目录
绪论 (1)
1. 离体快繁过程中的问题、原因及防治措施 (1)
1.1 污染问题 (2)
1.1.1 污染的来源 (2)
2.1.2 污染的防治措施 (2)
1.2 褐变问题 (3)
1.2.1 褐变的原因 (4)
1.2.2 克服外植体褐变的措施 (4)
1.3 玻璃化问题 (4)
1.3.1 玻璃化发生的原因 (4)
1.3.2控制组培苗玻璃化的措施 (5)
1.4 遗传稳定性 (5)
1.4.1 影响遗传稳定性的因素 (6)
1.4.2 提高遗传稳定性，减少变异的措施 (5)
1.5 黄化问题 (5)
1.5.1 黄化原因 (6)
2. 离体快繁的前景与探讨 (6)
2.2适应现状的需求 (6)
2.3存在问题 (6)
参考文献 (6)
致谢 (6)
浅析植物离体快繁中常见的问题
摘要
植物组织培养是20世纪初发展起来的一项新技术，是现代农业生物技术的一个重要组成部分，已经日益广泛地应用于园艺植物的脱毒和快繁等方面。本文针对植物组织培养中常出现的问题进行了分析，探讨了污染、褐变、玻璃化、遗传稳定性、黄化等发生的可能原因，并提出了相应的防治措施。
关键词
离体快繁；污染；褐变；玻璃化；遗传稳定性；黄化
Analysis of the Common Problems in Plant Vitro Propagation
Pick to
Plant tissue culture is developed in the early 20th century, a new technology of modern agricultural biotechnology, is one of the important constituent, has increasingly widely applied in the enviroment of horticultural plants and rapid propagation, etc. Aiming at the plant tissue culture often appears the question were analyzed, pollution, Browning, vitrification, genetic stability, such as possible reasons Browning, and puts forward the corresponding prevention cuo
Key words
Propagation in vitro; contamination; browning; vitrification; genetic stability; etiolation
绪论：
植物组织培养是研究植物生长和分化规律的重要手段，是在人工控制条件下培养外植体再生器官或植株的技术，可以在不受植株体其它部分干扰下研究被培养部分生长和分化的规律，并可以利用各种培养条件影响它们的发育进程。植物组织培养技术，作为现代生物技术的一个重要手段，已在很多领域得到了广泛的应用。植物离体快繁可节约人力和物力，并可人为控制培养基中的各种成分和环境条件，全年均可连续试验和生产，因而近年来在农业上的应用十分广泛。但是，在开展植物组培快繁技术研究和生产的过程中，我们发现有一些较常见的问题，有时会严重影响组培工作效率和进展，降低组培快繁的经济效益。譬如遗传稳定问题、玻璃化问题、污染及褐化问题等。因此，探讨植物离体快繁过程中常见的问题、分析其原因、提出有效的防治措施，是至关重要的。
1 离体快繁过程中的问题、原因及防治措施
1.1 污染问题
1.1.1 污染的来源
首先应考虑无菌操作的规范性,培养基接种工具消毒是否彻底。在此基础上植物组培中的污染主要是真菌、细菌引起的污染。真菌在培养条件下生长快，很容易观察到，而细菌潜伏期长，植物组织一般不表现症状，所以很难在前期和肉眼观察到。国外有关学者认为细菌污染的来源主要有三个：一是材料内部灭菌处理不好，这样造成的污染占污染总数的1/3～1/2。二是在正常的灭菌的条件下，内生菌能够存活，这样的污染占污染源的1/4。三是来自寄生植物的污染占1/4～1/2。同时认为有些植物的昆虫和螨虫的体表带有霉菌的孢子和细菌，在九、十月份是重要的污染源，因多种植物昆虫处在大量繁殖阶段，此时大量昆虫造成的污染源最易造成组培污染的严重发生。近六年来，我们通过对猕猴桃、樱桃、托柄菝葜及大花非洲菊初级培养污染的研究中发现，高温、多雨的环境更有利于污染的发生，而且随着植物材料年龄的增长，植物材料的健康状况不断恶化，组培污染也会更加严重。另外，外植体的状况，环境条件和操作过程也是引起污染的主要原因。
2.1.2 污染的防治措施
首先严格保证无菌操作的规范性，对培养基接种工具及接种室的严格消毒处理。
然后（1）抗生素对细菌污染的防治。植物组培污染的控制取决于灭菌技术、灭菌设备、外植体年龄和环境条件等许多方面。尽管在植物组培过程中尽量使无菌条件更完善，但是污染还是经常发生，甚至有时整个实验室的组培苗部分污染或全部死亡，这是无法挽回的巨大损失，因此人们对细菌污染研究的较多。细菌污染的消除有些研究人员希望用抗生素防治，抗生素可以直接加入到培养基中，也可以用抗生素喷洒或浸泡外植体。但植物种类不同，所用抗生素的种类、浓度和处理时间也不同，还有的抗生素对污染消除根本不起作用，因此必须对不同植物采用不同的抗生素的种类、浓度和处理时间进行实验探讨。一般情况下，为消除革蓝氏阳性菌对有些木本植物污染茎段组培苗，可在培养基中加入氨中噻肟头孢菌素、四环素、利福平和多粘菌素B分别以25mg/L、25mg /L、6mg/L 和6mg/L浓度的混合物，可使细菌完全被消除。另外，用头孢菌素Ⅱ和链霉素消除某些观赏植物外植体中的内生菌也有非常明显的效果。总之针对不同植物品种要想找到一种合适的抗生素处理组合是比较困难的，工作也较繁琐。国内外有关学者都认为没有一种抗生素对所有的细菌都有效，即使有效，抗生素消除植物组培污染的方法也是暂时的解决方案，如果长期使用抗生素消除污染，必然对组培苗的生长、分化和生根造成一定的影响。
（2）真菌污染的防治。抗生素消除细菌的研究比较多，但目前酵母菌污染的研究相对较少，G B Poulsen等在苹果砧分裂组织微生物消除的研究中，测试了几种物质对酵母菌的毒性，虽然它们对植物材料都没有伤害，但是没有一种能够消除酵母菌。胍类化合物是对两种酵母菌有毒的唯一复合
物，但它对分裂组织有毒害作用。霉菌污染的一个重要特点是迅速，难控制。目前，关于霉菌污染的研究还很少，有人建议用防腐剂消除霉菌污染，但是还未见报到。
（3）常用防治污染方法。目前外植体表面灭菌的方法除常规的氯化汞、双氧水、酒精和次氯酸钠外，用于厕所消毒的家净也是一种良好的表面杀菌剂。G Rreustle等学者在对葡萄组织培养污染的研究中发现家净表面消毒效果很好，家净虽然效果极好，价格便宜，但内生菌潜伏期长，内寄生性强，危险性大，对内生菌而言，任何一种表面消毒剂对外植体的内生菌几乎都是无能为力的，除了在培养基中加入杀菌剂消除植物组培污染外，还有许多其他的方法减少污染，如用抗微生物药剂定期喷洒活植物新梢、在新梢或发芽期套袋法隔绝微生物的侵入等方法来获得外植体接种消毒成功率。另外，培养环境和接种环境的各处不同，灭菌的方法以及新型杀菌设备的应用在植物组培污染中也起着一定的重要作用。
1.2 褐变问题
1.2.1 褐变的原因
褐变是材料在接种后，材料表面出现褐色物质甚至培养基也呈褐色的现象。在完整的植物体细胞中，酚类化合物与多酚氧化酶是分隔存在的，切割外植体使其受到创伤刺激，受伤细胞内的酚类化合物和多酚氧化物便流出，酚类化合物被多酚氧化物氧化成褐色的醌类物质和水。醌类物质又会和酪氨酸酶发生作用使外植体蛋白质聚合，导致外植体生长停顿，直至死亡。许多植物尤其是木本植物组织中含有较多的酚类化合物，褐变现象比较严重。影响外植体褐变的因子主要有：外植体酚类物质的含量、PPO活性上的差异、外植体的大小、培养基的成份、激素类型等。
1.2.2 克服外植体褐变的措施
在植物组织培养中，一般都是从培养基的组成，如培养基的无机盐成份、蔗糖浓度、添加的激素的种类和浓度、加入吸附剂活性炭或PVP（聚乙烯吡咯烷酮）等来防治外植体褐化。
（1）选择适当的外植体
不同时期和年龄的外植体在培养中褐变的程度不同，选择适当的外植体是克服褐变重要手段。避免在夏季高温季节取材，选择幼苗、褐变程度轻的品种和部位作为外植体。
