2型糖尿病大鼠模型研究概况 【摘要】目的：综述近年来2型糖尿病(T2DM)大鼠模型的研究进展及对其优缺点进行评价和未来同类模型的展望。方法：主要对T2DM大鼠模型的建立技术和方法进行综合性评价。结果：T2DM大鼠模型目前可以分为自发性T2DM 和实验性T2DM模型,且仍有较大发展空间。结论：经过综合评价研究，认为各种建模方法均有优缺点，目前较认可的是实验性T2DM大鼠模型，因价格低廉，造模方便而广受欢迎，但仍缺乏一定的造模标准。 【关键词】2型糖尿病；动物模型；研究概况 随着经济社会的发展，人们的饮食结构、生活方式等发生了很大改变，糖尿病发病率显著上升，尤其T2DM占了较高比例，大概占了糖尿病发病率的90%。T2DM是因人体胰岛素分泌相对不足或靶细胞对胰岛素敏感性降低继而引发糖、蛋白质、脂肪和水电解质等代谢紊乱所导致的疾病。患者典型表现为三多一少，即多饮、多食、多尿表现，同时还伴有身体消瘦、疲乏、烦躁、口渴等临床症状。 选择一些合适的动物模型进行动物试验成了我们研究糖尿病的良好途径，我们可以从中比较一些糖尿病药物的作用效果以及其药动学的特点，在临床用药上对评价某套治疗方案的可行性及预后等具有十分重要的参考意义。 目前研究的临床T2DM动物模型主要集中在大鼠上，这可能是由于大鼠作为T2DM动物模型相对较稳定且与人T2DM表现相似的优点。因此我们在下面综述近几年来国内外有关临床T2DM大鼠模型研究的情况。 总体上来说，目前临床T2DM研究的大鼠模型主要分为两类，一类是自发性T2DM大鼠模型，另一类则是实验性T2DM大鼠模型，考虑到成本及方便程度，目前以后者居多。 1 实验性T2DM大鼠模型 1.1 单纯高脂高糖引发的T2DM 在试验中，通过较长时间给予大鼠过量的高糖高脂饮食，发现能够诱导出较满意的T2DM大鼠模型，从而能为进一步研究奠定良好的基础。目前认为其机理可能是高糖高脂饲料会导致胰岛B细胞超负荷，进而使胰岛细胞发生损伤、萎缩甚至死亡，胰岛的功能因此下降，继而建立起伴胰岛素抵抗的T2DM模型。鲁瑾[1]等采用61%的高脂饮食，饲养大鼠7周后，大鼠就出现了高胰岛素血症，且形成了明显的胰岛素抵抗，是一个十分可靠的胰岛素抵抗模型。张丽锋[2]等给予W istar大鼠脂肪热比为59%的饲料, 喂养4周，均出现胰岛素抵抗，多项研究试验表明高脂饮食可以诱发产生可靠的糖尿病大鼠模型。 1.2 应用STZ药物诱导产生的大鼠模型由于高糖高脂饲料相对用时较长，且饲料成本相应较高，因此合理使用链脲菌素(STZ)是目前许多研究者所推崇的
糖尿病足部溃疡分类 足部溃疡的表现，标志着糖尿病足进入1级，病变常继发感染，感染可促进可溃疡的发生和发展，可迅速蔓延扩大到组织间隙及腱鞘，形成蜂窝织炎，脓肿，逐渐发展出现骨髓炎，甚至菌血症；以血管病变为主的，则由于循环障碍，出现末端供血障碍，导致局部缺血性坏死。在1~5级不同阶段中，病变程度不同，临床表现不同。 糖尿病足溃疡分类 糖尿病足溃疡根据病因或临床表现而采取两种分类方法。根据病因可分为神经性溃疡、缺血性溃疡和神经缺血性溃疡。根据临床表现分为湿性坏疽、干性坏疽和混合性坏疽三种。 1.根据病因分类 2.神经性坏疽：足部温暖，动脉搏动良好，皮肤、胼胝干硬，易于出现皲裂， 足部或足趾变形，溃疡可能发生在足趾尖、跖骨头表面部位，或在足底，有胼胝部位多见，疼痛感不明显，可以合并夏科关节。 3.神经-缺血性溃疡：足部发凉，脉搏减弱或消失，水肿，一般溃疡出现在 足侧边缘，溃疡的第一个征兆是出现红色水疱，逐渐演变成基部有稀疏灰色肉芽组织或浅黄色坏死组织的浅表溃疡，溃疡周围常伴有红色斑晕。皮肤或紫暗或青紫，国内糖尿病足溃疡主要是神经-缺血性溃疡，这些患者 同时有周围神经病变和周围血管病变，足背动脉搏动消失。 4.缺血性溃疡：单纯缺血性溃疡较为少见，一般多与神经性同时存在。可以 出现肢端变黑。 5.根据临床表现分类 6.干性坏疽：干性坏疽者较少，多因动脉血流逐渐或骤然受阻，而静脉血流 仍然通畅，造成局部组织血流减少，导致局部发生不同程度的缺血性坏疽，可见患处干枯变黑，坏死，分泌物少，与健康组织界限清楚。 7.湿性坏疽：湿性坏疽临床较为多见。多因肢端循环及微循环障碍，动静脉 血流同时受阻，皮肤损伤，感染化脓。局部红、肿、热、痛，潮湿流脓，分泌物多，分泌物可有异味。感染波及到皮下肌肉组织，形成蜂窝织炎，蜂窝组织液融合形成大脓腔，沿肌间隙蔓延扩大形成窦道，深部感染蔓延扩大，骨与关节破坏，形成假关节。
1例糖尿病足的伤口护理 发表时间：2018-12-03T14:49:04.027Z 来源：《航空军医》2018年20期作者：许小红伊晓瑜 [导读] 下肢远端外周血管病变和下肢远端神经异常相关的足部感染，是由糖尿病足破坏深层组织和溃疡组织导致的。（解放军第一七五医院厦门大学附属东南医院门诊部福建漳州363000） 下肢远端外周血管病变和下肢远端神经异常相关的足部感染，是由糖尿病足破坏深层组织和溃疡组织导致的[1]。慢性溃疡是糖尿病足最常见的后果，致残甚至截肢是糖尿病足最严重的结局，这使得患者的生存质量大大降低，给患者心理和生理带来极大的痛苦，给患者的家庭带来沉重的经济负担。大约有15% 的糖尿病（DM）患者的足溃疡是不同程度的，被截肢的糖尿病患者大约占1%。本文对该例糖尿病足疗患者的感染伤口采用银离子敷料联合普朗特凝胶进行伤口护理，取得了令人满意的治疗效果，现整理报告如下：1 病例介绍 患者，男，58岁，退休职工，右足跟部可见一大小约3.0cm×4.0cm的椭圆形伤口，皮肤破溃深达肌层，基底部分发黑坏死伴皮下波动感，足跟部红肿、皮温高。患者糖尿病肾病、尿素症10余年，因右足跟部溃疡于2017年3月16日来我科门诊换药中心行换药护理，数字疼痛评分3分，评估Wagner分级为2级。。 2 创面处理 控制感染、有效冲洗、清洁创面。