谷草转氨酶活性测定
实验原理：
酮戊二酸反应起催化作用,在一定的反应条件下,产生一定量的草酰乙酸,草酰乙酸随之脱羧成为丙酮酸(Pyruvic acid ,简写Pyr) 。反应至规定时间后,加入 2 ,4 - 二硝基苯肼及盐酸溶液终止反应,同时2 ,4 - 二硝基苯肼与酮酸中羰基加成,生成丙酮酸苯腙。在碱性条件下,苯腙呈红棕色,其颜色深浅与丙酮酸含量在一定范围内成正比,可用分光光度计以500nm 波长进行比色,测定丙酮酸含量以确定GOT活度。
主要试剂
（1）0. 05mol/ L Tris - HCL 缓冲液(pH7. 2) :0. 2mol/ L 三羟甲基氨基甲烷(24. 2g 三羟甲基氨基甲烷用蒸馏水溶解并定容至200ml) 50ml 和0. 2mol/ LHCl44. 2ml ,用蒸馏水稀释至200ml。
(2) 0. 1mol/ L 磷酸盐缓冲液:称取磷酸氢二钠(AR) 11. 928g ,磷酸二氢钾(AR) 2. 176g ,加
少量蒸馏水溶解并定容至1000ml。
(3) 2 ,4 - 二硝基苯肼溶液:称取2 ,4 - 二硝基苯肼19. 8mg ,用10mol/ L HCL10ml 溶
解后,加蒸馏水至100ml ,保存于棕色瓶中备用,此液可保存 3 个月。
(4) 0. 4mol/ L 氢氧化钠溶液:16g 氢氧化钠(AR)加蒸馏水溶解并定容至1000ml。
(5) 1mol/ L 氢氧化钠溶液:40g 氢氧化钠(AR)加蒸馏水溶解并定容至1000ml。
(6)丙酮酸标准液(2 μmol/ ml) :精确称取纯丙酮酸钠22. 0mg于100ml 容量瓶中,加0.
1mol/ L 磷酸盐缓冲液至刻度。此液应新鲜配制。
(7) GOT底物液(DL –天冬氨酸200mmol/ L , α-酮戊二酸2mmol/ L) :称取α- 酮戊二
酸29. 2mg和DL- 门冬氨酸 2. 66g置于一小烧杯中,加入1mol/ L 氢氧化钠20. 5ml 使溶解,并校正pH至7. 4 ,然后将溶液移入100ml 容量瓶内,用0. 1mol/ L 磷酸盐缓冲液定容至刻度。放置冰箱内保存。
实验方法：
1酶粗制剂的提取将新鲜植物材料剪碎,取鲜重0. 2g左右放入研钵,加0. 05mol/ L Tris - HCl 缓冲液(pH7. 2) 2. 0ml ,在冰浴中研磨,得到的匀浆用高速离心机20000 ×g离心20min ,上清液供测酶活度用
2谷草转氨酶( GOT)活度测定取10ml 试管2支,一支作测定管,分别加酶粗制剂0. 1ml 和GOT 底物液0. 5ml ,另一支作对照管,仅加酶粗制剂0. 1ml。将二管同时置37 ℃水浴,60min后取出,各管加2 ,4 二硝基苯肼液0. 5ml 终止反应,对照管再加GOT 底物液0.5ml。将二管再置37 ℃水浴中20min ,取出后各管加0.4mol/ L NaOH 5. 0ml ,混匀,10min 后用分光光度计比色,波长500nm ,蒸馏水调零点,读取吸光度。将测定管吸光度减去对照管吸光度,得吸光度差值,查工作曲线即可查得丙酮酸体积(ml) 。若查得的丙酮酸体积超过0. 2ml 时应将酶粗制液稀释后再进行测定,测定结果乘以稀释倍数即得丙酮酸体积V(ml) 。
工作曲线绘制:取10ml 试管 5 支,各管加0. 1mol/ L 磷酸盐缓冲液0. 1ml ,分别加GOT底物液0. 5、0. 45、0. 40、0. 35、0. 30ml ,丙酮酸标准液0 (对照管) 、0. 05、0. 10、0. 15、0. 20ml。置37 ℃水浴5min ,各管加2 ,4 - 二硝基苯肼溶液0. 5ml ,混匀,再置37 ℃浴中20min ,取出后各管加0. 4mol/ L 氢氧化钠溶液5ml ,混匀,10min后同上比色,读取各管吸光度。各管吸光度分别减去对照管吸光度,以各管丙酮酸体积为横座标,以相应的吸光度差值为纵座标绘制工作曲线
肝脏谷丙转氨酶活力测定 进入实验室要注意的问题 安全第一，在实验室中使用挥发性试剂时应在通风橱中进行，以免发生中毒事件；不得在实验室中随意使用明火，因为实验室中有许多易燃易爆药品，使用明火可能引起火灾或引发爆炸事件；不得在实验室吃东西，实验结束后也应将手洗净再吃东西。在实验室中不得嬉戏打闹，更不得用实验药品互相开玩笑。实验中使用药品应尽量节约，不得浪费药品，未使用完的药品因倒人废液缸或指定的容器中，切不可倒入原试剂瓶以免污染试剂。实验完成之前不能离开实验室，如有特殊原因要离开需经实验室负责人批准才能离开。每个实验台内的各种仪器的摆放顺序要牢记，离开实验室前要将仪器按顺序摆放好。养成一个好的习惯。 一．实验目的 了解转氨酶的性质及临床意义，并掌握谷丙转氨酶活力的测定方法 二．实验原理 在氨基酸的分解代谢过程中，联合脱氨基为大多数氨基酸的主要代谢方式，通过转氨基作用与氧化脱氨基的作用偶联而完成。本实验以丙氨酸和 ā-酮戊二酸作为谷丙转氨酶的作用的底物，利用内源性磷酸吡哆醛作为辅酶，在一定条件及时间作用后来测定所生成的丙酮酸的含量来确定其酶的活力。丙酮酸能与2，4二硝基苯肼结合，生成丙酮酸-2，4二硝基苯腙，后者在碱性条件溶液中呈棕色，基吸收光谱的峰为439-530nm，可用于测定丙酮酸的含量。 ā--酮戊二酸与能与2，4二硝基苯肼结合，生成相应的苯腙，但后者在碱性溶液中的吸收光谱与丙酮酸二硝基苯肼稍有差别，在520nm波长处 ā--酮戊二酸二硝基苯腙的吸光度远比丙酮酸2，4二硝基苯腙为低，因此在520nm处吸光度增加的程度与反应体系中的丙酮酸和 ā--酮戊二酸的摩尔比基本上呈线性关系。故可籍此可测定谷丙转氨酶的活力。 三、实验器材 容量瓶100ml 4个500ml 2个；电子天平；玻璃棒；研钵；试管5支；试管架；移液管0.5ml 2支；1ml 2支；5ml 1支；滴管1支；分光光度计，比色皿4个； 四.实验试剂 1标准丙酮酸溶液：准确称取纯化的丙酮酸钠62.5mg，溶于100ml 0.05mol/L H2SO4中，现用现配。 2、谷丙转氨酶底物：称取0.90g L-丙氨酸，29.2mg α-酮戊二酸，先溶于pH7.4 0.1mol/L 的磷酸缓冲液中。然后用1 mol/L NaOH 调节pH到7.4，再用pH7.4 0.1mol/L的磷酸缓冲液定容到100ml，贮存于冰箱中，可使用1周。 3、0.1mol/L pH7.4磷酸缓冲液：称取13.97g K2HPO4和2.69g KH2PO4溶于蒸馏水中，定容到1000ml。 4、0.02% 2,4-二硝基苯肼溶液：称取20mg 2,4-二硝基苯肼溶于少量的1mol/L HCl中。加热溶解，用1mol/L HCl定容到100ml。（后经试验发现取20mg 2,4 - 二硝基苯肼，溶于7ml11.6mol/L的浓盐酸，再定容至100ml效果更好） 5、0.4mol/L NaOH ：称取16g NaOH定容到1000ml。 6、0.9%生理盐水：称取0.9gNaCl，定容到100ml。
