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专题2 细胞工程
（一）植物细胞工程
1.理论基础（原理）：
全能性表达的难易程度：
2.植物组织培养技术
（1）过程：离体的植物器官、组织或细胞 ―→愈伤组织 ―→试管苗 ―→植物体
（2）用途： 。
（3）地位：是培育 、 培育植物新品种的最后一道
工序。
3.植物体细胞杂交技术 （1）过程：
（2）诱导融合的方法：物理法包括 等。化学法一般是用 作为诱导剂。 （3）意义：
（二）动物细胞工程
1. 动物细胞培养
（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的 ，将它分散成 ，
然后放在适宜的 中，让这些细胞 。
（2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用
处理分散成 →制成 →转入培养瓶中进行
培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续 培养。
（3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就 ，称为 。细胞数目不
断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面 时，细胞就会 ，这种现象称为 。 （4）动物细胞培养需要满足以下条件
① ：培养液应进行 处理。通常还要在培养液中添加一
定量的 ，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止 。
② ：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入
等天然成分。
③ ：适宜温度：哺乳动物多是 ；pH ： 。 ④ ：95% ＋5% 。O 2是 所必需的，CO 2的主要作用
是 。
（5）动物细胞培养技术的应用：
2.动物体细胞核移植技术和克隆动物
（1）哺乳动物核移植可以分为核移植（比较容易）和核移植（比较难）。（2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞；
卵(母)细胞。
（3）体细胞核移植的大致过程是：（下图）
（4）体细胞核移植技术的应用：
①②
③④
⑤
（5）体细胞核移植技术存在的问题：
克隆动物存在着问题、表现出缺陷等。
3.动物细胞融合
（1）动物细胞融合也称，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来细胞遗传信息的单核细胞，称为。（2）动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有等。（3）动物细胞融合的意义：克服了，成为研究
的重要手段。
（4）动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：
4.单克隆抗体
（1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种。从血清中分离出的抗体
。
（2）单克隆抗体的制备过程：
核移植
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动物细胞工程12月20日 动物细胞工程常用技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 一、动物细胞培养 1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 2、原理：细胞增殖 3、过程 分散成单个细胞， 制成细胞悬液 注意： ①10代以内细胞保持正常的二倍体核型，无突变发生，常用于实践或冷冻保存。 ②超过50代，极少数细胞突破自然寿命极限，突变成癌细胞，具有无限增殖能力；若超过50代，细胞不再增殖，全部死亡，则说明细胞没有发生癌变。 ③分瓶之前，称原代培养；出现接触抑制用胰蛋白酶处理，再分瓶培养为传代培养。 思考回答： ⑴、为什么选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养? 答：其细胞的分化程度低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。 ⑵、动物细胞培养需要脱分化吗?为什么? 答：不需要。因为高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以没有类似植物组织培养的脱分化过程，要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。 ⑶、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗? 答：主要是蛋白质，不行，因为胃蛋白酶作用的适宜PH约为2，当ＰＨ大于6时就会失去活性，多数动物细胞培养适宜PH为7.2－7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。（胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2－8.4，胰蛋白酶活性较高） ⑷、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?
答：胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质，长时间作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤，因此必须控制好消化时间。 ⑸、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 4、重要概念 ①细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 产生原因：培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖。 培养要求：培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒，易于贴附。 ②细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 ③原代培养：动物组织消化后的初次培养 ④传代培养：原代培养的细胞由于接触抑制不再分裂，需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，这种培养叫传代培养。 5、培养条件： ⑴无菌无毒环境：无菌——对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素。；无毒——定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。 ⑵营养： 成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。 培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基） ⑶温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。 ⑷气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95％空气加5％CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的CO2主要作用是维持培养液的pH。 6、应用：生产有重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。基因工程中受体细胞的培养。用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。科学家培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。
植物细胞工程和动物细胞工程默写 1、细胞工程是在或的操作 2、细胞工程按操作对象分为和 3、植物细胞工程通常采用的技术手段是：和 4、植物组织培养的理论基础是： 5、理论上每一个活细胞都应该具有。因为 6、受精卵的全能性最高，受精卵生殖细胞体细胞 7、为什么体内细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官？ 8、植物组织培养的外界条件：， 内在原理是： 9、植物组织培养的过程：经过形成 经由过程形成，最后移栽发育成。 10、是指已分化细胞经诱导，失去其特有的结构和功能而变为未分 化细胞的过程。 11、是指由外植体长出来高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成 的排列疏松无规则的组织。 12、植物体细胞杂交的意义（优势）：。 13、去除细胞壁的常用方法：（纤维素酶、果胶酶等） 14、人工诱导原生质体融合方法：物理法：等； 化学法： 15、融合完成的标志是： 16、植物体细胞杂交过程包括：和。 17、植物体细胞杂交的原理是：和
18、人工种子的特点是： 19、作物脱毒(1)材料: (2)脱毒苗: 20、单倍体育种：(1)方法: (2)优 点: ; 21、动物细胞工程常用的技术手段：(基础)、、 、 22、动物细胞培养的原理是：。 23、用处理，一段 时间后获得单个细胞。 24、细胞贴壁： 25、细胞的接触抑制： 26、原代培养：，培养的第1代细胞与传10代 以内的细胞称为原代细胞培养。 将原代细胞从培养瓶中取出，用处理后配制成，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为 27、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为 28、细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡， 少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代 细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失 去接触抑制，容易传代培养。 29、动物细胞培养的条件：1. 2. 3. （培养 液的Ph为7.2-7.4）4.