3％过氧化氢清洗创面，生理盐水洗净创面，碘伏消毒创面及周边皮肤，无菌纱布擦干伤口后选用纳米银敷料联合应用普朗特凝胶，纳米银敷料的网状棉纤维结构特性，也使得其具有理想的渗透性，能够有效促进创面渗出引流，加快创面愈合速度。普朗物凝胶能够有效清除和预防细菌生物膜的革新，可清洁、清创和提供湿性愈合环境，纳米银敷料和普朗物凝胶联合应用，能起到有效控制感染和促进组织修复的作用，加快了创面的愈合。外层敷料选用纱布绷带固定。每日换药1次，感染控制后视渗出物的颜色、量、性状可隔天或3ｄ换药１次。 伤口愈合过程： 伤口愈合的过程如图1A-D所示。 C.2017-03-25 D.2017-03-31 图1 病人伤口愈合过程 3 体会 3.1 针对该患者制定的综合性足部治疗包括积极控制血糖、营养干预、糖尿病足患教、局部清创换药、足部减压、足部皮肤护理等。临床上糖尿病足患者容易合并感染，渗出液较多，针对这样的糖尿病足伤口渗出液的管理和敷料的正确选择很重要，伤口过湿易导致肉芽水肿或周围皮肤浸渍；伤口过干，上皮细胞移行困难，故选择合适的清创换药方式对患者伤口的预后至关重要[2]。选用普朗物伤口凝胶，外层使用纳米银敷料覆盖以减少药液的蒸发及被外层绷带吸收的风险，从而保证药液的抗感染作用得到最大限度的发挥。本例患者临床实践也证明，普朗特伤口凝胶联合纳米银敷料在该患者身上取得了良好的抗感染效果，为感染控制后创面生长提供了良好的基础。 3.2 糖尿病教育在糖尿病足的诊治过程中占有重要地位，个体化的糖尿病教育可有效改善糖尿病足患者的伤口愈合情况和预后[4]。对患者做好健康宣教，包括饮食指导、血糖监测、足部护理等相关内容。包括：①糖尿病患者的高血糖抑制中性粒细胞功能，创面炎症反应弱，这直接导致了纤维母细胞生长和胶原合成减少。故血糖控制在空腹7 mmol/L 以内，餐后2 h 10mmol/L 以内，有利于伤口愈合。②告知患者正确的足部护理知识，患者依从性好，积极配合作好各项内容并按时换药，对伤口愈合起到促进作用。③告知患者伤口治疗期间足部减压的方法行走时使用轮椅、拐杖等助行器帮助行走，最好定做糖尿病足专用鞋，从而减少压力对伤口愈合的影响。参考文献 [1] 李茜.中医护理肾性水肿的临床体会[J].转化医学，2015，12（12）：7147. [2] Martini J.Diabetic foot：detection and prevention[J].Rev Med Interne，2008，29（sl2）：260-263. [3] Aragón-Sánchez J，Lázaro-Martínez JL，Quintana-Marrero Y，et al.Super-oxidized solution（Dermacyn Wound Care）as adjuvant treatmentin the postoperative management of complicated diabetic foot osteomyelitis：preliminary experience in a specialized department[J].Int J Low Extrem Wounds，2013，12（2）：130-137. [4] 中华医学会糖尿病学分会.中国2 型糖尿病防治指南（2013 版）[J].中华糖尿病杂志，2014，6（7）：447-498.
大鼠二型糖尿病造模方法 Prepared on 22 November 2020
大鼠2型糖尿病模型建立方法讨论 专业：药理班级：六班姓名：刘畅学号：150517 摘要：据国际糖尿病联合会（InternationalDiabetesFederation，IDF）估计，现在全球约%的成年人患有糖尿病。到2035年，该病患者人数预计会上升至亿。在2013年，全球约有亿成年人患有糖尿病，中国的糖尿病患者人数居全球之首，调查统计人数为亿。糖尿病导致约510万人死亡，平均大约每6秒钟就有1人死于糖尿病。2012年1月9日，中国健康教育中心公布的“中国慢病监测及糖尿病专题调查”结果显示，我国18岁及以上居民糖尿病患病率为2。6%，60岁以上老年人患病率高达%。因此，为治疗糖尿病建立简单、稳定、经济的动物模型非常重要。因2型糖尿病患者人数占糖尿病患病人数的90%以上，本文主要综合讨论高糖高脂饲料联合链脲佐菌素大鼠2型糖尿病模型的建立方法和注意事项。得出结果为：使用体重在190g~240g之间的雄性SD大鼠，通过连续两次腹腔注射小剂量链脲佐菌素并辅以去抗氧化剂处理，合理饲养并通过尾静脉采血方法建立的2型糖尿病模型较理想。 关键词：2型糖尿病，SD大鼠模型，链脲佐菌素STZ， 糖尿病（diabetes）是一种以胰岛素分泌缺陷和胰岛素作用不足所致的以高血糖为特征的葡萄糖、蛋白质、脂质代谢紊乱的综合征，基本治疗方案包括饮食治疗、运动治疗、药物治疗、糖尿病监测及糖尿病教育。病因主要有遗传因素、病毒感染、肥胖等，临床表现为“三多一少”即多尿、多饮、多食和体重减轻。长期的高血糖最终会引起很多严重的并发症，包括心脑血管疾病、糖尿病神经病变、糖尿病视网膜病变，糖尿病肾病、糖尿病足、感染、糖尿病酮症酸中毒、高渗性昏迷等[1]。 糖尿病分为1型糖尿病（Type1diabetes）和2型糖尿病 （Type2diabetes）两种，1型患者因自身免疫β细胞破坏所致，每日胰岛素分泌量非常少，空腹基值及糖刺激后峰值均明显低于正常值，表现为绝对分泌不足。2型糖尿病细分为两类：体重正常患者胰岛素分泌量低于正常人，糖刺激后峰值低并且延迟出现；肥胖糖尿病人胰岛素分泌量大于正常人，空腹基值和糖刺激后高峰明显高于正常人，但延迟出现，因此，表现为相对性胰岛素分泌不足且释放反应迟钝。胰岛素分泌不足的原因可能为：遗传因素、自身免疫、胰岛素拮抗。糖尿病患者中约有90%～95%属于2型糖尿病。 2型糖尿病，即非胰岛素依赖型糖尿病（non-insulin-dependentdiabetesmellitus，NIDDM），根据体重可分为肥胖和不出现肥胖两
