扫描电子显微镜生物样品制备与观察-细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告扫描电子显微镜生物样品制备与观察 姓名： 学号： 班级： 专业： 同组成员：
【实验目的】 1、了解扫描电镜的基本结构与工作原理 2、了解扫描电镜的基本使用方法 3、了解临界点干燥仪的工作原理了解扫描电镜生物样品制备的基本过程 【实验原理】 扫描电镜主要用于观察样品表面几何形貌。一般扫描电镜生物样品制备过程包括取材、固定、脱水、干燥以及导电处理等步骤。取材时应尽量保护待观察的样品表面（如细胞表面、组织或器官的上皮表面等），并且避免样品表面在清洗过程中的人为损伤。一般生物样品需经干燥后才能在扫描电镜下观察。由于表面张力的作用，含水量大的生物样品在自然干燥过程中，其表面形貌将发生严重变形。 为了观察生物样品真实的表面形貌，通常采用临界点干燥法对样品进行干燥处理。当气液两
相处于临界点时，气体、液体密度相等，表面张力为零。因此，对生物样品进行临界点干燥，可以较好地保护其表面形貌。水的临界温度和压力分别为374.1℃和218.3大气压，显然，此条件下生物样品将受到严重损坏。由于CO2的临界温度和压力较低，为31.4℃和72.9大气压，故通常选择CO2作为生物样品临界点干燥的工作介质。固定、脱水后的样品需经过乙酸异戊酯处理，然后利用临界点干燥仪对样品进行干燥。 由于生物样品导电性低，未经过导电处理的样品在扫描电镜下观察时会产生荷电现象，从而影响观察和照相记录。为了减少荷电效应，对生物样品表面要进行导电处理，通常使用离子溅射仪在样品表面喷镀金属导电薄层。喷镀的金属包括：金（Au），铂（Pt）及其合金等，喷镀导电薄层厚度在10nm左右为宜。对于花粉粒等含水量较少的生物样品，可以经过自然干燥后在扫描电镜下观察。入射电子术与固体样品原子之间的相互作用 1、入射电子术与固体样品原子之间的相互作用。 具有一定的能量的电子入射固体厚样品后收到样品原子的散射，产生二次电子、背散射电
冷场发射扫描电子显微镜S4800操作说明（普通用户） 燕山大学材料学院材料管A104（场发射，钨灯丝） 编写人：李月晴吕益飞 普通用户在熟练操作1个月后，如无不良记录，可申请高级用户培训。 高倍调清晰：局部放大(Red) →聚焦Focus→消像散 一、日常开机 1，开启冷却循环水电源。 2，按下Display开关至，PC自动开机进入用户界面并自动运行PC_SEM程序，以空口令登入。 3，打开信号采集开关，位置打到1，为打开。 4，打开电源插排的开关。 5，打开装有EDS软件的主机电源。 6，记录仪器运行参数(右下角Mainte)，即钨灯丝真空度。如：IP1：0.0×10-8Pa；IP2：0.0×10-8Pa； IP3：9.6×10-7Pa。PeG-1，<1×10-3；PeG-2，<1×10+2。 注意：PeG≤1×10-3Pa时才能加高压测量。记录的参数：①点Flashing时会显示：In2(Ie)Flashing时电流最大值，如32.9μA；②加上高压后会显示，V ext=3.4kV。 二、轰击（点flashing，即在阴极加额外电压） 目的：高温去除针尖表面吸附的气体 1，最好在每天开始观察样品前一时做flashing； 2，选择flashing intensity为2 ； 3，若flashing运行时Ie小于20μA，则反复执行直至Ie值超过20μA且不再增加。 4，若flashing后超过8个小时仍继续使用，重新执行flshing 。 三、加液氮 容积不要超过1L，能维持4~6h。 四、样品制备及装入 样品制备简单，对样品要求较低，只要能放进样品室，都可进行观察。 1，化学上和物理上稳定的干燥固体，表面清洁，在真空中及在电子束轰击下不挥发或变形，无放射性和腐蚀性。 2，样品必须导电，非导电样品，可在表面喷镀金膜。 3，带有磁性的样品，由于物镜有强磁性，制样必须非常小心，防止在强磁场中样品被吸入
扫描电镜实验报告 姓名：xxx 专业：xxx 学号：xxxxxxxx 一、实验目的 1. 了解扫描电镜的构造及工作原理； 2.学习扫描电镜的样品制备； 3. 学习扫描电镜的操作； 3. 利用扫描电镜对铝粉的形貌进行观察。 二、实验原理 扫描电镜原理是由电子枪发射并经过聚焦的电子束在样品表面扫描，激发样品产生各种物理信号，经过检测、视频放大和信号处理，在荧光屏上获得能反映样品表面各种特征的扫描图像。扫描电镜由下列五部分组成，主要作用简介如下： 1．电子光学系统。其由电子枪、电磁透镜、光阑、样品室等部件组成。为了获得较高的信号强度和扫描像，由电子枪发射的扫描电子束应具有较高的亮度和尽可能小的束斑直径。常用的电子枪有三种形式：普通热阴极三极电子枪、六硼化镧阴极电子枪和场发射电子枪。前两种属于热发射电子枪；后一种则属于冷发射电子枪，也叫场发射电子枪，其亮度最高、电子源直径最小，是高分辨本领扫描电镜的理想电子源。电磁透镜的功能是把电子枪的束斑逐级聚焦缩小，因照射到样品上的电子束斑越小，其分辨率就越高。扫描电镜通常有三个磁透镜，前两个是强透镜，缩小束斑，第三个透镜是弱透镜，焦距长，便于在样品室和聚光镜之间装入各种信号探测器。为了降低电子束的发散程度，每级磁透镜都装有光阑；为了消除像散，装有消像散器。样品室中有样品台和信号探测器，样品台还能使样品做平移、倾斜、转动等运动。 