水产动物疾病学综合实验安排
水产动物疾病学综合实验指导
一、实验目的与要求：
1. 水产动物疾病学综合实验是为了满足现代水产养殖行业对生产、培养科研技术操作人员的需要，使学生掌握水产动物疾病学的基本知识及基本技能，同时培养学生的创新、创业及社会服务能力，成为水产养殖行业防病治病的技术人才。
2. 通过实验了解水产动物疾病种类及其特点；能较准确地诊断水产动物疾病。
3. 能正确地使用渔药，能有效地防治水产动物疾病。
二、实验内容：
1. 现场调查；
2. 渔药使用：泼洒法；挂袋挂篓法；口服法；
3. 显微镜诊断疾病；
4. 寄生虫标本的收集与染色；
三、实验操作及其步骤：
1. 现场调查：
池塘是水生动物生存的基础，疾病的发生除了由病原生物直接感染和侵袭外，首先应了解池塘周围的环境和水体物理、化学因素的变化对养殖生物发病的影响。发病现场的调查可为全面查明发病原因，及时发现和正确判断病鱼提供依据。
①调查发病养殖水体环境和发病史
发病养殖水体环境是指养殖水体周围有哪些工厂，工厂是否排放污（废）水，这些污（废）水是否含有对鱼类有毒的物质，是否经过处理后排放等。同时，还要着重强调调查养殖水体情况，了解放养前清塘的方法、清塘药物的剂量、清塘
后放养鱼种的时间、鱼种消毒的药量等。这些与养殖生物疾病的发生关系较大，同时还应了解养殖水体近几年发生疾病的危害程度，以及所采用的防治方法和效果等。
②了解池塘水质状况
水温水温是养殖生物疾病发生的重要因素，水温高低与疾病的发生和流行有着密切的关系。一般病毒性鱼病和细菌性鱼病，在水温为25~30℃时传染性最强，32℃以上和18℃以下时感染减弱。因此江苏、浙江和湖南、湖北一带，每年5~6月和8~9月份是细菌病、病毒病流行高峰。暴发性鱼病需要需要的水温范围较大，流行的时间也更长些。有些寄生虫病，如车轮虫病和指环虫病是夏季危害鱼苗、鱼种的流行病，而有些疾病如水霉病、小瓜虫病、斜管虫病和鱼波豆虫病，通常在20℃以下发病，属于低温季节的流行病。
A. 谁的酸碱度（pH ）由于高密度养殖，池塘有机质多氢离子浓度微偏高（pH 偏低），易发生水霉病。酸性水也常常引起嗜酸性卵甲藻病的暴发。在氢离子浓度较低（pH 较高）的盐碱养殖水体，水温较低时易大量繁殖三毛金藻，分泌毒素，致使池鱼中毒死亡。
B. 溶解氧水中含氧量的多少关系到养殖生物的生长和生存，同疾病的发生有明显的相关性。正常池塘的溶解氧含量要求4毫克/升，最低不能低于1毫克/升，对于各种不同的鱼类和不同的生长阶段，因其生理需求不一样而对溶氧的需求不同。溶解氧长时间过低会影响鱼类生长，降低鱼体的抗病能力，同时为病原菌的繁殖，生长创造了条件。
C. 检测水质对发病水体进行水的pH 、溶解氧、氨氮、亚硝酸盐、磷酸盐、硬度、化学耗氧量的分析，了解水质的基本营养盐变化情况，对可能因环境因子致病的因素应根据具体情况选择分析。
③调查饲养管理情况
A. 了解鱼种放养情况: 放养数量过多就会出现相互拥挤、摄食不足、生长不良的现象，导致养殖生物体对疾病的抵抗能力降低，有利于病原菌的感染和传播。夏花培育至冬片鱼种一般亩放养量为7000~10000尾。
B. 了解投饲和施肥状况: 投喂的饲料不新鲜或不按照“四定”投喂，鱼类很容易患细菌性肠炎病。夏天在池塘内施用不经发酵的有机肥，易使池塘水质恶化、缺氧、并促使致病菌核寄生虫大量繁殖。
C. 了解养育过程中的生产操作情况: 在养殖生产过程中往往由于放养鱼种、运输和拉网操作不慎，造成鱼体受伤，使细菌、真菌和寄生虫等病原体乘机侵入伤口，引起多种鱼病，如赤皮病、白皮病、白头白嘴病、水霉病等。因此，了解发病池塘水温、酸碱度、溶解氧的变化以及饲养管理和环境因子，对正确查明疾病的发病原因，及时合理拟定防治方案是很重要的。
2. 渔药使用：
⑴泼洒法：
又称遍洒法，是药物防治鱼病时最常用的一种方法。通常采用对某些病原生物有杀灭作用，而对鱼无害的药物，在鱼池中全池遍洒，使药物达到一定的浓度，以杀灭鱼体表和水体中的病原生物，用以防治鱼病的方法称为泼洒法。泼洒时应尽量均匀泼洒，在上风处泼洒效果好。
⑵挂袋挂篓法:
其原理是将药物装在有微孔的器具中，使其在水中缓慢溶解，在池水中人为营造一定的药物区域，使养殖对象在能忍受的药物浓度范围内，利用其摄食过程主动地进入药物区域，接受药物治疗，达到杀灭或驱除体表和鳃部及药物有效作用区域病原体的目的。A. 挂篓法：是将100－150克漂白粉装入一个带盖的小竹楼中，每个食场悬挂3－6个竹楼在食场框架上，悬挂深度大约在水表层20－30厘米处，每天换药1次，每次消毒连挂3天。B. 挂袋法：是将100克硫酸铜、40克硫酸亚铁装入一个质地细密的布袋中对食场进行消毒的方法。技术要点: ①食物周围的药物浓度不宜过低或过高。浓度过低，鱼虽来吃食，但不能杀灭病原体；浓度过高，鱼不来吃食，也达不到防治鱼病的目的。所以挂药后注意观察，及时调整药袋(篓数量或增减药量。②食物周围药物浓度的保持时间，一般应不短于2～3小时，否则对迟来的鱼就不能起到消毒的作用此外，鱼每次在食场停留时间短暂，一次不能全部杀灭病原体，需经多次反复。为了达到这一目的，在下雨天和刮大风时不应使用，以免药物有效浓度保持时间太短，宜选择天气好、风浪小时使用。③为了让鱼类在挂药后仍能前来摄食，可在挂药前停食1～2天。在用药的几天内，选择投喂鱼类适口饵料，或在投喂饲料中添加诱食剂，所投饵料量应比平时少，以保证鱼在次日仍能到食场吃食。④应选择对鱼有趋向反应的药物挂袋(篓，不选用回避反应的药物。并控制药量不超过遍洒药量，鱼池开启增氧
机和注排水时应提起药袋(篓。
⑶口服法 :
口服法是把药物混入饵料投喂，它具有用药量少，操作方便，不污染环境，对不患病鱼，虾类不产生应激反应等特点。常用于增加营养，病后恢复及体内病原生物感染，特别是细菌性肠炎病和寄生肠虫病。但其治疗效果受养殖动物病情轻重和摄食能力的影响，对病重者和失去摄食能力的个体无效，对滤食性和摄食活性生物饵料的种类也有一定的难度。
口服给药的用量计算要考虑到鱼池中能摄食同一饵料的各种鱼，如做成药饵投喂发病的草鱼，必须考虑到草鱼、鲤鱼也会摄食。用药拌草投喂时应考虑到同池中鳊鱼也会摄食。药饵可根据鱼的生活习性制作，如草鱼应使用浮性药饵，将药物拌入到米糠和面粉（或榆树粉）中，米糠和面粉的药物的比例为3:1，充分拌匀后加热水调和，捏成软硬适度的块状，或压成药条或切成小块，晾干投喂。用于青鱼、鲤鱼的药饵要将药物拌入菜饼粉及面粉（或榆树粉）中。菜饼粉和面粉药物比例为5:1，充分拌匀后加热水调和，按上法制成沉性颗粒投喂。如用药物拌青饲料投喂，可将少量面粉用温水调和煮成糊状，冷却后拌入药物，再与嫩青草拌和，晾干后投喂。
3. 显微镜诊断疾病：
由于疾病的发生情况比较复杂往往存在多种并发症，肉眼通常局限于观察疾病的外表症状和大型寄生虫引起的鱼病，则需要经过显微镜检查。
①体表：用解剖刀刮取少许黏液置于载玻片，加滴适量的蒸馏水盖上盖玻片，放在显微镜下检查是否有寄生虫。
②鳃丝：用小剪刀剪取一小块鳃组织放在载玻片上，加滴适量的蒸馏水盖上盖玻片，放在显微镜下检查是否有寄生虫和异常变化。