实验流程 1、末次灌胃后，大鼠禁食不禁水12h，与麻醉前进行称重，行腹腔注射3%戊巴 比妥钠，0.3ml/100g 2、腹主动脉取血，留取全血标本。 3、取肝、脾、肾、胃、心脏及脑。 4、称肝、脾、肾、胃、心脏及脑组织，并分装各个组织，放入-80℃冻存。其中 肝组织剪取1g肝脏，送至肝均浆；肝10%甲醛固定做HE染色，每组5只； 肝4%戊二醛固定做电镜，每组一只； 5、小肠10%甲醛固定做HE染色，每组5只；小肠4%戊二醛固定做粪便电镜，每 组1只；其余肠组织-80℃冻存。 6、肝；制成肝均浆，1g肝脏加入9ml冰生理盐水，制成肝均浆液，离心后，取 上清液，于-80℃冻存。 7、全血标本静置30min后，进行离心，分离血清，血清和血浆均放入-80℃冻存。检测指标： 1、肝脏组织 1.1HE染色观察肝脏组织的病理学改变。 1.2透射电镜观察肝脏超微结构变化 1.3电感耦合等离子体质谱（ICP-MS） 1.4试剂盒测肝均浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化酶 （GSH-Px）、ROS活性氧水平 1.5检测肝脏组织中Western blot、NF-kB、COX-2表达情况，计算其阳性表达 率 2、血清（血浆） 2.1全自动化分析仪测谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、谷氨转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶TG 2.2酶联免疫吸附法检测血浆中肠结合脂肪酸蛋白（FABp2）、D-乳酸（D-LA）及二胺氧化酶（DAO）水平评价大鼠大肠粘膜损伤 2.3试剂盒测血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛（MDA）、4-HNE（羟基壬烯醛）、 谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）评价大鼠氧化应激水平 2.4酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠血浆中α肿瘤坏死因子（TNF α）、肿瘤坏死因子β（TNF-β）、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、细胞间粘附因子-1(ICAM-1)浓度 3、肠道菌群
糖尿病患者皮肤溃烂怎么治疗？ 糖尿病患者可能会因各种原因不经意间造成皮肤出现伤口，由于糖尿病患者并发周围神经病变感觉交差，如开水烫伤、或者冬天被取暖器灼伤等，出现创面后如果不及时处理伤口，会不断扩大，因此带来严重的后果。这里我们用真实的案例，以图文结合的形式向广大糖尿病患者展示糖尿病皮肤溃烂愈合的全程。 姓名：尹斌性别：男 年龄：53岁职业：农民 籍贯：山东烟台民族：汉 病情叙述：患者本人可靠程度：可靠 入院时间：2012.3.21 记录时间：2013.3.21 主诉：左腿胫前皮肤破溃5月余，加重7天 现病史：5月前患者左腿胫前有一月黄豆粒大小的硬结，未在意。硬结处皮肤红肿，随后出现溃疡伴脓液流出。赠于“烟台市北海医院进行植皮手术，术后伤口处皮肤坏死向四周缓慢扩散，并引起感染导致植皮坏死。7天前患者自觉皮肤破溃处疼痛加重，脓液流出量增多，患者为求进一步系统治疗，遂来我院，门诊以”糖尿病足“收入院。自发病以来患者精神可，饮食、睡眠可，体重减轻10kg,大小便正常。 正常人有破溃处会很快愈合，但是糖尿病人不同，如果不及时控制会出现大面积溃烂。尹国彬就是这样的患者。五个月的治疗没有让病情得到缓解，反而更加严重，对于任何人来说任何一个家庭都是一个沉重的打击。他在住院之前家人专程到医院进行了考察，与其他患者交流之后第三天便转入我院。
无论是针对足部溃烂还是皮肤溃烂，清创是第一步，也是重要的一个环节，清创的程度关系到后期治疗的效果。（在这里提一下，不少患者提出能不能在家里清创，换药？清创是需要专业的设备严格的操作，如果引起的感染会造成更严重的结果，所以如果家里有清创的设备以及专业人员，对于一些路途遥远或者 病情已经得到控制的患者可以在家换药。） 对创面直接进行控制炎症是控制感染最有效的方法，所以大部分医院只是一味的静脉消炎效果并不明显。 尹国兵曾进行植皮，失败后引起更大的溃烂，证明了我们始终在强调的 对于糖尿病引起的溃烂植皮是没有意义的，包括生物介入。
进食状态对糖尿病大鼠血糖及肝糖原的影响 实验目的： 1.熟悉常用的糖尿病大鼠造模方法 2.掌握血糖仪的使用方法 3.掌握组织样品的制备方法 4.了解血清胰岛素水平检测方法 5.熟悉肝糖原提取、鉴定的方法与原理 6.通过本实验探讨临床糖尿病患者不同进食状态对血糖的影响 实验用品： 一、器材： 普通离心机，酶标仪，恒温水浴箱，分光光度计，0.01g电子天平、0.1g电子天平，血糖仪，棉签，干棉球，剪刀2把，镊子2把，研钵2个，白磁盘，试管架，拆条酶标板，吸水纸，5ml离心管，试管，烧杯，漏斗，玻璃棒，刻度吸量管，EP管，滤纸，1000μl微量可调取液器，50ml容量瓶3个，注射器，白瓷反应板，塑料手套，布手套，抹布，记号笔 二、试剂： 5%三氯乙酸溶液，蒸馏水，生理盐水，碘试剂，95％乙醇，标准葡萄糖溶液（50mg/L），98%浓硫酸，30%KOH溶液，0.2%蒽酮显色剂，柠檬酸—柠檬酸钠缓冲液（PH4.4），1%链脲佐菌素（STZ）溶液，10%水合氯醛溶液，大鼠胰岛素（INF）ELISA检测试剂盒 实验步骤： 一、标记： 二、造模：
