视黄醇结合蛋白（RBP）在肾脏疾病中的临床意义
[导读]尿素氮（BUN）与肌酐（Cr）作为传统反映肾脏功能的指标，两者的灵敏性较差。因为肾小球的代偿能力很强，只有当50%以上的肾小球受损时才会引起两者的升高。近年众多研究已经证实通过检测视黄醇结合蛋白（Retinol-binding protein，RBP）能早期发现肾小管的损
尿素氮（BUN）与肌酐（Cr）作为传统反映肾脏功能的指标，两者的灵敏性较差。因为肾小球的代偿能力很强，只有当50%以上的肾小球受损时才会引起两者的升高。近年众多研究已经证实通过检测视黄醇结合蛋白（Retinol-binding protein，RBP）能早期发现肾小管的损害，对推测肾脏损坏的预后有一定意义。本文重点介绍视黄醇结合蛋白（RBP）在肾脏疾病中的临床意义。
1 视黄醇结合蛋白（RBP）的生理特性
视黄醇结合蛋白（RBP）是肝脏分泌的一种低分子量蛋白（21000kD），由肝细胞合成，受全反式视黄醇刺激并与之特意性结合主要功能是将视黄醇从肝细胞转运到上皮细胞，血浆中的视黄醇结合蛋白（RBP）约有90%与甲状腺素结合前蛋白结合，形成高分子蛋白复合物，故而不被肾小球滤过膜滤过，当视黄醇被转运到靶细胞后，视黄醇结合蛋白（RBP）便游离到血浆中，迅速被肾小球滤过，几乎全部被肾近曲小管重吸收而分解。
正常情况下，在尿中稳定性强，不易分解，不受pH和血压干扰，视黄醇结合蛋白（RBP）排量甚微（100μg/d）。但在肾近曲小管损伤时，其尿排量明显增加，故视黄醇结合蛋白（RBP）排量增加可作为肾近曲小管损伤的标志物。当肾脏滤过功能降低时，肾小球滤过率和肾血流量降低而使血中各种形式的视黄醇结合蛋白（RBP）贮积而显示血浓度升高。尿视黄醇结合蛋白（RBP）、尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）均是肾近曲小管损伤的标志，但尿视黄醇结合蛋白（RBP）是一项较NAG更敏感的肾近曲小管损伤的早期诊断指标。急性颅脑损伤患者使用甘露醇检测结果提示尿视黄醇结合蛋白（RBP）对于检测甘露醇所致早期肾功能损害较BUN、Scr敏感，可以更早的反应肾功能损伤的情况。血视黄醇结合蛋白（RBP）在各组肾病的阳性率与Urea、UA较为接近，明显高于Cr、血视黄醇结合蛋白（RBP）灵敏度好于Cr，Urea易受饮食影响，而血视黄醇结合蛋白（RBP）的结果较为稳定。血液或尿液中的视黄醇结合蛋白（RBP）浓度可以作为一种理想的肾功能指标应用于临床。
2 视黄醇结合蛋白（RBP）在肾脏疾病中的临床意义
当慢性肾炎患者近端肾小管有损伤时，血β 2 -微球蛋白以及内生肌酐清除率尚在正常范围内，尿视黄醇结合蛋白（RBP）排泄量便有明显增加。尤其是高血压的患者，尿视黄醇结合蛋白（RBP）排泄量便增加更为明显。IgA肾病患者视黄醇结合蛋白（RBP）排泄量明显
升高，肾活检报告肾间质纤维化和肾小管萎缩，提示IgA肾病患者视黄醇结合蛋白（RBP）排泄量与间质病变的严重程度密切相关。也有IgA肾病患者视黄醇结合蛋白（RBP）排泄量与正常人无差别，可能这些患者对近端小管功能影响不明显。在原发性肾病综合征研究组中，由于系膜组织增生程度的不同，尿视黄醇结合蛋白（RBP）在治疗前后的变化组间差异较大，轻度增生患者治疗前后尿视黄醇结合蛋白（RBP）的变化差异有非常显着性（P<0.01），而中、重度增生的患者其尿视黄醇结合蛋白（RBP）在治疗前后变化不大，差异无显着性（P>0.05）。经治疗尿视黄醇结合蛋白（RBP）明显减少的病理组，其尿蛋白亦明显减少，2年内出现肾功能不全的发生率亦较低，经治疗尿视黄醇结合蛋白（RBP）无明显减少者，其肾小管、肾间质的病理损伤仍持续存在，发生肾功能不全的可能性将增大，尿视黄醇结合蛋白（RBP）持续性增高的肾病综合征患者，肾功能不全的发生率明显高于一过性尿视黄醇结合蛋白（RBP）增高的患者（P<0.01）。因缺氧所致的一系列病理改变可引起几乎100%的缺氧新生儿的肾小管功能受到损害。窒息可致肾脏缺氧缺血，使肾小管上皮细胞浊肿、变性，甚至死亡，导致肾小管重吸收功能减弱及间质性改变。
