罗氏电化学发光法
罗氏电化学发光法是一种基于电化学原理的分析方法，通过测量电化学发光信号来分析样品中的分析物含量。它结合了电化学和发光技术的优势，能够实现对微量分析物的高灵敏度检测。
在罗氏电化学发光法中，通常采用电化学发光细胞作为检测器。该细胞由一个阳极和一个阴极组成，它们之间通过一个电解质溶液相连。当外加电压施加在阳极和阴极之间时，电解质溶液中的分析物会被氧化或还原，产生电化学反应。这些反应会产生电流，并激发发光物质发出光信号。
罗氏电化学发光法的原理是基于电化学发光物质的特性。这些发光物质通常是有机化合物，具有发光的性质。当发光物质被激发时，它们会从一个激发态返回到基态，释放出能量并发出光信号。这个过程是可逆的，可以重复使用。
在进行罗氏电化学发光分析时，首先需要选择合适的电化学发光物质。这个物质应该具有良好的发光性质，能够在特定条件下发出稳定的光信号。然后，需要确定适当的电化学条件，包括电压、电流和电解质浓度等。这些条件应该能够使发光物质发出最大的光信号，并且与样品中的分析物发生特异性反应。
在实际应用中，罗氏电化学发光法被广泛用于药物分析、环境监测和生物分析等领域。它具有高灵敏度、高选择性和高稳定性的优点。
相比于传统的光谱分析方法，罗氏电化学发光法能够实现对微量分析物的快速和准确检测。
然而，罗氏电化学发光法也存在一些限制。首先，需要选择合适的发光物质和电化学条件，这对于初学者来说可能具有一定的挑战性。其次，该方法对样品的前处理要求较高，需要去除干扰物质并提高分析物的浓度。最后，罗氏电化学发光法在样品矩阵复杂或含有多种分析物的情况下可能会受到干扰。
总的来说，罗氏电化学发光法是一种有效的分析方法，能够实现对微量分析物的高灵敏度检测。它的发展为化学分析提供了新的思路和方法，为科学研究和实际应用带来了许多便利。随着技术的进一步发展，相信罗氏电化学发光法将在更多领域得到应用和推广。
罗氏电化学发光原理 罗氏电化学发光原理是指在电化学发光（Electrochemiluminescence，ECL）过程中，通过电化学手段激发物质发光的原理。这一原理在生物医学领域中有着广泛的应用，特别是在免疫分析和生物传感器领域。本文将对罗氏电化学发光原理进行详细介绍，以便更好地理解其在实际应用中的作用。 首先，罗氏电化学发光原理的基本过程是通过电化学反应来产生激发态物质，从而激发发光。这一过程通常涉及到两种基本的反应，氧化还原反应和化学发光反应。在氧化还原反应中，通过施加电压或电流，使得电极上的物质发生氧化还原反应，产生激发态物质。而在化学发光反应中，激发态物质通过与另一种物质发生化学反应，释放出光子，产生发光现象。这两种反应的结合，构成了罗氏电化学发光的基本原理。 其次，罗氏电化学发光原理的应用主要集中在生物医学领域。在免疫分析中，罗氏电化学发光被广泛应用于检测生物分子，如蛋白质、核酸和细胞等。通过将待测物与特定的标记物结合，利用罗氏电化学发光技术来检测标记物的信号强度，从而实现对待测物的定量分析。在生物传感器领域，罗氏电化学发光也被用于构建高灵敏度、高选择性的生物传感器，用于检测生物分子的存在和浓度。 此外，罗氏电化学发光原理还具有许多优势。首先，它具有高灵敏度和高选择性，能够在复杂的生物样品中进行精准的分析。其次，罗氏电化学发光技术还具有快速、简便的特点，适用于高通量的实验操作。此外，由于其不需要外部光源的激发，可以减少背景信号的干扰，提高检测的准确性。 总的来说，罗氏电化学发光原理是一种重要的生物分析技术，具有广泛的应用前景。通过对其原理和应用的深入理解，可以更好地推动生物医学领域的研究和应用，为人类健康事业做出更大的贡献。
L电化学发光免疫分析仪 检测项目与参考范围值 序列号项目英通道项目中文参考值检测范围 乙肝 1HBsAg400乙肝病毒表面抗原< 1.0 COI 2HBsAb410乙肝病毒表面抗体< 10IU/ml 2.0--1000 3HBeAg440乙肝病毒E抗原< 1.0 COI 4HBeAb430乙肝病毒E抗体> 1.0 COI 5HBcAb450乙肝病毒核心抗体> 1.0 COI 6HBcIgM460乙肝病毒核心抗体IgM< 1.0 COI 甲状腺 7T350三碘甲状腺原氨酸 1.3-3.1nmol/l 0.3-10.0 8T421甲状腺素66-181nmol/l 5.40-320.0 9FT360游离三碘甲状腺原氨酸 2.8-7.1pmol/l 0.400-50.00 10FT430游离甲状腺素12-22pmol/l 0.300-100.0 11TSH10促甲状腺素0.27-4.2uIU/ml 0.005-100.0 12TG700甲状腺结合球蛋白<85 ng/ml 0.100-1000 13TG-AB710甲状腺结合球蛋白抗体 14TU***甲状腺素结合力0.8-1.3 0.200-1.90 15TPO720甲状腺过氧化物酶抗体<34IU/ml 