白蛋白测定试剂盒（溴甲酚绿法）
结构组成：
试剂：溴甲酚绿(BCG)（0.17mmol/L）预期用途：本试剂盒用于体外定量测定人血清中白蛋白的含量。
2.1外观
2.1.1试剂盒标签标识清晰，外包装完整无破损；
2.1.2试剂为褐色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；
2.2净含量
净含量不低于标示值。
2.3空白吸光度
在主波长630nm,37℃条件下, 试剂空白吸光度A≤0.600。
2.4分析灵敏度
样本浓度为40g/L时，其吸光度变化△A≥0.100。
2.5线性区间
[10.0,60.0]g/L区间内，相关系数r≥0.990；
[10.0,20.0]g/L区间内，线性偏差应不超过±4g/L；
（20.0,60.0]g/L区间内，线性偏差应不超过±10%。
2.6 精密度
2.6.1批内重复性
CV≤2.0%。
2.6.2批间差
相对极差R≤5.0%。
2.7 准确度
测定参考物质GBW(E)090619，相对偏差应≤6%。
2.8 稳定性
未开封试剂2℃～8℃储存，可稳定12个月。取到效期后2个月内产品进行检测，检测结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
白蛋白（ALB）测定试剂盒(溴甲酚绿法) 适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中白蛋白的含量。 1.1规格 试剂（R）5×80mL；7×60mL；5×40mL； 2×100mL；3×400mL；1×20mL。 校准品（选配）：1×3mL。 1.2组成 1.2.1 试剂组成 1.2.2校准品的组成：单个水平的液体校准品，在水基质中添加牛血清白蛋白（纯度：95%以上），稳定剂0.1%。定值范围：（40-60）g/L。 2.1 外观 液体单试剂：黄绿色液体。 校准品：无色至淡黄色澄清液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 空白吸光度
在37℃、（630nm±10%范围内的）波长,1cm光径条件下，试剂空白吸光度应<0.25 ABS。 2.4 分析灵敏度 浓度为40g/L时，吸光度变化范围在（0.4-0.8）ABS之间。 2.5 线性范围 测试血清样本，试剂线性在[10.0-60.0]g/L范围内：线性相关系数（r）≥0.990；在[20.1-60.0]g/L范围内，线性偏差应不超过±10%；[10.0-20.0]g/L范围内，线性应在±4.0g/L范围内。 2.6 精密度 重复测试浓度在（40.0±5.0）g/L的控制血清，所得结果的重复性（变异系数，CV）应不大于2.0 %。 2.7 批间差 测试浓度在（40.0±5.0）g/L的控制血清，批间相对极差应不大于5.0 %。 2.8 准确度 相对偏差应不大于 6.0%。 2.9 稳定性 2.9.1效期稳定性 原包装试剂（含校准品），在（2-8）℃下有效期为18个月，取失效期的试剂盒检测其准确度和线性，试验结果满足2.5、2.8的要求。 2.9.2 开瓶稳定性 试剂（含校准品）开瓶后，在（2-8）℃保存，可以稳定14天。在第15天检测线性和准确度，试验结果满足2.5、2.8的要求。
饲料中尿素含量的测定（非国标） ——比色法 一、适用范围 本方法适用于动物饲料及其原料中尿素含量的测定 二、原理 由于对-二甲胺基苯甲醛（DMAB，Ehrilich’S试剂）与尿素可形成有颜色的复合物，并可用分光光度计在420nm处进行比色，以求出尿素的含量 三、仪器与试剂 1、分光光度计420nm，1cm吸收池 本方法除特殊注明外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 2、DMAB溶液 溶解16g DMAB于1000mL甲醇中，再加入100mol/L盐酸，该溶液在1个月内是稳定的。 3、乙酸锌（Zn（Ac）2.2H2O）溶液 称取22.0克乙酸锌溶于蒸馏水中，再加入3mL乙酸，然后稀释至100mL 。4、亚铁氰化钾（K4Fe（CN）6.3H2O）溶液 溶解10.6g 亚铁氰化钾于蒸馏水中，再稀释至100mL。 5、磷酸缓冲液（PH6—7.0） 先分别溶解3.403g磷酸二氢钾和4.355g磷酸氢二钾100mL蒸馏水中，然后将两溶液合并在一起，再用水稀释至1000mL。 6、木炭Daroa G60 7、尿素标准溶液： 称取5g（准确至1mg）尿素（试剂级）溶解于水，再稀释至1000mL作为储备液（5mg/mL） 工作液：0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8和2.0尿素/5mL。吸收储备液各2 4 6 8 10 12 14 16 18和20mL 分别置于250mL容量瓶中，并用磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度。 8、参比溶液 用含1.0mg尿素/5mL的标准溶液作为参比溶液。如置于24℃以下环境，该参
比溶液可稳定一周。 四、标准曲线的制备 吸取不同浓度的尿素工作标准溶液5mL ，分别置于20mmX150mm（25mL）的比色管中，各加入5mL DMAB溶液。另外，制备一空白对照液，即吸取5mL DMAB溶液和5mL磷酸缓冲液于25mL比色管中。然后，将所有比色管轻轻充分摇动，并置于25℃水浴中放置10min。然后，用空白对照调节吸光度0点。用1Cm 吸收池于420nm处读取各溶液的吸光度值。然后用吸光度对尿素浓度做图，得一条直线。否则，应将该批号的DMAB溶液重做一次。 五、测定步骤 称取1.00g粉碎的样品置于500mL容量瓶中，加入1g木炭，约250mL水，5mL乙酸锌溶液和5mL铁氰化钾溶液，机械振摇30min，并用水稀释至刻度，静置至沉淀下沉。用滤纸过滤，收集上清溶液。吸取5mL溶液于比色管中，加入5mLDMAB溶液，并充分振摇。每组样品均应带一参比标准（5mL参比溶液和5mL DMAB溶液）及一个空白对照液。于25℃水浴中放置100min。以空白对照液为对照，读取420nm的吸光度。 六、测定结果的计算： 由标准曲线查得的浓度（mg/5mL）X100 尿素（%）=-------------------------------------------------------- 样品重X1000/500 （1.0 X A样品）X1000 或尿素（%）=------------------------------------------- A标准X所测定的样品重（mg）