A、抓取大鼠并称重。（结果见表一） B、大鼠先禁食12小时后（此部分为老师帮忙完成），进行血糖检测。然后抓取大鼠单次腹腔注射按1%STZ溶液（65mg/Kg），注射后一小时，给予自由饮食、饮水。 具体抓取大鼠方法：用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，抓住鼠尾向后轻拉，左手紧抓两耳和头颈部皮肤，余下三指紧捏鼠背部皮肤，如果大鼠后肢挣扎厉害，可将鼠尾放在小指和无名指之间夹住。 C、以后每天安排人员进去喂养动物，记录饮食量和更换垫料。 D、待72小时后大鼠尾静脉采血再次检测血糖，以餐后血糖≥16.7mmol/L为大鼠糖尿病模型造模成功的判定标准。 血糖检测具体步骤：将血糖检测专用试纸插入血糖分析仪中，待血糖仪显示屏上显示滴血标记时，方可使用。用剪刀剪断大鼠尾尖约＜0.5cm，挤出的第一滴血用棉球擦掉不要，第二滴血滴在试纸上。待血糖仪显示屏上显示稳定的数值后记录。（血糖检测结果见表二） 三、麻醉： 大鼠称量后，通过计算每只大鼠所需麻醉量（0.3ml/100g），抓取大鼠，腹腔注射。 四、血清胰岛素水平检测： 麻醉后摘除大鼠眼球，取血约1ml于EP管中，静置一小时以上，由于实验顺序要求先进行接下来的肝糖原检测并鉴定实验，所以静置后将EP管放入冰箱内冷藏一天，第二天进行实验时，将EP管对称放入离心机中，进行2000r/min离心15分钟，分离血清100μl。采用大鼠胰岛素ELISA检测试剂盒，严格按照试剂盒步骤进行血清胰岛素水平检测。 板37°C温育30分钟。 3．洗涤5次，每孔加入酶标试剂50μl，37°C温育30分钟。 4．洗涤5次，每孔加入显色液A,B各50μl，37°C避光显色10分钟。
糖尿病性皮肤溃疡行负压引流技术的护理体会 发表时间：2014-01-09T10:55:10.030Z 来源：《中外健康文摘》2013年第33期供稿作者：王兰平 [导读] 在护理中，注意观察创面负压吸引敷料的情况，敷料向下凹陷并紧贴创面。 王兰平（新疆奎屯第七师130团医院外科 834034） 【中图分类号】R473 【文献标识码】B 【文章编号】1672-5085（2013）33-0147-01 糖尿病性皮肤溃疡是一种慢性、进行性血管病变，主要由肢端缺血、神经病变、感染及多种诱发因素所致…。皮肤溃疡早期采用皮片移植等方法修复溃疡创面，效果并不满意经我科经过创面封闭式负压引流等手段改善创面基底情况，并行皮片移植术修复溃疡创面，得满意效果。现将围手术期护理体会报告如下。 1临床资料 2012年3月至201 3年3月，我科收治了糖尿病严重皮肤溃疡患者4例，均为男性年龄50一-81岁，皮肤溃疡面积占体表面积的5 %—20%。入院时空腹血糖为10.1—25.6mmol/L;4例均有皮肤破溃口，有大量黄白色分泌物，渗出较多，伴臭味，创面周围红肿明显，皮肤色素沉着、瘀青，足背动脉搏动减弱，疼痛明显，活动困难。l例左小腿肌腱、骨质外露，以止血钳探查未及明显窦道；2例下肢出现凹陷性水肿，其中1例合并脓腔。4例在人院时均合并糖尿病肾病、肺部感染、心功能不全、低蛋白血症及神经病变，血管彩超显示均有双下肢动脉硬化。4例人院后均进行创面封闭式负压引流治疗，同时进行疾病的对症治疗。在心肺肾功能改善、溃疡创面基底红润后，进行皮片移植术。4例行皮片移植术后均予石膏托外固定，10—14d打开敷料观察皮片成活情况。本组2例1次皮片移植成活：1例进行了2次皮片移植术，仍有1.5cmx2cm残余创面，经换药治疗后，创面完全愈合；l例经过2次皮片移植，创面完全愈合。本组4例住院42—69d后，在家属搀扶下步行出院。 2护理 2.1? 术前护理 2.1.1? 创面处理 溃疡创面先用39—40C温水浸泡10—15min，清洗溃疡分泌物及创面周围污迹，用0.5%聚维酮碘溶液（PVP-1消毒液）消毒后用银离子药膏包扎伤口，每日换药，第3天开始封闭式负压治疗。国外有研究显示，外科清创术对溃疡的愈合有积极作用，本组1例创面合并有脓腔，遵医嘱予0.5%PVP-1消毒液消毒后切开排脓，清除坏死组织；2例患者创面腐肉难脱，渗液、有恶臭，用过氧化氢溶液冲洗，再用生理盐水冲洗创面2—3次，每日清创换药1-2次。 2.1.2封闭式负压引流的护理 遵医嘱根据患者创面大小设定负压值-125—-450mmHg( ImmHg=0.133kPa)，根据创面分泌物情况选用持续或间断负压吸引方法。本组l例持续负压吸引的同时，用生理盐水持续冲洗。本组3例使用持续负压治疗24—72h后，改用间断负压吸引，其中2例在使用负压吸引48h内，出现引流管堵塞，使用生理盐水冲洗后，管道引流通畅。 在护理中，注意观察创面负压吸引敷料的情况，敷料向下凹陷并紧贴创面，呈真空状态，表示负压良好；向上隆起则为引流不通畅，可能是创面封闭欠良好，引流管松脱或引流管堵塞。本组1例薄膜粘贴不紧，护士用手指按压薄膜的每个点，观察到有漏气情况，护士在漏气的部位用薄膜补缺，经处理后该例未再出现漏气情况。进行负压吸引时注意听取患者主诉，l例主诉创面胀痛，经减小负压后，主诉胀痛减轻。4例经过封闭式创面负压引流治疗，创面红肿明显消退，肉芽生长良好。 2.1.3? 皮肤准备 术前ld做好供皮区皮肤的准备，保证皮肤没有破损、感染。手术当日用39—40C水浸泡溃疡创面10—15min，清洗创面分泌物及周围的污迹后，送患者去手术室。 2.2术后护理 2.2.1体位护理 患者腰麻术后去枕平卧6h后予半卧位。患肢外展中立位，植皮肢体石膏托外固定并抬高、制动，避免植皮区受压。护士每2h协助患者翻身1次，为患者翻身时动作轻柔，1名护士轻轻托住植皮肢体，另1名护士协助翻身，避免动作幅度过大而使皮片移动。植皮肢体石膏托外固定10—14d，以免移植皮片移位或失活。术后10d内避免患者下床活动，鼓励患者在床上活动健侧肢体。本组体位均能达到要求，外固定有效。 2.2.2患肢的观察殁护理 护士每1—2h巡视1次，询问患者术后肢体感觉、运动均良好。观察皮片移植肢体远端的皮肤颜色、温度、足背动脉搏动情况等，避免石膏绷带固定过紧而引起局部压痛及患肢缺血坏死，本组1例患者术后th出现皮片移植肢体远端皮肤轻度发绀、皮温正常，足背动脉搏动正常，予抬高患肢、局部保暖、石膏绷带适当放松，经处理后患者皮肤颜色逐渐恢复正常。