酒精浓醪发酵过程检验方法
1.围：本标准适用于对酒精生产全过程进行监控，目的确保最终产品的质量
2.要求：
2.1给样工序
粉碎粒度≥85%(过20目筛)二期
粉碎粒度≥80%(过20目筛)一期
2.2液化工序
2.2.1糖浆PH值:回配5.3~5.8, 不回配6.0以上
2.2.2糊化率≥80~88%
2.3糖化工序
2.3.1糖化醪糖度
一期17~19oBX (清液不回配)18~22oBX (清液回配)
二期21~24oBX(清液不回配)22~26oBX(清液回配)
2.3.2糖化率:20~50%(二期) 30~40%(一期)
2.3.3PH值:4.0~4.5
2.4酒母工序
2.4.1外观糖:一期≤20oBX, 二期12~20oBX
2.4.2PH值
3.4~3.8
2.4.3酵母液: 一期≥1.5亿/ml 二期≥2.0亿/ml
2.4.4出芽率: 8~20%(一期) ,≥15%(二期)
2.4.5死亡率: ≤10%(一期) ,≤12%(二期)
2.5发酵工序
2.5.1发酵1#罐(二期)酒份9.0%以上, 挥发酸:0.2以下,
酵母数1.0亿/ml以上
2.5.2发酵2#缺罐(二期) 酒份9.0%以上, 挥发酸:0.25以下
2.5.3发酵成熟醪指标:外观糖≤1.0oBX
酒份:一期10.0%(V/V)以上,二期≥11.5%(V/V)
挥发酸:0.3以下(二期),0.25以下(一期)
残还原糖: ≤0.3g/100ml
残总糖:一期≤1.5 g/100ml二期≤2.5g/100ml 2.6蒸馏工序
2.6.1粗馏塔:废液含酒≤0.05(V/V)
2.6.2精塔:废水含酒≤0.05%(V/V)
2.6.3净化塔: 废水含酒≤0.05%(V/V)
3.测定方法
3.1糖浆的检验
3.1.1糖浆pH值测定
3.1.1.1测定仪器:PHS-25型酸度计
3.1.1.2先用PH值为
4.00和6.86缓冲校正液校正酸度计然后参照说明书测定即可.
3.2 蒸煮糊液的检验
3.2.1取样方法:每四小时从液化罐取样点取样.
3.2.2糊化率的测定
3.2. 2.1检验仪器: 20目标准筛, 托盘天平
3.2.2.2测定方法: 取液化液100g放入20目标准筛中用80度热水冲洗过筛筛上颗粒应透明, 用天平称取筛上颗粒,质量设为A1, 则糊化率为(100—A1)/100*100%
3.3液化醪检验
3.3.1还原糖:测定同糖化还原糖
3.3.2干物质: 用阿贝折光仪读数
3.3.3DE值:还原糖与干物质的比值.
3.4糖化醪的检验
3.4.1取样方法:取糖化后冷却完毕的糖化醪在经双层纱布过滤后作为样品.
3.4.2糖度的测定
取糖化醪滤液于量筒中,用糖度计测定,同时测定湿度,查糖度温度更正表校正为20度时的糖度.
3.4.3酸度的测定
酸度的定义: 以10ml试样mol/l的氢氧化钠溶液1ml为一个酸度单位.
吸取滤液1ml于50~150ml的氢氧化钠溶液滴定至微红色在30秒不退色为终点,滴定ml数乘以10为酸度.
3.4.4还原糖的测定
3.4.4.1裴林氏液甲液硫酸铜溶液, 乙液(氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液)
组成.测定时, 甲乙液等体积混合, 硫酸铜与氢氧化钠反应生成氢氧化铜沉淀,以生成的氢氧化铜又与酒石酸钾钠反应,生成酒酸钾钠铜络合物,使氢氧化铜溶解其络合物中,二价铜是氧化剂,能使还原糖中的羰基氧化成糖酸,而二价铜被还原生成一价氧化亚铜红色沉淀,该反应用次甲基蓝指示剂来指示终点.因为次甲基蓝氧化能力较二价铜弱,所以二价铜全部还原糖还原后,过量一滴还原糖即使次甲基蓝还原,溶液的蓝色消失,以示终点
3.4.4.2仪器:250ml三角瓶, 5ml与10ml大肚吸管,25ml酸式滴定管, 50ml量筒,100ml容量瓶
3.4.4.3试剂
a.0.25%葡萄糖溶液
精称在105摄氏度烘干的无水葡萄糖(二级品)以上2.500g以蒸馏水溶解,并定容至1000ml.
b.裴林氏溶液
①制备
甲液:精称结晶硫酸铜(AR)69.278克,以蒸馏水溶解煮沸,冷却定容至1000ml放置一周后, 用G2,G3砂芯漏斗过滤后标定.
乙液:称取酒石酸钾钠346克及氢氧化100克,分别用搅拌后混合一起定容1000豪升.
②试验
第一步:预备试验:
取裴林式甲乙液各5ML放入250的三角烧瓶中加水20ml,均匀后置于
电炉上加热在2-3分钟沸腾,待沸腾后用滴定管逐滴滴入0.25%葡萄糖标准溶液(注意保持沸腾).待试液兰色消失时滴入2滴次甲基蓝蓝指示剂，试液复呈兰色时为终点，以上滴定过程应在4分钟完成。第二步：正式试验
取裴林氏甲乙液各5ml, 放入250ml三角瓶中加水20ml混匀后，从滴定管中预先加入少于预备试验0.5~1.0ml的25%葡萄糖溶液, 置于石棉网中用电炉加热至沸, 并保持沸腾 2 分钟后, 加入0.5%次甲基蓝指示剂2滴,再以每2~3秒为一滴的速度滴定至蓝色消失,开始呈现鲜红色为终点.(沸腾2 分钟滴入量应在0.5~1.0ml间,否则应增减预加葡萄糖液的量)
3.4.4.4测定方法
称取糖化醪10克,注入250ml容量瓶中,加水定容后混合均匀用脱脂棉过滤, 取滤液5ml按裴林氏法定糖
还原糖(%)=(A-B)*0.25%*250/(5*10)=1.25(A-B)
式中:A-空白滴定消耗0.25%葡萄糖毫升数
B-试样滴定消耗0.25葡萄糖毫升数
3.4.4.5糖化率计算
糖化率%=(还原糖/外观糖)*100%
3.4.4.6注意事项
裴林氏法测糖的实质为二价铜被糖中的醛基(或酮)还原,其反应是在强碱性溶液中,沸腾情况下进行的,故反应产物及为复杂,所以必须注意以下几点:
1.裴林甲乙液平时应分别贮存,用时才能混合,否则酒石酸钾钠铜络
合物长期在碱性条件下会发生分解.
2.裴林溶液吸量要准确,特别甲液,因起反应的是二价铜如吸量不准
会引起极大的误差.
3.反应时温度应一致, 常采用800W电炉子,煮沸时间需一致,否则蒸
发量改变,使反应液浓度发生变化,而引起误差.
4.滴定速度应一致,滴定速度过快消耗糖量增加,滴定速度过慢消耗
糖量减少.
5.次甲基蓝是氧化性物质,过早加入,加入量过多也会引起误差.
6.反应产物是氧化亚铜椎不稳定,是被空气中的氧氧化而增加耗糖量,
故滴定过程中不能随意摇动三角瓶,更不能从电炉上取下后再进行滴定.
7.为了防止滴定过程中出现泡沫影响滴定终点必须加玻璃珠.
8.水解残糖总糖和过滤总糖的水浴必须保证沸腾反之结果偏低.