细胞工程 考点一植物细胞工程1.细胞工程 (1)操作水平：细胞水平或细胞器水平。 (2)目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品。 2.植物细胞的全能性 (1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。 (2)原理：细胞内含有本物种的全部遗传信息。 (3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。 3.植物组织培养技术 (1)原理：植物细胞具有全能性。 (2)过程： 4.植物体细胞杂交技术 (1)概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 (2)原理：体细胞杂交利用了细胞膜的流动性，杂种细胞培育成杂种植株利用了植物细胞的全能性。 (3)过程(4)意义：克服不同种生物远缘杂交的不亲和性。 5.植物细胞工程的实际应用 (1)植物繁殖的新途径 ①微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。 ②作物脱毒技术：选取作物无毒组织(如茎尖)进行组织培养，获得脱毒苗的技术。 ③人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。 (2)作物新品种的培育 ①单倍体育种 a.实质：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。 b.流程：花药单倍体幼苗――――――――→ 秋水仙素诱导 染色体数目加倍 纯合子。 c.优点：后代不发生性状分离，都是纯合子，能够稳定遗传，明显缩短了育种年限。 ②突变体的利用：筛选出对人们有用的突变体，进而培育成新品种。 (3)细胞产物的工厂化生产 1.植物组织培养的关键 (1)条件：离体，一定营养物质，激素(生长素、细胞分裂素)等。
细胞工程知识点 1、细胞工程：以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。 2、细胞工程的应用： 1)动植物快速繁殖技术：植物组织培养、人工种子、试管动物、克隆动物 2)新品种的培育：细胞融合、细胞水平的重组 3)细胞工程生物制品：单克隆抗体制备、疫苗生产 4)细胞疗法与组织修复： 2细胞工程理论基础 1、细胞全能性：每个活的体细胞都具有像胚性细胞那样，经过诱导能分化发育成为一个新个体的潜在能力，并且具有母体的全部的遗传信息。 2、细胞分化：指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程。 3、细胞的脱分化：在一定营养和刺激因素作用下,具有特定结构与功能的植物组织的细胞被诱导而改变原来的发育途径,逐步失去原来的分化状态,细胞特性消失,转变为具有分生机能的细胞,并进行活跃的细胞分裂,这一过程称为去分化。 3细胞工程技术 1、实验室条件：组成：准备室、无菌间、操作间、培养室、分析室。 2、无菌技术、显微技术、细胞观察与分析、细胞分离、细胞保存与复苏 （1）细胞保存方法传代培养保存法低温冷冻保存法(低温、超低温保存) 液体固化的方式（形成冰晶、形成无定型的玻璃化状态） 玻璃化指液体转变为非晶态（玻璃态）的固定化过程，在此状态时，水分子没有发生重排，不产生结构和体积的变化，因此不会由于机械或溶液效应造成组织和细胞伤害，化冻后的细胞仍有活力。 冷冻方法（缓慢冷冻法、快速冷冻法预冷冻法包括逐级冷冻和两部冷冻） 细胞复苏按一定复温速度将细胞悬液由冻存状态恢复到常温的过程。 复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化，以避免慢速融化水分渗入细胞内，再次形成胞内结晶损伤细胞。 细胞培养和代谢调控：
专题2 细胞工程 ※细胞工程的概念： 是指导应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。（是指以细胞为基本单位，在体外无菌条件下，进行培养、繁殖或利用细胞融合、核移植等技术，使细胞某些生物学特性按照人们的意愿发生改变，从而改良生物品种、创造新品种和加速繁育生物个体，以及获得某些有用的细胞代谢产物的技术。） ﹡应用的原理和方法：细胞生物学和分子生物学 ﹡操作水平：细胞（细胞器）水平的操作 ﹡研究的目的：按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品(定向改造） ※细胞工程的类型 1、按研究对象可分为：植物细胞工程、动物细胞工程、（微生物细胞工程） 2、按所用技术可分为： ●植物组织培养、植物体细胞杂交 ●动物细胞培养、动物细胞融合和单克隆抗体制备、细胞核移植技术和动物体细胞克隆一、植物细胞工程（属于无性繁殖） ﹡有性生殖、无性生殖 1.无性生殖 ①．概念：不经过两性生殖细胞的结合，由母体直接产生新个体的生殖方式。 ②．种类:
③优点：保持优良品种的遗传特征。 2.有性生殖 ①.概念：由亲本产生有性生殖细胞，经过两性生殖细胞的结合，成为合子，再由合子发育成新个体的生殖方式。 ②.意义：产生的后代具备了双亲的遗传特性，具有更强的生活力和变异性，对于生物的生存和进化具有重要的意义。 （一）理论基础（原理）：细胞全能性 1．细胞全能性的概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞都具有发育成完整生物体的潜能，也就是说，每个生物细胞都具有全能性的特点。 2.理论依据：生物体内几乎每一个细胞内都含有该物种的全套遗传物质，具有发育成为完整个体所必需的全部基因。 3.全能性表达的难易程度： ①受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞； ②植物细胞＞动物细胞； ③分化程度低的细胞>分化程度高的细胞 4.实现全能性的条件 （1）离体状态。 （2）环境条件条件适宜（如营养物质、激素、温度等）。 5.植物体中体细胞未表现出全能性的原因 理论上，生物的任何一个细胞都具有发育成完整植物的潜力，但是在生物的生长发育过程中，细胞并不会表现出全能性，而是分化成各种器官和组织，是因为在特定的时间和空间条件下，细胞的基因会有选择的表达出各种蛋白质，从而构成生物体的不同组织和器官。（基因选择性表达。即未离体细胞只能在机体的调控下定向分化，不能表达其全能性。）
