细胞生物学实验报告
一、细胞形态观察及其大小测量
1.实验结果及分析
（1）细胞形态观察
图1.1 10X40倍镜下肝细胞图1.2 10X40倍镜下血细胞
图1.3 棉花叶横切（栅栏组织细胞）
（2）细胞大小测量
2.思考题
（1）血细胞分为哪几大类？分别描述你看到的不同血细胞的形态，并阐述其功能。绘图。
血细胞分为红细胞、白细胞和血小板。红细胞：主要的功能是运送氧。白细胞：主要扮演了免疫的角色。当病菌侵入人体时，白细胞能穿过毛细血管壁，集中到病菌入侵部位，将病菌包围，吞噬。血小板：止血过程中起着重要作用。血细胞约占血液容积的45%，包括红细胞、白细胞和血小板。在正常生理情况下，血细胞和血小板有一定的形态结构，并有相对稳定的数量。
红细胞呈双凹圆盘状，中央较薄（1.0μm），周缘较厚（2.0μm），故在血涂片标本中呈中央染色较浅、周缘较深。在扫描电镜下，可清楚地显示红细胞这种形态特点。红细胞的这种形态使它具有较大的表面积（约140μm2），从而能最大限度地适应其功能――携O2和CO2。
白细胞为无色有核的球形细胞，体积比红细胞大，能作变形运动，具有防御和免疫功能。
在血涂片中，血小板常呈多角形，聚集成群。血小板中央部分有着蓝紫色的颗粒，称颗粒区；周边部呈均质浅蓝色，称透明区（hyalomere）。电镜下，血小板的膜表面有糖衣，细胞内无核，但有小管系、线粒体、微丝和微管等细胞器，以及血小板颗粒和糖原颗粒等。
（2）任意选择你所看到的动物细胞和植物细胞各一个，绘图并进行适当标注，测量其大小，并比较动植物细胞大小的差异。
就植物叶片的栅栏组织细胞和红细胞而言，栅栏细胞为长方体形，体积较大，紧密排列成栅栏状；红细胞圆饼状，体积较小，具体数值如实验数值所示
（3）在不同的放大倍数下，所测得的细胞大小一致吗？你认为在哪个放大倍数下测定得比较准确？为什么？
测定结果不相同。
由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
但是由于不同显微镜及附件的放大倍数不同，因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件（特定的物镜、目镜、镜筒长度）进行，而且只能在特定的情况下重复使用，故当更换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。
在40倍物镜下看更准确，因为观察的台尺更清晰，可以更精确的读数。
二、PAS反应显示糖原和其他多糖物质
1.实验结果及分析
图2.1.1土豆切片PAS染色（紫红色颗粒）图2.2.1小鼠肝细胞PAS染色（紫色颗粒）
2.思考题
1、为所观察到的土豆切片和鼠肝切片绘图，标注其多糖的位置，并描述这两种细胞的多糖分布特点。
肝脏切片中，多糖位置表示在靠近核的区域，而土豆细胞中多糖在细胞质液泡中。
2、影响PAS反应染色效果的关键步骤是什么？
1.Camey固定液固定；
2.Schiff染色液染色；
3.对分色的控制。
3、如何制作徒手切片？应注意什么才能得到薄而均匀的切片？
需要快速连续地地切下多片薄片，从中选出较好的切片。
三、叶绿体的分离与荧光观察
1.实验结果及分析
图3.1.1叶绿体自发荧光（图中红色小圆点） 图3.1.2叶肉表皮细胞叶绿体自发荧光（图中红色小圆点）
从图中可以看出，叶绿体主要集中于液泡的周围，呈现红色。
2.思考题
（1）描述你所观察到的实验现象，自发荧光和次生荧光的区别？
有些生物体内的物质受激发光照射后，可直接发出荧光（称为自发荧光），如叶绿素的火红色荧光。有的生物材料本身不发荧光，但它吸收荧光染料后同样也能发出荧光（称为间接荧光），如叶绿体吸附吖啶橙后可发橘红色荧光。
（2）叶绿体分离的原理是什么？操作过程中应注意什么？
通过研磨植物叶片使细胞破损，叶绿体释放到提取液中，再通过等渗介质中差速离心去除杂志，再次离心分离出叶绿体沉淀；注意在低温下迅速提取，注意等渗液溶度，离心速度和时间的把握，避免叶绿体破裂。
四、吖啶橙染色观察口腔上皮荧光
1.实验结果及分析
从图3.1.1中可以看出，菠菜叶片表皮细胞中的叶绿体数目比较少，而在气孔细胞中的叶绿体数目比较多。从图3.1.2中可以看到，口腔上皮细胞的细胞质发出红色荧光，而细胞核发出的荧光是绿
图4.1.1菠菜叶片表皮细胞叶绿体吖啶橙染色（图中红色小圆点为叶绿体，亮黄色纺锤体状的为气孔）
图4.1.2口腔上皮细胞荧光染色（绿
色为细胞核）
色的。
五、植物细胞骨架的光学显微镜观察
1.实验结果及分析
图 5.1.1洋葱内表皮细胞骨架考马斯亮蓝
R250染色（蓝色的丝状结构为细胞骨架）
这个标本中的骨架分布得比较全面，几乎充斥着整个细胞内部。
2.思考题
（1）绘出洋葱细胞的骨架网络分布。
（2）根据M-缓冲液的成分，分析其作用。
咪唑：稳定PH值，缓冲作用；KCL：提供离子，对骨架起聚合作用；MgCl2:提供离子，对骨架起聚合作用。EGTA：螯合Ca离子Ca离子对聚合不利；EDTA：螯合Ca离子Ca离子对聚合不利；巯基乙醇：起还原作用，稳定骨架结构。
（3）通过实验过程，推测你所观察到的细胞骨架属于胞质骨架中的哪种类型，为什么？
推测洋葱的细胞骨架属于中间纤维。
六、PEG法诱导细胞融合
1.实验结果及分析
图6.1.1鸽子血细胞融合 图6.1.2鸽子血细胞融合
从这两幅图中，我们可以看出鸽子血细胞在融合前与融合后的不同，融合后的细胞是好几个聚合在一起的，融合之前是分散开的。
2.思考题
（1）请分析Hanks 溶液的作用是什么（可以从其成分的角度来回答）？
作为平衡盐溶液；终止细胞融合；细胞悬液，使细胞分散 （2）PEG 诱导细胞融合率受哪些因素影响？
PEG 的相对分子质量、PEG 的体积分数、融合时的温度、时间。
七、动物骨髓细胞染色体标本的制备与观察
1.实验结果及分析
图7.1.1小鼠骨髓细胞染色体
从这两幅图中，我们可以看出染色体的形态及分布区域。
2.思考题
在制备小鼠骨髓细胞染色体时为什么要进行预固定？
图7.1.2小鼠骨髓细胞染色体（细胞分裂被阻断在中期，染色体聚集在一起）
因为在之前得到的染色体都处于不同的分裂期，预固定是为了使这些细胞及其染色体都固定在当前所处的时期，便于观察。其实质就是把细胞杀死，使其无法继续进行有丝分裂。
八、酵母活性检测及线粒体原位
1.实验结果及分析 （1）图片
（2）数据
TTC
图8.1.1酵母细胞台盼蓝染色（图中蓝色细胞是死亡的细胞）
图8.1.2老化酵母詹纳斯绿染色（图中死细胞为无色，活细胞线粒体呈蓝色）
图8.1.3静置酵母詹纳斯绿染色
图8.1.4震荡酵母詹纳斯绿染色
美兰
2.思考题
（1）三种染色方法所得存活率差异原因探讨。
