实验一、植物有丝分裂P14
2）预处理：
a：目的：
获得较多有丝分裂中期分裂相；使染色体收缩变短和分散，便于压片观察。
b：预处理方法：
化学方法：
秋水仙素、对二氯苯、8-羟基喹啉、 -溴萘。
低温预处理(物理法)：
小麦1-5度；水稻、玉米６-８度；20-40小时。
剪取根尖放入盛有蒸馏水的指形管中，再置于冰水共存的冰瓶中，将冰瓶置0-3度冰箱处理24小时。染色体数较多的材料可适当延长处理时间。
３）固定：采用各种渗透力强的固定液将植物的组织、细胞迅速杀死，使蛋白质沉淀并尽量保持其原有状态。
固定液：
Carnoy I(冰醋酸：纯酒精＝1：3)
时间：24 hr
4）解离、染色
酸解法(盐酸)、酶解法材料经解离后用蒸馏水洗涤多次，洗净材料中的酸，以便染色。
染液：①洋红：醋酸洋红②Schiff试剂
目的是使细胞易于分散，便于压片。
５）压片操作
切取分身组织约1.5mm,加一滴醋酸洋红
刀片踮起一角，用解剖针敲打之组织分离开来。然后在酒精灯上加热煮沸3~6次。目的是使根尖软化着色。加热时要注意不断摇动试管，以防煮沸的染色液冲出试管。吸水纸吸干后，压片。
6）镜检：
作业：
１. 在你观察的细胞分裂过程中，那些分裂时期最多？并画示意图表示出来。
２．根据你的实验情况，总结出制备好１张优良的细胞分裂标本应注意哪些问题？
实验二、植物的减数分裂P19
实验原理
●减数分裂是生物在性母细胞成熟时配子形成过程中发生的一种特殊的有丝分裂。它
包括两次连续的细胞分裂过程。
●减数分裂中期I可以看到各种染色体构型，有环状二价体、棒状二价体等。
●通过花粉母细胞减数分裂染色体的构型分析，可以研究染色体的同源性关系，进而
分析物种的亲缘关系。
2) 制片: 滴1滴45%醋酸, 盖上盖玻片（用刀片架起盖玻片一角），用解剖针轻笃几下，使材料分散成雾状，再移去架起的刀片。为了加深染色，可把载玻片放在酒精灯火焰上来回摆动几次，用拇指压片（注意压片时切不可移动盖片）。
作业
●叙述有丝分裂和减数分裂的异同点；
●减数分裂过程中，染色体数目的减半发生在那个时期？
●在你观察的细胞分裂过程中，那些分裂时期最多？并画示意图表示出来。
实验三、玉米的独立分配规律9：3：3：1的遗传规律。
卡方测验：
?在遗传研究中，根据观察计算的杂交后代中各种类型的个体数往往与理论预期有一
定的偏差。这种偏差主要是由于两种原因造成：一是由于群体小而产生的机会偏差，另一是由于遗传原因造成的本质差异，若要判定是机会误差还是本质差异，就需要进行卡方测验。
?卡方测验是指实验观察值与理论值是否符合的假设测验。
?χ2的计算公式为：
（o-e）2
χ2=∑——————
e
?公式中o是实际观察值，e为理论预期值，∑为积加符号。
?df自由度，等于类型数减1。
?查χ2表所得相应概率P>5%，即χ2<χ20.05，即认为观察值与理论值相符，偏差
是误差引起的。如相应概率P≤5%，即χ2≥χ20.05，认为观察值与理论值不相符，实验结果不符合原有理论预期值。
实验四果蝇唾腺染色体的观察P52
一、实验原理
?果蝇的唾腺位于幼虫前端的食道两侧和神经球附近。剖取果蝇唾腺细胞进行制片观察，可见到一个有4对染色体的着丝粒结合形成的染色中心，以及向四周伸展的多条染色体臂（X、2L、2R、3L、3R），其中第四对染色体为粒状，与染色体中心密切相联，总称为唾腺染色体。
果蝇唾腺染色体是一种典型的多线染色体。它是核内染色体中的染色线连续分裂复制而染色体不分裂，结果使每条染色体中的染色线可多达500～1000条
●不同染色体的横纹数量、形状和排列顺序是恒定的，利用这些特征，不仅可以鉴别
不同的染色体，还可以结合遗传实验结果进行基因定位。
由于其体细胞同源染色体的配对，故易进行染色体的缺失、重复、倒位和易位的细胞学观察和研究。
整个剖取过程须在生理盐水中进行。加1滴1N盐酸，解离2-3分钟，染色：用吸水纸吸去盐酸，加1滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干。加2滴1%醋酸洋红染色15-20分钟。
作业绘制
实验五P45
果蝇性状观察和杂交实验
实验六
果蝇性状独立分配规律的杂交实验
实验七
果蝇性状的伴性遗传
实验八
果蝇性状的连锁交换和基因定位
?70%酒精棉球将镊子、白瓷盘擦干净，手指及毛笔消毒
?将F1果蝇倒入一空指形管中，棉塞上滴1-2滴乙醚轻度麻醉
?取经麻醉的5只雌果蝇、5只雄果蝇，在苏醒前用毛笔将其移入横卧于桌上的培养
瓶中，完全苏醒后再将培养瓶竖起
果蝇雌雄外形判别：体形大小、黑斑有无
雌果蝇腹部体节数六，腹部底部为产卵管，呈现圆锥状凸出
雄性4节，腹部地步为交尾器，呈现黑色圆形外观
雄果蝇在前肢先端第二节具有性梳
?性状
–体色：灰（显），黑（隐）在染色体Ⅲ上
–刚毛：直（显），卷（隐）
–翅形：长（显），小（隐）在性染色体X上
–眼色：红（显），白（隐）
?基因型个体
–野生型：灰体，直刚毛，长翅，红眼
–三隐性：灰体，卷刚毛，小翅，白眼
–黑体：黑体，直刚毛，长翅，红眼
培养基：
玉米粉培养基：琼脂糖和玉米粉，加上酵母使其发酵，加入丙酸，目的是一来防止霉菌生长，二来果蝇偏好丙酸的味道
独立分配规律
?考察性状:体色眼色（基因位于不同染色体上）
正交: ♀黑体(aaX+X+ )×♂三隐性(AAX W Y)
F1 ♀♂灰体红眼( AaX+X W, AaX+Y )
F2(灰红9:灰白3:黑红3:黑白1)
反交:
♀三隐性(AAX W X W) ×♂黑体(aaX+Y )
F1: ♀灰体红眼:♂灰体白眼
( AaX+X W:AaX W Y )
F2 : 灰红:灰白:黑红:黑白
伴性遗传
考察性状:眼色，性别
正交:黑体(X+X+)×三隐性(X w Y) 反交:三隐性(X w X w)×黑体(X+Y)
配子X+ X w, Y X w X+,Y
F1 X+ X w ×X+ Y X w X+ ×X w Y
F2 X+X+ X+ Y X+X w X w Y X w X w X+ Y X+X w X w Y 红眼与白眼的比例为3:1 眼与白眼的比例为1:1,雌雄各占一半没有白眼雌蝇.