试验研究表明出生后第3天窒息儿尿视黄醇结合蛋白（RBP）均显着高于对照组，重度窒息尿视黄醇结合蛋白（RBP）显着高于轻度窒息，说明窒息越重肾功能损害越明显。窒息组生后第7天与第3天尿视黄醇结合蛋白（RBP）比较差异有显着性意义。随着日龄增加缺氧情况改善，及肾小管功能本身日渐完善，肾功能多能很快恢复。视黄醇结合蛋白（RBP）和微白蛋白尿（MA）联合检测是常规肾功能检查又无明显改变时评价肾小球及近端肾小管功能的指标。MA是指一般常规临床检查尚未发现蛋白尿时而尿中已出现的增加的白蛋白排泄量（率），主要反映了肾小球机能障碍。早产儿的肾脏发育比足月正常儿更不成熟，新生儿肾小管发育落后于肾小球，二者呈不平衡发育，随着生后日龄的增加其肾脏发育的成熟。
有人将尿早产儿与足月正常儿做比较，结果显示MA的浓度在生后第1、4、7天均分别高于正常足月儿组（P<0.05），第14天降至正常足月儿范围；而尿视黄醇结合蛋白（RBP）的浓度在整个新生儿期均分别高于正常足月儿组（P<0.05）。表明这种不平衡发育状态在生后28天内持续存在。转铁蛋白（TRF）能自由通过滤膜，大量进入尿液，此时肾小球滤膜已不是早期的静电屏障损伤而是滤膜小孔增大。尿液TRF开始升高，意味着肾小球滤膜开始损伤。为了寻找糖尿病早期的肾损害指标，有人检测糖尿病患者尿中转铁蛋白（TRF）、视黄醇结合蛋白和α 1 微球蛋白（A1M）。
结果表明尿蛋白定性阴性时，尿视黄醇结合蛋白（RBP）出现较A1M早，而尿TRF较视黄醇结合蛋白（RBP）出现更早，表明糖尿病尿视黄醇结合蛋白（RBP）较A1M能更早反映肾小管的损伤；尿TRF和视黄醇结合蛋白（RBP）不仅能反映早期肾小球和肾小管的损害，而且能反应肾功能的损害程度。研究还发现糖尿病无肾病组，慢性肾盂肾炎组尿视黄醇结合蛋白（RBP）升高较血视黄醇结合蛋白（RBP）更为显着，而糖尿病肾病组、慢性肾盂肾炎组血视黄醇结合蛋白（RBP）升高较尿视黄醇结合蛋白（RBP）更为显着，由此可同时检测尿视黄醇结合蛋白（RBP）、血视黄醇结合蛋白（RBP）来判断部分肾脏疾病的类型和受损程度。在
慢性肾小球肾炎中，血视黄醇结合蛋白（RBP）与血清肾功能相关性好，可以作为肾小球滤过功能受损的敏感指标，但是血视黄醇结合蛋白（RBP）在慢性肝病和营养性疾病中都可以降低，临床应用中应加以考虑。
3 结论
视黄醇结合蛋白（RBP）作为肾小管损伤的早期诊断指标，灵敏度比Cr、BUN、NAG高，而尿易受其它因素影响，β 2 -微球蛋白易受pH值影响，视黄醇结合蛋白（RBP）结果却较为稳定。视黄醇结合蛋白（RBP）操作方便、价格低廉，适合常规检测。视黄醇结合蛋白（RBP）不仅对肾脏损伤的早期治疗有重要意义，而且还可用于肾脏损坏的动态监测，与其他项目联合检查能为肾脏损伤部位及程度提供更准确鉴别的诊断依据。
N—乙酰—β—D氨基葡萄糖甘酶(NAG酶)介绍：
N—乙酰—β—D氨基葡萄糖甘酶(NAG)广泛存在于各种组织器官、体液、血细胞的溶酶体中,是一种高分子量的溶酶体酶中的一种酸性水解酶.近端肾小管上皮细胞中含量特别