肝功能检查常见各项检测指标及其临床意义 全网发布：2013-12-04 17:28 发表者：张涛23219人已访问 一、谷丙转氨酶（ALT）： 最常见的肝功能检查项目之一，参考值为小于40单位，是诊断肝细胞实质损害的主要项目，其高低往往与病情轻重相平行。 临床意义： 在急性乙肝及慢性乙肝与肝硬化活动，肝细胞膜的通透性改变，谷丙转氨酶就从细胞内溢出到循环血液中去，这样抽血检查结果就偏高，转氨酶反映肝细胞损害程度。 但ALT缺乏特异性，有多种原因能造成肝细胞膜通透性的改变，如：疲劳、饮酒、感冒甚至情绪因素等等。上述原因造成的转氨酶增高一般不会高于60个单位，转氨酶值高于80个单位就有诊断价值，需到医院就诊。 另外需要注意，ALT活性变化与肝脏病理组织改变缺乏一致性，有的严重肝损患者ALT并不升高。因此肝功能损害需要综合其他情况来判断。 二、谷草转氨酶（AST）：谷草转氨酶的正常值为0～37μ/L，当ALT明显升高，谷草(AST)／谷丙(ALT)比值>1时，就提示有肝实质的损害。 临床意义：谷草转氨酶（AST）在肝细胞内与心肌细胞内均存在，心肌细胞中含量高于肝细胞，但肝脏损害时谷草转氨酶（AST）血清浓度也可升高，临床常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。 三、碱性磷酸酶（ALP）：正常参与值为30-90u/L。 临床意义：ALP主要用于阻塞性黄疸、原发性肝癌、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎等的检查。患这些疾病时，肝细胞过度制造ALP，经淋巴道和肝窦进入血液，同时由于肝内胆道胆汁排泄障碍，反流入血而引起血清ALP明显升高。 但由于骨组织中此酶亦很活跃。因此，孕妇、骨折愈合期、骨软化症。佝偻病、骨细胞癌、骨质疏松、肝脓肿、肝结核、肝硬变、白血病、甲状腺机能亢进时，血清ALP亦可升高，应加以鉴别。 四、谷氨酰转移酶（GGT）： 健康人血清中GGT水平甚低（小于40单位） 临床意义：主要来自肝脏，少许由肾、胰、小肠产生。GGT在反映肝细胞坏死损害方面不及谷丙转氨酶（ALT），但在黄疸鉴别方面有一定意义，肝脏内排泄不畅（肝内梗阻）和肝外梗阻（如胆道系统阻塞）等疾病，急、慢性病毒性肝炎、肝硬化：急性乙肝时，GGT呈中等度升高；慢性乙肝、肝硬化的非活动期，酶活性正常，若GGT持续升高，提示病变洁动或病情恶化； 急、慢性酒精性肝炎、药物性肝炎：GGT可呈明显或中度以上升高（300～1000U/L），ALT 和AST仅轻度增高，甚至正常。酗酒者当其戒酒后GGT可随之下降。其他如中毒性肝病、脂肪肝、肝肿瘤均可升高。 五、总蛋白（TP）、白蛋白（A）、球蛋白（G）：
血清转氨酶的活性测定 一、实验目的 1、了解分光光度计的使用方法 2、了解血清AL T测定方法的原理 二、实验原理 1、转氨基作用指的是一种氨基酸alpha-氨基转移到一种alpha-酮酸上的过程。转氨基作用是氨基酸脱氨基作用的一种途径。其实可以看成是氨基酸的氨基与alpha-酮酸的酮基进行了交换。结果是生成了一种非必需氨基酸和一种新的alpha-酮酸。反应由转氨酶和其辅酶磷酸吡哆醛催化。磷酸吡哆醛是维生素B6的衍生物。人体内最重要的转氨酶为谷丙转氨酶和谷草转氨酶。它们是肝炎诊断和预后的指标之一。 2、转氨酶活力的测定AL T作用于丙氨酸及α－酮戊二酸基质，反应生成谷氨酸和丙酮酸，丙酮酸可以与2，4 －二硝基苯肼定量反应生成丙酮酸苯腙，在碱性条件下呈红色，可以用分光光度法定量检测（500nm)。 三、实验器材、试剂 1、仪器723型分光光度计 2、试剂0.1mol/L磷酸盐缓冲液（PH7.4），AL T底物液（含丙氨酸（过量），α－酮戊二酸）、2，4 －二硝基苯肼溶液，0.4mol/LNaOH 溶液，2umol/L丙酮酸标准液。 四、实验步骤
1、标准曲线的绘制 按下表操作 置37℃水浴5min，各管加2，4-二硝基甲苯溶液1ml，混匀，再在37℃水浴放置20min，各管加0.4mol/L氢氧化钠2ml，混匀，10min 后，以对照组调零测A500.以各管吸光度为横坐标，以相应的ALT单位为纵坐标绘制标准曲线。 3、血清ALT的测定 按下表操作 置37℃水浴20min，各加入0.4mol/L的氢氧化钠2ml，混匀，10min 后，以对照组调零，测A500。并在标准曲线上查ALT活力单位。 五、实验数据级结果 1、数据记录
实验七尿淀粉酶活性测定 淀粉酶（AMY或AMS在体内的主要作用是水解淀粉，它随机地作用于淀粉分子内的 a—1, 4糖苷键生成葡萄糖、麦芽糖、寡糖及糊精。血清中的淀粉酶主要有胰型（P型）和 唾液型（S型）及其亚型同工酶组成，P型淀粉酶主要来源于胰腺，S型淀粉酶主要来源于唾 液腺。正常淀粉酶因分子量小，故可从肾小球滤过而由尿中排出。 【目的】 1、验证淀粉酶的催化作用。 2、观察淀粉及其水解产物分别与碘反应呈现的颜色变化。 【原理】血清及尿中的淀粉酶来源于胰腺和唾液腺，正常血清与尿中有一定活性。 Winslow 氏法测定尿和血清中淀粉酶活性是将试样作等比稀释，观察一系列试样在规定的 37C、30分钟的条件下，恰好能将0.1%淀粉溶液1ml水解（指加入碘液后不再呈蓝色）的 酶量定为淀粉酶的一个活性单位，乘以尿的稀释倍数，即可得知每项ml 尿液中的淀粉酶活性。 【器材】 试管（10mn X 100mr）、试管架、电热恒温水浴箱、吸管、洗耳球、滴管。 【试剂】 1 、 9%NaCl 2、0.3%碘液 3、0.1%淀粉溶液 【操作】 1 、准备尿液（自备）。 2、取 10支试管，编号，用吸管向管中加入0.9%NaCl 1ml。 3、用1ml吸管（注意应用刻度到头的）向第一管加尿液1ml，混合，再将试管中的液 体吸起，然后任其流回试管，如此重复三次，以便全管混匀，并借此冲洗吸管内壁。吸出此混合液1ml 移入第二管中。 4、用同法处理第二管使之混匀，并取出1ml 置于第三管中。依此类推，如此继续稀释 至第九管后，吸出1ml混合液弃之，这样既可获得分别含原尿液为1/2ml,1/4ml,1/8ml, ... 1/512ml 的不同浓度的尿稀释液。第十管不加尿液作为对照管。 5、从第十管起依次向各管迅速准确加入0.1%淀粉液2ml，迅速摇匀（是否充分混匀往