（2）外植体预处理
对较易发生褐变现象的外植体可采取一些措施进行预处理，即先用流水冲洗外植体，然后放置在5℃左右的冰箱中低温处理12～14h。消毒后先接种到只含蔗糖的琼脂培养基中培养3～7d，使组织中的酚类物质部分渗入培养基中，取出外植体用0.1%的漂白粉溶液浸泡10min，然后再接种到合适的培养基上。
（3）筛选合适的培养基和培养条件
降低培养基中的盐浓度，减少BA和KT的使用，采取液体培养，初期在黑暗或弱光条件下培养，保持较低温度（15～20℃）也是降低褐变的有效方法。
（4）添加抗氧化剂和系缚剂
在培养基中添加抗氧化剂，或用抗氧化剂进行材料的预处理或预培养，可预防醌类物质的形成，对易发生褐变的植物材料培养有很好的辅助作用。常用的抗氧化剂有抗坏血酸、聚乙烯吡咯烷酮、牛血清蛋白、硫代硫蛋白等。另外，添加1-5g/L的活性炭对酚类物质的吸附效果也很明显。
（5）连续转移
对易发生褐变的植物，在外植体接种后1~2d立即转移到新鲜培养基上,可减轻酚类物质对培养物的毒害作用,连续转移多次基本解决外植体的褐变问题。
1.3 玻璃化问题
1.3.1 玻璃化发生的原因
（1）琼脂和蔗糖浓度与玻璃化成负相关，琼脂或蔗糖浓度越高，玻璃苗的比率越低。Daniel G. W. Brown认为玻璃化可能是培养基渗透势不当所致。碳源不仅为芽的形成提供能量，而且也起渗透调节作用。随琼脂浓度及纯度的增加，培养基硬度增加，从而影响其衬质势和水分状况。
（2）试管苗玻璃化可能是培养基内水分状态不适应的一种生理变态。Debergh等研究表明，液体培养基的水势影响玻璃苗的形成，Ziv等认为只要降低培养容器中的相对湿度，就可以降低玻璃苗的比例。刘思颖等（1988）测得丝石竹玻璃苗叶片的水势约为正常苗的1.9倍，含水量为正常苗的2.09-2.21倍。自由水和高湿度可能与肉质嫩梢的形成有关。Davis等研究表明，液体培养是导致玻璃化的主要原因。
（3）许多学者证明玻璃化与培养基中BA浓度和培养温度成正相关，BA浓度越高或培养温度越高，玻璃苗比率越大。Debergh曾用14C-KT研究表明，随琼脂浓度的增加，KT利用率降低。同时也证明，随BA浓度的增加，玻璃化率增加。Bornman等用14C-BA研究表明，14C-BA的积累与不定芽分化和玻璃化是同步的。玻璃化苗的一个重要特征是叶脉明显加长，而GA3也有类似效应，也许GA3促进了细胞过度生工，从而导致玻璃化。生长素可以改变细胞壁的机械特性，使其具有更大的可塑性。
（4）许多研究表明，玻璃化被认为是一种非受伤协迫条件下形态上的反应。玻璃苗苯丙氨酸解氨酶（PAL）的活性低于正常植株。在协迫条件下乙烯的快速合成，又通过抑制氨基环丙烷羧酸（ACC）酶的形成，对乙烯起反馈调节作用。通过改善气体交换防止玻璃化形成，可能与克服乙烯反馈抑制有关。一种与膜有关的过氧化物酶直接或间接掺入ACC合成乙烯。现已证明，IAA-氧化酶体系至少在乙烯合成的最后一步起作用。IAA含量降低将进一步通过IAA调节S-腺苷甲硫氨酸（SAM）转化成ACC这一过程，从而降低了乙烯形成。Kevers等曾证明，对于玻璃苗，碱性过氧化酶同功酶活性增加，而酸性同功酶活性降低。但总可溶性过氧化物酶活性增加，仅限于碱性提取物。有人认为，玻璃化的形成主要是膜的效应而与核酸无关。乙烯促进了叶绿素分解及细胞的畸形发展。乙烯处理破坏了膜的结构，随着细胞壁解离，细胞内积累有在量纤维素及泡状物质。可见，乙烯对玻璃化的影响，与改变组织的生理生化及纤维结构有关。Hakkart F. A. 等认为玻璃苗是培养瓶内气体与外界交换不畅造成的。密闭的封瓶口材料是导致玻璃化的原因之一（陈国菊等1992，李云等1996）。
（5）导致玻璃化的因素可能是培养基中高的含N量，特别是高的氨态N，。
（6）还有人发现不同部位的节段外植体与玻璃化有关，以留兰香基部节段所形成的试管苗玻璃苗严重，中部茎段次之，茎尖最好（柴明良）；重瓣丝石竹中部茎段出现玻璃苗较多，基部茎段较少，茎尖没有（郭达初）。郭东红等（1989）认为瑞香茎尖外植体大小与玻璃化相关，茎尖外植体越小，出现玻璃苗比率越大。玻璃化苗是在芽分化启动后的生长过程，碳、氮代谢和水分发生生理性异常所引起。其实质是植物细胞分裂与体积增大的速度超过了干物质生产和积累的速度，植物只好用水分来充涨体积，从而表现玻璃化。
1.3.2控制组培苗玻璃化的措施
尽管关于玻璃化的成因及其生理机制到目前为止仍未得出一致的结论，但对某些植物的玻璃化已得到有效的控制。这些研究表明，控制玻璃化要从培养的环境条件和生理生化方面入手，具体措施如下：
（1）利用固体培养，增加琼脂浓度，降低培养基的衬质势，造成细胞吸水阻遏。提高琼脂纯度，也可降低玻璃化。
（2）适当提高培养基中蔗糖含量或加入渗透剂，降低培养基中的渗透势，减少培养基中植物材料可获得的水分，造成水分胁迫。
（3）降低培养容器内部环境的相对湿度。
（4）适当降低培养基中细胞分裂素和赤霉素的浓度。
（5）控制温度适当低温处理，避免过高的培养温度在昼夜变温交替的情况下比恒温效果好。增加自然光照。试验发现，玻璃苗放于自然光下几天后茎、叶变红，玻璃化逐渐消失，因自然光中的紫外线能促进试管苗成熟，加快木质化。
（6）增加培养基中Ca、Mg、Mn、K、P、Fe、Cu、Mn元素含量，降低N和Cl元素比例，特别降低铵态氮浓度，提高硝态氮含量。
（7）改善培养容器的通风换气条件，如用棉塞或通气好的封口膜封口。
（8）青霉素G钾（2mg/L—6mg/L）能有效防治菊花试管苗的玻璃化，青霉素（40万单位/升）可降低芥菜试管苗的玻璃化。
（9）培养基中加入间苯三酚或根皮苷。
1.4 遗传稳定性
遗传稳定性即保持原有良种特性问题。虽然植物组织培养中可获得大量形态、生理特性不变的植株，但通过愈伤组织或悬浮培养诱导的苗木，经常会出现一些体细胞变异个体，虽然其中有些是有益变异但更多的是不良变异，诸如观赏植物不开花、花小或花色不正；果树植物不结果、抗性下降或果小、产量低、品质差等问题，在生产上造成很大损失，并容易引起经济纠纷，如香蕉试管苗中的不良变异表现植株矮小、不结果，给果农造成损失。
许多研究表明，在植物组织与细胞培养过程中，细胞、组织和再生植株以及后代中会出现各种变异这种变异具有普遍性，既不限于某些物种，也不局限于某些器官。变异所涉及到的性状也相当广泛。体细胞无性系变异的频率相当高，且不能逆转，有的高达40%～60%，如非洲堇的个别品种、玉簪等，有的高达100%，如马铃薯、菠萝等。
1.4.1 影响遗传稳定性的因素
（1）基因型：基因型不同，发生变异的频率也不同。在玉簪中，杂色叶培养的变异频率为43%，而且绿色叶仅为1.2%。甘蔗品系H37-1933和H50-7209中得到的再生植株分别有12.1%和34.8%变异香龙血树愈伤组织培养再生植株全部发生变异嵌合体植株通过组培，其嵌合性更大。单倍体和多倍体变异大于二倍体。
（2）继代次数：根据报道，试管苗的继代培养次数和时间影响植物稳定性，是造成变异的关键因素。一般随继代次数和时间的增加，变异频率不断提高。朱靖杰（1995）报道，北蕉诱导不定芽产生，其变异率继代5次为2.14%；10次为4.2%；继代20次后则100%发生变异。因而香蕉继代培养不能超过一年。经长期继代培养的烟草愈伤组织再生植株，其花和叶的不正常性是很普遍的，而短期培养物却未发现变异研究表明，变异往往出现在由年龄渐老的培养物所再生的植株中，而由幼龄培养物再生的植株一般较少发生，也就是说，各种变异发生的频率随组织培养时间的增加而提高。长期营养繁殖的植物变异率较高，有人认为这是由于在外植体的体细胞中已经积累着遗传变异。
（3）发生方式：离体器官发生有5种类型，以茎尖、茎段等发生不定芽的方式繁殖不易发生变异或变异率极低。甘肃农业大学通过节培法繁殖名贵葡萄品种，经5～8年继代培养，其变异频率与常规方法相同，在数成株中仅发现一株变异此外用菊花茎尖、腋芽培养，变异较低，而从花瓣诱导的变异较高。由花椰菜根诱导的不定芽和再生植株中有不少变异，而从顶端分生组织（花菜）产生的4000个再生植株基本没有变异。通过愈伤组织和悬浮培养分化不定芽的方式获得再生植株变异率较高。通过分化胚状途径再生植株变异较少，通过茎尖或分生组织培养增殖侧芽可以保持基因型基本不变。在高浓度的激素作用下，细胞分裂和生长加快，不正常分裂频率增高，再生植株变异也增多。
1.4.2 提高遗传稳定性，减少变异的措施