丰富,是肾小管功能最敏感的指标之一.在正常情况下,血清中的NAG不能通过肾小球滤过膜.尿液中NAG的正常参考值范围<18.5U/L.尿中NAG升高主要反映肾小管损伤,见于：1,缺血或中毒引起的肾小管坏死,间质性肾炎等;2,肾移植排斥;3,慢性肾小球肾炎,肾病综合症β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)可水解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷，也能水解β-N-乙酰氨基半乳糖苷。其测定方法有比色法和荧光光度法。
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶正常值：
(1)对硝基酚比色法：血清NAG：21.54±6.4U/L，尿液NAG呈正态分布，中位数为9.13U/g肌酐，第95百分位数上限为16.10U/g肌酐。
(2)荧光光度法：
成人血清9.94±2.O7U/L。
成人尿液6.39±3.19U/L Cre。
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶临床意义：
血、尿NAG活性测定对反映肾实质病变，尤其是急性损伤和活动期病变更
敏感，主要用于早期肾损伤的监测和病情观察。
(1)肾小管疾病：重金属(汞、铅、镉等)及药物性肾损伤、缺血、缺氧、失血、休克等均可引起NAG活性增加。
(2)肾病综合征：尿NAG常明显增加，缓解期下降，复发时迅速回升，故可作为临床观察指征。肾小球肾炎急性期变化较大，但与肾小管损伤相比，变化幅度较小。
(3)尿路感染的定位诊断：急、慢性肾盂肾炎尿NAG上升，能与单纯性膀胱炎区别。可用于早期上尿路感染的诊断。
(4)肾移植排斥反应的监测：肾移植排斥反应早期NAG即可升高，比尿蛋白、血肌酐、肌酐清除率更敏感。
(5)糖尿病肾痛早期诊断：糖尿病肾病尿NAG升高，用于本病的早期诊断优于尿白蛋白及β2-微球蛋白。
尿NAG1活性升高可作为肾脏损伤的一个极为灵敏的指标，它可预示肾脏活动病变、急性肾衰、药物诱致肾毒损害和肾移植排异反应的时期诊断。
尿N－乙酰－β－氨基葡萄糖苷酶（N－Acetyl－β－glucosaminase，NAG），是广泛分布在哺乳动物身体各组织中，在人类，为泌尿系统所特有的酶。肾干冻切片发现NAG几乎存在于近端肾小管细胞的溶体酶中，分子量约为14万，是一种重要的溶酶体酶，与粘多糖类及糖蛋白代谢有关，酶的活性最高值是在近曲小管（PCT），低值在小球（GF）、近端小管垂直部（PR）、髓袢上升支（MAL）和皮质集合管（CCP），膀胱粘膜含量最低。在正常情况下尿液中可测得少量NAG，但在小管上皮细胞变性、坏死时，NAG活性显著升高。
尿中半乳糖苷酶（GAL）是一种广泛存在于人体组织细胞中的酶，属溶酶体酶。以近曲肾小管含量较多，正常人尿中含量很低，当肾组织尤其是肾小管损害时，尿中含量明显上升。由于它富含于新生态溶酶体中，肾损伤后修复时，它又可升高，所以它又是肾损伤修复的标志。如果GAL持续升高，则表明肾损伤处在修复过程中，说明愈后较好。
另外，临床上以NAG／GAL比值评价肾损伤的程度和愈后，优于单测NAG和GAL。GAL／NAG比值越小，说明肾损伤越严重，愈后越差，反之，比值越大则提示肾损伤轻微或恢复。一般GAL／NAG比值：尿毒症＜慢性肾炎＜肾病综合征和急性肾炎＜肾炎恢复期。动态观察NAG和GAL两者变化对肾疾患的诊断、鉴别诊断、治疗监测和预后评估有重要价值。
