饲料中粗脂肪的测定
一、实验目的
通过饲料样品中粗脂肪的测定，掌握各类饲料样品中粗脂肪的测定原理和方法。
二、适用范围
本方法适用于油籽和油籽残渣以外的动物饲料。
为了本方法的测定效果，将动物饲料分为A、B两类；B类产品提取前需水解。B类包括：①纯动物性饲料，包括乳制品；②脂肪不经预先水解不能提取的纯植物性饲料，如谷蛋白、酵母、大豆及马铃薯蛋白以及加热处理的饲料；③含有一定数量加工产品的配合饲料，其脂肪含量至少有20％来自这些加工产品。
A类：B类以外的动物饲料。
三、方法原理
1、脂肪含量较高的样品（至少20 g/kg）预先用石油醚提取。
2、B类样品用盐酸加热水解，水解溶液冷却、过滤，洗涤残渣并干燥后用石油醚提取，蒸馏、干燥除去溶剂，残渣称量。
3、A类样品用石油醚提取，通过蒸馏和干燥除去溶剂，残渣称量。
四、试剂
本标准所用试剂未注明要求时，均指分析纯试剂。
（1）水至少应为GB/T 6682规定的3级。
（2）硫酸钠无水。
（3）石油醚主要由具有6个碳原子的碳氢化合物组成，沸点范围为40～60℃。溴值应低于1，挥发残渣应小于20mg/L。也可使用挥发残渣低于20mg/L 的工业乙烷。
（4）金刚砂或玻璃细珠。
（5）丙酮。
（6）盐酸c（HCl）＝3mol/L
（7）滤器辅料例如硅藻土，在盐酸[c（HCl）＝6mol/L]中消煮30min，用水洗至中性，然后在130℃下干燥。
五、仪器设备
（1）提取套管，无脂肪和油，用乙醚洗涤。
（2）索氏提取器，虹吸容积约100mL，或用其他循环提取器。
（3）加热装置有温度控制装置，不作为火源。
（4）干燥箱温度能保持在（103+2）℃。
（5）电热真空箱温度能保持在（80+2）℃，并减压至13.3kPa以下，配有引入干燥空气的装置，或内盛干燥剂，例如氧化钙。
（6）干燥器内装有效的干燥剂。
六、分析步骤
试样的制备：选取有代表性的试样，用四分法将试样缩减至500g，粉碎至40目，再用四分法缩减至200g，于密封容器中保存。
1、分析步骤的选择
如果试样不易粉碎，或因脂肪含量高（超过200g/kg）而不易获得均质的缩减的试样，按步骤2处理。否则，按步骤3处理。
2、预先提取
（1）称取至少20 g制备的试样（m0），准确至1 mg，与10g无水硫酸钠混合，转移至一提取套管并用一小块脱脂棉覆盖。
将一些金刚砂转移至一干燥烧瓶，如果随后将对脂肪定性，则使用玻璃细珠取代金刚砂。将烧瓶与提取器连接，收集石油醚提取物。
将套管置于提取器中，用石油醚提取2h。如果使用索氏提取器，则调节加热装置使每小时至少循环10次；如果使用一个相当设备，则控制流速每秒至少5滴（约10mL/min）。
用500mL石油醚稀释烧瓶中的石油醚提取物，充分混合。对一个盛有金刚砂或玻璃细珠的干燥烧瓶进行称量（m1），准确至lmg，吸取50mL石油醚溶液移人此烧瓶中。
（2）蒸馏除去溶剂，直至烧瓶中几无溶剂，加2mL丙酮至烧瓶中，转动烧瓶并在加热装置上缓慢加温以除去丙酮，吹去痕量丙酮。残渣在103℃干燥箱内干燥（10+0.1）min，在干燥器中冷却，称量（m2），准确至0.1mg。也可采取：蒸馏除去溶剂，烧瓶中残渣在80℃电热真空箱中干燥1.5h，在干燥器中冷却，称量（m2），准确至0.1mg。
（3）取出套管中提取的残渣在空气中干燥，除去残余的溶剂，干燥残渣称量（m3），准确至0.1mg。将残渣粉碎成1mm大小的颗粒，按步骤3处理。
3、试料
称取5g左右（m4）制备的试样，准确至1mg。
对B类样品按步骤4处理。
对A类样品，将试料移至提取套管并用一小块脱脂棉覆盖，按步骤5处理。
4、水解
将试料转移至一个400mL烧杯或—个300mL锥形瓶中，加100 ml盐酸和金刚砂，用表面皿覆盖，或将锥形瓶与回流冷凝器连接，在火焰上或电热板上加热混合物至微沸，保持lh，每10min旋转摇动一次，防止产物附着于容器壁上。
在环境温度下冷却，加一定量的滤器辅料，防止过滤时脂肪丢失，在布氏漏斗中通过湿润的无脂的双层滤纸抽吸过滤，残渣用冷水洗涤至中性。
注：如果在滤液表面出现油或脂，则可能得出错误结果，—种可能的解决办法是减少测定试料或提高酸的浓度重复进行水解。
小心取出滤器并将含有残渣的双层滤纸放入一个提取套管中，在80℃电热真空箱中于真空条件下干燥60min，从电热真空箱中取出套管并用一小块脱脂棉覆盖。
5、提取
（1）将一些金刚砂转移至一干燥烧瓶，称量（m5），准确至1mg。如果随后将要对脂肪定性，则使用玻璃细珠取代金刚砂。将烧瓶与提取器连接，收集石油醚提取物。
将套管置于提取器中，用石油醚提取6h。如果使用索氏提取器，则调节加
热装置使每小时至少循环10次，如果使用一个相当设备，则控制回流速度每秒至少5滴（约10 mL/min ）。
（2）蒸馏除去溶剂，直至烧瓶中几无溶剂，加2mL 丙酮至烧瓶中，转动烧瓶并在加热装置上缓慢加温以除去丙酮，吹去痕量丙酮。残渣在103℃干燥箱内干燥（10±0.1）min ，在干燥器中冷却，称量（m6），准确至0.1mg 。也可采取：
蒸馏除去溶剂，烧瓶中残渣在80℃电热真空箱中干燥1.5h ，在干燥器中冷却，称量（m6），准确至0.1mg 。
七、计算
1、预先提取测定法 试样的脂肪含量W1，按下式计算，以g/kg 表示： ()()f m m m m m m m m W ????????+=034560121--10
式中，m 0为在步骤2中称取的试样质量，g ；m 1为在步骤2中装有金刚砂的烧瓶的质量，g ；m 2为在步骤2中带有金刚砂的烧瓶和干燥的石油醚提取物残渣的质量，g ；m 3为在步骤2中获得的干燥提取残渣的质量，g ；m 4为试料[步骤3]的质量，g ；m 5为在步骤5中使用的盛有金刚砂的烧瓶的质量，g ；m 6为在步骤5中盛有金刚砂的烧瓶和获得的干燥石油醚提取残渣的质量，g ；f 为校正因子单位，g/kg （f ＝1000g/kg ）。
结果表示准确至lg/kg 。
2、无预先提取的测定法 试样的脂肪含量W2按下式计算，以g/kg 表示： ()
f m m m W ?=4562-
式中变量符号意义同上。结果表示准确至lg/kg 。
八、重复性
用同一方法对相同的实验材料，在同一实验室内，由同一操作人员使用同一台设备，在短时间内获得的两个独立的测定结果之间的绝对差值，超过表7-7中列出的重复性限r 的情况不大于5%。
表7-7 测定结果的重复性限（r ）和再现性限（R ）
样品 r （g/kg ） R （g/kg ）
A 类（不需水解）
2.5 7.7a B 类（需要水解） 5.0 12.0b
A 椰子粉除外。
B 鱼粉和肉粉除外。
九、注意事项
（1）乙醚易挥发，易燃、易爆，整个操作过程注意安全，特别是烘干含有醚的样品时，开始要打开烘箱门防止醚积累过多发生爆炸。整个操作过程室内不能有明火。
（2）样品必须烘干，醚应无水状态，否则，影响测定和准确性。
（3）烘干时防止脂肪氧化而不溶于醚中，最好在惰性气体条件下烘干。
（4）整个操作过程应戴橡胶或白纱手套进行。
（5）估计样本中含脂肪20%以上时浸提时间需16h ；5%～20%需12h ；5%以下时需8h 。
十、其他说明