附件2 白蛋白测定试剂（盒）产品技术审评规范（2017版） 本规范旨在指导注册申请人对白蛋白测定试剂（盒）注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考。 本规范是对白蛋白测定试剂（盒）的一般要求，申请人应依据具体产品的特性对注册申报资料的内容进行充实和细化，并依据产品特性确定其中的具体内容是否适用。 本规范是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采用，但需要提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本规范。 本规范是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本规范相关内容也将进行适时调整。 一、适用范围 白蛋白测定试剂（盒）用于体外定量测定人血清或血浆中白蛋白的浓度。 从方法学考虑，本规范主要指基于分光光度法原理，利用全自动、半自动生化分析仪或分光光度计，在医学实验室采用溴甲酚绿法、溴甲酚紫法进行白蛋白定量检验所使用的临床化学体外诊断试剂。本文不适用于干式或免疫比浊法的白蛋白测定试剂，但适用处可参照执行。 依据《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5号，以下简称《办法》）、《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂
分类子目录的通知》（食药监械管[2013]242号）白蛋白测定试剂（盒）管理类别为Ⅱ类，分类代号为6840。 二、注册申报资料要求 （一）综述资料 综述资料主要包括产品预期用途、临床意义、产品描述、有关生物安全性方面说明、研究结果的总结评价以及同类产品上市情况介绍等内容，应符合《体外诊断试剂注册管理办法》和《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（国家食品药品监督管理总局〔2014〕第44号公告）相关要求。下面着重介绍与白蛋白测定试剂（盒）预期用途有关的临床背景情况。 白蛋白为含580个氨基酸残基的单链单纯蛋白质，分子量66.3kD,分子中含17个二硫键，在Ph7.4体液中为每分子可以带有200个以上负电荷的负离子。白蛋白由肝实质细胞合成分泌，是血浆中含量最多的蛋白质，约占血浆总蛋白的57%-68%，血浆半衰期约15-19天。白蛋白为体内重要营养蛋白，并参与维持血浆胶体渗透压、酸碱平衡等内环境稳定，也是血浆中多种物质的主要转运蛋白。白蛋白增高主要见于血液浓缩而致相对性增高，如严重脱水和休克、严重烧伤、急性出血、慢性肾上腺皮质功能减低症。白蛋白降低常见于肝硬化合并腹水及其他肝功能严重损害(如急性肝坏死、中毒性肝炎等)营养不良、慢性消耗性疾病、糖尿病、严重出血肾病综合征等。 注：若注册申报产品声称临床意义超出此内容范围，应提供相关文献或临床研究依据。 （二）主要原材料研究资料（如需提供） 主要原材料的选择、制备、质量标准及实验验证研究资料；质控品、校准品的原料选择、制备、定值过程及试验资料；校准品的溯源性文件，包括具体溯源链、实验方法、数据及统计分析等详细资料。
实验方案 一、实验目的 通过实验，掌握测定萝卜品质的方法 （一）萝卜外部形态的测定 1、实验材料 取鲜样3个∕小区 直尺、蒸馏水、笔、记录本、吸水纸 2、实验方法 ．用自来水将各组萝卜洗净后，再用蒸馏水洗涤，擦干表面水分．每个小区取3个重复，用电子天平称量每株的鲜重，用直尺测量植株的茎长、茎粗、叶长，取平均值作为指标值 实验(二) 植物体内可溶性糖含量的测定（蒽酮法） 一、实验目的 了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理；掌握分光光度计的使用二、实验原理 糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一，也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。不同载培条件，不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定，可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。 蒽酮比色定糖法是一个快速而方便的定糖方法，在强酸性条件下，蒽酮可以与游离的或多糖中存在的己糖、戊糖及己糖醛酸（还原性和非还原性）作用生成蓝绿色的糖醛衍生物，其颜色的深浅与糖的含量在一定范围内成正比。蒽酮也可以和其他一些糖类发生反应，但显现的颜色不同。当存在含有较多色氨酸的蛋白质时，反应不稳定，呈现红色。上述特定的糖类物质，反应较稳定。该法特点：灵敏度高，测定量少，快速方便。 三、材料、仪器及试剂