美兰和TTC染色原理都与细胞活性有关，所以染色结果即使活细胞也有染色差异，对观察计数有影响，台盼蓝只是判别细胞存活或是死亡，结果较明显。
（2）绘制光学显微镜下TTC染色的酵母细胞图。
（3）设计实验验证美兰染色及台盼兰染色原理上是否存在差异。
是存在有差异；美兰可以透过活细胞，区别的原理是活细胞体内有美兰的分解酶；而台盼蓝染色中，则是以细胞膜通透性作为区别，活细胞完全隔绝染液进入，死细胞不能，染色剂能进入死细胞中使胞质染色。
（4）比较詹纳斯绿B与TTC染色结果的差异。
詹纳斯绿B染色使线粒体呈现蓝绿色，而胞质显无色；TTC染色使细胞中线粒体呈红色，其他胞质部分呈无色。
九、细胞分裂中期纺锤体和染色体结构荧光观察
1.实验结果及分析
9.1.1Hela细胞传代培养细胞9.1.2分裂中期和后期染色体形态
在本次实验中，虽然细胞传代比较困难，但我们还是比较成功的，虽然在后面我们组的细胞板被打翻了两片，但其余两片的观察结果还不错，得到了几个比较清晰的观察结果，不过以后我们操作就要更加小心了。
第一章：绪论 细胞学说：施来登和施旺提出 主要内容：◆所有生物都是由一个或多个细胞组成的 ◆细胞是所有生物结构和功能的基本单位 ◆一切细胞产自于已存在的细胞 意义：对细胞与生物有机体的关系及其在生物体中的作用和地位有了明确的科学理论的概括，把动植物等生物有机体在细胞水平上统一起来。对生物科学的发展起到重大推动作用。 第二章：细胞的统一性和多样性 细胞的基本共性： 1、相似的化学组成 2、脂-蛋白体系的生物膜 3、相同的遗传装置：核酸和蛋白质分子构成的遗传信息的复制与表达系统 4、一分为二的分裂方式 原核细胞主要代表：支原体、细菌、蓝藻 真核细胞的基本结构体系： 1、以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统：质膜、细胞核、细胞质 主要功能：选择性的物质跨膜运输与信号转导 2、遗传信息表达系统： 包括细胞核和核糖体 DNA与组蛋白构成了染色质与染色体的基本结构—核小体（nucleosome） 核小体装配成染色质，继而在细胞分裂阶段形成染色体 3、细胞骨架系统：是由一系列特异的结构蛋白装配而成的网架系统。分为胞质骨架和核骨架。 （胞质骨架：由微丝、微管与中等纤维等构成的网络体系。核骨架：包括核纤层和核基质。）器官的大小主要决定于细胞的数量,与细胞的数量成正比,而与细胞的大小无关,把这种现象为“细胞体积的守恒定律”。 细胞的体积受什么因素控制？ 答：与各部分细胞的代谢活动及细胞功能有关；受外界环境条件的影响；细胞的核与质之间有一定的比例关系；细胞的“比面值”与细胞内外物质的交换及细胞内物质交流的关系 原核细胞与真核细胞、植物与动物细胞的比较： 功能上的共同点：都是生命的基本结构单位；都能进行分裂；都能遗传 结构上的共同点：都有细胞膜；都有DNA和RNA；都有核糖体
细胞生物学期末复习简答题及答案 五、简答题 1、细胞学说的主要容是什么？有何重要意义？ 答：细胞学说的主要容包括：一切生物都是由细胞构成的，细胞是组成生物体的基本结构单位；细胞通过细胞分裂繁殖后代。细胞学说的创立参当时生物学的发展起了巨大的促进和指导作用。 其意义在于：明确了整个自然界在结构上的统一性，即动、植物的各种细胞具有共同的基本构造、基本特性，按共同规律发育，有共同的生命过程；推进了人类对整个自然界的认识；有力地促进了自然科学与哲学的进步。 2、细胞生物学的发展可分为哪几个阶段？ 答：细胞生物学的发展大致可分为五个时期：细胞质的发现、细胞学说的建立、细胞学的经典时期、实验细胞学时期、细胞生物学时期。 3、为什么说19世纪最后25年是细胞学发展的经典时期？ 答：因为在19世纪的最后25年主要完成了如下的工作： ⑴原生质理论的提出；⑵细胞分裂的研究；⑶重要细胞器的发现。这些工作大推动了细胞生物学的发展。 1、病毒的基本特征是什么？ 答：⑴病毒是“不完全”的生命体。病毒不具备细胞的形态结构，但却具备生命的基本特征（复制与遗传），其主要的生命活动必需在细胞才能表现。⑵病毒是彻底的寄生物。病毒没有独立的代和能量系统，必需利用宿主的生物合成机构进行病毒蛋白质和病毒核酸的合成。⑶病毒只含有一种核酸。⑷病毒的繁殖方式特殊称为复制。 2、为什么说支原体是目前发现的最小、最简单的能独立生活的细胞生物？ 答：支原体的的结构和机能极为简单：细胞膜、遗传信息载体DNA与RNA、进行蛋白质合成的一定数量的核糖体以及催化主要酶促反应所需要的酶。这些结构及其功能活动所需空间不可能小于100nm。因此作为比支原体更小、更简单的细胞，又要维持细胞生命活动的基本要求，似乎是不可能存在的，所以说支原体是最小、最简单的细胞。 1、超薄切片的样品制片过程包括哪些步骤？ 答案要点：固定，包埋，切片，染色。 2、荧光显微镜在细胞生物学研究中有什么应用？ 答案要点：荧光显微镜是以紫外线为光源，照射被检物体发出荧光，在显微镜下观察形状及所在位置，图像清晰，色彩逼真。 荧光显微镜可以观察细胞天然物质经紫外线照射后发荧光的物质（如叶绿体中的叶绿素能发出血红色荧光）；也可观察诱发荧光物质（如用丫啶橙染色后，细胞中RNA发红色荧光，DNA发绿色荧光），根据发光部位，可以定位研究某些物质在细胞的变化情况。 3、比较差速离心与密度梯度离心的异同。 答案要点：二者都是依靠离心力对细胞匀浆悬浮液中的颗粒进行分离的技术。差速离心是一种较为简便的分离法，常用于细胞核和细胞器的分离。因为在密度均一的介质中，颗粒越大沉降越快，反之则沉降较慢。这种离心方法只能将那些大小有显著差异的组分分开，而且所获得的分离组分往往不很纯；而密度梯度离心则是较为精细的分离手段，这种方法的关键是先在离心管中制备出蔗糖或氯化铯等介质的浓度梯度并将细胞匀浆装在最上层，密度梯度的介质可以稳定沉淀成分，防止对流混合，在此条件下离心，细胞不同组分将以不同速率沉降并形成不同沉降带。 4、为什么电子显微镜不能完全替代光学显微镜？ 答案要点：电子显微镜用电子束代替了光束，大大提高了分辨率，电子显微镜相对光学显微镜是个飞跃。
细胞生物学期末复习附带答案及作业题目 一选择 1 最早发现细胞的是：胡克 2 观察无色透明细胞：相差显微镜；观察运动细胞：暗视野显微镜。 3 信号传递中，重要的脂类是：磷酸酰基醇。 4 多药性蛋白属于ABC转运器。 5 植物细胞与细菌的协助运输借助于质子浓度梯度。动物则借助钠离子浓度梯度。 6 鞭毛基体和中心粒属于三联微管。 7 叶绿体质子动力势产生是因为类囊体腔的PH值低于叶绿体基质的PH值。 8 Hela细胞属于宫颈癌上皮细胞。 9 电子显微镜的分辨力：0.2nm。光镜：0.2um。人眼： 0.2mm。 10 鞭毛轴丝由9+2微管组成。 11 矽肺与溶酶体有关。 12 纺锤体的微管包括：星体微管，动粒微管，极微管。 13 具有细胞内消化作用的细胞器是：溶酶体。 14 细胞生命活动所需能量均来自线粒体。 15 信号识别颗粒是一种核糖核蛋白，包括RNA和蛋白质。 16 抑制脂质分裂的是：松弛素。 17 钙离子浓度上升时，PKC转移到质膜内表面。 18 类囊体膜上电子传递方向：PSII---PSI---NADP+。 19 由膜围成的细胞器是胞内体。 20 氚标记的尿嘧啶核苷用于检测细胞中RNA转录。