在进行植物快速繁殖时，应尽量采用不易发生体细胞变异的增殖途径，以减少或避免植物个体或细胞发生变异，如采用生长点、腋芽生枝、胚状体繁殖方式，可有效地减少变异缩短继代时间，限制继代次数，每隔一定继代次数后，从新开始接外植体进行新的继代培养；取幼年的外植体材料；采用适当的生长调节物质种类和较低的浓度；减少或不使用培养基中容易引起诱变的化学物质；定期检测、及时剔除生理、形态异常苗，并进行多年跟踪检测，调查再生植株开花结实特性，以确定其生物学性状和经济性状是否稳定。
1.5 黄化问题
1.5.1 黄化原因
组培苗黄化是指在组织培养过程中由于培养基成分、环境、激素、碳水化合物等各种因素引起
的幼苗整株失绿，全部或部分叶片黄化、斑驳的现象。黄化现象在植物组织培养中比较常见，特别在部分木本花卉中较为常见，引起黄化的主要原因是培养基中Fe的含量不足；各矿质营养不均衡；培养环境通气不良，瓶内乙烯含量升高；激素配比不当；糖用量不足或长时间不转移糖已耗尽；PH 值变化过大；培养温度不适；光照不足等。
1.5.2黄化解决的方法
在配制母液和培养基的制作过程中，要检查仪器设备是否准确，还要认真细致地核对每项称量的每一个环节；及时转接培养物；使用透气的封口膜以改善瓶内通气状况；适当调节pH值、激素配比和无机盐浓度；配制培养基时切记不要忘记加糖；控制培养室内的温度；适当增加光照；另外，在培养基中添加抗生素类物质如青霉素、链霉素、头孢霉素等，有时也会出现幼苗黄化现象，应适当减少用量或停止使用。
2 离体快繁的前景与探讨
2.1其优点:离体快繁可快速繁殖某些稀有植物或有较大经济价值的植物; 解决无性繁殖的问题
2.2适应现状的需求
(1) 依靠自然条件在较短时间内繁殖稀有植物和经济价值较高的植物，受到地理环境和季节的限制，很难达到快速、高效的目的；特别对于在短时期内需要达到一定数量，才能创造应有价值的植物，时间就是效益，只有通过组织培养的方法才能满足这一要求。用组织培养法繁殖植物，这是组织培养应用于生产的主要的和成效最大的实例。首先是在兰花上的成功应用。自Morel在1960年得到兰花组织培养苗后，很快应用于生产，形成了组织培养法繁殖兰花工业。
（2）由于组织培养法繁殖植物的明显特点是快速，每年可以数以百万倍速度繁殖，因此对一些繁殖系数低，不能用种子繁殖的特优植物品种的繁殖，尤为意义重大。提高植物离体快繁的质量，使抗性加强，产量高，品质好，提高生产量，使其更广泛地应用。在植物大规模繁殖期间，应特别注
意污染及褐化（木本植物）问题,污染率、褐化率过高会导致生产成本过高。
2.3存在问题
(1)组培中虽可获得大量形态和生理稳定不变的植株，但也经常会出现一些体细胞变异
的个体，大多是有益的变异，但更多的是不良变异。
(2)在植物大规模繁殖期间，应特别注意污染及褐化（主要是木本植物）问题,污染率、褐化率过高会导致生产成本过高。
参考文献
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[14]李浚明编译 . 植物组织培养教程，北京：北京农业大学出版社， 2002
致谢
本次论文设计历经几个月的时间终于顺利完成。其间最应该感谢的是我的指导老师陈老师，在设计毕业论文期间得到了陈老师的悉心指导。在本论文的研究和写作中，给予了我无微不至的关怀和全面的指导。在论文设计中，严格要求我，在专业知识上对我的帮助，使我少走了很多弯路，对论文的完成，给予了莫大的帮助。对我的谆谆教诲和言传身教使我受益无穷。老师渊博的知识、诲人不倦的师德、严谨的治学态度、兢兢业业的工作作风和对科学知识执着的追求与探索精神深深的影响着我，不仅在学术上给我以动力和指导，而且从思想上激励和教育着我。在此，向我的指导老师致以最诚挚的谢意。
植物离体快繁技术的综述 黄新 （生物科学技术学院2009级生物技术一班） 摘要：植物快繁技术是一种全新的育苗技术，是现代计算机智能控制技术与生物技术有机结合的高新农业技术。运用植物生长模拟计算机为植物创造最为适宜的温、光、气、热、营养、激素环境，使植物的生理潜能得到最大的发挥，植物的生根基因尽快表达，从而实现植物的快速生根。它的推广应用将会带来一次全新的育苗革命。本文简要介绍植物快繁技术程序、相关培养技术以及植物快繁相关问题的讨论。同时还对植物组织培养脱毒快繁技术的应用前景作了分析。 关键词：植物离体快繁、愈伤组织、不定芽增殖、腋芽增殖、愈伤组织增殖、体细胞胚增殖、玻璃化问题、褐化问题、应用前景 1植物离体快繁概况 1.1研究简史 离体微繁殖技术的应用，首先应归功于Morel，他在1960年首先建立了兰花离体繁殖的方法（原球茎繁殖）。目前已有近400种植物的离体繁殖已获得成功，其中许多具有重要经济价值的花卉(如兰花、菊花、石竹)、果树(草莓、无籽西瓜、葡萄)、经济作物(马铃薯、甘蔗)、林木(桉树、杨树)均已在种苗生产上广泛应用，取得了巨大的经济和社会效益。 我国快速繁殖植物的种类达443种之多荷兰是试管苗的生产王国 1.2植物离体快繁的定义 快速繁殖（rapid clone propagation）：也叫离体繁殖（in vitro
propagation）、微体繁殖（Micropropagation），是指在无菌条件下，将植物体的器官、组织或细胞培养于人工培养基中，并辅以人工控制环境，使其生长出完整植株的繁殖技术。 追究植物组织培养脱毒快繁技术的发展简史，在11世纪就出现的热处理脱毒法，最早解决一些作物的病毒病害问题[1]。本世纪50年代发展的植物组织培养技术为脱毒提供了一条有效途径。现在植物的脱毒技术有多种，其中应用最广泛的有三种：热处理法、茎尖培养脱毒法、抗病毒药剂法，将不同的方法相结合起来应用效果更好。它们的脱毒原理各不相同。 2植物离体快繁的技术程序 无菌材料的建立芽苗的增殖生根及移苗 2.1无菌材料的建立 （1）初代培养：取材消毒接种培养 （2）外植体的选择主要应考虑以下问题： a)繁殖对象的品种典型性。 b)植物在自然条件下的繁殖特点。尽可能取自然繁殖器官的适当 部位作外植体， c)外植体的取材部位和大小、生理状态。 2.2芽苗的增殖 增值方式：不定芽增殖、腋芽增殖、愈伤组织增殖、体细胞胚增殖 2.2.1不定芽增殖 a)不定芽：从现存的芽以外的任何器官、组织上通过器官发生重新形 成的芽称之为不定芽。 b)特点：繁殖系数高、遗传稳定性较好、继代次数有限 c)注意事项：激素浓度不能过高；避免使用2，4-D等活性强的生长素， 以减少变异发生。 2.2.2腋芽增殖 腋芽进行离体培养时可不断生长，逐渐形成芽丛，反复切割和转移可不
常见园林景观植物一览 八角金盘： 指其掌状的叶片，裂叶约8片，看似有8个角而名。它叶丛四季油光青翠，叶片象一只只绿色的手掌。其性耐荫，在园林中常种植于假山边上或大树旁边，还能作为观叶植物用于室内，厅堂及会场陈设。八角金盘原产于日本暖地近海的山中林间。我国早年引种，现广泛栽培于长江以南地区，作城市绿化和庭园观赏，台湾尤多。为亚热带树种，喜阴湿温暖的气候。不耐干旱，不耐严寒。宁沪一带宜选小气候良好处种植，以排水良好而肥沃的微酸性土壤为宜，中性土壤亦能适应。 常春藤： 一种颇为流行的室内大型盆栽花木，尤其在较宽阔的客厅、书房、起居室内摆放，格调高雅、质朴，并带有南国情调。是一种株形优美、规整、世界著名的新一代室内观叶植物。可以净化室内空气、吸收由家具及装修散发出的苯、甲醛等有害气体，为人体健康带来极大的好处。原产欧洲、亚洲和北非。它对环境的适应性很强。喜欢比较冷凉的气候，耐寒力较强，可入药。在庭院中可用以攀缘假山、岩石，或在建筑阴面作垂直绿化材料。在华北宜选小气候良好的稍荫环境栽植，也可盆栽供室内绿化观赏用。常春藤绿化中已得到广泛应用，尤其在立体绿化中发挥着举足轻重的作用。花期5～8月，果期9～11月。
大叶黄杨: 常绿灌木或小乔木，高达5米；小枝近四棱形。叶片革质，表面有光泽，倒卵形或狭椭圆形，长3—6厘米，宽2—3厘米，顶端尖或钝，基部楔形，边缘有细锯齿；叶柄长约6—12毫米。花绿白色，4数，5—12朵排列成密集的聚伞花序，腋生。蒴果近球形，有4浅沟，直径约1厘米；种子棕色，假种皮桔红色。大叶黄杨叶色光亮，嫩叶鲜绿，极耐修剪，为庭院中常见绿篱树种。可经整形环植门旁道边，或作花坛中心栽植。其变种斑叶者，尤为美观。住宅可用以装饰为绿门、绿垣，亦可盆植观赏。花期6—7月，果熟期9—10月。