③肠道：剖开腹腔取出肠道，剪开肠管，分别取前、中，后三段肠壁上的少许黏液置于载玻片上，滴上适量的生理盐水，加盖玻片放在显微镜下检查。寄生在肠道内的寄生虫有黏孢子虫、球虫、肠袋虫、六鞭毛虫以及复殖吸虫、绦虫和线虫的虫卵。
④镜检注意事项
a 检查鱼体（刚死或未死的病鱼）和取出的各器官要保持湿润。
b 检查器官用过的解剖工具，须洗净、消毒后再用。
c 使用显微镜时，先用低倍镜后用高倍镜检查。没有显微镜也可用倍数较高的放大镜。
d 检查病鱼的尾数与肉眼检查相同。
⑤各种病原体的计数传染性鱼病。如草鱼出血病、烂鳃病、白皮病、赤皮病等。按病状的严重程度分别用“+”表示轻微；“++”表示较重；“+++”表示严重。还需用文字描述病状的情况。原生动物的个体小，并且不同种类个体大小差异有很大，纤毛虫、毛管虫在低倍显微镜（10×10）视野下有 1-20 个虫体记“+” ； 21~50 个记“++” ，51 个以上记“+++” 。小瓜虫除按上面标准计数外，如计算囊泡时，则可用文字说明。鞭毛虫、变形虫、孢子虫则以显微镜的高倍（10×40）视野为单位，具体标准同上。胞囊的计数。用文字说明。单殖吸虫、线虫、绦虫、棘头虫、甲壳动物、软体动物的幼虫，在 50 个一下均以数字说明，例如，一片鳃，一段肠子里的虫体数。（低倍显微镜为 10 ×8；高倍显微镜为 10×40。病原体的数量，用载玻片镜检时，都是以同一玻片中观察 3 个视野的平均标准） 4. 寄生虫标本的收集与染色：⑴车轮虫收集：载玻片收集。车轮虫常寄生在鱼的鳃和体表，当在显微镜（10×10）下观察到车轮虫时，取下盖玻片，将载玻片晾干，贴上标签，放入载玻片盒即可。染色：硝酸银染色法：主要是用染车轮虫的齿环等结构。具体操作：是把空气中晾干的涂片（载玻片），平放于桌上，用吸管吸取 2% 硝酸银液滴于涂片上，将涂片移到近窗口光线强处（避免直射阳光） 0.5～1 小时，然后弃掉片子上的染液，用清水轻轻冲去硝酸银液。放入清水中泡洗 1～2 小时，取出晾干，对于染色较好的切片用中性树胶封固。 6
（2）锥体虫收集：载玻片收集。锥体虫常寄生在鳝鱼的血液中。当在显微镜（10×10）下观察到锥体虫时，取下盖玻片，将载玻片晾干，贴上标签，放入载玻片盒即可。染色：吉姆萨染色法。具体操作：将在空气中晾干的血液涂片（载玻片），放在甲醇中固定 5 分钟，取出，让它在空气中晾干。然后将稀释的吉姆萨染色液滴在涂片上，静置 2 小时以上，弃掉染色液，用中性水（即蒸馏水和自来水各半混合）冲洗 0.5～1 分钟，取出晾干，然后镜检，如果染色过深，用
85%的酒精褪色 0.2～0.5 分钟，再镜检。对于染色较好的切片用中性树胶封固。（3）复殖吸虫、绦虫、棘头虫收集：载玻片压片法收集。复殖吸虫、绦虫、棘头虫等通常寄生在鱼类的肠或胃中，有的肉眼可见；有的则需在低倍显微镜
（10×10，10×4）或解剖镜下观察，用镊子或解剖针小心挑取虫子，放到载玻片上，然后将另一载玻片轻轻压上，用细线系好，放入 70%酒精中固定，第二天补加 70%酒精。染色：步骤①水化：由 70%酒精中取出标本退至 50%酒精→30%酒精→蒸馏水，每一阶段约 10-15 分钟。②用硼砂洋红染色。染色 4～6 小时后，水洗。用自来水慢慢冲洗至少 1～2 分钟（或多次换水）。③脱水：自 30%酒精
→50%→70%→80%→90%→95%（Ⅰ）→95%（Ⅱ）→100%（Ⅰ）→100%（Ⅱ）→1/2100%酒精+1/2 二甲苯，每一阶段需停留 10～ 15 分钟。时间也要延长一些。标本愈大，每一次脱水阶段停留的时间也要增长。从 100%酒精开始，松开载玻片，放入无水酒精（Ⅱ）1/2 无水酒精+1/2 二甲苯接着升至纯二甲苯中，到虫体透明为止。④封片：虫体透明后，挑取虫体迅速滴入中性树胶，盖上盖玻片，待中性树胶阴干后，贴上标签，装入载玻片盒。（4）中华鳋、锚头鳋、鱼虱 7
收集：在收集这类虫子时要小心，不能损坏虫体。固定前，标本应充分洗涤干净用 4%的福尔马林固定，第 2 天换液，并用 4%的福尔马林保存。染色：步骤①水洗，24~48 小时，去除福尔马林。或用自来水慢慢冲洗 2 小时（或多次换水）以上；②用硼砂洋红染色。染色 4～6 小时后，水洗。用自来水慢慢冲洗至少 1～2 分钟（或多次换水）。③脱水：自 30%酒精→50%→70%→80%→90%→95%（Ⅰ）→95%（Ⅱ）→100%（Ⅰ）→100%（Ⅱ）→1/2100%酒精+1/2 二甲苯，每一阶段需停留 15～ 20 分钟。时间也要延长一些。标本愈大，每一次脱水阶段停留的时间也要增长。从 100%酒精开始，松开载玻片，放入无水酒精（Ⅱ）1/2 无水酒精+1/2 二甲苯接着升至纯二甲苯中，到虫体透明为止。④封片：虫体透明后，挑取虫体迅速滴入中性树胶，盖上盖玻片，待中性树胶阴干后，贴上标签，装入载玻片盒。 5. 药品的配置①吉姆萨染液：适于染血液涂片吉姆萨液蒸馏水缓冲液 3～5 毫升 3 毫升 1 毫升其缓冲液 pH 为 6.4，配法：磷酸二氢钾磷酸二氢钠蒸馏水 6.63 克 2.56 克 1000 毫升吉姆萨液的配法是：取吉姆萨粉剂 0.76 克，溶于60℃的 50 毫升甲醇中，然后加入 60℃的甘油 50 毫升。不断地搅拌。混合均匀。
并放在干燥箱中过滤，其过滤液即为母液。②各种浓度的酒精：市上出售的普通酒精，通常浓度是 95%。如需要各种不同的浓度，可自行配制。如要配 50%的酒精，可量 50 毫升的酒精，加入 45 毫升的蒸馏水即成。如果要配制 70%的酒精，可量 70 毫升 95%的酒精，加入 25 毫 8
升的蒸馏水即成。其余各种浓度可依此类推。③福尔马林溶液：福尔马林又称甲醛溶液，市售一般含甲醛 36-40%，但在配制各种浓度的福尔马林液时，都是以市售福尔马林为 100%。所以，要配制 5% 福尔马林，取 5 毫升市售的福尔马林溶液，加 95 毫升水即成。配置 10%福尔马林液，取 10 毫升甲醛液，加入 90 毫升的水即成。④硼砂洋红：用于染完整寄生虫。洋红 4%的硼砂水溶液 70%酒精 1-2 克 100 毫升 100 毫升将洋红加入硼砂水溶液中。煮开至完全溶解，然后加入酒精，静置数天过滤，即可使用。 9
