分析实验一：食品中粗脂肪含量的测定 1.实验目的 （1）学习索氏抽提法测定脂肪的原理与方法； （2）掌握索氏抽提法基本操作要点及影响因素。 2.实验原理 利用脂肪能溶于有机溶剂的性质，在索氏提取器中将样品用无水乙醚或石油醚等溶剂反复萃取，提取样品中的脂肪后，蒸去脂肪瓶中的溶剂,所得的物质即为脂肪（或称粗脂肪）。 3.仪器及材料 3.1仪器 索氏提取器（如图3-3所示）、电热恒温鼓风干燥箱、干燥 器、恒温水浴箱 3.2试剂 无水乙醚（不含过氧化物）或石油醚（沸程30-60°C）、滤 纸筒 3.3材料 饼干、方便面等选一 4.实验步骤 4.1样品处理 准确称取均匀实验样品2g左右并记录（精确至0.01mg），装入滤纸筒内。 4.2索氏提取器的清洗 将索氏提取器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗后烘干。脂肪烧瓶在103°C±2°C的烘箱内干燥至恒重（前后两次称量差不超过2mg）。 4.3样品测定 (1)将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶，由抽提器冷 凝管上端加入乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处，通入冷凝水，将底瓶浸没在水浴中加热，用一小团脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口。 (2)抽提温度的控制：水浴温度应控制在使提取液在每6-8min回流一次为宜。 (3)抽提时间的控制: 抽提时间视试样中粗脂肪含量而定，一般样品提取6-12h，坚果 样品提取约16h。提取结束时，用毛玻璃板接取一滴提取液，如无油斑则表明提取完毕。 (4)提取完毕。取下脂肪烧瓶，回收乙醚或石油醚。待烧瓶内乙醚仅剩下1—2mL时，在 水浴上赶尽残留的溶剂，于95—105°C下干燥2h后，置于干燥器中冷却至室温，
饲料中粗蛋白测定方法 Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】
饲料中粗蛋白测定方法 1、原理 凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。 2、试剂 2.1硫酸（GB625）：化学纯，含量为98％，无氮。 2.2混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水（GB665），6g硫酸钾（HG3—920）或硫酸钠（HG3—908），均为化学纯，磨碎混匀。 2.3氢氧化钠（GB629）：化学纯，40％水溶液（m/V）。 2.4硼酸（GB628）：化学纯，2％水溶液（m/V）。 2.5混合指示剂：甲基红（HG3—958）0.1％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG3—1220）0.5％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。 2.6盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB601制备。 2.6.1盐酸标准溶液：c（HCl）=0.1mol/L。8.3mL盐酸（GB622，分析纯），注入1000mL蒸馏水中。 2.6.2盐酸标准溶液：c（HCl）=0.02mol/L。1.67mL盐酸（GB622，分析纯），注入1000mL蒸馏水中。 2.7蔗糖（HG3—1001）：分析纯。 2.8硫酸铵（GB1396）：分析纯，干燥。
2.9硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1000mL，加入0.1％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。 3、仪器设备 3.1实验室用样品粉碎机或研钵。 3.2分样筛：孔径0.45mm（40目）。 3.3分析天平：感量0.0001g。 3.4消煮炉或电炉。 3.5滴定管：酸式，10、25mL。 3.6凯氏烧瓶：250mL。 3.7凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。 3.8锥形瓶：150、250mL。 3.9容量瓶：100mL。 3.10消煮管：250mL。 3.11定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动。 4、试样的选取和制备 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。 5分析步骤 5.1.1试样的消煮 称取试样0.5～1g（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，放入凯氏烧瓶中，加入6.4g混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻
SZF-06C粗脂肪测定仪 使用说明书 非常感谢您选择托普仪器有限公司的产品和服务 在使用产品前请仔细阅读使用说明书 浙江托普仪器有限公司 ZHEJIANG TOP INSTRUMENT Co., Ltd. 一、概述 本仪器引进脂肪测定新技术，结合我国国情研制而成。设计合理、性能稳定、精确度高、操作省时、省力、测定结果符合国家(GB5512-85)标准，各项指标及性能都达到进口同类产品的要求，该仪器是食品、脂肪、饲料等行业测定脂肪的理想设备。本仪器根椐索氏抽提原理、根椐重量测定法来测定脂肪含量。即在有机溶剂下溶解脂肪，用抽提法使脂肪从溶剂中分离出来，然后烘干、称量、计算出脂肪含量。本仪器主要有加热抽提、溶剂回收和冷却三大部分组成。操作时可以根椐试剂沸点和环境温度不同而调节加热温度，试样在抽提过程反复浸泡及抽提、从而达到快速测定目的。 二、实验原理 样品用无水乙醚或石油醚等溶剂抽提后，蒸去溶剂所得物质，在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。因为除脂肪外还含有色素及挥发油、蜡、树脂等物，抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。三、技术指标 l. 测定范围：含油量在0.5％-60％范围内的粮食、饲料、油料及各种脂肪制品。 2. 测定样品：6个 3. 电源电压：AC220V、频率50HZ 4. 电加热功率：水浴加热1000W 5. 控温范围：室温—100度 6. 外型尺寸：670×600×250 7. 重量：23Kg
四、结构示意图 1.正面示意图： 抽提器位置调节方法：旋松旋塞可上下移动，到预定位置后再旋紧固定 仪表面板图操作说明： ①“PV”显示窗（红色）：显示温度实时值 ②“SV”显示窗（绿色）：显示设定控温值及自整定后手动修改后的新参数值。 ③“AT”自调整灯（黄）：仪表激活自整定功能时，全过程闪烁/数位左移键。 ④“SET”模式菜单键：设定控温值/进入仪表查看，设定参数，对已设置参数确认。 ⑤“”“”（从左到右）：数值减少键，数值增加键。 ⑥温度设定：按下“SET”键，待“SV”位闪烁时，按“”“”可减少或增加。 ⑦参数保存：若需要重新设置温度，当实时温度到达设定温度，“OUT2”亮起时，按“AT”，当“AT”自调整灯闪烁后即可松手，停止闪烁后会自行保存当前参数设定。 2.侧面接管示意图： 按上图连接好橡胶管。 冷却水左进（出）：控制左边两个冷凝管进（出）水， 冷却水中进（出）：控制中间两个冷凝管进（出）水， 冷却水右进（出）：控制右边两个冷凝管进（出）水。 五、操作方法
饲料中粗蛋白的测定方法 本标准参照采用ISO 5983—1979《动物饲料—氮含量的测定和粗蛋白含量计算》1.1 主要内容与适用范围 本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。 1.2 引用标准 GB 601 化学试剂滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备 1.3 原理 凯氏法测定试样中的含氮量，即在被催化剂的作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮量转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，乘以换算系数 6.25，计算出粗蛋白含量。 1.4 试剂 1.4.1 硫酸（GB 625）:化学纯，含量为98%，无氮。 1.4.2 混合催化剂：0.4g 五水硫酸铜，6g 硫酸钾或无水硫酸钠，均为化学纯， 磨碎混匀。 1.4.3 氢氧化钠（GB 629）:化学纯，40%水溶液（M/V）。 1.4.4 硼酸（GB 628）:化学纯，2%水溶液（M/V）。 1.4.5 混合指示剂:甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体 积混合，在阴凉处保存期为三个月。 1.4.6 盐酸标准溶液:邻苯二甲酸氢钾法标定。 147 O.lmol/盐酸（HCL）标准溶液：8.3ml盐酸（GB 622）,分析纯，注入1000ml 蒸馏水中。
1.4.8 0.2 mol/盐酸（HCL）标准溶液：1.67ml盐酸（GB 622），分析纯，注入 1000ml 蒸馏水中。 149 蔗糖（HG 3—1001）:分析纯。 1.4.10 硫酸铵（GB 1396）：分析纯，干燥。 1.4.11硼酸吸收液：1%硼酸水溶液1000ml,加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10ml, 0.1%甲基红乙醇溶液7ml，4%氢氧化钠水溶液0.5ml，混合，置阴凉处保存 期为一个月（全自动程序用）。 1.5 仪器设备 1.5.1 实验室用样品粉碎机或研钵。 1.5.2 分析筛：孔径0.42mm（40目）。 1.5.3 分析天平：感量0.0001g。 1.5.4 消煮炉或电炉。 1.5.5 滴定管：酸式（A 级），10、25mL。 1.5.6 凯氏烧瓶：250mL。 1.5.7 凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式。 1.5.8 锥形瓶：150、250mL。 1.5.9 容量瓶：100mL。 1.5.10 消煮管：250 mL。 1.5.11 定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动、全自动蛋白测定仪。 1.6 试样的选取和制备 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。 1.7 分析步骤 1.7.1 试样的消煮 称取试样0.5g~1g（含氮量5mg~80mg）准确至0.0002g,无损失地放入凯氏烧