专题2 细胞工程 （一）植物细胞工程 1.理论基础（原理）： 全能性表达的难易程度： 2.植物组织培养技术 （1）过程：离体的植物器官、组织或细胞―→愈伤组织―→试管苗―→植物体 （2）用途：。 （3）地位：是培育、培育植物新品种的最后一道工序。 3.植物体细胞杂交技术 （1）过程： （2）诱导融合的方法：物理法包括等。化学法一般是用作为诱导剂。 （3）意义：（二）动物细胞工程 1. 动物细胞培养 （1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的，将它分散成，然后放在适宜的中，让这些细胞。 （2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用处理分散成→制成→转入培养瓶中进行培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续培养。 （3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就，称为。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面时，细胞就会，这种现象称为。 （4）动物细胞培养需要满足以下条件 ①：培养液应进行处理。通常还要在培养液中添加一定量的，以防培养过程中的污染。此外，应定期 更换培养液，防止。 ②：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入等天然成分。 ③：适宜温度：哺乳动物多是；pH：。 ④：95%＋5%。O2是所必需的，CO2的主要作用是。 （5）动物细胞培养技术的应用： 2.动物体细胞核移植技术和克隆动物 （1）哺乳动物核移植可以分为核移植（比较容易）和核移植（比较难）。 （2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞；卵(母)细胞。 （3）体细胞核移植的大致过程是：（下图）
（4）体细胞核移植技术的应用：①② ③④ ⑤ （5）体细胞核移植技术存在的问题： 克隆动物存在着问题、表现出缺陷等。 3.动物细胞融合 （1）动物细胞融合也称，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来细胞遗传信息的单核细胞，称为。 （2）动物细胞融合及植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法及植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有等。 （3）动物细胞融合的意义：克服了，成为研究 的重要手段。 （4）动物细胞融合及植物体细胞杂交的比较： 4.单克隆抗体 （1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种。从血清中分离出的抗体 。 （2）单克隆抗体的制备过程： （3）杂交瘤细胞的特点：既能大量，又能产生。 （4）单克隆抗体的优点：。 （5）单克隆抗体的作用： ①：准确识别各种物质的细微差异，并跟发生特异性结合，具有的优点。
植物细胞工程知识点清单 （一）植物组织培养 1.理论基础（原理）：细胞全能性 2.全能性概念：具有某生物发育所需全部遗传信息的细胞，都具有发育成完整个体的潜能。 3、过程：外植体—脱分化—愈伤组织—再分化—丛芽、不定根—新植株 4、相关概念及实验注意事项 ①外植体：离体植物器官、组织、细胞 ②愈伤组织：高度液泡化，无固定形态的薄壁细胞。全能性高，分化程度低 ③外植体消毒：70%酒精30s—无菌水冲洗—次氯酸钠30min—无菌水冲洗 ④取材：选取形成层部位 ⑤脱分化：23~26o C，避光 ⑥再分化：将愈伤组织转接到分化培养基，光照下培养 ⑦生长素/ 细胞分裂素：比值高—促进生根；比值低—促进发芽 5、植物组织培养概念：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官，组织，细胞培养在人工配置的培养基上，诱导其产生愈伤组织，丛芽，最终形成完整的植株。 6、地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。 （二）植物体细胞杂交 1、植物体细胞杂交概念：将不同种的植物细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的过程。 2、过程及注意事项： ①去除细胞壁：酶解法（纤维素酶、果胶酶），获得原生质体 ②原生质体融合方法：物理法（离心、震荡、电刺激）；化学法：聚乙二醇 ③细胞融合成功的标志：杂种细胞再生细胞壁 3、融合结果：获得杂种细胞，进而获得杂种植株。 A细胞+B细胞所得杂种植株遗传物质=A+B 4、成功例子：番茄—马铃薯；烟草—海岛烟草；胡萝卜—羊角芹；白菜—甘蓝