5--600 生殖激素 16FSH150促卵泡激素M:1.7-8.6IU/l 0.100-200 17LH140促黄体生成激素M:1.5-12.6 IU/l 0.100-200 18E2101雌二醇M:49.6-218pmol/l 18.4-15781 19PROG121孕酮M:0.7-4.3nmol/l 0.095--191 20TESTO110睾酮M:9.9-27.8 W:0.22-2.9nmol/l 0.069—52.0 21PRL130泌乳素M:4.1-18.4ng/ml W:3.4-24.1ng/ml 0.470-470 22HCG171人类绒毛膜促性腺激素< 4 mIU/ml 0.100-10000 23HCG(B+T)人类绒毛膜促性腺激素+B亚单< 3 mIU/ml
【产品名称】 通用名称:胃泌素释放肽前体检测试剂盒(电化学 发光法) 英文名称:ProGRＰ 【包装规格】 100测试/盒 【预期用途】 主要用途 用于体外定量检测人血浆和血清中的胃泌素释放肽前体(ＰｒoGRＰ)。该分析结合其他临床方法可辅助用于肺癌的鉴别诊断和小细胞肺癌患者的管理。结果必须根据标准临床诊疗指南结合其他方法进行解释。 Elecsys和cobas e免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ＥCLIＡ”。 临床应用 胃泌素释放肽（GRP）是一种重要的调节分子, 和人体许多生理功能、病理状态有关。它是一种胃肠激素,是哺乳动物同源的两栖动物蛙皮素,最 初从猪胃粘膜中分离,广泛分布于哺乳动物的神 经系统、胃肠道和呼吸道。1随着信号肽解离,它的148个氨基酸的前蛋白原进一步分解生成2７个氨基酸的胃泌素释放肽和68个氨基酸的胃泌素释放肽前体(PrｏGRP)。由于胃泌素释放肽的半衰期很短,只有2分钟，不可能在血中检测到。因此研发出一种检测胃泌素释放肽前体（３1-98)的测定法，一个羧基端区域,常见于三种类型的人胃泌素释放肽前体剪接变体。现已证明血清胃泌素释放肽前体(３1-9８)可作为小细胞肺癌(SCLC)病人 的可靠标志物。２,3，４,5Eleｃsys胃泌素释放肽前体检测血浆和血清中的胃泌素释放肽前体（31-98）。胃泌素释放肽前体和神经特异性烯醇化酶(NＳE）是与神经内分泌源组织和肿瘤有关的两种分子。胃泌素释放肽前体水平升高见于多种神经内分泌源肿瘤，包括小细胞肺癌、类癌、具有神经内分泌功能的未分化大细胞肺癌、甲状腺髓样癌6、其他神经内分泌恶性肿瘤6以及具有神经内分泌功 能的不依赖雄激素的前列腺癌亚组。7 良性疾病中的胃泌素释放肽前体： 文献报道胃泌素释放肽前体血清浓度在2-５ 0pg/mＬ时为正常。8但是，在一项对包括肝脏疾病在内的良性疾病（肾功能不全除外）病人的研究中，有2.５％的病人胃泌素释放肽前体血清水平＞5０pｇ/mL。所有病人胃泌素释放肽前体水平均<80 pg／ｍＬ。肾功能不全是导致这一肿瘤标志物水平升高的唯一原因。９胃泌素释放肽前体水平升高与SＣLＣ具有高度特异性，与良性肺病相比，胃泌素释放肽前体也是SCLＣ最灵敏的标志物。10一项采用Eｌｅcsyｓ胃泌素释放肽前体测定法的临床研究显示了很高的滴度（在“参考值”章节中有详细介绍）。已验证其在鉴别诊断ＳCLC 中具有高度特异性。 肺癌中的胃泌素释放肽前体： 胃泌素释放肽前体是SCＬC的特异性肿瘤标志物,但其水平升高还可见于一小部分非小细胞肺癌(NSCＬC)病人。这些病人的血清胃泌素释放肽前体浓度明显低于ＳCLC病人。5NSE也有类似结果报道。11胃泌素释放肽前体血清浓度与肿瘤浸润程度有关,胃泌素释放肽前体血清浓度>１５0 pg/m Ｌ时提示SCLC的可能性高达93%。 胃泌素释放肽前体在鉴别肺癌中的应用: 胃泌素释放肽前体对鉴别小细胞肺癌和非小细胞肺癌非常有用。血清NSE还能为肺癌的组织学诊断提供额外信息。12 胃泌素释放肽前体在除肺癌外的其他恶性肿瘤中的应用： 胃泌素释放肽前体血清水平升高主要见于SＣLC 或神经内分泌肿瘤。13胃泌素释放肽前体在分化良好的神经内分泌肿瘤中浓度升高常提示原发肿瘤在肺并且生存几率较低。14在不伴随肾功能不全的其他恶性肿瘤病人中也常出现胃泌素释放肽前体血清浓度轻度升高，但99.7%的病人浓度<１００ｐｇ/mL。将150 pg／mL作为诊断标准之一,胃泌素释放肽前体诊断ＳＣＬC的灵敏度可达72．5％。9 胃泌素释放肽前体在监测SCLC病人中的应用：多名研究者曾报道胃泌素释放肽前体有助于监测接受治疗的SCLC病人，有助于检出复发病例。１５,16建议在诊断SCLC时选择胃泌素释放肽前体作为肿瘤标志物。支持依据包括:(1)胃泌素释放肽前体在SCLＣ中的灵敏度,以及在其他恶性肿瘤中的特异性，（２)在除肾功能不全的大部分疾病中该值检出正常以及（3)不会因溶血出现假阳性结果，再加上正常范围和SCLC病人检测结果之间差异明显。ＮSE可作为SＣLC的补充肿瘤标志物，结合ＮSE和胃泌素释放肽前体的结果可以增加组 织学诊断、预后和随访的精密度。17 胃泌素释放肽前体水平在SCＬC早期升高。但是人群中SCＬC的发病率很低,胃泌素释放肽前体 测定不应作为筛查试验。18不推荐在人群中将Eｌecsｙｓ胃泌素释放肽前体检测作为筛选试验使用。 【检测原理】 双抗体夹心法,总检测时间:１8分钟 第一次孵育:30μL标本、生物素化的特异性胃泌素释放肽前体单克隆抗体和钌复合物a)标