21 膜脂不具有的分子运动是跳跃运动。 （具有的是：侧向，旋转，翻转） 22 膜流的正确方向：内质网——高尔基体——质膜。 23 初级溶酶体来自粗面内质网和高尔基体。 24 线粒体合成ATP。 25 微丝重要的化学成分是肌动蛋白。 26 不消耗能量的运输方式是：电位门通道。 27 肌质网可贮存钙离子。 28 高尔基体功能功能：分泌颗粒形成。 29 微丝在非肌细胞中功能：变形运动，支架作用，吞噬运动。 30 中心粒：9组3联。 31 胞内信使有：C,CGMP,DG。生长因子：EGFR。、 32 流式细胞术可快速测定细胞中DNA含量。 33 完成细胞膜特定功能的组分为膜蛋白。 34 细胞质外层的一个复合结构体系和多功能体系成为：细胞膜。 35 酪氨酸蛋白激酶受体是血小板衍生生长因子受体。 36 肝细胞解毒作用发生在滑面内质网。 37 衰老细胞器被膜包裹形成自噬体。 38 线粒体中ADP---ATP在基粒中。 39 组成微丝的主要化学成分是：纤维状肌动蛋白。 40含不溶性脂蛋白颗粒的细胞内小体为脂褐质。 41 微管形态一般是中空圆柱状。 42 细胞氧化过程中，乙酰辅酶A生成在线粒体基质中。 43 粗面内质网作为核糖体附着支架。
姓名班级 13级生命基地班学号同组者： 科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合 【实验题目】 动物细胞融合 【实验目的】 1.了解动物细胞融合的常用方法。 2.学习化学融合的基本操作过程。 3.观察动物细胞融合过程中细胞的行为与变化。 【实验材料与用品】 1、材料 鸡血红细胞 2、试剂 50%PEG、GKN溶液、Alsever’s细胞保存液、0.85%氯化钠溶液。 3、器材 倒置显微镜、离心机、载玻片、盖玻片、离心管、废液缸、滴管等。 【实验原理】 细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包括：病毒诱导融合、化学诱导融和和电激诱导融合。 1、病毒诱导融合 仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融时也可介导细胞与细胞的融合。用紫外线灭活后，这些病毒即可诱导细胞发生融合。 2、化学诱导融合 很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。在恢复过程中想接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。化学诱导方法，操作方便，诱导融合的概率比较高，效果稳定，适用于动、植物细胞，但对细胞具有一定的毒性。PEG 是广泛使用的化学融合剂。 3、电激诱导融合
姓名班级 13级生命基地班学号同组者： 科目细胞生物学实验实验题目动物细胞融合 包括电诱导、激光诱导等。其中，电诱导是先使细胞在电场中极化成为偶极子，沿电力线排布成串，再利用高强度、短时程的电脉冲击破细胞膜，细胞膜的脂质分子发生重排，由于表面张力的作用，两细胞发生融合。电诱导方法具有融合过程易控制、融合概率高、无毒性、作用机制明确、可重复性高等优点。 【实验步骤】 在本次实验中采用的是化学诱导融合的方法，利用PEG使鸡血红细胞发生融合。具体实验步骤如下： 1、取鸡血2ml+2mlAlsever液，再加入6mlAlsever液，混匀后制悬液（4℃保存）【老师已做好，可直接使用】 2、取（1）中悬液1ml+4ml的0.85%的NaCl溶液，进行以下三次离心处理： ①在1200r/min下离心5min，去掉上清液，再加入0.85%的NaCl溶液至5ml； ②1000-1200r/min下离心5min，去掉上清液，再加入0.85%的NaCl溶液至5ml； ③1000-1200r/min下离心7min 【因时间关系此次实验只离心一次】 3、将离心后的沉降血球（去上清后约0.1-0.2ml）加入GKN至1-2ml，使之成为10%的细胞悬液； 4、取上述10%的血球悬液1ml,加入3mlGKN液，使每毫升含血球15000000个； 5、分别取（4）1ml+0.5ml50%PEG，（4）0.5ml+0.5ml50%PEG，（4）0.5ml+1.0ml50%PEG，混匀滴片，编号分别为①②③号溶液。在常温下2-3min后，显微镜下观察。 【实验结果】 1、实验中可观察到两个和多个细胞发生质膜融合现象,可看到不同融合状态的细胞： ①两细胞的细胞膜相互接触、粘连； ②接触部分的细胞膜崩解，两细胞的细胞质相同，形成一个细胞质的通道，呈现哑铃状； ③通道扩大，两个细胞连成一体，呈现一个长椭圆形细胞； ④细胞融合完成形成含有双核或者多核的细胞，呈圆形。 比较典型的细胞融合时的形态如下图：
医用细胞生物学知识点 细胞生物学 (cell biology )：细胞生物学是以细胞为研究对象，经历了从显微水平到亚显微和分子水平 的发展过程，成为今天在分子层次上研究细胞精细结构和生命活动规律的学科。 医学细胞生物学 (medical cell biology)：医学细胞生物学以揭示人体各种细胞在生理和病理过程中 的生 命活动规律为目的，期望能对人体各种疾病的发病机制予以深入阐明，为疾病的诊断、治疗和预防提 供理论依据和策略。 对细胞概念理解的五个角度： ①细胞是构成有机体的基本单位； ②细胞是代谢与功能的基本单位； ③ 细胞是有机体生长与发育的基础； ④细胞是遗传的基本单位； ⑤没有细胞就没有完整的生命。 生物界划分的三个类型：原核细胞、古核细胞和真核细胞。 原核细胞与真核细胞的比较： p13 表 2-1 生物大分子：是由有机小分子构成的，大约有 3000种，分子量从 10000到 1000000。 核酸 (nucleic acid ) 的基本单位 :核苷酸。 核苷酸：核苷的戊糖羟基与磷酸形成酯键，即成为核苷酸。 DNA 分子的双螺旋结构模型( p18图 2-8)：DNA 分子由两条相互平行而方向相反的多核苷酸链组成， 即一条链中磷酸二酯键连接的核苷酸方向是 5'→3'，另一条是 3'→ 5'，两条链围绕着同一个中心轴 以右手方向盘绕成双螺旋结构。 基因组：细胞或生物体的一套完整的单倍体遗传物质称为基因组。 