实验三食品中粗脂肪含量的测定（索氏抽提法） 一、目的与要求 1、学习索氏抽提法测定脂肪的原理与方法. 2、掌握索氏抽提法基本操作要点及影响因素. 二、原理 利用脂肪能溶于有机溶剂的性质，在索氏提取器中将样品用无水乙醚或石油醚等溶剂反复萃取，提取样品中的脂肪后，蒸去溶剂,所得的物质即为脂肪或称粗脂肪。 三、仪器与试剂 1、仪器 （1）、索氏提取器如图3-3所示 （2）、电热恒温鼓风干燥箱 （3）、干燥器 （4）、恒温水浴箱 2、试剂 （1）无水乙醚（不含过氧化物）或石油醚（沸程30-60°C） （2）滤纸筒 四、测定步骤 1、样品处理 (1)固体样品: 准确称取均匀样品2-5g（精确至0.01mg），装入 滤纸筒内。 (2)液体或半固体: 准确称取均匀样品5-10g（精确至0.01mg）， 置于蒸发皿中,加入海砂约20 g,搅匀后于沸水浴上蒸干,然 后在95-105°C下干燥。研细后全部转入滤纸筒内，用沾有 乙醚的脱脂棉擦净所用器皿，并将棉花也放入滤纸筒内。 2、索氏提取器的清洗 将索氏提取器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗后烘干。脂肪烧瓶在103°C±2°C的烘箱内干燥至恒重（前后两次称量差不超过2mg）。 3、样品测定 (1) 将滤纸筒放入索氏提取器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的脂肪烧瓶，由抽提器冷凝管上端加入乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处，通入冷凝水，将底瓶浸没在水浴中加热，用一小团脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口。 (2) 抽提温度的控制：水浴温度应控制在使提取液在每6-8min回流一次为宜。 (3) 抽提时间的控制: 抽提时间视试样中粗脂肪含量而定，一般样品提取6-12h，坚果样品提取约16h。提取结束时，用毛玻璃板接取一滴提取液，如无油斑则表明提取完毕。 (4) 提取完毕。取下脂肪烧瓶，回收乙醚或石油醚。待烧瓶内乙醚仅剩下1—2mL时，在水浴上赶尽残留的溶剂，于95—105°C下干燥2h后，置于干燥器中冷却至室温，称量。继续干燥30min后冷却称量，反复干燥至恒重（前后两次称量差不超过2mg）。
饲料中粗蛋白的测定 一、实验目的 通过饲料样品中粗蛋白的测定，掌握饲料粗蛋白质含量的测定方法。 二、适用范围 本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。 三、实验原理 凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用浓硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。 四、试剂 （1）硫酸：化学纯，含量为98%，无氮。 （2）混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水；6g硫酸钾或硫酸钠，均为化学纯，磨碎混匀。 （3）氢氧化钠：化学纯，40%水溶液（m/V）。 （4）硼酸：化学纯，2%水溶液（m/V）。 （5）混合指标剂：甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为3个月。 （6）盐酸标准溶液：基准无水碳酸钠法标定； ①0.1mol/L盐酸标准溶液：8.3mL盐酸注入1000ml蒸馏水中。 ②0.02mol/L盐酸标准溶液： 1.67mL盐酸注入1000ml蒸馏水中。 （7）蔗糖：分析纯。 （8）硫酸铵：分析纯，干燥。 （9）硼酸吸收液：1%硼酸水溶液1000mL，加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1%甲基红乙醇溶液7mL，4%氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为1个月（全自动程序用）。 五、仪器设备
（1）实验室用样品粉碎机或研钵。 （2）分样筛：孔径0.45mm（40目）。 （3）分析天平：感量0.0001g。 （4）消煮炉或电炉。 （5）滴定管：酸式，10、25mL。 （6）凯氏烧瓶：250mL。 （7）凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸汽蒸馏式。 （8）锥形瓶：150、250mL。 （9）容量瓶：100mL。 （10）消煮管：250mL。 （11）定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动、全自动蛋白质测定仪。六、分析步骤 试样的选取和制备: 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。 （1）仲裁法 ①试样的消煮 称取试样0.5～1g（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，放入凯氏烧瓶中，加入6.4g混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力（360～410℃）直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少2h。 ②氨的蒸馏 A. 常量蒸馏法 将试样消煮液冷却，加入60～100ml蒸馏水，摇匀，冷却。 将蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有25mL硼酸吸收液和2滴混合指示剂的锥形瓶内。然后小心地向凯氏烧瓶中加入50mL氢氧化钠溶液，轻轻摇动凯氏烧瓶，使溶液混匀后再加热蒸馏，直至流出液体体积为100mL。降下锥形瓶，使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏1～2min，并用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流
