专题2 细胞工程
※细胞工程的概念：
是指导应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。（是指以细胞为基本单位，在体外无菌条件下，进行培养、繁殖或利用细胞融合、核移植等技术，使细胞某些生物学特性按照人们的意愿发生改变，从而改良生物品种、创造新品种和加速繁育生物个体，以及获得某些有用的细胞代谢产物的技术。）
﹡应用的原理和方法：细胞生物学和分子生物学
﹡操作水平：细胞（细胞器）水平的操作
﹡研究的目的：按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品(定向改造）
※细胞工程的类型
1、按研究对象可分为：植物细胞工程、动物细胞工程、（微生物细胞工程）
2、按所用技术可分为：
●植物组织培养、植物体细胞杂交
●动物细胞培养、动物细胞融合和单克隆抗体制备、细胞核移植技术和动物体细胞克隆一、植物细胞工程（属于无性繁殖）
﹡有性生殖、无性生殖
1.无性生殖
①．概念：不经过两性生殖细胞的结合，由母体直接产生新个体的生殖方式。
②．种类:
③优点：保持优良品种的遗传特征。
2.有性生殖
①.概念：由亲本产生有性生殖细胞，经过两性生殖细胞的结合，成为合子，再由合子发育成新个体的生殖方式。
②.意义：产生的后代具备了双亲的遗传特性，具有更强的生活力和变异性，对于生物的生存和进化具有重要的意义。
（一）理论基础（原理）：细胞全能性
1．细胞全能性的概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞都具有发育成完整生物体的潜能，也就是说，每个生物细胞都具有全能性的特点。
2.理论依据：生物体内几乎每一个细胞内都含有该物种的全套遗传物质，具有发育成为完整个体所必需的全部基因。
3.全能性表达的难易程度：
①受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；
②植物细胞＞动物细胞；
③分化程度低的细胞>分化程度高的细胞
4.实现全能性的条件
（1）离体状态。
（2）环境条件条件适宜（如营养物质、激素、温度等）。
5.植物体中体细胞未表现出全能性的原因
理论上，生物的任何一个细胞都具有发育成完整植物的潜力，但是在生物的生长发育过程中，细胞并不会表现出全能性，而是分化成各种器官和组织，是因为在特定的时间和空间条件下，细胞的基因会有选择的表达出各种蛋白质，从而构成生物体的不同组织和器官。（基因选择性表达。即未离体细胞只能在机体的调控下定向分化，不能表达其全能性。）
【特别提示】
目前的实验证明，离体的植物体细胞的全能性得到了充分的体现（如植物组织培养）。离体的动物体细胞，其全能性受到限制，细胞核具有全能性（如克隆技术培养动物个体，需要去核卵细胞的细胞质才能体现出来。）；动物体细胞克隆的关键是细胞核移植技术。
※细胞分化
（1）概念：在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。
（2）原因：不同的细胞中遗传信息的执行情况是不同的。
（3）特点：普遍性、持久性、稳定性、不可逆性
（4）意义：细胞分化是生物个体发育的基础。
（二）植物细胞工程的基本技术：植物组织培养，植物体细胞杂交技术
1.植物组织培养技术
(1)概念：是指依据细胞全能性的原理，在无菌和人工控制条件下，将离体的植物的器官、组织、细胞或原生质体（称为外植体），培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整植株。（长成部分或完整植株的技术。）
(2)理论基础：植物细胞的全能性。
(3) 条件：离体、无菌、营养物质、激素、光照等其他适宜条件。
首先用消毒剂除去外植体表面的微生物，在无菌条件下将其放到适宜的培养基上。培养基一般有五类成分：①水
②无机营养：包括大量元素和微量元素。
③有机营养：主要有糖、维生素、氨基酸。
④生长物质：指植物激素，常用的有生长素（利于生根）和细胞分裂素（利于生芽），离体培养物的根芽分化取决于激素间的比例。此外，赤霉素对刺激细胞的伸长也有一定的作用。
⑤天然附加物：如椰子乳、酵母提取物等。
(4)过程：
①离体的植物器官、组织或细胞―→脱分化―→愈伤组织―→再分化―→试管苗―→植物体
（外植体消毒） 生长素及细胞分裂素（避光） 生长素及细胞分裂素（给光）
②植物组织培养过程：取外植体（离体的器官、组织、细胞），注意要消毒（可用次氯酸钠、无菌水处理，在超净工作台上操作）；将外植体接种到培养基，并封口（培养基成分：有机物、生长素、细胞分裂素、水、矿质元素、琼脂）；通过脱分化，形成愈伤组织（挑选出没有被污染的）；进行转接到分化培养基上，进行再分化（生长素浓度较高利于生根，细胞分裂素浓度较高利于生芽）；一段时间后诱导出试管苗；移栽到大田。
注意：整个过程要进行无菌操作 ③图示如下：
﹡相关概念：
愈伤组织：细胞排列疏松而无规则是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞,是一团没有特定结 构和功能并处于旺盛分裂状态的薄壁细胞。
脱分化：由已分化的植物细胞形成愈伤组织的过程。
再分化：愈伤组织生长一段时间后再移植到新的培养基（人教版：分化培养基）上继续培养，重新诱导分化形成根、芽等器官的过程。
培养基：固体培养基，含有矿质元素，碳源（蔗糖），氮源，植物激素，维生素 (5)地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。
﹡细胞工程育种之一——植物组织培养育种
方法：离体的植物器官、组织或细胞→愈伤组织→根、芽等器官→植物体 原理：植物细胞的全能性
优点：快速繁殖、培育无病毒植株等 缺点：技术要求高、培养条件严格 实例：制备人工种子
脱分化
再分化
特点：无定形状态、薄
壁细胞、高度液泡化、
排列疏松无规则
营养条件：水、无机盐、蔗糖、氨基酸、维生素等 激素：生长素类和细胞分裂素类
温度： 无菌：
条件
调控：生长素和细胞分裂素的比例
2.植物体细胞杂交技术
（1）概念：
就是将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 （2）、理论基础：植物细胞的全能性、细胞膜的流动性。
（3）、方法：去除细胞壁→诱导原生质体融合→筛选杂种细胞→组织培养 →植物体 （4）、过程
附：
a 原生质体：是指去除植物细胞壁后获得的裸露的植物细胞结构等。
b 诱导植物细胞融合的方法：
物理法：离心、振动、电激等。
化学法：一般用聚乙二醇（PEG ）作为诱导剂。
（5）融合实质：原生质体的融合
（6）完成标志：杂种细胞再生出细胞壁
（7）意义：克服远源杂交不亲和的障碍。打破特种之间的生殖隔离，扩大遗传重组范围。
﹡细胞工程育种之二——植物体细胞杂交育种
方法：去掉细胞壁→诱导原生质体融合→组织培养 →植物体 原理：植物细胞的全能性 （变异原理：染色体变异；融合原理：细胞膜具有一定的流动性）
优点：克服远源杂交不亲和的障碍，培育出作物新品种。 缺点：技术复杂，不能按人们的需要表现出亲代的优良性状。
A 细胞
B 细胞
纤维素酶和果胶酶
A B 原生质体原生
质体融合
再生壁
杂种 细胞 植物体
纤维素酶和果胶酶
实例：番茄—马铃薯的培育
【知识架构】
(三)植物细胞工程的应用：探究植物科学理论的重要手段，微型繁殖、培养脱毒苗、生产人工种子、培养新品种（单倍体育种）、转基因植物的培养，细胞产物的工厂化生产。
1.植物繁殖
a.微型繁殖：用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
特点：不仅可以保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。
b.作物脱毒：采用茎尖组织培养来除去病毒（因为植物分生区附近的病毒极少或没有）
植物分生区附近，如茎尖、根尖，由于细胞分裂快，很少被病毒感染，甚至无病毒，因而被用来培育无病毒植株。
c.人工种子：
概念：以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经人工薄膜包装得到的种子。（是
指在植物组织培养中得到的体细胞胚状体，包埋在含有营养物质和保护物质的包被中，在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。也可用不定芽、顶芽和腋芽等为材料制作人工种子。）
优点：完全保持优良品种的遗传特性，不受季节的限制；方便储藏和运输