5、优点：克服远缘杂交不亲和障碍 6、局限性：不能按照人的要求表达性状 （三）植物细胞工程应用 1、微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖（观赏植物，经济林木，无性繁殖作物） 2、作物脱毒：采用茎尖等分生区组织培养来除去病毒（因为分生区附近的病毒极少或没有） 如：马铃薯；草莓；甘蔗；菠萝、香蕉等经济作物 3、人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经人工薄膜包装得到的种子。优点：完全保持优良品种的遗传特性，不受季节的限制；方便储藏和运输 4、作物新品种培育：单倍体育种 5、突变体利用：在组织培养中会出现突变体，通过从有用的突变体中选育出新品种（如筛选抗病、抗盐、含高蛋白的突变体） 6、细胞产物的生产：通过能够产生对人们有利的产物的细胞进行组织培养，从而让它们能够产生大量的细胞产物。 如：生产人参皂甙，三七，紫草，银杏等。 （定向诱导愈伤组织细胞分化为产生特定物质的细胞，提纯产物）
细胞工程：以生物细胞或组织为研究对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的的利用或改造生物遗传特性，以获得特定细胞、组织、产品或新型物种的一门综合性学科。 1.微繁殖：是指在离体培养条件下、将来自优良植株的茎尖、腋芽、叶片、鳞片等器官、组织和细胞进行无菌培养，经过不断地切割和重复培养，使其增殖并再生形成完整植株，在短期内获得大量遗传性均一的个体的方法。 2.繁殖系数：经一次增值培养或在一定时间段内由一个繁殖体所增殖获得的总繁殖体数或苗数。 3.玻璃化：也称超水化作用，是离体培养过程中试管苗发生形态、生理和代谢异常的现象。 4.褐变：是指组织培养中，由于材料被切割而使多酚氧化酶活化将组织中的酚类物质氧化形成棕褐色的醌类物质，并向培养基中扩散，抑制培养物生长甚至导致其死亡的现象。 5.原球茎：兰科植物的种子在萌发初期并不出现胚根，只是胚逐渐膨大，以后种皮的一端破裂，膨大的胚呈小圆锥状，称作原球茎。 6.茎尖分生组织：指茎尖最幼龄叶原基上方的由2或3层分生细胞组成的很小区域、一般最大直径不超过0.1mm,长度0.25mm，最小的茎尖长度仅有几十微米，有时也称顶端分生组织。 7.不定芽：相对于顶芽和腋芽、由植物的其他部位或器官、组织上通过器官发生重新形成的、无固定着生位置的芽统称为不定芽。 细胞细胞工程知识点绪论研究内容（根据操作对象）：1）器官组织和细胞培养2）原生质体培养3）植物胚 胎培养4）动物胚胎工程5）转基因动植物6）胚胎干细胞7）染色体工程研究内容(研究水平）；个体、器官、组织、细胞、亚细胞、分子等不同研究层次动物细胞发展经历了哪些阶段？答：①细胞培养技术②细胞融合技术③动物胚胎移植技术④体外受精技术⑤动物克隆技术⑥转基因动物技术⑦胚胎干细胞技术生物工程：1）发酵工程2) 基因工程3）酶工程4）细胞工程5）蛋白质工程 （第二章没有放进来！！！！） 第三章培养原理 细胞学说：1838年，主要观点：细胞是生物体的基本结构单位，由它构成整个生物个体。 植物细胞的全能性：每个植物细胞都具有该物种的全部遗传信息，在适宜条件下具有发育成完整植株的能力。 植物细胞全能性含义：（1）每个植物细胞都具有它母性的全部遗传特征。 （2）每一个细胞都可以在特定条件下发育成为与母体一样的植株。 全能性的实现：一个已分化的细胞要实现其全能性两个过程：一是脱分化，使外植体的细胞转变成胚性细胞，从而获得不断分裂的能力；二是再分化，使胚性细胞分化形成器官。 条件：①具有较强全能性的细胞从植物组织抑制性影响下解脱出来，使其处于独立发育的离体条件下；②赋予离体细胞一定刺激，包括营养物质、植物激素、光周期、温度、酸碱度等。途径：1）以植物的体细胞为培养材料，可以诱导形成完整植株。 2）以植物的性细胞为培养材料，可以诱导形成完整植株。 3）用酶解法去除植物细胞的细胞壁，培养裸露的原生质体，原生质体发育成植物体。 4）加入促溶剂，可以诱导两个不同种的原生质体融合，继续培养可发育成杂种植株。5）将外源基因通过不同基因载体引入植物细胞，使植物细胞在分子水平上发生修饰，经离体培养后可再生成具有新性状的植物体。（转基因） 植物细胞的分化：由发育起始状态的合子沿个体发育方向不断分化出形态结构、生理功能不同的细胞、组织、器官而最终形成完整植株的过程。
第一章绪论 1、细胞工程的概念，广义的细胞工程，狭义的细胞工程， ?细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤，在细 胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质以获得新型生物或一定细胞产品的一门综合性科学技术。 ?广义的细胞工程包括所有的生物组织、器官及细胞离体操作和培养技术，狭义的细胞 工程则是指细胞融合和细胞培养技术。 2、细胞工程的研究内容（研究生物类型，实验操作对象） ?根据研究生物类型不同，细胞工程可分为动物细胞工程、植物细胞工程、微生物细胞 工程。 ?动物细胞工程包括：细胞培养技术（包括组织培养、器官培养）；细胞融合技术； 胚胎工程技术（核移植、胚胎分割等）；克隆技术（单细胞系克隆、器官克隆、个体克隆）。 ?植物细胞工程包括：植物组织、器官培养技术；细胞培养技术；原生质体融合与 培养技术；亚细胞水平的操作技术等。 3、细胞工程的重要应用（植物、动物） ?植物细胞工程的应用： 脱毒和快速繁殖 细胞工程育种：利用培养变异，筛选优良突变体 利用远缘杂交幼胚培养，获得杂种植株，克服其杂交不亲和性 利用细胞融合技术，克服远缘杂交不亲和性 倍性育种 离体种质保存 细胞培养生产有用物质 ?动物细胞工程的应用 动物细胞培养生产医药产品（单克隆抗体） 新品种培育 试管动物与婴儿 组织工程 珍稀动物资源的保存与保护