索氏提取脂肪测定仪的粗脂肪测定残余法 一. 方法原理： 一定量的样品经有机溶剂浸提脂肪,称剩余物重,有重量的减少求得脂肪重量计算脂肪含量二、试剂： 1．无水。 三、仪器： 脂肪提取器、水浴、干燥器；烘箱。 四、操作步骤： 1．取经脱脂处理后烘干过的滤纸，折叠成一头开口的纸包，用铅笔编号，然后称重(／万天平·W1)。 2．取粉碎样品1g左右，小心放人纸包内，将口折封，在1000 c烘1小时，放干燥器中冷却后，称重(W2)。 3．将纸包放人脂肪提取器内，加入无水，使能全部浸没纸包并有部分流人下部烧瓶中。4．安装好浸提器，注意接口不漏气，水浴加热下部烧瓶(温度约50℃)，通水冷凝回流10 小时左右，控制每小时回流10次左右。 5．打开脂肪提取器，取出纸包，风干+然后在105℃烘于1一2小时。 6．置于干燥器中冷却后，称重(W3)。 五、计算： 月旨肪％=[(w2-w3)*100]/w2-w1 式中：W1：滤纸包空重(g) w2：(滤纸包+样品)重(g) W3：(滤纸包+残余物)重(g) 索氏提取脂肪测定仪的粗脂肪测定残余法 六、注意事项： 1．滤纸用中速或慢速的，不要用快速的；滤纸形状可为方形也可为圆形。 2．滤纸先经脱脂烘干处理，方法是：滤纸放在大烧杯中，加无水浸泡4—6小时，取出 晾干，105℃烘干，在干燥器中冷却备用。 3．样品磨细过40目筛，磨碎时先弃去开始的部分样品，其余的再磨混匀，注意磨碎时使 样品不要发热，磨碎样不要久放，及时测定，称样重：油料样品1g左右，谷物样3—5g。4．如样品含水份较多，应先烘干，烘干的时间和温度要注意控制，温度过高或时间过长，可能使不饱和脂肪酸氧化或油脂挥发影响结果，或使油脂氧化难以提取。 5．滤纸包必须折好，确保样晶不漏出。如在实，验过程中有样品漏出，必须重做。纸包的大小，必须适合浸提器的口径和高度，纸包高度应低于回流弯管，使纸包能完全被浸没。 6．整个脂肪提取器内部都应干燥无水，按装好后各接口应密闭不漏气，冷凝管上口用脱 脂棉花松松堵上或是接上CaCl2干燥管，防水份进入和防挥发出去。
实验二饲料粗蛋白的测定 一、实验目的 通过饲料样品中粗蛋白质的测定，让学生了解了解凯氏定氮法测定的基本原理，掌握半微量凯氏定氮法测定饲料粗蛋白质的方法，掌握粗蛋白质含量的计算方法。 二、实验原理 各种饲料的有机物质在还原性催化剂(如CuSO4，K2SO4或Na2SO4或Se粉)的帮助下，用浓硫酸进行消化作用，使蛋白质和其它有机态氮（在一定处理下也包括硝酸态氨）都转变成NH4+并与H2SO4化合成（NH4）2SO4，而非含氮物质，则以CO2 ↑，H2O↑，SO2↑状态逸出。消化液在浓碱的作用下进行蒸馏，释放出的铵态氮，用硼酸溶液吸收之并与之结合成为四硼酸铵，然后以甲基红溴甲酚绿作指示剂，用HCl标准溶液（0.1mol/L）滴定，求出氮的含量，根据不同的饲料再乘以一定的系数（通常用6.25系数计算），即为粗蛋白质的含量。 其主要化学反应如下： 1、2NH4（CH2）2COOH+13H2SO4→（NH4）2SO4+6CO2+12SO2+16H2（丙氨酸） 2、（NH4）2SO4 +2NaOH→2NH 3+3H2O+2Na2SO4 3、4H3BO3+ NH 3→NH4HB4O7+5H2O 4、NH4HB4O7+HCl+5H2O→NH4C1+4H3BO3 本法不能区别蛋白氮和非蛋白氮，只能部分回收硝酸盐和亚硝酸盐等含氮化合物。在测定结果中除蛋白质外，还有氨基酸、酰胺，铵盐和部分硝酸盐、亚硝酸盐等，故以粗蛋白质表示之。 三、实验设备 1、实验室用样品粉碎机或研钵； 2、分析筛：孔径0.45mm(40目)； 3、分析天平：感量0.0001g； 4、消煮炉或电炉； 5、滴定管：酸式，25或50ml； 6、凯式烧瓶：100或500m1； 7、凯氏蔗馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式； 8、锥形瓶，150或250m1； 9、容量瓶：100ml。 三、实验内容
粗蛋白测定方法—凯式定氮法 粗蛋白crude protein；crude matter（DM）食品、饲料中一种蛋白质含量的度量。不仅包括蛋白质这一物质，它涵盖的范围更广，包括含氮的全部物质，及真蛋白质和含氮物（氮化物）。换句话说，粗蛋白是食品、饲料中含氮化合物的总称，食物中以大豆的粗蛋白含量最高，肉类次之。所以说，粗蛋白是一种既包括真蛋白又包括非蛋白的含氮化合物，后者又可能包括游离氨基酸、尿素、硝酸盐和氨等。然而，不同蛋白质的氨基酸组成不同，其氮含量不同，总氮量换算成蛋白质的系数也不同。总之，粗蛋白是食品、饲料中一种蛋白质含量的度量。我们可以通过粗蛋白测定仪即凯氏定氮仪来测量粗蛋白的含量，测量步骤如：蛋白质含氮量约为16%（这已通过多次试验得出），再用凯氏法测出总氮量，再乘以 6.25就可求得粗蛋白的含量。 一、实验原理 蛋白质是由碳、氢、氧、氮及少量硫元素组成。这些元素在蛋白质中含量都有一定比例关系，其中含碳50～55%、氢6～8%、氧20～23%、氮15～17%和硫0.3～2.5%。此外在某些蛋白质中还含有微量的磷、铁、锌、铜和钼等元素。 由于氮元素是蛋白质区别于糖和脂肪的特征，而且绝大多数蛋白质的氮元素含量相当接近，一般恒定在15～17%，平均值为16%左右，因此在蛋白质的定量分析中，每测得1克氮就相当于6.25克蛋白质。所以只要测定出生物样品中的含氮量，再乘以6.25，就可以计算出样品中的蛋白质含量。含氮有机物与浓硫酸共热，被氧化成二氧化碳和水，而氮则转变成氨，氮进一步与硫酸作用生成硫酸铵。