说明1：索氏测定脂肪法与饲料中其它概略营养成分测定法同样，准确度亦不够高。植物种子的乙醚提取物中真脂肪有86%，青饲料的乙醚提取物中真脂肪量极少，大部分为叶绿素。
说明2：鲜肉类（猪肉、鸡肉、鱼肉等）中脂肪测定前须先烘去肉中水分。具体方法如下：称取磨碎鲜肉样约10 g 放在铺有少量石棉的滤纸筒或滤纸上，用小棒混匀，将滤纸筒或滤纸移入瓷盘或铝匣中，在100-102℃烘箱内烘6小时（烘去鲜肉中水分），取出瓷盘或铝匣，冷却后，用棉线包扎滤纸包，以下步骤按照饲料中脂肪测定法进行。
说明3：估计样本中所含脂肪在20%以上时，浸提时间需16小时；5-20%时，需12小时，5%以下时则需8小时。
说明4：样本中粗脂肪量亦可根据样本滤纸包经乙醚提取前后的失重来计算。方法如下：
100%样本重（g）重（g）样本滤纸包乙醚提取后-重（g）样本滤纸包乙醚提取前量样本中粗脂肪含?=
样本滤纸包经乙醚提取后放入一个干净的已知重的称重瓶中，在100-105℃
烘箱烘1-2小时，在干燥器中冷却，称重，直至恒重。经乙醚提取后的滤纸包在称重时容易吸收空气中水分，影响包重，因此操作宜迅速。
饲料中粗蛋白的测定方法 本标准参照采用ISO 5983—1979《动物饲料—氮含量的测定和粗蛋白含量计算》1.1 主要内容与适用范围 本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。 1.2 引用标准 GB 601 化学试剂滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备 1.3 原理 凯氏法测定试样中的含氮量，即在被催化剂的作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮量转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，乘以换算系数 6.25，计算出粗蛋白含量。 1.4 试剂 1.4.1 硫酸（GB 625）:化学纯，含量为98%，无氮。 1.4.2 混合催化剂：0.4g 五水硫酸铜，6g 硫酸钾或无水硫酸钠，均为化学纯， 磨碎混匀。 1.4.3 氢氧化钠（GB 629）:化学纯，40%水溶液（M/V）。 1.4.4 硼酸（GB 628）:化学纯，2%水溶液（M/V）。 1.4.5 混合指示剂:甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体 积混合，在阴凉处保存期为三个月。 1.4.6 盐酸标准溶液:邻苯二甲酸氢钾法标定。 147 O.lmol/盐酸（HCL）标准溶液：8.3ml盐酸（GB 622）,分析纯，注入1000ml 蒸馏水中。
1.4.8 0.2 mol/盐酸（HCL）标准溶液：1.67ml盐酸（GB 622），分析纯，注入 1000ml 蒸馏水中。 149 蔗糖（HG 3—1001）:分析纯。 1.4.10 硫酸铵（GB 1396）：分析纯，干燥。 1.4.11硼酸吸收液：1%硼酸水溶液1000ml,加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10ml, 0.1%甲基红乙醇溶液7ml，4%氢氧化钠水溶液0.5ml，混合，置阴凉处保存 期为一个月（全自动程序用）。 1.5 仪器设备 1.5.1 实验室用样品粉碎机或研钵。 1.5.2 分析筛：孔径0.42mm（40目）。 1.5.3 分析天平：感量0.0001g。 1.5.4 消煮炉或电炉。 1.5.5 滴定管：酸式（A 级），10、25mL。 1.5.6 凯氏烧瓶：250mL。 1.5.7 凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式。 1.5.8 锥形瓶：150、250mL。 1.5.9 容量瓶：100mL。 1.5.10 消煮管：250 mL。 1.5.11 定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动、全自动蛋白测定仪。 1.6 试样的选取和制备 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。 1.7 分析步骤 1.7.1 试样的消煮 称取试样0.5g~1g（含氮量5mg~80mg）准确至0.0002g,无损失地放入凯氏烧
饲料中粗蛋白测定方法 Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】
饲料中粗蛋白测定方法 1、原理 凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。 2、试剂 2.1硫酸（GB625）：化学纯，含量为98％，无氮。 2.2混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水（GB665），6g硫酸钾（HG3—920）或硫酸钠（HG3—908），均为化学纯，磨碎混匀。 2.3氢氧化钠（GB629）：化学纯，40％水溶液（m/V）。 2.4硼酸（GB628）：化学纯，2％水溶液（m/V）。 2.5混合指示剂：甲基红（HG3—958）0.1％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG3—1220）0.5％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。 2.6盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB601制备。 2.6.1盐酸标准溶液：c（HCl）=0.1mol/L。8.3mL盐酸（GB622，分析纯），注入1000mL蒸馏水中。 2.6.2盐酸标准溶液：c（HCl）=0.02mol/L。1.67mL盐酸（GB622，分析纯），注入1000mL蒸馏水中。 2.7蔗糖（HG3—1001）：分析纯。 2.8硫酸铵（GB1396）：分析纯，干燥。
2.9硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1000mL，加入0.1％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。 3、仪器设备 3.1实验室用样品粉碎机或研钵。 3.2分样筛：孔径0.45mm（40目）。 3.3分析天平：感量0.0001g。 3.4消煮炉或电炉。 3.5滴定管：酸式，10、25mL。 3.6凯氏烧瓶：250mL。 3.7凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。 3.8锥形瓶：150、250mL。 3.9容量瓶：100mL。 3.10消煮管：250mL。 3.11定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动。 4、试样的选取和制备 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。 5分析步骤 5.1.1试样的消煮 称取试样0.5～1g（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，放入凯氏烧瓶中，加入6.4g混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻
饲料中脂肪的作用及分类 一、能量在饲料中的作用 维持生存 生长发育 劳役 繁殖 产肉、蛋、奶、毛等 脂肪——最有效的能量来源 二、基本供能物质: 蛋白质、碳水化合物和脂肪含能比较 1kg蛋白质4.7Mcal 代谢能 1kg碳水化合物4.3Mcal 代谢能 1kg脂肪8.8Mcal 代谢能 脂肪含能是蛋白质或碳水化合物的2.25倍 三、脂肪的额外能量效应 饲粮添加一定水平的油脂替代等能值的碳水化合物和蛋白质，能提高饲粮代谢能，使消化过程中能量消耗减少，热增耗降低，使饲粮的净能增加，当植物油和动物脂肪同时添加时效果更加明显，这种效应称为脂肪的额外能量效应或脂肪的增效作用。 脂肪额外能量效应机制： 第一，饱和脂肪和不饱和脂肪间存在协同作用，不饱和脂肪酸键能高于饱和脂肪酸，促进饱和脂肪酸分解代谢。 第二，脂肪能适当延长食糜在消化道的时间，有助于其中的营养素更好地被消化吸收。另外，因脂肪的抗饥饿作用使鸡更安静，休息时间更长，用于活动的维持需要减少，用于生产的净能增加。 第三，脂肪酸可直接沉积在体脂内，减少由饲粮碳水化合物合成体脂的能量消耗。 四、脂肪的其他作用 除简单脂类参与体组织的构成外，大多数脂类，特别是磷脂和糖脂是细胞膜的重要组成成分。 促进碳水化合物和蛋白质在小肠的吸收。
是脂溶性维生素A、D、E、K的溶剂，促进维生素的吸收。 形成新组织和修补旧组织不可缺少的物质。类脂中的固醇、磷脂等广泛地存在于机体内的器官、组织细胞中。 合成维生素的原料，如维生素D2和D3。 提供必需脂肪酸。 构成脑组织的成分。 降低饲料加工过程中的粉尘，减少污染。 五、脂肪对饲料品质的不利影响 为颗粒饲料的制粒带来了困难，尤其是动物性油脂需先液化后再喷到饲料上，而且量一大很难制粒，加大了生产颗粒的劳动量和难度，还增加了生产成本。 引起鸡的消化不良和下痢。如消化吸收不良，则引起拉稀，不但不促进生长，反而停止生长，饲料转化率降低。 降低胴体品质，在饲料中加入脂肪后，如代谢转化不当，会造成大量的脂肪堆积。 油脂的酸败，油脂长期在空气或微生物的作用下，可使其变性，产生有害物质，酸败的油脂是有害的，过量食入会出现缺硒或维生素E类似的症状。 酸败的饲料营养价值下降，维生素遭到破坏，肠道微生物发生变化，引起采食量下降和拉稀。 六、常用的主要脂肪源 植物性油脂：不饱和脂肪酸的含量高，熔点低，磷酯多，容易形成乳化微粒，消化率高，但是价格高。 动物性油脂：饱和脂肪酸含量高，磷酯少，熔点高，不容易形成乳化微粒，消化率低，价格低。 混合性油脂：吸收率中等，能值低，品质不可控，价格中等。 [NextPage] 饲料中脂肪的消化与吸收 一、脂肪的消化吸收过程 ※乳糜微粒的形成是脂肪吸收利用的一个重要环节 乳化剂或表面活性剂对脂肪吸收之所以重要，是由于脂肪吸收的一个重要环节在于乳糜微粒的形成。脂肪必须在生理环境下有效地被转化成乳糜微粒才能被有效地吸收。如下图所示：
饲料中粗纤维含量的测定过滤法 Feeding stuffs-Determination of fiber content-Method with intermediate filtration 1 范围 本标准规定了粗纤维含量测定的过滤法，描述了手工操作和半自动操作的测定步骤。。 本方法适用于粗纤维含量大于10g/kg的饲料。 注：对粗纤维含量等于或小于10g/kg的饲料，可用ISO6541［7］描述的方法测定。 本标准还适用于谷物和豆类植物。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法（neq ISO3696:1987） GB/T 20195 动物饲料试样的制备（ISO6498:1998，IDT） GB/T 14699.1 饲料采样（ISO 6497:2002，IDT） 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 粗纤维含量 crude fiber content 在样品按本标准规定的分析步骤用酸和碱消煮后所获得的干燥残渣灰化所丢失的质量除以试样的质量。 注：粗纤维含量以克每千克表示，也可用质量分数（%）表示。 4 原理 用固定量的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用醚、丙酮除去醚溶物，经高温灼烧和扣除矿物质的量，所余量称为粗纤维。（试样用沸腾的稀释硫酸处理，过滤分离残渣，洗涤，然后用沸腾的氢氧化钾溶液处理，过滤分离残渣，洗涤，干燥，称量，然后灰化。因灰化而失去的质量相当于试料中粗纤维质量。）它不是一个确切的化学实体，只是在公认强制规定的条件下，测出的概略养分。其中以纤维为主，还有少量半纤维和木质素。 5 试剂和材料 除非另有规定，只用分析纯试剂。 5.1水至少应为GB/T6682规定的三级水。
饲料中粗蛋白的测定 一、实验目的 通过饲料样品中粗蛋白的测定，掌握饲料粗蛋白质含量的测定方法。 二、适用范围 本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。 三、实验原理 凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用浓硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。 四、试剂 （1）硫酸：化学纯，含量为98%，无氮。 （2）混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水；6g硫酸钾或硫酸钠，均为化学纯，磨碎混匀。 （3）氢氧化钠：化学纯，40%水溶液（m/V）。 （4）硼酸：化学纯，2%水溶液（m/V）。 （5）混合指标剂：甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为3个月。 （6）盐酸标准溶液：基准无水碳酸钠法标定； ①0.1mol/L盐酸标准溶液：8.3mL盐酸注入1000ml蒸馏水中。 ②0.02mol/L盐酸标准溶液： 1.67mL盐酸注入1000ml蒸馏水中。 （7）蔗糖：分析纯。 （8）硫酸铵：分析纯，干燥。 （9）硼酸吸收液：1%硼酸水溶液1000mL，加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1%甲基红乙醇溶液7mL，4%氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为1个月（全自动程序用）。 五、仪器设备