第二章植物离体繁殖 植物离体繁殖: 利用组织培养技术对外植体进行离体培养，短期内获得遗传性一致的大量再生植株。也叫快繁或微繁。 和传统方法突出特点： 1、繁殖效率高:增值率高，生长速度快，可周年生产，在一个短暂的时间，由单一个体开始，能产生出大量的遗传组成相同的植株。（如苹果矮化砧木茎尖8个月可繁殖6万株，石刁柏一个腋芽一年可繁殖７万株） 2、培养条件可控性强：人为提供培养基及小气候，便于对环境进行控制，省去田间栽培繁杂劳动。 3、便于管理、占地面积小：30m2可存放1万多培养瓶，约10万多苗木。 4、利于种质资源的保存及交换。 快速繁殖的应用 （1）短期内获得大量形状优良、整齐一致的种苗群体。加快引进新种、新育良种的繁殖，促进优良品种推广和应用。（2）大量繁育原来常规方法不能进行无性繁殖、难繁殖和繁殖速度慢的一些植物，尤其对一些珍、稀、濒危的植物的繁殖有更重要的意义。 （3）作为培育新品种的有效手段，繁殖和保存育种材料。如远缘杂种、多倍体、突变体。 （4）通过茎尖培养等技术脱毒，扩增脱毒苗，达到提纯复壮良种的目的。 一、植物快繁的器官形成方式 由于植物种类不同，器官再生及快速繁殖的方式也不同。 1、短枝发生型：外植体为带叶单芽茎段，培养为完整植株。 特点：一次成苗，培养过程简单，容易移栽成活，遗传性状稳定。例如：葡萄、红薯等试管苗繁殖。 2、器官型：外植体带有顶芽或腋芽。培养后形成丛生芽，转入生根培养基，诱导生根成苗，扩大繁殖。 特点：由单芽到丛芽，繁殖速度快，遗传性状稳定，多数花卉、苗木的快繁属于此类。 3、器官发生型：直接由外植体上或从愈伤组织产生不定芽，经过脱分化与再分化成苗。 特点：繁殖速度快，由愈伤组织再生植株，遗传不稳定。烟草、水稻、小麦、番茄等。 4、胚胎发生型：外植体脱分化产生愈伤组织或细胞团，再分化为胚状体产生小植株（球形期、心形期、鱼雷期、子叶期）特点：发生数量大，速度快，结构完整，人工种子繁殖，遗传变异。 5、原球茎发生型：兰科。 茎尖或腋芽外植体通过形成原球茎，而发育为完整植株。 二、植物快繁的程序和关键技术 离体无性繁殖的程序包括：无菌母株的制备，继代芽的增殖，芽苗生根培养，再生植株的锻炼和移栽。 1、无菌母株的制备 初代培养：在无菌条件下，制备无菌繁殖的材料称为无菌母株，或繁殖母株。 选取遗传性状优良、稳定，生长健壮、无病虫害植株上的外植体，经适当有效灭菌处理后，接种在培养基上，诱导其产生芽（腑芽或不定芽）和愈伤组织。 注意:培养基激素配比，取材的年龄、大小和生理状态。 初代培养的启动生长方式:腋芽被刺激后生长;茎段、叶片、其它器官伤口处产生不定芽；外植体切口产生愈伤组织。此阶段一般需要4-6周。 ↗愈伤组织 2、继代芽的增殖 无菌母株再次切割继代培养，芽分化增殖成丛芽，加快繁殖速度。 在快速繁殖过程中，随培养时间和继代次数增加，芽分化和生长速率降低，称为驯化现象，与内源激素和恒定培养条件有关，故可以调节激素配比或变温处理，提高繁殖速度。 3、芽苗生根培养 诱导无根苗生根的方法有两种：试管内生根和试管外生根。 1）试管内生根：将无菌小枝条转入生根培养基中进行培养。 提高生根率的措施： ①降低无机盐和有机物含量（如1/2MS或1/4MS培养基）
目录 绪论 (1) 1. 离体快繁过程中的问题、原因及防治措施 (1) 1.1 污染问题 (2) 1.1.1 污染的来源 (2) 2.1.2 污染的防治措施 (2) 1.2 褐变问题 (3) 1.2.1 褐变的原因 (4) 1.2.2 克服外植体褐变的措施 (4) 1.3 玻璃化问题 (4) 1.3.1 玻璃化发生的原因 (4) 1.3.2控制组培苗玻璃化的措施 (5) 1.4 遗传稳定性 (5) 1.4.1 影响遗传稳定性的因素 (6) 1.4.2 提高遗传稳定性，减少变异的措施 (5) 1.5 黄化问题 (5) 1.5.1 黄化原因 (6) 2. 离体快繁的前景与探讨 (6) 2.2适应现状的需求 (6) 2.3存在问题 (6) 参考文献 (6) 致谢 (6)
浅析植物离体快繁中常见的问题 摘要 植物组织培养是20世纪初发展起来的一项新技术，是现代农业生物技术的一个重要组成部分，已经日益广泛地应用于园艺植物的脱毒和快繁等方面。本文针对植物组织培养中常出现的问题进行了分析，探讨了污染、褐变、玻璃化、遗传稳定性、黄化等发生的可能原因，并提出了相应的防治措施。 关键词 离体快繁；污染；褐变；玻璃化；遗传稳定性；黄化 Analysis of the Common Problems in Plant Vitro Propagation Pick to Plant tissue culture is developed in the early 20th century, a new technology of modern agricultural biotechnology, is one of the important constituent, has increasingly widely applied in the enviroment of horticultural plants and rapid propagation, etc. Aiming at the plant tissue culture often appears the question were analyzed, pollution, Browning, vitrification, genetic stability, such as possible reasons Browning, and puts forward the corresponding prevention cuo Key words Propagation in vitro; contamination; browning; vitrification; genetic stability; etiolation
1.洋紫荆： 拉丁名：Bauhinia blakeana。 别名：红花紫荆、红花羊蹄甲 科中文名：苏木亚科 属中文名：羊蹄甲属 习性：喜光。不甚耐寒，喜肥厚、湿润的土壤，忌水涝。萌蘖力强，耐修剪。 观赏及应用：花期冬春之间，花大如掌，略带芳香，五片花瓣均匀地轮生排列，红色或粉红色，十分美观。洋紫荆终年常绿繁茂，颇耐烟尘，特适于做行道树；树皮含单宁，可用作鞣料和染料；树根、树皮和花朵还可以入药。 2.大叶榕 种中文名：高山榕 种拉丁名：FicusaltissimaBl. 科中文名：桑科 属中文名：榕属 别名：马榕、鸡榕、大青树、大叶榕（海南岛） 观赏应用：高山榕为桑科榕属的一种。高大乔木，树冠大；叶厚革质，有光泽；隐头花序形成的果成熟时金黄色。极好的城市绿化树种。树冠广阔，树姿稳键壮观。只是树体量太大，根系过于发达不太适宜作路树。非常适合用作园景树和遮荫树。又为优良的紫胶虫寄主树。 生长习性:阳性，喜高温多湿气候，耐干旱瘠薄，抗风，抗大气污染。耐贫瘠和干旱，抗风和抗大气污染，生长迅速，移栽容易成活。
3.大叶紫薇 科：千屈菜科 属：紫薇属 景观用途：适合用作高级行道树、园景树、林浴树与庭荫树，单植、列植、群植均可。适于各式庭园、校园、公园、游乐区、庙宇等，均可单植、列植、群植美化。特别推荐用于风景林建设，紫花品种宜用于中、近距离观赏，而红花品种可用于供远距离观赏的风景林。 生长习性：阳性植物。需强光。耐热、不耐寒、耐旱、耐碱、耐风、耐半荫、耐剪、抗污染、大树较难移植。喜高温湿润气候。 4.猫尾木 种：猫尾木 科：紫葳科 属：猫尾木属 拉丁名：：Dolichandrone cauda-felina (Hance) Benth. et Hook. f
目录 摘要 (1) 关键词…………………………………………………………………………………………… 1 Abstract…………………………………………………………………………………………… 1 Keywords (1) 1 污染 (2) 1.1 污染的种类 (2) 1.2 污染的因素 (2) 1.2.1 外植体本身 (2) 1.2.2 外植体灭菌 (2) 1.2.3 接种和培养环境 (3) 2 褐化 (3) 2.1 褐化原因 (3) 2.2 影响褐变的因素 (3) 2.3 防止褐变的方法 (4) 2.3.1 外植体的选择 (4) 2.3.2 适宜的培养基和培养条件 (4) 2.3.3 加入抗氧化剂和吸附剂 (4) 2.3.4 反复转接 (4) 3 玻璃化 (4) 3.1 玻璃化苗的特点与发生原因 (4) 3.1.1 玻璃化苗的特点 (4) 3.1.2 发生原因 (4) 3.2 影响玻璃化苗的因素 (5) 3.2.1 生长调节剂 (5) 3.2.2 温度 (5) 3.2.3 湿度 (5) 3.2.4 消毒方法 (5) 3.2.5 光照时间 (5) 3.2.6 培养基 (5) 3.2.7 继代次数 (5) 4 其他常见问题及其解决措施 (5) 4.1 初始培养阶段 (5) 4.2 继代培养阶段 (6) 致谢 (7) 参考文献 (7)