3.5酒母醪的检验
3.5.1取样方法:在成熟酒母醪使用前,用75%酒精或漂白粉液将采样器具浸洗一次,开支搅拌和一分钟取可取样.洒母糖化醪在接种前也按上述方法取样用布过滤,备用.
3.5.2微生物检查
3.5.2.1仪器与试剂
生物显微镜1600倍, 玻璃棒
3.6发酵醪的检验
3.6.1取样方法:在发酵蒸馏前2小时,各罐开搅拌10分钟后,由取样点取样(前两杯倒掉)第三杯留样品.
3.6.2酒精量的测定
3.6.2.1仪器:
500Ml蒸馏烧瓶, 蛇形冷凝器, 容量瓶100ml, 漏斗, 电炉, 酒精计0~12%, 温度计0~50度
3.6.2.2分析方法
准确量取发酵醪100ml注入500ml蒸馏烧瓶中,加水100ml将烧瓶和冷凝器连接好(勿漏气)在电炉上加热馏,馏出液收集100ml容量瓶中,待馏出液达到刻度时取下摇匀,然后倒入100ml量筒中以水银温度计同时测其温度和酒精度,根据测出的酒精度和温度换算表换算为20度时的酒精度.
3.6.3挥发酸
1.1仪器与试剂
2.100ml三角瓶, 10ml大肚吸管, 0.1M氢氧化钠, 10ml滴定管, 1.0%
酚酞指示剂
1.2测定方法
准确量取测定酒精度的馏出液50ml, 注入三角瓶中, 加酚酞指示剂2滴, 以0.1M氢氧化钠溶液滴定, 滴定结果除以5.
3.6.4总酸度(取发酵过滤液, 方法同糖化工序酸度测定方法)
3.6.5外观糖测定(取发酵过滤液, 方法同糖化工序外观糖测定方法)
3.6.6还原糖测定
3.6.6.1仪器与试剂(同糖化工序还原糖测定)
3.6.6.2测定方法
量取发酵液50ml定容到250ml,用脱脂棉过滤,取滤液10ml, 加入盛有裴林氏甲乙液各5ml和水20ml的三角瓶中,按一般定糖法测糖,再用0.25%葡萄糖按同样条件做完空白试验
3.6.6.3结果
还原糖(g/ml)=(A-B*2.5*250/1000*10*50)*100=0.125*(A-B)
式中:A—滴入10ml裴林氏液所用葡萄糖液体积数
B---滴定加10ml试液后耗用的葡萄糖液体积数
50---吸取样品体积数
3.6.7总糖的测定
3.6.7.1试剂制备
20%盐酸溶液: 量取比重1.19浓盐酸454ml, 置于1000ml量筒中用稀释至刻度.
20%氢氧化钠: 取20克氢氧化钠在不断搅拌下定量至100ml
3.6.7.2测定方法
量取发酵液50ml于250ml的三角瓶中,加水40ml, 加20%盐酸10ml, 塞口具有1.0米长玻璃管的橡胶塞, 在沸水浴中转化60分钟, 取出冷却以20%氢氧化钠中和至微酸性,转移250ml容量瓶中加水至刻度, 摇匀后,用脱脂棉过滤, 吸取滤液10ml加入盛有裴林氏甲,乙液各5和水20ml的三角瓶中,以0.25%的葡萄糖滴定,然后以0.25%葡萄
糖液滴定10ml裴氏液做空白试验.
3.6.7.3计算
总糖(g/100ml)=((A-B)*2.5*250/1000*10*50)*100=0.125*(A-B)
式中:A—空白试验用葡萄糖液体积数
B-滴定加入10ml试液后耗用葡萄糖液ml数.
3.6.8过滤总糖的测定
取测还原糖的发酵醪稀释过滤液100ml加20%盐酸10ml在沸水浴中转化60分钟,冷却后用20%氢氧化钠溶液中和至微酸性,定容至250ml, 用脱脂棉过滤, 取滤液10ml按通用定糖法定糖
过滤总糖(g/100ml)=( A-B)*2.5*250.250/1000*10*100*50=0.312 *(A-B) 3.6.9糊精及残淀粉的计算
残糊精=(过滤总糖-还原糖)*0.9克糊精/100ml
残淀粉=(残总糖-过滤总糖)*0.9克淀粉/100ml
3.7粗塔糟液与精塔跑水酒的快速测定
3.7.1试剂
1%重铬酸钾标准液, 精确称取在120度下烘至恒重的基准重铬酸钾1.0000g,用蒸馏水溶解成100ml
浓硫酸分析纯
浓度0.1%(V)酒精标准液, 精确吸取10ml无水乙醇用蒸馏水稀至1000ml摇匀, 再从中取10ml用水稀释成100ml
3.7.2标准色阶制备
见下表
3.7.3试样测定
用移液管吸取精塔排水或塔废糟液(糟液需用快速滤纸或脱脂棉过滤)1ml放入下图100ml三角瓶中,再加及10ml蒸馏水,另取1支25ml 比色管2加入1ml1%的重铬酸钾溶液, 2ml浓硫酸后摇匀.然后用玻璃导管3与三角瓶连接起来,入在可调电炉子上加热蒸馏, 待蒸出2/3时断开导管与三角瓶的连接, 用洗瓶冲洗导管外.
3.8玉米面
粒度:称100g样品, 用20目筛子筛后取筛上物的重量粒度%=100-筛上物重/100
酒精计法检测验证报告报告编号：XZ/YZ20170003 编写： 审核： 时间：
酒精计法检测验证报告 1. 目的：本方案是酒精计法检测酒精考察，证明酒精棉签的挤出液里的酒精可以用精密酒 精计进行检测。 2. 原理：用精密酒精计读取酒精体积分数示值，按GB/T10345-2007白酒分析法附录B进 行温度校正，求得在20℃时乙醇含量的体积分数，即为酒精度。 3.实验依据：《消毒技术规范》2002版2.2.1.2.11乙醇含量的测定第二法比重法 GB/T10345-2007白酒分析法6.2酒精计法 4试验条件： 4.1室温：约20℃ 4.2检测方法：在洁净、干燥的100ml量筒中加入酒精样品溶液，静置数分钟后，待溶液中气泡消失后，放入洁净、擦干的酒精计，不应触量筒壁，同时插入温度计，平衡5min，水平观测，读取液面处与酒精计刻度弯月面相切处的刻度示值，同时记录温度。根据测得的酒精计示值和温度，查附录B换算成20℃时样品的酒精度。 4.3 样品：酒精棉签，批号：20171101、20171110、20171120，规格：30支/瓶 4.4检测器具： 精密酒精计：分度值为0.1%vol ，70-80%，两支量筒：100ml ，3个 温度计：2支 4.5检测人员：陶荣玲，复检人员：舒秀珍 5方法验证精密度 5.1配制方法：取酒精棉签，批号：20171101、20171110、20171120，规格：30支/瓶 各20瓶，分别取其挤出液100ml用酒精计检测，两个人检测结果绝对差值，不应超过平均值的0.5%。 5.2数据记录及处理见下表
表1 酒精计检测数据 表2 酒精计检测数据 表3 酒精计检测数据对比
