实验四 玉米粉中淀粉含量的测定
（旋光计法）
二、实验原理
淀粉具有旋光性，在一定条件下旋光度的大小与淀粉的浓度成正比。用氯化钙溶液提取淀粉，使之与其他成分分离，用氯化锡沉淀提取液中的蛋白质后，测定旋光度，即可计算出淀粉含量。
四、操作方法
1.把样品研磨并通过40目以上的标准筛，称取2g 样品，置于250ml 烧杯中。
2.加水10m1，搅拌使样品湿润，加入70ml 氯化钙溶液，盖上表面皿，在5min 内加热至沸并继续加热15min 。加热时随时搅拌以防样品附在烧杯壁上。如泡沫过多可加1～2滴辛醇消泡。
3.迅速冷却后，移入l00ml 容量瓶中，用氯化钙溶液洗涤烧杯上附着的样品，洗液并入容量瓶中。
4.加5mI 氯化锡镕液，用氯化钙溶液定容到刻度，混匀，过滤，弃去初滤液，收集滤液装入旋光管中，并于旋光计中测定样品溶液旋光度。
五、计算
100m 203L 100
(%)????=α淀粉
式中：α——旋光度读数，度；
L ——观测管长度，dm ；
M ——样品质量，g
203——淀粉的比旋光度，度
六、说明
1.氯化钙溶液可以作为淀粉的提取剂，是因为钙能与淀粉分子上的羧基形成络合物，使淀粉与水有较高的亲合力而易溶于水中。
2.淀粉溶液加热后，必须迅速冷却，以防止淀粉老化，形成高度晶化的不溶性淀粉分子微束。
3.氯化锡溶液的作用是沉淀蛋白质，因为蛋白质也具有旋光性(左旋性)。蛋白质含量较高的样品，如高蛋白营养米粉，用旋光法测定时结果偏低，误差较大。 思考题：
1.样品加盐酸处理时，煮沸时间少于或多于15分钟会对测定结果产生什么影响 答：因为淀粉水解成葡萄糖才有旋光，控制加热时间是为了水解完全保证测定的准确性。若煮沸时间少于15min ，淀粉可能水解不完全；如果煮沸时间多于15min ，会发生副反应，产生糊精，也会影响实验结果。
2.为什么过滤时要弃取初始滤液15mL
答：一是因为本小组在用滤纸做漏斗时未用蒸馏水先弄湿滤纸，直接倒需要过滤的浑浊液，因此会有部分未通过滤纸，直接从滤纸与漏斗的缝隙处流入烧杯；二是为了在滤纸表面形成滤饼层，此样液固体含量较高，适合使用滤饼层过滤，通常，过滤开始阶段得到的是浑浊液，对实验结果会有影响，所以要舍弃前15ml 。
蛋白质的提取与检测
蛋白质的提取与检测 第一节细胞总蛋白的提取及含量测定 【基本原理】 蛋白质含量测定法是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种经典的方法，即定氮法、双缩脲法（Biuret法）、Folin-酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法。另外还有两种近年普遍使用起来的测定法，即考马斯亮蓝法（Bradford法）与二辛可宁酸法（BCA法）。值得注意的是，上述方法并不能在任何条件下适用于任何形式的蛋白质，因为一种蛋白质溶液用这几种方法测定有可能得出不同的结果。每种测定法都不是完美无缺的，都有其优缺点。在选择方法时应考虑：①实验对测定所要求的灵敏度和精确度；②蛋白质的性质；③溶液中存在的干扰物质；④测定所要花费的时间。 Lowry法：蛋白质与碱性铜溶液中的二价铜离子络和使得肽键伸展，从而使暴露出的酪氨酸和色氨酸在碱性铜条件下与磷钼钨酸反应并产生深蓝色，在750nm有最大光吸收值。在一定浓度范围内，反应液颜色的深浅与蛋白质中的酪氨酸和色氨酸的含量成正比,由于各种蛋白质中的酪氨酸和色氨酸的含量各不相同，因此在测定时需使用同种蛋白质作标准。 Bradford法：蛋白质与染料考马斯亮蓝G-250结合，使得染料最大吸收峰从465nm变为595nm，溶液的颜色由棕黑色变为蓝色。在一定的线性范围内，反应液595nm处吸光度的变化量与反应蛋白量成正比，测定595nm处吸光度的增加即可进行蛋白定量。
BCA （Bicinchoninic acid）法：二价 铜离子在碱性 的条件下，可以 被蛋白质还原 成一价铜离子 （Biuret reaction）并与 BCA相互作用 产生敏感的颜 色反应。两分子 的BCA螯合一 个铜离子，形成 紫色的反应复 合物。该水溶性 的复合物在 562nm处显示 强烈的吸光性， 吸光度和蛋白 浓度在广泛范 围内有良好的 线性关 0.118 0.05 0.154 0.1 0.213 0.2 0.283 0.3 0.329 0.4 0.404 0.5 第二节SDS-PAGE电泳 【基本原理】
目的：建立玉米淀粉质量标准，保证玉米淀粉的质量。适用范围：适用于本公司所采购的辅料玉米淀粉。 职责：质量部负责制定、监督实施。 内容： 【定量和定性的限度要求】
【质量标准全文】 本品系自禾本科植物玉蜀黍Zea mays L.的颖果制得。【性状】本品为白色或类白色粉末。
本品在水或乙醇中均不溶解。 【鉴别】（1）去本品约1.0g，加水15ml，煮沸，放冷，即成类白色白透明的凝胶状物。 （2）取鉴别（1）项下凝胶状物约1ml，加碘试液1滴，即显蓝黑色或紫黑色，加热后逐渐褪色。 （3）取本品适量，用甘油醋酸试液装片（通则2001），置显微镜下观察，淀粉均为单粒，呈多角形或类圆形，直径为5-30um；脐点中心性，呈圆点状或星状；层纹不明显。在偏光显微镜下观察，呈现偏光十字，十字交叉位于颗粒脐点处。 【检查】酸度取本品4.0g，加水20ml，振摇5分钟，使混匀，离心，取上清液，依法测定（通则0631），pH值应为4.5～7.0。 外来物质取鉴别3项下装片，在显微镜下观察，不得有其他品种的淀粉颗粒。 二氧化硫取本品，依法检查（通则2331），含二氧化硫不得过0.004%。 氧化物质取本品4.0g，置具塞锥形瓶中，加水50.0m l,密塞，振摇5分钟，转人具塞离心管中，离心至澄清，取上清液30.0ml，置碘瓶中，加冰醋酸lml与碘化钾 1.0g,密塞，摇匀，置暗处放置30分钟，加淀粉指示液1ml, 用硫代硫酸钠滴定液（0.002mol/L）滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。