2. 扫描系统。扫描系统的作用是提供入射电子束在样品表面上以及阴极射线管电子束在荧光屏上的同步扫描信号。 3. 信号检测、放大系统。样品在入射电子作用下会产生各种物理信号、有二次电子、背散射电子、特征X射线、阴极荧光和透射电子。不同的物理信号要用不同类型的检测系统。它大致可分为三大类，即电子检测器、阴极荧光检测器和X射线检测器。 4. 真空系统。镜筒和样品室处于高真空下，它由机械泵和分子涡轮泵来实现。开机后先由机械泵抽低真空，约20分钟后由分子涡轮泵抽真空，约几分钟后就能达到高真空度。此时才能放试样进行测试，在放试样或更换灯丝时，阀门会将镜筒部分、电子枪室和样品室分别分隔开，这样保持镜筒部分真空不被破坏。 5. 电源系统。其由稳压、稳流及相应的安全保护电路所组成，提供扫描电镜各部分所需要的电源。
数控加工车间质量管理 规定 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
加工中心质量管理办法 为了保证产品质量，强化员工质量意识，提高产品的一次交检合格率，树立谁加工谁负责的观念，特制定质量管理办法如下： 1、员工操作前必须明确自己所从事工序的加工内容和精度要 求。没有弄懂自己的加工内容和要求时，禁止操作机床。以 此造成的损失由个人负责。 2、员工配合检验做好零件的首检，并做好自检、自分工作。 3、加工中遇到加工内容与图纸不符合时，及时向主管提出，做 好区分。 4、零件图纸或加工内容和加工程序未经主管许可不得擅自更 改，图纸或加工尺寸、加工程序的更改需要经线长许可，并 在每台设备的记录本上签名，并写上日期方可生效。 5、任何人不得私自将不合格品流入下道工序，一经发现，赔偿 所有工序产生的费用。 6、待处理品在处理过程中，需要经过相关部门和主管同意，处 理人签字后方可放行。私自处理的按加工废品落实到相关责 任人。 7、每班建立工人每月的废品记录台帐，及时公布，超标的进行 相应的赔偿，并做为年终先进评比的依据。 8、零件的加工尺寸到达设计的极限公差后，需要及时调整刀具 尺寸，否则造成的损失有操作者自己承担。
9、在带学员的过程中，学员操作时必须由师傅监管，否则造成 的质量、工装等损失由师傅负责承担。 10、在生产加工中出现批量（箱体一次性50件、箱盖70件）的 质量事故，有操作者和检验共同承担质量责任。并承担相应 的损失。 11、在运输或转工过程中，零件因摔伤、断角等非加工原因造成 的报废，由责任人直接赔偿相应的废品损失。 12、任何人发现不合格品都应该及时报告，杜绝质量事故，消除 质量隐患。车间依据挽回废品损失金额的大小，给予相应 （10%-30%）的奖励。 13、严格控制车间箱体、箱盖的废品指标（箱体2%，箱盖1%包含 调试废品）超出部分由相关的责任者承担（箱体10元/件， 箱盖10元/件）。 14、对产品处理存在争议的时候，操作者应在废品处理的两天内 提出异议，由车间和质检科共同判别，必要时由公司质检部 进行判别和处理。 15、线长对所负责生产的产品质量负有直接管理责任，产品质量 废品指标每超标%相应扣款50元；出现批量产品返工或返修 的，视其严重程度进行相应处罚。 16、漏工序的产品由本车间人员发现的，扣款责任人10元/件， 并按5元/件奖励发现者。对于流入装配的漏工序产品对相应责任人扣款50元/件，同时扣款线长5元/件。
扫描电镜实验报告要求 第一部分：实验预习报告 一、实验目的、意义 1、了解扫描电镜的基本结构与原理 2、掌握扫描电镜样品的准备与制备方法 3、掌握扫描电镜的基本操作并上机操作拍摄二次电子像 4、了解扫描电镜图片的分析与描述方法 二、实验基本原理与方法 1、扫描电镜的基本结构构造 2、扫描电镜的工作原理 3、扫描电镜成像原理 三、主要仪器设备及耗材 1、JSM-5610 LV扫描电镜 2、JFC-1600离子溅射仪（样品喷涂导电层用） 3、银导电胶、双面胶（制样用） 4、粉末样品、块状样品 四、实验方案与技术路线 1、介绍扫描电镜的基本情况与最新进展（场发射扫描电镜、环境扫描电镜的特点及应用） 2、结合具体仪器介绍扫描电镜的构造与工作原理； 3、重点介绍扫描电镜样品的准备与制备方法，并要求每位同学动手制样，掌握扫描电镜样 品的准备与制备方法； 4、了解扫描电镜的操作过程，掌握二次电子像的观察过程，要求每位同学上机操作，并在 2-4个样品上拍摄2-4张二次电子像图片，要求图片清晰有代表性； 5、仔细观察和分析现场给出的200多张图片，并对某类或某几张自己感兴趣的图片进行描 述（要求总字数150字以上）。 第二部分：实验过程记录 一、实验原始记录 按实验过程进行记录： 1、样品的准备与制备过程 2、仪器操作过程与照片的拍摄过程。 第三部分：结果与分析 一、实验结果与分析 1、现场没描述照片的同学，对“附件二、扫描电镜图片”进行微观形态描述（要求：写清 楚图片或样品名称，不需要打印照片，描述图片张数自己确定，总字数要达到150字以上）； 2、将2-4张自己拍摄的照片打印并粘贴到实验报告上，写上样品名称。 3、总结对扫描电镜实验课的体会。
扫描电镜S E M制样步 骤 -CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN
扫描电镜观察制样步骤 固定： 1、用灭菌镊子挑出少量的的样品（碳粒/碳毡）,放入 5ml 的离心管中, 2、加入2.5%戊二醛, 加量为淹没碳粒/碳毡样品为宜,室温固定1小时 3、置于 4℃冰箱中固定12小时。 冲洗： 用 0.2mol pH 7.4的磷酸缓冲溶液冲洗 3 次，每次 10 分钟。每次冲洗时先用注射器缓慢吸走上一步骤的冲洗液。Or 离心 脱水： 分别用浓度为30%， 50%，75%，90%, 95%, 100% v/v 的乙醇进行脱水，每次10分钟， 干燥： 将样品放在离心管里，置入干燥器中干燥 12 小时。粘样：用双面胶将样品观察面向上粘贴在扫描电镜铜板上 预处理好的样品放入干净离心管中待检。 SEM上机测样--测定条件参数设置 分子克隆实验指南第三版，1568页： 25度下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制； 先配0.1mol/L K2HPO4，0.1mol/L KH2PO4 配PH7.4，100ml磷酸钾缓冲液需： 0.1mol/L K2HPO4，80.2ml 0.1mol/L KH2PO4，19.8ml 混合即是，不用酸碱调PH。 参考文献： DOI:?10.1021/es902165y Microbial fuel cell?based on Klebsiella pneumoniae biofilm Selecting?anode-respiring bacteria based on?anode?potential: phylogenetic, electrochemical, and?microscopic?characterization A severe reduction in the cytochrome C content of?Geobacter sulfurreducens?eliminates its capacity for extracellular electron transfer 2
等级 培训项目 培训内容 培训要求 评价方式 可执行作业项目 1.设备开关机操作 2.设备各项功能及操作面板说明 3.设备每日点检事项介绍 4.设备日常保养维护内容及要求说明 5.设备常用油品标号及添加说明1.常用数控代码培训2.卡爪更换 3.刀片安装及更换（使用寿命辨别） 4.对刀操作 5.修改刀补 6.装件操作说明 7.加工检查记录的填写 8.加工不良介绍及原因分析 装配技能装配装箱要求及注意事项 独立完成装配装箱作业 现场操作 1.长时间关机后重新开机操作及注意事项 2.设备常见故障报警及排除 3.装夹压力选择 1.常见原材料加工参数的选取 2.工艺及程序的检查、修改 3.铜件、钢件粗车刀片的选择 4.首件调试操作及注意事项1.工艺及程序编写 2.刀具选择 （精车刀片、铣刀、钻头及特殊刀具） 3.工装夹具设计 4.钻孔调试操作及注意事项 5.精车调试操作及注意事项 1.Level 2评价通过以前不可独自进行任何设备加工作业 2.Level 3评价通过以前不可独自进行任何精加工作业 1.预计关机期限较长的关机作业 2.长期关机后重新开机的热机及调试作业 3.检查工艺程序，完成粗车调试作业 4.在Level4以上员工的监督下完成首件后剩余产品的精加工作业 5.Level 3 以下的可执行项目 1.根据产品图纸编写工艺程序 2.设计相关工装夹具 3.钻孔及精车调试作业 4.Level 4 以下的执行项目 1.根据产品图纸独立编写工艺程序 2.根据加工要求选择合适的刀具 3.独立完成工装夹具的设计 4.独立完成钻孔调试 5.独立完成精车调试 现场操作 1.独立完成卡爪更换 2.独立完成刀片安装，能辨别刀片的使用状况并及时更换 3.独立完成对刀及刀补修改作业 4.独立完成装卸件作业 5.熟练填写加工检查记录 6.熟知常见加工不良的发生原因1.独立完成长时间关机后重新开机的热机及调试作业 2.独立排除常见设备简易故障排除 3.根据产品特点独立选择合适的装夹压力 1.熟练掌握常见原材料的加工参数 2.独立完成工艺程序的检查，并能发现错误及时修改 3.根据不同原材料及产品加工要求选择合适的粗车刀具 4.独立完成粗车调试作业 1.日常设备开关机及点检 2.设备例行保养维护 3.首件调试成功后剩余产品的粗加工作业（限常见产品类型） 4.装配装箱 5.在Level4以上员工的监督下完成首件后剩余产品的精加工作业（限常见产品类型） 现场操作 现场操作 现场操作 加工技能 Level 3 加工技能Level 4 现场操作 设备 1.独立完成设备开关机作业 2.掌握设备各项功能及简单操作 3.独立完成设备每日点检 4.独立按要求完成设备的例行 保养维护 5.独立完成机床油品添加补充 设备 员工技能等级培训及评价标准 Level 2 加工技能