复习题 1、简述动物实验中3R原则内容及其意义。 Replacement 替代1.尽量使动物一体多用2、用低等动物代替高等动物3、尽量使用高质量动物4、使用恰当的试验设计和统计学方法 Reduction 减少1、用有生命的物体代替动物进行研究2、用数理化方法模拟动物进行研究Refinement 优化1、改善实验设施条件，提高动物实验质量2、改善控制技术，减少对机体的干扰 3R研究的意义 1、作为提升突破技术壁垒能力的载体和具体体现“标尺”，在经济发展和国际贸易中发挥不可替代的重要作用。 2、为科学发展提供了新思路和新方法。 3、体现时代发展、社会进步 2、简述免疫缺陷动物的概念以及生物学特性（主要是裸鼠和联合免疫缺陷鼠）。 指由于先天性遗传突变或用人工方法造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。 一、T淋巴细胞功能缺陷动物：1、裸小鼠（nude mice）：1）被毛生长异常，呈裸体外表。2）无胸腺，仅有胸腺残迹或异常胸腺上皮，不能使T-cell正常分化，导致细胞免疫力低下。幼龄鼠有残存的未分化的上皮细胞。3）B细胞功能正常，NK细胞活力增强。4）繁育能力差，乳腺发育缺损，以雄性纯合子与雌性杂合子繁育。5）T细胞缺陷可通过移植成熟T细胞、胸腺细胞或正常胸腺上皮得到校正。2、裸大鼠(nude rat)：基因符号为rnu，一般特征似裸小鼠。1）发育迟缓，体重为正常大鼠的70%。2）裸大鼠较裸小鼠对多种传染病更敏感。3）比裸小鼠更强壮、寿命更长。4）体型较大，对大范围的外科手术方法较有利。二、联合免疫缺陷动物1、严重联合免疫缺陷小鼠(SCID mice)：突变基因scid位于16号染色体。1）该突变基因造成编码Ig重链和TCR的基因重排异常，抑制B-cell和T-cell前体的正常分化。2）C.B-17Icr为携带来自C57BL/ka小鼠的免疫球蛋白重链Igh-1b等位基因的 BALB/cAnIcr的同源近交系。3）纯合子血清中无免疫球蛋白，淋巴结、胸腺变小，缺乏体液、细胞免疫功能。饲养于SPF环境中。4）通过移植人免疫组织或免疫细胞，可使SCID 小鼠具有人类部分免疫系统，称为SCID-hu小鼠。
水产动物疾病学综合实验安排 第一天第二天第三天第四天第五天 上午现场调查 给药方法操作： 泼洒法 挂袋挂篓 口服法鱼苗鱼种检查 成鱼检查 收集 锥体虫并染 色 染色： 锚头鳋、 中华鳋、 鲺 考试 下午鱼类甲壳动物病及 其病原体的观察 收集锚头鳋、中华鳋等 成鱼检查 收集车轮虫、锚 头鳋、中华鳋、 鱼虱等 收集车轮虫 并染色 染色交寄生虫染 色切片标本
水产动物疾病学综合实验指导 一、实验目的与要求： 1. 水产动物疾病学综合实验是为了满足现代水产养殖行业对生产、培养科研技术操作人员的需要，使学生掌握水产动物疾病学的基本知识及基本技能，同时培养学生的创新、创业及社会服务能力，成为水产养殖行业防病治病的技术人才。 2. 通过实验了解水产动物疾病种类及其特点；能较准确地诊断水产动物疾病。 3. 能正确地使用渔药，能有效地防治水产动物疾病。 二、实验内容： 1. 现场调查； 2. 渔药使用：泼洒法；挂袋挂篓法；口服法； 3. 显微镜诊断疾病； 4. 寄生虫标本的收集与染色； 三、实验操作及其步骤： 1.现场调查： 池塘是水生动物生存的基础，疾病的发生除了由病原生物直接感染和侵袭外，首先应了解池塘周围的环境和水体物理、化学因素的变化对养殖生物发病的影响。发病现场的调查可为全面查明发病原因，及时发现和正确判断病鱼提供依据。 ①调查发病养殖水体环境和发病史 发病养殖水体环境是指养殖水体周围有哪些工厂，工厂是否排放污（废）水，这些污（废）水是否含有对鱼类有毒的物质，是否经过处理后排放等。同时，还要着重强调调查养殖水体情况，了解放养前清塘的方法、清塘药物的剂量、清塘
后放养鱼种的时间、鱼种消毒的药量等。这些与养殖生物疾病的发生关系较大，同时还应了解养殖水体近几年发生疾病的危害程度，以及所采用的防治方法和效果等。 ②了解池塘水质状况 水温水温是养殖生物疾病发生的重要因素，水温高低与疾病的发生和流行有着密切的关系。一般病毒性鱼病和细菌性鱼病，在水温为25~30℃时传染性最强，32℃以上和18℃以下时感染减弱。因此江苏、浙江和湖南、湖北一带，每年5~6月和8~9月份是细菌病、病毒病流行高峰。暴发性鱼病需要需要的水温范围较大，流行的时间也更长些。有些寄生虫病，如车轮虫病和指环虫病是夏季危害鱼苗、鱼种的流行病，而有些疾病如水霉病、小瓜虫病、斜管虫病和鱼波豆虫病，通常在20℃以下发病，属于低温季节的流行病。 A.谁的酸碱度（pH）由于高密度养殖，池塘有机质多氢离子浓度微偏高 （pH偏低），易发生水霉病。酸性水也常常引起嗜酸性卵甲藻病的暴发。在氢离子浓度较低（pH较高）的盐碱养殖水体，水温较低时易大量繁殖三毛金藻，分泌毒素，致使池鱼中毒死亡。 B.溶解氧水中含氧量的多少关系到养殖生物的生长和生存，同疾病的发生 有明显的相关性。正常池塘的溶解氧含量要求4毫克/升，最低不能低于1毫克/升，对于各种不同的鱼类和不同的生长阶段，因其生理需求不一样而对溶氧的需求不同。溶解氧长时间过低会影响鱼类生长，降低鱼体的抗病能力，同时为病原菌的繁殖，生长创造了条件。 C.检测水质对发病水体进行水的pH、溶解氧、氨氮、亚硝酸盐、磷酸盐、 硬度、化学耗氧量的分析，了解水质的基本营养盐变化情况，对可能因环境因子致病的因素应根据具体情况选择分析。 ③调查饲养管理情况 A.了解鱼种放养情况: 放养数量过多就会出现相互拥挤、摄食不足、生长不良 的现象，导致养殖生物体对疾病的抵抗能力降低，有利于病原菌的感染和传播。夏花培育至冬片鱼种一般亩放养量为7000~10000尾。 B.了解投饲和施肥状况: 投喂的饲料不新鲜或不按照“四定”投喂，鱼类很容 易患细菌性肠炎病。夏天在池塘内施用不经发酵的有机肥，易使池塘水质恶化、缺氧、并促使致病菌核寄生虫大量繁殖。
水产养殖生物病害学疾病学 试卷一 一、填空题（每空0.5分，共30分） 1.病原是致病微生物和寄生虫的统称，其中，致病微生物包括__________、__________ 、____________和______________；寄生虫包括___________、______________、_____________、_____________、____________、___________和____________。 2.疾病的发生是____________、____________和____________三者相互作用的结果；疾病的经过包括____________、___________和___________三个时期；疾病的结局有_________、__________和__________三种方式。 3.决定病原体能否致病的因素包括____________、____________和______________；病原对宿主的危害作用包括_____________ 、____________、____________ 、____________和____________。 4.NH3-N中毒往往发生在水体的pH值偏_______时，H2S中毒容易发生在水体的pH值偏________时；浮头发生在水体的DO值偏________时，气泡病发生在水中的DO值偏_______时；如果浮头在夜晚12时就开始出现，说明______________，如果浮头仅发生在凌晨6时以后，则说明_______________。 5.细菌疫苗的类型主要有______________和______________；细菌疫苗的接种方法主要有______________、________________、______________和_____________。 6.抗原是能刺激机体产生__________和____________，并能与之结合而引起特异性