消耗硫代硫酸钠滴定液(0.002mol/L)不得过1.4ml(0.002% )。 干燥失重取本品，在130℃干燥90分钟，减失重量不得过14.0%(通则0831) 。 灰分取本品1.0g，依法检查（通则2302)，遗留残渣不得过0.3%。 重金属取本品1.0g，依法检查（通则0821)，含重金属不得过百万分之二十。 铁盐取本品1.0g，置于具塞锥形瓶中，加稀盐酸4ml与水16ml，强力振摇5分钟，滤过，用适量水洗涤，合并滤液与洗液置50ml 纳氏比色管中，加过硫酸铵50mg，用水稀释成35ml后，依法检查（通则0807)，与标准铁溶液1.0ml制成的对照溶液比较，不得更深( 0.001% ) 。 微生物限度取本品，依法检查（通则1105与通则1106），每1g供试品中需氧菌总数不得过1000cfu、霉菌和酵母菌总数不得过100cfu，不得检出大肠埃希菌。
淀粉基本知识 1、淀粉合成、结构、成份 淀粉是纯碳水化合物，分子式可简写为（C6H10O5）n 淀粉颗粒按结构可分为： 支链淀粉：70~80% 支杈状结构粘性分子量32000~16000 直链淀粉：20~30% 直链状结构易和有机物或碘生成化合物，10~100万。 2、物理性质 ①外观：白色粉末（或微带浅黄色阴影）淀粉密度1.61 偏光十字：在偏光显微镜下观察，淀粉颗粒具有双折射性，在淀粉粒面上可以看到以粒径为中心的黑心十字形。 ②淀粉水份含量： 平衡水份：淀粉在不同温度和湿度的空气中含有的水份。 一般水份12~13%，受空气的温度和湿度影响较大。 ③糊化： 若将淀粉的悬浮液加热，达到一定温度时，淀粉颗粒突然膨胀，因膨胀的体积达到原来的数百倍之大，所以悬浮液变为粘稠的胶体溶液这种现象称为淀粉的糊化。 玉米淀粉在55℃开始膨胀，64℃开始糊化，72℃糊化完成。 淀粉糊化的本质（宏观）： 三个阶段： A、吸水，淀粉粒内层膨胀，外形未变→可逆的润胀。 B、水温升高至糊化温度时突然膨胀，大量吸水，偏光十字消失，晶体解体→不可逆的溶胀。 C、温度升高，溶胀的淀粉粒继续分解，溶液黏度增高。晶体结构解体，无法恢复成原有的晶体结构。 （微观）本质：水分子进入淀粉颗粒的微晶体结构，拆散淀粉间的缔合状态，淀粉分子或其它集聚体经高度水化形成胶体体系。 ④淀粉遇碘变兰： 鉴别淀粉的存在：加热到70℃时兰色消失，故中和应冷却至70℃以下。 本质：这种反应不是化学反应，而是由于直链淀粉“吸附”碘形成的络合结构。 ⑤淀粉的凝沉作用： 淀粉的衡溶液在低温下静置一定时间后，溶液变浑浊，溶解度降低，而沉淀析出，如果浓度大时间长，则沉淀物可形成硬块不再溶解，也不易被酶作用，这种现象称为淀粉的凝沉作用，也叫老化作用。 凝沉本质：在温度逐渐降低的情况下，溶液中淀粉分子的运动减弱后，
1.目的 掌握凯氏定氮法测蛋白质的原理、操作、条件、注意事项。 2.原理 蛋白质是含氮有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解。分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后在以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量计算含氮量再乘以换算系数，即为蛋白质含量。 3.试剂 3.1浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾，所有试剂均用不含氮的蒸馏水配制 3.2混合指示液 1份（1g/L）甲基红乙醇溶液与5份1g/L溴甲酚氯乙醇溶液临用时混合。 也可用2份甲基红乙醇溶液与1份1g/L次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 3.3氢氧化钠溶液（400g/L） 3.4标准滴定溶液 硫酸标准溶液［c（1/2H2SO4）=0.0500mol/L］或盐酸标准溶液［c（HCl） 0.0500mol/L］ 3.5硼酸溶液（20g/L） 4.仪器 定氮蒸馏装置 5.样品 全蛋（2.47g） 6.操作 6.1样品处理 准确称取2—5g半固体样品，小心移入干燥洁净的500mL凯氏烧瓶中，然后加入研细的硫酸铜0.5g，硫酸钾10g和浓硫酸20mL，轻轻摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜放于加有石棉网的电炉上，小火加热，待内容物全部炭化后，泡沫完全消失后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色呈请透明后，再继续加热0.5h，取下放冷，慢慢加入20mL水。 放冷后，移入100mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。 6.2连接装置 装好定氮装置，于水蒸气发生器内装水至2/3处，加甲基红指示剂数滴及少量硫酸，以保持水呈酸性，加入数滴玻璃珠以防暴沸，用调压器控制，
文件标题玉米淀粉质量标准 文件编码QS 页码第 1 页共 6 页审核批准： 批准人：批准日期：年月日 审核人：审核日期：年月日 审核人：审核日期：年月日 制订人：制订日期：年月日 文件管理： 颁发部门：质量部颁发日期：年月日 颁发数量：共份生效日期：年月日 分发部门：总经理室〈〉副总经理室〈〉质量部〈〉生产部〈〉工程部〈〉行政人事部〈〉研发部〈〉财务部〈〉销售部〈〉档案室〈〉文件的变更记录 版本生效日期变更摘要 目的：建立玉米淀粉质量标准，保证玉米淀粉的质量。 适用范围：适用于本公司所采购的辅料玉米淀粉。 职责：质量部负责制定、监督实施。 内容：