0711 乙醇量测定法 —、气相色谱法 本法系采用气相色谱法（通则0521) 测定各种含乙醇制剂中在20℃时乙醇 (C 2H 5 OH )的含量（％) (ml /ml ) 。除另有规定外，按下列方法测定。 第一法（毛细管柱法） 色谱条件与系统适用性试验采用（6% )氰丙基苯基- (94%)二甲基聚硅氧烷 为固定液的毛细管柱；起始温度为40℃，维持2分钟，以每分钟3℃的速率升温至65℃，再以每分钟25℃的速率升温至200℃，维持10分钟；进样口温度200℃；检测器(FID )温度220℃；采用顶空分流进样，分流比为1：1；顶空瓶平衡温度为85℃，平衡时间为20分钟。理论板数按乙醇峰计算应不低于10000，乙醇峰与正丙醇峰的分离度应大于2 .0。 校正因子测定精密量取恒温至20℃的无水乙醇5ml，平行两份；置100ml 量瓶中，精密加入恒温至20的正丙醇（内标物质）5ml，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液lml ，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀（必要时可进一步稀释），作为对照品溶液。精密量取3ml，置10ml顶空进样瓶中，密封，顶空进样，每份对照品溶液进样3次，测定峰面积，计算平均校正因子，所得校正因子的相对标准偏差不得大于2.0% 。 测定法精密量取恒温至20的供试品适量（相当于乙醇约5 ml ) ，置 100ml 量瓶中，精密加入恒温至20 ℃的正丙醇5 ml，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液lml ，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀(必要时可进一步稀释），作为供试品溶液。精密量取3 ml ，置10ml顶空进样瓶中，密封，顶空进样，测定峰面积，按内标法以峰面积计算，即得。 【附注】毛细管柱建议选择大口径、厚液膜色谱柱，规格为30m×0.53mm×3.00um。 第二法（填充柱法） 色谱条件与系统适用性试验用直径为0.18~0.25mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为载体，柱温为120~150℃。理论板数按正丙醇峰计算应不低700，乙醇峰与正丙醇峰的分离度应大于2.0。 校正因子测定精密量取恒温至20℃的无水乙醇4ml、5ml、6 ml，分别置
玉米酒精废水处理 水处理技术:一、玉米酒精的特性 每生产1吨酒精需3吨玉米，排出糟液约为12立方米。淀粉质原料(玉米)酒精发酵产生的废糟液COD,BOD5值相对较低,COD大约3～5万mg/L,BOD5大约2～3万mg/L。糟液污染重要指标之一是总固体，它包括溶解性固体、悬浮固体和胶体，它是由有机物、无机物和生物菌体所组成。有机物的成分主要是碳水化合物、其次是含氮化合物、生物菌体和未完全分离出去的产品如丁醇，乙醇、丙酮等低沸点易挥发物；无机物主要来自原水（自来水）中各种离子和原料中的杂质、灰尘，如Ca2+、Mg2+、SiO2、HCO3-、CO32-、SO42-、Cl-、PO42-等。在总固体中悬浮固体（包括超胶体和部分胶体）约占60%~80%，溶解性固体和部分胶体（即粒径小于4.5um）占20%~40%。糟液具有很强的腐蚀性和较高的粘度。 二、玉米酒精糟液污染控制技术 玉米酒精糟中含有大量的蛋白质、脂肪等具有丰富的有机成分，是极好的畜、禽饲料，目前采用的主要污染控制技术有：玉米酒精糟制取全干燥蛋白饲料（DDGS）；玉米酒精糟固掖分离、滤渣直接做饲料或生产DDG蛋白饲料、滤液稀释排放；玉米酒精固掖分离、滤渣直接做饲料或DDG蛋白饲料、滤液30%~50%回用于生产：玉米酒精糟固液分离、滤渣直接做饲料或生产DDG蛋白饲料、滤液厌氧发酵生产沼气等四种。酒糟中存在的对酵母酒精发酵有抑制作用的物质,大部分被湿渣带走,留下的只是极少部分,通过调整回流比完全有可能在回流系统中将其浓度控制在酵母能够忍受的范围之内。所以现在一般酒精厂所采用的酒精废糟液的综合处理工艺中都包含有将
部分或者全部返回生产系统作为拌料用水或液化、糖化添加水的回用路线。而且,若回流比恰当,酒精回流技术的应用不仅不会影响酵母的酒精发酵,反而有可能会提高酒精产量。 （一）、膜过滤法处理酒精废糟液 膜处理技术由于操作简便、分离效果理想而得以广泛应用，同时也是污水深度处理的重要手段之一。目前，国内外已普遍应用与膜技术处理纺织、造纸废水、胶粘剂生产废水、含油废水以及味精生产废水等，其中不少单位也正尝试把膜技术应用于酒精工业废水的处理。 酒精废糟液先经离心分离去除粗渣，再经膜过滤，除去大部分对酵母生长和酒精发酵有抑制作用的大分子有机物，最后滤液全部回流。 应用膜过滤技术处理玉米酒精浓醪发酵酒精废糟液的工艺流程示意图如下： 玉米粉—→拌料—→低温蒸煮—→糖化—→发酵 ↑↓ 滤液←—膜过滤←—酒糟液←—蒸馏 ↓↓ 滤渣酒精 玉米酒精浓醪发酵废糟液“全回流”工艺流程示意图 应用膜过滤技术能去除酒精槽液中主要的抑制副产物，大大降低了副产物对酵母生产及酒精发酵的抑制作用。在工艺上实现“全回流”是切实可行的。但在膜过滤过程中要注意膜的污染问题，以确保膜通量的稳定，并延长膜的使用寿命。
酵母发酵酒精的研究进展 （生命科学与技术学院微生物专业） 前言 人类利用酵母菌的历史已有几千年了。值得提出来的是，早在我国宋代的酿酒著作中，中国人已经明确记载了从发酵旺盛的酿酒缸内液体表面撇取酵母菌（当然不是纯粹的酵母菌）的方法，并把它们称为“酵”，风干以后制成的“干酵”可以长期保存。这种制造干酵母的原始方法说明，早在800年前，中国人已经意识到酒精发酵是由“酵”，即某种能生长的物质引起的。这种推断直到19世纪巴斯德才证明是酵母菌。明代末年出版的词书中记载有“以酒母起面曰发酵”，“发酵，浮起者是也”等解释。这说明至少在那时，一引起细心观察自然现象和注意比较的学者，已经认识到发面和酿酒有某种相同的因素在起作用。当时在欧洲虽然已经发现了酵母菌，但在200年后才知道酵母菌的作用。今天我们把这类微生物称酵母菌，正是以此为根据的。 酵母菌能够把糖变成酒精，是因为它的细胞里有催化剂，这些存在于生物细胞的催化剂在科学上叫做酶。虽然现在知道所有的生物都是靠酶催化的化学反应来生活的，但最早发现的酶，就是酵母菌的酶。酵母菌中最早发现的酶，是把糖变成酒精的一群酶，当时自然数酒化酶。由于这种酶的作用，使糖分解成酒精和二氧化碳，这就是利用酵母菌酿酒和发面包的原理。使面团产生许多空隙的就是二氧化碳。酵母细胞大小为2.5-10μm×4.5-21μm, 在加盖的玉米琼脂上不产生假菌丝或有不典型的假菌丝, 营养细胞可直接变为子囊, 每囊有1-4个圆形光面的子囊孢子, 在麦芽汁25℃培养3d, 细胞为圆形、卵形、椭圆形和香肠形。其菌落在麦芽汁琼脂上为乳白色, 有光泽, 平坦, 边缘整齐。菌体维生素、蛋白质含量高, 既可食用又可提取细胞色素C、核酸、麦角固醇、谷胱甘肽、凝血质、辅酶A、三磷酸腺苷等。该菌种能发酵葡萄糖、麦芽糖、半乳糖及蔗糖, 但不能发酵乳糖和蜜二糖, 不同化硝酸盐。 酵母菌的繁殖方式既可进行无性繁殖，如芽殖，又可进行有性生殖；酵母菌既可进行有氧呼吸，又可进行无氧呼吸，是一种兼性厌氧呼吸的真核微生物。单细胞真核生物酿酒酵母基因组为12,068kb，比单细胞的原核生物和古细菌大一个数量级。酿酒酵母基因组共有5887个ORF，这比原核生物和古细菌要多很多。酿酒酵母的基因密度为1个基因/2kb，密度小于原核生物流感嗜血杆菌和尿殖道支原体等。酿酒酵母是最小的真核基因组，裂殖酵母其次，其密度是1/2.3kb，简单多细胞生物线虫的基因密度为1/30kb。第二、酿酒酵母只有4%的编码基因有内含子，而裂殖酵母则有40%编码基因有内含子。 1、酵母的生长条件 1.1 无机盐