1.材料：植物种子、白菜叶、柑桔 2.仪器：分光光度计；恒温水箱；20ml具塞刻度试管（3支）漏斗；100ml容量瓶；刻度试管；试管架；剪刀；研钵 3.试剂 （1）200μg/ml标准葡萄糖：AR级葡萄糖100mg，蒸馏水溶解，定容至500ml。 （2）蒽酮试剂：1g蒽酮，用乙酸乙酯溶解，定容至50ml，棕色瓶避光处贮藏； （3）浓硫酸 四、实验方法 1.葡萄糖标准曲线的制作 取6支20ml具寒试管，编号，按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。在每管中均加入0.5ml蒽酮试剂，再缓慢地加入5ml 浓H2SO4，摇匀后，打开试管塞，置沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却至室温，在620nm波长下比色，测各管溶液的光密度值（OD），以标 2. 称取1克白菜叶，剪碎，置于研钵中，加入少量蒸馏水，研磨成匀浆，然后转入20ml刻度试管中，用10ml蒸馏水分次洗涤研钵，洗液一并转入刻度试管中。置沸水浴中加盖煮沸10分钟，冷却后过滤，滤液收集于100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀备用。 3.糖含量测定 用移液管吸收1ml提取液于20ml具塞刻度试管中，加1ml水和0.5ml蒽酮试剂。再缓慢加入5ml浓H2SO4（注意：浓硫酸遇水会产生大量的热！），盖上试管塞后，轻轻摇匀，再置沸水浴中10分钟（比色空白用2ml蒸馏水与0.5ml蒽酮试剂混合，并一同于沸水浴保温10分钟）。冷却至室温后，在波长620nm下比色，记录光密度值。查标准曲线上得知对应的葡萄糖含量（μg）。 五、结果计算 样品含糖量（g/100g鲜重）=查表所得糖含量（μg）×稀释倍数×100/样品重（g）×106 六、注意事项
高铁血红素白蛋白检测试剂盒(Schumm 法) 简介： 出现严重血管内溶血，产生的游离血红蛋白量超过结合珠蛋白所能结合的量，血液中结合珠蛋白几乎被耗尽，游离血红蛋白分解成珠蛋白和血红素，有一部分会被氧化成高铁血红素，高铁血红素和血浆白蛋白结合生成高铁血红素白蛋白(Methemalbumin ，MHA)，MHA 分子较大，不能由肾脏排出，而是经肝脏清除。 Leagene 高铁血红素白蛋白检测试剂盒(Schumm 法)(Methemalbumin Assay Kit)采用Schumm 法，其检测原理是严重血管内溶血时，结合珠蛋白与血红素结合蛋白均被耗尽，高铁血红素与白蛋白结合成MHA ，经氧化作用后用分光镜或分光光度计检测，若在处出现强的吸收峰，表示存在高铁血红素白蛋白。该试剂盒主要用于定性检测血清或血浆样本，亦可用于定性检测细胞或组织的裂解液或匀浆液等中的高铁血红素白蛋白，血清中出现高铁血红素白蛋白是溶血严重的指标。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、 生理盐水 2、 比色杯 3、 分光光度计或分光镜 操作步骤(仅供参考)： 1、 准备样品：按照常规方法制备溶血标本血清或血浆，检测前再次高速离心，除尽红细胞，-80℃冻存。如果样品中的MHA 含量过高，可以用生理盐水适当稀释后再进行测定。 2、 加样：轻轻向待测样品加入Schumm Reagent A ，使Schumm Reagent A 完全覆盖样品表面，然后加入样品Schumm Reagent B ，轻轻混合。 4、 检测：取或恰当容量的比色杯，分别加入上述混合液，以生理盐水作为空白对照，用分光光度计或分光镜检测，若在处出现强的吸收峰，表示存在高铁血红素白蛋白，一般应数小时内检测完毕。 编号 名称 TC0211 50T Storage 试剂(A): Schumm Reagent A 15ml RT 避光 试剂(B): Schumm Reagent B 5ml ×2 RT 避光 使用说明书 1份
糖化白蛋白测定试剂盒（过氧化物酶法） 适用范围：本产品用于体外定量测定人血清或血浆中糖化白蛋白的含量。 1.1 规格 具体产品规格见下表:
1.2 组成成分 1.2.1 试剂的组成 试剂1： Tris缓冲液≥50mmol/L 酮胺氧化酶≥30U/ml N，N-双（4-磺丁基）-3-甲基苯胺≥2mmol/L 试剂2： Tris缓冲液≥50mmol/L 蛋白酶K ≥40U/ml 过氧化物酶≥60U/ml 4-氨基安替比林≥5mmol/L 1.2.2 校准品的组成（选配） 糖化白蛋白（0.40～2.00）g/dl 该校准品为血清基质冻干校准品 1.2.3 质控品的组成（选配） 水平1：
糖化白蛋白（0.40～1.00）g/dl 该质控品为血清基质冻干质控品 水平2： 糖化白蛋白（1.01～2.00）g/dl 该质控品为血清基质冻干质控品 校准品、质控品有批特异性，具体靶值见靶值表。 2.1 外观 2.1.1 外包装完整无破损； 2.1.2 试剂1：无色或淡黄色澄清液体； 2.1.3 试剂2：无色或淡黄色澄清液体； 2.1.4 校准品：白色或淡黄色冻干粉，复溶后为浅黄色溶液，无不溶物； 2.1.5 质控品：白色或淡黄色冻干粉，复溶后为浅黄色溶液，无不溶物。 2.2 净含量 净含量不低于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在主波长500～600nm、副波长700nm、37℃条件下，试剂空白吸光度不大于0.5。 2.4 线性 2.4.1 线性范围 [9.0%，69.0%]，相关系数r＞0.990。 2.4.2 线性偏差 （20.0%，69.0%]线性范围内，相对偏差不超过±10%； [9.0%，20.0%]线性范围内，绝对偏差不超过±2.0%。 2.5 分析灵敏度 检测浓度为3.27g/dl的样本时, 吸光度变化不小于0.02。 2.6 重复性 2.6.1 试剂重复性