文件标题玉米淀粉质量标准 文件编码QS 页码第 2 页共 6 页【定量和定性的限度要求】 项目法定质量标准定量和定性限度内控质量标准定量和定性限度 【性状】 本品为白色或类白色粉末。 本品在水或乙醇中均不溶解。 本品为白色或类白色粉末。 本品在水或乙醇中均不溶解。 【鉴别】（1）应呈正反应（1）应呈正反应（2）应呈正反应（2）应呈正反应（3）应符合规定（3）应符合规定 【检查】 酸度pH值应为4.5～7.0。pH值应为4.5～7.0。外来物质应符合规定应符合规定 二氧化硫不得过0.004%不得过0.004% 氧化物质应符合规定应符合规定 干燥失重不得过14.0%不得过14.0%灰分不得过0.3%不得过0.3% 重金属不得过百万分之二十不得过百万分之二十铁盐应符合规定应符合规定 【微生物限度】每1g供试品中需氧菌总数不得过 1000cfu、霉菌和酵母菌总数不得 过100cfu，不得检出大肠埃希菌。 每1g供试品中需氧菌总数不得过 1000cfu、霉菌和酵母菌总数不得 过100cfu，不得检出大肠埃希菌。 【质量标准全文】 本品系自禾本科植物玉蜀黍Zea mays L.的颖果制得。 【性状】本品为白色或类白色粉末。 本品在水或乙醇中均不溶解。 【鉴别】（1）去本品约1.0g，加水15ml，煮沸，放冷，即成类白色白透明的凝胶状物。 （2）取鉴别（1）项下凝胶状物约1ml，加碘试液1滴，即显蓝黑色或紫黑色，加
蛋白质的测定方法 测定食物中的蛋白质含量有二种方法，一是凯氏微量法，二是自动定氮分析法。 一．凯氏微量法 有手工滴定定氮和自动定氮仪定氮，实验者可根据经济条件设备而定。 1.原理 蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用过量硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。 2NH2（CH2）2COOH+13H2SO4 （NH4）2SO4+6CO2+12SO2+16H2O （NH4）2SO4+2NaOH 2NH3+2H2O+Na2SO4 2.方法 本法参照GB 5009.5 -85 适用于各类食品及饲料中蛋白质的测定 3.试剂 所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。试剂均为分析纯。 3.1硫酸铜 3.2硫酸钾 3.3浓硫酸 3.4 2%硼酸溶液（或1%的硼酸） 3.5 混合指示剂：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 3.6饱和氢氧化钠：500g氢氧化钠加入500ml水中，搅拌溶解，冷却后放置数日，澄清后使用。 3.7 0.01mol/L或0.05mol/L盐酸标准溶液：需标定后使用(配制及标定方法见附录) 4.仪器 消化炉凯氏定氮蒸馏装置万分之一电子天平 凯氏定氮蒸馏装置：如图所示 5. 操作步骤 5.1样品处理：精密称取0.1~2.0g固体样品或2~5g半固体样品或吸取液体样品5~20ml，放入100ml或500ml凯氏烧瓶中，加入0.2g硫酸铜，0.3g硫酸钾及3~20ml浓硫酸，放置过夜后小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，取下放冷后用约2～10ml蒸馏水冲洗瓶壁，混匀后继续加热至液体呈蓝绿透明，取下放冷，小心加10~20ml水混匀，放冷后，移入100ml容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白实验。 5.2按图装好定氮装置，于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处，加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。 5.3向接收瓶内加入10ml ,1~2%硼酸溶液及混合指示液1滴，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10ml样品消化稀释液由小玻璃杯流入反应室，并以10ml水洗涤小烧杯使之流入反应室内，塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。将3~10ml饱和氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯中，提起玻璃塞使其缓缓流入反应室，立即将玻璃塞盖紧，并加水于小玻璃杯中以防漏气。加紧螺旋夹，开始蒸馏。蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏2min，移动接收瓶，使冷凝管下端离开液面，然后用少量中性水冲洗冷凝管下端外部，再蒸馏1min取下接收瓶，以0.01或0.05mol/L盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。 同时吸取10ml试剂空白消化液按5.3操作。 6. 计算
蛋白质提取及纯化 提取蛋白质的当天早晨去后把高速离心机和超高速离心机都打开冷却 1、前一天晚上用Resuspension Buffer重悬4L菌体，然后离心于4C保存，第 二天使用。 2、用少量预冷的Resuspension Buffer重悬细菌，1 protease inhibitor tablets(EDTA Free)，1mM PMSF, 然后用玻璃Homogenizer做均一化处理，将总体积调至80ml； 3、High Pressure Homogenizer破壁，特别注意样品一定要在不加压力的情况 下运行一个循环（2min）；然后1200bar，6min三个循环，整个过程冰水冷却； 4、DNaseI处理：加入2.5mg DNaseI，10mM MgCl2, 室温处理30min； 5、 11.000rpm，4℃，15min; then 11.000rpm，4℃，15min； 6、 1mM PMSF, 45.000rpm，4℃，90min; 7、用Resuspension Buffer洗两次以除去可溶性的蛋白质，然后预热分光光度 计； 8、用3-4ml Binding Buffer重悬Membrane pellets，动作一定要轻缓，重悬 后的总体积不超过8ml，取出300ul测定OD800和OD850(以OD850为准),测定时候是逐步稀释，每次吸光值小于1； 9、调整OD850≤30-50，在缓慢搅拌（速度一定要慢）的情况下逐滴加入30%的 LDAO使其终浓度达到0.5%，1mM PMSF，26℃黑暗条件下重悬1h，期间注意观察颜色变化； 10、45.000rpm, 4℃, 30min，注意观察颜色的变化以及沉淀是否发生明显的变化。 