名词解释：实验动物（laboratory animal）：指经人工培育，对其携带的微生物、寄生虫进行严格控制，遗传背景明确，可用于科学实验、药品、生物制品的生产和检定及其它科学研究的动物。 实验用动物：是指一切用于实验的动物，除了符合严格要求的实验动物外，还包括家畜和野生动物等。 实验动物与实验用动物：遗传控制不同,微生物控制等级不同,培育的形质和目标不同。 人类疾病的动物模型：是指医学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料。 实验动物标准化：遗传质量标准化微生物质量标准化环境标准化营养标准化 按遗传控制标准，实验动物分为：近交系（CH3），突变系（裸鼠），杂交系（F1），封闭群（远交系）（KM小鼠，wister大鼠） 按基因型分：1、同基因型动物（如近交系、F1代） 2、不同基因型动物（如封闭群） 按微生物控制程度分级：普通级，清洁级，SPF级，无菌级（2001年版的国家标准中，大小鼠取消普通级动物，犬、猴只分普通级和SPF级，豚鼠、地鼠和兔仍然分4级） SPF动物定义：除清洁动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原。（屏障环境中饲养，种子群来源于无菌动物或剖腹产动物。饲养管理同清洁动物） 无菌动物的特点：形态学及生理学特点： ①形态学：盲肠肥大（增大5～6倍），肠壁薄，易发肠扭转。心脏、肝脏、脾脏相对较小。 ②生理学: 血中无抗体，巨噬细胞吞噬能力弱。体不能合成维生素B和K。无菌鸡生长较快、无菌豚鼠和无菌兔生长较慢。无菌大小鼠与普通大小鼠生长速度相同。 （3)饲养要求：隔离环境中饲养，种子群来源于剖腹产动物或无菌卵的孵化。由于肠道无菌，饲养困难，应注意添加各种维生素。每2～4周检查一次动物的生活环境和粪便标本。 悉生动物：概念：悉生动物是指在无菌动物体植入已知微生物的动物。又称已知菌动物。植入一种细菌的动物叫单菌动物；植入两种细菌的动物叫双菌动物；植入三种细菌的动物叫三菌动物；植入多种细菌的动物叫多菌动物。（由于肠道接种有利于消化吸收的细菌，故饲养较无菌动物容易，形态学和生理学方面与普通动物无异。） 近交系：经至少连续20代的全同胞兄妹交配培育而成，品系所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。 特点： 1、其基因纯合度达到98.6%，个体差异小，似同卵双生反应一致重复性好，用少量动物即可获得精确度很高的实验结果，个体相互之间可以接受皮肤、器官移植。 2、隐性基因纯合使许多病态性状得以暴露，可获得大量先天性畸形及先天性疾病的动物模型.如高血压、白障、糖尿病.动物模型。 缺点：出现近交衰退。近交衰退是近交过程中动物群体由于基因分离与纯合发生一系列不利于个体或群体发育的变化和现象。
复习题 1、水产动物细胞和组织变性的类型有哪些？ （1）颗粒变性：一种最早和最轻微的细胞变性，很容易恢复，其特点是变性细胞体积肿大，胞浆内水分增多，出现许多微细红染的蛋白性颗粒，故称颗粒变性。 (2).水泡变性水泡变性是指在细胞的胞浆内或胞核内出现多量水分形成大小不等的水泡的现象. (3).脂肪变性是指在实质细胞的胞浆内出现脂滴或脂滴增多的现象，简称脂变。 2、阐明寄生虫、宿主与外界环境三者之间的相互关系？ 3、阐明水产动物疾病发生的因素？ 1. 环境因素 A. 自然条件 1)．养殖水体的空间因素: 养殖密度。2)．养殖水体的水质因素：水质的好坏（溶氧、PH 值等）。3)．养殖水体的底质因素: 淤泥的影响。 B. 人为因素 1）放养密度过大或搭配比例不当（青鱼与鲤鱼的搭配）。2）饲养管理不当（用药方法、用药量不当，饲料投喂不当等）3）机械损伤（操作不当造成鱼体受伤，而继法感染，引起发病，水霉病）。 c 生物因素 主要包括病毒、细菌、真菌、藻类、原生动物、蠕虫、蛭类、甲壳动物、钩介幼虫、螨类等生物性因素。 D 机体自身因素主要是指鱼体自身的抗病能力，这与鱼的种类、年龄、生活习性和健康状况等方面有关。 疾病的发生，不是孤立的单一因素的结果，而是外界条件和内在的机体自身的抵抗力相互作用的结果，要综合加以分析，才能正确找到疾病发生的原因，采取相应的治疗措施。 4、药物治疗过程中有哪些不良反应？ （1）副作用：是指在常用治疗剂量时产生的与治疗无关的作用或危害不大的不良反应。 （2）毒性反应：是药物对机体的损害作用。一般是剂量过大，用药时间过长或个体敏感性较高时引起。（3）过敏反应： （4）继发反应：是药物治疗作用引起的不良反应。 （5）后遗效应：指停药后血药浓度已降至阈值以下时的残存药理效应。 5、阐明水产动物抗菌药物的作用机制？ 抗菌药物的作用机制 （1）抑制细胞壁的合成：细菌胞体外有一层坚韧的细胞壁，具有维持细菌形态和保护功能。抗菌药物（如青霉素类）可药物通过各种环节抑制细胞壁粘肽的合成，最终使细胞壁缺损，导致菌体破裂溶解死亡。（2）增高细菌胞浆膜的通透性：位于细胞壁内侧的胞膜是脂质和蛋白质分子构成的渗透屏障，具有物质交换，合成粘肽，保护菌体等功能。一些抗菌药物（多粘菌素、制霉菌素等)可与细胞膜结合导致胞浆膜通透性增加，使细菌体内氨基酸、嘌呤、蛋白质、盐类外逸，导致细菌死亡。 （3）抑制蛋白质合成如四环素类、大环内酯类等。 （4）抑制叶酸代谢：磺胺类抑制细菌二氢叶酸合成酶，抑制四氢叶酸合成，阻碍核酸前体物质嘌呤、嘧啶的形成，从而抑制细菌的生长繁殖。 （5）抑制核酸合成：喹诺酮类可抑制DNA螺旋酶，进而抑制DNA的合成。 6、水产动物疾病的预防有哪些措施？ 预防水产动物疾病的措施 1.改善生存环境 （1）建设符合防病要求的养殖场 A 选择良好的水源条件水源充沛，无污染 B科学地建设进排水系统 （2）清整养殖场 A 清除池底过多的淤泥 B 药物清塘 a. 生石灰清塘（图1） 干池清塘仅留5~10厘米深的水，每667平方米（相当于1亩）用生石灰50~70公斤。 带水清塘每亩水深1米用125~150公斤 b. 漂白粉清塘 按照鱼池中水的容量进行计算，每立方米用药量为20克。 （3）保持良好的水质 A 定期泼洒生石灰调节水的PH值 B 定期加注新水，保持适宜水质 C 适时开动增氧机，改善水体的溶氧状况 D 采用光合细菌、硝化细菌等改善水质 2. 增强养殖动物机体抗病能力 （1）加强饲养管理 A 合理放养合理的放养密度与放养比例 B 科学投饵与施肥 a.投饵：品质良好，营养全面，做好“四定” b.施肥：应根据池底质的肥瘦以及肥料种类等灵活掌握，有机肥应进行发酵处理。