浅析植物离体快繁过程中常见的问题 摘要 探讨了影响了植物组织培养的主要因素，分析了污染、褐变、玻璃化及其他常见问题，并提出了解决措施。认为：污染主要是由灭菌不彻底和环境不洁造成的，加强外植体和培养基的灭菌，对培养环境及其用具彻底消毒，可大大降低污染率。植物品种、取材部位及环境条件与褐变的发生密切相关，选择适宜的外植体，进行外植体，调价抗氧化剂和吸附剂等可有效控制褐变。培养基的种类、温度、通气状况等会影响玻璃苗的发生，选择适当培养基，降低温度，增强光照，改善通风等可使玻璃化率降低。 关键词 组织培养；污染，褐化，玻璃化 According to the rapid propagation process of in vitro in common problem Abstract Discusses the influence of the main factors of plant tissue culture, this paper analyzes the pollution, Browning, vitrification and other common problems, and proposes the measures. Think: pollution is mainly composed of sterilization is not complete and the environment caused by the unclean, strengthen the explant and culture medium sterilization for training environment and its appliance disinfection, can greatly reduce the rate of pollution. Plant variety, based site and environment and the occurrence of Browning closely related, the choice of appropriate explant, explant, introduce antioxidants and adsorbent, etc can effectively control the Browning. The kinds of culture medium, temperature and ventilation situation will influence the occurrence of glass seedlings, choose proper culture medium, reduce the temperature, and enhance the illumination, improve ventilation can make glass transition rate to decrease. Keywords Tissue culture; Pollution, Browning, vitrificatio
第三章植物离体快速无性繁殖技术和脱毒培养技术 第一节、植物离体快速繁殖技术 一、植物离体快速无性繁殖的概念及其意义 1 概念 离体无性繁殖：指利用组织培养的方法进行植物离体培养，在短时间内获得大量遗传性一致的个体的方法，又称“离体繁殖，快速无性繁殖、微型繁殖”。 试管苗：由离体无性繁殖获得的植株称试管苗。 无性系：指有同一个体通过无性繁殖产生的一个群体，它们的遗传背景基本一致。 2 应用 （1）用来加速难繁殖和繁殖速度慢的植物的繁殖。 （2）无病毒苗木的繁殖。 （3）用于某些杂合园艺植物的繁殖。 （4）用于需要加速繁殖的特殊基因型。 二、植物离体快速无性繁殖的特点 1 优点 （1）首先体现在一个“快”字上。 （2）可人为控制条件，不受大自然的干扰 （3）快速培养脱毒苗。 2局限性 （1）一些植物快速无性繁殖技术的某些环节还没有突破。 （2）要对其成本、技术等进行估算。 （3）随继代次数增多，培养材料的分化能力下降。 三、离体无性繁殖中器官的发生形式 1 不定芽型 ２器官型 ３器官发生型 ４类胚体发生型 ５原球茎型 四、离体无性繁殖的程序 ?无菌母株的制备 ?茎芽的增殖 ?诱导生根 ?炼苗 ?再生植株的鉴定 五、植物组织培养中应注意的问题 １褐变 （１）褐变
褐变：指在组织培养过程中，由培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。 （２）克服褐变的方法 选择适宜的外植体（幼嫩材料、春季取材） 改善营养条件（连续培养） 在培养基中加入一些附加物 ２污染 （１）特点： 细菌污染的特点 在培养材料附近出现黏液状菌斑，一般接种1-2天一5可发现。特别应注意一种呈乳白色的细菌污染，这种细菌为芽孢杆菌，外被荚膜，耐高温，一般灭菌剂难以杀死，可随培养材料、用具传播，可出现在培养基表面，也可呈滴形云雾状存在于培养基内，发现及时淘汰，并对用过的器具严格高温灭菌。 真菌污染的特点 培养基上长霉，一般接种3-5天就可先，霉的颜色有黑、白、黄等，真菌污染的特点是污染部分有不同颜色的霉菌，接种3天，有时多达10天才能表现。 （２）克服方法： ?外植体灭菌不彻底 ?培养基及各种器具清洁灭菌不彻底 ?人为因素 ?超净工作区被污染 ?环境不清洁 ３玻璃化 （１）玻璃化 玻璃化：是试管苗的一种生理失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的茎、叶往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。 （２）克服方法 ?增加固体琼脂浓度，使细胞吸水受到阻碍。 ?提高培养基中的Ｃ、Ｎ比。 ?控制温度，增加自然光照。 ?附加一些物质 第二节、植物的脱毒技术 一、病毒的特性及其侵染 １病毒的特性 ２植物病毒的侵染途径 ３病毒在植物体内分布不均匀的原因 （１）分生组织中无微管系统，病毒不易移动。 （２）在旺盛分裂的分生细胞中，代谢活性很强，有竞争状态，抑制了病毒的复制。（３）在分生组织中存在高水平的内源激素，可以抑制病毒的增殖。 二、脱毒的方法 １物理方法
北方常用园林植物汇总 适于山坡种植的耐瘠薄，耐干旱的常绿植物:黑松:喜光，耐干旱瘠薄，不耐水涝，不耐寒。。因其耐海雾，抗海风，也可在海滩盐土地方生长。抗病虫能力强，生长慢，寿命长。黑松一年四季长青，抗病虫能力强，是荒山绿化，道路行道绿化首选树种。红松:红松是名贵而又稀有的树种。乔木，树冠卵状圆锥形。树皮灰褐色，呈不规则长方形裂片，内皮赤褐色。弱阳性，喜冷凉湿润气候及酸性土。观赏特性和园林用途:树形雄伟高大，宜作北方森林风景区材料，或配置与庭院中。白皮松:阳性树种，幼树耐半阴;耐寒性不如油松，但耐旱、耐湿和对土壤的适应性均较油松强。观赏特性和园林用途:白皮松是特产中国的珍贵树种，自古以来即用于配植宫庭、寺院以及个园之中。其树干皮呈斑驳状的乳白色，极为显目，衬以青翠的树冠，可谓独具奇观。宜孤植亦宜团植成林，或列植成行，或对植堂前。华山松:华山松高大挺拔，针叶苍翠，冠形优美，生长迅速，是优良的庭园绿化树种。在园林中可用作远景树、庭荫树、行道树及林带树，亦可用于丛植、群植，并系高山风景区之优良风景林树种。油松:园林用途:树干挺拔苍劲，四季常青，不畏风雪严寒，象征坚贞不屈、不畏强暴的气质。适于作独植、丛植、纯林群植外，亦宜行混交种植。龙柏:性耐修剪又有很强的耐荫性，故作绿篱，四季常青。可植于建筑之北侧荫处。侧柏:较耐寒，抗风力较差。耐干旱，喜湿润，但不耐水淹。耐贫瘠，可在微酸性至微碱性土壤上生长。生长缓慢。寿命极长。铺地柏:匍匐小灌木。阳性树，能在干燥的砂地上生长良好，喜石灰质的肥沃土壤，忌低湿地点。在园林中可配置于岩石园或草坪角隅，又为缓土坡的良好地被植物。沙地柏:匍匐形小灌木。耐旱性强，生于石山坡及砂地、林下。可作园林绿化中的护坡、地被及固砂树种用。蜀桧:蜀桧为阳性树种，喜光，耐寒，生长快速，不耐水湿，对土壤的要求不严。色叶植物: 随着季节的变化，植物在树形、色彩、叶丛疏密和颜色等方面发