动物细胞内含有的主要 RNA 种类及功能： p20 表 2-3 核酶 (ribozyme ) :核酶是具有酶活性的 RNA 分子。 蛋白质 ( protein )的基本单 位：氨基酸。 肽键：肽键是一个氨基酸分子上的 羧基 与另一个氨基酸分子上的 氨基经脱水缩合 而成的化学键。 肽 (peptide) ：氨基通过肽键而连接成的化合物称为肽。 蛋白质分子的二级结构： α -螺旋， β-片层。 酶 (enzyme)：酶是由生物体细胞产生的具有催化剂作用的蛋白质。 酶的特性：高催化效率，高度专一性，高度不稳定性。 光学显微镜的种类：普通光学显微镜，荧光显微镜，相差显微镜，暗视野显微镜，共聚焦激光扫描显 微镜。 细胞培养：细胞培养是指细胞在体外的培养技术，即无菌条件下，从机体中取出组织或细胞，模拟机 体内正常生理状态下生存的基本条件，让它在培养器皿中继续生存、生长和繁殖的方法。 细胞膜 (cell membrane ):细胞膜是包围在细胞质表面的一层薄膜，又称质膜 ( plasma membrane ) 生物膜 ( biomembrane ):目前把 质膜 和细胞内膜系统 总称为生物膜。 细胞膜的组成：主要由脂类、蛋白质和糖类组成 磷脂 (phospholipid)可分为两类：甘油磷脂 由于磷脂分子具有亲水头和疏水 尾，故称为 膜蛋白可分为三种基本类型：膜内在蛋白 蛋白 (lipid anchored protein) 。 细胞外被 ( cell coat )：在大多数真核细胞表面有富含糖类的周缘区，称为细胞外被或糖萼。 细胞外被的基本功能： 保护细胞抵御各种物理、化学性损伤 ，如消化道、呼吸道等上皮细胞的细胞外 被有助于润滑、防止机械损伤，保护黏膜上皮不受消化酶的作用。 1． 2． 3． 4． 5． 6． 7． 8． 9． 10． 11 ． 12 ． 13 ． 14 ． 15 ． 16 ． 17 ． 18 ． 19． 20． 21 ． 22 ． 23 ． 24 ． 25 ． 26． 27． 28． (phosphoglycerides )和鞘磷脂 (sphingomyelin,SM) 。 两亲性分子 或兼性分子 。 intrinsic protein )、膜外在蛋白 (extrinsic
山东大学细胞生物学实验报告 聚乙二醇（PEG ）法诱导的动物细胞融合实验 2012/9/11 实验目的： 了解细胞融合技术的发展过程和主要方法的基本原理，用聚乙二醇(PEG)化学诱导法进行鸡血红细胞的融合实验，掌握实验的基本操作，观察鸡血红细胞融合的不同时期。 实验原理： 1. 细胞融合的概念 两个或两个以上的细胞或原生质体在自然或人为诱导的情况下细胞质膜相互融合，细胞质相互混合成为一个整体杂合细胞的现象被称为细胞融合。细胞融合可以发生在同种细胞之间也可以在不同物种间实现。 2. 细胞人工融合的主要方法及基本原理 细胞体外融合的主要方法分为病毒诱导，化学诱导和物 理诱导。1953年，M. Kuroya 在临床中第一次分离到仙台 病毒（HVJ ）[1]。1958年，日本学者Okada 发现仙台病毒 （HVJ ）能诱导动物细胞融合[2]，其基本原理是仙台病毒 的衣壳上有细胞表面受体的结合位点，可以诱导不同细 胞凝集，最终使不同细胞的细胞膜相互融合。 1974年，加拿大学者高国楠发明了细胞的聚乙二醇 （Polyethyleneglycol ，PEG ）化学融合法，由于该方法对 实验条件要求极低，试剂易得，操作简单，成为应用最广泛 的细胞融合方法。化学诱导细胞融合的基本原理是PEG 等化 学物质能够诱导细胞膜磷脂分子的极性基团发生结构重 排，相互接触的细胞在细胞膜恢复过程中借助磷脂分子的亲和作用和表面张力实现融合。比之于仙台病毒诱导法，PEG 诱导法的效率提高了几百倍。 80年代，科学家发明了细胞电融合法[4, 5] ，电融合法将细胞融合的产率提高到了50%-80%。电融合法的建立是基于细胞膜表面带电荷的性质。当在细胞悬液周围加入特定方向的电场时，细胞表面会发生极化现象，相邻的细胞将吸附在一起。这时突然提高电场强度，细胞间彼此接触的细胞膜会被击穿，细胞膜修复时受到磷脂分子间的亲和作用和细胞膜表面张力的作用将会发生融合。 图2. 以电融合方法得到的3T3-C2融合细胞 （引自J. Teissie 等，1982 )。 图1. 仙台病毒示意图。a 和b 是病毒套膜，c 为糖蛋白，d 为类染色体。
第一章医学细胞生物学绪论 名词解释：生物学，细胞生物学 解答题：细胞对生命活动的意义，细胞的共同属性 易考点：首次命名植物细胞的人，发现无丝分裂、减数分裂的事件，提出DNA 双螺旋模型 第二章细胞生物学研究方法 名词解释：分辨率，电子显微镜，酶细胞化学技术，流式细胞技术，细胞培养，细胞系，细胞株，细胞融合，干细胞 解答题：细胞培养的基本条件，光学显微镜技术的原理 易考点：分辨率的计算公式及各个字母代表的意思，光镜的分辨极限，暗视野显微镜观察的是细胞轮廓以及观察的范围，透射显微镜观察的是细胞内部的细微结构，扫描电子显微镜观察的是三维立体形貌。 第四章细胞膜 名词解释：生物膜，细胞膜 解答题：流动镶嵌模型，细胞膜的特性，耦联运输 易考点：功能复杂的膜中所占蛋白质的比例大，三种膜蛋白的存在形式，影响膜脂流动性的因素，细胞膜的物质转运功能（选择题形式），糖萼的本质 第六章内膜系统 名词解释：内膜系统，细胞质 解答题：信号假说的主要内容，高尔基复合体的功能，滑面内质网的功能，溶酶体的形成过程，溶酶体的功能 易考点：内质网的标志酶，高尔基复合体的形态（形成面，成熟面），溶酶体的标志酶 第七章线粒体 名词解释：三羧酸循环，氧化磷酸化，底物水平磷酸化，呼吸链，分子伴侣，导肽 解答题：描述线粒体的结构 易考点：光镜下线粒体的结构，线粒体各部位的标志酶，呼吸链的复合体中每个复合体有哪些物质，线粒体疾病的特点，化学渗透学说主要知道氧化放能
第八章细胞骨架 名词解释：细胞骨架，中间纤维结合蛋白 解答题：微管的体外装配，影响微管装配的因素，微管的功能（简单描述），微丝的组装过程，影响微丝组装的因素，微丝的功能，中间纤维结合蛋白的功能，中间纤维的组装的控制以及影响因素，中间纤维的功能 第九章细胞核 名词解释：核型，核纤层，细胞骨架，核基质， 解答题：简述细胞核的基本结构，核孔复合体的结构，常染色质和异染色质的异同点，核仁的光镜和电镜结构。 易考点：核基质的功能，人体哪几号染色体上有核仁组织区。 第十一章细胞生长与增殖 名词解释：细胞增殖，细胞周期蛋白依赖性激酶抑制物CDKI。解答题：简述有丝分裂过程及各过程标志，减数分裂过程。易考点：有丝分裂、无丝分裂、减数分裂的英文，细胞周期调控的起主要作用的物质。 第十三章细胞分化 名词解释：细胞分化，细胞决定，管家基因，奢侈基因。易考点：细胞分化实质，细胞分化特点。第十五章：名词解释：干细胞。易考点：干细胞的分类，干细胞的来源。 第十四章细胞衰老与死亡 名词解释：细胞衰老。解答题：细胞凋亡与细胞坏死的主要区别。易考点：细胞衰老的表现，细胞凋亡的特征。 第十五章：名词解释：干细胞。