视黄醇结合蛋白与肾脏疾病的研究进展 摘要】视黄醇结合蛋白，在体内是一种小分子蛋白质,它在维生素 A代谢中发挥 着重要作用。近年来，在肾脏疾病中视黄醇结合蛋白检测的应用日益受到关注。 本文对视黄醇结合蛋白的检测和特性以及其在肾脏疾病等方面的研究进展作一综述。 【关键词】视黄 A醇结合蛋白质类肾疾病 1968年Kanai等首次分离发现了RBP，1971年Berggard和Peterson在尿中将其分离出来。视黄醇结合蛋白（retinol-binding protein，RBP）为特异转运蛋白， 在血中维生素A起着重要的作用。RBP 的蛋白是低分子量，能由肾小球自由滤过，近端肾小管几乎完全重吸收，其在血尿中的含量变化与肾脏疾病密切相关。 一、RBP的生理功能和理化特性 RBP是一种单一肽链蛋白质，有一个结合一分子，含有184个氨基酸残基和 3个二硫键，全反式视黄醇的结合点。RBP 的分子量为21000，半衰期约为3-12 小时，它的沉降系数2.13-2.30，在体内每天公斤体重5mg的合成率[1]。RBP是肝脏内合成，在受到全反式视黄醇刺激后分泌出来，释放入血后与甲状腺素运载蛋 白（transthretin，TTR）、视黄醇（retinol，ROH）按照1：1：1的比例形成三元 的复合物。应严格按照视黄醇的调控分泌入血的 RBP量。RBP受体在不同细胞组 织的分布变化很大，其与 RBP 结合力也不一致。在肠、肝、脾分布的受体有特殊 的结合能力，在视网膜色素胎盘、上皮细胞、骨髓、肾脏其受体具有较高的结合力。不同组织的RBP受体分布与 VitA 在不同组织的功能、代谢要相一致。ROH 与RBP结合，从肝储备区将ROH转运至肝外的靶组织。在对肾脏髓质、皮质受 体的研究中，Smeiand等发现分布在皮质的几乎有特殊的结合力的受体[2]。 二、RBP在肾脏的功能性代谢 血清 RBP 结合 VitA 通过滤过肾小球部分。Usdda 等研究发现 RBP肾小管的重 吸收发生在S1、 S2段并发现了 RBP免疫反应物质在这两段的溶酶体。Marinos 等发现RBP-VitA 复合物介导的胞吞通过megalin（gp330）作用被近端肾小管重吸收，只是跨细胞转运通过近端肾小管，而并没有溶酶体转运到胞内降解[3]。他们也发现一些 RBP 降解在近端肾小管细胞，并且这一转运过程几乎不受 megalin（gp330）竞争者影响。 三、RBP测定与肾脏疾病 1.RBP与原发性肾小球疾病 近来国内外学者通过监测尿 RBP 做了一些研究来反应肾病综合征患者,对敏感 性的激素治疗。大量蛋白尿可导致肾病综合征患者的肾小管功能受损，肾小管上 皮细胞损害就会出现，都认为肾病综合征尿中小管损害标志物可能是不敏感激素 治疗的危险因素。 Sessos等[4]调查了37例原发性肾病综合征患者8周，在前后激素治疗中，尿RBP和β2-MG变化的情况，病人所有的强的松用量 1-1.5mg/kg，经过研究发现在 不敏感激素治疗组的尿β2-MG和 RBP明显高于敏感激素治疗组，随着疾病好转 敏感激素组的尿β2-MG和 RBP也出现了明显的下降。在不敏感激素组尿β2- MG>3000mg/g.Cr和RBP>4000mg/g. Cr。所以说分析多变量结果证实其激素的敏感性越差则尿RBP越高。 Masroiasnni等在研究为系膜增殖性肾小球肾炎、微小病变、局灶节段性肾小 球硬化症的患者的肾病综合征病理的表现，这些患者尿 RBP水平正常在治疗前，
视黄醇结合蛋白（RBP）在肾脏疾病中的临床意义 [导读]尿素氮（BUN）与肌酐（Cr）作为传统反映肾脏功能的指标，两者的灵敏性较差。因为肾小球的代偿能力很强，只有当50%以上的肾小球受损时才会引起两者的升高。近年众多研究已经证实通过检测视黄醇结合蛋白（Retinol-binding protein，RBP）能早期发现肾小管的损 尿素氮（BUN）与肌酐（Cr）作为传统反映肾脏功能的指标，两者的灵敏性较差。因为肾小球的代偿能力很强，只有当50%以上的肾小球受损时才会引起两者的升高。