由大分子分解成小分子的过程通常称为”消化”。为了加速消化，通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高消化液的沸点(290℃→400℃)，加入硫酸铜作为催化剂，过氧化氢作为氧化剂，以促进反应的进行。反应(1)(2)在凯氏烧瓶内完成，反应(3)在凯氏蒸馏装置中进行，其特点是将蒸汽发生器、蒸馏器及冷凝器三个部分融为一体。由于蒸汽发生器体积小，节省能源，本仪器使用方便，效果良好。硫酸铵与浓碱作用可游离出氨，借水蒸气将产生的氨蒸馏到一定浓度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨后使溶液中的H+浓度降低，然后用标准无机酸滴定，直至恢复溶液中原来H+浓度为止，最后根据所用标准酸的量计算出待测物中总氮量。 二、仪器和试剂
饲料粗脂肪测定方法 Method for the determination of crude fat feedstuffs 1 主题内容与适用范围 本标准规定了饲料粗脂肪的测定方法。 本标准适用于各种单一、混合、配合饲料和预混料。 2 原理 索氏(Soxhlet)脂肪提取器中用乙醚提取试样，称乙醚提取后的重量，重量之差即为脂肪。除脂肪外还有有机酸，磷脂，脂溶性维生素，叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。 3 试剂 3.1无水乙醚（分析纯）。 4 仪器设备 4.1实验室用样品粉碎机或研钵。 4.2 分样筛：孔径0.45nm。 4.3分析天平：感量0.0001g。 4.4电热恒温水浴锅：室温～100℃。 4.5 恒温烘箱：50～200℃。 4.6索氏脂肪提取器（带球形冷凝管）：100或150mL。 4.7索氏脂肪提取仪。 4.8滤纸或滤纸筒：中速，脱脂。 4.9干燥器：用氯化钙（干燥级）或变色硅胶干燥剂。 5 试样的制备 选取有代表性的试样，用四分法经试样缩减至500g，粉碎至40目。再用四分法缩减至200g，于密封容器中保存。 6 分析步骤 使用索氏脂肪提取器测定，索氏提取器（4.6）应干燥无水。 称取试样1～5g（准确至0.0002g），于滤纸筒中，或用滤纸包好，放入105℃烘箱（4.5）中，烘干120min。取出放入干燥器中冷却30min称重（m1）。 将滤纸筒或滤纸包放入提取器中，滤纸筒应高于提取器（4.6）虹吸管的高度，滤纸包长度应以全部浸泡于乙醚（3.1）中为准。将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚（3.1）60～100mL，在60～75℃的水浴（用蒸馏水）上加热，使乙醚（3.1）回流，控制乙醚（3.1）回流次数为每小时约10次，共回流约50次（含油高的试样约70次）或检查抽提管流出的乙醚（3.1）挥发后不留下油迹为抽提终点。 取出试样置干燥洁净的瓷托盘中，放置在通风橱，待多余的乙醚挥发完后放入
脂肪测定仪的安装与日常保养分析 脂肪测定仪根据索氏抽提原理、用重量测定方法来测定脂肪含量。即在有机溶剂下溶解脂肪，用抽提法脂肪从溶剂中分离出来，然后烘干，称量，计算出脂肪含量。脂肪测定仪主要用于食品、油脂、饲料、土壤等行业进行。如豌豆粉中脂肪含量测定、葵花籽中脂肪含量测定、炒货蚕豆中脂肪含量测定、土壤中残留前处理、芝麻中脂肪含量测定、扁桃中脂肪含量测定、婴儿米粉中粗脂肪含量测定、香肠中总脂肪含量测定、面包中脂肪含量测定等。 脂肪测定仪是依索氏抽提、重量测定为基本原理，集浸泡、抽提、加温、冷凝及溶剂回收于一体。采用了自动控温全封密电加热形式，使仪器加温更为均匀，安全可靠，并具有良好的密封设施，同时可测试1~6个样品，纤检脂肪测定仪做到浸泡、抽提、溶剂回收一次完成。所以本仪器具有设计合理、性能稳定、重现性好、度高、操作方便、省力、省时等优点。 一、脂肪测定仪主要特征 1、加热抽提，溶剂回收和冷却三大部分组成； 2、在操作时可以根据试剂沸点和环境温度不同而调节加热温度； 3、试样在抽提过程反复浸泡及抽提，从而达到快速提取目的； 4、可自动回收溶剂，大大方便了用户的使用，并节约了很多时间； 5、抽提时间可调，到时报警。 二、脂肪测定仪安装
1.打开包装，检查仪器及附件是否齐全，是否有损坏。 2.将主机搬至工作台，将仪器背后的进水管连接水龙头，将出水管通往下水道。注意接口注要用卡箍或扎带扎紧，避免水管脱落。 三、脂肪测定仪的日常保养 1、同一套抽提系统短时间内尽量使用同一种溶剂，防止溶剂交叉污染； 2、用潮湿布将仪器擦干净以免产生静电，用一块纱布清除掉加热板的一切灰迹以提高热量传送 3、平时注意抽提杯的洁净，需要定期进行清洗； 4、确认冷却器中是否有海藻类植物生长，如必要请用1mol/L的盐酸或次氯酸溶剂清理。
饲料中粗脂肪的测定方法 1．主题内容与适用范围 本标准规定了饲料粗脂肪测定方法 本标准适用于各种单一、混合配合饲料和预混料。 2．原理 索氏脂肪提取器中用乙醚提取试样，称提取物的重量，除脂肪外还有有机酸，磷脂，脂溶性维生素，叶绿素等，因而测定结果称为粗脂肪或乙醚提取物。 3．试剂 无水乙醚（分析纯） 4．仪器设备 实验室用样品粉碎机或研钵 分样筛：孔径0。45毫米。 分析天秤：感量0。0001克。 电热恒温水浴锅：室温~100℃。 恒温烘箱：50~200℃。 索氏脂肪提取仪。 滤纸或滤纸筒：中速，脱脂。 干燥器：用氯化钙（干燥级）或变色硅胶为干燥剂。 5．试样的制备 选取有代表性的试样，用四分法将试样缩减为500克，粉碎至