1．简述细胞生物学的基本概念，以及细胞生物学发展的主要阶段。 以细胞为研究对象，经历了从显微水平到亚显微和分子水平的发展过程,研究细胞结构与功能从而探索细胞生长发育繁殖遗传变异代谢衰老及进化等各种生命现象的规律的科学;主要阶段:①细胞的发现与细胞学说的创立②光学显微镜下的细胞学研究③实验细胞学研究 ④亚显微结构与分子水平的细胞生物学. 2.简述细胞学说的主要内容。 施莱登和施旺提出一切生物，从单细胞生物到高等动物和植物均有细胞组成，细胞是生物形态结构和功能活动的基本单位.魏尔肖后来对细胞学说作了补充，强调细胞只能来自原来的细胞。 3.简述原核细胞的结构特点。 1）. 结构简单 DNA为裸露的环状分子，无膜包裹，形成拟核。 细胞质中无膜性细胞器，含有核糖体. 2）. 体积小直径约为1到数个微米。 4.简述真核细胞和原核细胞的区别。 5.简述DNA的双螺旋结构模型. ① DNA分子由两条相互平行而方向相反的多核苷酸链组成。②两条链围绕着同一个中心轴 以右手方向盘绕成双螺旋结构。③螺旋的主链由位于外侧的间隔相连的脱氧核糖和磷酸组
成，内侧为碱基构成。④两条多核苷酸链之间依据碱基互补原则相连螺旋内每一对碱基均位于同一平面上并且垂直于螺旋纵轴,相邻碱基对之间距离为0。34nm，双螺旋螺距为3。4nm。 6.蛋白质的结构特点。 以独特的三维构象形式存在，蛋白质三维构象的形成主要由其氨基酸的顺序决定，是氨基酸组分间相互作用的结果。一级结构是指蛋白质分子氨基酸的排列顺序，氨基酸排列顺序的差异使蛋白质折叠成不同的高级结构。二级结构是由主链内氨基酸残基之间氢键形成，有两种主要的折叠方式a-螺旋和β—片层。在二级结构的基础上进一步折叠形成三级结构，不同侧键间互相作用方式有氢键，离子键和疏水键，具有三级结构既表现出了生物活性。三级结构的多肽链亚单位通过氢键等非共价键可形成更复杂的四级结构。 7.生物膜的主要化学组成成分是什么？ 膜脂(磷脂，胆固醇，糖脂），膜蛋白，膜糖 8.什么是双亲性分子(兼性分子）？举例说明。 既含有亲水头部又含有疏水的尾部的分子，如磷脂一端为亲水的磷酸基团，另一端为疏水的脂肪链尾. 9.膜蛋白的三种类型。 膜内在蛋白（整合蛋白），膜外在蛋白，脂锚定蛋白 10.细胞膜的主要特性是什么?膜脂和膜蛋白的运动方式分别有哪些? 细胞膜的主要特性：膜的不对称性和流动性；膜脂翻转运动，旋转运动，侧向扩散,弯曲运动，伸缩和振荡运动。膜蛋白旋转运动和侧向扩散. 11.影响膜脂流动的主要因素有哪些？ ①脂肪酸链的饱和程度，不饱和脂肪酸越多，相变温度越低其流动性也越大。 ②脂肪酸链的长短，脂肪酸链短的相变温度低,流动性大。 ③胆固醇的双重调节，当温度在相变温度以上时限制膜的流动性起稳定质膜的作用,在相变 温度以下时防止脂肪酸链相互凝聚,干扰晶态形成。 ④卵磷脂与鞘磷脂的比例，比值越大流动性越大. ⑤膜蛋白的影响，嵌入膜蛋白越多,膜脂流动性越小 ⑥膜脂的极性基团、环境温度、pH值、离子强度及金属离子等均可对膜脂的流动性产生一 定的影响。 12.简述生物膜流动镶嵌模型的主要内容及其优缺点。 膜中脂双层构成膜的连贯主体，他们具有晶体分子排列的有序性，又有液体的流动性，膜中蛋白质以不同的方式与脂双层结合.优点，强调了膜的流动性和不对称性.缺点，但不能说明具有流动性性的质膜在变化过程中怎样保持完整性和稳定性，忽视了膜的各部分流动性的不均匀性。 13.小分子物质的跨膜运输方式有哪几种？ 被动运输：简单扩散，易化扩散，离子通道扩散.主动运输：ATP直接供能，ATP间接供能。 14.简述被动运输与主动运输的区别。 被动运输不消耗细胞能量，顺浓度梯度或电化学梯度。主动运输逆电化学梯度运输，需要消耗能量，都有载体蛋白介导。 15.大分子和颗粒物质的跨膜运输方式有哪几种？ 胞吞作用（吞噬作用，胞饮作用,受体介导的胞吞作用）。胞吐作用（连续性分泌作用，受调性分泌作用） 16.简述小肠上皮细胞吸收葡萄糖的过程. 小肠上皮细胞顶端质膜中的Na+/葡萄糖协同运输蛋白，运输2个Na+的同时转运1个葡萄糖分子,使胞质内产生高葡萄糖浓度；质膜基底面和侧面的葡萄糖易化扩散运输蛋白,转运葡萄糖离开细胞，形成葡萄糖的定向转运.Na+—K+泵将回流到细胞质中的Na+转运出细胞，维持Na+穿膜浓度梯度。
细胞生物学期末考试资料 一、名词解释（8题/3分，英文，写出中文再解释） 1、蛋白质分选（protein sorting）：指依靠蛋白质自身信号序列，从蛋白质起始合成部位转运到其功能发挥部位的过程。P115 2、信号肽（signal peptide）：是位于蛋白质上的一段连续的氨基酸序列，一般有15~60个氨基酸残基，具有分选信号的功能。P116 信号斑（signal patach）：是溶酶体酶蛋白多肽形成的一个特殊的三维结构，是位于蛋白质不同部位的几个氨基酸序列在多肽链折叠后形成的一个斑块区，具有分选信号的功能。 前肽（prepeptide）：指一些分泌蛋白质的新生肽链N末端，有一段长度不等的肽段，通常由20~30个氨基酸残基组成。 导肽（leading peptide)：它是游离核糖体上合成的蛋白质的N-端信号。 3、分子伴侣（molecular chaperones）：将细胞核内能与组蛋白结合并能介导核小体有序组装的核质素。P123 4、细胞骨架（cytoskeleton）：由微丝、微管和中间纤维组成的蛋白纤维网络结构，具有为细胞提供结构支架、维持细胞形态、负责细胞内物质和细胞器转运和细胞运动等功能。 P166 5、微管组织中心（microtubule organizing centers,MTOCs）：是细胞质中决定微管在生理状态或实验处理解聚后重新组装的结构。P177 6、细胞通讯（cell communication）：指一个细胞发出的信息通过介质传递到另一个靶细胞并与其特异的受体相互作用，通过细胞信号转导引起靶细胞内一系列生理生化变化等生物学效应的过程。P200 7、受体（receptor）：是细胞表面或细胞内的一类大分子，可识别并特异性地与有生物活性的化学信号分子结合，从而激活或启动一系列生物化学反应，最后导致该信号物质特定的生物效应。P204 8、第二信使（second messenger）：指胞内产生的非蛋白类小分子，通过其浓度的增加或减少，应答胞外信号与细胞表面受体的结合，调节细胞内酶和非酶的活性，从而在细胞信号转导途径中行使信号放大、分化、整合并传递的功能。