近年众多研究已经证实通过检测视黄醇结合蛋白（Retinol-binding protein，RBP）能早期发现肾小管的损害，对推测肾脏损坏的预后有一定意义。本文重点介绍视黄醇结合蛋白（RBP）在肾脏疾病中的临床意义。 1 视黄醇结合蛋白（RBP）的生理特性 视黄醇结合蛋白（RBP）是肝脏分泌的一种低分子量蛋白（21000kD），由肝细胞合成，受全反式视黄醇刺激并与之特意性结合主要功能是将视黄醇从肝细胞转运到上皮细胞，血浆中的视黄醇结合蛋白（RBP）约有90%与甲状腺素结合前蛋白结合，形成高分子蛋白复合物，故而不被肾小球滤过膜滤过，当视黄醇被转运到靶细胞后，视黄醇结合蛋白（RBP）便游离到血浆中，迅速被肾小球滤过，几乎全部被肾近曲小管重吸收而分解。 正常情况下，在尿中稳定性强，不易分解，不受pH和血压干扰，视黄醇结合蛋白（RBP）排量甚微（100μg/d）。但在肾近曲小管损伤时，其尿排量明显增加，故视黄醇结合蛋白（RBP）排量增加可作为肾近曲小管损伤的标志物。当肾脏滤过功能降低时，肾小球滤过率和肾血流量降低而使血中各种形式的视黄醇结合蛋白（RBP）贮积而显示血浓度升高。尿视黄醇结合蛋白（RBP）、尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）均是肾近曲小管损伤的标志，但尿视黄醇结合蛋白（RBP）是一项较NAG更敏感的肾近曲小管损伤的早期诊断指标。急性颅脑损伤患者使用甘露醇检测结果提示尿视黄醇结合蛋白（RBP）对于检测甘露醇所致早期肾功能损害较BUN、Scr敏感，可以更早的反应肾功能损伤的情况。血视黄醇结合蛋白（RBP）在各组肾病的阳性率与Urea、UA较为接近，明显高于Cr、血视黄醇结合蛋白（RBP）灵敏度好于Cr，Urea易受饮食影响，而血视黄醇结合蛋白（RBP）的结果较为稳定。血液或尿液中的视黄醇结合蛋白（RBP）浓度可以作为一种理想的肾功能指标应用于临床。 2 视黄醇结合蛋白（RBP）在肾脏疾病中的临床意义 当慢性肾炎患者近端肾小管有损伤时，血β 2 -微球蛋白以及内生肌酐清除率尚在正常范围内，尿视黄醇结合蛋白（RBP）排泄量便有明显增加。尤其是高血压的患者，尿视黄醇结合蛋白（RBP）排泄量便增加更为明显。IgA肾病患者视黄醇结合蛋白（RBP）排泄量明显
视黄醇结合蛋白的临床意义 视黄醇结合蛋白（Retinol Binding Protcin,RBP）为血液中视黄醇（维生素A）的转运蛋白。1961年Berggard在免疫电泳中发现在α2-球蛋白区域能形成一条长沉淀线的蛋白质，曾称为长α2-球蛋白。在以后几十年中，人们对这种蛋白质的分子结构、生物学特性等进行了全面研究，发现这种蛋白质广泛地分布于正常人体液中，属α1-球蛋白，具有从肝细胞中转运视黄醇至周围组织的功能。现认为血液中RBP主要以视黄醇、前白蛋白结合的复合物形式存在，当复合物中视黄醇与靶细胞结合后，RBP便与前白蛋白分离，自肾小球滤出，由近端肾小管上皮细胞吸收、降解。近年来的深入研究表明RBP含量改变能够敏感地反映近端肾小管功能、肝功能损害程度，是反映肾脏、肝脏及营养性疾病发展、转归的敏感指标。本文就近年来对RBP理化特性、代谢以及RBP含量改变及其临床意义作一综述。 一、RBP的理化特性及生理功能 RBP分子由一条多肽链及小部分碳水化合物组成，不含中性糖和氨基已糖，分子量为21，000，沉降系数S020W 2.3S ，等电点pH 4.4~4.8，半衰期3~12小时。RBP经硫酸乙基葡聚糖层析（Slfoethy Sephadex Chromatography）得到A、B两个峰，二乙氨基乙醇葡聚糖（DEAE-Sephadex）层析A、B两部分后可获得A1、A2与B1、B2四组分。