（1）实验室用样品粉碎机或研钵。 （2）分样筛：孔径0.45mm（40目）。 （3）分析天平：感量0.0001g。 （4）消煮炉或电炉。 （5）滴定管：酸式，10、25mL。 （6）凯氏烧瓶：250mL。 （7）凯氏蒸馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸汽蒸馏式。 （8）锥形瓶：150、250mL。 （9）容量瓶：100mL。 （10）消煮管：250mL。 （11）定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动、全自动蛋白质测定仪。六、分析步骤 试样的选取和制备: 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。 （1）仲裁法 ①试样的消煮 称取试样0.5～1g（含氮量5～80mg）准确至0.0002g，放入凯氏烧瓶中，加入6.4g混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力（360～410℃）直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少2h。 ②氨的蒸馏 A. 常量蒸馏法 将试样消煮液冷却，加入60～100ml蒸馏水，摇匀，冷却。 将蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有25mL硼酸吸收液和2滴混合指示剂的锥形瓶内。然后小心地向凯氏烧瓶中加入50mL氢氧化钠溶液，轻轻摇动凯氏烧瓶，使溶液混匀后再加热蒸馏，直至流出液体体积为100mL。降下锥形瓶，使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏1～2min，并用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流
粗蛋白测定方法一凯式定氮法 粗蛋白crude protein ；crude matter (DM)食品、饲料中一种蛋白质含量 的度量。不仅包括蛋白质这一物质，它涵盖的范围更广，包括含氮的全部物质，及真蛋白质和含氮物(氮化物)。换句话说，粗蛋白是食品、饲料中含氮化合物的总称，食物中以大豆的粗蛋白含量最高，肉类次之。所以说，粗蛋白是一种既包括真蛋白又包括非蛋白的含氮化合物，后者又可能包括游离氨基酸、尿素、硝酸盐和氨等。然而，不同蛋白质的氨基酸组成不同，其氮含量不同，总氮量换算成蛋白质的系数也不同。总之，粗蛋白是食品、饲料中一种蛋白质含量的度量。我们可以通过粗蛋白测定仪即凯氏定氮仪来测量粗蛋白的含量，测量步骤如：蛋白质含氮量约为16% (这已通过多次试验得出)，再用凯氏法测 出总氮量，再乘以就可求得粗蛋白的含量。 一、实验原理 蛋白质是由碳、氢、氧、氮及少量硫元素组成。这些元素在蛋白质中含量 都有一定比例关系，其中含碳50?55%、氢6?8%、氧20?23%、氮15?17% 和硫?％。此外在某些蛋白质中还含有微量的磷、铁、锌、铜和钼等元素。 由于氮元素是蛋白质区别于糖和脂肪的特征，而且绝大多数蛋白质的氮元素含量相当接近，一般恒定在15?17%，平均值为16%左右，因此在蛋白质的定量分析中，每测得1克氮就相当于克蛋白质。所以只要测定出生物样品中的含氮量，再乘以，就可以计算出样品中的蛋白质含量。含氮有机物与浓硫酸共热，被氧化成二氧化碳和水，而氮则转变成氨，氮进一步与硫酸作用生成硫酸铵。 由大分子分解成小分子的过程通常称为”肖化”为了加速消化，通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高消化液的沸点(290C-400C )，加入硫酸铜作为催化剂，过氧化氢作为氧化剂，以促进反应的进行。反应(1)(2)在凯氏烧瓶内完成，反应(3) 在凯氏蒸馏装置中进行，其特点是将蒸汽发生器、蒸馏器及冷凝器三个部分融为一体。由于蒸汽发生器体积小，节省能源，本仪器使用方便，效果良好。 硫酸铵与浓碱作用可游离出氨，借水蒸气将产生的氨蒸馏到一定浓度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨后使溶液中的度降低，然后用标准无机酸滴定，直至恢 复溶液中原来H+浓度为止，最后根据所用标准酸的量计算出待测物中总氮量。 二、仪器和试剂
前言 随着养猪业的不断发展，生产规模的不断扩大，仔猪早期断奶技术已经成为养猪生产的重要环节。早期断奶可以提高母猪的生产性能及饲养母猪的经济效益，减少母猪向仔猪的疾病传播机率（切断仔猪的最初疾病感染源），从而有利于仔猪的成活及生长，提高栏舍的利用效率。但仔猪早期断奶时易受心理、环境及营养应激的影响，生产中最直接的表现就是仔猪食欲减退、采食量下降、生长缓慢甚至停滞等。由于仔猪的肠道发育不完善，消化酶分泌不足、活性低，对饲料养分的消化吸收差，最终导致仔猪早期断奶后能量摄入不足，所以营养学家一直推荐对仔猪使用高能量的平衡日粮。 1 仔猪利用脂肪的效果 近年来，许多学者从脂肪添加的类型、添加量以及仔猪不同断奶日龄、断奶后不同时间的日粮中添加脂肪的应用效果进行了研究，其中多数研究认为日粮中添加脂肪可以提高断奶2周后仔猪的生产性能，但2周内的效果不明显。表1 显示的是近几年来饲料中添加脂肪对仔猪增重效果的影响。 1.1 不同类型脂肪的添加效果 许多研究证明，猪对动物油的利用率不如植物油高，断奶后2周的仔猪对植物性脂肪的消化率，例如大豆油、玉米油、棕榈油、椰子油或是这些油脂的混合物，都可以获得较好的效果。Cera等（1988）发现，玉米油比猪油或牛油更易消化，但猪在断奶后1～4周对不同来源的脂肪消化能力差异不大。在各种脂肪中，猪对牛油的消化率比植物油低，对猪的生产性能的改善也差。研究表明，断奶仔猪对玉米油的消化率比牛油、猪油、或牛油和猪油的混合物高13%。前苏联的很多研究证明，猪对动物性的脂肪消化率为80%～90%，而对植物性脂肪的消化率则为90%。 根据不同脂肪对仔猪饲料报酬、增重和血液尿素氮的影响，应按下例顺序选择脂肪种类：稳定化猪脂>椰子油>豆油>玉米油>猪油>牛油。 1.2 仔猪断奶后时间和断奶日龄对脂肪利用效果的影响 早期断奶后2周内的仔猪对脂肪的消化率较差。随着日龄的增加，消化道发育趋于成熟、完善，对脂肪的利用率逐渐增加，同时动物脂肪和植物油脂的消化率差别也越来越小。Dove和Cera等证实，在早期断奶仔猪日粮中使用6%的玉米油，并没提高断奶后头2周的生产性能，却显著提高第3、4周及其以后的仔猪生长速度。Tokach等（1989）进行试验研究在高营养浓度日粮中添加脂肪的适宜水平，试验采用384头21日龄断奶仔猪，在第一阶段分别饲喂含0%、3%、6%、9%的油脂。结果表明，提高日粮中脂肪水平对断奶后0～2周龄仔猪平均日增重、日采食量和饲料效率无显著影响。 另外，断奶时的日龄也对仔猪利用脂肪的效果有影响。据石旭东报道，对于35d断奶的仔猪，28日龄开始补饲添加3%猪油的日粮至49日龄，平均日增重提高了8.39%。因此，仔猪断奶日龄越大，对脂肪利用的效果差异越小，这可能与仔猪不同断奶日龄消化道损伤的程度不同有关。 目前，脂肪在断奶仔猪日粮中应用能够得到多数学者认同的结论是，仔猪断奶后1～2周内对脂肪的利用效果较差，2周后利用率显著提高。对于断奶初添加油脂是否会诱导脂肪酶的发育，尚存有争议，如何尽快提高断奶后仔猪体内脂肪酶的活性，是影响脂肪利用效果的关键，值得进一步深入研究。