P206 9、生物的基因组（genome）：在真核细胞中，每条DNA分子都被包装在染色体中，一个生物储存在单倍染色体组中的总遗传信息。P254 10、核型（karyotype）：一个体细胞有丝分裂中期的全部染色体，按其数目、大小和形态特征顺序排列所构成的图像。P272 11、灯刷染色体（lampbrush chromoome）：是卵母细胞进行第一次减数分裂时，停留在双线期的染色体。P277 12、Hayflick 界限(Hayflick limit)：细胞，至少是培养的细胞，不是不死的，而是有一定的寿命；它们的增殖能力不是无限的，而是有一定的界限。P369 细胞周期（cell cycle）：指细胞从上一次分裂结束到下一次分裂结束的全过程。 13、表观遗传（epigenetics）：指DNA序列不发生变化，但基因表达却发生了可遗传的改变。 14、干细胞（Stem cell）：是存在于个体发育过程中，具有长期(或无限)自我更新能力、并可分化产生某种(或多种)特化细胞的原始细胞。是个体的生长发育、组织器官的结构和功能
细胞生物学考点 1、细胞最早于1665年由英国科学家R.Hooke发现。活细胞是1673~1677年由荷兰科学家 A.Van Leeuwenhoek 观察到的。 2、德国植物学家M.J.Schleiden和动物学家T.Schwann根据自己的研究并总结前人的工作，提出了细胞学说（cell theory）。细胞学说的基本内容是：一切生物，从单细胞生物到高等动物和植物均由细胞组成，细胞是生物形态和功能活动的基本单位。 3、1958年Crick发表了“中心法则”，指出遗传信息的流向是：DNA→ RNA →蛋白质。 4、原核细胞与真核细胞的比较。 5、原核细胞向真核细胞的演化的两种假说：1分化起源说；2内共生起源说。 6、DNA和RNA在化学组成上的异同。 7、动物细胞内主要含有的RNA种类和功能。 8、蛋白质的各级结构： 一级结构是指蛋白质分子中氨基酸的排列顺序。主要化学键为肽键，少数含二硫键。 二级结构是指蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构，即该段肽链主链骨架原子的相对空间位置，并不涉及氨基酸残基侧链的构象。主要化学键为氢键。 三级结构是指整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置。即肽链中所有原子在三维空间的排布位置。主要化学键为疏水键、离子键、氢键和 Van der Waals力等。 四级结构是指蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用。主要是疏水作用，其次为氢键和离子键。 9、用可见光做光源的光学显微镜分辨率是0.2um，切片厚度为1~10um。电子显微镜的分辨率实际上仅约2nm，切片厚度为50~100nm。通常将光镜下所见物体的结构称作显微结构。在电子显微镜下观察到的细胞的结构称为亚显微结构或超微结构。 10、细胞的分离方法有：1差速离心或密度梯度离心；2流式细胞技术；3免疫磁珠法；4激光捕获显微切割技术。
细胞生物学期末考试试题 1. 一氧化氮 (NO)是不是第二信使,请简述你的观点和证据。一氧化氮是第二信使 资料表明，细胞中存在一种NO合成酶，NO合成酶分解L-精氨酸，生成NO和 L-瓜氨酸。 NO的作用决定其释放部位，生成细胞是血管内皮。如乙酞胆碱，缓激肤或动脉流等刺激内皮细胞,使之释放NO，它激活邻近平滑肌的鸟核昔酸环化酶, 引起血管舒张。在血小板，则抑制聚集和粘附; 在大鼠小脑，由于激活了兴奋性NMDA(N-甲基-D-天冬氨酸)受体，神经元释放 畜NO,使邻近的突触前神经末梢及星形细胞的可溶性鸟核昔酸释化酶激活。FMLP或LTB刺激大鼠腹腔中4性粒细胞和刺激巨噬细胞产生NO,NO可以激活血管平滑肌及血小板的鸟核昔酸环化酶: 由此看啦NO确实是一种第二信使。 参考文献:NO-神经系统和免疫系统的第二信使，Coller j&Vallance P 国外医学分子生物学分册第13卷第1期，1991 2. 简述你对干细胞的理解和干细胞的应用前景。 干细胞(stem cells, SC)是一类具有自我复制能力(self-renewing)的多潜能 细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES细胞)和成体干细胞(somatic stem cell)。根据干细胞的发育潜能分为三类:全能干细胞(totipotent stem cell,TSC)、多能干细胞(pluripotent stem cell)和单能干细胞(unipotent stem cell)。干细胞(Stem Cell)是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种组织器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”。
细胞生物学 第一章：绪论 ●现代细胞生物学研究的三个层次是什么？ ●细胞的发现 ●细胞学说 ●分子生物学的出现 ●真核细胞与原核细胞的比较 第三章：细胞基础 ●生物大分子 ●蛋白质一、二、三、四级结构 ●核酸分类 ●DNA/RNA结构、功能比较 ●三类主要RNA的大体结构与功能 ●DNA双螺旋结构模型 第四章：细胞膜 ●膜的化学组成：三种膜脂加二种膜蛋白 ●膜的流动镶嵌模型fluid mosaic model ●脂筏 ●膜的两大特性， ●物质运输的方式及比较：穿膜与跨膜 ●主/被动运输名词及其异同 ●内吞、外吐比较 ●细胞表面，细胞外被概念 第六章：细胞连接与细胞外基质 ●名解解释： ◆细胞连接cell junction, ◆紧密连接tightjunction, ◆锚定连接anchoringjunction, ◆通讯连接communicationjunction, ◆细胞外基质extracellular matrix, ●细胞连接可分为几种类型？在结构和功能上各有什么特点？ 第七章：核糖体 ●根据来源和沉降系数，细胞中核糖体分两类，其亚基组成？其rRNA组成及组成蛋白质种类？ ●细胞中核糖体有几种存在形式？所合成的蛋白质在功能上有什么不同？ ●核糖体上重要活性位点 ●蛋白质合成的过程 ●遗传密码，密码子，反密码子之间有何联系和区别？ ●遗传密码具有哪些特征？