2.作物新品种培育：单倍体育种和突变体的利用。
I．单倍体育种：
a过程：
植株（AaBb）通过减数分裂得到花粉（AB、Ab、aB、ab四种类型）；―→对花粉进行花药离体培养（技术是植物组织培养），得到单倍体植株；―→对其幼苗时期进行秋水仙素处理，得到了正常的纯合二倍体植株（AABB、AAbb、aaBB、aabb四种类型）。
b 优点：明显缩短育种年限，迅速获得纯系植株。
II.突变体利用：在组织培养中会出现突变体，通过从有用的突变体中选育出新品种（如筛选抗病、抗盐、含高蛋白的突变体）
3.细胞产物的生产：通过能够产生对人们有利的产物的细胞进行组织培养，从而让它们能够产生大量的细胞产物。细胞产物有蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。
【总结】：植物组织培养和植物体细胞杂交的比较
【知识拓展】
1、微型繁殖与作物脱毒、人工种子、单倍体育种
作物脱毒、人工种子、单倍体育种的培育过程均有采用微型繁殖的技术。作物脱毒主要是强调微型繁殖的取材一定是无毒（的如茎尖、根尖），才能繁殖出无毒的幼苗。
人工种子采用的还是微型繁殖的技术，但是只需培育得到胚状体、不定芽、顶芽和腋芽，包上人工种皮就可形成人工种子。人工种子与微型繁殖得到的幼苗一样能保持亲本的优良性状，另外还可不受气候、季节和地域的限制。
单倍体育种的优点是后代无性状分离，后代都是纯合子，能够稳定遗传，明显缩短育种年限。单倍体育种从本质上说属于有性生殖，这一点与微型繁殖有所区别。但单倍体育种首先要进行花药离体培养，采用还是微型繁殖的技术，然后用秋水仙素处理，获得纯合子。
二、动物细胞工程
※常用的技术手段：动物细胞培养，动物细胞核移植，动物细胞融合，生产单克隆抗体。其中动物细胞培养技术是基础技术
（一）动物细胞培养
1、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。
﹡这项技术是动物细胞工程的基础。
﹡用于培养的动物细胞和组织大多取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织。
2、原理：细胞增殖
3、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或
胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
附：相关概念
●细胞贴壁：培养时悬液中分散的细胞很快就会贴附
在瓶壁上，称为细胞贴壁。
●接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互相互接
触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞
的接触抑制。
●原代培养：是指从供体获取组织或细胞后的初次培
养。
●传代培养：将原代培养的细胞分离稀释后转入新的
培养瓶中继续培养。（一般情况下，传代培养10-50次后，细胞增殖会明显放缓，甚至完全停止，但有少部分细胞克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，这些细胞已经发生了突变，即细胞内遗传物质发生了改变，细胞正在朝着等同于癌细胞的方向发展。）
●细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50
代，这种传代细胞为细胞株。
●细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其
在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
4、动物细胞培养需要满足以下条件
（1）无菌、无毒的环境：
培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
（2）营养：
合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。合成培养基中通常需加入血清、血浆等天然成分。
（3）温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃＋0.5℃；pH：7.2～7.4。
（4）气体环境：
?细胞培养所需气体主要是O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的PH。
?进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
附：培养基的的种类（按来源分）
天然培养基：主要取自动物血清、动物组织提取液和鸡胚汁等，具有营养价值高、成分复杂的特点。
合成培养基：是人工配制的，具有成分明确、便于控制实验条件的特点。
5、动物细胞培养技术的应用：
（1）许多有重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等，都可以借助动物细胞的大规模培养来生产。
（2）作为基因工程的受体细胞。
（3）用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。
（4）用于医学研究。培养医学研究的各种细胞。
﹡植物组织培养与动物细胞培养的比较
（二）动物体细胞核移植技术和克隆动物
细胞核移植
是一种利用显微操作技术将某种动物细胞的细胞核移入同种或异种动物的去除细胞核的成熟卵细胞内的技术。
1、动物核移植概念：
是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。（将供体体细胞的细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合，借助于卵细胞的发育能力，经过培养发育成胚胎，进而形成个体的技术。）（关键：细胞核移植技术）
﹡克隆的含义：克隆（clone）是指通过无性生殖而产生的遗传上均一的生物群，即具有完全相同的遗传组成的一群细胞或者生物的个体。现在则指个体、细胞、基因等不同水平上的无性增殖物。
﹡选用去核卵(母)细胞的原因：卵(母)细胞比较大，容易操作；卵(母)细胞细胞质多，营养丰富；细胞质不会抑制细胞核全能性的表达。）
﹡在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。
2、种类：哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。
3、体细胞核移植的大致过程是：
高产奶牛（提供体细胞）进行细胞培养；同时采集卵母细胞，在体外培养到减二分裂中期的卵母细胞，去核（显微操作）[注：为什么要用卵细胞？它可以提供充足的营养；操作简便；细胞质不会抑制细胞核全能性的表达]；将供体细胞注入去核卵母细胞；通过电刺激使两细胞融合，供体核进入受体卵母细胞，构建重组胚胎；将胚胎移入受体（代孕）母牛体内；生出与供体奶牛遗传基因相同的犊牛。（见下图）
﹡
克隆羊“多利”的产生过程
4、体细胞核移植技术的应用：
（1）在畜牧生产中，可以加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育；
（2）在保护濒危物种方面，可以增加这些动物的存活数量；
（3）在医疗卫生领域：
①转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的医用蛋白；
②在治疗人类疾病时，转基因克隆动物细胞、组织和器官可以作为异体移植的供体；
③人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化，形成相应的组织、器官后可以用于组织、器官的移植。（4）研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程；
（5）用克隆动物做疾病模型，能使人们更好的追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病的方法。
5、体细胞核移植技术存在的问题：
克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。
﹡细胞工程育种之三——动物细胞核移植育种
方法：细胞核移植→重组细胞→培养成早期胚胎→胚胎移植
原理：动物细胞核的全能性
优点：快速繁殖优良品种，保存濒危物种，有选择地繁殖某性别的动物。
缺点：导致生物品系减少，个体生存能力下降。
实例：“多利”羊等克隆动物的培育