伴性遗传的特征:
一、正交反交不一样
二、隐性基因在雌雄个体上的分配不同
三、交叉遗传和隔代遗传
连锁遗传（考察性状：眼色，刚毛，翅形）
X wsnm X wsnm（三隐性）×X+++Y（野生型）
F1 （三杂合体）X wsnm X+++，X wsnm Y （三隐性）
配子X wsnm, X+++,X w+m,X+sn+
X wsn+,X++m,X+snm,X w++×X wsnm Y
姊妹交
F t
五、实验步骤
?5人/组，每组三个杂交组合（三管/组），每管5只雌蝇，３只雄蝇
三个组合分别为：
独立分配规律：体色，眼色
♀黑体×♂三隐性♀三隐性×♂黑体
伴性遗传：眼色、性别
♀黑体×♂三隐性♀三隐性×♂黑体
连锁遗传：眼色、刚毛、翅形
♀三隐性×♂野生型
?70%酒精棉球将镊子、白瓷盘擦干净，手指及毛笔消毒
?仍需饲养的果蝇宜轻度麻醉，以便复苏
?准备继续饲养的果蝇，应在苏醒前应用毛笔将其移入横卧于桌上的培养瓶中，完全苏醒后再将培养瓶竖起
?每个杂交组合贴上标签，标明组合(如♀黑体×♂三隐性)、班级、小组号、时间等
六、作业
?画一表格；根据体色和眼色统计数据分析是否符合9：3：3：1的独立分配规律，并做卡方测验
?画一表格；统计时分眼色并雌，雄（F1和F2）；证明白眼基因在X染色体上；证明伴性或交叉遗传
?画一表格；根据统计数据，验证连锁遗传规律，计算单交换，双交换的数据；基因定位及基因间的距离
实验九植物多倍体的诱发和鉴定
实验十大肠杆菌的遗传转化
CaCl2转化法的原理是在低温（0℃）和低渗的CaCl2溶液中，菌体膨胀，转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物黏附于细菌细胞表面，经42℃短时间热击，促进细胞吸收DNA复合物。
（一）感受态的制备
（二）转化（冰上操作）
1、1.5mL管中加入感受态细胞50μL和待转化的质粒2μL，冰浴30min；
2、42℃热击90sec（勿晃动管子）；
3、冰浴2min；
4、加入37℃预热的LB至1mL；
5、37℃，振荡（<50r/min）培养2h；
6、取200μL涂板（Ampr），37℃培养12~16h；
7、对生长出的白色菌落计数，计算出每微升质粒的转化率。
六、实验作业
n计算出大肠杆菌的转化率，转化率= 平板上的白色菌落数÷2μL。
n转化过程中，会不会出现假阳性的结果，为什么？如何排除？
答：转化过程中，经常出现假阳性。原因很多，如质粒、菌株不纯，载体自连等。详细的解释见《分子遗传学》。
七、注意事项
视时间安排，感受态的制备可由带课老师提前准备，学生从第（二）步开始做。
上述实验在冰上放置的时间可以调节，宁长勿短。
本实验5人分为一组。
第二天的实验最关键，带课老师须细心准备。
CaCl2溶液须过滤灭菌，由带课老师准备。
实验十一细菌质粒DNA的提取和纯化
质粒DNA的提取方法有三种：碱裂解法、煮沸法和去污剂（如Triton和SDS）裂解法。碱裂解法比较剧烈，可破坏碱基配对，使宿主细胞DNA变性，共价闭合环状DNA由于空间缠绕，两条链不会彻底分开。当外界条件到达复性条件时，质粒DNA的双链又迅速恢复原状，而较大的线性染色体DNA难以复性。
实验药品
（三）碱裂解法提取质粒DNA
1.将上述沉淀重悬于100μL冰预冷的溶液Ⅰ中，剧烈震荡（须使沉淀完全分
散）；
2.加入200μL溶液Ⅱ，盖紧管口，快速颠倒离心管5~10次；
3.加入150μL冰预冷的溶液Ⅲ，盖紧管口，温和地颠倒离心管5~10次；
4.10000r/min离心5min；
5.上清转移到另一新1.5mL离心管中；
6.加入2倍体积的乙醇，充分混匀，室温放置2min（若沉淀不充分，可加入
1/10体积3mol/L的醋酸钠）；
7.10000r/min离心5min；
8.弃上清，干燥沉淀；
9.加TE溶解沉淀，保存。
六、实验作业
n按上述实验步骤提取质粒DNA。
n思考本实验的关键步骤是什么？
答：本实验的关键是溶液Ⅰ重悬须充分，溶液Ⅲ混合须温和。
实验十二DNA的酶切检测及重组载体构建
一、实验原理：
?限制性内切酶可识别特定位点并切割DNA 产生粘性末端或平端的外源片段，经酶切的DNA 纯化处理后用于连接反应；
?选择克隆载体多克隆位点上相应的限制性内切酶切割，并用碱性磷酸酶处理防止载体自连；
?在连接酶的作用下将外源片段连接到载体上，实现外源片段的克隆。
附注：
2．克隆中用到的几种工具酶：
（ 1 ）限制性内切酶
限制性内切酶的一个活性单位（1U ）：指在50 μl 反应体系中，37 ℃下，经过1
小时的反应将1μg DNA 完全切割所需要的酶量。
限制性内切酶的star 活性：限制酶在某些条件下使用时，对DNA 切割的位点特异性可能降低，即可以切割与原来识别的特定DNA 序列不同的碱基序列，这种现象叫限制酶的star 活性。它的出现与限制酶、底物DNA 以及反应条件有关。
附注：
（ 2 ）碱性磷酸酶
细菌碱性磷酸酶（BAP ）和牛小肠碱性磷酸酶（CIAP ）都能催化水解DNA 、RNA 、dNTP 和NTP 上的5' －磷酸残基。比较而言，CIAP 更常用，因其可在70 ℃10 '内加热灭活或通过苯酚抽提而变性失活，同时CIAP 的活性比BAP 的高10 －20 倍。它主要用于：（1 ）克隆时去除载体的5'-P ，以防载体自连；（2 ）在用Kinase 进行5' 末端标记前，去除DNA 的5'-P 。
附注：
（ 3 ）连接酶
体外催化磷酸二酯键的形成可使用两种酶：大肠杆菌连接酶和T4噬菌体连接酶，但几乎在所有的克隆中T4噬菌体连接酶都是首选的酶，因其在正常的反应条件下能有效的将平端连接起来。
氯仿对眼睛、皮肤、粘膜及呼吸道都有刺激作用，它是致癌剂并可损伤肝脏和肾脏，操作时需戴手套、安全镜并在通风橱中进行。苯酚是强腐蚀剂，能引起严重烧伤。操作时应戴手套、安全镜、穿防护服，并在通风橱中进行。
遗传学实验指导 实验1 细胞有丝分裂与减数分裂 实验1.1 植物根尖细胞有丝分裂过程的制片与观察 目的要求 学习和掌握植物细胞有丝分裂制片技术；观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征及染色体的动态行为变化。 实验原理 有丝分裂是植物体细胞进行的一种主要分裂方式。有丝分裂的目的是增加细胞的数量而使植物有机体不断生长。在有丝分裂过程中，细胞核内的遗传物质能准确地进行复制，然后能有规律地均匀地分配到两个子细胞中去。植物有丝分裂主要在根尖、节间、茎的生长点、芽及其它分生组织里进行。将生长旺盛的植物分生组织经取材、固定、解离、染色、压片等处理即可以观察到细胞内的有丝分裂图象。如若需要进行染色体计数，则需进行前处理，即取材之后采用物理的或化学的方法，阻止细胞分裂过程中纺锤体的形成，使细胞分裂停止在中期。这时，染色体不排到赤道板上，而是散在整个细胞质中。这十分便于对染色体的形态、数目进行观察。 试剂和器材 1材料 均可以大蒜(Allium sativum 染色体数目2n=16)、玉米(Zea mays 染色体数目2n=20)、洋葱(Allium cepa染色体数目2n=16)或蚕豆(V icla faba染色体数目2n=12) 等根尖为实验材料。 