40目，再用四分法缩减到200克，于密封容器中保存。 6．分析步骤 仲裁法：使用索氏脂肪提取器测定 索氏脂肪提取器，应干燥无水，抽提瓶中有沸石数粒，在105±2℃烘箱中烘干60分钟，干燥器中冷却30分钟，称重，再烘干30分钟，同样冷却称重，两次重量之差小于克为恒重，称取试样1~5克准确至克，于滤纸筒中，或用滤纸包好，放入105℃烘箱中，烘干120分钟，（或称水分后的干试样，折算成风干样品重）滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度，滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醚中为准，将滤纸包或滤纸筒放入抽提管，在抽提瓶中加入无水乙醚60~100ml，在60~75℃的水浴上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约10次，共回流约50次，含油高的试样约70次，或检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。 取出试样，仍用原提取器回收乙醚直至抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去残留学乙醚，擦拭干净瓶外壁，将抽提瓶放入105±2℃烘箱中烘干120分钟，干燥器中冷却30分钟稳重，再烘干30分钟，同样冷却称重，两次重量之差小于克为恒重。 推荐法，使用脂肪提取仪测定，依仪器操作说明书进行操作。7．测定结果的计算： 粗脂肪（%）=(m2－m1)×100／m
饲料中粗蛋白质的测定 一、目的 掌握饲料中粗蛋白质的测定方法，并测定饲料中粗蛋白质的含量。 二、原理 饲料中纯蛋白质和非蛋白氮总称粗蛋白质。凯氏法的基本原理是用浓H 2SO4在还原性催化剂(CuSO4、K 2SO4、Na 2SO4等)的催化作用下消化饲料样本，使其中的蛋白质和非蛋白氮都变为NH ４＋，NH ４＋立即被浓H 2SO4吸收成为(NH 4)2SO4，(NH 4)2SO4在浓碱作用下放出NH 3，通过蒸馏，氨气随水蒸汽沿冷凝管流入硼酸吸收液被硼酸吸收并与之结合成为四硼酸铵，然后以甲基红溴甲酚绿混合指示剂作指示剂，用标准HCL 溶液滴定，求出氮含量，根据不同饲料再乘以一定的换算系数(通常用6.25计算)，即为粗蛋白质的含量。 上述原理的主要化学反应如下： 2.(NH 4)2SO4+2NaOH →2NH 3↑+2H 2O+Na 2SO4 3.H 3BO ３+NH 3→NH 4H 2BO 3 4.NH 4H 2BO 3+HCL →NH 4CL+H 3BO 3 三、仪器设备 1.实验室用样品粉碎机：40目网筛。 2.分析天平：感量0.0001。 3.电子天平: 感量0.001。 4. 六联电炉: 6×1000W 。 5.改良式半微量凯氏定氮仪(图1)。 6.酸式滴定管:25ml 。 7.凯氏烧瓶:100ml 。 8.烧杯:250ml 。 9.三角瓶:150ml 。 10.容量瓶:100ml 。
11.移液管:10ml。 12.量筒: 10ml 。 13.量筒:25ml。 四、试剂 1.浓H 2SO 4 ：化学纯,含量为98%，无氮。 2.混合催化剂：CuSO 4:Na 2 SO 4 =1:10 化学纯。 3.甲基红—溴甲酚绿混合指示剂：0.1%甲基红酒精溶液与0.5%溴甲酚绿酒精溶液等体积混合，阴凉处保存期不超过三个月。此混合指示剂在碱性溶液中呈蓝色，中性溶液中呈灰色，强酸性溶液中呈红色。在硼酸吸收液中呈暗紫色，在吸收氨的硼酸溶液中呈兰色。 4.2%硼酸吸收液：溶2g化学纯硼酸于100ml蒸馏水中，加甲基红—溴甲酚绿混合批示剂0.4ml。 5.40%饱和NaOH溶液：溶40克氢氧化钠（化学纯）于100ml蒸馏水中。 6.0.05mol/l的HCL标准液：取分析纯浓HCL(比重1.19)4.2ml，加蒸馏水稀释至1000ml，用基准物质标定。将基准无水碳酸钠（分析纯）于270-300℃灼烧40分钟称重，至恒重，准确称取0.013-0.015克，溶于50ml 蒸馏水中，加2滴甲基红—溴甲酚绿混合指示剂，用欲配的0.05mol/lHCL滴定至暗紫红色，记录HCL用量 五、测定步骤 1.样本的消化： 精确称取饲料样本0.5-1g，以硫酸纸卷无损的移入消化管中，再加入5氺硫酸铜0.4克，无水硫酸钾或硫酸钠6克，加10ml浓硫酸后将凯氏烧瓶放于通风橱的电炉子上消化(为防止消化时液体溅失，可再加两粒玻璃珠)。 注意：先低温加热(100-200℃)，注意防止泡沫浮起，待泡沫消失后，提高加热温度(约360-410℃) 至沸腾。消化时要经常转动凯氏烧瓶，如果有黑色炭粒不能全部消化，待烧瓶冷却后，补加少量浓硫酸后继续消化至溶液澄明无黑点并呈蓝绿色为止，移出电炉，放于凯氏消化架上冷却。 2.转移：将冷却的消化液加少许蒸馏水约20ml，摇匀后无损移入100ml容量瓶，再用蒸馏水反复冲洗烧瓶数次，直至消化液全部转入容量瓶中，冷却至室温后以蒸馏水定容至刻度。即为试样分解液。 3.空白实验：另取凯氏烧瓶一个，加入混合催化剂（同前），浓硫酸10ml，同样消化至澄清，冷却后按上述方法转移至容量瓶中，定容至刻度备用。