罗氏诊断Elecsys 2010 SOP文件 运行条件 ROCHE（罗氏）Elecsys 2010 全自动电化学发光免疫分析仪 1、环境条件 为了确保系统操作的正常运转，应该保证以下的条件： ?无灰尘的、良好通风的环境 ?无直接日照 ?地面水平(角度：<1/200 o) ?地面足够坚硬能够承受仪器的重量 ?温度：18~32摄氏度 ?当系统启动时，温度的改变应该小于2度/小时 ?屋内湿度：20%~85% ?电源电压没有明显的波动 ?在附近没有会产生电磁波的仪器
?有接地的三相电源 ?噪音应该小于65分贝
2，水质要求 ?无菌 (< 10 cfu/ml)，去离子水 ? 1.5 M?电阻值 (最大1.0 Ms/cm) ?15-25 磅/英寸2 (0.5~3.5 kg/cm2或 49~343 kpa) 安全注意事项 尤其要注意以下安全注意事项。如果忽视了这些安全注意 事项，则操作人员可能遭受重伤或致命伤害。每个注意事 项都很重要。 操作人员资格 操作应在技术人员的监督之下进行，该技术人员曾于销售 代理指定的实验室培训过。 认真遵守操作手册中规定的程序进行系统操作和维护。本 操作手册中没有说明的维护应由经过培训的罗氏技术支 持人员进行。 安装要求 安装由罗氏诊断代表进行。客户负责提供必要的设施。 接通仪器 在停机后1秒内不要接通电源。 电气安全注意事项 对于任何电子设备，可能出现触电的危险。不要企图接近标有该 标签的仪器部件。不要企图在任何电子室中工作。只有经过授权 的和具备资格的人员才能进行安装、维护和修理。 固体和液体废物 与废液接触会导致感染。在进行维护时，要确保佩带防护 设备。如果废液与皮肤接触，立即用水冲洗并加以消毒剂。 向内科医生咨询。 运动部件 在仪器操作期间，不要将手放入仪器中。 接触标本机构、试剂移液机构、搅拌机构或其它机构可造成伤害。 在开始操作或维护/检查之前，要保证关闭并锁紧顶盖。不要在操 作期间，打开顶盖。在打开顶盖进行维护和检查时，要保证遵循 本手册中提供的程序。 处理系统和测定试剂溶液 不要与Cleancell M、SysClean M直接接触。直接接触可 造成皮肤发炎或损伤。有关详细说明，请参见试剂盒标签。
罗氏电化学发光仪器E170S O P 仪器简介： E170 是罗氏诊断公司出品的全自动电化学发光免疫分析仪，是全自动，随机进样的免疫分析系统，可以对许多种检测项目进行体外的定量或者定性的分析。该分析仪应用的是电化学发光技术(ECL)。每个E模块系统每小时的标本处理量为170个试验(最多可以将4个E模块连接)。只有在试验室条件下，经过培训的操作者方可操作E模块系统。 系统特色 ?可以24小时待机使用 ?标本条码扫描功能 ?试剂条码扫描功能 ?单个E模块的每小时处理能力为170个试验 ?自动保养功能 ?自动复查功能 ?自动发出定标信息 ?自动标本稀释功能 ?系统辅助的操作流程 ?一个E模块具有25个温控的试剂通道 ?1个模块可以安放672个反应杯 ?1个模块可以安放672个加样头 ?双向数据传输接口 运行条件： 水质要求 ◆无菌(< 10 cfu/ml)，去离子水 ◆ 1.5 M?电阻值(最大1.0 Ms/cm) ◆15-25 磅/英寸2 (0.5~3.5 kg/cm2 或49~343 kpa) ◆耗水量：每E170模块消耗18升/小时 环境条件 ◆无灰尘的、良好通风的环境 ◆无直接日照 ◆地面水平(角度：<1/200?o) ◆地面足够坚硬能够承受仪器的重量(详细情况请见本章中的系统特点) ◆温度：18~32摄氏度 ◆当系统启动时，温度的改变应该小于2度/小时 ◆屋内湿度：45%~85%