观察供皮区及植皮区敷料的渗血渗液情况，本组2例因取皮时供皮区注入500—800ml生理盐水，术后渗液较多，于术后8h更换供皮区敷料1次，之后敷料能够保持清洁干燥。本组术后没有出现患肢缺血坏死及压疮。 2.2.3功能锻炼 住院期间的个体化教育指导是患者短期内系统学习糖尿病足知识、提高自我管理能力的有效手段[41。手术后第1天指导患者在床上进行健侧下肢踝关节背屈、旋转和小腿屈伸运动，10次／组，3组ld，促进静脉回流。患者仰卧时，先抬高患肢至450，维持1—2min，然后休息/mm，10次／组，3组ld。皮片移植肢体在术后l0日内，由责任护士为其进行患肢远端的被动运动，防止患肢长时间制动造成关节僵直、肌肉萎缩等。活动肢体时动作轻柔，避免移植皮片移动。本组患者均能配合护士进行各项功能锻炼。 2. 2、4合理控制血糖，做好饮食指导 严格监测患者早餐前及三餐后2h的血糖变化，根据患者的血糖情况及时遵医嘱调整治疗方案，指导患者合理饮食。本组1例空腹血糖为27.6mmol／L，根据医嘱予皮下注射赖脯胰岛素注射液(优泌乐)22U，30min后复测患者血糖为13.lmmol/L，早餐后2h血糖为15.2mmol/L，连续3d表现为空腹血糖高，请内分泌医生调整注射胰岛素剂量后，患者血糖逐渐正常。另外1例患者连续出现早餐后2h血糖升高到19.8—22.6mmol/L,遵医嘱予临时注射胰岛素，并于30min后测量血糖变化。该例早餐有喝粥的习惯，指导患者早餐时进食燕麦、馒头和牛奶，之
【标准与规范】中国糖尿病足防治指南（2019版）（Ⅰ） 摘要 糖尿病足是糖尿病患者致残、致死的主要原因之一，本着"中国实践，中国证据，中国指南"的原则，中华医学会糖尿病学分会联合中华医学会感染病学分会、组织修复与再生分会以及其他相关领域的多学科专家，共同制定此部适合我国糖尿病足现状的临床指南，旨在规范我国糖尿病足的预防、诊断与治疗。本指南有以下特点：（1）突出临床实用性；（2）充分纳入糖尿病足领域的中国证据；（3）重视早期筛查与管理，强调糖尿病足的预防胜于治疗；（4）强调规范化综合管理的重要性；（5）强调糖尿病足的多学科协作诊断与治疗。另外，参照2017版中国2型糖尿病防治指南的要求，增加了要点提示和证据级别，根据证据质量、临床意义、普遍性、适用性等将证据级别分为A、B、C三个等级。A级：证据基于多项随机临床试验或Meta分析。B级：证据基于单项随机临床试验或多项非随机对照研究。C级：仅为专家共识意见和（或）基于小规模研究、回顾性研究和注册研究结果。 前言 糖尿病在我国已从少见病变成流行病，糖尿病足的患病率也明显增加，我国50岁以上的糖尿病患者，糖尿病足的发病率高达8.1%。据估计，全球每20秒钟就有一例糖尿病患者截肢；糖尿病足溃疡患者年死亡率高达11%，而截肢患者死亡率更高达22%；国内外研究表明，糖尿病足花费巨大，约占整个糖尿病医疗费用的三分之一。因此，糖尿病足是糖尿病患者致残、致死的主要原因之一，也是造成社会沉重负担的重大公共卫生问题。 有鉴于此，1996年中华医学会糖尿病学分会（CDS）糖尿病足与周围血管病变学组成立后，一直致力于通过多种途径促进我国糖尿病足相关领域学术交流以提高学术水平。除了组织大型流行病学调查、召开全国糖尿病足病及相关疾病论坛外，还积极制定糖尿病足相关共识与诊疗手册，以帮助各级医师提高糖尿病足相关知识，组建多学科协作的治疗团队，同时积极探讨糖尿病足的诊疗新技术。近20年来，虽然我国糖尿病足的小截肢率没有变化，但大截肢率从12.1%降至2.14%，从而降低了糖尿病足相关社会和经济负担。 纵观全球，自2005年以来，国际糖尿病联盟（IDF）在全球范围内提出"关注足以预防截肢"，国际上开始重视糖尿病足并发症，一系列足病相关的指南相继问世，如在2011年开始，英国国立卫生保健研究所（The National Institute for Health and Care Excellence，NICE）糖尿病足问题住院管理指南与国际糖尿病足工作组（The International Working Group on the Diabetic Foot，IWGDF）糖尿病足管理和预防实践指南，2012年澳大利亚糖足网糖尿病足溃疡的管理临
糖尿病慢性皮肤溃疡菌群分析 发表时间：2016-03-28T10:04:26.057Z 来源：《健康世界》2016年1期供稿作者：迟海燕周玉萍苏丽清宋明强司凤霞 [导读] 威海市立医院研究观察了316例糖尿病慢性皮肤溃疡的分泌物培养细菌学分布，对临床用药可提供指导。 威海市立医院山东威海 264200 糖尿病的发病率呈现逐年增高的趋势，糖尿病相关慢性皮肤溃疡给患者和社会带来巨大的经济负担，严重影响患者的生活质量。因此了解糖尿病合并慢性皮肤溃疡的细菌学分布对临床治疗有重要的指导意义。本研究观察了316例糖尿病慢性皮肤溃疡的分泌物培养细菌学分布，对临床用药可提供指导。 1 资料与方法 1.1 一般资料 2013年6月至2014年12月于威海市立医院就诊并住院治疗的糖尿病合并慢性皮肤溃疡患者316人，其中男性178人，女性138人，年龄22-78岁，平均30-58岁，糖尿病病程5.9±10.3年。慢性皮肤溃疡感染未合并糖尿病的患者255人，其中男性91人，女性164人，平均年龄25-60岁。排除高血压、冠心病、慢性支气管炎、恶性肿瘤、自身免疫性疾病及血液系统疾病的患者。 1.2 标本采集在使用咽拭子取皮肤感染部位的分泌物进行细菌培养，标本收集后立即送检。 1.3 诊断标准 316名均为2型糖尿病，符合1999年WHO的诊断标准，菌落计数革兰氏阳性球菌≥10４CFU/ml，革兰氏阴性杆菌 ≥105CFU/ml有诊断意义。 1.4 检验方法对培养获得的纯培养的可疑菌落进行分离鉴定，按照《全国临床检验操作规程》规定的方法进行，接种血琼脂平板做细菌计数。