第二章细胞工程基础 1、细胞分化：个体细胞发育过程中，后代细胞在形态、结构和生理功能上发生差异的过程。 2、发育潜能：指细胞分化能力的强弱。 3、细胞全能性：指细胞具有发育成完整个体的潜能。 4、细胞多能性：指随着胚胎发育，有的体细胞失去全能性，具有分化出多种组织的潜能。 5、去分化：又称脱分化，指某些条件下分化细胞不稳定，又回到未分化状态的这一过程 6、愈伤组织：脱分化后的细胞，经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的、松散的细胞团称为愈伤组织。 愈伤组织的种类 胚性愈伤组织（Embryonenic callus）：表面光滑、组织结构紧凑、细胞小、再生力强。 胚性愈伤组织容易形成胚状体，所以被称为胚性愈伤组织。 非胚性愈伤组织：表面粗糙、组织结构疏松、细胞大。 第三章细胞工程实验室及实验基本操作（教材第二章） 1、什么是灭菌？是么是消毒？（P18） 灭菌是指杀灭或者去除物体表面和孔隙内的所有微生物，包括抵抗力极强的细菌芽胞。 消毒是指杀死物体上的病原微生物，但细菌芽胞和非病原微生物可能还存活。 2、常用的灭菌和消毒方法有哪些？ 物理法 （一）紫外线 直接照射、表面灭菌、可消毒空气和培养用具（如塑料器皿），消毒的效力和距离有密切关系，故无菌室天花板一般不宜太高。一般石菌室内空气、桌椅以及培养用具在紫外线有效消毒距离内，照射30分钟，可达到灭菌效果。紫外线照射使用方便、消毒效果好；缺点是能产生臭氧，污染空气，且对未直接照射的部分无消毒效果。 （二）干热消毒 主要用于消毒玻璃器四周，干热、消毒的器皿干燥，易贮存。但干热传导慢，需加温到160℃，保持90~120分钟，才能杀死芽孢，达到消毒目的。消毒后不要立即打开箱门，防止冷空气忽然进入影响消毒效果和损坏玻璃器皿。金属器械和橡胶制品不能用于干热消毒等。 （三）湿热消毒 即高压蒸气消毒，是最有效的一种方法。布类、胶塞、金属器械、玻璃器皿以及某种液体都可以用这种方法。 （四）滤过消毒 不能高温高压灭菌的液体可以用此法，如动物组织的人工合成培养液、小牛血清、胰蛋白酶系。须选一定规格的滤器，液体滤过速度，且保证除菌效果的关键。一般以肉眼可见液滴滴下为。滤过后及时分装。
专题三细胞工程 （一）植物细胞工程 1、植物细胞工程的基本技术包括：___________和植物体细胞杂交，植物体细胞杂交是对植物组织培养的应用。 2、在生物的生长发育过程中，细胞并不会表现出全能性，而是分化成各种组织和器官，这是因为在特定的环境条件下__________________________的结果。 3.植物组织培养技术 （1）.理论基础（原理）：__________________ （2）过程：___________的植物器官、组织或细胞―――→愈伤组织―――→试管苗――→植物体 （3）注意：a、操作在_________条件下进行。 b、____________不需要光照，_______________需要光照。 c、激素包括_____________和___________________. d、适宜的温度和ph e、一定的营养成分 4.植物体细胞杂交技术 （1）过程： （2）诱导融合的方法：物理法包括_____________________________等。化学法一般是用____________________作为诱导剂。 （3）意义：_________________ 5、植细胞工程的应用 A 植物繁殖 微型繁殖：可以高效快速地实现种苗的大量繁殖 作物脱毒：采用________组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒极少或没有） 人工种子：以植物组织培养得到的____________________________________等为材料，经人工薄膜包装得到的种子。优点：___________________________ B 作物新品种培育 单倍体育种：
细胞工程 考点一植物细胞工程 1.细胞工程 (1)操作水平：细胞水平或细胞器水平。 (2)目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品。 2.植物细胞的全能性 (1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。 (2)原理：细胞内含有本物种的全部遗传信息。 (3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。 3.植物组织培养技术 (1)原理：植物细胞具有全能性。 (2)过程： 4.植物体细胞杂交技术 (1)概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 (2)原理：体细胞杂交利用了细胞膜的流动性，杂种细胞培育成杂种植株利用了植物细胞的全能性。 (3)过程 (4)意义：克服不同种生物远缘杂交的不亲和性。 5.植物细胞工程的实际应用 (1)植物繁殖的新途径 ①微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。 ②作物脱毒技术：选取作物无毒组织(如茎尖)进行组织培养，获得脱毒苗的技术。 ③人工种子：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。 (2)作物新品种的培育 ①单倍体育种