◆电源电压没有明显的波动 ◆在附近没有会产生电磁波的仪器 ◆有接地的三相电源 E170由三个类型的硬件单元组成：控制单元、核心单元以及检测单元。 控制单元介绍 包括： ?触摸屏幕的电脑 ?键盘 ?打印机 ?仪器管理电脑终端 核心单元介绍 核心单元将所有的标本从入口端经过E170仪器到出口端或者复查缓冲区。下面所列位核心单元的组成部分。 ?加样端 ?标本架转运通道 ?复查缓冲带 ?出口端 ?中心控制区 ?电源开关(在进样端的左侧面上) 检测单元介绍 分立式、随机进样的每小时170试验的免疫检测系统。下面所列为E170模块的组成部分： ◆试剂区位于分析模块的左边部分,它包含以下部分: 1.一个试剂盘,温度控制在20?3℃; 有25个试剂通道 2.一个用来将试剂以及磁珠从试剂盘中加入的试剂针,将之加到孵育器的反应杯中 3.一个条码扫描器,用来阅读试剂盒上的二维条码 4.一个用于试剂盒盖的开关的机械装置,以避免试剂的挥发 5.一个用于混匀磁珠的搅拌器.当磁珠被加入之前或额外的混匀步骤中,搅拌棒用来搅拌磁 珠 6.两个用来清洗探针以及搅拌器的冲洗站 7.一个探针清洗站,它含有两瓶探针洗液用来清洗探针的内部 ◆测量区位于分析模块的中部,它含有以下几个部分： 1.一个孵育器,含有54个孵育位,用来进行免疫反应 孵育池有54个孵育位置,位于仪器的中心部分,当标本和试剂加入到反应杯中后,该孵育池的温度维持在37℃±0.3℃. 当一个反应在准备测定时,该孵育盘需旋转,将反应杯转至需要的位置,在此处,适宜的单位将执行相应的功能. 2.一个用来将标本从标本容器中加入到反应杯中的标本探针
罗氏电化学发光法 罗氏电化学发光法是一种基于电化学原理的分析方法，通过测量电化学发光信号来分析样品中的分析物含量。它结合了电化学和发光技术的优势，能够实现对微量分析物的高灵敏度检测。 在罗氏电化学发光法中，通常采用电化学发光细胞作为检测器。该细胞由一个阳极和一个阴极组成，它们之间通过一个电解质溶液相连。当外加电压施加在阳极和阴极之间时，电解质溶液中的分析物会被氧化或还原，产生电化学反应。这些反应会产生电流，并激发发光物质发出光信号。 罗氏电化学发光法的原理是基于电化学发光物质的特性。这些发光物质通常是有机化合物，具有发光的性质。当发光物质被激发时，它们会从一个激发态返回到基态，释放出能量并发出光信号。这个过程是可逆的，可以重复使用。 在进行罗氏电化学发光分析时，首先需要选择合适的电化学发光物质。这个物质应该具有良好的发光性质，能够在特定条件下发出稳定的光信号。然后，需要确定适当的电化学条件，包括电压、电流和电解质浓度等。这些条件应该能够使发光物质发出最大的光信号，并且与样品中的分析物发生特异性反应。 在实际应用中，罗氏电化学发光法被广泛用于药物分析、环境监测和生物分析等领域。它具有高灵敏度、高选择性和高稳定性的优点。
相比于传统的光谱分析方法，罗氏电化学发光法能够实现对微量分析物的快速和准确检测。 然而，罗氏电化学发光法也存在一些限制。首先，需要选择合适的发光物质和电化学条件，这对于初学者来说可能具有一定的挑战性。其次，该方法对样品的前处理要求较高，需要去除干扰物质并提高分析物的浓度。最后，罗氏电化学发光法在样品矩阵复杂或含有多种分析物的情况下可能会受到干扰。 总的来说，罗氏电化学发光法是一种有效的分析方法，能够实现对微量分析物的高灵敏度检测。它的发展为化学分析提供了新的思路和方法，为科学研究和实际应用带来了许多便利。随着技术的进一步发展，相信罗氏电化学发光法将在更多领域得到应用和推广。
电化学发光免疫测定 电化学发光免疫测定 电化学发光反应：电化学发光（electro－chemiluminescence，ECL)是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，实际上包括了电化学和化学发光两个过程。化学发光剂三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+(图1）和电子供体三丙胺（TPA）在阳电极表面同时各失去一个电子发生氧化反应（图2）。二价的[Ru(bpy)3]2+被氧化成三价，后者是一种强氧化剂。TPA 被氧化成阳离子自由基TPA+*（参见图2），后者很不稳定，自发地失去一个质子（H+），形成自由基TPA*，这是一种非常强的还原剂。这两个高反应基团在电极表面迅速反应，三价的[Ru(bpy)3]3+被还原形成激发态的二价 [Ru(bpy)3]2+*，能量来源于[Ru(bpy)3]3+和TPA*之间存在的高电化学电位差。TPA*自身被氧化成二丙胺和丙醛。接着激发态的 [Ru(bpy)3]2+*衰减成基态的[Ru(bpy)3]2+，同时发射一个波长620nm的光子。这一过程在电极表面周而复始地进行，产生许多光子，使光信号得以增强。 图1 三联吡啶钌NHS Ru2＋* -H+光子 TPA* Ru3+ Ru2＋ TPA+*