培养基由威海医学高分子有限公司提供，细菌鉴定及药敏测试板由法国生物梅里埃公司VITEX-32提供。 1.5 质控菌株大肠埃希氏菌ATCC25922，金黄色葡萄球菌 ATCC25923，铜绿假单胞菌 ATCC27853。 1.6 统计学处理采用SPSS11.5统计软件包进行分析，构成比或率的比较采用卡方检验，P<0.05认为差别有统计学意义。 2 结果 2.1 病原菌构成统计两组最常见的前十位致病菌，其他少见菌因例数过少未做统计。皮肤溃疡感染组最常见的致病菌前三位分别为大肠埃希氏菌，肺炎克雷伯菌，金黄色葡萄球菌，皮肤溃疡感染合并糖尿病组最常见的致病菌前三位分别为大肠埃希氏菌，肺炎克雷伯菌，表皮葡萄球菌。第三位常见致病菌的构成有统计学差异（P<0.05）。 2.2 大肠埃希氏菌敏感的抗生素 皮肤溃疡感染组致病菌大肠埃希氏菌最敏感的抗生素前三位分别为左氧氟沙星，头孢哌酮舒巴坦，环丙沙星，皮肤溃疡感染合并糖尿病组中大肠埃希氏菌最敏感的抗生素前三位分别为左氧氟沙星、亚胺培南、头孢哌酮舒巴坦舒巴坦钠，两组之间差别无统计学差异（P>0.05）。 3讨论 皮肤溃疡感染的发生取决于细菌的致病力和机体的防御能力两个方面。在糖尿病患者中的发病率为8%-19%[1]，是常人的2-3倍，因此及时治疗糖尿病患者合并慢性皮肤溃疡感染显得十分重要。尽管抗菌药物发展很快，但皮肤溃疡感染的发病率却无明显下降，因此了解糖尿病合并慢性皮肤溃疡感染的临床特点和细菌学特征对临床有较大的指导意义。 糖尿病皮肤慢性难愈性溃疡是糖尿病最为棘手又严重的并发症之一，一直是创面治疗的难题。在糖尿病皮肤组织中存在着局部糖含量增高及糖基化终末产物（AGE）蓄积，以及以胶原合成减少和组织修复细胞增殖障碍为主要表现的病理生理改变，并由此造成了糖尿病皮肤菲薄的组织学或解剖学特征。这一在未遭遇外源性损伤的情况下即已经存在组织学和细胞功能学的异常改变，被称之为糖尿病皮肤的“隐性损害”现象[2]，因此与非糖尿病患者相比，其外伤等刺激下皮肤的易损性明显增加，且容易发生自发性溃疡以及创面形成后难以愈合。Leese G等的研究认为，标准常规治疗4周后皮肤溃疡的面积变化是反映糖尿病相关性足部溃疡能否最终痊愈的预测因素之一[3]。本研究结果提示引起皮肤溃疡感染的病原菌主要是条件致病菌，以革兰氏阴性杆菌如大肠埃希氏菌为主，与报道相一致。糖尿病合并皮肤溃疡感染者与单纯皮肤溃疡感染患者的致病菌分布有差异，这一点可以对临床医师用药提供指导。 有效预防和治疗糖尿病患者的慢性皮肤溃疡感染，首先应加强全身支持疗法，改善营养，提高自身免疫功能，积极控制血糖等。其次，抗生素的使用应规范，足量，足疗程，必要时根据细菌学培养的结果更改品种。
糖尿病足创面修复治疗专家共识 糖尿病足是糖尿病的严重并发症之一，给患者带来极大的痛苦及沉重的经济负担，其常见临床表现为慢性溃疡，导致最严重的结局是截肢（趾）甚至死亡。据统计糖尿病患者一生中发生足部溃疡的风险达25％，其中有14％~24％的足溃疡患者需要截肢[1]。在许多国家糖尿病足是截肢的首位原因[2]，全球每20秒就有一个人因糖尿病足截肢。 国际糖尿病足工作组对糖尿病足的定义是：糖尿病患者由于合并神经病变及各种不同程度的下肢血管病变而导致的下肢感染、溃疡形成和（或）深部组织的破坏[3]。糖尿病足大致分三种类型：神经型、缺血型、混合型。我国糖尿病足以混合型为主，其次为缺血型，而单纯神经型少见[4]。对糖尿病足溃疡规范的评估和清创有利于促进创面愈合，降低截肢率。 一、糖尿病足评估 （一）糖尿病足的溃疡分级 目前，国内外对糖尿病足分级分期采用的方法主要有Wagner评级和Texas分级分期。
1．Wagner评级 是Meggitt等在1976年建立，经Wagner改良后在1981年正式应用于临床。Wagner分级越高，截肢的可能性越大，同时治愈率与好转率越低[5,6]。是目前针对糖尿病足病情发展评价应用最广泛的评级系统。 2．Texas分级 是由美国Texas San Antonio大学lavery等[7]提出的，此分级包括了对创面深度、感染和缺血程度的评估。 （二）糖尿病足感染分级 2016年国际糖尿病足工作组对糖尿病足创面感染的严重程度做了分类。 二、糖尿病足创面处理 糖尿病足溃疡愈合过程属于病理性愈合，易形成慢性难愈性创面，创面难以出现正常生理性愈合的阶联反应。因此，要重视全身因素治疗，如控制血糖、血压、血脂，抗感染，改善微循环外，还必须重视对慢性创面本身的规范处理，只有全身与局部的综合协调治疗才能促使慢性难愈性创面愈合。
2型糖尿病大鼠模型的建立及其验证论著 燕娟1 郭巍伟1 梁执群1 李志国1 郭永昌2 (山西医科大学1人文社会科学学院;2实验动物中心 山西 太原 030001) 【摘要】 目的 制备一种发病过程类似人类2型糖尿病的动物模型。方法 雄性S D成年大鼠高糖高脂饲料喂养 1个月,诱发出胰岛素抵抗,给予小剂量链脲佐菌素(STZ)25mg/kg,腹腔注射,建立2型糖尿病大鼠模型。结果 试验 组大鼠血糖升高,对胰岛素敏感性下降,从生化指标和形态学方面证实造模成功。结论 本实验2型糖尿病大鼠模型 造模成功,它具有中度高血糖、胰岛素抵抗、成功率高等特点,是人类2型糖尿病及其药物研究的理想动物模型。 【关键词】 糖尿病 动物模型 大鼠 Type2d i a betes ra t m odel and its ver i f i ca ti on.YAN Juan,G UO W ei-w ei,L I ANG Zhi-qun,et al.ShanxiM edical U niversity,College O f Hu2 m anities A nd Social Science,Taiyuan Shanxi030001,China. 