扫描电镜的基本结构和工作原理 扫描电子显微镜利用细聚焦电子束在样品表面逐点扫描，与样品相互作用产行各种物理 信号，这些信号经检测器接收、放大并转换成调制信号，最后在荧光屏上显示反映样品表面各种特征的图像。扫描电镜具有景深大、图像立体感强、放大倍数范围大、连续可调、分辨率高、样品室空间大且样品制备简单等特点，是进行样品表面研究的有效分析工具。 扫描电镜所需的加速电压比透射电镜要低得多，一般约在1～30kV，实验时可根据被 分析样品的性质适当地选择，最常用的加速电压约在20kV左右。扫描电镜的图像放大倍数在一定范围内(几十倍到几十万倍)可以实现连续调整，放大倍数等于荧光屏上显示的图像横向长度与电子束在样品上横向扫描的实际长度之比。扫描电镜的电子光学系统与透射电镜有所不同，其作用仅仅是为了提供扫描电子束，作为使样品产生各种物理信号的激发源。扫描电镜最常使用的是二次电子信号和背散射电子信号，前者用于显示表面形貌衬度，后者用于显示原子序数衬度。 扫描电镜的基本结构可分为电子光学系统、扫描系统、信号检测放大系统、图像显示 和记录系统、真空系统和电源及控制系统六大部分。这一部分的实验内容可参照教材第十二章，并结合实验室现有的扫描电镜进行，在此不作详细介绍。 三、扫描电镜图像衬度观察 1．样品制备 扫描电镜的优点之一是样品制备简单，对于新鲜的金属断口样品不需要做任何处理，可 以直接进行观察。但在有些情况下需对样品进行必要的处理。 1) 样品表面附着有灰尘和油污，可用有机溶剂(乙醇或丙酮)在超声波清洗器中清洗。 2) 样品表面锈蚀或严重氧化，采用化学清洗或电解的方法处理。清洗时可能会失去一些 表面形貌特征的细节，操作过程中应该注意。 3) 对于不导电的样品，观察前需在表面喷镀一层导电金属或碳，镀膜厚度控制在5-10nm 为宜。 2．表面形貌衬度观察 二次电子信号来自于样品表面层5～l0nm，信号的强度对样品微区表面相对于入射束的 取向非常敏感，随着样品表面相对于入射束的倾角增大，二次电子的产额增多。因此，二次电子像适合于显示表面形貌衬度。 二次电子像的分辨率较高，一般约在3～6nm。其分辨率的高低主要取决于束斑直径，而 实际上真正达到的分辨率与样品本身的性质、制备方法，以及电镜的操作条件如高匝、扫描速度、光强度、工作距离、样品的倾斜角等因素有关，在最理想的状态下，目前可达的最佳分辩率为lnm。 扫描电镜图像表面形貌衬度几乎可以用于显示任何样品表面的超微信息，其应用已渗透 到许多科学研究领域，在失效分析、刑事案件侦破、病理诊断等技术部门也得到广泛应用。在材料科学研究领域，表面形貌衬度在断口分析等方面显示有突出的优越性。下面就以断口分析等方面的研究为例说明表面形貌衬度的应用。 利用试样或构件断口的二次电子像所显示的表面形貌特征，可以获得有关裂纹的起源、
扫描电镜样品制备方法 一、取材 组织块小于3立方毫米（单细胞培养或收集展片于盖玻片或滤膜上）。 二、固定 前固定：2.5%戊二醛（磷酸缓冲液配制）固定2小时或更长时间。 用0.1M pH7.4磷酸盐缓冲液漂洗三次，每次10分钟。 后固定：1% 锇酸固定液，固定1-2小时。 用0.1M pH7.4磷酸盐缓冲液漂洗三次，每次10分钟。 三、脱水 ＊脱水在4度冰箱内进行，所有脱水步骤建议在专用的冷冻干燥杯中进行，冷冻干燥杯请于实验前一天到电镜室领取。 ＊整个过程，样品不要暴露于空气。 1.乙醇脱水，每一级10-20分钟： 30%乙醇—50%乙醇—70%乙醇—90%乙醇—95%乙醇—100%乙醇； 2.然后从乙醇逐步过渡到叔丁醇，纯叔丁醇每次10分钟，3次以上； 此系列操作均在25度环境中进行； 3.纯叔丁醇4度冰箱过夜，样品结晶。 四、冷冻干燥 ＊需事先预约冷冻干燥时间； 第二天上午八点半讲冷冻结冰的样品用冰盒送至电镜室进行冷冻干燥。 五、喷金
附件1： 细菌类样品的前处理方法 1.盖玻片泡酸，清洗，烘干。用剪刀剪碎，挑出5mm*5mm大小玻片备用。玻 片过大或者过厚影响观察效果。 2.菌液或样品悬液离心，需要可进行清洗，加入固定液，吹散固定，于4度冰 箱固定2小时左右。 3.固定结束后，去固定液，加入PBS浸泡清洗，10分钟。离心去PBS，固体沉 淀根据量多少，加入适量PBS，制成浓度较高的悬液（目测较混浊）。样品浓度对后期吸附有较大影响，浓度过低可能吸附量会很少。 4.取鸡蛋清，稀释3-5倍（一定要稀释！蛋清过浓会包裹样品），之前准备好的 玻片放入液体内蘸一下，取出晾干至触摸感觉有点黏的状态（快干的状态）。 将第3步取得的悬液滴在玻片上，吸附30秒到1分钟，用滤纸吸去多余液体。 （样品悬液在玻片上停留时间过长将导致样品被蛋清完全包裹而无法观察）。 5.在玻片上滴加固定液，固定10分钟，固定后用PBS浸泡清洗10分钟，放入 干燥杯开始进行脱水。
车间安全生产知识及注意事项 1．新员工安全用电的要求有哪些？ 答：①车间内的电气设备，不要随便乱动。自己使用的设备、工具，如果电气部分出了故障，不得私自修理，也不能带故障运行，应立即请电工检修。 ②自己经常接触和使用的配电箱、配电板、闸刀开关、按钮开关、插座、插 销以及导线等,必须保持完好、安全,不得有破损或将带电部分裸露出来。 ③在操作闸刀开关、磁力开关时，必须将盖盖好，防止万一短路时发生电弧 或熔丝熔断飞溅伤人。 ④需要移动某些非固定安装的电气设备，如电风扇、照明灯、点焊机等时， 必须先切断电源再移动。同时导线要收拾好，不得在地面上拖来拖去，以 免磨损。如果导线被物体轧住时，不要硬拉，防止将导线拉断。 ⑤在一般情况下，禁止使用临时线。如必须使用时，得由工程部批准，同时 临时线应按有关安全规定装好，不得乱拉乱拽。且应按规定时间拆除。 ⑥在打扫卫生、擦拭设备时，严禁用水去冲洗电气设备，或用湿抹布去擦拭 电气设备，以防发生短路和触电事故。 ⑦发生电气火灾时，应立即切断电源，用黄砂、二氧化碳、四氯化碳等灭火器材灭火。切不可用水或泡沫灭火器灭火。因为它们有导电的危险。救火时应注意自