植物快繁技术/植物克隆技术/植物傻瓜克隆技术/植物非试管高效快 繁技术 减小字体增大字体作者：本站来源：本站整理发布时间： 2008-1-1 18:33:32 植物快繁技术简介 所谓植物非试管高效快繁技术也就是植物克隆技术，也有人称之为植物非试管快繁技术、植物快繁技术、植物全光照喷雾育苗技术、全光雾插技术、微材料或微组织扦插育苗技术，喷雾育苗技术、喷雾扦插育苗技术、傻瓜克隆。无论叫做植物快繁还是植物克隆其原理和方法是一样的。 植物克隆技术（植物快繁技术）的关键是喷雾，十几年前就有权威单位推广全光照喷雾育苗技术，实际上也就是后来有人称之为植物非试管高效快繁技术，而现今更多被称为植物克隆、傻瓜克隆等时髦词汇。过去开发的喷雾全套设备是机械式，成本高达数万元，且容易锈蚀和损坏，一段时间后就没人再使用，而自从引进以色列微喷（头）技术后，微喷雾问题顺利以低成本形式解决，于是植物克隆技术（植物快繁技术）得以在全国迅速推广普及。 植物快繁技术（植物克隆技术）的推广的另一障碍就是自动控制仪的问题，进口的温湿控制设备好用但价格高，所谓的农业智能化计算机系统除了价格更高之外还总是不能成熟，使用起来问题百出，经常造成育苗的失败，笔者使用两年后才不得已开发了国产育苗仪，其低廉
的价格和丰富实用的功能很快被全国同行赏识。 植物克隆技术（植物非试管高效快繁技术）现在的投入只需2000余元，大力推广植物克隆技术、植物快繁技术利国利民。 植物非试管高效快繁技术的起源、应用和进展 植物傻瓜克隆技术是20年前从国外引进，又经过我国众多农业专家花费二十余年时间，逐步完善并成熟运用于规模生产一个系统配套，用于多种经济植物大规模无性快繁产业化生产的实用技术，又称非试管快繁技术、喷雾快繁技术等。此技术是一项崭新经济植物苗木快繁技术体系，它将植物组织培养快繁苗从试管培养基中解放到田间大地，是一场无性繁殖快速育苗的革命！是现代农业生物技术研究的一大创举！ 该技术育苗生产成本低，适用于国内外苗木交易市场和经济植物种苗繁殖工程。绿色快繁产业是一个永久性高效益产业，它可以带动制药产业、林纸产业、林草产业、园林绿化等其它产业，进而促进农业产业化、林业产业化、制药产业化和农业现代化的快速发展。还有利于生态城市、园林城市、森林公园、自然保护区的建设、生态环境改善、城市生态系统的改变、无性系造林、天然林保护工程、城市绿化工程以及与人们生活息息相关的如粮食作物、花卉、蔬菜、无公害蔬菜、野生蔬菜、濒危野生植物、果树、山野菜、药用植物、珍稀植物等高效经济植物以及新经济资源的开发利用。 植物快繁技术是古今中外人们十分关注的问题。从传统的扦插繁
植物组织培养：离体条件下利用人工培养条件在无菌情况下培养、生长、发育再生出完整植株的过程。外植体：由活体植物体上提取下来的，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。植物细胞的全能性：植物细胞具有该植物体全部遗传的可能性，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。脱分化：将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱出来，恢复细胞的分裂活性。再分化经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。 第二章设备与培养条件 实验室组成：化学实验室、洗涤菌室、无菌操作室、培养室、细胞学实验室。1化学实验室：完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、配制、培养基分装等。主要设备：药品柜、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器. 2 洗涤、灭菌室：完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。主要设备：水池、操作台、高压灭菌锅、干燥灭菌器（如烘箱）等。3无菌操作室（接种室）：主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序。主要设备：紫外光源、超净工作台、消毒器、酒精灯、接种器械（接种镊子、剪刀、解剖刀、接种针）等。4培养室：培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。主要设备：培养架（控温控光控湿）、摇床、培养箱、紫外光源等。5细胞学实验室：用于对培养物的观察分析与培养物的计数等。主要设备：双筒实体显微镜、显微镜、倒置显微镜等。6其他小型仪器设备：分注器、血球计数器、移液枪、过滤灭菌器、电炉等加热器具、磁力搅拌器、低速台式离心机等。 第三章培养基及其制备 培养基的成分主要可以分水、无机盐、有机物、天然复合物、培养体的支持材料等五大类。常用的培养基及特点如下：(1)MS培养基特点是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。(2)B5培养基其主要特点是含有较低的铵，这可能对不少培养物的生长有抑制作用。(3)White培养基其特点是无机机盐数量较低，适于生根培养。（4）N6培养基其特点是成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4含量高。(5)KM —8P培养基其特点是有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，广泛用于原生质融合的培养。水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。1无机营养--①大量元素，指浓度大于0.5mmol／L的元素等。其作用是：(1)N 是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分，是生命不可缺少的物质。(2)P 是磷脂的主要成分。在植物组织培养过程中，向培养基内添加磷，不仅增加养分、提供能量，而且也促进对N的吸收，增加蛋白质在植物体中的积累。(3)K 对碳水化合物合成、转移、以及氮素代谢等有密切关系。K增加时，蛋白质合成增加，维管束、纤维组织发达，对胚的分化有促进作用。但(4)Mg、S和Ca、Mg 是叶绿素的组成成分，又是激酶的活化剂；S 是含S氨基酸和蛋白质的组成成分。Ca是构成细胞壁的一种成分，Ca对细胞分裂、保护质膜不受破坏有显著作用，铁是一些氧化酶、细胞色素氧化酶、过氧化氢酶等的组成成分。同时，它又是叶绿素形成的必要条件。培养基中的铁对胚的形成、芽的分化和幼苗转绿有促进作用。也是植物组织培养中不可缺少的元素，缺少这些物质会导致生长、发育异常现象。②微量元素，作为酶的辅助因子或激活剂参与代谢的调节③缺素症④稀土元素，对试管苗的生长分化生根愈伤组织诱导生长体细胞胚的发生以及提高次生代谢物的产量有促进作用2有机营养成分①碳源，对细胞增殖起作用也影响细胞分化②维生素类，对生长分化等有很好促进作用③肌醇，糖类的转化中其重要作用，是细胞壁的构建材料④氨基酸，可直接被细胞吸收⑤天然复合物，对细胞的增殖与分化有明显的促进作用，但对器官的分化作用不明显3培养材料的支持物4活性炭吸附培养基及培养物分泌物中的抑制物质，抑制外植体褐变防止玻璃苗的产生促进培养物生长和分化促进生根5抗生素防止外植体内生菌造成的污染6抗氧化物，作用抑制外植体的褐变7硝酸银促进愈伤组织器官发生或体细胞胚胎发生的作用，使原再生困难的物种分化再生植株母液的配置与保存：①大量元素母液，即含N.P.K.Ca.Mg.S等六种盐类的混合溶液，一般配成浓度10倍或20倍母液。②微量元素母液，含有除Fe以外的B.Mn.Cu.Zn,Mo.CL等盐类的混合溶液，因含量低，一般配成100倍或200倍母液。