免疫扩散法显示RBP的四个组分抗原性是一致的。 RBP主要由肝细胞合成，广泛分布于人体血清、脑脊液、尿液及其他体液中。在血液中，RBP与视黄醇、前白蛋白以1:1:1（mol）的复合物形式存在，转运体内90%的视黄醇至机体组织，当RBP与细胞表面的RBP受体结合时，视黄醇进入细胞内，复合物解体，游离的RBP从肾小球滤出，其中绝大部分被近端肾小管上皮细胞重吸收，并被分解，供组织利用，仅有少量从尿中排出。当体内锌、铁缺乏及严重感染等疾病能降低RBP的生物合成。 RBP的提纯方法主要有普通提纯法、亲和层析法和快速蛋白液相层析法（Fast Protein Liquid Chromatography,FPLC）三类。测定血、尿中的RBP方法较多，有放射免疫扩散、免疫浊度、免疫电泳、酶联免疫吸附和放射免疫分析，但其中灵敏度高、实用性强的仅为放射免疫分析法（RLA）和酶联免疫吸附法（ELISA）。
尿视黄醇结合蛋白（uRBP）测定试剂盒(胶乳免疫比浊法) 适用范围：用于体外定量测定人体尿液中视黄醇结合蛋白的含量。 1.1 试剂盒包装规格 试剂1：1×15mL，试剂2：1×5mL；试剂1：2×30mL，试剂2：2×10mL； 试剂1：2×54mL，试剂2：2×18mL；试剂1：3×45mL，试剂2：3×15mL； 试剂1：4×54mL，试剂2：4×18mL；试剂1：2×300mL，试剂2：1×200mL； 试剂1：1×9L，试剂2：1×3L。 校准品（选配）：5×0.5mL（五水平），5×1mL（五水平）。 质控品（选配）：1×0.5mL，1×1mL。 1.2 试剂盒主要组成成分
注：校准品和质控品存在批特异性，具体浓度见对应批次产品标签。 2.1 外观 液体双试剂：试剂1 无色澄清液体；试剂2 白色悬浊液。 校准品：无色至淡黄色液体。 质控品：无色至淡黄色液体。 2.2 净含量 净含量不得低于标示体积。 2.3 试剂空白吸光度 在37℃、600 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于 1.5。 2.4 分析灵敏度 测定浓度在1.0mg/L的样本时，吸光度变化值应>0.01。 2.5 线性 在（0.2，10.0）mg/L范围内，线性相关系数r不小于0.990。在（0.2，1.0]mg/L区间内线性绝对偏差不大于±0.15mg/L；在（1.0，10.0)mg/L区间内线性相对偏差不大于±15.0%。 2.6 重复性 重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于10%。
2.7 批间差 不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于15%。 2.8 准确度 与已上市产品进行比对试验，在（0.2，10.0）mg/L范围内，线性相关系数r不小于0.975。在（0.2，1.0]mg/L区间内线性绝对偏差不大于±0.15mg/L；在（1.0，10.0)mg/L区间内线性相对偏差不大于±15.0%。 2.9 质控品赋值有效性 测定结果在靶值范围内。 2.10 校准品溯源性 依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，提供试剂盒内校准品的来源、赋值过程及测量不确定度。校准品溯源至企业工作校准品。 2.11 稳定性 效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃储存，有效期为12个月，取失效期的试剂盒进行检测，试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8、2.9要求。