粗脂肪含量的测定 -xx抽提法 摘要： 测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标.脂肪含量的测定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等.目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法是公认的经典方法,也是我国粮油分折首选的标准方法.通过本实验的学习,掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理和操作方法. 一、目的 脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标.脂肪含量的测定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等.目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法（Soxhlet extractor method）是公认的经典方法,也是我国粮油分折首选的标准方法.通过本实验的学习,掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理和操作方法. 二、原理 本实验采用索氏抽提法中的残余法,即用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提,除去样品中的粗脂肪,以样品与残渣重量之差,计算粗脂肪含量.由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外,还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质,因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪. 三、实验材料、主要仪器和试剂 1、实验材料 油料作物种子、中速滤纸 2、仪器： 1）索氏脂肪抽提器（图1）或YG-Ⅱ型油分测定器 2）干燥器（直径15-18cm,盛变色硅胶）
3）不锈钢镊子（xx20cm） 4）培养皿 5）分析天平（感量0.001g） 6）称量瓶 7）恒温水浴 8）烘箱 9）样品筛（60目） 3、试剂 无水乙醚或低沸点石油醚（A.R.） 四、操作步骤 1、准备工作 将滤纸切成8cm×8cm,叠成一边不封口的纸包,用硬铅笔编写顺序号,按顺序排列在培养皿中.将盛有滤纸包的培养皿移入105±2℃烘箱中干燥2h,取出放入干燥器中,冷却至室温.按顺序将各滤纸包放人同一称量瓶中称重（记作a）、称量时室内相对湿度必须低于70%. 2、包装和干燥 在上述已称重的滤纸包中装入3g左右研细的样品,封好包口,放入105±2℃的烘箱中干燥3h,移至干燥器中冷却至室温.按顺序号依次放入称量瓶中称重（记作b）. 3、抽提 将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中,注入一次虹吸量的 1.67倍的无水乙醚,使样品包完全浸没在乙醚中.连接好抽提器各部分,接通冷凝水水流,在恒温水浴中进行抽提,调节水温在70-80℃之间,使冷凝下滴的乙醚成
饲料中粗脂肪（EE）的测定方法 减重法 一、适用范围 本方法适用于各种单一、混合、配合饲料和预混料。 二、原理 索氏脂肪提取器中用石油醚提取风干试样中的脂肪，计算样品的失重。其中失重除脂肪外，还有有机酸、磷脂、脂溶性维生素、叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或石油醚提取物。 三、仪器设备 1、实验室用样品粉碎机或研钵。 2、分析筛：孔径0.45mm（40目）。 3、分析天平：感量0.0001g。 4、电热恒温水浴锅：室温～100℃。 5、干燥箱：50℃～200℃。 6、索氏脂肪提取器（带球形冷凝器）：或500～1000ml。 7、滤纸：中速、脱脂。 8、干燥器：用变色硅胶为干燥剂。 9、棉线绳。 四、试剂 无水乙醚（分析纯）或石油醚（30～60℃）。 五、试样的选取和制备 取具有代表性试样，用四分法缩减至50g，粉碎至40目。 六、测定步骤
1、将待测试样粉碎过40目后，精确称取2g 于130℃±5℃干燥箱内干燥40分钟（同时将折好备用的滤纸包标号、放入烘干，后称重），制成风干样品（测水分）。 2、用分析天平精确称取上述风干试样（约1.5g ），置于预先标号烘干的滤纸中包好，并用棉线绳系好。 3、把滤纸包放于抽提管内，在抽提瓶中加入浸提管内的虹吸管高度的两倍容积的石油醚，在50～65℃的水浴中加热（以蒸馏的石油醚冷凝成滴状不连线为好），待3小时左右（脂肪含量高于8%的5小时）用滤纸检查抽提管流出的石油醚，挥发后不留下油迹为抽提终点。 4、取出试样后，在通风橱内自然挥发，至滤纸表面风干为止（约10分钟），将棉线剪去，置于恒重的铝盒内，于130℃±5℃干燥箱内，烘40分钟，置于干燥器中冷却30分钟后，称重。 5、每次实验结束后，将用过的石油醚回收于瓶中，备用。 七、测定结果的计算和表达 1、 风干样中粗脂肪含量： 100)((%)0 1230?---=M M M M M EE 式中：M 0——风干试样重，g 。 M 1——滤纸恒重，g 。 M 2——铝盒恒重，g 。 M 3——烘后铝盒+滤纸包重，g 。 2、 原样中粗脂肪含量： 风干样品中粗脂肪含量原样中水份的含量?-=)1((%)EE 3、 重复性：