Charge and Equilibrate Resin (1)用蒸馏水冲洗柱子以除去20%酒精，注意不要用buffer，1ml/min，至紫外 吸收和电导稳定； (2)用0.1M NiSO4 Charge Resin，1ml/min，10倍柱体积，尽量使得紫外吸收 和电导稳定； (3)用蒸馏水冲洗，1ml/min，至紫外吸收和电导稳定；
文件编号页码共3页第1页 文件名称玉米淀粉内控质量标准版次 制定人制定日期年月日 审核人审核日期年月日 批准人批准日期年月日 颁发部门颁发日期年月日 执行部门生效日期年月日 分发部门：取代： 【名称】玉米淀粉 【代号】 ）、中国药典2015年版四部通则 【依据】中国药典2015年版四部（P 488 【来源】本品系自禾本科植物玉蜀黍Zea mays L.的颖果制得。 【性状】本品为白色或类白色粉末。 本品在水或乙醇中均不溶解。 【鉴别】（1）取本品约1.0g，加水15ml，煮沸，放冷，即成类白色半透明的凝胶状物。（2）取鉴别（1）项下凝胶状物约1ml，加碘试液1滴，即显蓝黑色或紫黑色，加热后逐渐褪色。 （3）取本品适量，用甘油醋酸试液装片（中国药典2015年版四部通则2001），置显微镜下观察。淀粉均为单粒，呈多角形或类圆形，直径为5～30μm；脐点中心性，呈圆点状或星状；层纹不明显。在偏光显微镜下观察，呈现偏光十字，十字交叉位于颗粒脐点处。【检查】酸度取本品4.0g，加水20ml，振摇5分钟，使混匀，离心，取上清液，依法测定（中国药典2015年版四部通则0631），pH值应为4.5~7.0。 外来物质取鉴别（3）项下装片，在显微镜下观察，不得有其他品种的淀粉颗粒。 二氧化硫取本品，依法检查（中国药典2015年版四部通则2331），含二氧化硫不得过0.004%。 氧化物质取本品4.0g，置具塞锥形瓶中，加水50.0ml，密塞，振摇5分钟，转入具塞离心管中，离心至澄清，取上清液30.0ml，置碘瓶中，加冰醋酸1ml与碘化钾1.0g，密塞，摇匀，置暗处放置30分钟，加淀粉指示液1ml，用硫代硫酸钠滴定液（0.002mol/L）滴定
大连商品交易所玉米淀粉交割质量标准 （F/DCE CS001-2014） 1主题内容与适用范围 1.1本标准规定了用于大连商品交易所交割的玉米淀粉定义、质量要求、试验方法、检验与判定规则、包装和贮存等要求。 1.2 本标准适用于大连商品交易所玉米淀粉期货合约交割标准品。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，引用文件最新版本适用于本标准。 GB/T 8885 食用玉米淀粉 GB/T 191 包装储运图示标志 3 术语和定义 玉米淀粉：以国产玉米为原料，在中国境内生产的淀粉。
4 质量要求 标准品质量应同时满足表1、表2和表3要求。 表1 感官要求 表3卫生指标 5 检验与判定规则 5.1 同一生产厂家、同一包装规格的产品组为一批。 5.2 抽样数量按照GB/T 8885中抽样方案规定，再向上取最近整数后执行，检验方法按照GB/T 8885中相关规定执行，有版本更新的，适用新版本相应条款。 5.3 本标准4质量要求中任何一个项目不合格，该批次产品为不合格。 6包装、标签、标志要求 6.1 采用全新的双层或覆膜袋装，包装材料应干燥、清洁、牢固，符合食品包装材料的卫生要求。 6.2 每袋净重应为40±0.5千克或830±5千克。 6.3 包装袋应注明产品名称、净含量、生产者名称、地址和联系方式、生产日期、食品生产许可证编号等内容，标志应符合GB/T191的要求。 7 贮存要求 产品贮存在阴凉、干燥、通风无污染的环境下，不应露天存放。 8 附加说明
大连商品交易所交割细则 第一章总则 第一条为保证大连商品交易所(以下简称交易所)期货交割业务的正常进行，规范实物交割行为，根据《大连商品交易所交易规则》，制定本细则。 第二条交易所上市的商品期货合约采用实物交割方式。实物交割是指交易双方按照合约和规则的规定通过该期货合约所载商品所有权的转移,了结未平仓合约的过程。 第三条客户的实物交割应当由会员办理，并以会员名义在交易所进行。 第四条个人客户持仓和焦炭、焦煤、铁矿石非交割单位整数倍持仓不得交割。 自交割月份第一个交易日起，交易所对个人客户交割月份合约的持仓予以强行平仓。 对焦炭、焦煤、铁矿石以外品种合约，最后交易日收市后，个人客户交割月份合约的持仓仍未能平仓的，首先由会员代为履约，会员仍未能履约的，则按照本细则第二十三章有关规定进行处理。 对焦炭、焦煤、铁矿石合约，最后交易日收市后，个人客户交割月份合约的持仓和非交割单位整数倍持仓仍未能平仓的，由交易所按照“不允许交割持仓优先，含有时间最短持仓的交割单位整数倍持仓优先”原则，选择对手方持仓对冲平仓，平仓价格为该合约交割结算价，并对客户持有的不允许交割持仓部分处以按交割结算价计算合约价值20％的罚款，该款项支付给对方。若对冲双方均为持有不允许交割持仓的客户，交易所对双方分别处以按交割结算价计算合约价值20％的罚款，不再支付给对方。 第五条交易所上市的商品期货合约的交割业务按本细则进行，交易所、会员、客户、指定交割仓库、指定车板交割场所、指定质量检验机构等交割业务参与者应当遵守本细则。 第二章期货转现货 第六条期货转现货（以下简称期转现）是指持有同一交割月份合约的交易双方通过协商达成现货买卖协议，并按照协议价格了结各自持有的期货持仓，同时进行数量相当的货款和实物交换。