白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法) 简介： 总蛋白(Total Protein ，TP)由白蛋白和球蛋白组成，检测白蛋白的方法有双缩脲法、色氨酸法、染料结合法。检测白蛋白的染料结合法可采用溴甲酚绿或溴甲酚紫染料结合，上述染料对白蛋白具有高度的亲和力，通常监测染料与白蛋白结合的初速率，该速率与样品中白蛋白浓度成正比。 Leagene 白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫比色法)检测原理是在酸性环境下，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚紫(Bromocresol purple ，BCP)结合生成绿色复合物，在603nm 处有吸收波，该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，求得待测样品中白蛋白浓度。本试剂盒多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的蛋白含量测定，该法操作简单、方法特异，既可手工操作，又可采用自动分析仪检测，对血清清蛋白的特异性比BCG 法(溴甲酚绿法)要好，不易受时间和温度变化的影响。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、 离心管、小试管 2、 比色杯 3、 分光光度计 操作步骤(仅供参考)： 1、 取白蛋白标准配制液或稀释液加入到白蛋白标准中，充分溶解后配制成40mg/ml 的白 蛋白标准溶液，配制后可立即使用，溶解后的白蛋白标准溶液应-20℃保存。亦可按自己试验要求继续进行稀释，如稀释至1mg/ml 。特别提示：待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，白蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取白蛋白标准溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl 或PBS 作为溶解白蛋白标准品的稀释液。 2、 样本处理：血清、血浆样本直接取检测。对于组织样本，按组织质量(g)：生理盐水比 例，加入生理盐水或PBS ，冰浴下匀浆后，离心，取上清待检。 编号 名称 TC0567 100T Storage 试剂(A): BCP 试剂 200ml 4℃ 避光 试剂(B): 白蛋白标准 20mg RT 试剂(C): 白蛋白标准配制液 100ml RT 使用说明书 1份
中华人民共和国国家标准 运行中变压器油、汽轮机油UDC 621.892.098 ∶543.06 水溶性酸测定法(比色法)GB 7598—87 Determination of water-soluble acid in transformer and turbine oils in service by colormetric method 国家标准局1987-03-26批准1988-01-01实施 本方法适用于测定运行中变压器油、汽轮机油的水溶性酸pH值。 在试验条件下，试油与等体积蒸馏水混合摇动，取其水抽出液，通过比色确定其pH值。 1 仪器 1.1 pH比色计：pH为3.8～7.0，间隔为0.2，比色管直径为15mm，容量10mL。 1.2 比色盒：如右图。 1.3 锥形瓶：250mL。 1.4 分液漏斗：250mL。 1.5 温度计：0～100℃。 1.6 水浴。 2 试剂 2.1 pH指示剂 2.2.1 指示剂的配制方法及变色范围见表1。 表1 指示剂的配制
2.1.2 指示剂应盛在严密的棕色试剂瓶内，保存于阴暗处。 2.2 试验用水 除盐水或二次蒸馏水，煮沸后，pH为6.0～7.0，电导率小于3μS/cm(25℃)。 2.3 化学试剂 2.3.1 所用固体试剂均应进行干燥(苯二甲酸氢钾、磷酸二氢钾的干燥温度为100～110℃)。 2.3.2 苯二甲酸氢钾：保证试剂或基准试剂。 2.3.3 磷酸二氢钾：保证试剂或基准试剂。 2.3.4 氢氧化钠：分析纯。 2.3.5 盐酸：分析纯，比重为1.19。 3 准备工作 3.1 配制缓冲溶液 3.1.1 0.2mol/L苯二甲酸氢钾溶液 称取40.846g苯二甲酸氢钾，溶于适量除盐水(或二次蒸馏水)，移入1000mL 容量瓶，再用除盐水(或二次蒸馏水)稀释至刻度。 3.1.2 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液 称取27.218g磷酸二氢钾，溶于适量除盐水(或二次蒸馏水)，移入1000mL容量瓶，再用除盐水(或二次蒸馏水)稀释至刻度。 3.1.3 0.1mol/L盐酸溶液 用量筒量取16.8mL浓盐酸注入1000mL容量瓶，用除盐水(或二次蒸馏水)稀释至刻度(此溶液浓度约为0.2mol/L)，再用硼砂、无水碳酸钠、无水碳酸钾或已知的相近浓度的标准碱溶液进行标定，然后稀释成0.1mol/L。 3.1.4 0.1mol/L氢氧化钠溶液 迅速称取8g氢氧化钠放入小烧杯中，加入50～60mL蒸馏水使其溶解，移入1000mL容量瓶，再加2～3mL10%的氯化钡溶液以沉淀碳酸盐，然后用蒸馏水稀释至刻度，静置澄清。取上层清液(此溶液浓度约为0.2mol/L)，用苯二甲酸氢钾或已知的浓度相近的标准酸液进行标定，然后稀释成0.1mol/L。 3.1.5 pH标准缓冲溶液 按表2之比例用上述溶液配制。 表2 标准缓冲溶液表(20℃)
BCA蛋白浓度测定试剂盒 说明 23225蛋白质化验试剂盒：为500试管或5000微孔板的检测提供充足的试剂 23227蛋白质化验试剂盒：为250试管或2500微孔板的检测提供充足的试剂 试剂盒组分： BCA 试剂A，1000 mL (No. 23225产品中) 或500mL ( No. 23227产品中)，碳酸钠，碳酸氢钠，二喹啉甲酸，酒石酸钠溶于0.1 M氢氧化钠中。 BCA 试剂B , 25 mL, 包括4%硫酸铜 一次性标准白蛋白, 2mg/ mL, 10 × 1 mL 安瓿, 包含2 mg/ mL牛血清白蛋白(BSA) 存在于0.9% 盐和0.05%叠氮化钠中。 储存：以上试剂保持在室温下储存和装运 注意：如果试剂A 或试剂 B 在低温下运输或长期储存时出现沉淀现象，可以通过缓慢加温或轻轻搅拌溶液使沉淀物溶解。当试剂变色或确定微生物污染时请丢球试剂盒。 