实验动物学重点整理 1大小鼠年龄、体重、寿命的比较数据？ 成年动物的年龄、体重和寿命比较 小鼠大鼠 成年日龄（天）65-90 85-110 成年体重（克）20-28 200-280 平均寿命（年）1-2 2-3 2动物实验的对照类型？ （一）空白对照： 不给任何措施的情况下观察动物自发变化的规律。家兔白细胞数每天上下午有周期性的生物钟变化。 （二）实验对照： 采用与实验组相同操作条件下对照，如给药实验中的溶媒（Nacl），手术，注射以及观察时的抚摩等都可以对动物发生影响。有人报告，针刺犬的人中穴对休克、心脏血液动力学有改变，但采用空白对照（不针刺）不够，应该设有针刺其它部位或穴部的实验对照。 （三）有效（标准）对照： 常用于药物研究。对一新药疗效可用一已知有效药或能引起标准反应药物做对照，可考核实验方法可靠性，又可通过比较，了解新药疗效和特点（普鲁卡因---对皮肤黏膜穿透力弱，用纳塞卡因---穿透力强，作用快、持久）。（四）配对对照： 同一个体不同眼睛比较对照期和实验期差异（左眼试验，右眼对照）；同一种动物后代分成左右两部分进行对照和实验以比较差异，此法可大大减少抽样误差。实验中可用同卵双胎或同窝动物。 （五）组间对照： 将实验对象分成两组或几组比较其差异。这种对照个体差异和抽样误差比较大，可用交叉对照方法以减少误差。观察某药物疗效可用两组犬先分别做一次实验和对照，再相互交换，以原实验组做对照组，原对照组做实验组重复第一次实验，观察疗效或影响，切记检查指标和条件要等同。 （六）历史对照与正常值对照： 此种对照要慎重，similar background ---条件、背景、指标和技术方法相同才进行对比，否则得出不恰当的甚至错误结论。 3转基因动物的概念、制备过程? 转基因动物： 用物理、化学、生物手段将确定外源基因通过生殖细胞或早期胚胎导入动物染色体，其基因组内稳定整合导入外源基因，能遗传给后代的一类动物,使其获得人类需要新功能。 技术程序：
水产动物疾病学复习题 ?一、名词解释（共8分，每小题2分） ?继发性感染：已遭受病原感染的个体再次遭到不同病原的侵袭。 ?原发性感染：指病原体直接浸入健康鱼体而引起的鱼病。 ?再感染：第一次患某种疾病痊愈后，第二次又患同样的疾病。 ?重复感染：第一次患某种疾病后，一般症状已消失，但仍遗留有病原体，机体和病原体间保持着暂时的平衡，当新的同种病原体入侵后，平衡被破坏，就会重新发病。 ?拮抗作用：当两种或两种以上药物共同使用时，其作用因相互抵消或减弱，称拮抗作用。 ?充血：机体的某一区域（组织或器官）的含血量超过正常的现象。 ?栓塞：在正常状况下并不存在于血液中的某些物质或小块，随血流而被带到较小的血管中，引起管腔阻塞的过程。 ?炎症：机体遭受有害刺激（如微生物、寄生虫、理化因子等）后所产生的防卫性反应，其作用为清除入侵体内的有害刺激物。 ?水肿：组织间隙大量液体的积储。 ?萎缩：物质代谢发生改变，使组织或器官的体积较正常缩小的过程。 ?湖靛：池中微囊藻（主要是铜绿微囊藻及水花微囊藻大量繁殖）在水面形成一层翠绿色的水花。 ?泛池是因为池塘水体中溶解氧降低到不能满足鱼类生理上最低需要时，造成鱼类呼吸困难，窒息死亡。?二、填空题（共17分，每空0.5分） ?1、根据症状区分，草鱼出血病有(肠炎型、红肌肉型、红鳍红鳃盖型)三种类型。 ?2、贝类的血液一般无色，如扇贝、牡蛎、文蛤等，是因为其血液含（血蓝蛋白）。 ?3、有些种类血液是红色的，如泥蚶，魁蚶等，是因为其血液中含（血红蛋白）。 ?4、锥体虫寄生在鱼的（血液）里，通过（水蛭）传播。 ?5、病原对宿主的危害主要有（夺取营养、机械损伤、分泌有害物质）三个方面。 ?6、药物的剂量必须达到(最小有效剂量)才能产生效应，但是超过(最大剂量)又会引起中毒。 ?7、敌百虫在碱性条件下迅速降解为（敌敌畏），其毒性增强近10倍，它是一种胆碱脂酶抑制剂。 ?8、草鱼细菌性烂鳃病的典型症状是(烂鳃和开天窗)。 ?9、白头白嘴病主要危害鱼的（苗种）阶段。 ?10、漂白粉是一种混合物，它的有效成分是（次氯酸钙）。 ?11、病毒进入机体的途径大致可分为两大类，即（水平感染）与（垂直感染）。 ?12、发现鱼浮头的急救办法有（加注新水、开机增氧机、泼洒增氧药物）等。 ?13、鱼苗转塘时，两水体的温差不超过±(2)℃，鱼种转塘时，两水体的温差不超过±(5)℃。 ?14、在复口吸虫的生活史中，（螺类）为第一中间宿主，（鱼类）为第二中间宿主，鸥鸟为终末宿主。?15、病鱼“跑马”的主要原因是（缺乏适口饵料）（池塘漏水）（车轮虫寄生）。 ?16、竖鳞病的主要症状为（全身鳞片竖立），主要危害（鲤鱼、金鱼）。 ?17、疾病发生与（环境）、病原体与鱼类的体质有关。 ?18、大黄使用前用（氨水）浸泡12小时，目的是使蒽琨衍生物游离出来。 ?19、鲢碘泡虫主要寄生在白鲢的(神经系统)和(感觉器官)。 ?20、烂鳃病的主要症状表现为病鱼鳃丝（溃烂），常粘有污泥。患严重烂鳃病的病鱼，鳃盖内表皮中间部分常被腐蚀成一个圆形或不规则的病灶区，这个病灶区俗称（开天窗）。 ?21、水产动物传染性疾病的病原体可大致分为（病毒）、细菌、真菌和（单细胞藻类）。 ?22、九江头槽绦虫生活史需经（卵）、（钩球蚴）、（原尾蚴）、（裂头蚴）才能发育为成虫。 ?23、九江头槽绦虫的中间寄主是(剑水蚤)。九江头槽绦虫寄生在鱼体的（肠道）部位。 ?24、清塘时经常使用的两种药物有(生石灰)和(漂白粉)，其中(生石灰)还具有增加肥效和调节pH的作用。?25、疾病的发展过程可分为（潜伏期）、（前驱期）、（发展期）三个时期。
水产动物疾病学综合实验安排 水产动物疾病学综合实验指导 一、实验目的与要求： 1. 水产动物疾病学综合实验是为了满足现代水产养殖行业对生产、培养科研技术操作人员的需要，使学生掌握水产动物疾病学的基本知识及基本技能，同时培养学生的创新、创业及社会服务能力，成为水产养殖行业防病治病的技术人才。 2. 通过实验了解水产动物疾病种类及其特点；能较准确地诊断水产动物疾病。 3. 能正确地使用渔药，能有效地防治水产动物疾病。 二、实验内容： 1. 现场调查；
2. 渔药使用：泼洒法；挂袋挂篓法；口服法； 3. 显微镜诊断疾病； 4. 寄生虫标本的收集与染色； 三、实验操作及其步骤： 1. 现场调查： 池塘是水生动物生存的基础，疾病的发生除了由病原生物直接感染和侵袭外，首先应了解池塘周围的环境和水体物理、化学因素的变化对养殖生物发病的影响。发病现场的调查可为全面查明发病原因，及时发现和正确判断病鱼提供依据。 ①调查发病养殖水体环境和发病史 发病养殖水体环境是指养殖水体周围有哪些工厂，工厂是否排放污（废）水，这些污（废）水是否含有对鱼类有毒的物质，是否经过处理后排放等。同时，还要着重强调调查养殖水体情况，了解放养前清塘的方法、清塘药物的剂量、清塘 后放养鱼种的时间、鱼种消毒的药量等。这些与养殖生物疾病的发生关系较大，同时还应了解养殖水体近几年发生疾病的危害程度，以及所采用的防治方法和效果等。 ②了解池塘水质状况 水温水温是养殖生物疾病发生的重要因素，水温高低与疾病的发生和流行有着密切的关系。一般病毒性鱼病和细菌性鱼病，在水温为25~30℃时传染性最强，32℃以上和18℃以下时感染减弱。因此江苏、浙江和湖南、湖北一带，每年5~6月和8~9月份是细菌病、病毒病流行高峰。暴发性鱼病需要需要的水温范围较大，流行的时间也更长些。有些寄生虫病，如车轮虫病和指环虫病是夏季危害鱼苗、鱼种的流行病，而有些疾病如水霉病、小瓜虫病、斜管虫病和鱼波豆虫病，通常在20℃以下发病，属于低温季节的流行病。
实验动物学重点