③铁盐母液④有机物母液⑤植物生长调节物质母液1生长素类，作用促进细胞伸长和分裂，促进生根抑制器官脱落，性别控制，延长休眠，顶端优势，单性结实等作用2细胞分裂素类作用，促进细胞分裂和分化，诱导胚状体和不定芽的形成，延缓组织的衰老并增强蛋白质的合成。3赤霉素作用，加速细胞的伸长生长，促进细胞分裂。脱落酸具有抑制细胞分裂和伸长促进脱落和衰老促进休眠和提高抗逆等能力4多胺作用，调控部分植物外植体不定根不定芽画押体细胞胚发生发育以及延缓原生质体衰老促进原生质体分裂及细胞克隆形成方面具有明显的效果5多效唑作用，控长矮化，促进分枝，分嶪促进生根成花坐果，延缓衰老，提高叶绿素含量，增强植物抗逆性等培养基的配置准备工作1实验用具的准备2试剂药品的准备3 Vo=V1/t 或Vo=(C1*V1)/Co Vo=吸取母液体积（mL）V1=配置培养基体积（mL）Co=母液浓度（mg/L）C1=配置培养基的浓度（mg/L）T=母液扩大倍数①取规定数量的糖源和凝固剂置于烧杯内，加蒸馏水至培养基最终体积的3/4在恒温水浴中加热使之溶解，加热过程应不断搅拌，防治结块。②根据计算所需量一次加入大量元素微量元素铁盐有机物生长调节物质母液及其他特殊附加物，搅拌均匀。③加水定容至规定体积，搅拌均匀。④调整培养基的PH值。⑤分装⑥封口 第四章植物材料 植物材料幼年期特点：植物生长快，呼吸强，核酸代谢和蛋白质合成快。成年期：代谢和生理活动慢，光合速率和呼吸速率下降。外植体的选择：1植物的种质选择2外植体的增值能力3外植体的大小4外植体的年龄和着生部位5取外植体的季节和时间6木本材料的特殊性灭菌的常用化学药品:1乙醇2升汞3次氯酸钠4漂白剂5过氧化氢6其他用于外植体体表灭菌的化学药品①茎尖茎段以及叶片等材料的灭菌流水冲洗，70％乙醇浸泡，冲洗，取0.1％升汞。最后用无菌水洗涤干净，备用。②果实和种子的灭菌冲洗20min 再用70％乙醇灭菌30s，用无菌水洗涤3次，取出果实内种子进行培养。如暴露了，用10％次氯酸钙溶液浸泡30min。
景观植物大全 名称：七里香 学名：Murraya paniculata 科名：芸香科 形态特性：常绿灌木，奇数羽状复叶，小叶互生，椭圆形。夏季开花，五瓣白色，短繖房花序，香气浓郁，可传得很远，因此俗称七里香。果长椭圆形，熟後由绿转红。性喜高温多湿，日照需充足。春季剪枝，生长快速 生态／分布：原产地为台湾、热带亚洲 用途／解说：庭园树、绿篱、盆栽 校园栽植地：校门口旁 大王仙丹 名称：大王仙丹 学名：Ixora duffii cv. "Super king" 科名：茜草科Rubiaceae 形态特性：常绿性灌木，叶对生，长椭圆形，全缘，革质；繖形花序，红色，柱头2裂， 雄蕊4枚与花瓣裂片互生，具长花茼 生态／分布：园艺栽培种 用途／解说：庭园植物、切花 校园栽植地：外语学院 木麻黄
名称：木麻黄 学名：Casuarina equisetifolia L. 科名：木麻黄科Casuarinaceae 别名：木贼木麻黄、番麻黄 形态特性：大乔木；干皮灰褐色，不规则纵向缝裂，略长片条状剥落。脱落性小枝节间长6～13㎜；鞘齿6～8，狭三角形，长约0.7㎜，宿存性小枝上鞘齿剥离性。球果状果序椭圆形，长1～2.4㎝，径1～2㎝，果苞12～14列，基部宽，明显凹陷；翅果长5～8㎜， 翅长约为其之1/2 生态／分布：原产澳洲、马来、印度、缅甸，台湾引进栽为海岸防风林及行道树，防风、 耐盐、抗海潮，适生於海边沙地 用途／解说：本种为台湾防风林之重要树种，对台湾农业之贡献至钜，木材为良好之薪炭 材，树皮可提炼栲胶 校园栽植地：校门口前花圃 合欢 名称：合欢 学名：Albizia julbrissin Durazz. 别名：绒花树，夜合树
塘英生活营地植物图鉴 树木类 三药槟榔 棕榈科 槟榔属 拉丁名:Areca triandra Roxb. 常绿丛生灌木,高达2-3.5m 。干绿色光滑,环纹明显如竹。叶长1-1.7m,羽状全裂,条状披针形,端具齿或浅裂,光滑无毛,喜暖湿气候,耐阴。 国王椰子：学名Ravenea rivularis jum ，形状常绿乔木，单干，高可达30米，羽状复叶似羽毛，羽叶密而伸展，树干粗壮，极限温度不低于-2℃. 盆架子Alstonia scholaris 夹竹桃科 ，正确中名为糖胶树，原产中国及东南亚、大洋洲等地。常绿乔木，高可达15米以上。叶轮生，倒披针形，全缘。秋季开花，绿白色。果实长线形。枝条开展呈水平状，层层有序，树冠优美，树叶常绿。 印度紫檀(Pterocarpus indicus) 原产地: 印度 特性: 属於蠂形花科落叶乔木, 羽状复叶, 叶序整齐,叶貌似杨桃叶, 枝 桠特长呈放射状伸展, 树冠伞形,冬季落叶后枝桠优美, 春季嫩叶 娇柔翠绿。 蒲葵Livistona chinensis ，别名：扇叶葵、葵树，科：棕榈科 属:蒲葵属。 形态特征:为常绿乔木。株高约20m 。单干直立，干棕灰色，有环纹和纵裂纹。叶大，扇形，有折叠，裂片约27枚，先端下垂，端尖2裂。肉穗花序腋生，花小，黄绿垂叶榕Ficus benjamina ，科名：桑科Moraceae ，原产地：中国、越南至印度。形态：常绿乔木。干直立，枝条稍下垂，树冠锥形。几乎全年均可开花结果。质感：中色泽：叶色深绿，果实由绿转黄绿色。生育适温：２3～32℃生长特性：
丛生鱼尾葵也称单穗鱼尾葵，Caryota monostachya Becc. 科属：棕榈科，槟榔亚科，鱼尾葵属，形态特征：茎丛生，高3～8m。叶子外缘近平直，内缘有圆形啮蚀状齿；叶鞘有少量纤维。花序下垂，不分枝或偶有短的分枝。果球形，直径2～2.5cm，青紫色，含1～2粒种子 小叶榕别名:细叶 榕，科属:桑科、榕属、 抗污染。学名Ficus microcarpa 英文名称 Chinese Banyan 科 桑科Moraceae 属榕 属Ficus 可达高度15 米，树形及树皮常绿 乔木,扩展形树干气根 下垂后形成新树干 习性:常绿乔木、生长 快、耐荫、抗污染、 树冠丰满、枝叶繁茂。 羊蹄甲 Bauhinia variegata（红花紫荆、红 紫荆、弯叶树）形态特征：豆科羊蹄甲属乔木植 物，高5-8 米。叶形变化较大，圆形至阔卵形， 有时几为肾形，先端二裂，裂至叶片的1/2 至 1/4 ，基部圆形、截形或心形。短总状花序，花 少，粉红色或白色，具紫色线纹。荚果条形，长 15-25厘米，宽1.5-2 厘米，扁平，有种子10-15 粒。 佛肚竹别名: 佛竹,密节竹学名: Bambusa vulgaris 所属类别: 禾本科，箣竹属与龙头竹 不同处在于秆较矮，高仅2—5m，秆及大多数枝 条节间短缩肿胀呈佛肚状。
康乃馨的离体快繁开题报告 学生姓名：姜平阳张骏驰李凯 班级：14生本2 专业：生物技术 学部：生物医药 指导教师：严铮辉 二〇一七年三月
一、实验目的 掌握植物离体快速繁育原理、方法和完整过程。 二、实验原理 康乃馨又名香石竹,花色艳丽,开花时间长,装饰效果好,是世界上最畅销的切花之一,具有较高经济价值。由于病毒病侵害,常使植株矮化,花朵变小,花色产生斑点,退色甚至不开花,影响切花产量和质量。通过茎尖分生组织培养,能够获得“无病毒”的健康植株,对于引进的少而新的脱毒种苗,再进行一次茎尖培养,进一步降低基础苗中的病毒含量,并通过组织培养的方法快速繁殖,在短期内,就可以获得大量的脱毒试管苗,使引入材料迅速在生产上推广应用,取得明显的经济效益。 三、实验仪器与材料： 1.材料康乃馨枝条 2.仪器设备 超净工作台，带有吸水纸的成套的培养皿，无菌水 培养基MS+1mg/L 6-BA 剪刀，镊子 量筒，酒精灯，滤纸，蒸馏水，小刷子 纱布，棉塞，牛皮纸，标签纸，肥皂，酒精喷壶 3.试剂 95%乙醇，70%酒精，70%酒精棉球 四、培养基的配方 （1）香石竹的生芽培养基