附：现代生物技术育种小结
（三）动物细胞融合
1、概念：指在一定条件下将2个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或
多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。
2、过程
附：诱导动物细胞融合的方法
主要有物理法（如电激）、化学法（如聚乙二醇）、生物法（如灭活的病毒）
3、意义：克服远源杂交的不亲和性。成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要
手段。
4、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：
诱导因素
不同来源的细胞
杂交细胞
（四）单克隆抗体
1、抗体：一个B 淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。 ﹡概念：机体受抗原刺激后产生的，并且能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 ﹡分布：主要分布于血清中，也分布于组织液及外分泌液中。
2、单克隆抗体的制备过程：
对免疫小鼠注射特定的抗原蛋白（目的使小鼠产生了效应B 细胞）；提取B 淋巴细胞；同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取；促使它们细胞融合[注：融合的结果是有很多不符合要求的；如有2个B 淋巴细胞融合的细胞等，所以要进行筛选]；在特定的选择培养基上筛选出融合的杂种细胞[特点是能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体]；然后对它进行克隆化培养和抗体检测[筛选出能够分泌所需抗体的杂种细胞]；最后将杂交瘤细胞在体外做大规模培养或注射入小鼠腹腔内增殖，从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的单克隆抗体。
3、杂
交瘤细胞
的特点：既能大量繁殖，又能产生专一的抗体。
4
、单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。 5、单克隆抗体的作用：
①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、
简易、快速的优点。
②用于治疗疾病和运载药物：
●主要用于癌症治疗，也有少量用于其他疾病治疗。
●可把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合，制成“生物导弹”
1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
提示：为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。
2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，想一想，这是为什么？
提示：培养的动物细胞一般当传代至10～50代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质可能会发生突变，而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此，在体细胞核移植中，为了保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用传代10代以内的细胞。
3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？提示：克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。所以，用教材中所述的方法克隆的动物不是供核动物完全相同的复制。
此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系，核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是核供体动物100%的复制。
【知识架构】
动物细胞工程12月20日 动物细胞工程常用技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 一、动物细胞培养 1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 2、原理：细胞增殖 3、过程 分散成单个细胞， 制成细胞悬液 注意： ①10代以内细胞保持正常的二倍体核型，无突变发生，常用于实践或冷冻保存。 ②超过50代，极少数细胞突破自然寿命极限，突变成癌细胞，具有无限增殖能力；若超过50代，细胞不再增殖，全部死亡，则说明细胞没有发生癌变。 ③分瓶之前，称原代培养；出现接触抑制用胰蛋白酶处理，再分瓶培养为传代培养。 思考回答： ⑴、为什么选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养? 答：其细胞的分化程度低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。 ⑵、动物细胞培养需要脱分化吗?为什么? 答：不需要。因为高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以没有类似植物组织培养的脱分化过程，要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。 ⑶、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗? 答：主要是蛋白质，不行，因为胃蛋白酶作用的适宜PH约为2，当ＰＨ大于6时就会失去活性，多数动物细胞培养适宜PH为7.2－7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。（胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2－8.4，胰蛋白酶活性较高） ⑷、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?
答：胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质，长时间作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤，因此必须控制好消化时间。 ⑸、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 4、重要概念 ①细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 产生原因：培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖。 培养要求：培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒，易于贴附。 ②细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 ③原代培养：动物组织消化后的初次培养 ④传代培养：原代培养的细胞由于接触抑制不再分裂，需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，这种培养叫传代培养。 5、培养条件： ⑴无菌无毒环境：无菌——对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素。；无毒——定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。 ⑵营养： 成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。 培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基） ⑶温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。 ⑷气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95％空气加5％CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的CO2主要作用是维持培养液的pH。 6、应用：生产有重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。基因工程中受体细胞的培养。用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。科学家培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。