玉米淀粉生产工艺流程图 原料玉米 ↓ 净化→杂质 ↓ 硫磺→制酸→浸泡→稀玉米浆→浓缩→玉米浆 ↓ 破碎→胚芽→洗涤→脱水→干燥→榨油 ↓ 精磨 ↓ 筛洗→渣皮→脱水→干燥→粉碎→纤维粉 ↓ 分离→浓缩→脱水→干燥→蛋白粉 ↓ 清水→淀粉洗涤 ↓ 精制淀粉乳→制糖、变性淀粉等 ↓ 脱水 ↓ 干燥 ↓ 淀粉成品 ↓ 计量包装 主要设备 1.提升机1台 2.清理筛1台 3.除石槽2台（自制） 4.亚硫酸罐1个（自制） 5.硫磺吸收塔 2 座 6.浸泡罐6个（自制） 7.重力筛 2台 8.破碎磨 2台 9.针磨 1台 10.胚芽旋流器 2台 11.胚芽筛 1台 12.压力曲筛 7 台 13.洗涤槽 1套（自制） 14.分离机 2台 15.洗涤旋流器一套
16.汽浮槽 2台（自制） 17.螺旋挤干机 2台 18.管束干燥机 3台 19.板框压滤机 4台 20.沉淀罐 4个 21.地池 1个 22.刮刀离心机 1台 23.气流干燥机组 1套 24.原浆罐浓浆罐洗涤水罐各一个 25.各种泵、管道、阀门 玉米：水分%（m/m）≤14%杂质率%≤2%淀粉含量%（m/m）≥70%淀粉：65-68% 胚芽6-8% 纤维粉8-10% 蛋白粉 4.5-6% 一吨玉米可生产酒精0.3-0.32 吨吨淀粉可生产麦芽糖浆1.15吨 采用传统的玉米湿磨法（即用亚硫酸水溶液逆流浸泡玉米提取可溶性成分得玉米浸泡水，齿磨破碎、旋流分离提取玉米胚芽，筛分去渣，碟片分离机与旋流分离器组合使用分离去除蛋白）闭路循环生产工艺生产玉米淀粉，从而保证工艺的可靠性。同时充分利用工艺过程水，达到节省用水的目的。 玉米淀粉是以玉米为原料，经过原粮清理，浸泡，破碎，精磨，分离，淀粉精致，脱水，烘干，计量包装，成品。生产的过程中同步分离出胚芽，纤维粉，玉米蛋白粉及玉米浆。这些副产品还要分别经过分离，洗涤，脱水，烘干到计量包装。最终完成整套的生产过程。玉米淀粉生产线是一套连续的流水作业。玉米浆还可以和玉米纤维粉混合制成喷浆纤维，是做饲料的很好原料。 吨淀粉用水5吨左右电180度左右煤200公斤左右
生物化学综合性实验 蛋白质的提取（沉淀法）和定量分析之 鸡蛋中卵清蛋白的提取和定量测定 一、实验目的 研究盐析沉淀和等电点沉淀法的基本原理和技术。 一、二、实验原理 1、沉淀法粗分离蛋白质[1][2] 沉淀法是分离纯化生物大分子物质常用的一种经典方法，可分盐析法、等电点沉淀法和有机溶剂沉淀法等。 蛋白质分子表面含有带电荷的基团，这些基团与水分子有较大的亲和力，故蛋白质在水溶液中能形成水化膜，增加了蛋白质水溶液和稳定性。如果在蛋白质溶液中加入大量中性盐，导致蛋白质分子表面电荷被中和，水化膜被破坏，最终引起蛋白质分子间相互聚集并从溶液中析出，这就是盐析作用。 由于各种蛋白质分子表面的极性基团所带电荷数目不同，它们在蛋白质表面上的分布情况也不一样，因此，将不同蛋白质盐析出来所需要的盐浓度也各异，盐析法就是通过控制盐的浓度，使蛋白质混合液中的各个成分分步盐析出来，达到粗分离蛋白质的目的。 盐析法是1878年Hammarster首次使用的，可用作盐析的中性盐有过硫酸钠、氯化钠、磷酸钠、硫酸铵等，其中应用最广的是硫酸铵，硫酸铵在水中溶解度大，25℃可达4.1mol/L的浓度，化学性质稳定，溶解度的温度系数变化较小，价廉易得；分段效果较其他盐好，性质温和，即使浓度很高时也不会影响蛋白质的生物学活性。 鸡蛋清的主要成分是球蛋白和白蛋白（卵清蛋白），球蛋白可在半饱和硫酸铵溶液中析出，而清蛋白则在饱和硫酸铵溶液中才能析出。 蛋白质的盐析作用是可逆过程，由盐析获得的蛋白质沉淀，当降低其盐类浓度时，又能再溶解，因而可初步纯化蛋白质。 等电点沉淀法是利用蛋白质在其等电点时溶解度最小来分离具有不同等电点蛋白质的方法。蛋白质是两性电解质，蛋白质分子的电荷性质和数量因PH不同而变化，蛋白质处于等电点时，其净电荷为零，由于相邻蛋白质分子之间没有静电斥力而趋于聚集沉淀，因此，在其他条件相同时，它的溶解度达到最低点。 卵清蛋白的等电点为4.6-4.8，而球蛋的等电点是5.1。 2、蛋白质的测定 根据蛋白质的物理化学性质，测定蛋白质的方法有凯氏定氮法、紫外吸收法、Folin-酚法、考马斯亮蓝G-250染色法等。 由于蛋白质分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，因此蛋白质具有吸收紫外线的性质，吸收高峰在280nm波长处。在此波长范围内，蛋白质溶液的光吸收值（A280）与其含量呈正比关系，可用作定量测定。 由于核酸在280波长处也有光吸收，对蛋白质的测定有干扰作用，但核酸的最大吸收峰在260nm处，如同时测定260nm的光吸收，通过计算可能消除其对蛋白质测定的影响，因此溶液中存在核酸时必须同时测定280nm及260nm之光密度，方可通过计算测得
玉米淀粉水分含量的不确定度分析 依据ISO/ IEC 17025 准则,检测实验室应具有评价测量不确定度的程序,不确定度的测量目的是为了实验室数据比对,对测量结果临界值进行判断、方法确认及实验室的质控。本文给出玉米淀粉水分含量的测定不确定度的评定过程。 1 测量方法 （1）烘盒恒质 取干净的空烘盒，放在130 ℃ 烘箱内烘 30 min ～60 min ，取出烘盒置于干燥器内冷去至室温；再烘30 min ，重复进行冷却、称量至前后两次质量差不超过0.005 g ，即为恒质（m 0） （2） 样品及烘盒称量 精确称取5 g ±0.25 g 充分混匀的试样，倒入恒质后的烘盒内，使试样均匀分布在盒底表面上，盖上盒盖，立即称量烘盒和试样的总质量（m 1）。在整个过程中，应尽可能减少烘盒在空气中的暴露时间。 （3）测定 称量结束后，将盒盖打开斜靠在烘盒旁，迅速将盛有试样的烘盒和盒盖放入已预热到 130 ℃的恒温烘箱内，当烘箱温度恢复到130 ℃ 时开始计时，样品在130℃～133 ℃ 的条件下烘 90 min ，然后取出，并迅速盖上盒盖，放入干燥器中，在干燥器中，烘盒不可叠放。烘盒在干燥器中冷却 30 min ～45 min 至室温，然后将烘盒从干燥器内取出，在 2 min 内精确称量出样品和带盖烘盒的总质量（m 2）。 2 测量数学模型 水分含量按下式计算： 12 10100m m X m m -=?- （1） 式中： X ——试样水分含量，% ； 0m ——恒质后空烘盒和盖的总质量，单位为 g ； 1m ——干燥前带有样品的烘盒和盖的总质量，单位为 g ； 2m ——干燥后带有样品的烘盒和盖的总质量，单位为 g 。 3 不确定度的评定