a.实质：花药离体培养过程就是植物组织培养过程。 b.流程：花药单倍体幼苗 ――――――――→秋水仙素诱导染色体数目加倍 纯合子。c.优点：后代不发生性状分离，都是纯合子，能够稳定遗传，明显缩短了育种年限。②突变体的利用：筛选出对人们有用的突变体，进而培育成新品种。(3)细胞产物的工厂化生产 1.植物组织培养的关键 (1)条件：离体，一定营养物质，激素(生长素、细胞分裂素 )等。 (2)培养基状态：固体培养基 (需再分化生根培养基及生芽培养基 ) (3)体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。(4)光照的应用 脱分化阶段不需要给予光照，再分化阶段需要给予光照，以利于叶绿素的形成。2.杂种植物遗传物质的变化 (1)遗传特性：杂种植株中含有两种植物的遗传物质，故杂种植株具备两种植物的遗传特性。(2)染色体组数 ①染色体组数＝两种植物体细胞内染色体组数之和。 ②植物体细胞杂交形成的杂种植株，有几个染色体组就称为几倍体。 考点二 动物细胞工程 1.动物细胞培养 (1)地位：动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合等。其中动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础。(2)培养过程 (3)培养条件 ①无菌、无毒环境 培养液和培养用具进行无菌处理 培养过程加抗生素 定期更换培养液，清除代谢产物 ②营养：除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。 ③适宜的温度：36.5 ℃±0.5 ℃；适宜的 pH ：7.2～7.4。 ④气体环境 95%的空气：其中O 2为细胞代谢必需 5%的CO 2：维持培养液的pH 2.动物体细胞克隆技术 (核移植技术) (1)原理：动物细胞核具有全能性。
精品文档 专题2 细胞工程 （一）植物细胞工程 1.理论基础（原理）： 全能性表达的难易程度： 2.植物组织培养技术 （1）过程：离体的植物器官、组织或细胞 ―→愈伤组织 ―→试管苗 ―→植物体 （2）用途： 。 （3）地位：是培育 、 培育植物新品种的最后一道 工序。 3.植物体细胞杂交技术 （1）过程： （2）诱导融合的方法：物理法包括 等。化学法一般是用 作为诱导剂。 （3）意义： （二）动物细胞工程 1. 动物细胞培养 （1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的 ，将它分散成 ， 然后放在适宜的 中，让这些细胞 。 （2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用 处理分散成 →制成 →转入培养瓶中进行 培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续 培养。 （3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就 ，称为 。细胞数目不 断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面 时，细胞就会 ，这种现象称为 。 （4）动物细胞培养需要满足以下条件 ① ：培养液应进行 处理。通常还要在培养液中添加一 定量的 ，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止 。 ② ：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入 等天然成分。 ③ ：适宜温度：哺乳动物多是 ；pH ： 。 ④ ：95% ＋5% 。O 2是 所必需的，CO 2的主要作用 是 。 （5）动物细胞培养技术的应用： 2.动物体细胞核移植技术和克隆动物
（1）哺乳动物核移植可以分为核移植（比较容易）和核移植（比较难）。（2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞； 卵(母)细胞。 （3）体细胞核移植的大致过程是：（下图） （4）体细胞核移植技术的应用： ①② ③④ ⑤ （5）体细胞核移植技术存在的问题： 克隆动物存在着问题、表现出缺陷等。 3.动物细胞融合 （1）动物细胞融合也称，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来细胞遗传信息的单核细胞，称为。（2）动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有等。（3）动物细胞融合的意义：克服了，成为研究 的重要手段。 （4）动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较： 4.单克隆抗体 （1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种。从血清中分离出的抗体 。 （2）单克隆抗体的制备过程： 核移植 精品文档
高中生物选修三专题二细 胞工程知识点 The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020