2试剂 95％乙醇、冰乙酸、石炭酸品红、l mol／L HCl。 3器材 恒温培养箱、显微镜、水浴锅、载玻片、盖玻片、单面刀片、镊子、培养皿、量筒、吸水纸。 操作方法 1生根 植物根尖是植物的分生组织，取材容易，操作方便。植物根尖细胞分裂旺盛，因此，它是细胞有丝分裂相制备与观察的理想选取部位。大蒜、洋葱易于在水培、沙培、土培条件下生根。采用水培时要注意在暗处培养，以满足根生长条件，使根系生长旺盛。玉米和蚕豆种子可先用温水浸泡1天之后，再转入铺有多层吸水纸或纱布的培养皿中，上面盖双层湿纱布置于24～26℃温箱中培养，每天换水二次。 2取材 待根长至l.5~2.0 cm时，将根取下。若实验只需观察细胞有丝分裂的过程和各时期的特征，可将根尖直接放入Carnoy固定液(95％乙醇：冰乙酸=3：1)中固定；如果要观察染色体形态和数目，则必须对根尖进行前处理后才能固定。取材和固定必须要在细胞分裂高峰期进行，即分裂细胞占细胞总数最大值时进行，这样分裂细胞比例大，便于选择和观察。 不同的植物在不同的环境条件，其细胞分裂高峰的时间是不同的。大蒜和洋葱的细胞分裂高峰期通常
实用标准文案 遗传实验设计 一、相对性状显隐关系确定的实验设计 应用在微重,1 科学家选用萌发的普通甜椒的种子搭载“神舟”飞船例在从太空,力和宇宙射线等各种因素作用下生物易发生基因突变的原理培育出大果实“太空甜,返回后种植得到的植株中选择果实较大的个体,,且由单基因控制的完全显性遗传椒”。假设果实大小是一对相对性状设计一个请你用原有的纯种小果实普通甜椒和大果实甜椒为实验材料,以鉴别太空甜椒大果实这一性状的基因型。实验方案, 直接用纯种小果实与大果实杂交，观察后代的性状：解析 、如果后代全表现为小果实，则小果实为显性，大果实为隐性；1 ，则大果1、如果后代全表现为大果实或大果实与小果实的比例为1∶2实为显性，小果实为隐性。 马的毛色有栗色和白色两种。正常情况下，一匹母马一次只能生2 例控制，此基因位于常染色体上。现bB和一匹小马，假定毛色由基因在一个配种季节从该马提供一个自由放养多年的农场马群为实验动物，⑴如果后代毛色均为1头栗色公马和多头白色母马交配，群中随机抽取栗色；⑵如果后代小马毛色有栗色的，也有白色的。能否分别对⑴⑵结果判断控制马毛色基因的显隐性关系。若能，说明理由；若不能，设计出合理的杂交实验。 ）能。理由：如果栗色为隐性，则这匹公马1这道题比较开放。（解
，那么后代小马的基因Bb，白色母马的基因型为bbBB、的基因型为，即既有白色的也有栗色的。如果栗色为显性，则这匹bbBb型为和精彩文档． 实用标准文案 ，那么，多匹白色母马的基因型均为bb栗色公马的基因型为BB或Bb，和bb全为栗色；或后代小马的基因型为Bb，后代小马的基因型为Bb只有在栗色公马为显性纯合体的情况下才栗色和白色均有。综上所述，）不能。杂交方案：从会出现后代小马毛色全为栗色的杂交结果。（2马群中随机选择多对栗色母马与这匹栗色公马杂交（栗色×栗色）。如如果后代全部为栗色马，则栗色为显性，白色为隐性；果后代出现白马。则白色为显性，栗色为隐性。 二、验证遗传定律的实验设计 用纯种有色饱满籽粒的玉米与无色皱缩籽粒的玉米杂交（实验条3 例的性状表F全部表现为有色饱满，F自交后，件满足实验要求），F211，无色皱缩2%2%，无色饱满现及比例为：有色饱满73%，有色皱缩。回答下列问题：23% 定律。）上述一对性状的遗传符合1_________________（ ）上述两对性状的遗传是否符合自由组合定律？为什么？（2 ）请设计一个实验方案，验证这两对性状的遗传是否符合自由组合（3定律。（实验条件满足实验要求） 。___________________________；③；实验方案实施步骤：①____________
遗传实验部分历年真题回顾 【果蝇】100年来，果蝇作为经典模式生物在遗传学研究中备受重视。请根据以下信息回答问题。 1.（10四川卷，31II有删改）果蝇的某一对相对性状由等位基因（N，n）控制，其中一个基因在纯合时能使合子致死（注：NN,X n X n, X n Y等均视为纯合子）。有人用一对果蝇杂交，得到F1代果蝇共185只，其中雄蝇63只。 ①控制这一性状的基因位于染色体上，成活果蝇的基因型共有种。 ②若F1代雌蝇仅有一种表现型，则致死基因是，F1代雌蝇基因型为。 ③若F1代雌蝇共有两种表现型，则致死基因是。让F1代果蝇随机交配，理论上F2 代成活个体构成的种群中基因N的频率为。 2.（12·四川.31II有删改）果蝇的眼色由两对独立遗传的基因（A、a和B、b）控制，其中B、b仅位于X染色体上。A和B同时存在时果蝇表现为红眼，B存在而A不存在时为粉红眼，其余情况为白眼。 果蝇体内另有一对基因T、t与A、a不在同一对同源染色体上。当t基因纯合时对雄果蝇无影响，但会使雌果蝇性反转成不育的雄果蝇。让一只纯合红眼雌果蝇与一只白眼雄果蝇杂交，所得F1代的雌雄果蝇随机交配，F2代雌雄比例为3 ：5，无粉红眼出现。 ①T、t位于染色体上，亲代雄果蝇的基因型为。 ②F2代雄果蝇中共有种基因型，其中不含Y染色体的个体所占比例为。 ③用带荧光标记的B、b基因共有的特异序列作探针，与F2代雄果蝇的细胞装片中各细胞内染色体上 B、b基因杂交，通过观察荧光点的个数可确定细胞中B、b基因的数目，从而判断该果蝇是否可育。 在一个处于有丝分裂后期的细胞中，若观察到个荧光点，则该雄果蝇可育；若观察到个荧光点，则该雄果蝇不育。 3. （07全国卷，31有删改）已知果蝇刚毛和截毛这对相对性状由X和Y染色体上一对等位基因控制，刚毛基因（B）对截毛基因（b）为显性。现有基因型分别为X B X B、X B Y B、X b X b和X b Y b的四种果蝇。 （1）根据需要从上述四种果蝇中选择亲本，通过两代杂交，使最终获得的后代果蝇中，雄性全部表现为截毛，雌性全部表现为刚毛，则第一代杂交亲本中，雄性的基因型是，雌性的基因型是；第二代杂交亲本中，雄性的基因型是，雌性的基因型是，最终获得的后代中，截毛雄果蝇的基因型是，刚毛雌果蝇的基因型是。 （2）根据需要从上述四种果蝇中选择亲本，通过两代杂交，使最终获得的后代果蝇中雌性全部表现为截毛，雄性全部表现为刚毛，应如何进行实验？（用杂交实验的遗传图解表示即可） 4. (14·天津卷.9有删改)果蝇是遗传学研究的经典实验材料，其四对相对性状中红 眼（E）对白眼（e），灰身（B）对黑身（b），长翅（V）对残翅（v），细眼（R） 对粗眼（r）为显性。下图是雄果蝇M的四对等位基因在染色体上的分布。在用 基因型为BBvvRRX e Y和bbVVrrX E X E的有眼亲本进行杂交获取果蝇M的同时， 发现了一只无眼雌果蝇。为分析无眼基因的遗传特点，将该无眼雌果蝇与果蝇 :1 ①从实验结果推断，果蝇无眼基因位于号（填写图中数字）染色体上，理由 是。