TPA ＋ -e -e ＋ 图2 在电极表面的ECL反应 Ru2＋: [ Ru(bpy)3] 2+基态 Ru3＋: [Ru(bpy)3]3+氧化态 Ru2＋*: [Ru(bpy)3]2+* 激发态 二、电化学发光免疫测定 以三联吡啶钌作为标记物，标记抗原或抗体，通过免疫反应及ECL反应，即可进行电化学发光免疫测定（ECLIA）。在实际应用中则尚有特定的仪器和试剂。瑞士罗氏公司（ROCHE）的Elecsys ECLIA系统，综合了各种先进技术，具有独特的优越性，已在医学检验中取得广泛应用。 Elecsys全自动分析仪分成两个部分：在试管内化学反应部分和在流动池内的ECL反应部分。 （一）试管内的化学反应 1、试剂的组成 在Elecsys试剂的制备中，包括电化学发光剂的标记和抗原或抗体的固相化，应用了多种先进技术，简述如下： （1）电化学发光剂的标记 [Ru(bpy)3]2+需经化学修饰形成活化的衍生物后才能与抗体或抗原形成结合物。有多种活性基团可与[Ru(bpy)3]2+分子中的砒啶基反应。在Elecsys试剂中采用的是N羟基琥珀酰胺酯（NHS）（图1）。该衍生物具有水溶性，可与抗体、蛋白质抗原、半抗原、激素、核酸等各种分子结合形成稳定的标记物。而且[Ru(bpy)3]2＋NHS分子量很小，与免疫球蛋白结合的分子比超过20仍不会影响抗体的可溶性和免疫活性。 （2）固相载体 Elecsys中采用的固相载体是带有磁性的直径约2.8μm的聚苯乙烯微粒。其特点是表面积极大，吸附效率高；在液体中形成均匀的悬液，参与反应时类似液相，反应速度快。由于带有磁性，在游离标记物与结合标记物分离时，只需用磁铁吸引，方便迅速。 （3）链霉亲和素与生物素系统的应用 链霉亲和素（streptoavidin，SA）和生物素（biotin，B）是具有很强的非共价相互作用的一对化合物。一分子SA 可与4分子B相结合。在Elecsys的试剂中，SA通过特殊的蛋白结合物均匀牢固地包被在磁性微粒上，形成通用的能与B结合的固相载体。另一试剂为与经活化的B衍生物化合的抗原或抗体。两种试剂混合时，B化合的抗原或抗体即结合在磁性微粒上。 2、在试管中的反应 反应分两个步骤。以双抗体夹心法测抗原为例，试剂含以下组分： a、[Ru(bpy)3]2+标记的抗体 b、生物素化合的抗体 c、SA磁性微粒 d、TPA溶液 e、洗涤液
罗氏电化学发光化学发光检测结果罗氏电化学发光化学发光检测（Roche electrochemiluminescence immunoassay，ECLIA）是一种基于化学发 光原理的生化检测技术，广泛应用于临床诊断、药物筛选、环境监测 等领域。该技术具有灵敏度高、特异性好、操作简便、结果稳定等优点，因此受到了广泛关注和应用。本文将从技术原理、应用范围和发 展趋势等方面对罗氏电化学发光化学发光检测进行详细介绍。 一、技术原理 罗氏电化学发光化学发光检测技术是基于电化学发光和化学发光 原理的一种生化检测技术。其基本原理是通过特定的抗体-抗原反应， 将感兴趣的生物分子标记上特定的发光分子，当这些标记分子与特定 底物反应时，产生化学反应产生发光。通过检测产生的化学发光信号 大小来定量分析待测物质的浓度。 罗氏电化学发光化学发光检测技术主要包括三个关键步骤：标记、洗脱和检测。首先，将待检测物质与特定的抗体结合，并标记上发光
物质。然后，利用特定的洗脱方法将未反应的物质除去，最后通过检 测设备对发光的强度进行测定。 二、应用范围 罗氏电化学发光化学发光检测技术在临床诊断、药物筛选、环境 监测等领域有着广泛的应用。在临床诊断领域，该技术被应用于各种 疾病的早期筛查、疾病的诊断与分型、治疗效果的监测等方面。例如，在肿瘤标志物、感染性疾病、免疫相关疾病等方面都有广泛的应用。 在药物筛选方面，罗氏电化学发光化学发光检测技术可以用于快 速检测潜在药物的毒性、药效、药代动力学等参数，帮助研究人员更 快速地筛选出有效的药物。 在环境监测方面，该技术可以用于水质、空气、土壤等环境样品 中有毒有害物质的检测，为环境保护提供有力的技术支持。 三、发展趋势 随着生物技术的不断发展和进步，罗氏电化学发光化学发光检测 技术也在不断创新和发展。未来，该技术将有以下几个发展趋势：
引言： 罗氏电化学发光（Electrochemiluminescence，简称ECL）是一种基于化学电致发光的分析技术，由瑞士公司Roche首次开发并应用于临床诊断中。ECL技术具有高灵敏度、高选择性、宽线性范围和低检测极限等优点，因此在生物医学研究、生物芯片检测、生化分析等领域得到了广泛的应用。本文将从ECL的原理、仪器设备、应用领域、优缺点以及未来发展方向等五个大点来详细阐述罗氏电化学发光技术的相关内容。 概述 罗氏电化学发光（ECL）是一种特殊的电化学发光分析技术，通过电化学反应激发分析介质中的发光物质产生发光。与传统的化学发光技术相比，ECL技术具有较高的灵敏度、较宽的线性范围和更低的检测极限。ECL技术近年来在生物医学研究、药物研发、环境分析等领域得到了广泛的应用。下面将分别介绍ECL的原理、仪器设备、应用领域以及其优缺点及未来发展方向。 正文内容 一、ECL的原理