专题二细胞工程 （一）植物细胞工程 概念：在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 1.理论基础（原理）：细胞全能性 全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞 2.植物组织培养技术 （1）原理：植物细胞的全能性，即具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整个体的潜能。 （2）过程： （3）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。 （4）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。 3.植物体细胞杂交技术 （1）概念：将不同植物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，培育成新的植物体的技术。细胞融合的生物学原理：细胞膜的流动性。 （2）过程： （3）诱导融合的方法：①物理法：离心、振动、电刺激等。 ②化学法：一般用乙二醇(PEG)作为诱导剂诱导原生质体融合。 ③融合成功的标志：杂种细胞再生出细胞壁。 （4）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。 杂种植株特征：具备两种植物的遗传特征。原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。 （5）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。 4.植物细胞工程的实际应用 (1)植物繁殖的新途径：微型繁殖(快速繁殖)、作物脱毒、人工种子 (2)作物新品种的培育：单倍体育种、突变体的利用、细胞产物的工厂化生产。（二）动物细胞工程 1. 动物细胞培养 （1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 （2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原
专题二细胞工程 细胞工程概念：指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过水平或水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。根据操作对象的不同，可分为工程和工程。 一、植物组织培养技术 1、过程： （1）图中离体的植物器官、组织或细胞又称，离体处理的原因是 。 （2）图中①表示，形成的愈伤组织由具有分生能力的薄壁细胞构成，属于未分化的细胞；愈伤组织细胞的特点是。 （3）图中②表示，其实质是。形成的胚状体与种子中的有类似结构和发育过程。 （4）植物组织培养技术的两个关键步骤是。 Ⅰ.激素条件：这两个关键步骤主要涉及两种植物激素分别是生长素和细胞分裂素。 生长素和细胞分裂素比值时，诱导愈伤组织的形成； 生长素和细胞分裂素比值时，促进根分化，抑制芽分化； 生长素和细胞分裂素比值时，促进芽分化，抑制根分化。 Ⅱ.光照条件：阶段不需要光照；阶段需要光照，以利于叶绿素的形成。 2、理论基础（原理）：植物细胞的。 Ⅰ.细胞具有全能性的原因：（除哺乳动物成熟红细胞等外）。Ⅱ.全能性表达的容易程度：＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞。 Ⅲ.种子发育为完整个体（填“体现”或“未体现”）细胞全能性。 3、应用： ①微型繁殖：繁殖方式是，优点是能够保持优良品种的，高效快速地实现 种苗的大量繁殖。 ②作物脱毒：利用病毒极少，甚至无病毒的（如茎尖、根尖等）进行植物组织培养获得脱毒 苗。注意：脱毒苗不等于抗毒苗。 ③人工种子：利用植物组织培养得到的等为材料，经过人工种皮（或 人工薄膜）包裹而成。人工种皮中除添加各种养料外，为防止虫害还需添加，为防止杂菌污染还需添加，为促进胚状体正常生长发育还需添加。 ④单倍体育种：单倍体育种时，需利用技术（实际为植物组织培养技术）将花粉培养 成单倍体，该过程属于生殖。 ⑤突变体利用: 突变体利用时，需利用物理或化学方法处理植物组织培养得到的，诱导其产 生，进而筛选培养成新品种。 ⑥细胞产物的工厂化生产：利用植物组织培养，将阶段的细胞分散在培养基中悬 浮培养，进而从培养细胞中提取蛋白质、脂肪、糖类药物、香料、生物碱等细胞产物，如人参皂苷、紫杉醇等。该过程利用的原理是，（填“有”或“没有”）体现植物细胞全能性。
-细胞工程知识点总结 （一）植物细胞工程 1、理论基础（原理）：细胞全能性全能性表达的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞 2、植物组织培养技术（1）过程：离体的植物器官、组织或细胞―→愈伤组织―→试管苗―→植物体（2）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。（3）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。 3、植物体细胞杂交技术（1）过程：（2）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。 （二）动物细胞工程 1、动物细胞培养（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。（2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。（3）细胞贴壁和接触抑
制：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。（4）动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度：哺乳动物多是 36、5℃＋0、5℃；pH： 7、2～ 7、4。④气体环境：95%空气＋5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。（5）动物细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。 2、动物体细胞核移植技术和克隆动物（1）哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。（2）选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比较大，容易操作；卵(母)细胞细胞质多，营养丰富。（3）体细胞核移植的大致过程是：（右图）核移植胚胎移植（4）体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移