目录 介绍 (1) 准备标准试剂和工作试剂 (2) 准备试管 (3) 准备微型版 (3) 故障检修 (4) 有关美国热电其他产品 (5) 附加信息 (5) 参考文献 (6) 介绍 美国热电（Thermo）公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒是基于二喹啉甲酸(BCA)通过比色检测和定量测定总蛋白的洗涤剂兼容配方。该方法通过碱性介质中的一种蛋白结合了Cu2使其显著减少转变为Cu1 （缩二脲反应）。用一种含二奎琳甲酸的试剂选择性的比色法高敏感的比色杯中的Cu1. 这种测定方法的紫色色反应产物是通过BCA的两个分子和亚铜离子螯合作用形成的。这种水溶性复合物在562nm 处有强吸收峰。在大的活性范围内(20-2000μg / mL）几乎同蛋白浓度增加呈线性关系。BCA 法不是真正的终点的方法；也就是说，最终颜色继续发展。孵化之后, 继续的颜色发展速度是足够慢以允许一起进行测定大量样本。 大分子结构的蛋白质,肽键的数量和存在的四个特定氨基酸(半胱氨酸,胱氨酸，色氨酸和酪氨酸)据说是与BCA形成颜色产物的原因。因此,蛋白浓度的测量通常要参照标准的一个常见的蛋白质如牛血清白蛋白。一系列已知浓度的蛋白质稀释液是为与之相近的未知蛋白质浓度测定准备的。因为每一个未知浓度的测定都需要基于标准曲线。如果需要将一个未知蛋白精确定量，选择一个与未知蛋白特性相似的标准蛋白是可取的。例如，当测定免疫球蛋白时牛血清丙种球蛋白可以被当做标准蛋白。以下给出了两种检测过程： 其中,试管程序需要一个较大的体积(0.1毫升)的蛋白质样品。然而,因为它使用了一个样品比例为1:20的工作试剂(v / v),所以将干扰物质的影响降到最小。在酶处理程序提供了一样品处理酶，需要体积较小(10 -25μL)的蛋白质样品。然而,由于使用了样品比例为1:8的工作试剂(v / v)，所以在克服干扰物质浓度时灵活性降低，从而获得的检测水平较低。
实验一阿司匹林肠溶片的鉴别、检查与含量测定 一、目的要求 1、掌握比色法检查阿司匹林片剂中游离水杨酸的实验原理。 2、掌握两步滴定法测定阿司匹林片剂含量的实验原理。 3、掌握水杨酸类药物的鉴别、检查与含量测定的操作方法。 二、基本原理 （一）鉴别（三氯化铁反应） 阿司匹林为水杨酸酯类药物，加热水解后产生水杨酸，水杨酸及其盐在中性或弱酸性条件下（适宜pH为4.0~6.0），会与三氯化铁试液反应，生成紫堇色的铁配位化合物。 （二）检查——游离水杨酸（对照法） 阿司匹林生产过程中乙酰化不完全或贮存过程中水解产生的水杨酸对人体有毒性，而且分子中酚羟基在空气中被逐渐氧化成一系列醌型有色物质，使阿司匹林成品变色，因而需加控制。 阿司匹林为水杨酸酯，无游离酚羟基，不能直接与高铁盐作用，而其杂质游离水杨酸含酚羟基，可与高铁盐反应显紫堇色，因此，将适量阿司匹林供试品溶液与一定量水杨酸对照品溶液生成的色泽对比，即可控制阿司匹林中游离水杨酸的含量。该法灵敏，可检测出1 μg 的游离水杨酸。 （三）含量测定——两步滴定法 阿司匹林分子结构中含有酯键，易水解成水杨酸和醋酸，片剂中为防止酯键水解加入少量酒石酸或枸橼酸做稳定剂，因此在片剂中有酸性杂质，含量测定时为消除酸性杂质干扰，采用两步滴定法。 第一步中和，消除酸性杂质（酸性附加剂和降解产物）的干扰 阿司匹林： 水杨酸： 醋酸：
枸橼酸： 第二步水解后剩余滴定 （定量过量） （剩余） 三、仪器及试药 电热恒温干燥箱，万分之一分析天平，托盘天平（精度0.01 g），称量瓶，称量纸，药匙，量筒（10 mL、50 mL、100 mL），电炉，研钵，烧杯（25 mL），胶头滴管，容量瓶（100 mL），玻璃漏斗，滤纸，纳氏比色管（50 mL），锥形瓶（250 mL），酸滴定管，碱式滴定管，水浴锅，温度计，阿司匹林肠溶片，纯化水，乙醇（分析纯），水杨酸（分析纯），酒石酸（分析纯），中性乙醇（分析纯），三氯化铁（分析纯），盐酸（分析纯），硫酸铁铵（分析纯），酚酞（分析纯），氢氧化钠（分析纯)，邻苯二甲酸氢钾（基准试剂），硫酸（分析纯），无水碳酸钠（基准试剂），甲基红（分析纯），溴甲酚绿（分析纯） 四、实验内容与方法 （一）鉴别（三氯化铁反应） 取本品的细粉适量（约相当于阿司匹林0.1 g），加水10 mL，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。 （二）检查——游离水杨酸 取本品5片，研细，用乙醇30 mL分次研磨，并移入100 mL容量瓶中，充分振摇，用水稀释至刻度，摇匀，立即滤过，精密量取滤液6 mL，置50 mL纳氏比色管中，用水稀释至50 mL，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液3 mL，摇匀，30秒内如显色，与对照液（精密量取0.01%水杨酸溶液4.5 mL，加乙醇3 mL，0.05％酒石酸溶液1 mL，用水稀释至50 mL，再加上述新制的稀硫酸铁铵溶液3 mL，摇匀）比较，不得更深。（限量1.5%） （三）含量测定——两步滴定法 取本品30片，研细，用中性乙醇70 mL分数次研磨，并移入100 mL容量瓶中，充分振摇，再用水适量洗涤研钵数次，洗液合并于100 mL容量瓶中，再用水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取滤液10 mL（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇20 mL，
微量白蛋白测定试剂盒(免疫比浊法) 适用范围：本品用于体外定量测定人尿液中微量白蛋白的含量。 1.1规格 规格1： (试剂1：20mL；试剂2： 5mL)； 规格2： (试剂1：40mL；试剂2：10mL)； 规格3： (试剂1：80mL；试剂2：20mL)； 校准品（冻干品）：为选配: 规格1（0.3mL×1；1水平)；规格2（0.5mL×1；1水平)； 规格3（1.0mL×1；1水平)； 质控品（冻干品）：为选配 规格1（0.5mL×2；2水平)；规格2（1.0mL×2；2水平)。 1.2组成 试剂盒组成见表1定试 表1 微量白蛋白测定试剂盒组成