1.实验动物学绪论 2.实验动物质量控制 3.常用实验动物 4.实验动物营养与饲料 5.实验动物环境和设施 6.基因工程动物 7.“3Rs”理论及其研究进展 8.怎样才能作好动物实验 实验动物学绪论 实验动物学：以生物学、动物科学、动物医学、医学,药理学、毒理学等学科为基础，综合发展而形成的一门覆盖 面极广的边缘学科。 实验动物学包括：实验动物，实验动物医学，比较医学，动物实验 实验动物：是指经人工培育的、遗传背景清楚、对其携带微生物和寄生虫实行控制、用于科学实验、教学、检定及 药品、生物制品生产的动物。 实验用动物：实验动物、家畜、野生动物、伴侣动物 概况：实验动物科学内容：实验动物、实验动物医学、比较医学、动物实验 1988年，国家科委发布《实验动物管理条例》 1996年10月，《北京市实验动物管理条例》出台，于2005年1月1日实施 实验动物伦理：是人与实验动物关系的伦理信念、道德态度和行为规范。主要体现在尊重实验动物的价值和权利。 实验动物福利：实验动物的一种康乐状态。在此状态下，其基本需求得到满足，而痛苦被减至最小。 五项基本福利：一，提供适当的清洁饮水和保持健康和精力所需要的食物，使动物不受饥渴之苦 二，提供适当的栖息场所，能够舒适地休息
和睡眠，使动物不受困顿不适之苦 三，做好防疫，预防疾病和给患病动物及时诊治，使动物不受疼痛、伤病之苦 四，保证拥有良好的条件和处置（包括安乐死），使动物不受恐惧和精神上的痛苦 五，提供足够的空间、适当的设施以及与同类动物伙伴在一起，使动物能够自由表达正常的习性 动物实验需要考虑实验动物伦理的几个环节：实验目的确定和必要性评估、实验设计遵循3Rs原则、实验操作过程避免或减轻动物疼痛及恐惧、日常饲养及护理、安乐死 CRO：Contract Research Organization Include: Clinical trial、Preclinical research AAALAC认证（国际实验动物管理评估和认证协会）实验动物学发展趋势：基因修饰技术运用； 实验动物福利与“3Rs”原则； 实验动物商品化及SPF动物广泛应用； 人源化小鼠模型的建立。 实验动物科学发展简史：1909年，Prof. Little 采用近交方法 培育出首个近交系小鼠DBA 1943年，美国Dr. Reynier研制出第一台金属隔离器，饲养无菌 大鼠 1948年，美国成立实验动物管理小组，后又成立实验动物科 学学会（AALAS） 1966年，美国国会批准《实验动物福利法案》 1982年，第一例转基因小鼠问世 实验动物学、比较医学等专业的设立及建立相应培训制度 我国实验动物科学发展概况：1918年，原北平中央防疫处开 3
1.实验动物: 实验动物（Laboratory Animals）特指的是人工饲养，对其携带的微生物实行控制，遗传背景明确或者来源清楚的，用于科学研究、教学、生产、检定及其它科学实验的动物。 2.实验动物三大特点: 人为遗传限定、携带的微生物和寄生虫得到控制、应用于科学实验 5实验动物的标准化包括哪些内容它有什么意义 实验动物学的核心内容：是实验动物的标准化，它包括实验动物的遗传学控制标准、微生物学和寄生虫学控制标准、设施环境控制标准、饲料营养控制标准。 意义: 在符合标准化的实验动物及其环境条件下，所做的动物实验无论在时间的先后上，还是在世界的不同实验室里，其实验结果应该具有可重复性和可对比性。 8、动物福利: 动物福利是指动物在整个生命过程中应得到人类的保护，其基本原则是要善待动物，保证动物的健康和快乐。 9.针对动物保护主义，科技界的对策是: 1.为动物福利立法，号召“善待动物”。 2.坚持原则、坚持科学、坚持动物实验。 3.进行动物实验伦理审查 提倡动物实验的“3R”原则。Replacement 替代Reduction 减少Refinement 优化10.国际上对动物实验伦理有哪些要求 1.动物居住空间应符合标准，注意日常饲养管理，不使动物陷入饥饿、缺水和患病。 2.尽可能的采用替代法最少地使用和牺牲动物。 3.在必须使用犬、猫和猴时，在实验前应进行训练，尽可能地减少动物的恐惧和不安。 4.实验结束和动物不可能恢复时，应采取安乐死。 5.要爱护动物和对由于试验死亡的动物应持有怜悯和感激之情。 动物实验的“3R原则”: 1替代（Replacement）替代是指用其它实验方法替代用哺乳类动物进行实验研究。 2. 减少（Reduction）减少是指某一研究必须要使用实验动物，而又没有可靠的替代方法时，应考虑把使用动物的数量减少到实验研究目的所必需的最少数量。 3 优化（Refinement）优化是指通过改进和完善实验程序、利用先进仪器设备，减轻或避免给动物造成痛苦和不安，提高动物福利的同时，获得可靠的实验结果。 第二章实验动物的遗传控制 1. 请说出实验动物种、品种、品系的概念。 种（Species）：是生物分类学上的基本单位，由自然选择形成。 品种（stock）：是种以下的非自然分类单位，由人工选择和定向培育出来的，具有某些生物学特性，能稳定遗传。
渔药与人药、兽药的差异 实验课程：水产动物疾病学 姓名:刘保 学院：水产学院 学号:2009308200422 专业班级:水族科学与技术0901班 指导老师：顾泽茂 完成时间：二○一二年二月二十五日
渔药与人药、兽药的差异 刘保 （华中农业大学水产学院，武汉430070） 摘要 随着我国医药学和畜牧业的快速发展,人药、兽药及渔药的需求量越来越大,人药、兽药及渔药的生产厂家和药物品种也越来越多。同时，由于药物生产和经营管理体制不顺、机制不全,致使大量的伪劣假冒和低质药品充斥市场，一些地方不规范用药、滥用药和凭经验用药现象时有发生，更有甚者，人药、兽药和渔药不分，用兽药替代渔药，用人药代替兽药或渔药，滥用现象十分严重，也十分普遍。虽然这类药物疗效显著，但引发的副作用较多，后果也较严重，如引发环境污染、引起药害、增加用药成本、耽误治疗良机、导致品种质量安全问题等。 为尽快扭转这种局面，大力普及规范用药知识，笔者在下面将对人药、兽药、渔药进行详细区分，对这些年来用药过程中存在的主要问题加以梳理、分析和归纳，就药物的合理使用加以说明，供广大从事医药事业特别是医生和兽医以及用药指导技术人员了解和掌握。 关键字：人药;兽药；渔药；药物；水产养殖
目录 1.药物 (4) 1.1.兽药 (4) 1.1.1.定义及分类 (4) 1.1.2.生产现状 (4) 1.1.3.成分 (5) 1.2.渔药 (6) 1.2.1.定义及分类 (6) 1.2.2.生产现状 (6) 1.2.3.疗效 (6) 1.3.人药 (7) 1.3.1.定义及分类 (7) 1.3.2.自身特性 (7) 2.药物滥用 (7) 2.1.现状 (8) 2.2.原因 (9) 2.3.危害 (10) 3.兽药、渔药和人药的区别 (10) 3.1.兽药与渔药 (10) 3.2.兽药与人药 (11) 4.科学用药方法 (12) 4.1.怎样安全使用兽药 (12) 4.2.怎样安全使用渔药 (13) 4.3.怎样有效遏制药物滥用现象 (14) 参考文献 (16)