（细胞生物学复习资料вＴсエ莋室整理） 第一，对内膜系统的概念和相互关系有较清楚的了解和掌握； 第二，重点要了解和掌握内质网，高尔基体，溶酶体和过氧化物酶体等细胞器和结构的性质特点和主要功能，以及有关的一些重要名词术语概念。 标志酶分别是。。 Signal peptide- SRP- ribosome 膜流；溶酶体分类；有被小泡类型；膜泡定向运输机制 名词解释 内膜系统； 内质网； 粗面内质网； 滑面内质网； 信号肽,信号假说内体性溶酶体； 吞噬性溶酶体；自噬性溶酶体； 异噬性溶酶体内质网有几种类型？在形态和功能上各有何特点？ ●简述分泌蛋白的合成和分泌过程 ●高尔基复合体的超微结构有何特点？ ●高尔基复合体有哪些主要功能？ ●简述溶酶体的形成过程（溶酶体与ER、GC的关系）。 ●溶酶体分为几类？各有何特点？ ●溶酶体与过氧化物酶体比较（形态结构，化学成分，标志酶，功能） ●内膜系统各细胞器的结构与功能 第八章：线粒体 ●名词解释：（部位+结构+功能）细胞氧化，细胞呼吸, 基粒，电子传递链，氧化磷酸化 ●线粒体的超微结构如何？ ●线粒体的功能 ●呼吸链及组成 ●基粒的结构与功能 ●化学渗透学说如何解释氧化磷酸化偶联？ ●线粒体半自主性 第九章：细胞骨架 ●细胞骨架cytoskeleton， ?微管组织中心（ MTOC ）， ?微管microbubule， ?微丝microfilament， ?中间纤维intermediate filament， ?踏车现象（踏车行为）p89“快于改为等于” ●微管、微丝、中间纤维的功能 ●细胞骨架中各纤维系统的异同 ●细胞骨架中各纤维系统的装配 ●比较纤毛与微绒毛的结构组成
春2周细胞膜 1.细胞膜的化学组成及其特性：膜脂；膜蛋白；膜糖。 2.细胞膜的分子结构模型：流动镶嵌模型，脂筏模型。 3.细胞膜的生物学特性：不对称性；流动性（膜流动性的影响因素）。 1.脂质体（liposome）：当脂质分子被水环境包围时，自发聚集，疏水尾在内， 亲水头在外，出现两种存在形式：球状分子团、形成双分子层，为防止两端尾部与水接触，游离端自动闭合，形成充满液体的球状小泡称为脂质体。 2.细胞外被（cell coat）或糖萼（glycocalyx）：质膜中的糖蛋白和糖脂向外表面 延伸出的寡糖链构成的糖类物质。 3.脂筏（lipid raft）：膜双层内含有特殊脂质和蛋白质组成的微区，微区中富含胆 固醇和鞘脂，其中聚集一些的特定种类的膜蛋白。由于鞘脂的脂肪酸尾部比较长，这一区域比膜的其他部分厚，更有秩序且较少流动，称脂筏。 1.细胞膜的基本结构特征与生理功能？ 1)脂类：包括磷脂、胆固醇、糖脂，构成细胞膜主体，与膜流动性有关。 2)蛋白质：可分为内在蛋白和外在蛋白，是膜功能的主要体现者，如物质运输、 信号转导等。 3)糖类：包括糖脂和糖蛋白，对细胞有保护作用，在细胞识别起作用。 2.影响膜脂流动性的因素？ 1)脂肪酸链的饱和程度（不饱和流动性大）。 2)脂肪酸链的长短（短链流动性大）。 3)胆固醇的双重调节（相变温度以上降低，相变温度以下提高）。 4)卵磷脂和鞘磷脂的比值（比值高的流动性大）。 5)膜蛋白的影响（膜蛋白越多，流动性越差）。 6)极性基团、环境温度、pH、离子强度。 春3、4周细胞内膜系统、囊泡转运 1.细胞内膜系统的概念、组成。 2.粗面内质网功能：蛋白质的合成；蛋白质的折叠装配；蛋白质的糖基化；蛋白 质的胞内运输。 3.滑面内质网的功能：参与脂质物质的合成运输；参与糖原代谢；参与解毒；参 与储存和调节Ca2+；参与胃酸、胆汁的合成分泌（内质网以葡萄糖-6-磷酸酶为标志酶）。 4.信号肽假说：新生肽链N端有独特序列称为信号肽，细胞基质中存在SRP能 识别并结合信号肽，SRP另一端与核糖体结合，形成复合结构，然后向内质网膜移动，与内质网膜上SRP-R识别结合，并附着于移位子上，然后SRP解离，肽链延伸。当肽链进入内质网腔时，信号肽序列会被内质网腔信号肽酶切除，肽链继续延伸至终止。 5.高尔基体是高度动态、具有极性的细胞器，以糖基转移酶为标志酶，主要功能 有：糖蛋白合成；参与脂质代谢；是大分子转运枢纽；加工成熟蛋白。 6.溶酶体酶的形成：①在内质网中合成、折叠和N-连接糖基化修饰，形成N-连 接的甘露糖糖蛋白，运送至高尔基体；②溶酶体酶蛋白在高尔基体中加工时甘露糖残基磷酸化为甘露糖-6-磷酸（M-6-P），为分选重要信号；③溶酶体酶分选并以出芽方式转运到前溶酶体。 7.溶酶体以酸性磷酸酶为标志酶，主要功能为：细胞内的消化作用；细胞营养功 能；机体防御和保护；激素分泌的调控；个体发生和发育的调控。 8.过氧化物酶体（peroxisome）又称微体，特点：①内有尿酸氧化酶结晶，称作 类核体；②模内表面界面可见一条称为边缘板的高电子致密度条带状结构。以过氧化物酶为标志酶。主要功能：清除细胞代谢所产生的H2O2及其他毒物； 对细胞氧张力的调节作用；参与脂肪酸等高能分子物质的代谢。 9.三种了解最多的囊泡：①网格蛋白有被囊泡：来源于反面高尔基体网状结构和 细胞膜，介导蛋白质从反面高尔基网状结构向胞内体、溶酶体和细胞膜运输； 在受体介导的胞吞作用过程中，介导物质从细胞膜向细胞质或从胞内体向从溶酶体运输；②COP Ⅰ有被囊泡：主要产生于高尔基体顺面膜囊，主要负责回收、转运内质网逃逸蛋白返回内质网及高尔基体膜内蛋白的逆向运输；③COP Ⅱ有被囊泡：产生于粗面内质网，主要介导从内质网到高尔基体的物质转运。
细胞生物学实验报告 一．实验名称：细胞凝集反应 二．实验原理： 细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分支状糖外被.目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分支状糖分子有关。 凝集素(lectin)是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。 凝集素是指一种从各种植物,无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白，因其能凝集红血球(含血型物质)，故名凝集素。常用的为植物凝集素(Phytoagglutin， PNA）,通常以其被提取的植物命名，如刀豆素 A(Conconvalina,ConA）、麦胚素（Wheat germ agglutinin， WGA)、花生凝集素（Peanut agglutinin, PNA)和大豆凝集素(Soybean agglutinin， SBA）等，凝集素是它们的总称。凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，它们具有的某些“亲合”特性，能被免疫细胞化学技术方法所应用。 血型鉴别实验，也是凝集反应的一种。 三．实验用品： 土豆块茎 显微镜，粗天平，载玻片，滴管2支，离心管2支 PBS缓冲液:称取NaCl7.2g，Na 2HPO 4 1。48g，KH 2 PO 4 0。43g,加蒸馏水，定 容至1000ml，调pH值到7.2. 4。2%的红细胞 四．实验步骤：