授课对象：06级检验1-5班 课时：2学时 血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定（赖氏法） 目标：1.掌握赖氏法测血清ALT的原理及注意事项 2.掌握试剂的配制熟练地制作标准曲线 3.规范地进行ALT测定 4.了解血清ALT测定的临床意义 实验用品：配制试剂用的各种器皿（烧杯、容量瓶、电炉、分析天平等）、37℃水浴箱、721型风光光度计、坐标纸等 原理： 丙氨酸和α-酮戊二酸在血ALT的作用下生成丙酮酸及谷氨酸，在酶反应达到规定时间时，加入2.4-二硝基苯肼-盐酸溶液以终止反应。生成的丙酮酸与入2.4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸入2.4二硝基苯腙，苯腙在碱性条件下显红棕色。根据显色之深浅，求得血清中丙氨酸氨基转移酶活力。 试剂： 1. 0.1molPH7.4磷酸盐缓冲液称取磷酸氢二钠（Na2HPO4AR）11.928g,磷酸二氢钾（KH2PO4AR） 2.176g，加少量蒸馏水溶解并稀释至1000mL。 2. ALP基质液称取DL丙氨酸[CHCH（NH）COOH]1.79g，α-酮戊二酸[COOH （COCOOH）29.2mg于烧杯中，加入0.1mol/L PH7.4磷酸盐缓冲液80mL,煮沸溶解后待冷，用摩尔NaOH溶液调节PH至7.4（约加入0.5ml），再用0.1mol/LPH7.4磷酸盐缓冲液稀释至100mL,混匀，加氯仿数滴，置冰箱保存数周。 3．1mmol/L2.4-二硝基苯肼溶液称取 2.4-二硝基苯肼[（NO）CHNHNH AR]19.8mg，用10mol/L HC110mL溶解，然后加蒸馏水至100mL，置棕色瓶内，冰箱保存。 4．0.4mol/L NaOH溶液。 5．2mmol/L丙酮酸标准液精确称取丙酮酸钠[CHCOCOONa AR]22.0mg于
实验二（2）转氨酶（GPT）活性的测定 一．研究背景及目的 转氨酶是生物体内重要的一类酶。转氨酶催化α-氨基酸的氨基与α-酮酸的酮基之间的相互转化而生成一种新的氨基酸与一种的新的酮酸，这种作用被称为转氨基作用[1]。转氨酶种类很多，体内除了赖氨酸、苏氨酸外，其余α-氨基酸都可参加转氨基作用并各有其特异的转氨酶。其中以谷丙转氨酶（GPT）和谷草转氨酶（GOT）最为重要。GPT与GOT活性的测定在临床上有着重要应用，可作为一些疾病诊断的指标。GPT催化的是谷氨酸与丙酮酸之间的转氨作用，GOT催化的是谷氨酸与草酰乙酸之间的转氨作用，草酰乙酸在柠檬酸苯胺溶液中可以转变为丙酮酸与二氧化碳。由于都有丙酮酸的生成，所以可以通过实验测定一定时间内丙酮酸的生成量而计算这两种转氨酶的活性。本实验以动物的新鲜肝脏和血清为材料，分别测定其中的GTP的活性，以此来研究该转氨酶活性的测定方法。 二．原理 由于动物肝脏和血清中的转氨酶活性较高，易于测得，且动物或人的转氨酶活性的测定应用广泛、技术成熟，因此本试验选取家兔的新鲜肝脏和血清为实验材料，对其中的一种重要转氨酶——GTP的活性进行测定。转氨酶活性测定的历史沿革建立了金氏法、穆氏法及赖氏法等较成熟的基本方法，本实验采用的是金氏法。该方法对转氨酶活力的定义是：血清在37℃，pH7.4条件下，与底物作用60min后，每生成1μM丙酮酸为一个转氨酶活性单位。丙酮酸含量的测定运用的是比色法。丙酮酸可与2,4-二硝基苯肼反应，生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，所以通过测定溶液在520nm下的光吸收值并与标准溶液比色便可计算出丙酮酸的含量，丙酮酸的含量对应于一定的转氨酶活力单位。 三．材料、试剂与仪器 材料： 新鲜家兔肝脏和血清 试剂[1]： ①磷酸盐缓冲液（pH7.4） 甲液：1/15 mol/L磷酸氢二钠溶液 乙液：1/15 mol/L磷酸氢二钾溶液 取甲液825ml，乙液175ml，混合，测得pH为7.4即可。
血清转氨酶测定 上海市第二人民医院朱福英综述 【摘要】血清转氨酶包括天冬氨酸转氨酶（AST，曾称为谷草转氨酶SGOT）和丙氨酸氨基转移酶（ALT，曾称为谷丙转氨酶SGPT）。是最常用的检测肝细胞坏死的血清特异性酶类试验。本文就近年来有关转氨酶的基本概念，正常值范围及临床意义的进展做一综述。 【关键词】肝功能试验；转氨酶 转氨酶试验仍是现今最常用的检测肝细胞坏死的血清特异性酶类试验，是临床判断有无肝损害、评估肝病严重程度，不同肝病的鉴别诊断以及判断治疗效果和预后的重要检验指标。常用转氨酶试验主要包括血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）。本文对于近年来转氨酶正常值范围的界定，转氨酶及其比值在各类肝脏疾病的临床意义做一综述解析，从而有助临床医生对于转氨酶试验的合理应用和正确解释。 一、血清转氨酶概述 转氨酶（曾称为氨基转移酶）试验是最常用的检测肝细胞坏死的血清特异性酶类试验。包括，天冬氨酸转氨酶（AST，曾称为谷草转氨酶SGOT）和丙氨酸氨基转移酶（ALT，曾称为谷丙转氨酶SGPT）。其分别催化天冬氨酸和丙氨酸上的氨基转化生成酮戊二酸上的酮基AST：天门冬氨酸+ a-酮戊二酸= 草酰乙酸+ 谷氨酸ALT：丙氨酸+ a-酮戊二酸= 丙酮酸+ 谷氨酸。人体内，ALT广泛存在于各组织细胞内，以肝细胞含量最多，其次为心肌，脑和肾组织。因而，ALT的升高，并非肝病所特有的，当骨骼肌肉损伤时，也可测得血清ALT水平轻度升高。可同时检测AST以及肌酸激酶，从而确定ALT的升高是否来源于肝脏损伤[1]。 AST广泛分布于人体各组织间。如，心脏、骨骼肌、肾、脑以及肝脏。肝细胞中的AST存在于细胞胞浆与线粒体内。胞浆和线粒体中的AST为免疫原性不同的同工酶，其中线粒体型AST活性占肝脏AST总活性80％左右，而正常人血清中可检出的AST 为胞浆型。 任一时刻检测转氨酶的血清活性，反应该酶从组织内释放入血循环与其在血循环中被清除的相对速率。临床实验室，检测转氨酶水平的各方法均参考国际临床化学家联合会（IFCC）一级文献的参考方法（PRMP）。以计量酶催化反应所得产物-丙酮酸和草酰