视黄醇结合蛋白（RBP） 视黄醇结合蛋白(RBP) 是一种低分子量的亲脂载体蛋白,属Lipocalin 蛋白超家族成员。其功能是从肝脏转运维生素 A 至上皮组织,并能特异性地与视网膜上皮细胞结合,为视网膜提供维生素A。RBP 广泛存在于人体血液、尿液及其他体液中,由于其具有分子量小和半衰期短的特点, 测定视黄醇结合蛋白能早期发现肾小管的功能损害，并能灵敏反映肾近曲小管的损害程度，还可作为肝功能早期损害和监护治疗的指标。又因RBP 可特异地反映机体的营养状态,因此也是一项诊断早期营养不良的敏感指标。 RBP与肾功能改变 当肾脏滤过功能降低时,肾小球滤过率和肾血流量降低而使血中各种形式的视黄醇结合蛋白（RBP）贮积而显示血清RBP浓度升高。在慢性肾小球肾炎中, 血清RBP与肾功能相关性好,可以作为肾小球滤过功能受损的敏感指标。 当肾脏疾患或感染等导致肾小管重吸收功能障碍时,尿中RBP 浓度升高,血清RBP 浓度下降。因此尿中RBP 测定是诊断早期肾小管损伤的敏感指标。 β2微球蛋白和RBP 均属反映近端肾小管功能的小分子蛋白.但近几年来随着对小分子蛋白理化特性的深入研究发现, 温度、PH对β2微球蛋白的影响较大，表明在室温或4℃条件下, 正常及异常尿液中RBP稳定性好, 是一个比β2-MG更实用、可靠的肾功能指标。 RBP与肝功能改变 RBP 是由肝细胞粗面内质网合成的蛋白质,当肝细胞损伤时,RBP 的合成受到抑制,因RBP 的半衰期为3～12h ,所以它可敏感地反映肝功能的改变。肝病患者血清中RBP显著低于正常人，且急性病毒性肝炎病程早期血清RBP含量降低较晚期更明显。血清RBP水平能准确、灵敏地反映肝功能变化 RBP与机体营养状态 因RBP 参与视黄醇的运转,体内的变化也与其密切相关。当视黄醇缺乏时,可改变血液中RBP 含量及抑制肝脏分泌RBP。大量口服视黄醇可导致血液及肝脏RBP 下降[很多疾病(肿瘤、胃肠道疾病、外科手术、长期昏迷等) 可导致机体营养状态的下降。前白蛋白( PA) 、转铁蛋白( TRF) 和RBP 在营养不良或急性时相反应中可迅速下降,故均可作为判断营养状态指标。但三者半衰期不同(RBP 为12 小时、PA为2 天、TRF 为8 天,半衰期越短越灵敏。) ,所以判断营养状态的敏感性依次为RBP、PA、TRF。明血清RBP 水平是反映营养性疾病疗效的灵敏、特异的指标。
尿视黄醇结合蛋白、尿转铁蛋白及血清胱抑素C在输血患者肾功能早期损害诊断中的价值分析 发表时间：2018-08-01T15:44:23.000Z 来源：《中国结合医学杂志》2018年3期作者：谢贤国 [导读] 严重创伤和失血可导致红细胞和血红蛋白浓度的下降，造成机体缺氧，对人体带来危害。 湖南省娄底市娄星区人民医院（娄星区妇幼保健院）湖南娄底 417000 【摘要】目的：观察输血患者输血前后尿视黄醇结合蛋白（RBP）、尿转铁蛋白（TRF），血清胱抑素C（Cyse）含量的变化情况，以探讨RBP、TRF、Cyse在大量输血患者肾功能早期损害诊断中的价值。方法：对30例输血患者输血前后尿RBP、TRF、Cyse、血清尿素（UREA）和肌酐（CRE）分别进行检测，并对结果统计分析。结果：输血前、后患者血清UREA、CRE无显著性差异（P＞0.05），而尿RBP、TRF及Cyse较输血前有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01）。结论：Cyse，尿RBP、TRF联合检测在输血患者肾功能早期损害的诊断中具有重要的临床价值，对肾功能早期损害的判断具有重要意义。 