2.1试剂 2.1.1外观 试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰；试剂1、试剂2均为无色透明液体，不得有沉淀和絮状物。 2.1.2装量 每瓶不少于标示值。 2.1.3试剂空白吸光度 用指定的空白样品测试试剂（盒），在光径1cm下，在A340nm处测定试剂空白吸光度A≤0.2。 2.1.4分析灵敏度 测定30 mg/L的样品，吸光度差值△A≥0.01。
2.1.5线性范围 2.1.5.1在[2, 400]mg/L内,相关系数R≥0.990。 2.1.5.2在[2, 30]mg/L内，线性绝对偏差不超过± 3.0mg/L；(30, 400]mg/L内，线性相对偏差不超过±10%。 2.1.6 重复性 重复测试(45±9)mg/L和(90±18)mg/L样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。 2.1.7批间差 测定(45±9)mg/L和(90±18)mg/L样本，所得结果的批间相对极差（R）应不大于10%。 2.1.8准确度 ）中加入一定体积高于400mg/L的白蛋在正常浓度范围的临床样本（C 白纯品（C ）或由纯品配制的标准溶液，回收率应在90%-110%范围内。 s 2.2校准品 2.2.1外观 校准品为冻干品。 2.2.2瓶间差 瓶间差CV≤10% 2.2.3准确度 与配套试剂组成测试系统，指标要求同2.1.8。 2.2.4 溯源性
血清白蛋白溴甲酚绿比色法 原理：白蛋白具有与阴离子染料结合的特性。在pH4左右，溴甲酚绿与白蛋白结合后由黄色变成绿色，绿色的深浅与白蛋白浓度成正比，因此，应用溴甲酚绿溶液可以直接比色测定血清白蛋白含量。 试剂：1、溴甲酚绿贮存液：在25ml烧杯中称入溴甲酚绿419mg，加入0.1N 氢氧化钠10ml，用玻璃棒搅拌，使溴甲酚绿完全溶解（如用溴甲酚绿钠盐，则称取432mg，用蒸馏水溶解）。用蒸馏水将此溶液全部转注入1L容量瓶中，再加入叠氮钠100mg，最后加蒸馏水至1L刻度。 2、0.1M枸橼酸缓（柠檬酸）冲液，pH4.2：分别配制0.1M枸橼酸及0.1M 枸橼酸钠，然后按12.3：7.7的体积比例混合，每升混合液中加入叠氮钠100mg。试测pH，如不符合要求，再在混合液中加入适量0.1M枸橼酸或0.1M枸橼酸钠以校正pH至4.2. 3、30%聚氧化乙烯月桂醚溶液：称取聚氧化乙烯月桂醚（Brij-35）30g，加入适量蒸馏水，在约60℃水浴中使溶液，然后加蒸馏水至100ml。 4、溴甲酚绿应用液：取溴甲酚绿贮存液250ml，加0.1M、pH4.2枸橼酸钠缓冲液750ml，再加30%聚氧化乙烯月桂醚溶液8ml，混合。 以上试剂可在室温保存数月。如不加叠氮钠则枸橼酸缓冲液和溴甲酚绿应用液应保存于冰箱中。 操作：将血清标本及标准血清用生理盐水作1/10稀释（例如血清0.20ml加生理盐水1.8ml），然后按表进行操作： 空白管标准管测定管 ul ul ul 血清标本20 标本血清40g/L 20 生理盐水20 溴甲酚绿应用液500 500 500 充分混合，室温放置10min后在1小时后用628nm处比色。以空白管校正光密度 到0点，读取各管光密度读数 计算：测定管光密度/标准管光密度*40 g/L=血清白蛋白g/L
医疗器械产品技术要求编号： 白蛋白检测试剂盒（BCP法） 1.产品型号/规格及其划分说明 序号规格 12×300Tests 22×2000ml 3R：5×60ml 4R：6×50ml 5R：5×80ml 6R：5×120ml 7R：10×50ml 8R：3×100ml 9R：4×54ml 2.性能指标 2.1外观 试剂R溶液褐黄色、无颗粒、无杂质。 2.2净含量 试剂盒各试剂装量应不小于标示值。 2.3试剂空白吸光度 应≤0.50。 用蒸馏水作为样品加入试剂测试,试剂空白吸光度A 600nm 2.4分析灵敏度 测试48g/L被测物时，吸光度差值（△A）应不小于0.10。 2.5线性范围 在（0～60）g/L范围内，其线性相关系数r≥0.990；浓度≥10g/L时，相对偏差≤20%；浓度＜10g/L时，绝对偏差≤4g/L。 2.6测量精密度 2.6.1重复性
用控制血清重复测试所得结果的重复性（变异系数，CV）应≤6.0%。 2.6.2批间差 批间差应≤10.0%。 2.7准确度 用参考物质进行测试，其相对偏差应≤10.0%。 3.检验方法 仪器基本要求 a）波长：600nm；恒温装置温度：37℃±1℃。 b）全自动生化分析仪。 测试方法按说明书规定，因不同机型使用试剂最终浓度相同。在此推荐以本公司BECKMAN或HITACHI全自动生化分析仪进行测试。 3.1外观和性状 目测检查，试剂R溶液性状应符合2.1的要求。 3.2净含量 用通用量具进行测量，应符合2.2的要求。 3.3试剂空白吸光度 用蒸馏水作为样品测试试剂（盒），在测试波长600nm下，记录测试启动时的 吸光度（A 1）和约5min(t)后的吸光度（A 2 ），A 2 测试结果即为试剂空白吸光度测 定值，应符合2.3的要求。 3.4分析灵敏度 用48g/L的样品测试试剂（盒），记录试剂（盒）在600nm下产生的吸光度改变，换算为吸光度差值（△A），结果应符合2.4的要求。 3.5线性范围 用接近线性范围上限高浓度（活性）的样品和接近线性范围下限低浓度（活性）的样品，混合成5个稀释浓度（xi）。分别测试试剂（盒），每个稀释浓度测试3次，分别求出检测结果的均值（yi）。以稀释浓度（xi）为自变量，以测定结果均值（yi）为因变量求出线性回归方程。计算线性回归的相关系数（r）。稀释浓度（xi）代入线性回归方程，计算yi的估计值及yi与估计值的相对偏差或绝对偏差，应符合2.5的要求。