己身体的任何部分及灭火器具不得与电线、电气设备接触，以防发生触电。2．什么是电气事故？有哪些种类？ 答：电气事故是由局外能量作用于人体或电气系统内能量传递发生故障而导致的人身和设备的损坏。电气事故可分为触电事故、静电事故、雷电灾害、电磁场危害、电路故障等五类。①触电事故：是由电流的能量造成的。触电是电流对人体的危害。电流对人体的危害可以分为电击和电伤。绝大部分触电事故都含有电击的成分。与电弧烧伤相比，电击致命的电流小的多，但电流作用时间较长，而且在人体表面一般不留下明显的痕迹。②静电事故：静电指生产工艺过程中和工作人员操作过程中，由于某些材料的相对运动，接触与分离等原因而积累起来的相对静止的正电荷和负电荷。这些电荷周围的场中储存的能量不大，不会直接使人致命。但是，静电电压可能高达数万乃至数十万伏，可能在现场发生放电，产生静电火花。在火灾和爆炸危险场所，静电火花是一个十分危险的因素。③雷电灾害：雷电是大气电，是由大自然的力量分离和积累的电荷，也是在局部范围内暂时失去平衡的正电荷和负电荷。雷电放电具有电流大、电压高等特点。其能量释放出来可能产生极大的破坏力。雷电除可能毁坏设施和设备外，还可能直接伤及人、畜，还可能引起火灾和爆炸。④电磁场危害：也叫射频辐射危害，是指人体在高频电磁场作用下吸收辐射能量，使人的中枢神经系统、心血管系统等部件会受到不同程度的伤害。电磁场危害还表现为感应放电。⑤电路故障：电路故障是由电能传递、分配、转换失去控制造成的。断线、短路、接地、漏电、误合闸、误掉闸、电气设备或电气元件损坏等属于电器电路故障。电气线路或电气故障可能影响到人身安全。 3．电气设备发生火灾，切断电源要注意哪些问题？ 答：当发现电气设备或线路起火后，首先要设法尽快切断电源。切断电源要注意以下几点：①火灾发生后，由于受潮或烟熏，开关设备绝缘能力降低，因此，拉闸时最好用绝缘工具操作。②高压应先操作.断路器而不应先操作隔离开关切断电源，以免引起弧光短路。③切断电源的地点要选择适当，防止切断电源后影响灭火工作。④剪断电线时，不同相位应在不同部位剪断，以免造成短路：剪断空中电线时剪断位置应选择在电源方向的支持物附近，以防电线切断后落下来造成接地短路和触电事故。 4．带电灭火应注意哪些安全问题？ 答：为了争取灭火时间，防止火灾扩大，在来不及断电或因需要或其他原因，不能断电，则需要带电灭火。带电灭火应注意以下几点：①应按灭火剂的种类选择适当的灭火机。二氧化碳、四氯化碳、二氟一氯一溴甲烷（1211）、二氟二溴甲烷或干粉灭火机的灭火剂都是不导电的，可用于带电灭火。泡沫灭火机的灭火剂（水溶液）有一定的导电性，而且对导电设备的绝缘有影响，不宜用于带电灭火。 ②用水枪灭火时宜采用喷雾水枪，这种水枪通过水柱的泄漏电流较小，带电灭火较安全：用普通直流水枪灭火时，为防止通过水柱的泄露电流通过人体，可以将水枪喷嘴接地：也可以让灭火人员穿戴绝缘手套和绝缘靴或穿均压服操作。③人体与带电体之间要保持必要的安全距离：电压110KV以下者不应小于3M，220KV 及以上者不应小于5M，用二氧化碳等不导电的灭火机时，机体、喷嘴至带电体的最小距离：10KV 不应小于0.4M，36KV者不应小于0.6M。④对架空线路等空
无机非金属材料扫描样品的制备流程 样品要求：试样经切割和磨抛处理成适宜扫描电镜观察的大小后还应进行喷金或蒸碳处理，使其导电。 切割设备：沈阳科晶自动化设备有限公司生产适用于无机非金属材料切割的的金刚石线切割机的型号有STX-202A、STX-1202A、STX-202AQ、STX-603、STX-2401、STX-402、STX-2017种。 外圆切割机的型号有：SYJ-400、SYJ-200、SYJ-150、SYJ-160、SYJ-800、SYJ-506 种。可根据材料的大小、切割的具体要求选择合适的切割设备。 耗材：金刚石线切割机用的各类直径的金刚石线、外圆切割机用的各类锯片、切割专用油、切割冷却粉、油石。 切割辅助设备：沈阳科晶自动化设备有限公司生产的MTI-3040和MTI-250加热平台，设备操作简单，温度≤200℃。 耗材：陶瓷树脂衬垫、石蜡 试样的镶嵌：沈阳科晶自动化设备有限公司生产的适用于无机非金属材料的冷镶嵌机的型号为CXQ-2500。 耗材：水晶胶、硬性冷镶模、软性冷镶模、弹性样品夹（冷镶嵌） 样品的磨抛：沈阳科晶自动化设备有限公司生产的手动研磨抛光机型号有UNIPOL-820、UNIPOL-830、UNIPOL-1210三种。自动精密研磨抛光机型号有UNIPOL-810、 UNIPOL-802、UNIPOL-1202、UNIPOL-1502四种。自动压力研磨抛光机型号有 UNIPOL-1000D、UNIPOL-1200S、UNIPOL-1200M、UNIPOL-800M、UNIPOL-1260五种。及 双面研磨抛光机UNIPOL-160D一种。 耗材：砂纸、金刚石磨片、树脂基金刚石磨片、研磨纸、研抛底片、磨料、抛光垫、抛光液、抛光膏、磁力橡胶 样品的清洗：沈阳科晶自动化设备有限公司生产的超声波清洗机的型号有VGT-1620QTD、VGT-1620TD 两种。等离子清洗设备的型号有PCE-6、PCE-8两种。可根据样品自身的特性选择合适 的清洗方法。 样品表面喷金和蒸碳：沈阳科晶自动化设备有限公司生产的GSL-1800X-ZF2小型蒸镀仪，VTC-16-3HD 3溅射蒸镀膜仪是电镜实验室喷金和蒸碳常用的最佳设备。 耗材：靶材 样品观察：将已经导电的试样用导电双面胶粘接到载样台上之后就可以用扫描电子显微镜进行观察了。 以上设备和对应耗材沈阳科晶自动化设备有限公司均有销售。