疾病学复习资料 病原对宿主的危害 1夺取营养 2机械损伤 3分泌有害物质 有些病原有严格的专一性，如鰤本尼登虫，就专门寄生在鱼的皮肤；也有对宿主非专一性，如刺激隐核虫可以寄生在数十种海水鱼，小瓜虫可寄生多种淡水鱼。 疾病的控制包括三部分；诊断、预防、治疗 疾病诊断基本原则： 1诊断方法：先外后内、先腔后实、先肉眼后镜检。 2诊断材料：具典型症状的活的或刚死不久的材料。 诊断流程 宏观观察诊断 1观察症状和寻找病原：体液、体表、肌肉、内脏等部位有无颜色变化、有无炎症、充血、出血溃疡等症状，肉眼检查有无异 物。 2调查饲养管理情况：养殖品种和放养密度，放养量，摄食情况和活动情况。 疾病的综合预防 水产疾病的防治原则：无病早防、有病早治、防重于治 为什么水产病害学要实施综合预防？ 发现难生活于水中，不易发现 诊断难原因复杂，常为综合或并发感染 治疗难 a 水体施药用量大，治疗难以彻底 b 患病后食欲减退，口服用药难以理想 c 许多药物具有抗药性，反复使用无效 疾病的综合预防措施 1彻底清池清淤、药物消毒 2 保持适宜的水深和水色 A水深的调节：以淡黄色、淡褐色、黄绿色为好 黄褐色、绿色、蓝绿色、红色 b水色的调节方法：换水、适当改变水体的营养成分等 c科学用水和管水：PH、溶氧度、盐度、亚硝酸盐等指标。 3放养健壮的种苗和适宜的密度 4饵料应质优量适
5改善养殖水体生态环境条件 6操作要细心 7经常进行检查—寻唐 8在日常管理中要防治病原传播 9定期药物预防 10完善并严格执行检验检疫制度，建立预警预报。 11人工免疫 12选育抗病力强的新品种：SRP品种选育、杂交育种。 疾病的治疗 目的：通过药物控制或消灭病原或改善环境及营养条件 治疗的时机：早发现早治疗 一改善和优化养殖环境 a合理放养放养密度要合理；混养的种类搭配要适合。 b保证充足的溶解氧 c不滥用药物 d适时适量使用环境保护剂石灰类、光合细菌等 二增强养殖群体抗病力 1、培养和放养健壮苗种 1）SPF亲本 2）PVP-1洗卵 3） 使用清洁水 4）忌高温育苗、忌滥用抗生素 5）饵料优 2、免疫接种 3、选用抗病力强的养殖种类 4、降低应激反应 应激源：凡是偏离养殖动物正常生活范围的异常因素，如高 温等 应激反应：养殖动物对偏离养殖动物正常生活范围的异常因 素的躲避现象 三控制和消灭病原体 1使用无病原污染的水源 2池塘彻底清淤消毒 3强化疾病检疫 4建立隔离制度 5实施消毒措施 四加强饲养管理 思考题：1、水产动物疾病学 2、水产动物疾病发生的原因 3、水产动物疾病的诊断流程（诊断原则） 4、水产动物疾病的综合预防措施？
实验动物学复习重点 第一章绪论 1、实验动物学：是以实验动物为主要研究对象，并将培育的实验动物应用于生命科学等研 究的一门综合性学科。 简而言之：研究实验动物和动物实验的一门综合性学科。 2、【实验动物】指由人工培育，来源清楚，遗传背景明确，对其携带的微生物和寄生虫实行 监控，用于生命科学研究、药品与生物制品生产和检定以及其他科学研究的 动物。 3、【动物实验】应用标准的实验动物进行科学研究，观察实验过程中实验动物有关器官的组 织形态改变、机能反应变化及其发生、发展规律。 4、【中医实验动物学】以中医药理论为基础，运用实验动物学的理论和方法，进行中医药研 究的实验学科。 5、【实验动物的特点】 （1）遗传学要求——人工培育，来源清楚，遗传背景明确的动物。 按照遗传特点分近交系、封闭群或远交群、杂交群。 （2）微生物和寄生虫监控要求——根据控制程度分普通级动物（CV）、清洁动物（CL）、 无特定病原体动物（SPF）、无菌动物（GF） （3）应用要求——实验动物对试验因素的敏感性强、反应一致，从而使研究结果具有可靠性、精确性、可比性、可重复性和科学性。 6、【AEIR】进行生命科学实验研究所必需的4个基本条件： A——animal(实验动物) E——equipment(设备) I——information（信息）R——reagent(试剂) 7、【“3R”原则】 替代replacement原则——尽可能采用低等实验动物或非实验动物，以替代高等实验动物进 行实验。 减少reduction 原则——要求尽可能减少实验动物的用量，甚至可以降低统计学要求。 优化refinement原则——要求优化实验设计和操作，以减轻动物的痛苦。 8、1956年，联合国科教文卫协会建立了“国际实验动物科学委员会”，是实验动物学真正 形成的时期。 1988年，原国家科学技术委员会颁布了《实验动物管理条例》标志我国实验动物工作走上行政法规管理的轨道。 20XX年，国家科技部在全国推行实验动物生产和使用许可证制度，大大提高实验动物的质量和动物实验的技术。
本科选修课论文 题目我国水产动物疾病学研究进展及发 展趋势 学院工程技术学院 专业电子科学与技术 年级2007 级 学号222007322072003 姓名冯启业 指导教师唐毅 成绩
2009年11月27日 我国水产动物疾病学研究进展及发展趋势 一、近年来我国水产动物疾病学研究进展 １、水生动物免疫学的研究 （1）免疫组织、器官 免疫组织、器官的研究发展迅速，卢全章等（１９９１）报道了胸腺是鱼类淋巴细胞增殖和分化的主要场所，其组织结构分为皮质和髓质，内有大、中、小三类淋巴细胞，有人认为鱼类的胸腺参与了Ｔ淋巴细胞的成熟。脾脏是鱼类红细胞、粒细胞产生、储存及成熟的主要场所，由红白髓组成，同样存在着大量淋巴细胞（秉志，１９８３）。 （2）免疫相关细胞的研究 对参与免疫应答的主要细胞――Ｔ淋巴细胞和Ｂ淋巴细胞也进行了研究，证明了真骨鱼类确有Ｔ、Ｂ细胞之分（夏春，１９９４）。研究的发展趋势为进一步对这些细胞进行分析，以确认它们与哺乳动物异同及在体液免疫及细胞免疫中的作用。 （3）鱼类疫苗的研究工作逐渐深入 草鱼出血病细胞灭活疫苗在进一步实验的基础上完成了大规模生产工艺流程及生产性免疫试验，草鱼出血病的防治基本上得到了解决。对于淡水鱼细菌性败血症和对虾常见细菌病的防治，已建立了疫苗防治技术综合预防措施，使细菌性疾病基本上得到了控制。对于鳗鲡、甲鱼等的细菌性疾病的疫苗也进行了深入的研究，并取得了较好的防治效果。目前疫苗的研究工作已从组织疫苗、细胞疫苗向基因疫苗方向发展。 （4）免疫相关因子的研究 近年来对免疫相关因子的研究发展迅速，主要表现在以下几个方面。补体的作用已查明，它是一组蛋白成份组成的复合酶，主要是导致细胞溶解，协助抗体杀死病原体，可介导炎症反应并吸引及增强吞噬细胞的活性；干扰素是鱼体重要的抗病毒感染的防御因子，由白细胞产生；溶菌酶多存在于鱼粘液、血清及吞噬细胞中，能抵抗病原微生物而使鱼类获得保护（陈昌福，１９９０）；白细胞介素和巨噬细胞活化因子能刺激肾和外周血白细胞，增加巨噬细胞数量并提高巨噬细胞的杀菌能力。 （5）免疫诊断技术 核酸探针技术核酸探针技术是把ＤＮＡ片段用放射性同位素和光敏生物素标记后制成探针，与病原微生物的ＤＮＡ进行杂交，以此来确定病原携带者和传播者的一种分子生物学技术。该技术以其灵敏度高，特异性强，使用方便等优点，在对虾病毒病的检测中倍受青睐。我国通过从纯化的虾暴发性皮下及造血组织坏死状病毒中提取的ＤＮＡ，用限制性内切酶切成ＤＮＡ片段，用质粒做载体。建立ＨＨＮＢＶＤＮＡ文库，从中筛选出三个重组质粒，分别用光敏生物素标记做成核酸探针，用于检测受ＨＨＮＢＶ感染的对虾，取得了满意的结果（刘萍等，１９９５年）。目前已生产出核酸探针诊断试剂盒。 ＰＣＲ技术即聚合酶链式反应，又称为ＤＮＡ体外扩增技术。它具有灵敏度高、特异性强、反应快、操作简便、省时等优点，在医学上应用于检测人类遗传性疾病、传染性疾病、肿瘤基因等许多方面。黄海所已成功的将此技术应用于对虾病毒病和细菌性病原的检测（孔杰等，１９９４）。中国农业大学建立了套式ＰＣＲ法检测β－溶血素嗜水气单胞菌（夏春等，１９９９）。 单位克隆抗体技术利用杂交瘤技术生产单克隆抗体，其原理是正常脾脏细胞与癌细胞