血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定 实验原理 国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。 ALT L-丙氨酸+ -酮戊二酸丙酮酸+L-谷氨酸 LDH（乳酸脱氢酶） 丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD++H2O 加入磷酸吡哆醛（P-5-P）是为了稳定ALT活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛不足造成测定结果假性偏低。(如心肌梗死、肝病和特别监护病人的结果)[1] 2.标本： 2.1病人准备：12小时禁食。 2.2类型：血清，肝素或EDTA血浆。 3.标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。 4.标本运输：常温条件下保存运输。 5.标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。 6.实验材料 6.1试剂申能ALT测定试剂盒（货号：141270171701试剂16×64ml 试剂26×16ml） 6.1.1试剂组成 试剂1（R1）： Tris缓冲液pH7.5100mmol/L
L-丙氨酸500mmol/L LDH（乳酸脱氢酶）≥1200U/L 试剂2（R2）： a-酮戊二酸 15mmol/L NADH 0.18mmol/L 磷酸吡哆醛试剂： Good’s缓冲液pH9.60.7mmol/L 磷酸吡哆醛0.09mmol/L 6.1.2试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.4变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.5注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。 6.2校准品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 6.3质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 7.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪 8.操作步骤 8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件 8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操
谷草转氨酶的正常值 养生之道网导读：谷草转氨酶的正常值是多少？谷草转氨酶是医学临床上肝功能检查的指标，用来判断肝脏是否受到损害。那么，谷草转氨酶的正常值是多少呢？一起来了解下。 一、谷草转氨酶的正常值： 谷草转氨酶，又名天门冬氨酸氨基转移酶，英文缩写AST 或GOT，是转氨酶中比较重要的一种。一个健康人正常情况下，谷草转氨酶的正常参考值为13～35U/L（单位每升）。正常情况下，谷草转氨酶存在于组织细胞中，其中心肌细胞中含量最高，其次为肝脏，血清中含量极少。谷草转氨酶主要存在于肝细胞线粒体内，当肝脏发生严重坏死或破坏时，才能引起谷草转氨酶在血清中浓度偏高。 谷草转氨酶偏高，肝炎患者转氨酶数值老是居高不下，反映肝细胞炎症始终未停止，肝细胞肿胀、坏死等病变持续存在。测定血清中此酶含量可用以协助诊断疾病和观察愈后。 二、谷草转氨酶的检测结果意义： 1、显着增高：各种急性肝炎，大手术后。 2、中度增高：肝癌、肝硬化、慢性肝炎、胆道阻塞性疾病。 3、轻度增高：进行性肌肉损害，胸膜炎、肾炎、肝炎等。
三、谷草转氨酶高的临床意义： 1、谷草转氨酶高可以提示心肌梗死或心肌炎。 2、谷草转氨酶高可以反映肝细胞损伤严重，甚至患者已经到了肝硬化的程度。 3、谷草转氨酶高更能反映肝细胞受损伤的严重程度。 四、影响谷草转氨酶的因素： 临床上，假如乙肝（乙型病毒性肝炎）病程过长、慢性化程度高、肝细胞实质损害重、预后较差者，通常表现为谷草转氨酶偏高，谷丙转氨酶/谷草转氨酶小于1.0。 早期肝硬化（liver及肝硬化（liver患者也会表现谷草转氨酶偏高，谷丙转氨酶/谷草转氨酶比值均在1.0以下。 健康人的谷草转氨酶水平也有可能暂时超出正常范围。剧烈运动、过于劳累或者近期吃过油腻食品，都可能使谷草转氨酶暂时偏高。 假如在检查肝功能前一晚加班工作，没睡好觉，或是体检前早餐时吃了油炸的东西，检查结果中谷草转氨酶可能就会超出正常范围。一个人刚刚在操场上跑了几圈，就立即检查他的谷草转氨酶水平，结果也可能会高出正常范围。 看了以上的介绍，现在你知道谷草转氨酶的正常值是多少了吧。体检时发现异常，最好再多做一次检查哦。
实验五血液中谷丙转氨酶活力的测定 【目的和要求】 了解转氨酶在代谢过程中的重要作用及其在临床诊断中的意义，学习转氨酶活力测定的原理和方法。 【原理】 生物体内广泛存在的氨基移换酶也称转氨酶，能催化α-氨基酸的α-氨基与α-酮基酸的α-酮基互换，在氨基酸的合成和分解、尿素和嘌呤的合成等中间代谢过程中有重要作用。转氨酶的最适pH接近7.4，它的种类甚多，其中以谷氨酸-草酰乙酸转氨酶（简称谷草转氨酶）和谷氨酸-丙酮酸转氨酶（简称谷丙转氨酶）的活力最强。它们催化的反应如下。 正常人血清中只含有少量转氨酶。当发生肝炎，心肌梗死等病患时，血清中转氨酶活力常显著增加，所以在临床诊断上转氨酶活力的测定有重要意义。 测定转氨酶活力的方法很多，本实验采用分光光度法。谷丙转氨酶作用于丙氨酸α-酮戊二酸后，生成的丙酮酸与2，4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸2，4-二硝基苯腙。 丙酮酸2，4-二硝基苯腙加碱处理后呈棕色，可用分光光度法测定。从丙酮酸2，4-二硝基苯腙的生成量，可计算酶的活力。 【操作方法】