1. 化学电致发光原理：ECL技术基于电化学反应和化学发光原理，通过在电极表面引发可逆氧化还原反应来激发发光物质的发光。 2. ECL机制：罗氏电化学发光的机制主要包括金属配合物的降解、电荷转移发光和共发光机制等。 3. 发光物质：介绍ECL中常用的发光物质，如三恶唑（Tz）、氧化铼（Ru(bpy)32+）等。 二、ECL的仪器设备 1. ECL系统组成：介绍ECL分析所需的核心设备和仪器，包括电化学工作站、荧光光谱仪、样品处理系统等。 2. 电极选择和修饰：讨论ECL中常用的电极材料和修饰技术，如玻碳电极、金电极、纳米颗粒修饰等。 3. 仪器调试和操作：介绍ECL系统的调试方法和操作步骤，以及常见的误差来源和校正方法。 三、ECL的应用领域 1. 生物医学研究：罗氏电化学发光技术在生物医学研究中广泛应用于蛋白质检测、基因分析、细胞信号传导等方面，如免疫检测、核酸检测等。
4.罗氏电化学发光原理 罗氏电化学发光原理 电化学发光免疫分析原理杨明忠 12/____ 罗氏电化学发光原理 免疫检测技术的发展电化学发光系统及其原理电化学发光技术的优势罗氏电化学发光原理 免疫检测技术的发展电化学发光系统及其原理电化学发光技术的优势罗氏电化学发光原理 技术创新领先的免疫检测新技术-ECL 电化学发光 放免 酶免荧光免疫化学发光 1960‘S 1970_80‘S ____‘S 1,抗体技术的革命，从使用多克隆抗体向使用单克隆抗体转变 2,从手工操作向全自动分析仪的转变 3,从液相放射免疫技术向均相和固相免疫分析技术的转变罗氏电化学发光原理 放射免疫测定法1959年Berson和Yalow建立了放射免疫分析方法(RIA),大大提高了免疫测定的敏感度，这种标记免疫测定开拓了医学检验的新领域。 缺点半衰期短，试剂货架期不长。标记物不断变化，试剂批间、批内变化大，标准曲线不能保存。反应时间长，操作步骤很难自动化。使用放射性核素，对人体有一定的危害性。分析的限度为 10 mol/ml 或 10 g/ml。 在一定时期内曾被采用，正在被逐步取代。 罗氏电化学发光原理 酶免疫测定法1971年Engvall和Perlman建立了固相酶免疫测定方法(ELISA),这种非放 射标记免疫测定在临床检验，特别是感染性疾病的诊断中取得了广泛应用。缺
点 试剂制备困难。操作步骤复杂，耗时长。影响因素多，质量控制难以保证。最后测定的是颜色的光密度，其精密度和敏感性不如发光免疫技术。 各实验室操作不规范，质量难以保证。有学者认为ELISA 技术已逐步走向退化，可能会逐步退出临床实验室。 罗氏电化学发光原理 化学发光免疫测定法化学发光免疫测定法出现于20世纪90年代初。由于最后测定的是光子的量，不但对检测者无害，其敏感度和精密度均优于RIA,而且试剂较稳定，并可进行全自动分析。缺点采用标记催化酶(如辣根过氧化物酶)或化学发光分子(如鲁米诺)的方法，其化学反应一般不稳定，为间断的、闪烁性发光，而且在反应过程中易发生裂变，导致反应结果不稳定。检测时需对结合相与游离相进行分离，操作步骤多。反应原理相对落后。 罗氏电化学发光原理 电化学发光免疫技术 电化学发光免疫测定法(ECLIA)发展于 ____年，它在发光反应中加入了电化学反应，是继放射免疫、酶免疫、化学发光免疫测定之后的新一代标记免疫测定技术，是电化学和免疫测定相结合的产物。 世界公认的 最先进的临床免疫检测技术 罗氏电化学发光原理 免疫检测技术的发展电化学发光系统及其原理电化学发光技术的优势罗氏电化学发光原理 Elecsys系列全自动免疫分析仪____年德国宝灵曼公司推出Elecsys ____系统世界上第一台应用电化学发光技术的全自动免疫分析仪 ____年罗氏公司收购宝灵曼公司 ____年罗氏推出电化 学发光免疫模块E 170 罗氏是全球唯一应用电化学发光免疫技术制造仪器的厂商 ____年罗氏推出电化学发光免疫模块e601 ____年罗氏推出电化学发光免疫模块e411
罗氏电化学发光免疫分析仪定标物保存方法罗氏电化学发光免疫分析仪是一种常见的实验仪器，用于检测和定量分析生物样本中的特定生物分子，如蛋白质、抗体、激素等。定标是使用已知浓度的标准物质来建立分析仪器的检测曲线和定量范围。定标物的保存方法对于保证分析仪器的准确性和稳定性非常重要。本文将从两个方面介绍罗氏电化学发光免疫分析仪定标物的保存方法，包括标准物质的选择和保存条件。 选择标准物质： 在进行定标前，首先需要选择与待测分析物相同或相似的标准物质进行定标。标准物质应具有以下特点： 1.纯度高：标准物质的纯度应尽可能接近100%，以减少不纯物质对分析结果的影响。 2.稳定性好：标准物质应具有良好的化学稳定性和物理稳定性，以确保在保存期间不发生分解、降解或溶解。 3.可溶性好：标准物质应易于溶解于使用的溶剂中，以便在定标过程中进行稀释。 4.经济适用：标准物质的价格应相对较低，以降低实验成本。 保存条件： 标准物质的保存条件直接影响着其稳定性和可靠性，因此需要注意以下几个方面： 1.存储温度：一般来说，标准物质的保存温度应根据其化学性质和稳定性来确定。一些易降解的标准物质需在低温下保存，如-20℃或更低。