实验一果蝇遗传性状的观察 背景知识 果蝇是在世界各地常见的昆虫,属于昆虫纲,双翅目,果蝇科,果蝇属（Drosophila）。果蝇属有3000多种，我国发现800多种，遗传学研究中通常用的是黑腹果蝇(D.melanogaster)。作为遗传学研究的材料，果蝇具有非常突出的优点。它形体小，生长迅速，繁殖率高，饲养方便；世代周期短（约12天即可繁殖一带）；突变性状多；染色体数目少，基因组小；实验处理十分方便，容易重复实验，便于观察和分析。果蝇的遗传学研究广泛而深入，尤其在基因分离、连锁、互换等方面十分突出，为遗传学的发展做出了突出的贡献。目前果蝇仍然是遗传学、细胞生物学、分子生物学、发育生物学等研究中常用的模式生物。 一、实验目的 1.掌握果蝇的基本特征及鉴别雌、雄果蝇的方法,熟悉常见突变型。 2.了解果蝇生活周期特征及各阶段的形态变化。 二、实验材料 野生型和几种常见的突变型黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）。 三、仪器设备 双筒立体解剖镜，培养瓶（粗平底试管或牛奶瓶）及麻醉瓶（与培养瓶一致的空瓶），白瓷板，毛笔。 四、药品试剂 乙醚，玉米粉，酵母粉，蔗糖，丙酸。 五、实验内容和步骤 （一）生活周期的观察 果蝇是完全变态昆虫，其完整的生活周期可分为4个明显的时期，即卵、幼虫、蛹和成虫（图1-1）用放大镜从培养瓶外即可观察到这4个时期，也可取出用立体解剖镜仔细观察。 果蝇的生活周期长短与温度关系很密切，低温使生活周期延长，生活力减低，高于30℃使果蝇不育甚至死亡。果蝇培养的最适温度为20~25℃，25℃培养条件下果蝇从受精卵到成虫约10天，其中卵和幼虫期5天，蛹4天。成虫果蝇在25℃时约成活15天。 卵：受精卵白色，椭圆型，腹面稍扁平，长约0.5mm，在前端背面伸出一触丝，他能使卵附着在事物上。 幼虫：受精卵经24h就可孵化成幼虫，幼虫经2次蜕皮到第3龄期体长可达4~5mm。肉眼观察可见幼虫一端稍尖为头部，上有一黑色沟状口器。 蛹：幼虫4天左右即开始化蛹。化蛹前3龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的表面（如培养瓶壁），渐次形成一个菱形的蛹，起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化变成深褐色，此时即将羽化。 成虫：刚从蛹壳中羽化出来的果蝇，虫体较肥大，翅还未展开，体表也未完全几丁质化，所以成半透明的乳白色。透过腹部体壁还可以观察到消化道和性
《遗传学实验》简介 课程名称：遗传学实验 课程性质：随课实验 课程属性：基础课 学时学分：学时16学分1 面向专业： 一、课程的任务和基本要求 遗传学实验是生物学所有专业的一门专业基础课程，是一门独立的实验课程，同时也是为了配合遗传学的教学而开设的一门实验课程,本课程由基础操作性、综合性和设计性等多层次实验内容构成，目的在于巩固和加深学生对遗传学知识的理解、验证遗传学理论、并初步掌握遗传学研究所必需的基本实验技术。在此基础上，进行一定比例的综合性、设计性实验，将实验理论和实验技能融为一体，从而培养学生的基本实验思想、实验方法、实验技能和综合应用能力。本课程的任务是从个体、细胞水平揭示遗传学的基本现象与规律，培养学生牢固掌握经典遗传学研究方法与技术，并初步掌握现代遗传学实验操作技能，熟悉遗传学分析方法，同时要求学生初步具备进行遗传学创新性研究的基本能力与素质。 二、实验项目 植物染色体核型分析 果蝇的培养及生活史和形态观察 小鼠骨髓染色体的制片及观察 人群中基因频率的调查 人类巴氏小体观察 三、有关说明 1、与其它课程和教学环节的联系 先修课程：动物学、植物学、生物化学、微生物学 后续课程：分子生物学、基因工程、人类遗传学 平行开设课程：细胞生物学 2、教材和主要参考书目 （1）教材：刘祖洞江绍慧遗传学实验高等教育出版社1987年第二版 （2）主要参考书目 ①张文霞等编遗传学实验指导高等教育出版社2005 年版 ②张贵友等编普通遗传学实验指导清华大学出版社2003 年 实验一1、洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察（３学时） 一、教学基本要求： 1. 掌握植物染色体压片法。 2. 掌握有丝分裂各时期的特征。 3. 掌握用秋水仙素诱发多倍体的一般方法 二、教学内容： 1、洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察 〖目的和要求〗 本次实验通过对植物根尖的制片和观察, 要求学生初步学会对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法，了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况,掌握有丝分裂各时期的特征。〖实验原理〗 有丝分裂是细胞均等增殖的过程, 是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中.细胞内每条染色体都能复制一份, 然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目,形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察（间期、早期、中期、后期、末期） 〖材料和方法〗 洋葱或大蒜或种子根尖 水浴锅、显微镜 卡诺氏固定液、石炭酸品红（或醋酸洋红）染色液，1N盐酸（或0.5%果胶酶+纤维素酶）,秋水仙素（0.1%）1、取材：大蒜、洋葱根尖，恒温箱
遗传实验设计专题复习 2020/3/18 一、纯合子、杂合子鉴定的实验设计 （1）自交：让某显性性状个体进行自交,若后代无性状分离，则可能为纯合体。 （2）测交：待测个体与隐性类型交配，若后代出现隐性类型则一定为杂合体，若后代只有显性性状个体，则可能为纯合体。 （3）花粉离体培养法：用花粉离体培养形成单倍体植株并用秋水仙素处理后获得的植株为纯合体，根据植株性状进行确定，如果植株只有一种表现型，则为纯合体。若有两种以上表现型，则为杂合体。 1. 现有3支试管分别装有红眼雄果蝇和两种不同基因型的红眼雌果蝇，请利用实验室条件设计最佳方案，鉴别并写出上述3支试管内果蝇的基因型。已经有1支试管，内装有白眼雄果蝇可以供实验使用。(已知红眼对白眼为显性，显性基因用B表示，位于X染色体上。) ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ __________________________________________________________。 二、世代关系判断的实验设计 基本思路：先做亲子假设，再做基因型和表现型分析