2,4-硝基苯肼可与有酮基的化合物作用形成苯腙。底物中的α-酮戊二酸与2，4-二硝基苯肼反应，生成α-酮戊二酸苯腙。因此，在制作标准曲线时，须加入一定量的底物，（内含α-酮戊二酸）以抵消由α-酮戊二酸产生的消光影响。 先将试管置于37℃恒温水浴中保温10min以平衡内外温度。向各管内加入0.5ml2，4-二硝基苯肼溶液后再保温20min，最后，分别向各管内加入0.4mol/L氢氧化钠溶液5ml。在室温下静置30min，以0号管作空白，测定520nm的光吸收值。用丙酮酸的微摩尔数为横坐标，光吸收值为纵坐标，画出标准曲线。 2．酶活力的测定：取2支试管并标号，用第1号试管做为未知管，第2号试管做为空白对照管。各加入谷丙转氨酶底物0.5ml,置于37℃水浴内10min，使管内外温度平衡。取血清0.1ml加到第1号试管内，继续保温60min。到60min时，向两支试管内各加入2，4-二硝基苯肼试剂0.5ml，于37℃保温20min,然后再向2支管中加入0.4mol/L氢氧化钠溶液5ml。在室温下静置30min后，测定未知管的520nm波长光吸收值（显色后30min 至2小时内其色度稳定）。在标准曲线上查出丙酮酸的微摩尔数。（用1μmol丙酮酸代表1.0单位酶活力）。计算每100ml血清中转氨酶的活力单位数。 【试剂和器材】 一`试剂 1．试管及试管架 2．吸管 3．恒温水浴 4．分光光度计 二`器材 1．0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4） 2．2.0μmol/ml丙酮酸钠标准溶液。 取分析纯丙酮酸钠11mg溶解于50ml磷酸缓冲液内[当日配制]。 3．谷丙转氨酶底物。 取分析纯α-酮戊二酸29.2mg DL-丙氨酸1.78g克置于小烧杯内，加1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸调整pH至7.4后，加磷酸缓冲液至100ml。然后加氯仿数滴防腐。此溶液每毫升含α-酮戊二酸2.0μmol，丙氨酸200μmol。[在冰箱内可保存一周]。 4．2，4-二硝基苯肼溶液。 在200ml锥形瓶内放入分析纯2，4-硝基苯肼19.8mg，加100ml 1 mol/L盐酸。把锥形瓶放在暗处并不时摇动，待2，4-二硝基苯肼全部溶解后，滤入棕色玻璃瓶内置[冰箱内保存]。 5．0.4mol/L氢氧化钠溶液。 6．人血清[冰箱内保存]
实验八 肝脏谷丙转氨酶活力测定 实验类型：验证性实验 相关知识 1. 酶活力： 2. 酶活力单位(即酶含量的多少) 国际单位 习惯单位：谷丙转氨酶在37度与底物作用30min 后，能产生2.5ug 的丙酮酸者为一个谷丙转氨酶活力单位 3.转氨酶 4 谷丙转氨酶 一、 实验目的 1． 了解转氨酶的性质及临床意义 2． 掌握谷丙转氨酶活力的测定方法 二、实验原理 丙氨酸及α－酮戊二酸作用为谷丙转氨酶的作用底物，利用内源性磷酸吡哆醛作辅酶，在一定条件下及时间作用后测定所生成的丙酮酸的量来确定酶活力。 丙酮酸能与2,4－二硝基苯肼结合，生成丙酸－2,4二硝基苯腙，后者在碱性溶液中呈现棕色，其吸收光谱的峰为439~530nm ，可用于测定丙酮酸的含量。 α－酮戊二酸也能与2,4－二硝基苯肼结合，生成相应的苯腙，但后者在碱性溶液中吸收光谱为与丙酸－2,4二硝基苯腙的吸光度有差别，在520nm 波长比色时，丙酸－2,4二硝基苯腙吸光度高出3倍。 在520nm 处吸光度增加的程度与反应体系中丙酮酸与α－酮戊二酸的摩尔比基本上呈线性关系，故可以测定谷丙转氨酶的活力。 三、实验器材、试剂、材料 1． 新鲜猪猪脏 2． 722型分光光度计、剪刀、吸管 3． 标准丙酮酸溶液；谷丙转氨酶底物；0.1mol/L 磷酸缓冲液（pH7.4）；0.02%2,4－二硝基 苯肼；0.4mol/L NaOH 溶液 2 ＋ 辅基为磷 2 2 + + ‘ ‘
四、实验操作步聚 1.肝匀浆制备 （1）将猪肝脏用生理盐水冲洗，滤纸吸干，称取肝脏0.25g，剪成小块，置于玻璃匀浆管内（或小研砵中），加入2.25ml预冷的pH7.40.1%mol/L磷酸缓冲 液，制成10%肝匀浆。（每四组1份） （2）吸取肝匀浆0.1ml于另一试管中，加入预冷的0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4） 4.9ml摇匀，为稀释肝匀浆（稀释50倍）（每四组1份） 2.谷丙转氨酶活力测定（每组做1份） 取试管4支按下表加液 五、实验结果与讨论 2.每毫升稀释肝匀浆谷丙转氨酶活力单位（谷丙转氨酶活力计算：规定酶在37度与底物 作用30min后，能产生2.5ug的丙酮酸者为一个谷丙转氨酶活力单位） 3.每克肝脏谷丙氨酶的活力单位。
货号: QS1900 规格：50管/24样谷丙转氨酶（GPT）活性测定试剂盒说明书 可见分光光度法 正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定 测定意义： GPT（EC 2.6.1.2）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化氨基酸和酮酸转氨基反应，在氨基酸代谢中具有重要作用。此外，哺乳动物肝细胞GPT活性很高，当肝细胞坏死，GPT释放到血液中，血清GPT活性显著增高。因此，GPT被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。 测定原理： GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应，生成丙酮酸和谷氨酸；加入2,4-二硝基苯肼溶液，不仅终止上述反应，而且与酮酸中的羰基加成，生成丙酮酸苯腙；苯腙在碱性条件下呈红棕色，可以在505nm读取吸光值并计算酶活力。 自备实验用品及仪器： 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 试剂的组成和配制： 提取液：30mL×1瓶，4℃保存。 试剂一：液体5 mL×1瓶，4℃保存； 试剂二：液体5 mL×1瓶，4℃避光保存； 试剂三：液体50 mL×1瓶，4℃保存； 样品测定的准备： 1、细菌、细胞或组织样品的制备： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 测定操作表： 1、分光光度计预热30min以上，调节波长至505nm，蒸馏水调零。 第1页，共2页
丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(单试剂速率法) 简介： 转氨酶是催化α-氨基酸和α-酮酸之间氨基转换反应的一组酶，丙氨酸氨基转移酶(ALT)旧称谷丙转氨酶(GPT)主要存在于肝细胞浆内，细胞内ALT 浓度远高于血清，肝细胞破坏后，血清ALT 立即迅速升高，因此谷ALT 被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。 Leagene 丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测试剂盒(单试剂速率法)其检测原理是丙氨酸氨基转移酶催化丙氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，丙酮酸与NADH 经LDH 催化成NAD +，上述方法实际为ALT 速率法，在上述偶联反应中，NADPH 的氧化速率与样本中 酶活性呈正比。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 准备样品： ① 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定， -20℃保存1个月有效，用于ALT/GPT 的检测。 ② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存1个 月有效，用于ALT/GPT 的检测。 ③ (选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的ALT/GPT 含量。 2、 分光光度计检测：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避 免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。 编号 名称 TE0125 100T TE0125 200T Storage ALT 检测液(R) 成分 终浓度 2×50ml 2×100ml 4℃ 避光 Tris 缓冲液 100mM L-丙氨酸 500mM 酮戊二酸 15mM NADH 0.22mM LDH 1700U/L 防腐剂 15mM 使用说明书 1份 加入物 空白管 测定管
谷草转氨酶究竟是指的什么 谷草转氨酶在目前的临床上，是在医学方面化验肝功能指标的，可以判断出肝功能是否有受损，一般正常人的肝脏谷草转氨酶的正常值是在规定范围之内，如果超出了这个正常范围之内，说明人的身体可能会正在受到肝脏疾病的困扰，需要及时的去诊断，只有这样才能保证不会出现问题。 ★分类 肝内的谷草转氨酶有2种同工酶，分别存在于肝细 胞的线粒体(mAST)和胞浆内(sAST)。在肝细胞轻度病变时，仅sAST释放入血;而当病变严重时，mAST也会相继释放入血。故血清AST活性随肝细胞损害的程度增高。 在HBV感染的肝炎和肝病时，AST随ALT较小幅度升高，或虽幅度较大而时间短暂，可能主要是sAST，临床意义与ALT相同;AST增高超过ALT，虽幅度并不太大而持续时间很长，可能主要是mAST，提示病变的慢性化和进展性。
★机理 正常情况下，谷草转氨酶存在于组织细胞中，其中心肌细胞中含量最高，其次为肝脏，血清中含量极少。谷草转氨酶主要存在于肝细胞线粒体内，当肝脏发生严重坏死或破坏时，才能引起谷草转氨酶在血清中浓度偏高。谷草转氨酶偏高，肝炎患者转氨酶数值老是居高不下，反映肝细胞炎症始终未停止，肝细胞肿胀、坏死等病变持续存在。测定血清中此酶含量可用以协助诊断疾病和观察愈后。 ★正常值 谷草转氨酶正常值是4-40U/L(单位每升)。 由于医院使用试剂的不同，以上正常值只供参考。 ★检测方法
空腹12小时取静脉血。也就是说，在检查谷草转氨酶前12小时，应保持空腹，不能进食，否则会引起检查结果出现偏差。 ★临床症状 临床上，如果乙肝病程过长、慢性化程度高、肝细胞实质损害重、预后较差者，通常表现为谷草转氨酶偏高，谷丙转氨酶/谷草转氨酶小于1.0。早期肝硬化及肝硬化患者也会表现谷草转氨酶偏高，谷丙转氨酶/谷草转氨酶比值均在1.0以下。谷草转氨酶高的临床症状，也是肝炎的常见症状，一般有低烧、厌油、恶心、呕吐、乏力、食欲差、肝脏肿痛等。 总之，如果发现自己谷草转氨酶高了，不要过于紧张，不要担心自己患了严重的肝脏疾病，但是也一定要给予足够的重视，好好休息，及时接受正规复查和治疗。 ★肝功能指标 谷草转氨酶是肝功能检查中的一项重要指标，高了说明肝脏
3.8.2.1小鼠肝、肾、心组织ALT含量测定 1实验原理 谷丙转氨酶作用于由丙氨酸及α-酮戊二酸组成的基质，在一定的反应条件下，产生一定量的丙酮酸。在酶反应到规定时间时，加入2,4-二硝基苯肼，在当量浓度的酸性条件下，终止了酶反应。2,4-二硝基苯肼分别与反应产生的丙酮酸及剩余的基质α-酮戊二酸形成各自对应的2,4-二硝基苯腙。在碱性条件下，虽然二种苯腙分别显出红棕色，但由于丙酮酸生成的颜色较深，以同等克分子计算，在480-530nm波长范围内其浓度约为α-酮戊二酸生成的颜色的3倍，利用这一差别可以反映出丙酮酸的生成量。本实验设谷草转氨酶活力为：样品液与ALT 基质液在37℃下反应60min时每生成1μmol丙酮酸所需的酶量为1个活力单位（U）。 2试剂配制 （1）0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4） 称取NaH2PO4.2H2O 2.96495g，Na2HPO4.12H2O 29.0142g，溶解于蒸馏水中，定容到1000mL。 （2）20μmol/L丙酮酸钠标准溶液 称取22mg丙酮酸钠，溶解于0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）100mL中。现配现用。 （3）ALT基质液 称取α-酮戊二酸29.2mg，DL-丙氨酸1.78mg（L-丙氨酸0.85mg）溶解于30mL 0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.4）中，溶解后校正pH至7.4，再用pH7.4的磷酸缓冲液定容至100mL，置冰箱中保存备用（可保存一周）。可加入氯仿数滴防腐。（4）0.02% 2，4—二硝基苯肼溶液 称取20mg2，4—二硝基苯肼先溶解于10 mL纯盐酸中，电炉加热助溶，待2，4—二硝基苯肼全部溶解后，用蒸馏水稀释至100mL，过滤后盛于棕色中，置冰箱中保存备用。 （5）1mol/L NaOH溶液： 称取4g NaOH溶解于蒸馏水后，定容到100mL。 （6）0.4 mol/L NaOH溶液