???????????????负分数负整数负有理数零正分数正整数正有理数有理数备注：红色字体重点记忆 人教版七年级上 第一章 有理数 1.1 正数和负数 （一）正数：大于0的数叫正数，为了明确表达意义，正数前面加上符号“+”，这里 的“+”通常省略； 负数：小于0的数叫负数，在正数的前面加上符号“-”。（重点看教材例子） （二）0既不是正数，也不是负数；-a 不一定是负数，+a 也不一定是正数。 1.2.1 有理数 （一）有理数：整数和分数统称有理数。 （二）有理数的分类： ① ② 1.2.2 数轴 （一）数轴：数轴是规定了原点、正方向、单位长度的一条直线。 （二）画数轴的步骤：（1）画直线；（2）在直线上取一点作为原点；（3）确定正方 向，并用箭头表示（4）根据需要选取适当单位长度。 （三）一般的，设a 是一个正数，则数轴上表示数a 的点在原点的右边，与原点的距离 是a 个单位长度；表示数-a 的点在原点的左边，与原点的距离是a 个单位长度。 1.2.3 相反数 （一）相反数：只有符号不同的两个数。一般地a 和-a 互为相反数，0的相反数还是0。 （二） 相反数的和为0 ? a+b=0 ? a 、b 互为相反数。 1.2.4 绝对值 （一）绝对值：一般地，数轴上表示数a 的点与远点的距离叫做数a 的绝对值， ???????????????? ?正整数整数零负整数有理数正分数分数负分数
（二）一个正数的绝对值是它本身；一个负数的绝对值是它的相反数；0的绝对值是0.即 1.； 2.； 3.。 4.有理数大小比较 （1）正数大于0，0大于负数，正数大于负数； （2）两个负数，绝对值大的反而小。 （3）异号两数比较大小，要考虑它们的正负；同号两数比较大小，要考虑它们的绝对值。 1.3 有理数的加减法 （一）有理数的加法法则： 1.同号两数相加，取相同的符号，并把绝对值相加； 2.绝对值不相等的异号两数相加，取绝对值较大的加数的符号，并用较大的绝对值减去较小的绝对值。互为相反数的两个数相加和为0； 3.一个数同0相加，仍得这个数。 （二）有理数加法的运算律 1. 2. （三）有理数的减法法则：减去一个数，等于加上这个数的相反数。 1.4 有理数的乘除法 （一）有理数的乘法法则： 1.两数相乘，同号为正，异号为负，并把绝对值相乘； 2.任何数与0相乘都得0。 （二）几个不是0的数相乘，负因数的个数是偶数时，积是正数；负因数的个数是奇数时，积是负数。 （三）几个数相乘，如果其中有因数为0，那么积等于0。 （四）乘积是1的两个数互为倒数。 （五）有理数乘法的运算律： 1.乘法的交换律：； 2.； 3.。
动物细胞工程试题 1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（C）A都须用液体培养基 B都需用培养箱 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性 解析：动物细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物，植物体细胞离体培养体现的是全能性。植物体细胞是固体培养基。动物体细胞培养需要二氧化碳培养箱。 动物细胞培养： 1、动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 2、动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。 3、动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。 4、动物细胞培养需要满足以下条件 (1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。 (2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 (3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 (4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 5、动物细胞培养的过程： 取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 2下列关于细胞工程的叙述，错误的是（D） A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 解析：A正确诱导原生质体融合的方法有物理法（离心振动电刺激）化学法（聚乙二醇PEG）生物方法（灭活的病毒）. B正确去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。C正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可以无限增殖，又可产生特异性抗体。D错误，假设甲植物体细胞是2N,乙植物体细胞是2M，甲乙体细胞杂交染色体数目为2N+2M；而甲乙品种杂交染色体数目是N+M。 3制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（A） ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④ 解析：单克隆抗体的制备过程是人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 4利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（D） A. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
人教版语文五年级下册教材知识点梳理 一、五年级下册教材分析 （一）本册教材的内容 专题组织单元：八组。两次综合性学习:“语言的艺术”“走进信息世界”。全册共有课文28篇，精读和略读各14篇。在每组课文之后设有“词语盘点”总计词语334个。其中“读读写写”的词语，是由会写的字组成的，要求能读会写共计 181个；“读读记记”的词语，只要求认记，不要求书写共计153个。一些课文的后面还安排了资料袋或阅读链接。全册共安排了五次“资料袋”，两次“阅读链接”。 （二）本册教学目标 1．语文基础知识部分 生字表（一）是要求认识的200个字。生字表（二）是要求写的150个字。 2．阅读部分 高年级的默读训练既要提高理解水平，又要提高默读速度，一般为每分钟不 少于300字。通过默读，了解课文内容，精读课文的思考练习。理解重点句子3．习作 明确提出内容具体、语句通顺、感情真实，习作不少于400字。 4．综合性学习 “信息传递改变着人们的生活”，“利用信息，写简单的研究报告”来说，目的是使学生了解从古至今信息传递的方式发生的变化，了解不同的信息传播方式， 让学生学会怎样写研究报告。 （三）高年级段的教学目标 项目具体目标 语文基汉语 拼音 常用汉字3000个 汉字2500个常用字。 区分同音字和多音字，辨析形近字。
础知 识部分 书写规范，行款正确，有一定的速度。词语理解词语意思。 辨别词语感情色彩。 句子理解句子意思。 推想文章中语句的意思，体会表达效果。积累背诵优秀诗文60篇。 积累常用成语。 阅读默读每分钟不少于300字；正确、流利、有感情地朗读课文；读懂理解、概括文章的主要内容；领会含义深刻的语句；体会文章思想感情， 并有自己的独特体验；了解表达顺序，领悟表达方法；说明性文章， 能抓住要点，了解说明方法；课外阅读总量不少于100万字，累计 145万字。 习作写简单的记实作文和想象作文，内容具体、语句通顺、感情真实；分段表述；正确使用常用的标点符号；能写读书笔记和常见应用文；40 分钟能完成不少于400字的习作。 口语交际能用普通话与他人交流；听他人说话认真耐心，能抓住要点，并能简要转述；能稍做准备，做简单的发言；乐于参与讨论，敢于发表自己 的意见； 表达要有条理，语气、语调适当；注意使用文明用语。 综合实践活动学习浏览，扩大知识面，根据需要搜集资料；能够把搜集的资料进行简单整理，并运用多种形式进行成果展示。 （四）五年级下册教材的习作训练 组别写作内容备注第一组给远方小学生写信应用文