专题二 细胞工程知识点梳理填空 概念：应用 和 的原理和方法，通过 或 上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的 或获得 的一门综合科学技术。 分类：根据操作对象不同，可分为 、 。 一、植物细胞工程 理论基础（原理） 。 1、概念：具有某种生物 的任何一个细胞，都具有发育成 的潜能。 全能性表达的难易程度： ＞ 生殖细胞＞ ； ＞ 动物细胞； 2．在理论上，生物的任何一个细胞都具有 ，但在生物的生长发育过程中，细胞并不表现 ，而是分化成各种 。 3．特定的___________条件下，细胞中的基因会有 地表达出各种 ，分化形成不同的细胞，从而构成生物体的不同 。 （一）植物组织培养技术 植物组织培养：在 和 的条件下，将 的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的 上，给予适宜的培养条件，诱导其产生 、丛芽，最终形成完整植株。 1.操作过程： 外植体――→①A ――→② B ―→植物体 图中① ，② ，A 表示 ，B 表示 。 2．细胞脱分化：已 的细胞经过 后，失去其特有的 而转变成未分化细胞的过程。 3.胡萝卜的组织培养实验 1）实验原理 植物体的根、茎、叶细胞都具有 ，在一定的 和 等条件下，可以脱分化形成 。将愈伤组织转接到含有不同 成分的培养基上，就可以诱导其再分化生成胚状体或丛芽，进而发育成 。证明了分化的植物细胞仍具有 。 2）实验步骤 ①将 用自来水充分洗净，削去外皮，并切成段。用酒精棉球擦手 。 ②在超净工作台(或接种箱)上将胡萝卜段用 消毒30s 后，立即用 清洗2～3次，再用 处理30min 后，立即用无菌水清洗2～3次。 ③用 的滤纸吸去胡萝卜段表面的水分。然后，在 瓷砖上，用无菌的解剖刀将胡萝卜段切成1 cm 厚的横切片，再选取有 的部位，切取1 cm 3左右的小块。 ④将 接种到培养基上，用锡箔纸封盖瓶口，并用橡皮筋扎紧。然后，在培养
选修三基因工程、细胞工程和胚胎工程知识填空 姓名班级 专题2 细胞工程 考点一、植物细胞工程 1、植物组织培养技术 注：Ⅰ.图中①表示，形成的愈伤组织由具有分生能力的薄壁细胞构成，属于未分化的细胞；②表示，其实质是基因选择性表达；这两个过程是植物组织培养技术的两个关键步骤。 Ⅱ. 图中①②主要涉及的植物激素是。 当比例较高，促进芽分化，抑制根分化； 当比例较高，促进根分化，抑制芽分化。 Ⅲ.光照条件： 阶段不需要光照；阶段需要光照，以利于叶绿素的形成。（2）理论基础（原理）：。 全能性表达的难易程度：＞生殖细胞＞体细胞；植物细胞＞动物细胞。 细胞具有全能性的原因：（除哺乳动物成熟红细胞等外）。（3）应用： ①微型繁殖：繁殖方式是，优点是能够保持优良品种的，高效快速地实现种苗的大量繁殖。 ②作物脱毒：利用病毒极少，甚至无病毒的（如茎尖、根尖等）进行植物组织培养获得脱毒苗。 ③人工种子：利用植物组织培养得到的等为材料，经过人工种皮包裹而成。 ④单倍体育种和突变体利用 ⑤细胞产物的工厂化生产：利用植物组织培养，从中提取蛋白质、脂肪、糖类药物、香料、生物碱等细胞产物。 2、植物体细胞杂交技术 （1）过程：
图中①表示去除细胞壁，需用酶处理（酶解法），目的是获得。 图中②表示诱导原生质体融合，诱导方法有： 物理法：包括等， 化学法：一般是用作为诱导剂。 图中③表示，标志原生质体融合完成。 图中④⑤分别是。 （2）原理：。 （3）意义：。 考点二、动物细胞工程 1、动物细胞培养技术 （1）动物细胞培养技术的原理是。 （2）动物细胞培养的流程： 取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→ 用酶（或酶）处理分散成 →制成→转入培养瓶中进行代培养→ 贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续代培养。（3）原代培养和传代培养 原代培养：10代以内细胞，保持正常二倍体核型（遗传物质不变），使用或冷冻保存的正常细胞。 传代培养：10代以后细胞，10～50代称为细胞株，50代以后称为细胞系，核型改变（遗传物质发生改变），带有癌变细胞的特点。 （4）细胞贴壁和接触抑制： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为。 细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现 象称为。 （5）动物细胞培养需要满足以下条件： ①环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的，以防培养过程中的杂菌污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累胞自身造成危害。 ②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入 等天然成分。 ③温度和PH：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；适宜pH：7.2～7.4。 ④气体环境： 95% 空气＋5% CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是。