吃玉米淀粉会胖吗 玉米是属于粗娘的一种，在平时的生活中大家经常会吃到。那么玉米淀粉我想大家也不陌生，因为在许多食物中我们都会采用它作为辅助材料使得我们煮出来的食物更加的鲜美。玉米淀粉中也含有丰富的蛋白质，人食用后会增加身体中所需要的营养成分，这样身体才会健康。 现如今吃东西怕发胖，使得很多人都不去吃一些脂肪含量高的食物，因为我们知道如果身体中摄取的脂肪含量大于了正常所需要的那么就会发胖。玉米淀粉的本质是属于玉米类的食物，所以它的大致营养因素也是相同的，那么吃玉米淀粉会胖吗 ? 玉米多吃不会增肥，反而有减肥的功效。 减肥食品玉米 又名苞谷、棒子、蜀黎等。每100克玉米中含热量820.06千焦
耳(196千卡)，粗纤维1.2克，蛋白质3.8克，脂肪2.3克，碳水化合物40.2克。玉米中含有较多的粗纤维，比精米、精面高4～10倍。玉米中还含有大量镁，镁可加强肠壁蠕动，促进机体废物的排除。 玉米可煮汤代茶喝，也可粉碎后作成玉米粥、玉米饼，膨化后的爆米花体积大，食后有饱胀感，含热量很低。 玉米含有丰富的钙、磷、硒和卵磷脂、维生素E等，均具有降低血清胆固醇的作用。印第安人几乎没有高血压、冠心病，这主要是得益于他们以玉米为主食。另外，多吃玉米，还可以使眼睛保持年轻漂亮。 玉米为一年生禾本科植物，又名苞谷、棒子、六谷等。据研究测定，每100克玉米含热量196千卡，粗纤维1.2克，蛋白质3.8克，脂肪2.3克，碳水化合物40.2克，另含矿物质元素和维生素等。玉米中含有较多的粗纤维，比精米、精面高4-10倍。玉米中还含有大量镁，镁可加强肠壁蠕动，促进机体废物的排泄。玉米上述的成份与功能，对于减肥非常有利。玉米成熟时的花穗
食品中蛋白质的测定方法 蛋白质的测定方法分为两大类：一类是利用蛋白质的共性，即含氮量，肽链和折射率测定蛋白质含量，另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸、碱性基团和芳香基团测定蛋白质含量。但是食品种类很多，食品中蛋白质含量又不同，特别是其他成分，如碳水化合物，脂肪和维生素的干扰成分很多，因此蛋白质的测定通常利用经典的剀氏定氮法是由样品消化成铵盐蒸馏，用标准酸 液吸收，用标准酸或碱液滴定，由样品中含氮量计算出蛋白质的含量。由于食品中蛋白质含量不同又分为凯氏定氮常量法、半微量法和微量法，但它们的基本原理都是一样的。 一凯氏定氮法 我们在检验食品中蛋白质时，往往只限于测定总氮量，然后乘以蛋白质核算系数，得到蛋白质含量，实际上包括核酸、生物碱、含氮类脂、叶啉和含氮色素等非蛋白质氮化合物，故称为粗蛋白质。 (一) 、常量凯氏定氮法 衡量食品的营养成分时，要测定蛋白质含量，但由于蛋白质组成及其性质的复杂性，在食品分析中，通常用食品的总氮量表示，蛋白质是食品含氮物质的主要形式，每一蛋白质都有其恒定的含氮量，用实验方法求得某样品中的含氮量后，通过一定的换算系数。即可计算该样品的蛋白质含量。 一般食品蛋白质含氮量为l6 ％，即1份氮素相当于6.25 分蛋白质,以此为换算系数6.25 ，不同类的食物其蛋白质的换算系数不同. 如玉米、高梁、荞麦, 肉与肉制品取6.25 ，大米取 5.95 、小麦粉取 5.7, 乳制品取 6.38 、大豆及其制品取5.17 ，动物胶 5.55 。 测定原理： 食品经加硫酸消化使蛋白质分解，其中氮素以氨的形式与硫酸化合成硫酸铵。然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸液吸收形成硼酸铵，再用盐酸标准溶液或硫酸标准溶液滴定，根据盐酸消耗量计算出总氮量，再乘以一定的数值即为蛋白质含量，其化学反应式如下。 ⑴消化反应：有机物(含C、N、H、0、P、S等元素)+H2S04 -T(NH4)2SO4+CO0 +S02f +S03+H3PO4+C02 (2) 蒸馏反应：(NH4)2SO4+2NAOH—2NH3T +2H2O+NA2SO4 2NH3+4H3B04 (NH4)2B4O7+5H2O (3) 滴定反应：(NH4)2B4O7+2HCH+5H2O T2NH4CH+4H3BC或(NH4)2B407+H2S04+5H20- (NH4)9SO4+4H2BO2 试剂与仪器： 1、硫酸钾； 2、硫酸铜；