遗传学实验考题 1、固定植物材料的卡诺氏（Carnoy）固定液配方是什么？ 配方:无水酒精3份:冰醋酸1份或无水乙醇6份，氯仿3份，冰醋酸1份 2、固定动物材料的卡诺氏（Carnoy）固定液配方是什么？ 3、有丝分裂实验的原理是什么？ 实验原理：有丝分裂是真核细胞分裂的一种常见方式，存在于所有的细胞当中。这一过程的特点是：染色体复制一次，分裂一次，结果形成两个核，分裂为两个细胞，每个核中含有二倍体的染色体，染色体数目不减半。 4、有丝分裂实验的目的是什么？ 实验目的：①了解动植物细胞有丝分裂全过程。 ②掌握植物有丝分裂样品的制备方法，学会观察各 种有丝分裂的细胞 5、制作植物有丝分裂染色体标本的基本步骤有哪些？ 自来水浸泡蚕豆（1 至2天）——萌发3~4天——取根尖
（1~1.5cm）秋水仙素处理——卡诺氏固定液固定24小时,70%的酒精保存(4°C)（水洗）——0.1mol/L HCl 水解（60。C8至10分钟）——洗后用改良苯酚品红染色（20分钟）——压片法制片，观察（低倍到高倍） 6、制作植物有丝分裂染色体标本时需用哪些工具、器皿？用具：镊子，培养皿，温度计，温浴锅，刀片，载玻片，盖玻片，吸水纸，显微镜等。 7、制作植物有丝分裂染色体标本时需用哪些药品和染液？盐酸，碱性品红，改良苯酚品红染色酒精，秋水仙素，卡诺氏固定液 8、减数分裂实验的原理是什么？ 实验原理：在动、植物有性生殖过程中，由一个二倍体到单倍体的减数分裂过程：动物的精巢分化出精母细胞，精母细胞减数分裂，形成单倍染色体的精子。对精母细胞分裂过程的观察，可用来了解动物生殖细胞的形成过程。
Genetic Experiment Course code：81070100 Course Title：Genetic experiment Credit: 1.5 Semester classes:5 Teaching object: Profession of all undergraduate students in biology Pre-course: Biochemistry Microbiology Cell Biology Course Director: Zhang Jianmin . Title: Professor. Course Description： The object chiefly include experiments testing basic theory (the meiosis, three basic laws of the Genetics) and branching object (basic experiments of the inheritance of microorganism, the inheritance of quantitative character, the inheritance of population, the inheritance of human, the molecular inheritance and so on). As the students do the genetic experiments and study basic theory so that their ability to analyse and to solve a problem can heighten. Courses assessment: Course final results= Usually results multiplied by 70% + Examination results at the end multiplied by 30%. Designated teaching: Liu Zudong Jiang Shaohui. “Genetic Experiment” 1992. Beijing. Higher Education Press. A list of reference books: Yang Daxiang. “Genetic Experiment”.2004, Beijing. Science Press.
遗传学实验指导
实验须知 一、实验课的目的 1．培养锻炼科学的思维方法，实事求是的科学态度和严格的科学作风，提高分析问题解决问题的能力。 2．通过实验加深对理论知识的理解，学习掌握基本的实验技术和实验技能，为今后学习和研究打下一定的基础。。 3．培养学生爱好公物，爱护集体，团结互助的优良道德品质。 二、实验课要求 1．课前必须预习，了解基本原理和主要步骤及意义，写出预习报告。 2．上课必须穿白大褂，带实验讲义和实验报告纸。 3．遵守实验室制度，注意安全（水、电、暖、强酸、强碱、有毒物质等）。 4．实验中要正规操作，动手动脑主动进行实验；掌握关键，力求得出准确结果；仔细观察，认真思考，及时做好记录；综合分析得出正确的结果。 5．在实验过程中不诉大声喧哗，有问题及时请教老师或同学。 6．器材、药品等按规定使用，严禁乱用乱放。 7．爱护仪器，在实验过程中因个人未能安实验要求操作而导致的器材损坏，按规章制度进行赔偿。 8．实验结束后，相关器材要彻底清洗干净，放到指定原位。 9．废弃物按要求分类收集、处理。 10．值日生要打扫干净实验台、地面，并负责关好门窗、检查水、电等。 11．因故不能上实验者应有请假手续。
实验1 植物染色体压片技术 一、实验原理 植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。 二、实验目的 学习植物材料的固定方法和常规压片技术；观察染色体的动态变化。 三、实验材料 洋葱（Aillum cepa）根尖 四、实验器具和药品 1．用具：染色板，载玻片，盖玻片，指管，温度计，试剂瓶，滴瓶，镊子，解剖针，毛边纸。 2．药品：无水酒精，70%酒精，冰醋酸，对二氯苯或秋水仙素，醋酸钠，碱性品红，石炭酸，甲醛，山梨醇，二甲苯。 a卡诺固定液的配制：用3份无水酒精，加入1份冰醋酸（现配现用）。 b染色液的配制： 配方Ⅰ.石炭酸品红（Carbol.fuchsin），先配母液A和B。 母液A：称取3g碱性品红，溶解于100mL的70%酒精中（此液可长期保存）。 母液B：取母液A 10mL，加入90mL的5%石炭酸水溶液（2周内使用）。 石炭酸品红染色液：取母液B 45mL，加入6mL冰醋酸和6mL 37%的甲醛。此染色液含有较多的甲醛，在植物原生质体培养过程中，观察核分裂比较适宜，后来在此基础上，加以改良的配方Ⅱ，称改良石炭酸品红，可以普遍应用于植物染色体的压片技术。 配方Ⅱ：改良石炭酸品红。取配方Ⅰ石炭酸品红染色液2-10ml，加入 90-98ml45%的醋酸和1.8g山梨醇（sorbitol）。此染色液初配好时颜色较浅，放置二周后，染色能力显著增强，在室温下不产生沉淀而较稳定。 1N Hcl ：浓HCl82.5ml→1000ml 五、实验说明 1．有丝分裂主要发生在根尖、茎生长点及幼叶等部位的分生组织，根尖取材容易，操作和鉴定方便。根尖由于取材方便，是观察植物染色体最常用的材料，有些植物种子难以发芽，或仅有植株而无种子，也可以用茎尖作为材料； 2．植物细胞分裂周期的长短不尽相同，通常在十到几十小时之间，温度明显地影响分裂周期，对于一个不太熟悉的实验材料，最好在特定温度下长根，掌握有丝分裂高峰期，以便得到更多的有丝分裂的细胞。 3．预处理是降低细胞质的粘度，使染色体缩短分散，防止纺锤体形成，让更多的细胞处于分裂中期。预处理的方法有低温预处理和药物预处理。(1)低温预处理将材料浸在蒸馏水中，放在1-4℃冰箱内离体处理24h。此法效果很好，对染色体无破坏作用，染色体缩短均匀，简便易行，各种作物都适用。(2)药物预处理：①0.05-0.2%秋水仙素溶液与室温下处理2-4h，对抑制纺锤体活动效果明显，易获得较多的中期分裂相，且染色体收缩较直，有利于染色体结构的研究。②饱和对二氯苯溶液室温下处理3-5h，对阻止纺锤体活动和缩短染色体效果也较好，但对染色体小而多的植物来说不利于染色体的计数。③0.002-0.00mol/L8-羟基喹啉18℃条件下处理5-6h，可以引起细胞粘度的改变，导致纺锤体活动受阻，使中期染色体在赤道面上保持相应的排列位置。缢痕区也较为清晰。一般认为对中等或长染色体的植物较合适。④70ppm放线菌酮和250ppm8-羟基喹啉的混合液于25℃条件