实验九&十血液中转氨酶活力的测定（分光光度法） 本实验八人一组（根据分光光度计来确定） 一、目的要求： 1、了解转氨酶的重要作用及其在临床诊断中的意义。 2、学习转氨酶活力测定的原理和方法。 二、原理：（谷丙转氨酶和丙酮酸的反应方程式） 生物体内广泛存在的氨基移换酶也称转氨酶，能催化α-氨基与丙酮酸的α-酮基互换，在氨基酸的合成和分解，尿素和嘌呤的合成等中间代谢过程中有重要作用。转氨酶的最适pH接近7.4，它的种类很多，其中以谷氨酸-草酰乙酸转氨酶和谷氨酸-丙酮酸转氨酶（简称谷丙转氨酶）的活力最强。正常人血清中只含有少量转氨酶，当发生肝炎、心肌梗死等病患时，血清中转氨酶活力常显著增加，所以在临床诊断上转氨酶活力的测定有重要意义。 本实验采用分光光度计法。谷丙转氨酶作用于丙氨酸和α-酮戊二酸后，生成的丙酮酸与2，4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸2，4-二硝基苯腙（催化反应方程式）。丙酮酸2，4-二硝基苯腙加碱处理后呈棕色，可用分光光度法（520nm）测定。从丙酮酸2，4-二硝基苯腙的生成量，可以计算酶的活力。 三、操作： 实验九标准曲线的绘制（由于时间关系，只做一组数据，不要重复） 1、向试管中加入试剂（有改动）：取6支试管，分别标上0、1、 2、 3、 4、5六个号。按表中所列的次序添加各种试剂（由于后面测定样品时有对照实验，所以不需要加入谷丙转氨酶底物，以蒸馏水补齐；不需要保温10分钟来平衡内外温度）。 2、向各管内加入0.5mL 2，4—二硝基苯肼溶液后37℃保温20分钟。 3、分别向各管内加入0.4mol/L氢氧化钠溶液5mL（丙酮酸2，4-二硝基苯腙加碱处理后呈棕色）。在室温下保温静置30分钟，以0号管做空白，测定A520nm的吸光度。用丙酮酸的摩尔数做横坐标，光吸收值为纵坐标，画出标准曲线。
血清丙氨酸氨基转移酶测定标准操作规程 1 检验申请 单独验项目申请：血清丙氨酸氨基转移酶测定(缩写ALT)；组合项目申请：血生化中肝功能测定。临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理 2.1标本采集 2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。 2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。 2.1.3急诊标本应记录采集时间、送检时间、接收时间。 2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 2.1.5下列标本为不合格标本 2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。 2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。 2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。 2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。 2.2标本保存 2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。 2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定48h，普通冰箱中（2～8℃）稳定7天。-20℃保存稳定30天。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。 2.3 标本采集的注意事项 2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，和12h 以上禁食空腹状态。 2.3.2 一般采用血清，可以使用EDTA 、枸橼酸盐、草酸盐抗凝的血液标本，但肝素抗凝剂可引起反应液混浊。 3 方法原理 测定反应以如下的原理进行： ＋LDH ＋ALT 乳酸＋NAD 丙酮酸＋NADH＋H ??→?+??→?-+ 丙酮酸谷氨酸酮戊二酸丙氨酸α ALT 催化L-丙氨酸的氨基转移至α-酮戊二酸，生成丙氨酸和L-谷氨酸，LDH 催化丙酮酸生成乳酸，同时将NADH 氧化成NAD+。NADH 吸光度的下降速率和ALT 的活力成正比。 4 试剂及其他用品 4.1 试剂：丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。 4.2 试剂盒保存：未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定28 天。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 4.3 试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。 4.4 试剂盒主要成分：
1,谷草转氨酶:又名天门冬氨酸氨基转移酶，是转氨酶中比较重要的一种，分别存在于肝细胞线粒体和细胞胞浆内。肝功能检查的指标，用来判断肝脏是否受到损害。 2,谷丙转氨酶((GPT、ALT)：谷丙转氨酶顾名思义是谷氨酸和丙酮酸之间的氨基转移酶，(蛋白质代谢时的生物化学反应形式之一就是氨基酸分子上氨基发生转移).GPT主要存在于肝细胞浆内，其细胞内浓度高于血清中1000-3000倍。只要有1%的肝细胞坏死，就可以使血清酶增高一倍。因此，GPT被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。 3,胆红素：红细胞中血红蛋白代谢产物。体内的胆红素大部分来自衰老红细胞裂解而释放出的血红蛋白。血红蛋白分子中的血色素会分解成为正铁血红素和血红素。正铁血红素生成胆绿素,胆绿素再生成胆红素。经肝脏处理后的胆红素叫直接胆红素，反之叫间接胆红素。胆红素组成胆汁的重要成分，储存在胆囊,随胆汁排入肠道，最后经大便排出，少部分经肠道再吸收入血经肾脏随尿排出。间接胆红素与直接胆红素之和就是总胆红素。上述的任何一个环节出现障碍，均可使总胆红素增高，人就发生黄疸。如果红细胞破坏过多，产生的间接胆红素过多，肝脏不能完全把它转化为直接胆红素，可以发生溶血性黄疸；当肝细胞发生病变时，或者因胆红素不能正常地转化成胆汁，或者因肝细胞肿胀，使肝内的胆管受压，排泄胆汁受阻，使血中的胆红素升高，这时就发生了肝细胞性黄疸；一旦肝外的胆道系统发生肿瘤或出现结石，将胆道阻塞，胆汁不能顺利排泄，而发生阻塞性黄疸。