一、实验摘要： 蛋白质是含一定量氮的有机化合物。其测定方法也有很多种。不同的方法都有其优点和缺点，以及它们的适用范围不同。 紫外吸收法（方便快捷，0.2-2mg/ml） 凯氏定氮法（粗蛋白测定，0.2 – 2.0mg /ml) 双缩脲法（1-10mg /ml) 福林酚法（0.005-0.10mg /ml) G250 （0.025-0.20mg /ml) （考马氏亮蓝法） BCA法（0.010-1.2mg/ml；0.0005-0.001mg/ml） 此次实验采用牛奶样品在凯氏烧瓶中经浓硫酸和催化剂消化后，使蛋白质分解，产成的氨与硫酸结合生成硫酸铵，再在强碱条件下蒸馏出氨，并用硼酸吸收，以标准盐酸滴定，根据标准酸消耗的量，乘以一定系数，即可计算样品中蛋白质的含量。此次实验中使用的是乳制品，系数F=6.38.这种测定方法即为凯氏定氮法。因为食品中除蛋白质外，还含有其他含氮物质，所以此蛋白质称为粗蛋白质。此次实验后，我们组的最终得率为2.77%。 二、实验目的： 1、学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理 2、掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理，蒸馏、滴定及蛋白 质含量计算等 3、侧面了解测定食品中蛋白质含量的多种方法和优劣 三、基本原理： 利用浓硫酸及催化剂与食品试样一同加热消化，使蛋白质分解，其中C、H 形成CO 2、H 2 O逸出，而氮以氨的形式与硫酸作用，形成硫酸铵留在酸液中。然后 将消化液用NaOH碱化，蒸馏，使氨游离，用水蒸气蒸出，被硼酸吸收。用标准盐酸溶液滴定所生成的硼酸铵，从消耗的盐酸标准液计算出总氮量，再折算为粗蛋白含量。 1.有机物中的氮在强热和CuSO4，浓H2SO4作用下，消化生成（NH4）2SO4 反应式为：H2SO4==SO2↑+ H2O +[O] R-CH2-COOH+[O]==R-CO-COOH+ NH3↑
《分子生物学实验》 实验报告 实验名称：生物样本中蛋白质的提取及测定 姓名：杰 学号：3140104666 组别： 同组同学：唐曦
带教教师：伟俞萍 实验日期：2015年9月15日 目录 1.原理： (3) 1.1生物样本中蛋白质的提取 (3) 1.2生物样本中蛋白质的测定 (3) 1.2.1 Lowry法 (3) 1.2.2 考马斯亮蓝法 (4) 1.2.3 紫外吸收法 (4) 2.操作步骤 (4) 2.1生物样本中蛋白质的提取 (4) 2.2生物样本中蛋白质的测定 (5) 2.2.1 Lowry法 (5) 2.2.2 考马斯亮蓝法 (5) 2.2.3紫外吸收法 (5) 3、实验结果 (6) 3.1 原始数据 (6) 3.1.1 Lowry法 (6) 3.1.2 考马斯亮蓝法 (7) 3.1.3 紫外吸收法 (7)
3.2 数据处理 (8) 3.2.1 Lowry法 (8) 3.2.2 考马斯亮蓝法 (9) 3.2.3 紫外吸收法 (10) 4.讨论： (11) 1.原理： 1.1生物样本中蛋白质的提取 离体不久的组织，在适宜的温度及pH等条件下，可以进行一定程度的物质代谢。因此，在生物化学实验中，常利用离体组织来研究各种物质代谢的途径与酶系作用，也可以从组织中提取各种代谢物质或酶进行研究。但生物组织离体过久，其所含物质的含量和生物活性都将发生变化。例如，组织中的某些酶在久置后会发生变性而失活；有些组织成分如糖原、ATP等，甚至在动物死亡数分钟至十几分钟，其含量即有明显的降低。因此，利用离体组织作代谢研究或作为提取材料时，都必须迅速将它取出，并尽快地进行提取或测定。一般采用断头法处死动物，放出血液，立即取出实验所需的脏器或组织，除去外层的脂肪及结缔组织后，用冰冷的生理盐水洗去血液（必要时可用冰冷的生理盐水灌注脏器以洗去血液），再用滤纸吸干，即可用于实验。取出的脏器或组织，可根据不同的方法制成不同的组织样品。包括组织糜、组织匀浆、组织浸出液。由于动物肝脏细胞比较脆弱，易于破碎，故本实验选用小鼠肝脏细胞作为实验材料，采用匀浆法法将其破碎，然后加入样品提取液使蛋白质溶解，用高速离心法弃去细胞碎片。收集上清液后可进行蛋白质定量分析。 1.2生物样本中蛋白质的测定 1.2.1 Lowry法 1921年，Folin发明了Folin-酚试剂法测定蛋白质的浓度，反应原理是利用蛋白质分子中的酪氨酸和色氨酸残基还原酚试剂（磷钨酸-磷泪酸）生成蓝色
玉米淀粉质量标准第 1 页共 3 页 目的：建立淀粉质量标准，用于淀粉初检及复检的质量控制。 范围：适用于淀粉的质量控制。 标准依据：《中国药典》2015版。 内容： 1、物料名称：玉米淀粉 1.1物料代码： 1.2质量标准的依据：中国药典2015年版 1.3经批准的供应商： 2、取样 照原料药、辅料取样标准操作规程取样，取样量为180g
4、检验方法： 本品系自禾本科植物玉蜀黍的颖果制得。 4.1性状 本品为白色粉末；无臭。本品在冷水或乙醇中均不溶解； 4.2鉴别 4.2.1取本品约1g，加水15ml，煮沸，放冷，即成类白色半透明的凝胶状物。 4.2.2取鉴别4.2.1项下凝胶状物约1ml，加碘试液1滴，即显蓝色或蓝黑色，加热后逐渐褪色。 4.2.3显微鉴别 取本品，用甘油醋酸试液装片（通则2001），置显微镜下观察。玉蜀黍淀粉均为单粒，呈多角形或类圆形，直径为5～30μm；脐点中心性，呈圆点状或星状；层纹不明显。在偏光显微镜下观察，呈现偏光十字，十字交叉位于颗粒脐点处。 4.3检查 4.3.1酸度： 取本品4.0g，加水20ml，振摇5分钟使混匀，离心，取上清液，依法测定（通则0631），pH值应为4.5～7.0。 4.3.2 外来物质 取鉴别4.2.3项下装片，在显微镜下观察，不得有其他品种的淀粉颗粒。 4.3.3二氧化硫： 取本品，依法检查（通则2331），含二氧化硫不得过0.004％。 4.3.4氧化物质： 取本品4.0g，置具塞锥形瓶中，加水50.0ml，密塞，振摇5分钟，转入50ml具塞离心管中，离心至澄清，取上清液30.0ml，置碘量瓶中，加冰醋酸1ml与碘化钾1.0g，密塞，摇匀，置暗处放置30分钟，加淀粉指示液1ml，用硫代硫酸钠滴定液（0.002mol/L）滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硫代硫酸钠滴定液（0.002mol/L）相当于34μg的氧化物质（以过氧化氢H2O2计），消耗的硫代硫酸钠滴定液（0.002mol/L）不得过1.4ml(0.002%)。 4.3.5干燥失重： 取本品，在130℃干燥90分钟，减失重量，不得过14.0%通则（0831） 4.3.6 灰分 取本品约1.0g，依法检查（通则2302），遗留残渣不得过0.3％。 4.3.7 重金属 取本品1.0g，依法检查（通则0821），重金属不得过百万分之二十。 4.3.8铁盐：