食品加工人员要求及标准 目的 提高员工卫生意识，规范公司直接与产品生产有关的员工的个人卫生要求，培养良好卫生习惯，保证产品的卫生质量。 范围 适用于本公司产品生产过程中涉及的每位员工。 定义/参考 1 《生产车间卫生管理规定》 2 《生产设备、加工用具的卫生管理规定》 职责 1 各部门主管负责所属与公司产品生产直接接触的员工的卫生健康达标及日常的监督。 2品管部负责进行定期个人卫生的抽查考核。 程序内容 1 卫生健康检查 1.1 人事部负责组织公司所有与产品生产直接有关的员工每年至少一次的卫生健康检查。一般情况检查单位至少应具备市区级以上医疗卫生的资格水平，经检查如发现患有有碍食品卫生疾病者,由人事部调离该当事人直接与产品生产有关的工作岗位，并根据该当事人的实际工作能力，安排适合的岗位或辞退。 1.2 每位从事与公司产品生产直接有关的个人，必须接受有食品卫生与安全方面的内容培训。 1.3 新进员工若分配进行从事与产品生产有关的岗位,需经人事部组织卫生健康检查,同时由品管部组织食品卫生与安全内容的培训,合格者方可上岗。 1.4 所有个人卫生健康检查证明或健康证的复印件由人事部建档保管,保存期一年。 2 着装要求 A.不留长指甲，禁涂指甲油，禁止化妆后进入车间或在车间内化妆。 B.不得戴首饰（戒指、耳环、项链、手链、发卡等）、手表等饰物进入车间。 C.必须穿戴统一发放的工作服、水鞋，戴发网、工作帽进入作业车间，并且应保持干净。 D.卫生区作业员工必须戴口罩。 E.工作服等应穿整齐，头发不得外露。不允许将工作服、水鞋穿到车间以外，进厕所必须换下工作服和鞋靴。 3 个人行为 A.不允许在车间（包括更衣室、消毒间以及化验室内）有吸烟、吃零食，
3.1 试样制备技术 试样制备技术在电子显微术中占有重要的地位，它直接关系到电子显微图像的观察效果和对图像的正确解释。如果制备不出适合电镜特定观察条件的试样，即使仪器性能再好也不会得到好的观察效果。 和透射电镜相比，扫描电镜试样制备比较简单。在保持材料原始形状情况下，直接观察和研究试样表面形貌及其它物理效应（特征），是扫描电镜的一个突出优点。扫描电镜的有关制样技术是以透射电镜、光学显微镜及电子探针X射线显微分析制样技术为基础发展起来的，有些方面还兼具透射电镜制样技术，所用设备也基本相同。但因扫描电镜有其本身的特点和观察条件，只简单地引用已有的制样方法是不够的。扫描电镜的特点是： ①观察试样为不同大小的固体（块状、薄膜、颗粒），并可在真空中直接进行观察。 ②试样应具有良好的导电性能，不导电的试样，其表面一般需要蒸涂一层金属导电膜。 ③试样表面一般起伏（凹凸）较大。 ④观察方式不同，制样方法有明显区别。 ⑤试样制备与加速电压、电子束流、扫描速度（方式）等观察条件的选择有密切关系。 上述项目中对试样导电性要求是最重要的条件。在进行扫描电镜观察时，如试样表面不导电或导电性不好，将产生电荷积累和放电，使得入射电子束偏离正常路径，最终造成图像不清晰乃至无法观察和
照相。 3.1.1 块状试样制备 1．导电性材料 导电性材料主要是指金属，一些矿物和半导体材料也具有一定的导电性。这类材料的试样制备最为简单。只要使试样大小不得超过仪器规定（如试样直径最大为φ25mm，最厚不超过20mm等），然后用双面胶带粘在载物盘，再用导电银浆连通试样与载物盘（以确保导电良好），等银浆干了（一般用台灯近距离照射10分钟，如果银浆没干透的话，在蒸金抽真空时将会不断挥发出气体，使得抽真空过程变慢）之后就可放到扫描电镜中直接进行观察。但在制备试样过程中，还应注意： ①为减轻仪器污染和保持良好的真空，试样尺寸要尽可能小些。 ②切取试样时，要避免因受热引起试样的塑性变形，或在观察面生成氧化层。要防止机械损伤或引进水、油污及尘埃等污染物。 ③观察表面，特别是各种断口间隙处存在污染物时，要用无水乙醇、丙酮或超声波清洗法清理干净。这些污染物都是掩盖图像细节，引起试样荷电及图像质量变坏的原因。 ④故障构件断口或电器触点处存在的油污、氧化层及腐蚀产物，不要轻易清除。观察这些物质，往往对分析故障产生的原因是有益的。如确信这些异物是故障后才引入的，一般可用塑料胶带或醋酸纤维素薄膜粘贴几次，再用有机溶剂冲洗即可除去。 ⑤试样表面的氧化层一般难以去除，必要时可通过化学方法或
A 悬浮培养的细胞、细菌、血细胞、精子等； 细胞使用PBS或无血清培养基离心漂洗1~2次以去除血清，离心转速依据不同离心机、不同样品自定，总时间控制在5min内；细胞团根据预设浓度在适量2.5%戊二醛吹悬，滴加在预先置入青霉素小瓶中的托盘，4℃静置沉降2~3天，在托盘周围加入PBS，以防止样品干燥。 B贴壁培养的细胞： 在培养皿中预先加入盖玻片，使细胞贴附于盖玻片上；PBS或无需请培养基漂洗后，放置在培养板室温固定1h，4℃3 h，注意放置干燥，自行转入青霉素小瓶中，加满PBS送检。SEM标本处理必须使用玻璃容器，需明确所用盖玻片尺寸可以放入青霉素瓶。 C组织取材 样品观察表面可达8~10mm2,高度小于5mm左右； 样品表面在固定前必须清洁：使用生理盐水或PBS冲洗掉表面的灰尘以及不需要观察的蛋白、粘液等。