初中化学教材各章节知识点归纳 第1单元走进化学世界 1化学是研究物质的组成结构性质以及变化规律的基础科学 2我国劳动人民商代会制造青铜器春秋战国时会炼铁炼钢 3绿色化学-----环境友好化学化合反应符合绿色化学反应 ①四特点P6原料条件零排放产品②核心利用化学原理从源头消除污染 4蜡烛燃烧实验描述现象时不可出现产物名称 1火焰焰心内焰最明亮外焰温度最高 2比较各火焰层温度用一火柴梗平放入火焰中现象两端先碳化结论外焰温度最高 3检验产物 H2O用干冷烧杯罩火焰上方烧杯内有水雾 CO2取下烧杯倒入澄清石灰水振荡变浑浊 4熄灭后有白烟为石蜡蒸气点燃白烟蜡烛复燃说明石蜡蒸气燃烧 5吸入空气与呼出气体的比较 结论与吸入空气相比呼出气体中O2的量减少CO2和H2O的量增多吸入空气与呼出气体成分是相同的 6学习化学的重要途径科学探究 一般步骤提出问题→猜想与假设→设计实验→实验验证→记录与结论→反思与评价 化学学习的特点关注物质的性质变化变化过程及其现象
7化学实验化学是一门以实验为基础的科学 一常用仪器及使用方法一用于加热的仪器－－试管烧杯烧瓶蒸发皿可以直接加热的仪器是－－试管蒸发皿燃烧匙只能间接加热的仪器是－－烧杯烧瓶可用于固体加热的仪器是－－试管可用于液体加热的仪器是－－试管烧杯蒸发皿烧瓶二测容器－－量筒量取液体体积时量筒必须放平稳视线与量筒内液体凹液面的最低水平量筒不能用来加热不能用作反应容器量程为10毫升的量筒一般只能读到01毫升三称量器－－托盘天平一般能精确到01克调整零点称量物和砝码的位置为左物右码在两边托盘中各放一张大小质量相的纸称量称量结束后应使游码归零四加热器皿－－酒精灯 ①不可向燃着的酒精灯内添加酒精②用火柴从侧面点燃酒精灯不可用燃着的酒精灯直接点燃另一盏酒精灯③熄灭酒精灯应用灯帽盖熄不可吹熄2酒精灯内的酒精量不可超过酒精灯容积的23也不应少于14 3酒精灯的火焰分为三层外焰内焰焰心用酒精灯的外焰加热物体 4如果酒精灯在燃烧时不慎翻倒酒精在实验台上燃烧时应及时用沙子盖灭或用湿抹布扑灭火焰不能用水冲 五夹持器－－铁夹试管夹铁夹夹持试管的位置应在试管口近处试管夹的长柄不要把拇指按在短柄上试管夹夹持试管时应将试管夹从试管底部往上套夹持部位在距试管口近处用手拿住六分离物质及加液的仪器－－漏斗长颈漏斗过滤时应使漏斗与承接内壁靠以免滤液飞溅长颈漏斗的要以防止的气体漏斗逸出二基本操作药品的取用取用液体药品的取用取下瓶盖倒放在桌上以免药品被污染标签应向着手心以免残留液流下而腐蚀标签胶头滴管使用时千万不能伸入容器中或与器壁接触否则会造成试剂污染用手紧贴容器外壁就说明装置不漏气加热
细胞工程第一讲 一、概述 1、细胞工程（cell engineering ）定义 应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的原理方法与技术，按照人们的需要，在细胞水平上进行遗传操作，包括细胞融合、核质移植等方法，快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术。 2、细胞工程的研究内容 （1）动植物细胞和组织培养 植物细胞培养主要用于育种和代谢产物制备，日本等国家用生物反应器培养人参细胞生产有效药用成分。 动物细胞培养用于制备单克隆抗体、疫苗、生长因子等。 （2）细胞融合 改良性状，培育新品种 （3）染色体工程 细胞工程 动植物细胞和组织培养 细胞融合 染色体工程 胚胎工程 细胞遗传工程 器官培养 组织培养 细胞培养 （快速繁育和产物大量制备） （改良性状，培育新品种） （培育新品种，单倍体和多倍体） （获得人们需要的成体） （无性繁殖，改变性状） 克隆 转基因技术
主要用于培育单倍体或多倍体新品种，如四倍体小麦，八倍体小黑麦 （4）胚胎工程 主要是获得人们需要的成体 如：胚胎分割技术、胚胎融合技术、卵核移植技术、体外授精技术等最成功应用于畜牧业获得优良品种与胚胎保存 对人类来说主要用于不孕症获得试管婴儿 （5）细胞遗传工程 克隆：无性繁殖，动物克隆指经无性繁殖而产生遗传性状完全相同的后代个体。 转基因技术：将外源基因整合到生物体内，能够表达并稳定遗传给后代的实验技术。 3、细胞工程的优势 （1）避免了分离、提纯、剪切、拼接等基因操作，只需将细胞遗传物质直接转移到受体细胞中就能够形成杂交细胞。 （2）不仅可以在植物与植物之间、动物与动物之间、微生物与微生物之间，甚至可以在三者之间形成前所未有的杂交物种。 4、细胞工程发展 （1）萌芽阶段---理论渊源和早期的尝试（20世纪初-30年代中期）德国植物生理学家Haberlandt在1902年提出植物细胞的全能性。认为植物细胞有再生出完整植株的潜在能力。 美国生物学家Harrison 是公认的动物组织培养的创始人，1907年，以淋巴液为培养基观察了蛙胚神经细胞突起的生长过程，
初中地理课本知识点总结（人教版） 七年级上册 与同学们谈地理 1、人类的活动离不开地理 ⑴地理与日常生活：地理与日常生活密切相关，我们可以了解天气，广泛了解世界各地的基本情况和风土人情等。 ⑵地理与生产建设：我们生产活动不能随心所欲，它要受到地理环境的影响和制约。 ⑶学会收集地理信息：①查阅地理书籍②咨询有关人士③上网查阅资料等。 2、学习地理，为了更好地生活 ①尊重自然规律，做大自然的朋友；②因地制宜，扬长避短；③综合地分析问题；④具备可持续发展的观念。 第一章地球和地图 一、地球和地球仪 1、认识地球的形状和大小（P3中的图1.2） ⑴形状：地球是一个两极稍扁赤道略鼓的不规则球体。 ⑵大小：表面积=5.1亿平方公里；平均半径=6371千米；赤道周长=4万千米 ⑶能证明地球是球体的事实：麦哲伦环球航行的成功；地球的卫星照片；月食照片，是地球影子遮挡了照射的。 ⑷麦哲伦环球航行路线：西班牙→大西洋→麦哲伦海峡→太平洋→菲律宾群岛→印度洋→好望角→大西洋→西班牙。 2、地球的模型——地球仪 ⑴含义：仿照地球的形状，按照一定的比例进行缩小的模型。 ⑵意义：可以方便我们知道地球的面貌，了解地球表面各种地理事物的分布。 3、纬线和经线（P5中的图1.7） ⑴纬线：与地轴垂直并且环绕地球一周的圆圈。 ⑵经线：连接南北两极并且与纬线垂直相交的半圆。 ⑶地轴：假想的地球自转轴。 ⑷两极：地轴与地球表面的交点。 ⑸经、纬线的特点： ⑹特殊的经、纬线 ①特殊纬线 赤道——是最长的纬线，既是纬度的起始点，以北为北纬用字母N表示；赤道以南为南纬用字母S表示，也是南北半球的划分界线。 30°纬线——是低纬度与中纬度的分界线
高三生物一轮复习导学提纲(38) 选修三：动物细胞工程 班级______ 学号_____ 姓名____________ 学习目标： 细胞融合与单克隆抗体（A ） 知识结构： 自主预习： 1.动物细胞融合和植物原生质体融合比较，特殊性表现在 ( ) A ．融合的原因 B ．融合的优点 C ．融合的诱导手段 D ．融合的过程 2.制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括 ( ) ①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植 A ．①② B ．①③ C ．②③ D ．③④ 3.下列是应用动物细胞工程获取单克隆抗X 抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述错误的是 ( ) ①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞 ②将X 抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X 抗体的B 淋巴细胞 ③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养 ④筛选出能产生抗X 抗体的杂交瘤细胞 ⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞 ⑥从小鼠腹水中提取抗体 ⑦利用促细胞融合因子促使细胞融合 A ．实验顺序应该是①②⑦⑤④③⑥ B ．③过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆 C ．