粗脂肪测定方法 1、简述：本标准适用于各种单一、混合饲料和预混料中粗脂肪的测定方法。 2、方法原理：索氏脂肪提取器中用乙醚提取试样，称提取物的重量，除脂肪外还有有机酸，磷脂、脂溶性维生素，叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。 3、试剂与仪器 2) 无水乙醚（AR） 3) 索氏脂肪提取器（带球形冷凝管）：100或150ml。 4) 索氏脂肪提取仪。 4、使用索氏脂肪提取器测定： 索氏提取器应干燥无水。抽提瓶（内有沸石数粒）在105±2℃烘箱中烘干60min，干燥器中冷却30min，称重，再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于0.0008g为恒重。（可直接烘1.5-2h，冷却后将抽提瓶称重编号） 称取试样1-5g，于滤纸筒中，或用滤纸包好，放入105℃烘箱中，烘干120min（或称测水分后的干试样，折算成风干样重），滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度，滤纸包长度应以可全部浸泡于乙醚中为准。将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚60--100ml，在60--75℃的水浴（用蒸馏水）上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数为每小时约10次，共回流约50次（含油高的试样约70次）
或检查抽提管流出的乙醚挥发后不留下油迹为抽提终点。（将试样在无水乙醚中浸泡三小时，效果更佳） 取出试样，仍用原提取器回收乙醚直到抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去残余乙醚，擦净瓶外壁。将抽提瓶放入105+-2℃烘箱中烘干120min，干燥器中冷却30min称重，再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于0.001g这恒重。（延长烘干时间至3h，称重一次即可） 5、计算： 粗脂肪（%）= 式中：m--风干试样重量，g m1--已恒重的抽提瓶重量，g； m2--已恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g. 6、重复性 每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。 粗脂肪含量在10%以上（含10%）允许相对偏差为3%。 粗脂肪含量在10%以下时，允许相对偏差为5%。 （学习的目的是增长知识，提高能力，相信一分耕耘一分收获，努力 就一定可以获得应有的回报）
饲料粗蛋白测定的测定方法 Method for the determination of crude protein in feedstuffs 本标准参照采用ISO5983-1979《动物饲料-氮含量的测定和粗蛋白含量计算》。 1 主题内容与适用范围 本标准规定了饲料中粗蛋白含量的测定方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。 2 引用标准 GB 601 化学试剂滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备 3 原理 凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收液吸收后，再用酸滴定。测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白的含量。 4 试剂 4.1硫酸（GB625）:化学纯，含量为98%，无氮。 4.2混合催化剂 0.4g 硫酸铜，5个结晶水（GB665），6g 硫酸钾（HG3-920）或硫酸钠（HG3-908），均为化学纯，磨碎混匀。 4.3 氢氧化钠（GB629）：化学纯，40%水溶液（M/V）。 4.4硼酸（GB628），化学纯，2%水溶液（M/V）。 4.5混合指示剂溶液 甲基红（HG3-958）0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿（HG3-1220）0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。 4.6盐酸标准溶液，c(HCl)=0.1mol/L、0.02mol/L 配制如下： 移取8.3mL 盐酸(分析纯)，于1000mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。此溶液为c(HCl)=0.1mol/L。 移取1.67mL 盐酸(分析纯)，于1000mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。此溶液为c(HCl)=0.02mol/L。 4.7蔗糖，分析纯。 4.8硫酸铵，分析纯，干燥。 4.9硼酸吸收液 1%硼酸水溶液1000mL，加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL，0.1% 甲基红乙醇溶液7mL，4%氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月(全自动程序用)。
饲料中酸性洗涤纤维的测定 1 范围 本标准规定了饲料中饲料中酸性洗涤纤维(ADF) 的测定方法。 本标准适用于各种植物性单一饲料。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 601 化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T 6682-1992 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料采样 GB/T 20195 动物饲料试样的制备 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 酸性洗涤纤维（ADF）acid detergent fiber 用酸性洗涤剂去除饲料中的脂肪、淀粉、蛋白质和糖类等成分后，残留不溶解物质的总称，包括纤维素、木质素及少量的硅酸盐等。 4 原理 植物性经酸性洗涤剂浸煮，再用水、丙酮洗涤后不溶解的残渣为酸性洗涤纤维，包括纤维素、木质素和少量硅酸盐等。 5 仪器和设备 5.1 样品粉碎机。 5.2 分析筛：孔径为1mm。 5.3 分析天平：感量为0.0001g。 5.4 电热式恒温烘箱。 5.5 可调温电路或电热板。 5.6 回流消煮装置：配冷凝球600mL高型烧杯或配冷凝管的锥形瓶。 5.7 30mL烧结玻璃过滤坩埚（G2）。 5.8 干燥器：无水氯化钙或变色硅胶为干燥剂。 5.9 抽滤装置：烧结玻璃过滤坩埚、抽滤瓶和真空泵组成。 5.10 纤维测定仪：符合本标准测定原理。 6 试剂和溶液 本标准所用水，一律指GB/T 6682-1992中的三级水，化学试剂为分析纯。 6.1 硫酸。 6.2 丙酮。 6.3 十六烷基三甲基溴化铵。 6.4 1.00mol/L 硫酸（1/2 H2SO4）溶液：按GB/T 601配制并标定。 6.5 酸性洗涤剂（2%十六烷基三甲基溴化铵溶液）：称取20g CTAB溶解于