玉米原料超高浓度酒精发酵 许宏贤，段钢 （杰能科（中国）生物工程有限公司亚太谷物加工酶应用中心，江苏无锡， 214028）摘 要 以全磨玉米为原料，研究了超高浓度条件下传统工艺与生料工艺的黏度变化。采用传统工艺，在超高 浓度条件下， 物料的糊化、液化会变得非常困难。而采用生料工艺，黏度始终维持在合理的水平。对高浓度传统工艺和生料工艺发酵的结果进行对比，证明生料工艺可以产出更多的酒精；对超高底物浓度（35%绝对干物）生料发酵时采用温度梯度控制，使用市售酒精干酵母，在98h 内发酵醪液酒精浓度可达20%以上。关键词 玉米，浓醪发酵，黏度，酵母，温度梯度控制，生料水解酶，酒精 第一作者：硕士，高级工程师（段钢博士为通讯作者）。收稿日期：2011－08－10，改回日期：2011－10－17 由于石油危机而造成的国家能源安全、农民收入 和环境等问题而使得生物酒精的生产日益受到重视，近几年发展较快，中国已成为世界上第三大生物酒精生产国。现在工业上的生物酒精绝大部分属第一代燃料乙醇，即用淀粉质原料来生产 ［1］ 。据酿酒协 会酒精分会的统计， 2004年我国酒精生产玉米原料占50.3%，经过近几年的发展，玉米现在已经占到65%［2］。适度发展玉米燃料乙醇有益于粮食供需平衡， 依然可以起到玉米供需平衡蓄水池的作用。同时玉米也是深加工链条最长、产品系列最丰富的粮食品种 ［3］ ，因此相对于其他淀粉质原料，玉米酒精发酵的 研究意义更大。 高浓度酒精发酵工艺具有高发酵率、高转化率、 低残糖和节约能源等特点，可大幅度增加产量，显著提高经济效益 ［3－4］ 。据哈尔滨中国酿酒有限公司的 生产实践表明，按年产6万t 酒精计算，实施浓醪发酵后年节约一次水12万t ，吨酒精节电62.5?，吨酒精节约煤160kg ，年节约资金675万元，减排废水15万t ［5］ 。因此，酒精浓醪发酵是发酵酒精工艺的重大 技术进步，已经成为酒精行业清洁生产重点推广的技术之一。 中国开展生料酿酒研究始于20世纪70年代。以节能、减排、高出酒率、高浓度发酵为特点的无蒸煮生料发酵工艺是燃料乙醇生产技术的未来发展方向［1］ 。近期的研究增多［6－12］，商业化过程进展也加快 ［10］ 。但相对而言，生料超高浓度酒精发酵的研究 并不多［11－12］ 。 若采取传统的蒸煮工艺进行超高浓度酒精发酵， 由于黏度问题，在配料浓度很高的情况下，会造成液 化非常不彻底，并且浓醪的换热和输送在工厂会变得异常困难，同时也影响发酵体系的传质，而使过 程效率降低 ［7－8］ ；即便不考虑黏度问题，在这种条件下往往需要特别的耐高糖度、耐高酒度的酵母 ［13－15］ 。生料工艺除了可以节约能量外，由于整个系统中 温度远远低于淀粉的糊化温度， 没有剧烈的反应，体系黏度比传统过程低得多 ［7－8］ ，因此可以大幅提高发酵浓度而不必过分担心黏度问题。同时由于生料过 程中， 葡萄糖是逐步缓慢释放的，因此可以进行浓醪发酵而减轻高初糖浓度和高渗透压对酵母的生长抑制。 相关研究表明，传统的浓醪发酵温度对酵母的生 长和发酵效率非常重要 ［16－18］ ，采用温度梯度培养方式进行的研究近期有所报道 ［12，19］ ，而针对玉米生料 浓醪发酵过程中温度影响的研究尚未见报道，对酵母在不同工艺中的数量和形态的研究也未见报道。本文以玉米为原料，对不同过程的黏度变化与酵母情况进行考察，同时研究不同温度控制方式对玉米超高浓度酒精发酵的影响。 1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 实验原料 全磨40目玉米粉，中粮肇东酒精厂试验室提供； 安琪牌酿酒高活性干酵母（耐高温型）。1.1.2主要酶制剂 颗粒淀粉水解酶（STARGEN 001），酶活力443GAU /g ；高温淀粉酶（SPEZYME ALPHA ），酶活力15170AAU /g ；糖化酶（GA-L-NEW ），酶活力100000wu /g ；酸性蛋白酶（FERMGEN ），酶活力
再谈酒精浓醪发酵 提高酒精发酵浓度是发酵工业技术革新的一个主要方面和简单有效的手段。多年以来酒精工业已经成功地将发酵浓度从5%提高到10%，再到目前的12%~13%。提高发酵浓度可以在基本不改动现有设备的情况下提高设备利用率，减少人工和能耗，减少工艺用水量，缩短发酵周期，减少发酵罐清洁费用，减少DDGS蒸发量，从而大幅度地降低生产成本。因此，酒精浓醪发酵一直是近年来研究的热门课题。 狭义的酒精浓醪发酵主要包含三方面的内容： （1）酵母菌体浓度高－－1x109~3x109个／ml （2）底物（淀粉糖）浓度－－30~40％ （3）产物（酒精）浓度－－14-18%（V/V） 实现酒精浓醪发酵的优势是非常明显的。 1、提高发酵速度和设备利用率 在酒精浓醪发酵中，随着底物浓度（糖）的提高和细胞浓度的提高，促进了发酵速率增大，单位体积和时间内的酒精浓度提高（即发酵强度提高）。随着发酵强度的提升，相应的设备利用率自然提高。 2、分离费用低，节省能源 除原料消耗以外，能耗是酒精厂主要的支出之一，具体表现在煤和电的消耗上（如图1所示）。实行酒精浓醪发酵后，酒份提高，工艺用水减少，可以降低酒精蒸馏以及DDGS生产蒸气的用量，从而降低了煤或电的消耗！有经验证明，当发酵酒份从9%（V/V）提高到10%（V/V）时，可节约蒸汽消耗300kg/吨酒精，可降低生产成本约50元/吨酒精。 图1 一吨酒精的成本分摊 3、节水、减少废液排放和处理费用 目前，一般酒精厂的料水比为1：2.5~3.0左右，而采用浓醪工艺的料水比将为1：1.8～1：2.0，吨酒精用水节约1吨以上；同时可减少蒸馏损失，由于乙醇与水互溶，通过蒸馏方法提取，乙醇在糟液中必然有一定的残留，乙醇浓度越高，最终相对损失就越少。生产经验证明，在酒精生产中，发酵醪酒份提高1%（V/V）（比如从11%提高到12%），每吨酒精可节约工艺用水1.2~1.5吨、减少废液体积1.5~2吨、减少废液浓缩蒸汽消耗0.6~0.8吨，节约DDGS生产成本约80元/吨，提高废液厌氧处理时COD负荷10~13%。 但是，要实现酒精浓醪发酵，需要完成以下两方面的工作。一是发酵菌种（即酵母）方面的