高考生物遗传实验设计题总结（内部资料） 一、显隐性（完全显性）的判断（确定某一性状的显隐性） 基本思路是依据相对性状和性状分离的概念进行判断。以下野生型（或自然种群）指显性中既有纯合体也有杂合体。 1．若已知亲本皆为纯合体：杂交法（定义法） 2．若已知亲本是野生型（或自然种群）： 性状分离法：选取具有相同性状的多对亲本杂交，看后代有无性状分离。若有则亲 本的性状为显性性状，若无则亲本为隐性性状。 3．若已知亲本是野生型：可选取多对具有相对性状的亲本杂交，后代中比例大的 性状是显性性状。 4．若亲本未知类型 植物：方案一：杂交 分别自交 若后代只表现甲（或乙）性状，则甲（或乙）为显性 若后代甲、乙性状均出现，再分别自交，若甲（或乙）出现性状分 离则甲（或乙）为显性 方案二：分别自交 杂交 若甲（或乙）出现性状分离则甲（或乙）为显性 若甲、乙均未出现性状分离，再杂交，若后代为甲（乙）性状则甲 （乙）为显性 动物：将上述分别自交换为同性状的多对个体杂交。 注意：上述方法主要针对常染色体遗传，若是X 染色体则用下面方法。 5. X 染色体 ⑴亲本皆为纯合体：选具有相对性状的雌雄个体交配。 ⑵亲本是野生型（或自然种群）：选多对多对（或一雄多雌）具有相对性状的 雌雄个体交配。 二、显性性状个体是纯合子还是杂合子的判断（某一个体的基因型） 假设待测个体为甲（显性） ，乙为隐性 1．测交：（动物或植物）将待测显性个体与隐性类型杂交，若后代显性性状： 隐性性状=1：1，则为杂合子，若后代全为显性性状，则为纯合子。 甲×乙→全甲（纯合） 甲×乙→甲：乙=1：1（杂合） 2．自交：（植物、尤其是两性花） 将待测显性个体自交，若后代不发生性状 分离，则为纯合子，若后代显性性状：隐性性状=3：1，则为杂合子。 3．杂交：（动物）待测个体甲×多个同性状个体（结果同上） 4．单倍体育种：针对植物 三、确定某变异性状是否为可遗传变异 (变异仅由环境引起还是环 境引起基因变化导致)的实验探究 总的思路：探究变异是否遗传，实质是探究变异个体的遗传物质或基因型是否改变， 也就是要检测变异个体的基因型。一般要看其后代的情况，如果是遗传 甲×乙→甲 甲为显性乙为隐性 甲×乙→乙 乙为显性甲为隐性
遗传学实验课程教学大纲 课程名称：遗传学实验Experiment of genetics 课程编号：1313013224 课程类别：专业课 总学时数：33 实验时数：33 学分：1 开课单位：生命科学学院生物综合教研室 适用专业：生物科学 适用对象：本科（四年） 一、课程的性质、类型、目的和任务 遗传学实验课是为加深学生对所学的遗传理论课内容的理解开设的专业必修课，目的是使学生系统学习和掌握现代遗传学实验理论和实验技术，巩固和验证课堂教学内容，培养学生严肃、认真、客观的态度，提高学生的动手能力、综合分析问题、解决问题的能力和理论联系实际的能力，为培养21世纪教学和科研人员奠定基础。 二、本课程与其它课程的联系与分工 本课程与生物化学、微生物学、植物生理学，以及动、植物学，细胞生物学课程均有联系，所以在上述课开出后有利于该课的顺利开出。 三、课程内容及教学基本要求 [1]表示“了解”；[2]表示“理解”或“熟悉”；[3]表示“掌握”； 实验一、大蒜根尖的有丝分裂 有丝分裂各时期动态变化[1]；细胞的固定、解离、压片方法[3]； 实验二、细胞的减数分裂 植物花粉形成中的减数分裂过程[1]；染色体的动态变化[2]；制备减数分裂玻片标本的方法和技术[3]； 实验三、染色体核型分析 染色体核型分析的基本方法[3]；显微摄影技术[1]； 实验四、果蝇生活史及形态观察 果蝇的生活史[1]；果蝇几个突变型的形态特征[3]； 实验五、小白鼠骨髓染色体制片技术 小白鼠骨髓细胞制作染色体标片[3]；空气干燥法基本技术[1]； 实验六、果蝇唾腺染色体的观察 剖取果蝇唾腺技术[3]；制作唾腺染色体标本的方法[3]；多线染色体的特征[2]； 实验七、果蝇的单、双因子杂交、伴性遗传、三点测交实验 果蝇的杂交技术[3]；统计处理方法[3]；伴性遗传和非伴性遗传区别[1]；绘制遗传学图的原理和方法[3]； 实验八、人工诱发多倍体植物
植物基因组DNA的提取（CTAB法） 一、原理 植物组织中绝大部分是核DNA，它和组蛋白、非组蛋白结合在一起，以核蛋白（即染色质或染色体）的形式存在于细胞核内。CTAB是一种阳离子去污剂，可溶解细胞膜，它能与核酸形成复合物，在高盐溶液中（0.7mol/L NaCl）是可溶的，当降低溶液盐的浓度到一定程度（0.3mol/L NaCl）时从溶液中沉淀，通过离心就可将CTAB与核酸的复合物同蛋白、多糖类物质分开，然后将CTAB与核酸的复合物沉淀溶解于高盐溶液中，再加入乙醇使核酸沉淀，CTAB能溶解于乙醇中。 二、实验材料、仪器及试剂 1、仪器 水浴锅；混匀器；高速冷冻离心机；移液器；754紫外分光光度计；液氮罐；水平电泳槽；电泳仪；一次性手套；吸头；1.5 mL离心管。 2、材料与药品 植物材料，以幼苗、嫩叶含DNA高。 液氮；氢氧化钠；CTAB；Tris；氯仿；乙醇；RNA酶；硼酸；溴酚蓝；异戊醇；β-巯基乙醇；盐酸；异丙醇；EDTA；GoldView核酸染料；琼脂糖；甘油；DNA分子量标记（DNA marker）。 三、操作方法 （1）按1 g样品3 ml DNA提取液的比例，取相应的园艺植物叶片，加入DNA提取液后，在研钵中充分磨碎；取3ml左右研磨后的液样于5 mL离心管中，65℃水浴35分钟以上，其间颠倒混匀一次。 （2）加等体积的氯仿：异戊醇（24：1）溶液，上下颠倒摇匀后，10000 rpm下离心10分钟，取吸上清液于一新的离心管中。 （3）再加两倍体积的预冷异丙醇，上下颠倒混匀后，10000 rpm下离心10分钟，弃上清。 （4）用3 mL 70%乙醇洗涤沉淀，重复一次，在室温下倒置晾干。 （5）沉淀用100 uL TE溶液溶解，用TE（pH8.0）作空白对照，于紫外分光光度计上测定260nm、280nm和230nm吸收值，计算A260/A230和A260/A280的比值，并换算出核酸的含量。 （6）琼脂糖凝胶板的制备 （7）加样：将样品与溴酚蓝按4：1的比例混合，用移液器缓慢加入凝胶样品孔中，点样量为每孔5 μgDNA。 （8）电泳：点样端接负极，电泳开始时，可用较高的电压，如100伏特，这样可使样品很快进入胶内，而减少样品扩散，待样品进入胶内即可保持每厘米5伏特左右的电压，DNA 在电泳中向正极移动。 当溴酚蓝的区带移至距凝胶底部1-2cm，停止电泳，当胶板为10-15cm的长度时，电泳时间一般为2小时左右。 （9）观察与鉴定