⑦过程获得的细胞均可无限增殖 D ．利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选 典型例题： 4.（06 广东)单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是 A ．特异性强、灵敏度高 B ．与抗癌药物结合可制成“生物导弹” C ．体外培养B 淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 D ．由效应B 细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌 5.利用细胞工程方法，以SARS 病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。相关叙述正确 A ．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B ．体外培养单个效应B 细胞可以获得大量针对SARS 病毒的单克隆抗体 C ．将等量效应B 细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG 诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D ．利用该单克隆抗体与SARS 病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 6.图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。 （1） 技术是单克隆抗体技术的基础。 选育出产生高特异性抗体的细胞 骨髓瘤细胞 HA T 某些淋巴细胞 （产生特异抗体） 混合并进行细胞融合，转到HA T 培养基上 培养 杂交瘤 杂交瘤
人教版小学数学教材1-6年级知识点汇总 一年级上册 ①数一数②比一比③1~~5的认识和加减法④认识物体和图形⑤分类⑥6~~10的认识和加减法⑦11~~20各数的认识⑧认识钟表⑨20以内的进位加法⑩总复习一年级下册 ①位置②20以内的退位减法③图形的拼组④100以内数的认识⑤认识人民币⑥100以内的加法和减法⑦认识时间⑧找规律⑨统计⑩总复习 二年级上册 ①长度单位②100以内的加法和减法③角的初步认识④表内乘法（一）⑤观察物体⑥表内乘法（二）⑦统计⑧数学广角⑨总复习 二年级下册 ①解决问题②表内除法（一）③图形与变换④表内除法（二）⑤万以内数的认识⑥克与千克⑦万以内的加法和减法一⑧统计⑨找规律⑩总复习 三年级上册 ①测量②万以内的加法和减法二③四边形④有余数的除法⑤时、分、秒⑥多位数乘一位数⑦分数的初步认识⑧可能性⑨数学广角⑩总复习 三年级下册 ①位置与方向②除数是一位数的除法③统计④年、月、日⑤两位数乘两位数⑥面积⑦小数的初步认识⑧解决问题⑨数学广角⑩总复习 四年级上册 ①大数的认识②角的度量③三位数乘两位数④平行四边形和梯形⑤除数是两位数的除法⑥统计⑦数学广角⑧总复习 四年级下册 ①四则运算②位置与方向③运算定律与简便计算④小数的意义和性质⑤三角形⑥小数的加法和减法⑦统计⑧数学广角⑨总复习 五年级上册 ①小数乘法②小数除法③观察物体④简易方程⑤多边形的面积⑥统计与可能性⑦数学广角⑧总复习 五年级下册 ①图形的变换②因数与倍数③长方体和正方体④分数的意义和性质⑤分数的加法和减法⑥统计⑦数学广角⑧总复习 六年级上册 ①位置②分数乘法③分数除法④圆⑤百分数⑥统计⑦数学广角⑧总复习 六年级下册 ①负数②圆柱与圆锥③比例④统计⑤数学广角⑥数与代数⑦空间与图形⑧统计与概率⑨综合应用⑩生活中的数学问题
第一章七年级上Unit 1-4 一、Unit 1知识点 1.语法：be动词/ 物主代词/ 人称代词(详见语法) 2.句型/词汇 (1) --- What’s your name? --- My name is … / I am … 注意：人称要用物主代词 eg：---What’s his name ? --- His name is Tony. ☆英文中姓氏是写在后面，名字在前面 eg：Jenny Brown ↓ ↓ 名字姓氏 姓氏：last name = family name 名字：first name (2) --- Nice to meet you ! --- Nice to meet you, too. /Me, too. (3) ---What’s your telephone number? --- My telephone number is … It’s… 二、Unit 2 - Unit 3知识点 1.语法：指示代词/名词的单复数(详见语法) 2.句型/词汇 (1) ---Is this / that….? --- Are these/ those …? --- It is …(回答都用It) --- They are…(回答都用They) eg：--- Is this your ruler? --- No, it isn’t . 辨析：this (复数these) 这个，这样(这些)→指近处的事物，人that (复数those) 那个，那样(那些)→指远处的事物，人eg：---Is this your pencil? ---Is that your book? --- Yes, It is. --- No, it is not. (2)陈述句型 This is my sister . That is my brother. These are my sisters. Those are my brothers. 注意单数→复数：指示代词，be 动词，名词全都要相应的变化(3) ---What’s this in English? ---It is a pen. (注意冠词不要省略) (4) --- How do you spell it? --- P-E-N. (5) Call Alan at 4953539. (6)易错单词，短语，句子
动物细胞工程 【教学目标】 1．知识方面 （1）动物细胞培养。 （2）动物细胞融合。 （3）单克隆抗体的制备及应用。 2．态度观念方面 （1）初步培养学生勇于探索，不断创新的精神和合作精神。 （2）通过向学生介绍几大动物细胞工程技术的发展动态及一些新的研究成果，使学生明确人们对生命奥秘的揭示愈加广泛和深入，知识不断更新并向前发展。认识到学无止境，形成终生学习的意识。 3．能力方面 （1）在学习动物细胞培养过程中，学生通过阅读、自学、质疑、讨论、训练、总结等环节，逐步提高独立获取知识的能力、逻辑思维能力、分析问题和解决问题的能力。 （2）由植物体细胞杂交技术导出动物细胞融合过程，培养学生的知识迁移能力、思维能力。 （3）让学生尝试设计革克隆抗体的制备过程，指导学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法，使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力。 【教学重难点】 单克隆抗体既是本小节的重点，也是难点内容。 【教学过程】 一、单倍体抗体的制备： 环节一：多数学生会提出如下思路：把产生相应抗体的B淋巴细胞提取出来，用我们所学的动物细胞培养技术经原代培养和传代培养（把单个B淋巴细胞克隆），将该细胞培养成细胞系，能无限传代，大量繁殖，便能从这些细胞中提取单抗了。 教师质疑：该方案可行性如何？（引导学生确认为什么单纯地进行B细胞培养行不通。）一些学生提出异议：一个B淋巴细胞不可能渡过原代培养和传代培养过程中的两次危机而达到细胞系水平。因为每经历一次危机，都有大部分细胞被淘汰，只有少部分生存下来，而单
个B淋巴细胞在这个过程中的命运便可想而知了。 抓住学生这一认识过程中的矛盾冲突，引领学生进人下一挑战性环节。 需解决的难题何在？（B细胞在体外不可能无限增殖） 如何使它无限增殖，方法有哪些？（B细胞与瘤细胞融合） 环节二： 学生思考： (l）单克隆抗体是用哪两种细胞来融合？为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？ （2）骨髓瘤细胞是癌细胞吗？ （3）整个制备过程为何要经过两次筛选？ （4）杂交瘤细胞在小鼠腹腔内培养与在体外培养有何区别？ （5）杂交瘤细胞在小鼠腹腔增殖，可否造成小鼠死亡吗？ （6）鼠单抗能用于人体疾病的治疗吗？ （板画诱导学生探究两次筛选的对象） 环节三： 假如现在要制备抗SARS病毒的抗体，用我身上的B细胞来融合行吗？为什么？（必须用对应的抗原刺激才会产生特异性的B细胞） 二、单倍体抗体的应用 制备到的抗体除了可以用于在临床治疗以外，还可以用来干什么？ 三、细胞核移植 阅读→归纳 【板书设计】 1．单倍体抗体的制备： 获得杂交瘤细胞 动物细胞培养 提取 2．单倍体抗体的应用：可用于疾病治疗、预防、单抗诊断疾病（“生物导弹”）等。