而一些稳定性较好的标准物质可以在常温下保存，但应避免暴露在光照、高温或高湿环境中。 2.容器选择：标准物质应存放在密封、不透光的容器中，以防止光和空气的影响。常见的存储容器有玻璃瓶、塑料管或聚丙烯封口袋等。 3.避免冷冻解冻：对于需要在冷冻状态下保存的标准物质，应避免频繁的冷冻解冻过程，以免影响其稳定性。可以根据实验需要，将标准物质分装成适量的小份，每次只取一小部分使用，并立即将剩余的封存起来。 4.防潮防湿：标准物质应避免接触水分和湿气，以免发生水解、分解或结晶现象。可以在存放容器中加入干燥剂，如无水硫酸钠、碳酸钠或干燥的硅胶等，以吸湿保持干燥环境。 5.定期检测：定期对保存的标准物质进行检测，以确保其浓度和稳定性。可以使用同一批次的标准物质进行再次定标，以验证保存的标准物质是否保持稳定。 总之，罗氏电化学发光免疫分析仪的定标物保存方法对于保证分析结果的准确性和稳定性非常重要。选择适当的标准物质和严格的保存条件，可以保证定标物的纯度、稳定性和可靠性，进而提高实验的准确性和可重复性。
罗氏E170电化学发光自动免疫分析仪使用体会论文 电化学发光免疫分析仪具有灵敏度高、精细度好、检测速度快、检测工程多、试剂无核素污染等特点，是各临床实验室优先选择的免疫分析仪。罗氏公司电化学发光自动免疫分析仪包括三个型号：1010、xx及E170，其中E170试剂位最多（25个）、检测速度最快（可达170个测试/小时），适合样本量大、开展工程多的大型医疗机构使用。我们使用该仪器已有两年多，现把使用体会报道如下，供同行分享和探讨。 临床医生对检测工程要求有较高的准确性和稳定性，以利于疾病诊断和疗效观察。该仪器所用试剂为全封闭试剂，试剂及耗材全部依赖进口，路途遥远，运输和保存条件均会影响试剂的质量，操作者除定期进展工程校准和仪器维护外，还应坚持室内质控制度，以观察检测工程的稳定性，同时也可监测仪器的工作状态。室内质控品可选择仪器配套质控品，或进口的免疫室内质控品，也可用自制质控品。 该仪器共有两个流动测量池，虽为同一检测系统，但检测结果也有差异。我们刚开始使用该仪器时，为了追求最快检测速度，设置每个流动测量池均可检测所有工程，结果发现同一工程室内质控累积靶值有较大差异，后来根据本实验室各检测工程的使用频度分配检测工程在固定的流动测量池，进展室内质控时，靶值就容易确定，同时校准时减少了校准品及试剂的消耗、室内质控时质控品和试剂的消耗，保证了检测结果的稳定性，实验室进展认可时也不必进展结果的比对。 罗氏xx进展试剂扫描后，试剂是否校准通过，是否可用一目了然，但对于E170，装载试剂后，在试剂（Reagent）界面无法知道
试剂的校准情况，必须到校准（Calibration）界面才可知道检测工程的校准状态（工程为红色为未校准或校准未通过），这一点要引起重视，因为E170当您进展检测时，仪器不管该工程是否可用，均消耗试剂，造成试剂不必要的浪费；罗氏xx在样品盘装载标准品后，仪器优先校准该工程未校准批号，但E170必须要选择所需校准工程的位置号，详细方法为：CalibrationStatus→全选所有工程→Full→Save→按住Ctrl选择所需工程→Full→Save，所需工程后的FULL变为兰色即可进展校准；E170为样本架进样，按顺序好样本后，一定要注意起始号正确后才能开始进展检测，否那么导致样本张冠李戴。 E170是轨道进样，设计时考虑到运行路线较长，一套标准品仅可使用一次。为了能屡次重复使用标准品，标准品盒内提供了一些标准品条形码，每次校准时，贴上新的条形码，即可进展校准。但有的校准品盒内没有提供新的条形码，只能采用手工校准，安排好校准品位置后，遮住校准品条形码才可进展校准。 E170的所有数据均保存在硬盘上，所以只能通过手动安排，将三个相同批号的原装试剂盒中的死腔量试剂分别集中至其中一个试剂盒，成为一盒混合试剂。把混合试剂瓶上Elecsysxx/1010专用条形码数字以手工法输入ModularE170，可被ModularE170识别，作为一盒新的同批号试剂使用到达节约试剂的目的；当然，如果实验室有两台E170或一台E170与一台Exx，那么可很方便地使用剩余试剂（约20%）。 当仪器报警采样不正常时，首先要检查样本状态，是否样本太少或有凝块、气泡并进展相应处理，其次用75%酒精清洁采样针，