探讨玉米酒精浓醪发酵工艺董克芝 发表时间：2017-11-27T16:42:21.500Z 来源：《基层建设》2017年第21期作者：董克芝 [导读] 摘要：酒精浓醪发酵技术是一项极具前景的技术，该项技术的实施不需要对现有设备进行大的改造，而且还能显著提升企业的经济效益。 中粮生化能源（肇东）有限公司黑龙江省肇东市 151100 摘要：酒精浓醪发酵技术是一项极具前景的技术，该项技术的实施不需要对现有设备进行大的改造，而且还能显著提升企业的经济效益。通过应用该项技术在一定程度上解决了我国发酵水平低的问题，同时在节水、节能、提高设备利用率以及减轻环境污染等方面具有极大优势。 关键词：玉米；酒精；浓醪发酵 引言 酒精浓醪发酵工艺是一项极具前景的技术。利用此项技术可以有效减少废物的排放并且提高原料的利用率。除此之外，该项技术还具有原料上的优势。随着科技的不断发展，该项技术也越来越成熟，使用玉米作为原料进行酒精浓醪发酵已经较为普遍。近年来，我国玉米产量大幅度提升，玉米酒精的产量也获得显著提升。本文将对玉米酒精浓醪发酵技术进行详细探究。 1我国酒精行业存在的主要技术问题 1.1发酵浓度偏低 尽管经过几十年的努力，我国酒精工厂的发酵醪酒精含量己经增加到10％左右，但与国外发酵醪的浓度普遍在13％以上还有很大的差距。发酵浓度低不仅影响了设备的使用效率，而且增加了蒸馏和蒸煮的能耗，在DDGS回收时处理量也大大增加。 1.2酒精糟液的污染问题 酒精行业是造成我国环境污染的主要源头之一，每生产1t酒精产生12～15t的酒糟；一个年产80kt的酒精工厂每年产生的污染物质相当于一个140万人口的城市排放的全部生活污水负荷。而且酒精工厂废水的BOD和COD的指标都很高，直接排放会造成严重的环境污染。有效地解决酒精糟的利用问题不仅关系到环境保护，而且直接关系到酒精企业的经济效益。 1.3能耗高 酒精生产是一项高能耗的产业，尤其是蒸煮和蒸馏两个环节，其能耗非常大。为有效降低生产成本，必须尽可能地减少能耗，同时提高设备的利用率。除此之外，由于很多工厂的发酵温度低，需要更多的能量将糖化醪冷却，发酵过程的冷却消耗能量和冷却水用量很大，这也是产生能耗的一方面因素。 1.4原料利用率低 对谷物原料来说，通过蒸煮和糖化工段的加工只利用了绝大部分的淀粉，还有一部分淀粉由于其被纤维素以及蛋白质包围，无法水解，而纤维素和蛋白质更是白白从系统内通过，而未得到充分的利用。这不仅造成了原料的浪费，而且白白地消耗了加热、冷却和输送的能量。 2玉米原料酒精浓醪发酵工艺研究 2.1玉米湿法加酶粉碎液化糖化 将浸泡后的玉米米查醪液，加入耐高温α-淀粉酶（20U/g原料），送入粉碎机湿法粉碎。粉碎后的浆料属于粗粉碎，尚含有小颗粒（直径为2～3mm），之后进行二次粉碎磨细重复处理。最后将所得浆料置于恒温水浴中90℃液化至终点。液化终点用碘液显色呈棕黄色确定。所得液体用100目尼龙滤布过滤2次，所得滤液即为液化液。同时干法粉碎玉米米查至40目，加酶液化做对照实验。然后测定升温至90℃后的液化时间、液化液得率、黏度及颗粒分布指标。每个处理重复3次。液化液降温至60℃，加入糖化酶、酸性蛋白酶、木聚糖酶，再经均质化（边均质边糖化）处理1次，60℃条件下处理60min，糖化然后冷却到35℃，准备发酵。图1为具体流程图。 原料的选择和粉碎粒度直接关系到后续各个工序的效率。原料粉碎粒度对酒精发酵的影响很大。粉碎粒度小可以增加原料的比表面积
中国药典2000版一部附录 乙醇量测定法 附录Ⅸ M. 乙醇量测定法 一、气相色谱法 本法系用气相色谱法[附录Ⅵ Ｅ3.项下，照高效液相色谱法3.(1)测定各种制剂中 在20℃时乙醇(C2H5OH)的含量（%）（ml/ml）。除另有规定外，按下列方法测定。 色谱条件与系统适用性试验用直径为0.25～0.18mm的二乙烯苯－乙基乙烯苯型高 分子多孔小球作为载体,柱温为120～150℃；另精密量取无水乙醇4ml、5ml、6ml，分别 精密加入正丙醇（作为内标物质）5ml，加水稀释成100ml，混匀（必要时可进一步稀释），照气相色谱法（附录Ⅵ Ｅ）测定，应符合下列要求： (1)用正丙醇峰计算的理论板数应大于700； (2)乙醇和正丙醇两峰的分离度应大于2； (3)上述3份溶液各注样5次，所得15个校正因子的相对标准偏差不得大于2.0％。 标准溶液的制备精密量取恒温至20℃的无水乙醇和正丙醇各5ml，加水稀释成100 ml，混匀，即得。 供试溶液的制备精密量取恒温至20℃的供试品适量（相当于乙醇约 5ml）和正丙 醇5ml，加水稀释成100ml，混匀，即得。 上述两溶液必要时可进一步稀释。 测定法取标准溶液和供试品溶液适量，分别连续注样3次,并计算出校正因子和供 试品的乙醇含量，取3次计算的平均值作为结果。 【附注】 (1) 在不含内标物质的供试品溶液的色谱图中，与内标物质峰相应的位 置处不得出现杂质峰。 (2)标准溶液和供试品溶液各连续3次注样所得各次校正因子和乙醇含量与其相应的 平均值的相对偏差，均不得大于1.5％，否则应重新测定。 (3) 选用其他载体时，系统适用性试验必须符合本法规定。 二、蒸馏法 本法系用蒸馏后测定相对密度的方法测定各种制剂中在20℃时乙醇(C2H5OH)的含量（%）（ml/ml）。按照制剂的性质不同，分为下列三法。 第一法本法系供测定多数流浸膏、酊剂及甘油制剂中的乙醇含量。根据制剂中含 乙醇量的不同，又可分为两种情况。 1.含乙醇量低于30%者 取供试品，调节温度至20℃，精密量取25ml，置150～200ml蒸馏瓶中，加水约25ml，加玻璃珠数粒或沸石等物质，连接冷凝管，直火加热，缓缓蒸馏，速度以馏出液一滴接一 滴为准。馏出液导入25ml量瓶中，俟馏出液约达23ml时，停止蒸馏。将馏出液温度调节至20℃，加20℃的水至刻度，摇匀，在20℃时按相对密度测定（附录Ⅶ A）项下的方法测定 相对密度。在乙醇相对密度表内查出乙醇的含量（%）（ml/ml）,即为供试品中的乙醇含量（%）（ml/ml）。 2.含乙醇量高于30%者 取供试品，调节温度至20℃，精密量取25ml，置150～200ml蒸馏瓶中,加水约50ml，加玻璃珠数粒，如上法蒸馏。馏出液导入50ml量瓶中，俟馏出液约达48ml时，停止蒸馏。调节馏出液温度至20℃，加20℃的水至刻度，摇匀，在20℃时照上法测定相对密度。将查得所含乙醇的含量（%）（ml/ml）与2相乘，即得。
酒精发酵 一、实验目的 1．了解淀粉水解酶、糖化酶和活性干酵母活化的方法； 2．掌握双酶法糖化淀粉的方法； 3．掌握酵母发酵糖化液制取酒精的方法； 4．了解糖浓度和酒精含量的测定方法。 5．通过实验让学生理解糖的无氧酵解途； 二、实验原理 1．在无氧的培养条件下，酵母菌(或细菌)利用葡萄糖发酵生成酒精和二氧化碳，此过程即为酒精发酵，反应式为： C6H12O6 2C2H5OH ＋2CO2 通过对发酵醪液酒精含量的测定，可以判断酒精发酵的程度。 酵母菌在有氧和无氧条件下的糖代谢的产物不同（好氧条件下生成水和二氧化碳），无氧条件下产生酒精和CO2，所以在酒精发酵时要杜绝氧气，否则酒精产率下降。 三、实验材料及仪器 1．实验材料：大米粉、玉米粉或甘薯粉等淀粉质原料，自来水，耐高温活性干酵母，耐高温α-淀粉酶，糖化酶，蔗糖，氯化钙，硫酸铜，亚甲基蓝，酒石酸钾钠，沸石。 2．实验仪器：铝锅，恒温培养箱，高压灭菌锅，酒精蒸馏装置，恒温水浴锅，蒸馏烧瓶，酒精计，糖度计，滴定管，温度计，pH计，三角瓶，容量瓶，石棉网等。 四、实验过程 1、实验步骤 （1）取自来水1000mL，按照1：4的料水比称取大米粉（250g），一起加入铝锅中，混匀，用盐酸将醪液pH调节到5.5-6.0，煮沸1h。注意不要煮糊，可适当补温水，不要骤然降温，避免“夹生饭”。 （2）糊化结束后，耐高温 淀粉酶，加入少量CaCl2 50-70mg/L，如果使用自来水也可以不加，冷却到85℃，按10U/g大米粉的比例加入活化好的淀粉酶酶液，90-93℃水浴保温。当DE值下降到20左右，结束糊化（一般糊化1个小时）。（3）用盐酸调节上述醪液至pH4.0-4.5，将醪液冷却到60℃，按150U/g大米粉的比例加入活化好的糖化酶酶液，60℃恒温箱或水浴保温6h以上（可放置过夜）。