1.称取土豆去皮块茎2g，加10mlPBS缓冲液，浸泡2h,浸出的粗提液中含 有可溶性土豆凝集素。 2.以无菌方法抽取兔子静脉血液（加抗凝剂),加生理盐水3ml，在 1000r/min，离心5min，重复3次离心,最后按压积红细胞体积用生理盐水配成1%红细胞液。 3.分别用滴管吸取土豆凝集素和1%红细胞液各一滴,置双凹片左孔内,充分 混匀。 4.同时分别用滴管吸取PBS缓冲液和1%的红细胞悬液各一滴，置双凹片右 孔内，充分混匀，做对照实验。 5.摇晃5-10min后，观察有无发生细胞凝集并置显微镜下观察。 试剂土豆凝集素PBS缓冲液 现象 在振荡过程中，溶液中 的红细胞渐渐凝集成颗 粒状，逐渐聚拢，最后 在液滴中形成一大块血 红色血块。 在振荡过程中，红细胞 不断向中间靠拢，最终 形成中间颜色较深，边 缘颜色较浅的红细胞浑 浊溶液。 结果红细胞发生凝集红细胞未发生凝集 说明结论 土豆凝集素可使血液发生凝集，PBS缓冲液不能使 血液发生凝集。 图左为PBS缓冲液对照图右为土豆凝集素
细胞生物学：是研究细胞形态结构和功能和起源的科学。 细胞:是生命活动和结构的基本单位。其结构通常由细胞膜，细胞质，以及细胞器所构成。生活在地球上的细胞可分为：原核细胞；古核细胞和真核细胞三大类。 细胞学说： 一切生物，从单细胞生物到高等动植物都是由细胞组成的，细胞是生物形态结构功能活动的基本单位，细胞通过分裂形成组织。细胞来自于细胞。每个细胞相对独立，一个生物体内各细胞之间协同配合。 为什么说细胞是生命的基本单位？ 细胞是生命的基本结构单位，所有生物都是由细胞组成的； 细胞是生命活动的功能单位，一切代谢活动均以细胞为基础； 细胞是生殖和遗传的基础与桥梁；具有相同的遗传语言； 细胞是生物体生长发育的基础； 形状与大小各异的细胞是生物进化的结果 没有细胞就没有完整的生命（病毒的生命活动离不开细胞） 细胞生物学学习方法： 【1】抽象思维与动态，立体的观点；【2】同一性(unity)，多样性(diversity)联系性，开放性，历史性，发展性的观点；【3】实验科学与实验技术——细胞真知源于实验室，来源于观察，实验创新的观点；【4】化学成分，结构，和功能结合的观点；【5】尊重记忆的规律来进行学习。 细胞的大小和细胞分裂的原因 细胞如果太小，则最低限度的细胞器以及生命物质没有足够的空间存放；太大则表面积不够。有人认为，由于细胞的重量和体积的增长，造成了细胞表面积与体积的比例失调，从而触发细胞分裂。随着细胞生长，细胞体积增大，而细胞表面积和体积之比(表面积/体积)却在变小。活细胞不断进行新陈代谢，细胞表面担负着输入养分，排出废物的重任。表面积/体积比值的下降，意味着代谢速率的受限和下降。所以，细胞分裂是细胞生长过程中保持足够表面积，维持一定的生长速率的重要措施 原生质(protoplasm)： 1839 Purkinje用原生质一词指细胞的全部活性物质，从现代概念来说它包括质膜、细胞质和细胞核(或拟核)。 细胞核：细胞核（nucleus）是细胞内最重要的细胞器，核 表面是由双层膜构成的核被膜（nuclear envelope），核内 包含有由DNA和蛋白质构成的染色体（chromosome）。核内1 至数个小球形结构，称为核仁（nucleolus）。细胞核中的原 生质称为核质。 细胞质（cytoplasm）：质膜与核被膜之间的原生质。 细胞器：具有特定形态和功能的显微或亚显微结构称为细胞器 细胞质基质:细胞质中除细胞器以外的部分。又称为或胞质溶胶（cytosol），其体积约占细胞质的一半。 真核细胞:具有核膜，由膜围成的各种细胞器，如核膜、内质网、高尔基体、线粒体、叶绿体、溶酶体等在结构上形成了一个连续的体系，称为内膜系统。内膜系统将细胞质分隔成不同的区域，即所谓的区隔化。区隔化使细胞内表面积增加了数十倍，代谢能力增强。细胞质基质的功能：为细胞内各类生化反应的正常进行提供了相对稳定的离子环境;许多代谢过程是在细胞基质中完成的，如①蛋白质的合成；②核苷酸的合成；③脂肪酸合成；④糖酵解；⑤磷酸戊糖途径；⑥糖原代谢；⑦信号转导。供给细胞器行使其功能所需要的一切底物;控制基因的表达，与细胞核一起参与细胞的分化;参与蛋白质的合成、加工、运输、选择性降解 真核细胞的结构 细胞壁（植物细胞具有） 细胞细胞膜（质膜） 原生质体细胞质 细胞核 三大结构体系: 生物膜系统质膜、内膜系统（细胞器） 遗传信息表达系统染色质(体)、核糖体、mRNA、tRNA等等 细胞骨架系统胞质骨架、核骨架 植物细胞特有的结构:细胞壁、叶绿体、大液泡、胞间连丝 细胞形态：单细胞生物细胞的形态通常与细胞外沉积物或细胞骨架有关；高等生物细胞的形状与细胞功能及细胞间的相互作用有关 原核细胞：没有核膜，遗传物质集中在一个没有明确界限的低电子密度区，称为拟核。DNA为裸露的环状双螺旋分子，通常没有结合蛋白，没有恒定的内膜系统，核糖体为70S型。无细胞器, 无细胞骨架原核细胞构成的生物称为原核生物，均为单细胞生物。一般以二分裂的方式繁殖，也有的产生孢子。以无丝分裂或出芽繁殖 原核细胞真核细胞 细胞大小很小（1-10微米）较大（10-100微米） 细胞核无核膜、核仁（称“类核”）有核膜、核仁 遗传系统 DNA不与蛋白质结合 DNA与蛋白质结合成染色质， 一个细胞仅一条DNA 一个细胞有多条的染色体 细胞器无有 细胞分裂无丝分裂有丝分裂为主 质粒(plasmid) ：除核区DNA外，可进行自主复制的遗传因子，是裸露的环状DNA分子，所含遗传信息量为2~200个基因，能进行自我复制，有时能整合到核DNA中去。质粒常用作基因重组与基因转移的载体。 细胞膜：细胞质与外界相隔的一层薄膜，又叫质膜 生物膜：细胞内由膜构成的结构其成分基本相近，因此又把细胞中的所有膜统称为生物膜。特征：流动性，不对称性 “单位膜”模型由厚约3.5nm的双层脂分子和内外表面各厚约2nm的蛋白质构成。 细胞膜的功能：1. 为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境；2. 选择性的物质运输，包括代谢底物的输入与代谢产物的排出；3. 提供细胞识别位点，并完成细胞内外信息的跨膜传递4. 为多种酶提供结合位点，使酶促反应高效而有序地进行5. 介导细胞与细胞、细胞与基质之间的连接；6. 参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构。 脂双层的特点：⑴自我封闭性⑵装配性⑶流动性⑷不对称性