饲料中粗蛋白测定方法 YKK standardization office【 YKK5AB- YKK08- YKK2C- YKK18】
饲料中粗蛋白测定方法 1、原理 凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数，计算出粗蛋白含量。 2、试剂 硫酸（GB625）：化学纯，含量为98％，无氮。 混合催化剂：硫酸铜，5个结晶水（GB665），6g硫酸钾（HG3—920）或硫酸钠（HG3—908），均为化学纯，磨碎混匀。 氢氧化钠（GB629）：化学纯，40％水溶液（m/V）。 硼酸（GB628）：化学纯，2％水溶液（m/V）。 混合指示剂：甲基红（HG3—958）％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG3—1220）％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。 盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按GB601制备。 2.6.1盐酸标准溶液：c（HCl）=L。盐酸（GB622，分析纯），注入1000mL蒸馏水中。 盐酸标准溶液：c（HCl）=L。盐酸（GB622，分析纯），注入1000mL蒸馏水中。 蔗糖（HG3—1001）：分析纯。 硫酸铵（GB1396）：分析纯，干燥。
硼酸吸收液：1％硼酸水溶液1000mL，加入％溴甲酚绿乙醇溶液10mL，％甲基红乙醇溶液7mL，4％氢氧化钠水溶液，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。 3、仪器设备 实验室用样品粉碎机或研钵。 分样筛：孔径（40目）。 分析天平：感量。 消煮炉或电炉。 滴定管：酸式，10、25mL。 凯氏烧瓶：250mL。 凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。 锥形瓶：150、250mL。 容量瓶：100mL。 消煮管：250mL。 定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动。 4、试样的选取和制备 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g，粉碎后全部通过40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。 5分析步骤 试样的消煮 称取试样～1g（含氮量5～80mg）准确至，放入凯氏烧瓶中，加入混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻璃
实验二饲料粗蛋白的测定 一、实验目的 通过饲料样品中粗蛋白质的测定，让学生了解了解凯氏定氮法测定的基本原理，掌握半微量凯氏定氮法测定饲料粗蛋白质的方法，掌握粗蛋白质含量的计算方法。 二、实验原理 各种饲料的有机物质在还原性催化剂(如CuSO4，K2SO4或Na2SO4或Se粉)的帮助下，用浓硫酸进行消化作用，使蛋白质和其它有机态氮（在一定处理下也包括硝酸态氨）都转变成NH4+并与H2SO4化合成（NH4）2SO4，而非含氮物质，则以CO2 ↑，H2O↑，SO2↑状态逸出。消化液在浓碱的作用下进行蒸馏，释放出的铵态氮，用硼酸溶液吸收之并与之结合成为四硼酸铵，然后以甲基红溴甲酚绿作指示剂，用HCl标准溶液（0.1mol/L）滴定，求出氮的含量，根据不同的饲料再乘以一定的系数（通常用6.25系数计算），即为粗蛋白质的含量。 其主要化学反应如下： 1、2NH4（CH2）2COOH+13H2SO4→（NH4）2SO4+6CO2+12SO2+16H2（丙氨酸） 2、（NH4）2SO4 +2NaOH→2NH 3+3H2O+2Na2SO4 3、4H3BO3+ NH 3→NH4HB4O7+5H2O 4、NH4HB4O7+HCl+5H2O→NH4C1+4H3BO3 本法不能区别蛋白氮和非蛋白氮，只能部分回收硝酸盐和亚硝酸盐等含氮化合物。在测定结果中除蛋白质外，还有氨基酸、酰胺，铵盐和部分硝酸盐、亚硝酸盐等，故以粗蛋白质表示之。 三、实验设备 1、实验室用样品粉碎机或研钵； 2、分析筛：孔径0.45mm(40目)； 3、分析天平：感量0.0001g； 4、消煮炉或电炉； 5、滴定管：酸式，25或50ml； 6、凯式烧瓶：100或500m1； 7、凯氏蔗馏装置：常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式； 8、锥形瓶，150或250m1； 9、容量瓶：100ml。 三、实验内容
第18卷第1期上海海洋大学学报Vol.18,No.1 2009年1月JOURNAL OF SHANGHA IOCE AN UN I V ERSI TY Jan.,2009 文章编号:1004-7271(2009)01-0035-07 饲料脂肪水平对奥尼罗非鱼幼鱼生长 和血浆生化指标的影响 甘 晖1,2,李坚明2,3,冯广朋2,4,龚竹林1,黄 凯5,李家乐2 (1.广西水产畜牧学校,广西南宁 530021; 2.上海海洋大学水产与生命学院,上海 201306; 3.广西水产技术推广总站,广西南宁 530022; 4.中国水产科学研究院东海水产研究所,上海 200090; 5.广西大学动物科学技术学院,广西南宁 530004) 摘 要:研究了奥尼罗非鱼幼鱼的生长及血浆生化指标与不同脂肪含量饲料间的关系。饲料脂肪水平为 0%、2%、4%、6%、8%5个梯度组。结果表明,5组不同脂肪水平的饲料对奥尼罗非鱼幼鱼的成活率无显著性影响。随着饲料脂肪水平升高,奥尼罗非鱼幼鱼的增重率、肥满度和摄食量先上升后下降,而饲料系数则先下降后上升;肝脏重量、肝体比、肝脏与肌肉脂肪含量等4个指标均呈现逐渐升高的趋势。饲料脂肪水平与奥尼罗非鱼幼鱼血浆中的胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白呈负相关,与高密度脂蛋白呈正相关。随着饲料中脂肪含量的增加,试验鱼血浆中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、淀粉酶、碱性磷酸酶等活性逐渐升高。本研究条件下饲料脂肪水平超过6%容易导致奥尼罗非鱼幼鱼形成脂肪肝,对其摄食、体形特征、生长指标、相关组织脂肪含量以及血清中酶的活性等都有明显影响。 