【产品名称】 通用名称：他克莫司检测试剂盒（电化学发光法） 英文名称：Tacrolimus 【包装规格】 100测试/盒 【预期用途】 主要用途 主要用于定量测定人全血中他克莫司的含量。 本检测有助于接受他克莫司治疗的心、肝、肾移植病人的治疗。电化学发光免疫测定试剂“ECLIA”，适用于罗氏Elecsys 和cobas e免疫测定分析仪。 临床应用 他克莫司（又称KF506）是一种大环内酯类抗生素，1984年在日本被发现，是链霉菌属的代谢产物1.2,3。研究表明他克莫司的免疫抑制活性是环孢霉素的10-100倍。4 他克莫司产生免疫抑制效应的主要原理在于它可以抑制T细胞的激活和增殖。细胞内的他克莫司可结合一种抑免蛋白FK506-结合蛋白（FKBP-12），这种免疫复合物可抑制磷酸酶的活性。5抑制磷酸酶可限制激活的T细胞（NFAT）的核因子的去磷酸化和核转位，由此调节包括IL-2、IL-4、TNF-α和γ-干扰素在内的多种细胞因子的转录，进一步限制淋巴细胞的激活和增殖。6,7,8,9,10 他克莫司具有很高的亲脂性，吸收不完全并且不稳定。吸收后，他克莫司高效结合蛋白和红细胞，血浆中99%的药物都与白蛋白或α-1-糖蛋白结合。11 他克莫司的生物利用度和代谢主要受细胞色素P450药物代谢同工酶CYP3A4和CYP3A5以及流出泵P-糖蛋白的影响，在表达和功能方面在同一个体以及不同个体之间都变现出明显的差异。12,13,14 他克莫司在同一病人和不同病人间都表现出很大的变异性，无论剂量高低都可能出现严重不良反应。他克莫司浓度不足可能导致对抑制器官的排异反应。浓度过高又可导致严重不良反应。他克莫司的主要不良反应包括肾毒性、神经毒性、胃肠道损害、糖尿病、高血压病和恶性肿瘤。15,16 为了让每个病人的体内药物浓度都维持在狭窄的治疗窗范围内，治疗药物监测的应用和浓度控制下给药作为标准临床实践的一部分已在临床上应用多年，它也是病人治疗的主要手段。16,17虽然C0和临床结果之间的关系还存在争议，谷浓度（C0）监测在指导个体化他克莫司给药方面已广泛应用。一般情况下，曲线下面积（AUC0- 12 ）是药物暴露的最佳标志，但它太过昂贵，不实用。为了评估另一种检测C0的方法的有效性，需要进行多中心前瞻性试验。16 【检验原理】 手工沉淀： 采用Elecsys他克莫司检测前，采用Elecsys ISD预处理试剂对标本、定标液和质控品进行预处理。 该试剂可使细胞溶解，提取出他克莫司，并使血中大部分蛋白沉淀。预处理样本经过离心，抽取含有他克莫司的上清液采用ELecsys他克莫司检测进行测定。 竞争法原理，总检测时间：18分钟 ●第一次孵育：他克莫司特异性生物素 化抗体和钌标记的他克莫司衍生物与 35μL样本一起孵育。随样本中分析物 浓度的不同，免疫复合物的形成过程 中，标记的抗体空白结合位点一部分 被样本分析物占据，一部分与钌标记 的半抗原占据。 ●第二次孵育：添加包被链霉亲和素的 磁珠微粒后，该复合物通过生物素和 链霉素之间的反应结合到固相上。 ●将反应液吸入测量池中，通过电磁作 用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠 结合的物质通过ProCell/ProCell M被去 除。给电极加以一定的电压，使复合 体化学发光，并通过光电倍增器测量 发光强度。 ●仪器自动通过2点校正的定标曲线计算 得到检测结果。 a)Tris(2,2’-bipyridyl)ruthenium(II)-
罗氏cobas e601化学发光免疫分析仪操作程序 1目的 正确使用与维护罗氏c obas e601全自动化学发光免疫分析仪。 2仪器简介、工作原理 2.1 仪器名称：全自动化学发光免疫分析仪 2.2 仪器型号：罗氏cobas e601 2.3 生产厂商：罗氏诊断公司德国 2.4仪器简介：cobas e601是采用目前国内、外最先进的电化学发光免疫分析技术（ECLIA），该技术在发光反应中加入了电化学反应，应用理想的标记物，标记物三联吡啶钌分子结构简单，可标记任何抗原、抗体、核酸等，稳定性好，可确保检测结果的重复性好，无放射性、可避免对人体和环境的危害。ECLIA 是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫之后的新一代标记免疫测定技术。该仪器秉承罗氏公司模块化设计，为实验室提供优秀服务。 3仪器运行环境 3.1 环境条件 为了确保系统操作的正常运转，应该保证以下的条件。 3.1.1 无尘良好通风的环境，无直接日照。 3.1.2 温度：18-32℃，温度的改变应该小于2℃/小时，屋内湿度：30%-80%。 3.1.3 输入电压220V（+/- 10％）50HZ，有良好接地的电源，单独接地线，对地阻抗小于10Ω，零地电压小于2V,仪器功率11KV A，建议UPS功率大于 15KV A。 3.1.4 在附近没有会产生电磁波的仪器，环境噪音<85dB（A）。 3.2 供水要求 3.2.1无菌去离子水(要求<10 cfu/ml，电导率≤1μS/cm), 水量: c701为50 L/h, c502为40 L/h，水压为0.5-3.5kg/cm2。 3.2.2 纯水水箱出水管口径1/2inch(约12mm内径），地面排水口距仪器排水出口在50--100mm，管长应小于5m。 3.3 操作人员 3.3.1要求操作人员熟知相关指导方针与标准以及操作员手册中包含的信息与程序。操作人员需要接受过罗氏诊断公司的培训，要求操作人员已仔细遵循操