【关键词】输血；RBP；TRF；Cysc；肾功能 严重创伤和失血可导致红细胞和血红蛋白浓度的下降，造成机体缺氧，对人体带来危害。输血作为治疗危重患者临床的常用手段之一，具有不可替代的作用，在外科手术和创伤治疗中，通常进行同种异体输血。大量输血对于严重创伤和急性大出血患者的治疗中必不可少，但同时大量输血会引起患者电解质紊乱、凝血功能障碍等各种并发症的发生，严重的甚至会出现死亡[1]。本研究通过对30例输血患者输血前后尿RBP、TRF、Cyse、血清尿素（UREA）和肌酐（CRE）进行检测，以探讨其在输血患者肾功能早期损害诊断中的价值，现报道如下。 1材料与方法 1.1研究对象 选取择期手术和外科输血患者30例，其中男17例，女13例，平均年龄50.7岁；患者输血（包括部分全血、去白细胞的红细胞悬液和血浆）范围800ml-3550ml之间，平均输注1280±420.15ml，所有患者均无心、肾病变史、无高血压、糖尿病史，空腹血糖，血脂、肝肾功能及尿常规检查均正常，且输血前后排除使用过损害肾脏的药物。 1.2标本采集 收集输血患者输血前、后的空腹血及随机尿液标本，以3000r/min离心10min，留取血清及尿液上清液，密封-20℃冰冻保存。 1.3仪器和试剂 使用贝克曼AU680全自动生化分析仪进行测定，血清尿素（UREA）测定采用紫外-谷氨酸脱氢酶法，血肌酐（CRE）测定采用肌氨酸氧化酶法，试剂来源于重庆中元生物技术有限公司；血清胱抑素C（Cyse）测定采用乳胶增强散射比浊法，试剂由重庆中元生物技术有限公司提供；尿视黄醇结合蛋白（RBP）、尿转铁蛋白（TRF）测定检测采用酶联免疫吸附测定法，试剂来源于上海太阳生物技术有限公司，在检测过程中，为了避免排除尿量对结果的影响[2]，同时使用碱性苦味酸法测定尿肌酐（CRE），以尿RBP、TRF与尿CRE的比值作为它们排泌值。以上检测项目均严格按照试剂及仪器说明书进行操作，室内质控在可控范围。 1.4统计学分析 所有数据以均数土标准差（±s）表示，数据间比较采用卡方检验，以（P＜0.05）为差异有统计学意义。 2 结果 输血后与输血前进行比较，血清UREA、CRE含量无明显变化，两者比较差异无统计学意义（P＞0.05），而血清Cyse，RBP/尿CRE、TRF/尿CRE较输血前有明显增高，两者比较有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01），结果见表1。 3．讨论 输血对于严重创伤和急性大出血患者的治疗必不可少，大量的进行同种异体输血会引起患者多种并发症的出现。据文献[3、4]报道，血液及血液成分在保存过程中，白细胞容易崩解，其产生的碎片和释放的各种细胞因子很难被白细胞滤器去除。白细胞碎片可导致肾小管堵塞，而细胞因子可促进肾脏细胞增生，细胞外基质生成增多，致使肾脏肥大和发生硬化，对经输血治疗患者的肾功能造成危害。在肾脏早期损害发生时由于患者临床症状不明显，而临床实验室的肾功能常规检测项目（UREA、CRE）灵敏度低，因此肾脏的早期损害容易被忽视。 血清胱抑素C（Cysc）是一种由122个氨基酸组成的半胱氨酸蛋白酶抑制剂，由机体所有有核细胞恒定产生，无组织特异性，能自由通过肾小球滤过膜，几乎完全被肾小管重吸收，与肾小球滤过率有良好的相关性，可在早期反映肾小球滤过膜通透性的变化，是反映肾功能损伤的标志物[5]。尿视黄醇结合蛋白（RBP）为低分子量蛋白，相对分子量为21400道尔顿，等电点为4.4-4.8，生物半衰期为3-12小时，正常人血浆中90%的RBP与前白蛋白结合，不能透过肾小球滤出，游离状态的RBP经肾小球滤出后几乎全部被肾小管重吸收，因此正常人