酒精浓醪发酵过程检验方法 1.围：本标准适用于对酒精生产全过程进行监控，目的确保最终产品的质量 2.要求： 2.1给样工序 粉碎粒度≥85%(过20目筛)二期 粉碎粒度≥80%(过20目筛)一期 2.2液化工序 2.2.1糖浆PH值:回配5.3~5.8, 不回配6.0以上 2.2.2糊化率≥80~88% 2.3糖化工序 2.3.1糖化醪糖度 一期17~19oBX (清液不回配)18~22oBX (清液回配) 二期21~24oBX(清液不回配)22~26oBX(清液回配) 2.3.2糖化率:20~50%(二期) 30~40%(一期) 2.3.3PH值:4.0~4.5 2.4酒母工序 2.4.1外观糖:一期≤20oBX, 二期12~20oBX 2.4.2PH值 3.4~3.8 2.4.3酵母液: 一期≥1.5亿/ml 二期≥2.0亿/ml 2.4.4出芽率: 8~20%(一期) ,≥15%(二期)
2.4.5死亡率: ≤10%(一期) ,≤12%(二期) 2.5发酵工序 2.5.1发酵1#罐(二期)酒份9.0%以上, 挥发酸:0.2以下, 酵母数1.0亿/ml以上 2.5.2发酵2#缺罐(二期) 酒份9.0%以上, 挥发酸:0.25以下 2.5.3发酵成熟醪指标:外观糖≤1.0oBX 酒份:一期10.0%(V/V)以上,二期≥11.5%(V/V) 挥发酸:0.3以下(二期),0.25以下(一期) 残还原糖: ≤0.3g/100ml 残总糖:一期≤1.5 g/100ml二期≤2.5g/100ml 2.6蒸馏工序 2.6.1粗馏塔:废液含酒≤0.05(V/V) 2.6.2精塔:废水含酒≤0.05%(V/V) 2.6.3净化塔: 废水含酒≤0.05%(V/V) 3.测定方法 3.1糖浆的检验 3.1.1糖浆pH值测定 3.1.1.1测定仪器:PHS-25型酸度计 3.1.1.2先用PH值为 4.00和6.86缓冲校正液校正酸度计然后参照说明书测定即可. 3.2 蒸煮糊液的检验 3.2.1取样方法:每四小时从液化罐取样点取样.
酒精度代表的就是酒精百分比含量。如100ml的33度酒精度的酒就含33ml的酒精，假设这100ml的酒重93.4克（酒精密度为0.8，水密度为1），那就含30.8克酒精。… 酒精的度数 酒的度数表示酒中含乙醇的体积百分比，通常是以20℃时的体积比表示的，如50度的酒，表示在100毫升的酒中，含有乙醇50毫升(20℃)。 酒精度单位：(V/V),百分之七的意思是100体积单位的酒中含有7体积单位的乙醇。例如100升酒中含有7升的乙醇。 一般是以容量来计算，故在酒精浓度后，会加上“V ol”以示与重量计算之区分。 酒精度表示法 表示酒精含量也可以用重量比，重量比和体积比可以互相换算。 标签上酒精含量的表示法有两种： 欧式百分比法〔酒精度百分比法〕：欧洲、日本等国，是以百分比或度来表示，如威士忌一般为40%V ol或43%V ol，白兰地为40%V ol，葡萄酒为12%~12.5%V ol。美式proof 法：美国、加拿大是用proof 来表示。proof 之值等于百分比之两倍，如80proof=40%。 酒精度的测定 一、密度瓶法 1.原理 以蒸馏法去除样品中的不挥性物质，用密度瓶法测出试样（酒精水溶液）20℃时的密度，查表求得在20℃时乙醇含量的体积分数，即为酒精度。 2.仪器 2.1 全玻璃蒸馏器：500mL。 2.2 恒温水浴：控温精度±0.1℃。 2.3 附温度计密度瓶：25mL或50mL。 3.试样液的制备 用一干燥、洁净的100mL容量瓶，准确量取样品（液温20℃）100mL于500mL 蒸馏瓶中，用50mL水分三次冲洗容量瓶，洗液并入蒸馏瓶中，加几颗沸石或玻璃珠，连接蛇形冷却管，以取样用的原容量瓶作接收器（外加冰浴），开启冷却水（冷却水温度宜低于15℃），缓慢加热蒸馏（沸腾后的蒸馏时间应控制在30min －40min内完成），收集馏出液，当接近刻度时，取下容量瓶，盖塞，于20℃水浴中保温30min，再补加水至刻度，混匀，备用。 4.分析步聚 将密度瓶洗净，反复烘干、称量，直至恒重（m）。 取下带温度计的瓶塞，将煮沸冷却至15℃的水注满已恒重的密度瓶中，插上带温度计的瓶塞（瓶中不得有气泡），立即浸入20.0℃±0.1℃恒温水浴中，待内容物温度达20℃，并保持20min不变后，用滤纸快速吸去溢出侧管的液体，立即盖好侧支上的小罩，取出密度瓶，用滤纸擦干瓶外壁上的水液，立即称量（m1）。将水倒出，先用无水乙醇，再用乙醚冲洗密度瓶，吹干（或于烘箱中烘干），用试样液反复冲洗密度瓶3至5次，然后装满。重复上述操作，称量（m2）。 5.结果计算 试样液（20℃）的相对密度按下式计算。
酒精浓醪发酵过程检验方法 1.范围：本标准适用于对酒精生产全过程进行监控，目的确保最终产品的质量 2.要求： 2.1给样工序 粉碎粒度≥85%(过20目筛)二期 粉碎粒度≥80%(过20目筛)一期 2.2液化工序 2.2.1糖浆PH值:回配5.3~5.8, 不回配6.0以上 2.2.2糊化率≥80~88% 2.3糖化工序 2.3.1糖化醪糖度 一期17~19oBX (清液不回配)18~22oBX (清液回配) 二期21~24oBX(清液不回配)22~26oBX(清液回配) 2.3.2糖化率:20~50%(二期) 30~40%(一期) 2.3.3PH值:4.0~4.5 2.4酒母工序 2.4.1外观糖:一期≤20oBX, 二期12~20oBX 2.4.2PH值 3.4~3.8 2.4.3酵母液: 一期≥1.5亿/ml 二期≥2.0亿/ml 2.4.4出芽率: 8~20%(一期) ,≥15%(二期)
2.4.5死亡率: ≤10%(一期) ,≤12%(二期) 2.5发酵工序 2.5.1发酵1#罐(二期)酒份9.0%以上, 挥发酸:0.2以下, 酵母数1.0亿/ml以上 2.5.2发酵2#缺罐(二期) 酒份9.0%以上, 挥发酸:0.25以下 2.5.3发酵成熟醪指标:外观糖≤1.0oBX 酒份:一期10.0%(V/V)以上,二期≥11.5%(V/V) 挥发酸:0.3以下(二期),0.25以下(一期) 残还原糖: ≤0.3g/100ml 残总糖:一期≤1.5 g/100ml二期≤2.5g/100ml 2.6蒸馏工序 2.6.1粗馏塔:废液含酒≤0.05(V/V) 2.6.2精塔:废水含酒≤0.05%(V/V) 2.6.3净化塔: 废水含酒≤0.05%(V/V) 3.测定方法 3.1糖浆的检验 3.1.1糖浆pH值测定 3.1.1.1测定仪器:PHS-25型酸度计 3.1.1.2先用PH值为 4.00和6.86缓冲校正液校正酸度计然后参照说明书测定即可. 3.2 蒸煮糊液的检验 3.2.1取样方法:每四小时从液化罐取样点取样.