能够明确标识标本的观察面。消化道、呼吸道、血管、生殖器官、泌尿等官腔内表面，尤其要注意先清洗再固定。 如需要观察脏器内结构，应依照不同的实验目的，决定目的脏器是否需要灌注清洗； 固定2.5%戊二醛浸没标本，室温1h，4℃固定3h以上，换PBS送检。 附：2.5%戊二醛的配制 Step 1: 0.2M磷酸缓冲液的配制： --------------------- 磷酸二氢钠（NaH2PO4.H2O） 2.6克 磷酸氢二钠(Na2HPO4.12H2O)29克 双蒸馏水加至500毫升 pH调至7.4 Step 2: 戊二醛固定液的配制： --------------------- 25% 戊二醛1ml 双蒸馏水4ml 0.2mol/L磷酸缓冲液5ml 戊二醛最终浓度 2.5% pH值7.3-7.4
一机加工车间班组长工作标准 1 范围 本标准规定了车间班组长的职责权限，工作内容与要求，检查考核等内容和对该车间的检查与考核。 2 隶属关系 直属上级领导：生产副总经理 3. 岗位资格要求 机械制造专业或相关专业，高中及以上学历 三年以上技术岗位或管理岗位工作的经历 身体健康。 4. 职责 组织本车间员工做好各种产品机械零件的加工和装配任务，保证按品种，按数量，按期限，按质量，低消耗，安全的完成生产计划。 5. 权限 有权组织车间员工按公司的指令（品种，数量，质量，交货期）完成生产任务。有车间员工进行安全生产，设备维护保养，严格遵守操作规程方面的教育。
有人事调配权，根据车间各工种的生产任务情况，调整车间内不平衡的工种人员。对不合格的原材料，毛胚见，车间有权拒收。 对不合格的设备，工装，模具等车间有权拒收或拒用。 对严重影响车间按质，按量，按期完成生产任务的各项因素有权向主管部门提出及时解决的要求，并报告上级领导。 有钱考核本车间员工的工作情况，并对其使用，奖惩，工资晋级等有建议权。6. 主要工作内容 做好本车间人员的岗位分工，明确目标责任，规范各岗位的工作标准。 机加工车间工作标准编号：FHSC-01 A版第0次 第2/9页 修订 负责制定本车间的方针目标和完成目标的措施，实施目标管理。 按公司质量体系的要求，健全本车间质量保证体系，抓好工艺记录的监督检查和质量控制点的管理，保证产品质量。 推行现代化生产管理方式，开展群众性的革新活动。 负责车间安全生产管理，严格执行安全操作规程，及时发现，防范和组织排除不安全隐患。 负责车间生产设备的管理工作，认真贯彻点检制度和维护保养工作，保证设备安全有效的运行。 负责节约能源工作，落实节能措施。完成节能目标。 负责车间的文明生产管理，继续推行好定置管理，使生产现场达到布局合理，整齐清洁，井然有序。 负责车间劳动纪律管理，认真考勤，严格劳动纪律。 搞好车间的经济核算和车间员工的业绩考核，按时编报车间报表。
扫描电镜样品制备程序 一、固定：戊二醛-锇酸双固定法 1．2.5%戊二醛（试剂1）固定4小时（或者过夜） 2．0.1M 磷酸缓冲液（试剂2）清洗3次，每次15-30分钟 3．1%锇酸（试剂3）固定2-4小时 4．0.1M 磷酸缓冲液（试剂2）清洗3次，每次15分钟 二、脱水：乙醇系列 1．30%乙醇15－20分钟 2．50%乙醇15－20分钟 3．70%乙醇15－20分钟 4．80％乙醇15－20分钟 5．90%乙醇15－20分钟 6．95%乙醇15－20分钟 7.100%乙醇两次每次15-20分钟 三、置换： 乙酸异戊酯2次，每次15分钟（或过夜）。 四、干燥： 临界点干燥 五、离子溅射金 六、扫描电镜观察 附注：试剂配置 试剂1：2.5%戊二醛 取0.2M磷酸氢二钠40.5mL（A液），0.2M磷酸二氢钠9.5mL（B液），混合均匀（即0.2M磷酸盐缓冲液pH7.4），加入10mL浓度为25%的戊二醛，用超纯水稀释至100mL。 试剂2：0.1M 磷酸缓冲液（pH 7.4） A液：0.2M磷酸氢二钠 称取3.561g Na2HPO4.2H2O（或者5.365g Na2HPO4.7H2O）; 或7.164g Na2HPO4.12H2O)，溶于100mL双蒸水中。 B液：0.2M磷酸二氢钠 称取2.760g NaH2PO4.H2O（或者3.121g NaH2PO4.2H2O），溶于100mL双蒸水中。 量取A液36.0mL, B液14.0mL，混合均匀后用双蒸水稀释至100mL，得0.1M 磷酸缓冲液（pH 7.4）。 试剂3：1%锇酸 将2%的锇酸溶液与0.1M磷酸盐缓冲溶液（pH 7.4）等体积混合，得1%锇酸。 注意：该操作在通风橱中进行。
扫描电镜实验报告记录
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HUNAN UNIVERSITY 姓名：扫描电镜实验报告 姓名：高子琪 学号： 201214010604