初中语文基础知识点 归纳及人教版教材 -CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
初中语文基础知识点归纳及人教版教材 初中语文基础知识点归纳 第一部分 二种常见叙事线索：物线、情线。 二种语言类型：口语、书面语。 二种论证方式：立论、驳论。 二种说明语言：平实、生动。 二种说明文类型：事理说明文、事物说明文。 二种环境描写：自然环境描写--烘托人物心情，渲染气氛。 社会环境描写--交代时代背景。 二种论据形式：事实论据、道理论据。 第二部分 三种人称：第一人称、第二人称、第三人称。 三种感情色彩：褒义、贬义、中性。 小说三要素：人物（根据能否表现小说主题思想确定主要人物）情节（开端 /发展 /高潮 /结局）环境（自然环境/ 社会环境。） 人物主要掌握通过适当的描写方法、角度刻画人物形象，反映人物思想性格的阅读技巧。 情节主要了解各部分的基本内容及理解、分析小说情节的方法、技巧。 开端交代背景，铺垫下文。 例：《孔乙己》开端部分叙写咸亨酒店的格局和两种不同身份、地位的酒客（短衣帮、长衫主顾）来往的情景，交代了当时贫富悬殊、阶级对立的社会背景，为下文孔乙己这一特殊的人物的出场作下铺垫。 发展刻画人物，反映性格。 例：《孔乙己》发展部分叙写孔乙己第一次到咸亨酒店喝酒遭人耻笑的情景，通过刻画孔乙己的肖像、神态、动作、语言等，揭示其贫困潦倒、自欺欺人、迂腐可笑、死要面子、好逸恶劳的思想性格。 高潮表现冲突，揭示主题。 例：《孔乙己》高潮部分叙写孔乙己最后一次到咸亨酒店喝酒遭人耻笑的情景，通过侧面反映丁举人的横行霸道、心横手辣和正面描写孔乙己的身残气微，表现其悲惨遭遇，从而深刻的揭露了封建科举制度的罪恶。 结局深化主题，留下思考。 例：《孔乙己》结局部分以“大约”、“确实”这样一组意味深长的词句，不仅为孔乙己的悲惨命运增添了悲剧意味，还给读者留下了无穷的思考。 环境主要理解自然环境和社会环境的作用。 自然环境描写自然景观，渲染气氛、衬托情感、预示人物命运、揭示社会本质、推动情节发展。 例1：《孔乙己》高潮部分通过描写秋天悲凉的景象，渲染了凄凉的气氛，预示着孔乙己即将死亡的悲惨结局。
九年级化学目录及教材重难点梳理 九年级化学上册目录： 1、化学的魅力 1.1化学使世界更美好 1.2走进化学实验室 1.3物质的提纯 1.4世界通用的化学语言 2、浩瀚的大气 2.1人类赖以生存的空气 2.2神奇的氧气 2.3化学变化中的质量守恒 3、走进溶液的世界 3.1水 3.2溶液 3.3溶液的酸碱性 4、燃料及其燃烧 4.1燃烧与灭火 4.2碳 4.3二氧化碳的实验室制法 4.4化学燃料
九年级上册知识点梳理 第一章、化学的魅力主要重难点 1.1化学使世界更美好 1)物理变化、化学变化的判别，主要依据是有无新的物质生成。 2)物理性质：颜色、气味、状态、密度、溶解性、挥发性；化学性质：通过化学反应体现 出的性质：稳定性，能使指示剂变色，可燃性等。 3)知道化学是一门研究物质的组成、结构、性质以及变化规律的自然科学。 4)化学能促进社会的发展，化学研究物质的组成、结构、性质及用途，来研究新材料，如 光导纤维。认识学习化学的重要意义。 1.2走进化学实验室 1)认识到化学是以实验为基础的学科，化学实验是学好化学的重要方法和手段。 2)了解一些常见的仪器的名称、使用范围、操作要求：试管、酒精灯、广口瓶、细口瓶、 集气瓶、试管夹、托盘天平和砝码、量筒等实验仪器的使用及操作要求、同时学会固体药品和液体药品的取用，等实验室操作规则。 1.3物质的提纯 1)掌握混合物和纯净物的概念，并且会区分。 2)会物质提纯的方法——过滤、蒸发，掌握过滤分离难溶性固体和液体的操作，明白过滤 的原理，在操作时要注意“一贴、二低、三靠”；掌握蒸发的方法。 1.4世界通用的化学语言 1)单质及化合物的概念，由同种元素组成的是单质，由不同元素组成的是化合物。单质是 元素的游离态，化合物是元素的化合态。 2)21种常见元素的记忆，地壳中元素的含量为：O 、Si 、Al、Fe 、Ca 、Na，以及元 素表示的意义，①表示某种元素、②表示该元素的一个原子、 ③有些还可以表示单质的化学式（金属和稀有气体）。 3)化学式表示的意义：①表示某物质、②表示该物质的一个分子、③表示该物质由何 种元素组成、④表示一个某某分子由几个某某原子构成。 第二章、浩瀚的大气主要重难点
音乐教材知识点归纳 一册 X与X的时值比例 聂耳（1912-1935）原名聂守信，字子义。云南玉溪人。自幼喜爱花灯、滇剧等民间音乐，会演奏多种民间乐器。1933年在创作上初试锋芒，创作了《开矿歌》、《卖报歌》、使人耳目一新。1934年是他的“音乐年”，《大路歌》、《开路先锋》、《毕业歌》、《新女性》、《码头工人歌》、《前进歌》、《打长江》等歌曲以及《金蛇狂舞》、《翠湖春晓》等民族器乐曲，都是这一年完成的。1935年，写下了《梅娘曲》、《慰劳歌》、《塞外村女》、《自卫歌》、《铁蹄下的歌女》以及建国后定为国歌的《义勇军进行曲》。此外还发表了《黎锦晖的“芭蕉叶上诗”》、《中国歌舞短论》等十五篇战斗性的音乐论文和《时代青年》等三部电影剧本（生前未出版）。1935年到日本，准备经欧洲去苏联求学，不幸于游泳时溺死于藤泽市鹄沼海中。他的作品具有鲜明的民族特征和时代精神，第一次在歌曲中塑造了中国无产阶级的光辉形象，是我国当之无愧的革命音乐的开路先锋。 认识X- 音的长短 音的强弱 打击乐的认识和使用 二册 0休止符 圣桑卡米尔·圣-桑（Camille Saint-Saens, 1835-1921），法国作曲家。其代表作有管弦乐组曲《动物狂欢节》、交响诗《骷髅之舞》、《第一大提琴协奏曲》和小提琴与乐队的《引子与回旋随想曲》等。 打击乐的认识和使用 蒙古音乐文化 三册 贺绿汀：中国作曲家、音乐理论家。主要音乐作品有《天涯歌女》、《四季歌》、《游击队之歌》、《嘉陵江上》、《牧童短笛》等，管弦乐《森吉德玛》、《晚会》等。著有《贺绿汀音乐论文选集》。 大管单簧管小号圆号小提琴等 四册 普罗科菲耶夫：普罗科菲耶夫是原苏联作曲家、钢琴家。他的作品具有青春的活力、热情、乐观、清晰而富有魅力。主要作品有：舞台作品：歌剧《马格达伦》，《赌徒》，《火天使》，《谢苗·科特科》，《三桔爱》，《修道院的订婚礼》，《真正的人》；芭蕾舞剧６部，包括《罗密欧与朱丽叶》和《灰姑娘》。乐队作品：7部交响曲，小交响曲，序曲，交响组曲，5部钢琴协奏曲，两部小提琴协奏曲，大提琴协奏曲，电影配乐多部。室内乐４首；钢琴曲十几首以及声乐曲多首。代表作：交响
2．2动物细胞工程 2．2．1 动物细胞培养和核移植技术 【课标要求】 1．简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 2．比较动物细胞培养与植物组织培养区别。 3．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 【本节重难点】 1．动物细胞培养的过程、条件。 2．用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 【学习过程】 一、动物细胞培养 1．动物细胞培养的概念： 从动物机体中取出相关的组织，将它，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞和。 2．动物细胞培养的过程
3．动物细胞培养的条件 ①无、无的环境 a．对和进行无菌处理； b．添加一定量的； c．定期。 ②营养 有等，另外还需要加入等一些天然成分。 ③和 哺乳动物多以℃为宜，多数细胞生存的最适pH为。 ④环境 细胞培养所需气体主要有和，是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的。 进行细胞培养时，通常采用或培养瓶，将其置于含加的混合气体的培养箱中进行培养。 4．动物细胞培养技术的应用 ①大规模生产有重要价值的； 如：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体。 ②为技术提供受体细胞； ③检测； ④用于生理、病理、药理等方面的。 如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．动物核移植技术概念： 将动物一个细胞的，移入一个已经的细胞中，使其并发育成一个新的，这个新的胚胎最终发育成动物 （克隆动物）。 2．动物细胞核移植的原理： 动物细胞核的性。 3．动物细胞核移植的种类： ①细胞核移植（分化程度低，恢复其全能性相对容易） ②细胞核移植（分化程度高，恢复其全能性相对困难） 4．体细胞核移植的过程：