缺血修饰白蛋白测定试剂盒（DTE比色法） 适用范围：用于体外定量测定人血清中缺血修饰白蛋白的含量。 1.1 包装规格 a) 试剂1：1×15mL 试剂2：1×5mL b) 试剂1：2×45mL 试剂2：2×15mL c) 试剂1：4×60mL 试剂2：4×20mL d) 试剂1：2×60mL 试剂2：2×20mL 1.2 主要组成成分 1.2.1试剂1主要组分 三羟甲基氨基甲烷缓冲液30 mmol/L ） 1 mmol/L 硫酸钴（CoSO 4 表面活性剂及稳定剂适量 1.2.2试剂2主要组分 三羟甲基氨基甲烷缓冲液30 mmol/L 1,4-二硫代赤藓糖醇（DTE） 1 mmol/L 表面活性剂及稳定剂适量 2.1 外观 试剂1应为无色至浅红色液体；试剂2应为无色至浅红色液体。 2.2 试剂装量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.3 试剂空白吸光度 在505nm波长处测定试剂空白吸光度，应≤0.1。
2.4 分析灵敏度 测定IMA含量为80 U/mL样本时，其△A应≥0.005。 2.5 线性范围 2.5.1在（5，150）U/mL范围内，线性回归的确定系数应不低于0.990； 2.5.2测试浓度在（5，15] U/mL范围内，线性绝对偏差应不超过±1.5 U/mL；测试浓度在（15，150）U/mL范围内，线性相对偏差应不超过±10%。 2.6 测量精密度 2.6.1重复性：用两个水平质控血清重复测试其变异系数（CV）应不超过5％。 2.6.2批间差：抽取3个不同批号试剂，对同一份样本进行重复测定，相对极差≤10％。 2.7 准确度 在样本中加入一定量的纯品，计算回收率，应在85%～115%范围内。 2.8 稳定性 取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月的试剂进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
作为学有机化学的，在平时工作实验中，最最不可缺少的就是TLC点板跟踪反应，而显色剂的种类大家都知道有多少种？好的显色剂不但能够让你工作更加效率，更多的有可能帮助你减少失误。那么今天，这一篇，笔者罗列了几乎所有常用的显色剂，希望能够帮助到大家。注：TLC在浸润以下显色剂后，都一般需要热烤才能显色！ 1.4-甲氧基苯甲醛显色(适用于：所有有机化合物) 原料 1. 4-甲氧基苯甲醛(p-anisaldehyde) 13mL 2. 醋酸(AcOH) 5mL 3. 浓硫酸(conc. H2SO4) 18mL 4. 乙醇(EtOH) 478mL 调配方法：把1,2,4在冰浴条件下混合后，缓慢滴加3，冷藏保存。 2. 磷钼酸显色剂 (适用于：所有有机化合物，特别是含有氢氧基的化合物) 原料 1. 磷钼酸(12MoO3?H3PO4) 5g 2. 乙醇(EtOH) 100mL 调配方法：把1,2混合成溶液即可使用。 3. 铈–钼酸铵显色别名：Hanessian染色液(适用于：所有有机化合物) 原料 1. 钼酸铵((NH4)6Mo7O24?4H2O) 25g 2. 硫酸铈(Ce(SO4)2) 5g 3. 浓硫酸(conc. H2SO4) 50mL 4. 蒸馏水(H2O) 450mL 调配方法：把1,2,4混合后缓慢滴加入3，均匀搅拌，即可使用。 4. 茚三酮显色 (适用于：胺基化合物) 原料 1. 茚三酮((ninhydrin) 0.3g 2. 醋酸(AcOH) 3mL 3. 正丁醇(n-BuOH) 100mL 调配方法：把1,2,3混合成溶液即可 小窍门(对于比较难显色的胺基化合物)把TLC蘸一下HBr溶液在加热板上加热烤一下后再蘸取茚三酮显色剂。 注意：茚三酮接触皮肤的话也会将其染成粉紫色 5. 二硝基苯肼显色简称：DNP显色 (适用于：醛或酮类) 原料 1. 2,4-二硝基苯肼 12g 2. 浓硫酸(conc. H2SO4) 60mL 3. 蒸馏水(H2O) 80mL 4. 乙醇(EtOH) 200mL 调配方法：把1,3,4混合后缓慢滴加2，搅拌混合成溶液即可。 6. 碱性高锰酸钾显色 (适用于：所有有机化合物)
前白蛋白测定试剂盒(免疫比浊法)标准化操作规程 1 目的 规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。 2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。 3 适用范围本试剂适用于体外定量检测人血清中前白蛋白的浓度。 4 检验方法 本试剂盒采用免疫透射比浊法测定人血清中前白蛋白的浓度。 5 检验原理 样本中前白蛋白与抗体结合产生免疫复合物的浊度，根据浊度的高低与样本中前白蛋白的含量成正比。在340nm处测定吸光度的变化值，即可计算出样本中前白蛋白的含量。 6 标本要求 6.1标本类型: 新鲜血清标本，避免溶血。 6.2标本运输: 室温条件下运输。 6.3标本保存: 若不能及时测定，请尽快置于-20℃保存，避免反复冻融。 7 试剂及配套品 7.1试剂来源 长春迪瑞医疗科技股份有限公司前白蛋白测定试剂盒 7.2试剂组成 7.3试剂的稳定性与贮存 在2℃～8℃条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期12个月；启用后在2～8?C可稳定30天，试剂不可冰冻。 8 实验仪器及性能指标 8.1 实验仪器 迪瑞CS系列全自动生化分析仪 8.2试剂性能指标 8.2.1 空白吸光度：A≤0.30。 8.2.2分析灵敏度：测试30 mg/dL被测物时，吸光度变化△A≥0.015。 8.2.3 线性范围：11mg/dL～56mg/dL，线性相关系数r值≥0.9900；[11，19] mg/dL