关键词:罗非鱼;饲料;脂肪水平;生化指标;生长 中图分类号:S963.1 文献标识码:A Effects of di fferent li pi d levels on growth and hae matologi cal bi oche m istry i n juven ile til api a (O reoch ro m is n iloticus×O reoch rom is au reus) G AN Hui1,2,L I J ian2m in2,3,FENG Guang2peng2,4,G ONG Zhu2lin1,HUANG Kai5,L I J ia2le2 (1.Guangxi A quaculture and A ni m al Husbandry School,N anning 530021,China; 2.College of Fisheries and L ife,Shanghai O cean U niversity,Shanghai 201306,China; 3.Guangxi Fisheries Technology Extension Center,N anning 530022,China; 4.East China Sea Fisheries Research Institute,Chinese A cade m y of Fishery Sciences,Shanghai 200090,China; 5.College of A ni m al Science and Technology,Guangxi U niversity,N anning 530004,China) Abstract:Juvenile tilap ia were fed by five diets f or70days t o study the relati onshi p bet w een diet li p id levels and fatty liver disease.L i p id content levels included0%,2%,4%,6%,8%.The results showed that five different diets didn’t affect survival rate of juvenile tilap ia significantly.Fish fed with6%and8%li p id levels 收稿日期:2008203215 基金项目:广西壮族自治区科技攻关项目(0537008-2E) 作者简介:甘 晖(1976-),女,广西贵港人,硕士,讲师,主要从事水产养殖病害方面的研究。 通讯作者:黄 凯,E2mail:hkai110@https://www.doczj.com/doc/5d11454550.html,
粗蛋白测定方法—凯式定氮法 粗蛋白crude protein；crude matter（DM）食品、饲料中一种蛋白质含量的度量。不仅包括蛋白质这一物质，它涵盖的范围更广，包括含氮的全部物质，及真蛋白质和含氮物（氮化物）。换句话说，粗蛋白是食品、饲料中含氮化合物的总称，食物中以大豆的粗蛋白含量最高，肉类次之。所以说，粗蛋白是一种既包括真蛋白又包括非蛋白的含氮化合物，后者又可能包括游离氨基酸、尿素、硝酸盐和氨等。然而，不同蛋白质的氨基酸组成不同，其氮含量不同，总氮量换算成蛋白质的系数也不同。总之，粗蛋白是食品、饲料中一种蛋白质含量的度量。我们可以通过粗蛋白测定仪即凯氏定氮仪来测量粗蛋白的含量，测量步骤如：蛋白质含氮量约为16%（这已通过多次试验得出），再用凯氏法测出总氮量，再乘以就可求得粗蛋白的含量。 一、实验原理 蛋白质是由碳、氢、氧、氮及少量硫元素组成。这些元素在蛋白质中含量都有一定比例关系，其中含碳50～55%、氢6～8%、氧20～23%、氮15～17%和硫～%。此外在某些蛋白质中还含有微量的磷、铁、锌、铜和钼等元素。 由于氮元素是蛋白质区别于糖和脂肪的特征，而且绝大多数蛋白质的氮元素含量相当接近，一般恒定在15～17%，平均值为16%左右，因此在蛋白质的定量分析中，每测得1克氮就相当于克蛋白质。所以只要测定出生物样品中的含氮量，再乘以，就可以计算出样品中的蛋白质含量。含氮有机物与浓硫酸共热，被氧化成二氧化碳和水，而氮则转变成氨，氮进一步与硫酸作用生成硫酸铵。由大分子分解成小分子的过程通常称为”消化”。为了加速消化，通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高消化液的沸点(290℃→400℃)，加入硫酸铜作为催化剂，过氧化氢作为氧化剂，以促进反应的进行。反应(1)(2)在凯氏烧瓶内完成，反应(3)在凯氏蒸馏装置中进行，其特点是将蒸汽发生器、蒸馏器及冷凝器三个部分融为一体。由于蒸汽发生器体积小，节省能源，本仪器使用方便，效果良好。 硫酸铵与浓碱作用可游离出氨，借水蒸气将产生的氨蒸馏到一定浓度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨后使溶液中的H+浓度降低，然后用标准无机酸滴定，直至恢复溶液中原来H+浓度为止，最后根据所用标准酸的量计算出待测物中总氮量。 二、仪器和试剂
饲料中粗蛋白测定方法 1、原理 凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数 6.25，计算出粗蛋白含量。 2、试剂 2.1 硫酸（ GB 625）：化学纯，含量为 98％，无氮。 2.2混合催化剂：0.4g硫酸铜，5个结晶水（GB 665）,6g硫酸钾（HG 3 —920）或硫酸钠（ HG 3—908），均为化学纯，磨碎混匀。 2.3 氢氧化钠（ GB 629）：化学纯， 40％水溶液（ m/V）。 2.4 硼酸（ GB 628）：化学纯， 2％水溶液（ m/V）。 2.5 混合指示剂：甲基红（HG 3—958）0.1％乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3—1220） 0.5％乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存 期为三个月。 2.6 盐酸标准溶液：邻苯二甲酸氢钾法标定，按 GB 601制备。 2.6.1 盐酸标准溶液：c （HCl） =0.1mol/L。8.3mL 盐酸（GB 622,分析纯），注入 1 000mL 蒸馏水中。 2.6.2 盐酸标准溶液：c（HCl）=0.02mol/L。1.67mL 盐酸（GB 622, 分析纯），注入 1 000mL 蒸馏水中。
2.7 蔗糖（ HG 3—1001）：分析纯。 2.8 硫酸铵（ GB 1396）：分析纯,干燥。 2.9硼酸吸收液：1%硼酸水溶液1 OOOmL,加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL， 0.1％甲基红乙醇溶液 7mL， 4％氢氧化钠水溶液 0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月（全自动程序用）。 3、仪器设备 3.1 实验室用样品粉碎机或研钵。 3.2分样筛：孔径0.45mm （40目）。 3.3 分析天平：感量 0.0001g。 3.4 消煮炉或电炉。 3.5 滴定管：酸式， 10、25mL。 3.6 凯氏烧瓶： 250mL。 3.7 凯氏蒸馏装置：半微量水蒸气蒸馏式。 3.8 锥形瓶： 150、250mL。 3.9 容量瓶： 100mL。 3.10 消煮管： 250mL。 3.11 定氮仪：以凯氏原理制造的各类型半自动。 4、试样的选取和制备 选取具有代表性的试样用四分法缩减至200g,粉碎后全部通过 40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。