④红:绿=1∶0 （2分）厚:薄=3∶1 （2分）（注：只有比例，没有性状不得分） 例题２：果蝇的灰身、黑身由常染色体上一对基因控制，但不清楚其显隐性关系。现提供一自然果蝇种群，假设其中灰身、黑身性状个体各占一半，且雌雄各半。要求用一代交配试验（即P→F1）来确定其显隐性关系。（写出亲本的交配组合，并预测实验结果） 答案：方案一P：多对灰身×灰身 实验结果预测：①若F1中出现灰身与黑身，则灰身为显性 ②若F1中只有灰身，则黑身为显性 方案二P：多对黑身×黑身 实验结果预测：①若F1中出现灰身与黑身，则黑身为显性 ②若F1中只有黑身，则灰身为显性 方案三P：多对灰身×黑身 实验结果预测：①若F1中灰身数量大于黑身，则灰身为显性 ②若F1中黑身数量大于灰身，则黑身为显性 3、确定两对基因在染色体上的位置（是否符合自由组合定律、位于一对还是两对同源染色体上） 基本思路：是否符合测交与自交的特殊比例、单倍体育种、花粉鉴定
结果结论：若符合，则在两对同源染色体上 若不符合，则在一对同源染色体上 例题：果蝇的长翅对残翅、正常肢对短肢、后胸正常对后胸变形、红眼对白眼分别为显性，控制这些性状的基因可能位于X、Ⅱ、Ⅲ这３对同源染色体上，请回答下列问题： （1）基因与染色体的关系为：基因在染色体上呈排列。 （2）果蝇性状中的残翅、短肢、后胸变形、白眼是由于导致的。 （3）已知控制果蝇眼色的基因位于X染色体上。请写出能根据后代眼色就识别出性别的亲本组合（基因型和表现型）。 （4）实验室内有各种已知基因性和表现性的雌雄果蝇若干，请任意选取两对性状的表现型和符合要求的基因型，用一次杂交确定控制这两对性状的基因是否位于两对同源染色体上（用遗传图解表示推理过程） 答案： 4、确定显性性状个体是纯合子还是杂合子（某一个体的基因型） 基本思路：6种杂交组合（如甲、乙为一对相对性状） 测交：甲×乙→全甲（纯合）甲×乙→有乙（杂合） 自交：甲→全甲（纯合）甲→有乙（杂合） 例题1：家兔的褐毛与黑毛是一对相对性状。现有四只家兔：甲和乙为雌兔，丙和丁为雄兔：甲、乙、丙兔为黑毛，丁兔为褐毛。已知，甲和丁的杂交后代全部为黑毛幼兔；乙和丁的杂交后代中有褐毛幼兔。 (1)用B-b表示控制毛色性状的等位基因，依次写出甲、乙、丁三只兔的基因型______。 (2)用上述四只兔通过一次交配实验来鉴别丙兔的基因型，应选用______兔与丙兔交配。若后代表型______，证实丙为纯合体；若后代表型______，则证实丙兔为杂合体。 答案：（1）BB、Bb、bb （2）乙全黑色有褐色 例题2：猫的长尾和短尾是受常染色体一对等位基因(D-d)控制的。一只短尾雌猫的父本也是短尾型，但它的母本和同胞中的雌雄个体却是长尾型。 (1)这只猫的父本基因型为______；母本基因型为______。 (2)这只短尾雌猫的基因型与其父本基因型______。 (3)若用回交法判断出尾型性状的显隐性关系，你采用的交配组合为______。如果回交后代有性状分离，______为显性；如果回交后代无性状分离，则______为显性。 答案：（1）dd或Dd Dd或dd （2）相同 （3）该短尾雌猫与父本回交短尾长尾 5、确定某变异性状是否为可遗传变异 基本思路：利用该性状的（多个）个体多次交配（自交或杂交） 结果结论：若后代仍有该变异性状，则为遗传物质改变引起的可遗传变异 若后代无该变异性状，则为环境引起的不可遗传变异
遗传学实验期末试卷 一、填空题，每空1分，共5分。 1、果蝇的系统地位是（动物界节肢动物门昆虫纲有翅亚纲双翅目果蝇科果蝇属果蝇）。 2、高压灭菌培养基时，一般温度为（121℃）时灭菌20分钟。 3、配制培养基时，丙酸的作用是（抑制霉菌的生长）。 4、果蝇唾腺染色体经过多次复制而并不分开，大约有1000~4000根染色体丝的拷贝，所以又称（多线染色体）。 5、基因型方差（VG）占表型总方差（Vp）的比值称为（遗传率）。 二、选择题，每题1分，共5分。 1、下列哪项是雄果蝇所特有的构造（C）。 A、腹板 B、环纹 C、性梳 D、跗节 2、些列那种病是伴性遗传（B） A、白血病 B、血友病 C、猫叫综合症 D、三体综合症 3、唾腺染色体上的横纹宽窄、浓淡是一定的，但在果蝇的特定发育时期，它们会出现不连续的膨胀，这称为（A） A、疏松期 B、蓬松期 C、膨胀期 D、特殊期 4、下列那种性状不是完全显性作用（C） A、单双眼皮 B、能否卷舌 C、头发疏密 D、有无足弓 5、数量性状的表现比质量性状受环境影响（A） A、大 B、小 C、无影响 D、相等 三、名词解释，每题2分，共10分。 1、测交与回交：测交是测定杂合个体的基因型而进行的未知基因型杂合个体与有关隐性纯合个体之间的交配。杂交产生的子一代个体再与其隐性(或双隐性)亲本的交配方式，用以测验子代个体基因型的一种杂交方式。 子一代和两个亲本的任一个进行杂交的方法叫做回交。在育种工作中，常利用回交的方法来加强杂种个体中某一亲本的性状表现。用回交方法所产生的后代称为回交杂种。 2、伴性遗传：性染色体是异形的，其实不仅形态上不相同，质量上也大不相同，以XY型而言，X染色体和Y型染色体有一部分是同源的，该部分的基因是互为等位的，其所控制的遗传行为常与常染色体基因控制的性状相同，另一部分是非同源的，该部分基因就不能互为等位，X染色体非同源部分的基因只存在于X染色体上，Y染色体非同源部分的基因只存在于Y染色体上，两者无配对关系，无功能上的联系，这些基因称半合基因，它们所控制的性状称为伴性性状，因为这些性状的遗传与性别有关，称为伴性遗传。 3、数量性状与质量性状：数量性状是指在一个群体内的各个体间表现为连续变异的性状，如动植物的高度或长度等。数量性状较易受环境的影响，在一个群体内各个个体的差异一般呈连续的正态分布，难以在个体间明确地分组。 质量性状指属性性状，即能观察而不能量测的性状，是指同一种性状的不同表现型之间不存在连续性的数量变化，而呈现质的中断性变化的那些性状。 4、基因分离定律：在杂合子细胞中，位于一对同源染色体上的等位基因，具有一定的独立