【Abstract】 O bjecti ve Preparati on of a disease si m ilar t o human type2diabetes ani m al model.M ethods Male S D adult rats fed high- fat high-sugar a month,induced insulin resistance,given l ow-dose strep t ozot ocin(STZ,25mg/kg,intraperit oneal injecti on),set up in type2 diabetic rat model.Results Test gr oup of rats increased bl ood glucose,insulin sensitivity decreased,fr om the bi oche m ical indices and mor phol ogy confir med the successful model.Conclusi on The experi m ental rat model of type2diabetes model successfully,it has moderately high bl ood sug2 ar,insulin resistance,the success rate is high,are of human type2diabetes and its drug research ideal ani m al model. 【Key words】 D iabetes;Ani m al model;Rat 糖尿病与心脑血管疾病、肿瘤是当前威胁人类健康的三大非传染性疾病,已成为全球性的卫生问题。随着我国人民生活水平的提高、人口老化、生活方式的改变以及诊断技术的进步,糖尿病的发病率呈现迅速上升趋势,2型糖尿病是糖尿病人群的主体,占糖尿病发病率的90%以上。因此,研制2型糖尿病动物模型具有重要的医学研究意义。在国外2型糖尿病的研究中,采用的动物模型多为遗传相关模型,如ob/ob小鼠、db/db小鼠及肥胖型Zucker大鼠等,其特点是遗传因素在发病过程中占主导作用,不完全与临床相符,且十分昂贵,不利于国内研究的开展[1]。本研究结合前人经验,应用高糖高脂饲料结合小剂量链脲佐菌素(STZ)建立了2型糖尿病大鼠模型,较符合人类普通型2型糖尿病发病机制,有利于进行2型糖尿病及其并发症的相关研究[2,3]。1 材料和方法 1.1 动物和材料 清洁级雄性S D大鼠40只,体质量(180±20)g,由山西医科大学实验动物中心提供,每笼4～5只,饲以普通饲料,自由摄食摄水,除实验应激外无其他不良刺激。STZ由美国Sig m a公司生产。胰岛素、胰高血糖素放射免疫分析药盒为解放军总医院科技开发中心放免所产品,购自北京普尔伟业生物科技有限公司。 1.2 2型糖尿病大鼠模型的建立 在大鼠适应期后,随机取10只作为正常对照组,其余30只给予高糖高脂饲料(在标准全价混合饲料的基础上添加蔗糖、炼猪油和蛋黄,热能含量21.6kJ/kg)。高糖高脂饲料组喂养4周后,腹腔注射STZ(临用前溶解在pH=4.0的0.1mmol/L柠檬酸缓冲液内,25mg/kg,1次/d,连续2d),正常对照组普通饲料喂养4周,再注射等量柠檬酸缓冲液,1次/d,连续2d。注射药物两天后间隔1d血糖测试仪测查大鼠空腹血糖(测试前禁食12h)即注射后血糖,以血糖含量16.7mmol/L为2型糖尿病大鼠模型判定标准,随机选取10只糖尿病大鼠为模型组。继续普通饲料喂养4周。 1.3 指标测定 1.3.1 一般状况观察 包括大鼠的精神状态、体质量、饮水量、食量、大小便。 1.3.2 血糖测定 腹腔注射STZ或柠檬酸缓冲液2 d后及实验结束时分别进行空腹状态下剪尾取血,测其血糖值,为注射后血糖。4周后处死大鼠测其血糖为终血糖。 1.3.3 血清胰岛素、胰高血糖素水平测定 实验结束时禁食12h,20%的乌拉坦腹腔麻醉大鼠,腹主动脉取血,分离血清后放射免疫分析法测定。 1.3.4 胰岛素敏感指数(I SI)的计算 参照李光伟等[4,5]的方法,I SI=ln[1/F BG×F I N S],F BG为空腹血糖,F I N S为空腹胰岛素。 1.4 统计学处理 采用SPSS11.5统计软件对实验数据进行处理,数据以均数±标准差( x±s)的形式表示,用t检验分析。 2 结果 2.1 两组大鼠一般状况 对照组大鼠生长良好,体质量持续增加,无其他症状。模型组大鼠在注射STZ后体质量呈缓慢增长、逐步较前下降、消瘦走势,观察发现有 ? 5 ? 临床和实验医学杂志 2009年4月 第8卷 第4期
7 摘要：目的探讨链脲佐菌素（STZ ）建成可靠、稳定的1型大鼠糖尿病模型情况。方法选取 SDF 级雄性Wistar 大鼠70只，分成3个实验组，各20只和对照组10只，实验组大鼠一次性腹腔注射STZ 30、65、100mg /kg ，对照组10只大鼠腹腔注射枸橼酸缓冲液，用拜安易血糖仪检测血糖，7d 后血糖＞16．65mmol /L 判定为1型糖尿病动物模型。观察大鼠的血糖、体质量、饮水量、胰岛素和C 肽等指标。结果大鼠注射STZ 65mg /kg 7d 后，大部分血糖值达到成模标准，并出现糖尿病表现，持续观察7周，有18只大鼠成模，未见糖尿病转复，糖尿病症状明显。结论腹腔一次性注射STZ 65mg /kg 剂量可成功制备1型糖尿病大鼠模型。 关键词：链尿佐菌素；1型糖尿病模型；大鼠 Establishment and Observation of Type I Diabetic Rat Models ZHANG Ju-biao 1， SU Xiu-lan 2，OUY-ANG Xiao-hui 1 ．（1．