酒精中甲醇含量检测方法分析 酒精中甲醇含量检测方法分析 迪庆州质量技术监督综合检测中心云南迪庆州 674400 摘要：本文对各种检测酒精中甲醇含量的方法进行了具体分析，并指出了各种方法的优势和缺点，并在此基础上提出了一种新的研究方法。经过实验，样品酒精中的成分在薄层板上经过化学反应而分离，甲醇和高锰酸钾进行氧化反应之后就会生成甲醛，并改变液体的颜色，只需要用品红亚硫酸和三色硅等色敏检测元件来进行颜色检验，这样就能够确定酒精中的甲醇含量是否符合标准。 关键词：酒精甲醇检测方法 一、概述 酒精是酒的主要成分，也是酿酒的重要原料，尤其是近年来白酒的种类不断增加，甲醇含量的多少已经成为衡量白酒质量的一个重要标准。这是因为现在很多白酒都是直接用甲醇或者串香等材料配制而成的。国家对食用酒精中的甲醇含量有明确规定，即每100毫升中的酒精含量不能超过0.06克，否则就会危害人体健康。因为甲醇本身具有一定的毒性，长期饮用不符合标准的白酒容易使甲醇在体内积累，超过一定的程度之后就会出现积蓄性中毒现象。而且甲醇经过人体的新陈代谢会生成甲酸和甲醛。甲醛能够对视网膜中的氧化磷酸化作用进行破坏，导致失明。即便甲醛的含量很少，也能够引起人体的慢性中毒。人们虽然经常饮用白酒，但是因为甲醇的味道和酒精比较相似，只凭借口感是很难进行区分的，所以有很多不法之徒为了获取暴利，直接用工业酒精勾兑甲醇制成假酒，导致人体中毒。所以对酒精中的甲醇含量进行检测是非常有必要的。 二、酒精中甲醇含量检测的主要方法 （一）顶空法 顶空法可以分成静态法和动态法两种。使用静态法进行检测，首先需要将酒精样品放入密封的容器，然后进行加热，直到样品和上方的蒸汽实现平衡为止，最后选择合适的方法提取蒸汽，用来进行气相
高浓度酒精发酵 摘要：高浓酒精发酵是以提高单位体积内发酵醪液中淀粉含量，在适量的酿酒酵母菌作用下，在一定的时间内获得最大量的酒精。影响高浓酒精发酵的因素有：葡萄糖浓度、酒精含量、溶解氧浓度、酵母菌细胞密度、发酵温度和副营养物匮乏等。提高高浓酒精发酵的方法有：改良筛选优良酵母生产菌株、改进发酵系统、利用复合酶添加工艺和提高营养限制因子利用。 关键词：高浓度发酵；酒精；酵母菌 Abstract: high-gravity alcohol fermentation by raising the per unit volume of starch content in beer, in moderate amounts of wine under the action of yeast, in time to get the maximum amount of alcohol. Factors affecting high-gravity alcohol fermentation: glucose concentrations, alcohol content, concentration of dissolved oxygen, yeast cell density, temperature and under lack nutrients, and so on. There are ways to improve high-gravity alcohol fermentation: improved screening good strains of yeast production, improvement of the fermentation system, using compound enzymes added and improved nutrient limit factor. Key words：high consentration; yeast ;alcohol; 酒精作为食品和化工原料，一直是我国发酵行业的主要产品，用微生物发酵生产酒精的历史在我国历史悠久。始于20世纪70年代中期的石油危机给酒精行业带来了前所未有的良机，随着人们环保意识的不断加强，酒精作为一种清洁的燃料越来越受到人们的重视。因此，许多科学家和科学工作者开始致力于应用生物技术开发酒精发酵的新菌种、新工艺的开创性研究，而酒精浓醪发酵作为解决当前实际生产的可行方法，具有极其重要的意义，已成为当前酒精行业研究的热门课题。 1.高浓度酒精发酵 所谓的高浓度酒精发酵，是以提高单位体积内发酵醪液中淀粉的含量，在适量的酿酒酵母菌作用下，在一定的时间内力求得到最多的发酵终产物——酒精。现在，一般的酒精生产企业淀粉质原料糖化醪的可溶性固形物含量为20%—25%（w/v），因此有人将高浓度酒精发酵定义为每1L发酵液中含300g或者更高的可溶性固形物的酒精发酵。而在理论上当发酵醪液葡萄糖浓度达到28%左右时（相当于1L发酵醪液中含固形物300g），发酵成熟醪中酒精浓度可达18%。 与传统的酒精发酵工艺相比，高浓度酒精发酵具有如下明显的优点：①单位设备的生产率提高：例如若要在发酵成熟醪液中的酒分达到12.5%，如果发酵罐体积为一千立方米，则发酵罐中酒精的量为：1000*12.5%*0.7893=99.125t；如果采用高浓度醪液发酵，发酵成熟醪中酒分达到18%，则最终酒精的量可以达到124.074t。在基本相同或接近的发酵时间情况下，高浓度酒精发酵可以明显地提高单位设备的生产率和利用率。②降低能耗：高浓酒精发酵因为增加了单位体积醪液中淀粉的含量，增加了单位体积醪液中酒精的含量和其他固形物的含量，减少了拌料过程中水的投入，可以大大降低蒸煮、发酵、蒸馏和DDGS浓缩干燥过程。 2.影响高浓度酒精发酵的因素 2.1酵母菌的产酒机理 在酒精发酵过程中，酵母菌处于主体地位。研究发现，处于对数生长期的酵母细胞产生酒精的能力是稳定期的酵母细胞产酒能力的30倍，而处于稳定期的