粗脂肪含量的测定-索氏抽提法 摘要：测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标.脂肪含量的测定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等.目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法是公认的经典方法,也是我国粮油分折首选的标准方法.通过本实验的学习,掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理和操作方法. 一、目的 脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标.脂肪含量的测定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等.目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法（Soxhlet extractor method）是公认的经典方法,也是我国粮油分折首选的标准方法.通过本实验的学习,掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理和操作方法. 二、原理 本实验采用索氏抽提法中的残余法,即用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流抽提,除去样品中的粗脂肪,以样品与残渣重量之差,计算粗脂肪含量.由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外,还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质,因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪. 三、实验材料、主要仪器和试剂 1、实验材料
油料作物种子、中速滤纸 2、仪器： 1）索氏脂肪抽提器（图1）或YG-Ⅱ型油分测定器2）干燥器（直径15-18cm,盛变色硅胶） 3）不锈钢镊子（长20cm） 4）培养皿 5）分析天平（感量0.001g） 6）称量瓶 7）恒温水浴 8）烘箱
9）样品筛（60 目） 3、试剂 无水乙醚或低沸点石油醚（A.R.） 四、操作步骤 1、准备工作 将滤纸切成8cm×8cm,叠成一边不封口的纸包,用硬铅笔编写顺序号,按顺序排列在培养皿中.将盛有滤纸包的培养皿移入105±2℃烘箱中干燥2h,取出放入干燥器中,冷却至室温.按顺序将各滤纸包放人同一称量瓶中称重（记作a）、称量时室内相对湿度必须低于70%. 2、包装和干燥 在上述已称重的滤纸包中装入3g 左右研细的样品,封好包口,放入105±2℃的烘箱中干燥3h,移至干燥器中冷却至室温.按顺序号依次放入称量瓶中称重（记作b）. 3、抽提 将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中,注入一次虹吸量的1.67 倍的无水乙醚,使样品包完全浸没在乙醚中.连接好抽提器各部分,接通冷凝水水流,在恒温水浴中进行抽提,调节水温在70-80℃之间,使冷凝下滴的乙醚成连珠状（120-150 滴/min 或回流7次/h 以上）,抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止（约需6-12h）.抽提完毕后,用长镊子取出滤纸包,在通风处使乙醚挥发（抽提室温以12-25℃为宜）.提取瓶中的乙醚另行回收. 4、称重
饲料中粗脂肪的测定 一、实验目的 通过饲料样品中粗脂肪的测定，掌握各类饲料样品中粗脂肪的测定原理和方法。 二、适用范围 本方法适用于油籽和油籽残渣以外的动物饲料。 为了本方法的测定效果，将动物饲料分为A、B两类；B类产品提取前需水解。B类包括：①纯动物性饲料，包括乳制品；②脂肪不经预先水解不能提取的纯植物性饲料，如谷蛋白、酵母、大豆及马铃薯蛋白以及加热处理的饲料；③含有一定数量加工产品的配合饲料，其脂肪含量至少有20％来自这些加工产品。 A类：B类以外的动物饲料。 三、方法原理 1、脂肪含量较高的样品（至少20 g/kg）预先用石油醚提取。 2、B类样品用盐酸加热水解，水解溶液冷却、过滤，洗涤残渣并干燥后用石油醚提取，蒸馏、干燥除去溶剂，残渣称量。 3、A类样品用石油醚提取，通过蒸馏和干燥除去溶剂，残渣称量。 四、试剂 本标准所用试剂未注明要求时，均指分析纯试剂。 （1）水至少应为GB/T 6682规定的3级。 （2）硫酸钠无水。 （3）石油醚主要由具有6个碳原子的碳氢化合物组成，沸点范围为40～60℃。溴值应低于1，挥发残渣应小于20mg/L。也可使用挥发残渣低于20mg/L 的工业乙烷。 （4）金刚砂或玻璃细珠。 （5）丙酮。 （6）盐酸c（HCl）＝3mol/L
（7）滤器辅料例如硅藻土，在盐酸[c（HCl）＝6mol/L]中消煮30min，用水洗至中性，然后在130℃下干燥。 五、仪器设备 （1）提取套管，无脂肪和油，用乙醚洗涤。 （2）索氏提取器，虹吸容积约100mL，或用其他循环提取器。 （3）加热装置有温度控制装置，不作为火源。 （4）干燥箱温度能保持在（103+2）℃。 （5）电热真空箱温度能保持在（80+2）℃，并减压至13.3kPa以下，配有引入干燥空气的装置，或内盛干燥剂，例如氧化钙。 （6）干燥器内装有效的干燥剂。 六、分析步骤 试样的制备：选取有代表性的试样，用四分法将试样缩减至500g，粉碎至40目，再用四分法缩减至200g，于密封容器中保存。 1、分析步骤的选择 如果试样不易粉碎，或因脂肪含量高（超过200g/kg）而不易获得均质的缩减的试样，按步骤2处理。否则，按步骤3处理。 2、预先提取 （1）称取至少20 g制备的试样（m0），准确至1 mg，与10g无水硫酸钠混合，转移至一提取套管并用一小块脱脂棉覆盖。 将一些金刚砂转移至一干燥烧瓶，如果随后将对脂肪定性，则使用玻璃细珠取代金刚砂。将烧瓶与提取器连接，收集石油醚提取物。 将套管置于提取器中，用石油醚提取2h。如果使用索氏提取器，则调节加热装置使每小时至少循环10次；如果使用一个相当设备，则控制流速每秒至少5滴（约10mL/min）。 用500mL石油醚稀释烧瓶中的石油醚提取物，充分混合。对一个盛有金刚砂或玻璃细珠的干燥烧瓶进行称量（m1），准确至lmg，吸取50mL石油醚溶液移人此烧瓶中。