Department of Tumor Surger ， Inner Mongolia Autonomous Region People's Hospital ，Hohhot 010010，China ；2．Central Lab of Inner Mongolia Medical University ，Hohhot 010010，China ） Abstract ：Objective To establish type I diabetic rat models by intraperitoneal injection of streptozoto-cin and observe the stability of diabetic changes in rats．Methods 70male Wistar rats were divided into 3experiment groups of 20rats each and 1control group of 10rats．The experiment groups were intraperitoneally injected by 30mg /kg ，65mg /kg ，and 100mg /kg STZ respectively ，while the control group was injected cit-rate buffer．Bayer blood glucose meter was adopted to test the blood glucose ，setting ＞16．65mmol /L after 7d as the type 1diabetic animal model．The fasting blood glucose level ，body weight ，water intake ，insulin and C-peptide of the rats at different time points were observed /measured．Results In the group of injection by 65mg /kg STZ ，after 7days most rats reached the model blood glucose standard and had diabetic manifes-tation ，after continuous observation of 7weeks ，18rats were qualified as the model with obvious symptoms and without conversion．Conclusion With the dose of 65mg /kg of STZ through one intraperitoneal injection ，type 1diabetic rat models can successfully established． Key words ：Streptozotocin ；Type 1diabetic models ；Rat 糖尿病已成为严重威胁人类身体健康和生命的 疾病。它是一种以持续性高血糖为特征的内分泌障碍疾病，可导致全身性代谢紊乱并继发眼、肾、神经和心血管等器官的慢性进行性病变，最终引起功能损伤及衰竭。1型糖尿病及其并发症的病因、发病机制尚未完全阐明，预防和治疗仍不完善，干细胞（stem cells ）是体内存在的一类特殊细胞，有自我更新和不断增生的能力，又具有多向分化的潜能，只要掌握了胰腺干细胞的特异标志、转化调控机制、培养及分离技术，就可以体外操纵干细胞，进行大量扩增和定向诱导分化，最后将得到能分泌胰岛素的胰岛 样细胞［1-2］，用于治疗1型糖尿病。因此，建立较理 想的动物模型研究该病的发病机制和治疗具有重要意义。目前，国内外普遍使用STZ 制备糖尿病大鼠 动物模型。该项实验根据吴清洪报道的方法［3］ ，采用简单的腹腔一次注射的方法制备稳定并且可靠的动物模型。1材料与方法 1．1实验动物的选择和喂养SDF 级成熟Wistar 雄性大鼠70只（体质量220 280g ），购自内蒙古大学实验动物中心，饲养室内氨浓 度＜20g /L ， 相对湿度40% 70%，室温18 25℃，保证良好的通风，避免增加造模后大鼠的感染概率，普通饲料喂养，饮水自由。 1．2主要仪器和试剂拜安易血糖检测仪及试纸（美国Bayer 公司）；STZ （美国Sigma 公司）；胰岛素、C 肽放射免疫分析药盒（均购自内蒙古泽生耗材）。 1．3主要实验试剂的配制STZ 液称取STZ 粉剂0．2g ，溶于pH 4．5，浓度为0．1mmol/L 的枸橼酸三钠-枸橼酸缓冲液20mL 中，制成1%溶 液，经0．22μm 滤器过滤除菌，要求5min 内配制完成，配好后，10min 内用完，STZ 和枸橼酸缓冲溶液低温保存，新鲜配制。 1．4实验分组和大鼠糖尿病模型的制备采取国内外普遍使用的STZ 制备糖尿病大鼠模型，根据徐 华等［4］ 报道， 雄性大鼠易于成模，且成模后血糖稳定性好，故选取成熟雄性大鼠用于实验。将所有大鼠（70只）使用代谢笼单只喂养，适应性喂养1周， 1周内注意观察大鼠的饮食情况、体质量等健康状况， 1周后，选取空腹血糖介于2．92 6．92mmol /L 的大鼠为实验对象。将空腹血糖介于2．92 6．92mmol /L 的大鼠随机分为4组，实验组（60只）分别接受STZ 液一次性腹腔注射，剂量为30、65、100mg /kg ，对照组（10只）注射枸橼酸三钠-枸橼酸缓冲液。实验前 大鼠禁食、水12h 。分别于注射后3、 7、14、28d 采用剪尾法采集血样，用拜安易血糖仪检测空腹血糖，7d 后空腹血糖＞16．65mmol /L ，出现多饮、多食、多尿 · 533·医学综述2013年1月第19卷第2期Medical Recapitulate ， Jan．2013，Vol．19，No．2