部编语文三年级下册总复习教材重点知识点归纳 考试神器归纳全面知识点在手什么都不怕 归纳目录： 一、课文说明道理归纳： 二、人物主人公品质概括： 三、课文各课知识点重点： 四、背诵积累归纳 1.成语类别 2.古诗归纳积累 3.日积月累 4.重点作者及课文出处归纳 5.资料袋 五、重点词语归纳： 1、“的”字短语 2.“地”字短语 3.动词搭配 4.“得”字短语 5. 数量词 6.四字词 7.近义词 8.反义词 六、句子归纳整理： 1.比喻句 2.拟人句 3. 排比句 4.反问句 5.设问句 6.夸张句 7.双重否定句
一、课文说明道理归纳： 《守株待兔》告诉我们：不努力，而抱侥幸心理，指望靠好运气过日子，是不会有好结果的。 《陶罐和铁罐》告诉我们：每个人都有自己的长处和短处，正视自己的短处，相互尊重，和睦相处。 《鹿角和鹿腿》告诉我们的道理：事物各有自己的价值，不能只凭外表去判断事物的好坏。 《池子与河流》这个寓言揭示了：才能不利用就要衰退，它会逐渐磨灭；才能一旦让懒惰支配，它就一无所为。教育人们：不要贪图眼前的安逸，虚度年华，应当多为社会做贡献。 《九月九日忆山东兄弟》表达作者思念家乡、思念亲人的情怀。 《赵州桥》赞美了我国古代劳动人民的智慧和才干。 《清明上河图》抒发了作者对《清明上河图》以及祖国传统文化热爱与赞美。《花钟》告诉我们：一天之内，不同的花开放的时间是不同的。 《蜜蜂》告诉了我们凡事要多动脑筋、勤于实践，“实践出真知”的道理。《童年的水墨画》表现了孩子们童年生活的快乐。 《肥皂泡》表达了冰心对童年时代快乐生活的怀念之情。 《我们奇妙的世界》展现了世界的神奇和活力。 《海底世界》揭示了海底世界景色的奇异和特产的丰富。 《火烧云》描绘了变化极多极快的火烧云的奇特和瑰丽。 《慢性子裁缝和急性子顾客》告诉我们无论做什么事情都要把握适当的度。《方帽子店》告诉我们的道理：不能因循守旧、要敢于创新、勇于接受新事物。《漏》告诉人们的道理：做贼心虚、干坏事没有好下场。
人教版八年级下册课本知识点梳理 Unit 1 What’s the matter? 【重点短语】1、have a fever 发烧2、have a cough 咳嗽 3、have a toothache 牙疼 4、talk too much 说得太多 5、drink enough water 喝足够的水 6、have a cold 受凉;感冒 7、have a stomachache 胃疼8、have a sore back 背疼 9、have a sore throat 喉咙痛10、take risks 冒险 11、hot tea with honey 加蜂蜜的热茶12、see a dentist 瞧牙医 13、get an X-ray 拍X 光片14、take one’s temperature 量体温 15、put some medicine on sth、在……上面敷药16、give up 放弃17、sound like 听起来像18、all weekend 整个周末 19、in the same way 以同样的方式20、go to a doctor 瞧医生 21、go along 沿着……走22、on the side of the road 在马路边23、shout for help 大声呼救24、without thinking twice 没有多想 25、get off 下车26、have a heart problem 有心脏病 27、to one’s surprise 另某人惊讶的就是28、thanks to 多亏了;由于29、in time 及时30、make a decision 做出决定 31、get into trouble 造成麻烦32、right away 立刻;马上 33、because of 由于34、get out of 离开;从……出来 35、keep on doing sth、继续或坚持做某事37、fall down 摔倒 36、put a bandage on sth、用绷带包扎38、feel sick 感到恶心 39、have a nosebleed 流鼻血40、cut his knee 割伤她的膝盖 41、put her head back 把她的头向后仰45、run out (of) 用完;用尽 42、have problems breathing 呼吸困难43、mountain climbing 登山运动44、be used to doing sth、习惯做某事46、so that 以便 47、so、、、that、、、如此……以至于、、、…48、be in control of 掌管;管理 49、in a difficult situation 在闲境中 【重点句型】 1、What's the matter with you?= What'the trouble with you? = What's wrong with you? 您怎么了？ 2、What should she do? 她该怎么办呢？ 3、Should I take my temperature? 我应该量一下体温不？ 4、You should lie down and rest、您应该躺下休息一会儿。 5、Do you think it comes from a newspaper or a book? 认为它就是来自报纸还就是书呢？ 6、I think I sat in the same way for too long without moving、 我想我以同样的姿势一动不动地坐得太久了。 7、She said that the man had a heart problem and should go to the hospital、她说这个人有心脏病应该去医院。 Unit 2 I ’ll help to clean up the city parks、 【重点短语】 1、Clean-Up Day 清洁日 2、an old people’s home 养老院 3、help out with sth、帮助解决困难 4、used to 过去常常、、、、、、 5、care for 关心;照顾 6、the look of joy 快乐的表情
人教版七年级下册数学课本知识点归纳完 整版
人教版七年级下册数学课本知识点归纳 第五章相交线与平行线 一、相交线两条直线相交，形成4个角。 1．邻补角：两个角有一条公共边，它们的另一条边互为反向延长线。具有这种关系的两个角，互为邻补角。如：∠1、 ∠2。 2．对顶角：两个角有一个公共顶点，并且一个角的两 条边，分别是另一个角的两条边的反向延长线，具有这 种关系的两个角，互为对顶角。如：∠1、∠3。 3．对顶角相等。 二、垂线 1．垂直：如果两条直线相交成直角，那么这两条直线互相垂直。2．垂线：垂直是相交的一种特殊情形，两条直线垂直，其中一条直线叫做另一条直线的垂线。 3．垂足：两条垂线的交点叫垂足。 4．垂线特点：过一点有且只有一条直线与已知直线垂直。 5．点到直线的距离：直线外一点到这条直线的垂线段的长度，叫点到直线的距离。连接直线外一点与直线上各点的所有线段中，垂线段最短。
三、同位角、内错角、同旁内角两条直线被第三条直线所截形成8个角。 1．同位角：在两条直线的上方，又在直线EF的同侧，具有这种位置关系的两个角叫同位角。如：∠1和∠5。 2．内错角：在在两条直线之间，又在直线EF的两侧，具有这种位置关系的两个角叫内错角。如：∠3和∠5。 3．同旁内角：在在两条直线之间，又在直线EF的同侧， 具有这种位置关系的两个角叫同旁内角。如：∠3和∠6。 四、平行线 (一)平行线 1.平行：两条直线不相交。互相平行的两条直线，互为平行线。 a∥b（在同一平面内，不相交的两条直线叫做平行线。） 2．平行公理：经过直线外一点，有且只有一条直线与这条直线平行。 3.平行公理推论：①平行于同一直线的两条直线互相平行。 ②在同一平面内，垂直于同一直线的两条直线互相平行。 (二)平行线的判定： 1.同位角相等，两直线平行。 2.内错角相等，两直线平行。 3.同旁内角互补，两直线平行。 (三)平行线的性质 1.两条平行线被第三条直线所截，同位角相等。