乙醇检测方法（中国药典2005版） 作者：guoyawei 药用辅料来源：中国药典点击数：737 更新时间：2008-11-28 [关键词]：乙醇检测方法,中国药典 健康网讯： 酸度取本品10.0ml，加水25ml及酚酞指示液2滴，摇匀，滴加氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）至显淡红色，再加本品25.0ml，加水10ml与酚酞指示液2滴，摇匀，加氢氧化钠滴定液 （0.02mol/L）0.50ml，应显淡红色。 水不溶性物质取本品，与同体积的水混合后，溶液应澄清；在10℃放置30分钟，溶液仍应澄清。杂醇油取本品10ml，加水5ml与甘油1ml，摇匀后，分次滴加在无臭的滤纸上，使乙醇自然挥散，始终不得发生异臭。 甲醇取本品5.0ml，用水稀释至100ml，摇匀；分取1.0ml，加磷酸溶液（1-10）0.2ml与5%高锰酸钾溶液0.25ml，在30-35℃保温15分钟，滴加10%焦亚硫酸钠溶液至无色，缓缓加入在冰浴中冷却的硫酸溶液（3-4）5ml，在加入时应保持混合物冷却；再加新制的1%变色酸溶液0.1ml，置水浴中加热20分钟，如显色，与标准甲醇溶液（精密称取甲醇20mg，加水使成200ml）1.0ml 用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.20%）。 易氧化物取50ml具塞量简，依次用盐酸、水与本品份净后，加入本品20ml，放冷至15℃，加高锰酸钾滴定液（0.02mol/L）0.10ml，密塞摇匀后，在15℃静置10分钟，粉红色不得完全消失。 丙酮和异丙醇取本品1.0ml，加水1.0ml、磷酸氢二钠的饱和溶液1.0ml与高锰酸钾的饱和溶液3.0ml，混匀后，置45-50℃水浴中，待高锰酸钾褪色后，加10%氢氧化钠溶波3.0ml，摇匀，用垂熔玻璃漏斗滤过，滤液中加新制的1%糠酸溶液1.0ml，放置10分钟后，取出1.0ml，加盐酸3.0ml，在3分钟内观察；如显粉红色，与对照液（取磷酸氢二钠的饱和溶液1.0ml、10%氢氧化钠溶液3.0ml与0.001%丙酮溶液0.8ml，加1%糠醛溶液1.0ml，用水稀释成10ml，放置10分钟后，取出1.0ml，加盐酸3.0ml）比较，不得更深（0.0008%）。 戊醇或不挥发的易炭化物取本品25ml，置蒸发皿中于水浴上蒸发至器皿表面微显湿润（约剩0.05ml），加95%硫酸数滴，不得染成红色或棕色。 不挥发物取本品40ml，置105℃恒重的蒸发皿中，于水浴上蒸干后，在105℃干燥2小时，遗留残渣不得过1mg。
渭南市惠丰公司样品中乙醇 检测规程 1、适用范围：适用于各类产品乙醇残留的检测。 2、实验原理：采用蒸馏法蒸出样品中残留的乙醇，蒸出的乙醇用重铬酸钾氧化为乙酸，而六价铬被还原为三价铬，进行比色测得乙醇含量。 3、仪器：分光光度计、分析天平、蒸馏瓶、容量瓶、比色管、移液管 4、试剂： 4.1、0.1%（V/V）标准乙醇溶液：准确移取1.0ml无水乙醇至1000ml容量瓶，定容； 4.2、2%重铬酸钾溶液； 4.3、浓硫酸； 4.4、四硼酸钠。 5、分析步骤 5.1试样蒸馏 称取10g四硼酸钠溶于约200ml热水后500ml蒸馏瓶中，准确称取5.0000g 样品加入容量瓶，用50ml水冲洗蒸馏瓶，加热蒸馏，用150ml容量瓶接收150ml 馏出液，取下，摇匀。 5.2标准曲线的绘制 准确吸取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml0.1%（V/V）标准乙醇溶液分别置于6支10ml比色管中，加水至5ml，再依次加入1ml2%重铬酸钾溶液，5ml浓硫酸摇匀后于沸水浴加热10分钟，取出冷却，分别移入1cm比色皿内，以零管为参比，于波长600nm处测量吸光度，根据各点吸光度绘制标准曲线或计算直线回归方程。 5.3试样测定 准确吸取5ml馏出液于10ml比色管中，以下按5.2自“再依次加入1ml2%
重铬酸钾溶液，5ml 浓硫酸摇匀后于沸水浴加热10分钟，取出冷却，分别移入1cm 比色皿内，以零管为参比，于波长600nm 处测量吸光度”起依法操作。试样吸光度与标准曲线比较定量或代入标准回归方程求出试样管相当的0.1%标准乙醇溶液体积。 6、计算结果 式中： V1—试样管与标准管相当的0.1%标准乙醇溶液体积，单位为毫升（ml ）； 0.001—标准乙醇溶液浓度，单位为毫升每毫升（ml/ml ）； 5—比色时所用馏出液的体积，单位为（ml ）； V —馏出液的总体积，单位为（ml ）； m —样品质量，单位为（g ）； 0.7134—1ml 乙醇的质量，单位为克每毫升（g/ml ）。 m 100010005V 0.001V10.7134Kg /mg ??? ??=）乙醇含量（
乙醇测定方法 一、气相色谱法 本法系采用气相色谱法（2010年版药典一部附录ⅥE）测定各种制剂中在20℃时乙醇（C2H5OH）的含量（%）（ml/ml）。除另有规定外，按下列方法测定。 第一法（毛细管柱法） 色谱条件与系统适用性试验用键合交联聚乙二醇为固定液的毛细管柱；起始温度为50℃，维持7分钟，再以每分钟10℃的速率升温至110℃；进样口温度190℃；检测器温度220℃。理论板数按正丙醇峰计算应不低于8000，乙醇峰与正丙醇峰的分离度应大于2.0。 校正因子测定精密量取恒温至20℃的无水乙醇4ml、5ml、6ml，分别置100ml量瓶中，分别精密加入恒温至20℃的正丙醇（内标物质）5ml，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取上述各溶液1ml，分别置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀（必要时可进一步稀释），作为对照品溶液。取上述三种溶液各适量，注入气相色谱仪，分别连续进样3次，测定峰面积，计算校正因子，所得校正因子的相对标准偏差不得大于2.0%。测定法精密量取恒温至20℃的供试品适量（相当于乙醇约5ml），置100ml量瓶中，精密加入恒温至20℃的正丙醇5ml，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液1ml，置1 00ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀（必要时可进一步稀释），作为供试品溶液。取1μl注入气相色谱仪，测定，即得。 第二法（填充柱法） 色谱条件与系统适用性试验用直径为0.18～0.25mm的二乙烯苯－乙基乙烯苯型高分子多孑L小球作为载体；柱温为120～150℃。理论板数按正丙醇峰计算应不低于70 0，乙醇峰与正丙醇峰的分离度应大于2.0。 校正因子测定精密量取恒温至20℃的无水乙醇4ml、5ml、6ml，分别置100ml量瓶中，分别精密加入恒温至20℃的正丙醇（内标物质）5ml，用水稀释至刻度，摇匀（必要时可进一步稀释），取上述三种溶液适量，注入气相色谱仪，分别连续进样3次，测定峰面积，计算校正因子，所得校正因子的相对标准偏差不得大于2.0%。 测定法精密量取恒温至20℃的供试品溶液适量（相当于乙醇约5ml），置100ml 量瓶中，精密加入恒温至20℃的正丙醇5ml，用水稀释至刻度，摇匀（必要时可进一步稀释），取适量注入气相色谱仪，测定，即得。 【附注】除另有规定外，若蒸馏法测定结果与气相色谱法不一致，以气相色谱法测定结果为准。 二、蒸馏法