区间内，线性绝对偏差应不超过±3.36mg/dL；（19，56] mg/dL区间内，相对偏差不超过±15％。 8.2.4 准确度：相对偏差应在±20%范围内。 8.2.5 测量精密度： 重复性：CV≤7.0%。 批间差：R≤8.0%。 8.2.6空白限≤11.00mg/dL。 9 校准 9.1校准品 前白蛋白校准品 9.2校准品存贮及使用注意事项 参见前白蛋白校准品使用说明书。 9.3 校准程序 建议使用试剂盒配套的校准品：进行5点校准测定，测定后仪器自动拟合成校准曲线。当试剂批号更换或质控失控时，需要重新校准。 10 质量控制 10.1质控品 前白蛋白质控品 10.2质控品存贮及使用注意事项 参见前白蛋白质控品使用说明书。 10.3质量控制 建议使用迪瑞公司质控品，进行质量控制。实验室应自行建立质控区间和限值，若质控值失控，应采取纠正措施。 11操作程序 11.1试剂配制 试剂1和试剂2均为液体试剂，可直接使用。 11.2 项目参数： 11.3 样本测试步骤：
前白蛋白(PA)测定试剂盒(免疫比浊法) 适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中前白蛋白的含量。 1.1规格 试剂1（R1）：2×80mL、试剂2（R2）：2×16mL； 试剂1（R1）：5×60mL、试剂2（R2）：5×12mL； 试剂1（R1）：2×60mL、试剂2（R2）：2×12mL； 试剂1（R1）：3×40mL、试剂2（R2）：3×8mL； 试剂1（R1）：1×50mL、试剂2（R2）：2×6mL； 试剂1（R1）：1×20mL、试剂2（R2）：1×6mL； 试剂1（R1）：4×60mL、试剂2（R2）：4×12mL； 试剂1（R1）：4×80mL、试剂2（R2）：4×16mL； 600T：试剂1（R1）：168mL、试剂2（R2）：33mL。 1.2组成 试剂盒由试剂1（R1）和试剂2（R2）组成。
2.1 外观 液体双试剂：试剂1（R1）（缓冲液）：无色液体，试剂2（R2）（启动液）：无色或淡黄色液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 空白吸光度 在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应<0.1 ABS。 2.4 分析灵敏度 浓度为5mg/dL时，吸光度变化范围在（0.01- 0.10）之间。 2.5 线性范围 在3-52]mg/dL线性范围内，线性相关系数r2 ≥0.990。在（20–52 ]mg/dL范围内的相对偏差≤10%；测定结果3-20] mg/dL时绝对偏差≤2 mg/dL。 2.6 精密度 试剂盒测试项目精密度 CV< 5 %。 2.7 批间差 不同批号之间测定结果的相对偏差应< 6 %。 2.8 准确度 回收率：回收率应为 80%-120%范围内。 2.9 稳定性
血清白蛋白测定标准操作规程 1 检验申请 单独检验项目申请：血清白蛋白测定(缩写ALB)；组合项目申请：血生化中肝功能测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。 2 标本采集与处理 2.1标本采集 2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。 2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。 2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。 2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。 2.1.5下列标本为不合格标本 2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。 2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。 2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。 2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。 2.2标本保存 2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。 2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定一周，普通冰箱中（2～8℃）稳定一个月。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。 2.3标本采集的注意事项 2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。 2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。 3 方法原理 血清中的白蛋白与溴甲酚绿在PH=4.2的条件下结合生成绿色复合物，溶液由黄色变为绿色，其颜色深浅与白蛋白浓度成正比，通过在630nm处测定其吸光度可得出白蛋白的含量。 PH=4.2 白蛋白 + 溴甲酚绿 --------------- 绿色复合物 4 试剂及其他用品 4.1试剂：溴甲酚绿法测定白蛋白试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。 4.2试剂盒保存：保存于2～8℃，不开盖情况下至标签的失效期。开盖后放于仪器的冰箱中至少稳定14天。开盖后避免污染。变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 4.3试剂盒准备：液态单试剂型，即开即用，无特殊准备 4.4试剂盒主要成分：缓冲液（pH 4.2）50 mmol/L，溴甲酚绿0.25 mmol/L，其中含有稳定剂与保护剂＜0.1%。 5 校准品与校准模式 5.1校准品: Beckman-Coulter SYNCHRON LX MULTI 校准液（P/N 442600），其白蛋白浓度值可溯源至美国国家标准技术研究所（NIST）标准参考材料。 5.2校准类型和校准点数目：线性模式，1个校准点。