一.实验目的 1.了解扫描电镜的基本结构与原理； 2.掌握扫描电镜样品的准备与制备方法； 3.掌握扫描电镜的基本操作并上机操作拍摄二次电子像； 4.了解扫描电镜图片的分析与描述方法。 二．实验设备及样品 1.实验仪器：D5000-X衍射仪 基本组成：1）电子光学系统：电子枪、聚光镜、物镜光阑、样品室等 2）偏转系统：扫描信号发生器、扫描放大控制器、扫描偏转线圈 3）信号探测放大系统 4）图象显示和记录系统 5）真空系统 2.样品：块状铝合金 三.实验原理 1.扫描电镜成像原理 从电子枪阴极发出的电子束，经聚光镜及物镜会聚成极细的电子束（0.00025微米-25微米），在扫描线圈的作用下，电子束在样品表面作扫描，激发出二次电子和背散射电子等信号，被二次电子检测器或背散射电子检测器接收处理后在显象管上形成衬度图象。二次电子像和背反射电子反映样品表面微观形貌特征。而利用特征X射线则可以分析样品微区化学成分。 扫描电镜成像原理与闭路电视非常相似，显像管上图像的形成是靠信息的传送完成的。电子束在样品表面逐点逐行扫描，依次记录每个点的二次电子、背散射电子或X射线等信号强度，经放大后调制显像管上对应位置的光点亮度，扫描发生器所产生的同一信号又被用于驱动显像管电子束实现同步扫描，样品表面与显像管上图像保持逐点逐行一一对应的几何关系。因此，扫描电子图像所包含的信息能很好地反映样品的表面形貌。 2.X射线能谱分析原理 X射线能谱定性分析的理论基础是Moseley定律，即各元素的特征X射线频率ν的平方根与原子序数Z成线性关系。同种元素，不论其所处的物理状态或化学状态如何，所发射的特征X射线均应具有相同的能量。
扫描电镜实验报告 篇一：扫描电镜实验报告 扫描电镜实验报告 班级：材化11学号： 41164049 姓名：李彦杰日期： XX 05 16 一、实验目的 1. 了解扫描电镜的构造及工作原理； 2. 扫描电镜的样品制备； 3. 利用二次电子像对纤维纵向形貌进行观察； 4. 了解背散射电子像的应用。 二、实验仪器 扫描电子显微镜（热发射扫描型号JSM-5610LV）、真空镀金装置。扫描电镜原理是由电子枪发射并经过聚焦的电子束在样品表面扫描，激发样品产生各种物理信号，经过检测、视频放大和信号处理，在荧光屏上获得能反映样品表面各种特征的扫描图像。扫描电镜由下列五部分组成，主要作用简介如下： 1．电子光学系统。其由电子枪、电磁透镜、光阑、样
品室等部件组成。为了获得较高的信号强度和扫描像，由电子枪发射的扫描电子束应具有较高的亮度和尽可能小的束斑直径。常用的电子枪有三种形式：普通热阴极三极电子枪、六硼化镧阴极电子枪和场发射电子枪。前两种属于热发射电子枪；后一种则属于冷发射电子枪，也叫场发射电子枪，其亮度最高、电子源直径最小，是高分辨本领扫描电镜的理想电子源。电磁透镜的功能是把电子枪的束斑逐级聚焦缩小，因照射到样品上的电子束斑越小，其分辨率就越高。扫描电镜通常有三个磁透镜，前两个是强透镜，缩小束斑，第三个透镜是弱透镜，焦距长，便于在样品室和聚光镜之间装入各种信号探测器。为了降低电子束的发散程度，每级磁透镜都装有光阑；为了消除像散，装有消像散器。样品室中有样品台和信号探测器，样品台还能使样品做平移、倾斜、转动等运动。 2. 扫描系统。扫描系统的作用是提供入射电子束在样品表面上以及阴极射线管电子束在荧光屏上的同步扫描信号。 3. 信号检测、放大系统。样品在入射电子作用下会产生各种物理信号、有二次电子、背散射电子、特征X射线、阴极荧光和透射电子。不同的物理信号要用不同类型的检测系统。它大致可分为三大类，即电子检测器、阴极荧光检测
员工上岗操作注意事项 一、上岗前 1.操作者上岗前必须穿戴好劳保防护用品。 2.身体不适、喝酒后严禁上岗。 二、工作前 1.认真执行15分钟清理打扫工作。 清理工具箱、工作台架，整理转运筐及工件摆放，清扫现场卫生，擦拭挡板，标示牌。检查机床表面，必须清理、擦拭干净。 2.认真检查设备情况并填写设备日点记录。 检查安全防护、制动（止动）、限位和换向等装置是否齐全完好。检查机械、液压、气动等操作手柄、阀门、开关等是否处于非工作的位置上。检查各刀架处是否于非工作位置。检查电器配电箱是否关闭牢靠，电气接地良好。检查润滑系统储油部位的油量是否符合要求，封闭良好。油标、油窗、油杯、油嘴、油线、油毡、油管和分油器等应齐全完好，安装正确。按润滑指示图表规定进行人工加油或机动（手位）泵打油，查看油窗是否来油。根据检查情况认真填写设备日点检记录卡片。 3.量具应擦拭干净后，认真校验量具并填写好量具日点记录卡片。 4.认真检验所用工装，填写工装日点记录卡片。 三、工作中 1.首件必检，中间时时抽检，末件检测；关键工序每件必检并认真填
写工件加工记录。每个工件做好标识。 2.坚守岗位，精心操作，不做与工作无关的事（如吸烟，看手机，相互嬉闹等）。因事离开机床时要停车，关闭电源、气源。 3.按工艺规定进行加工。不准私自改动加工程序，不准任意加大走刀进给量、切屑深度和切（磨）削速度。注意工件图纸标注的加工精度及粗造度，倒角的尺寸及角度（特别是安装轴承或油封处）。加工完后及时清理铁屑及毛刺，做防锈处理。 4.不准超规范、超负荷、超重量使用设备。 5.工件在加工中测量时必须停车进行。高速切削机床，操作者严禁戴手套。 6. 不准擅自拆卸机床上的安全防护装置，缺少安全防护装置的机床不准工作。密切注意机床运转情况，如发现动作失灵或其他异常现象，应立即停车检查，排除故障后，方可继续工作。 7.机床发生事故时应立即按总停按钮，保持事故现场，报告有关部门进行处理。 8.不准在机床上焊接和补焊工件。 四、工作后 1.将机械、液压、气动等操作手柄、阀门、开关等扳到非工作位置上。 2.停止机床运转，切断电源、气源。清除铁屑，认真擦净机床，导轨面、转动及滑动面、定位基准面、工作台面等处加油保养。 3.清理工作现场，认真打扫卫生，整理工件，盘好气带，放好卫生用具。