饲料中粗纤维含量的测定方法 GB／T 6434—94 1 主题内容与适用范围 本标准规定了饲料中粗纤维含量的测定方法。 本标准适用于各种混合饲料、配合饲料、浓缩饲料及单一饲料。 2 引用标准 GB／T 601 化学试剂滴定分析(容量分析)用标准溶液的制备 3 原理 用浓度准确的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醇除去可溶物，经高温灼烧扣除矿物质的量，所余量为粗纤维，它不是一个确切的化学实体，只是在公认强制规定的条件下测出的概略成分，其中以纤维素为主，还有少量半纤维素和木质素。 4 试剂 本方法试剂使用分析纯，水为蒸馏水。标准溶液按GB601制备。 4.1 硫酸(GB 625)溶液0.128±0.005mol／L 氢氧化钠标准溶液标定，GB 601。
4.2 氢氧化钠(GB 629)溶液，0.313±0.005mol／L 邻苯二甲酸氢钾法标定GB 601。 4.3 酸洗石棉HG 3─1062。 4.4 95％乙醇(GB 679)。 4.5 乙醚(HG 3─1002)。 4.6 正辛醇(防泡剂)。 5 仪器设备 5.1 实验室用样品粉碎机。 5.2 分样筛：孔径1mm，(18目)。 5.3 分析天平：感量0.0001g。 5.4 电加热器(电炉)，可调节温度。 5.5 电热恒温箱(烘箱)：可控制温度在130℃。 5.6 高温炉：有高温计可控制温度在500～600℃。 5.7 消煮器：有冷凝球的600mL高型烧杯或有冷凝管的锥形瓶。 5.8 抽滤装置：抽真空装置，吸滤瓶和漏斗。(滤器使用200 目不锈钢网或尼龙滤布)。
5.9 古氏坩埚：30mL，预先加入酸洗石棉悬浮液30mL(内含酸洗石棉0.2～0.3g)再抽干，以石棉厚度均匀，不透光为宜。上下铺两层玻璃纤维有助于过滤。 5.10 干燥器，以氯化钙或变色硅胶为干燥剂。 5.11 粗纤维测定仪器 国内外生产的符合本标准测定原理，且测定结果一致的仪器。 6 试样制备 将样品用四分法缩减至200g，粉碎，全部通过1mm筛，放入密封容器。 7 分析步骤 7.1 仲裁法 称取1～2g试样，准确至0.0002g，用乙醚脱脂，(含脂肪大于10％必须脱脂，含脂肪不大于10％，可 不脱脂)，放入消煮器(5.7)，加浓度准确且已沸腾的硫酸溶液(4.1) 200mL和1滴正辛醇，立即加热，应使 其在2min内沸腾，调整加热器，使溶液保持微沸，且连续微沸 30min，注意保持硫酸浓度不变。试样不应 离开溶液沾到瓶壁上。随后抽滤，残渣用沸蒸馏水洗至中性后抽干。
饲料粗脂肪测定方法 Method for the determination of crude fat feedstuffs 1 主题内容与适用范围 本标准规定了饲料粗脂肪的测定方法。 本标准适用于各种单一、混合、配合饲料和预混料。 2 原理 索氏(Soxhlet)脂肪提取器中用乙醚提取试样，称乙醚提取后的重量，重量之差即为脂肪。除脂肪外还有有机酸，磷脂，脂溶性维生素，叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醚提取物。 3 试剂 3.1无水乙醚（分析纯）。 4 仪器设备 4.1实验室用样品粉碎机或研钵。 4.2 分样筛：孔径0.45nm。 4.3分析天平：感量0.0001g。 4.4电热恒温水浴锅：室温～100℃。 4.5 恒温烘箱：50～200℃。 4.6索氏脂肪提取器（带球形冷凝管）：100或150mL。 4.7索氏脂肪提取仪。 4.8滤纸或滤纸筒：中速，脱脂。 4.9干燥器：用氯化钙（干燥级）或变色硅胶干燥剂。 5 试样的制备 选取有代表性的试样，用四分法经试样缩减至500g，粉碎至40目。再用四分法缩减至200g，于密封容器中保存。 6 分析步骤 使用索氏脂肪提取器测定，索氏提取器（4.6）应干燥无水。 称取试样1～5g（准确至0.0002g），于滤纸筒中，或用滤纸包好，放入105℃烘箱（4.5）中，烘干120min。取出放入干燥器中冷却30min称重（m1）。 将滤纸筒或滤纸包放入提取器中，滤纸筒应高于提取器（4.6）虹吸管的高度，滤纸包长度应以全部浸泡于乙醚（3.1）中为准。将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙醚（3.1）60～100mL，在60～75℃的水浴（用蒸馏水）上加热，使乙醚（3.1）回流，控制乙醚（3.1）回流次数为每小时约10次，共回流约50次（含油高的试样约70次）或检查抽提管流出的乙醚（3.1）挥发后不留下油迹为抽提终点。 取出试样置干燥洁净的瓷托盘中，放置在通风橱，待多余的乙醚挥发完后放入
饲料：能被动物摄取、消化、吸收和利用，可促进动物生长或修补组织、调节动物生理过程的物质。 粗蛋白：用凯氏法测定的氮，除了蛋白质中的氮，还包括其他含氮化合物的氮。在根据含氮量计算蛋白质时，假设所有氮都是以蛋白质形式存在，所有蛋白质均含16%的氮。而实际上这两个假设都不完全成立，因此，这样计算出的蛋白质在营养上称为粗蛋白。 粗饲料：指自然状态下水分在45%以下、饲料干物质中粗纤维含量大于等于18%、能量值低的一类饲料。青绿饲料：主要指天然水分含量等于或高于60%的青绿多汁饲料。主要包括天然牧草、人工栽培牧草、青饲作物、叶菜类、非淀粉质根茎瓜类、水生植物及树叶类等。 青贮饲料：指将新鲜的青饲料切短装入密封容器里，经过微生物发酵作用，制作成的具有特殊芳香气味、营养丰富的多汁饲料。 能量饲料：以干物质计，粗蛋白含量低于20%、粗纤维含量低于18%的一类饲料。类别：谷实类、糠麸类、脱水块根、块茎及其加工副产品、动植物油脂及乳清粉等。作用：在动物饲粮中所占比例最大，一般为50%~70%，对动物主要起着供能作用。 饲料添加剂：（1）狭义的饲料添加剂概念是指各种用于强化畜禽饲料效果和有利于配合饲料生产和贮存的一类非营养性微量成分，如防霉剂、抗氧化剂、增味剂、酶制剂等。（2）广义的饲料添加剂概念是指在天然饲料的加工、调剂、贮存或饲喂过程中，人工加入的各种微量物质的总称。 配合饲料：指按照动物的不同生长阶段、不同生理要求、不同生产用途的营养需要和饲料的营养价值把多种单一饲料，依一定比例、并按照规定的工艺流程均匀混合而生产出的营养价值全面的能满足动物各种实际需求的饲料，也称全价饲料。 浓缩料：由蛋白质饲料、常规矿物质饲料和添加剂预混料组成，通常为全价饲料中除去能量饲料的剩余部分。 饲料学是一门研究饲料的营养、饲料生产、饲料加工、饲料配合、人畜卫生、畜产品品质以及环境保护等的一门学科，同时也是一门涉及农业、工业、食品、医药、机械、内外贸等十多个行业的综合性学科。