遗传学实验设计常见题型 1、确定一对相对性状的显隐性关系（确定某一性状的显隐性） 基本思路：Aa为显性。 方法：先自交后杂交或者先杂交后自交 例题：果蝇的灰身、黑身由常染色体上一对基因控制，但不清楚其显隐性关系。现提供一自然果蝇种群，假设其中灰身、黑身性状个体各占一半，且雌雄各半。要求用一代交配试验（即P→F1）来确定其显隐性关系。（写出亲本的交配组合，并预测实验结果） 答案：方案一P：多对灰身×灰身 实验结果预测：①若F1中出现灰身与黑身，则灰身为显性 ②若F1中只有灰身，则黑身为显性 方案二P：多对黑身×黑身 实验结果预测：①若F1中出现灰身与黑身，则黑身为显性 ②若F1中只有黑身，则灰身为显性 方案三P：多对灰身×黑身 实验结果预测：①若F1中灰身数量大于黑身，则灰身为显性 ②若F1中黑身数量大于灰身，则黑身为显性 2、确定某个体是纯合子还是杂合子（某一个体的基因型） 基本思路：纯合子只能产生一种配子。 方法：①测交法。前提是知道显隐性 ②自交法。看自交后代是否有形状分离，前提是该种生物能自交。 ③单倍体法或单倍体加倍后的纯合二倍体法。 ④花粉鉴定法。前提是实验原理给出不同花粉用同种试剂染色后颜色不同。 例题：家兔的褐毛与黑毛是一对相对性状。现有四只家兔：甲和乙为雌兔，丙和丁为雄兔：甲、乙、丙兔为黑毛，丁兔为褐毛。已知，甲和丁的杂交后代全部为黑毛幼兔；乙和丁的杂交后代中有褐毛幼兔。 (1)用B-b表示控制毛色性状的等位基因，依次写出甲、乙、丁三只兔的基因型______。 (2)用上述四只兔通过一次交配实验来鉴别丙兔的基因型，应选用______兔与丙兔交配。若后代表型______，证实丙为纯合体；若后代表型______，则证实丙兔为杂合体。 答案：（1）BB、Bb、bb （2）乙全黑色有褐色 3、确定某变异性状是否为可遗传变异 基本思路：利用该性状的（多个）个体多次交配（自交或杂交） 结果结论：若后代仍有该变异性状，且有一定的分离比，则为遗传物质改变引起的可遗传变异若后代无该变异性状，则为环境引起的不可遗传变异 例题：正常温度条件下（25℃左右）发育的果蝇，果蝇的长翅（V）对残翅（v）为显性，这一对等位基因位于常染色体上。但即便是纯合长翅品种（VV）的果蝇幼虫，在35℃温度条件下培养，长成的成体果蝇却表现为残翅，这种现象叫“表型模拟”。 （1）这种模拟的表现性状能否遗传？为什么？ （2）现有一只残翅果蝇，如何判断它是否属于纯合残翅（vv）还是“表型模拟”？请设计实验方案并进行结果分析。 方法步骤：
目录 验一人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 实验二小鼠骨髓细胞染色体标本的制备 实验三人类染色体G显带技术 实验四人类染色体C显带技术 实验五核仁形成区银染技术 实验六人类染色体G显带核型分析 实验七X染色质标本的制备 实验八姐妹染色单体交换 实验九微核检测技术 实验十ABO血型的测定及其基因频率的计算 实验十一苯硫脲尝味试验及其基因频率的计算 实验十二人类皮纹分析 实验十三遗传咨询 实验十四人类基因组DNA的提取 实验十五聚合酶链式反应（PCR） 实验十六DNA的琼脂糖凝胶电泳 实验十七PCR-RFLP技术 《遗传学》实验须知 一、医学遗传学实验目的和要求 医学遗传学实验课是医学遗传学课程的重要内容。实验课有助于加深和巩固基础理论知识，并进一步了解和掌握本学科的基本实验内容和操作技能。在培养学生分析问题、综合问题和解决问题能力方面具有重要作用。为此，要求学生做到以下几点： 1、实验课前做好预习，明确实验目的、实验原理。
2、复习有关理论内容。 3、熟悉实验的主要步骤。 4、初步估计和判定实验的可能结果。 二、实验操作过程中的注意事项 1、认真操作，仔细观察和综合分析实验所出现的现象与结果并及时记录。 2、如果实验结果与理论结果不一致，须及时进行科学分析，判断结果的可靠性，寻找出现误差的原因。 3、各种实验试剂用后放回原处，瓶盖封严，轻拿轻放。 4、使用微量加样器时，一定调整好取用量，按使用要求操作。 5、实验室应保持肃静，注意清洁卫生，实验中用过的废弃物品要及时清理，避免堵塞下水管道。 三、实验后的注意事项 1、实验后，整理清洁所用仪器、设备，注意放回原位，以备下次使用。 2、如有仪器损坏，要及时填写破损报告，并报告老师。 3、离开实验室前，检查并关闭门、窗、水、电。 四、实验室的意外处理 实验室如遇着火、烫伤等意外事件发生，必须镇静做紧急处理，并立即报告老师。 1、着火：如遇酒精灯推倒或其它原因着火，首先将一切易燃品移至远处，然后用水扑灭或者切断电源。 2、火伤：皮肤被火灼伤，用烫伤软膏涂抹，如伤势较重，立即送医院治疗。 3、如有毒药品泼溅到皮肤上，如EB，同位素等，应用大量清水进行清洗，必要时，去医院处理。． 4、割伤出血：遇玻璃割伤出血，可用碘酒或红药水消毒后，用纱布包扎。如有玻璃留在伤口，处理前应先取出。 实验一人体外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 【目的要求】 1、初步掌握人体外周血淋巴细胞短期培养的基本方法。 2、初步掌握人体外周血淋巴细胞染色体标本制备的技术方法 【实验原理】 人体外周血淋巴细胞培养(人体末梢血、微量全血短期培养)及其染色体标本制备是国内外研究显示染色体最常用和效果最好的方法。此方法取材方便，用血量少，操作简便，现已广泛应用于基础医学、临床医学的研究和染色体病的诊断等。 人体外周血中的小淋巴细胞，是已分化、处于G期的细胞，几乎不具有分裂增殖能力。0在离体血培养细胞中很难找到正在分裂的淋巴细胞，因此，需采用刺激细胞增殖的措施。人们发现从云豆(菜豆)中提取的植物血球凝集素(植物血凝素，PHA)可以刺激小淋巴细胞进行有丝分裂，即在PHA作用下，处在G期的小淋巴细胞可转化为淋巴母细胞。淋巴母细胞具0有分裂能力，重新进入增殖周期进行有丝分裂。在PHA作用下体外培养72小时左右，多数淋巴细胞已处于细胞周期的第二周期。此时，细胞分裂相较多，但都处于分裂的不同时期。一般来说，制作染色体标本主要是显示细胞分裂中期染色体，因中期染色体形态最为典型、最为清晰，最易辨认，是研究染色体的最好阶段。为了获得大量可供分析的中期染色体，需在终止细胞培养前数小时加入适当浓度
遗传实验设计专题复习 2018/3/18 一、纯合子、杂合子鉴定的实验设计 （1）自交：让某显性性状个体进行自交,若后代无性状分离，则可能为纯合体。 （2）测交：待测个体与隐性类型交配，若后代出现隐性类型则一定为杂合体，若后代只有显性性状个体，则可能为纯合体。 （3）花粉离体培养法：用花粉离体培养形成单倍体植株并用秋水仙素处理后获得的植株为纯合体，根据植株性状进行确定，如果植株只有一种表现型，则为纯合体。若有两种以上表现型，则为杂合体。 1. 现有3支试管分别装有红眼雄果蝇和两种不同基因型的红眼雌果蝇，请利用实验室条件设计最佳方案，鉴别并写出上述3支试管内果蝇的基因型。已经有1支试管，内装有白眼雄果蝇可以供实验使用。(已知红眼对白眼为显性，显性基因用B表示，位于X染色体上。) ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ ___________________________________________________________ __________________________________________________________。 二、世代关系判断的实验设计 基本思路：先做亲子假设，再做基因型和表现型分析