实验动物学Laboratory Animal Science 是研究有关实验动物和动物实验、融合了生物学、医学与畜牧兽医学的一门新兴、交叉学科。 特点：A.综合性学科B.应用性强C. 发展迅速 实验动物Laboratory Animals经人工培育或人工改造，对其携带的微生物实行控制、遗传学背景明确或来源清楚，用于科学研究、教学、生物制品或药品鉴定以及其它科学实验的动物。 特点：人工饲育、微生物控制、遗传背景清楚、应用要求、质量标准 实验用动物Animals for Research指所有用于动物实验的动物，包括实验动物。 实验动物和实验用动物的区别：实验用动物是指所有用于动物实验的动物，包括实验动物、野生动物、甚至观赏动物等。而实验动物是为研究的需要而培育的标准化的动物。确定是否是实验动物，要经过一系列检测，如微生物和遗传基因等，并要求达到一定的质量标准. 实验动物遗传控制程度分类 远交（封闭）群动物(Outbreed stock, Close colony) 基因突变动物(mutant stock) 近交系动物(Inbred strain): 嵌合体(Chimera) 重组近交系(Recombinant inbred strains) 同源近交系(Cogenic inbred strains) 分离近交系(Segregating inbred strain) 杂交群动物(Hybrids) 实验动物微生物控制程度分类 无菌动物(Germ-free animal) 悉生动物(Gnotophoric animal) SPF动物(Specific pathogen-free) 清洁动物(Clean animal) 普通动物(Conventional animal) 根据对饲养环境控制分类 Isolation system（隔离系统）animal; Barrier system（屏障系统）animal; Semi-barrier system （半屏障系统）animal; Open system（开放系统）animal. AEIR 动物(Animal)设备(Equipment)信息(Information)试剂(Reagent) 近代实验动物学发展特点 1实验动物生产技术逐步完善 2实验动物品种增加 3有关实验动物的法规日趋完善 4充分利用现有动物资源 5开展实验动物附属设施及动物实验技术的研究 6转基因（遗传工程）技术的应用 7遗传学和微生物学监测方法的研究 实验动物研究内容 实验动物遗传学(Laboratory Animal Genetics)是应用遗传调控原理, 控制实验动物的遗传特征,培育新的实验动物品系和多种实验动物模型, 以实现实验动物标准化的目的. 实验动物微生物学(Laboratory Animal Microbiology)是研究实验动物的细菌、病毒、寄生虫的种类、特性及其与宿主的相互关系，并进一步研究其对实验动物与动物实验的影响 实验动物生态学(Laboratory Animal Ecology)是研究实验动物与环境相互关系，研究对实验动物与动物实验有利的环境条件; 实际上主要研究气候因素, 理化因素, 生物因素, 栖居环境对实验动物的影响. 实验动物营养学(Laboratory Animal Nutrition)是研究饲料与实验动物机体生长、发育、繁殖、健康及实验结果关系的分支学科. 实验动物医学(Laboratory Animal Medicine)是专门研究实验动物疾病的诊断、治疗、预防及其在生物医学领域中应用的分支学科.
第一章 1.实验动物（Laboratory Animals）特指的是人工培育，遗传背景明确或来源清楚，对其携带的微生物和寄生虫实行控制，用于生命科学研究、教学、药品与生物制品生产和检定以及其它科学研究的动物。 2. 3.实验动物学的核心内容之一是实验动物的标准化，它包括实验动物的 ?遗传学控制标准 ?微生物学和寄生虫学控制标准 ?设施环境控制标准 ?饲料营养控制标准 实验动物标准化的意义在于用符合标准的实验动物，在标准化饲养、实验环境条件下，所做的动物实验无论在时间的先后上，还是在世界的不同实验室里，其实验结果应该具有可重复性和可对比性。 4.生命科学研究所必需的四个基本条件： AEIR Animal 实验动物 Equipment 仪器设备 Information 信息 Reagent 试剂
5.什么是动物福利？（选择，判断） 动物福利是指动物在整个生命过程中应得到人类的保护，其基本原则是要善待动物，保证动物的健康和快乐。 6.“3R”原则： Replacement 替代-是指用其它实验方法替代用哺乳类动物进行实验研究。 Reduction 减少-是指某一研究必须要使用实验动物，而又没有可靠的替代方法时，应考虑把使用动物的数量减少到实验研究目的所必需的最少数量。 Refinement 优化-是指通过改进和完善实验程序、利用先进仪器设备，减轻或避免给动物造成痛苦和不安，提高动物福利的同时，获得可靠的实验结果。 第二章 1.近交系(inbred strain）是指采用连续全同胞兄妹交配（brother-Sister inbreeding）20代以上而培育成的动物。 近交系动物的特点 （1）基因的纯合性（近交系动物的每个个体） （2）遗传组成的同源性（一个近交系动物的所有个体） （3）遗传组成的独特性（不同近交系比较） （4）遗传特征的可辨别性（不同近交系比较） （5）遗传的稳定性（所有近交系） （6）表现型的一致性（同一近交系个体间） （7）背景资料的可查性 （8）国际分布的广泛性（定义+特点=简答，分开是小题） 2.封闭群（closed colony）是指以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个种群，在不从外部引入新个体的条件下，至少连续繁殖4代以上的动物群体。 3.杂交群动物 由两种不同的近交系杂交所繁殖的第一代杂交动物称为杂交群（Hybrid），又称为系统杂交动物，或“F1”代。 杂交群动物的双亲来自两个不相关的近交系，它具有以下几种特征： （1)各个个体的基因型相同，是其父母基因型的组合。 (2)表型一致，对试验反应均一。 (3具有杂交优势，生活力和抗病力比近交系强。 (4)具备双亲的生物学特性。 (5)由于基因互作，可产生不同于双亲的新性状。