MS+ IAA (0.1mg/L) + BA( 2.0mg/L)+NAA(0.2mg/L)+蔗糖（30g/L）+琼脂(8g/L)，pH5.8-6.0,配制0.3L,用小培养瓶分装10~15瓶。 另外，需要制备无菌水20瓶（大培养瓶），每人3~4瓶，，纱布、碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。 （2）香石竹的继代培养基 MS+ BA( 0.3mg/L)+NAA(0.2mg/L)+蔗糖（30g/L）+琼脂(8g/L), pH5.8-6.0,配制0.3L,用小培养瓶分装10-15瓶。 另外，需要制备无菌水20瓶（大培养瓶），每人3-4瓶，，纱布、碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。 （3）香石竹的生根培养基 MS+生根培养基为1/2MS+NAA(0.075mg/L)+蔗糖(30g/L)+琼脂 (8g/L)，pH5.8-6.0,配制0.3L,用小培养瓶分装10-15瓶。 另外，需要制备无菌水20瓶（大培养瓶），每人3-4瓶，纱布、碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。 五、实验步骤 1.灭菌 （1）实验室及超净台消毒 先进行无菌室内消毒，用紫外线照射30-45分钟，地面消毒，紫外灯关闭约20min后方可进去工作。对超净工作台进行消毒，开启无菌风开关，开启紫外，让无菌风吹上15-20min后方可工作。并用70%的酒精棉台擦净工作台 （2）外植体灭菌
常见园林景观植物一览 Company number：【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】
常见园林景观植物一览 八角金盘： 指其掌状的叶片，裂叶约8片，看似有8个角而名。它四季油光青翠，叶片象一只只绿色的手掌。其性耐荫，在园林中常种植于边上或大树旁边，还能作为用于室内，厅堂及会场陈设。八角金盘原产于日本暖地近海的山中林间。我国早年引种，现广泛栽培于长江以南地区，作和庭园观赏，台湾尤多。为亚热带树种，喜阴湿温暖的气候。不耐干旱，不耐严寒。宁沪一带宜选小气候良好处种植，以排水良好而肥沃的为宜，亦能适应。 常春藤： 一种颇为流行的室内大型盆栽花木，尤其在较宽阔的客厅、书房、起居室内摆放，格调高雅、质朴，并带有情调。是一种株形优美、规整、世界着名的新一代。可以净化室内空气、吸收由家具及装修散发出的苯、等有害气体，为人体健康带来极大的好处。原产欧洲、亚洲和北非。它对环境的适应性很强。喜欢比较冷凉的气候，耐寒力较强，可入药。在庭院中可用以攀缘假山、岩石，或在建筑阴面作材料。在宜选小气候良好的稍荫环境栽植，也可盆栽供室内绿化观赏用。常春藤绿化中已得到广泛应用，尤其在立体绿化中发挥着举足轻重的作用。花期5～8月，果期9～11月。 大叶黄杨: 常绿灌木或，高达5米；小枝近四棱形。叶片革质，有光泽，倒卵形或狭，长3—6厘米，宽2—3厘米，顶端尖或钝，基部，边缘有细锯齿；叶柄长约6—12毫米。花绿白色，4数，5—12朵排列成密集的，腋生。近球形，有4浅沟，直径约1厘米；种子棕色，桔红色。色光亮，嫩叶鲜绿，极耐修剪，为中常见绿篱树种。可经整形环植门旁道
古典园林常用植物配置有哪些 导读：我根据大家的需要整理了一份关于《古典园林常用植物配置有哪些》的内容，具体内容：植物具备改善生态环境、创造优美景观等多重功能，植物景观是中国古典园林景观空间构成要素。呢?下面是我为大家整理的古典园林常用植物配置，欢迎大家一起来分享!古典园林常用植物配置...植物具备改善生态环境、创造优美景观等多重功能，植物景观是中国古典园林景观空间构成要素。呢?下面是我为大家整理的古典园林常用植物配置，欢迎大家一起来分享! 古典园林常用植物配置 植物配置是古典园林构成的要素之一，它的功能一是造景，保护好世界遗产古典园林的植物特征，是遗产保护管理工作中的一项重要内容，如国际公约《佛罗伦萨宪章》就对历史园林的植物作了原则规定。 买地建造沧浪亭的苏舜钦，是一个聪慧而又德才兼备之人，当年虽被谤罢官，但凌霜傲雪的骨气仍存，永葆高风亮节的意愿尚在，流溢芬芳的追求未泯。古代以竹、兰、梅、荷为植物中的"四君子"，所以，在沧浪亭的植物中，前面的三样植物景观非常突出，而在园外的河水里，则栽有荷花。竹子，节格刚直，喩人高风亮节，怀若虚谷。竹子的种植占了沧浪亭的很大比重，近几年在品种和数量上又几乎增加一倍。在种植上疏密有致，做到大小高矮层次分明，使之自成一景，非常具有观赏性。兰花，典雅高洁，象征高尚。沧浪亭的兰花可说是名扬全国。近几年不断引进新种，增加数量，还别开生面，每年都举办展览活动，吸引了更多的市民和国内外
游客前来观赏。梅花，性直坚贞，以其清神逸韵、铁骨冰心折服世人。在闲吟亭左前方、闻妙香室后就是一个梅圃，可以想象，当年主人在室内攻读，身处幽境，暗香缭绕，心怡神清，学识日进。荷花，脱俗无邪，清纯高洁。在藕花小榭背后的一段水面，原本种有荷花，岸边的这栋傍水建筑因此得名。但随着时光流逝、人事沧桑，不知何时起，这段水面连续多年空白无物。而经过数年的努力，现在这段水面又重现了当初"浮香绕曲岸，圆影覆华池"的情景。 从上述植物配置的变化里，我们看到了人们花在遗产保护上的心血与汗水，同样，在竭力保持有关植物品种和数量不变的工作中，也可看到园林人所付出的辛劳和所获得的成效。 古典园林中常用的植物有哪些 方竹、梓、薜荔、桧柏，是园中依附于山石，叶色姿态均不尽相同、榉，主要分为秋色叶类，是构成园中山林与绿荫的主要树种、彩色叶类和特色叶类树种、增加园中生气的效果;、构骨、栀子，或作为冬季点缀。 常用的有象竹、连翘;水生植物常用的有荷花、紫萼、铺地柏. 草本及水生植物、牡丹、棕榈、桂花迎合着"、桔子果实金黄，落叶的有梧桐、朴，种植也多、火棘、葡萄等、庭院都可种植、凌霄、白玉兰、迎春、珍珠梅，不可居无竹"、金丝桃，常植于花台、花架上的主要植物、紫玉兰，味美、皂荚等、秋海棠、楝、紫藤、荫木类、南天竹，是冬季的重要观赏树种、月季，池畔宅旁皆可种植、紫竹，其中紫藤还可修剪成各种形态、菊花、虎耳草等，观特色叶的有八角金盘 1、花红、紫薇，又与松、槭等、紫薇姿态花色都美。海棠、合欢。常
植物组织培养试题 一、名词解释 1、外植体：在植物组织培养过程中，由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子等器官 以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。(重点识记) 2.玻璃化现象: 玻璃化现象指当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈透明水浸状的现象。(重点识记) 3愈伤组织培养:是指将母体植株上的外植体,接种到无菌的培养基上,进行愈伤组织诱导,生长和发育的一门技术. (重点识记) 4 植物细胞全能性：一个生活的植物细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会有一整套发育成一个完整植株的遗传基础，在适当的条件下可以通过分裂、分化再生成一个完整的植株。(重点识记) 5愈伤组织：在人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团不定形的疏松排列的薄壁 细胞。 6胚胎培养——将植物的胚胎和母体分离，培养在已知化学成分的培养基上。 7接种：经过表面消毒的植物材料，按照不同的要求切割或分离出器官、组织、细胞，并将它们转接到无菌的培养基质上的全过程。 8花粉培养：从花药中取出花粉进行无菌培养，以获得单倍性愈伤组织，进而长出单倍体植株的技术。 9体细胞杂交：指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。 10 单倍体育种：利用植物组织培养技术诱导产生单倍体植株，再通过某种手段使染色体组 加倍，从而使植物恢复正常染色体数。 11 超低温冷冻保存：根据生物种子资源，在极低温度下，新陈代谢减缓或降至极低，加入一定的冷冻防护剂，而使之得以长期保存的方法。 12 细胞融合：在自发或人工诱导下，两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。 13 愈伤组织：在人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团不定形的疏松排列的薄壁细胞。 14热处理脱毒：利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同，选择适当的高温处理染病植株，使植株体内的病毒部分或全部失活，而植株本身仍然存活。 15平板培养法：是把单细胞悬浮液和融化的琼脂培养基均匀混合，平铺一薄层在培养基底上的培养方法。 16消毒：指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。