肝炎患者的黄疸一般为肝细胞性黄疸，也就是说直接胆红素与间接胆红素均升高，而淤胆型肝炎的患者以直接胆红素升高为主 5,总蛋白: 血液(准确称血桨或血清)中蛋白质总量.增高：主要是血清中水分减少，使总蛋白浓度相对增高，如高度脱水所致血液浓缩（腹泻、呕吐、休克、高热、大量出汗）及多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等；慢性肾上腺皮质功能减退时，钠丢失继发水分丢失，进而促使血浆出现浓缩现象。降低：各种原因引起的水钠潴留，使血浆被稀释，或静脉注射过多的低渗溶液而形成血浆中总蛋白降低。肝功能障碍，则肝脏合成蛋白质减少，主要以白蛋白的 下降明显。 6, 白蛋白:由肝脏合成，是正常人体血清总蛋白中的主要蛋白质成分。增高：主要由于血液浓缩而致相对性增高，如严重脱水和休克、严重烧伤、急性出血、慢性肾上腺皮质功能减低症。 减低：见于肝硬变合并腹水及其他肝功能严重损害（如急性肝坏死、中毒性肝炎等）、营养不良、慢性消耗性疾病、糖尿病、严重出血、肾病综合征等。当降低至25g／L以下，易生腹水。 7,球蛋白:总蛋白减去白蛋白后的主要蛋白.由人体免疫器官生成.因具有免疫性也称免疫球蛋白.球蛋白检测常用于肝病的判断。例如肝病中的慢性乙肝、酒精肝、药物性肝损伤、肝硬化等都会引起球蛋白高 8,白蛋白/球蛋白：肝脏功能判断指标。比值降低表示肝功能降低 9,,前白蛋白: 又称转甲状腺素蛋白，由肝细胞合成。在急性炎症、恶性肿瘤、肝硬化或肾炎时其血浓度下。.前白蛋白可作为实体瘤患者化疗后肝功能损害的预见性指标。在接受化疗的实体瘤患者中,在化疗前PA下降群体中发生肝功能损害概率为72.2%,而在化疗前PA 正常群体中为4.4%,两者之间存在统计学差异(P<0.01)。 10,胆汁酸：胆汁酸是胆汁的主要成分，在脂肪代谢中起着重要作用。增高:肝胆疾病,血清胆汁酸的测定，对于检测肝细胞毒性药物急性中毒患者的肝损伤，以及跟踪检测此类患者的肝功能均具有重要价值。在检测肝细胞毒性药物的治疗剂量效应方面，血清总胆汁酸水平也是一项重要的检测指标。
血清转氨酶（GPT、GOT）活性的测定 【原理】 酶的活性即酶的催化效能，在一定条件下酶活性的高低代表酶的含量的多少，故酶活性的测定也即相当于酶含量的测定。 酶的活性通常都是在一定条件下（最适温度、最适的pH、必要的激动剂等），一定的时间内，测定该酶所催化的反应系统中底物的消耗量或产物生成量来确定的。 血清谷丙转氨酶（SGPT）及血清谷草转氨酸（SGOT）分别以丙氨酸和α-酮戊二酸；天冬氨酸和α-酮戊二酸为底物，催化它们进行如下反应： 在SGOT催化下所生成的草酰乙酸又可在β脱羧酶和枸橼酸苯胺作用下脱羧，生成丙酮酸，而丙酮酸则可与2，4二硝基苯肼作用，生成丙酮酸2，4二硝基苯腙，后者在碱性溶液中呈棕色，在520nm比色时，α-酮戊二酸二硝基苯腙之光吸收远丙酮酸二硝基苯腙为低。在反应后，α-酮戊二酸减少而丙酮酸增加，故520nm处光密度增加之程度与反应体系中丙酮酸与α-酮戊二酸之克分子比例成线性关系。 一般临床上用以测定SGPT及SGOT活性的方法有改良的穆氏法、金氏法及赖氏法，这些方法都是基于上述原理而设计的，操作也基本相同，只是这些实验的某些条件、活性单位的规定和计算有所差异。 改良的穆氏法（Mohun）规定血清在37（pH7.4）的条件下，与底物作用30分钟后，每生成2.5μg丙酮酸为一个转氨酶活性单位。 金氏法（King）则规定在同上条件下，与底物作用60分钟后，每生成1μM丙酮酸为一个转氨酶活性单位。
赖氏法（Reitman）本身并未对转氨酶活性单位提出规定，他是用卡门氏法（Karman）来定单位的。卡门氏法是在紫外分光光度计中用1毫升血清，反应溶液总量为3毫升，在340nm波长下，用内径为1.0cm的比色皿，25℃ 1分钟内所产生的丙酮酸，在乳酸脱氢酶作用下，使NADH变成NAD+，而引起光密度下降0.001为1个转氨酶活性单位。而赖氏法则是用卡门氏法所测出的单位数相当于赖氏法所产生的丙酮酸量的相关系数，套用卡门氏单位而来。由此可见，测定同一份血清的转氨酶活性，用不同方法测算，其值不一样。因而它们的正常值范围也可有显著差异。 赖氏法：SGPT与SGOT的正常值均在40单位以下。 金氏法：SGPT91±35.8单位；SGOT83±23.8单位 改良穆氏法：SGPT2-40单位：SGOT4-50单位 以上均以每100ml血清计 目前国内多采用赖氏法。本实验即采用此法。 【操作】 1、标准曲线绘制：取试管6支按下表操作。 试管号对照 1 2 3 4 5 丙酮酸标准液（1毫升2微克分子）0 0.05 0.10 0.15 0.20 0.25 SGPT或SGOT底物0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25 0.1M磷酸盐缓冲液PH7.4 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 相当于谷丙转氨酶单位0 28 57 97 150 200 相当于谷草转氨酶单位0 24 61 114 190 —置37水浴30分钟，各管加2，4二硝基苯肼液0.5毫升，混匀，再在37℃水浴中放置20分钟，各管加0.4mol/L氢氧化钠溶液5毫升，混匀，10分钟后，从水浴箱中取出，以蒸馏水调“零”点，用520nm波长比色，读取各管之光密度，各管之光密度均减去对照管之光密度，然后以光密度为纵坐标，各管相应的转氨酶单位为横坐标。绘制成标准曲线。为了方便，可列出各光度相当于转氨酶单位表。 2、酶活性测定：取试管两支，注明测定管及对照管。 试剂（毫升）测定对照血清0.1 0.1 SGPT或SGOT底物0.5 — 置37℃水浴30分钟（SGOT为37℃，60分钟后再加枸橼酸苯胺1滴） 2.4二硝基苯肼0.5 0.5 置37℃水浴20分钟 SGPT或SGOT底物—0.5 0.4N NaOH 5.0 5.0 10分钟后，用520nm波长比色，以蒸馏水调节零点，读取光密度，用测定管光密度减去对照管光密度，由标准曲线查知转氨酶活力单位。 【临床意义】 谷丙转氨酶广泛在于机体的各种组织中，但以肝脏含量最为丰富。正常人血清中此酶活性甚低。由本实验方法测定SGPT正常值应在40单位以下。当肝脏有病变，特别是急性肝炎及中毒性肝细胞坏死时，血清中谷丙转氨酶活性显著增高。在肝癌、肝癌化及胆道疾病患时，