蛋白的提取和定量 肺组织用预冷1×TBS洗净后，加入含PMSF的RIPA buffer（冰上操作，310ul,决定未来的蛋白浓度和蛋白液体积）,50-60mg肺组织砸碎放入1.5ml离心管，冰上孵育1h，10000转4℃离心10min，转上清至新管。裂解液分装后保存于-70℃ 蛋白质定量：BCA蛋白测定法 ①根据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B（50：1）配制适量BCA工作液，充分混匀。BCA工作液室温24小时内稳定。 ②完全溶解蛋白标准品(BCA试剂盒中，BSA原浓度2mg/mL),稀释到1mg/mL。 ③将标准品按0，2，5，10，15，20，25 ul标准品孔中，加蒸馏水稀释标准品的 ④加样品2uL加到96孔板的样品孔中，加蒸馏水23微升。 ⑤各孔加入200微升BCA工作液，37o C放置30分钟。同时打开酶标仪预热。 注：也可以室温放置2小时，或60o C放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，吸光度会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低，适量在较高温度孵育，或延长孵育时间。 ⑥测定A570的波长，根据标准曲线计算出蛋白浓度。 ⑦计算调蛋白时所需TBS和RSB的体积（调所有样品浓度至3-5ug/ul）： 总体积=蛋白体积*蛋白浓度/3（ul） RSB=1/5*总体积（ul） TBS=总体积-RSB-蛋白体积（ul） 先加RSB（对蛋白有保护作用），后加TBS。最后放于-70℃保存。 Western Blot SDS-PAGE 1. 玻璃板：注意对齐、夹紧，防止漏出，短板朝前。 灌至距绿线1cm左右，用dd水封顶，放置30－40min。状况好时往往能观察到
GB 12309—90 1 主题内容与适用范围 本标准规定了工业玉米淀粉的技术要求、试验方法、检验规则及产品的标志、包装、运输、贮存。 本标准适用于以玉米为原料，经湿磨法加工制成的工业淀粉。 2 引用标准 GB 191 包装储运图示标志 GB 601 化学试剂滴定分析（容量分析）用标准溶液的制备 GB 602 化学试剂杂质测定用标准溶液的制备 GB 603 化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备 GB 604 化学试剂酸碱指示剂pH变色域测定通用方法 GB 7718 食品标签通用标准 3 技术要求 3.1 感官要求 感官要求见表 1。 表 1 3.2 理化要求 理化要求见表 2。 表 2
4 试验方法 试验方法中所用水均为去离子水或蒸馏水，所用试剂均为分析纯。 4.1 取样 从整批产品中抽取样品时，应先从整批中抽取若干包装单位，然后再从抽出的包装单位中抽取均匀试样。 4.1.1 整批产品中包装单位的抽取 抽取包装单位的数量，根据批量总数按式（1）计算。 (1) 式中：A ── 应抽取的包装单位数（A 不得小于10），袋； N ── 批量的总包装单位数，袋。
4.1.2 均匀试样的抽取 取样时，用清洁、干燥的取样工具插入包装袋的2/3处。每袋取样100 g，将抽取的样品迅速混匀，用四分法缩分，然后分装于两个1000 mL清洁干燥的广口瓶中，密封，贴上标签，一瓶供检测用，一瓶封存备查。 4.2 感官试验 4.2.1 外观 在明暗适度的光线下，用肉眼观察样品的颜色，然后在较强烈阳光下观察样品的光泽。 4.2.2 气味 取淀粉样品20 g，放入100 mL磨口瓶中，加入50℃的温水50 mL，加盖，振摇30 s，倾出上清液，嗅其气味。 4.3 理化试验 4.3.1 水分（烘箱法） 4.3.1.1 原理 将样品放于131±2℃的烘箱内，干燥后测样品的损失质量。 4.3.1.2 仪器 a．电热干燥箱：131±2℃； b．铝盒或称量瓶：直径40～50 mm； c．干燥器：用变色硅胶作干燥剂。 4.3.1.3 试验程序 用恒重的铝盒（或称量瓶）称取样品4～5 g（精确至0.0001 g），置于131±2℃的烘箱中，把盖靠在铝盒（或称量瓶）上，烘干40 min取出，迅速盖盖。放入干燥器内，冷却（30 min）至室温，称量（在2 min内完成）。 4.3.1.4 计算 …………………………………………………… （2）式中：X1──样品的水分，％；
实验四 玉米粉中淀粉含量的测定 （旋光计法） 二、实验原理 淀粉具有旋光性，在一定条件下旋光度的大小与淀粉的浓度成正比。用氯化钙溶液提取淀粉，使之与其他成分分离，用氯化锡沉淀提取液中的蛋白质后，测定旋光度，即可计算出淀粉含量。 四、操作方法 1.把样品研磨并通过40目以上的标准筛，称取2g 样品，置于250ml 烧杯中。 2.加水10m1，搅拌使样品湿润，加入70ml 氯化钙溶液，盖上表面皿，在5min 内加热至沸并继续加热15min 。加热时随时搅拌以防样品附在烧杯壁上。如泡沫过多可加1～2滴辛醇消泡。 3.迅速冷却后，移入l00ml 容量瓶中，用氯化钙溶液洗涤烧杯上附着的样品，洗液并入容量瓶中。 4.加5mI 氯化锡镕液，用氯化钙溶液定容到刻度，混匀，过滤，弃去初滤液，收集滤液装入旋光管中，并于旋光计中测定样品溶液旋光度。 五、计算 100m 203L 100 (%)????=α淀粉 式中：α——旋光度读数，度； L ——观测管长度，dm ； M ——样品质量，g 203——淀粉的比旋光度，度 六、说明 1.氯化钙溶液可以作为淀粉的提取剂，是因为钙能与淀粉分子上的羧基形成络合物，使淀粉与水有较高的亲合力而易溶于水中。 2.淀粉溶液加热后，必须迅速冷却，以防止淀粉老化，形成高度晶化的不溶性淀粉分子微束。 3.氯化锡溶液的作用是沉淀蛋白质，因为蛋白质也具有旋光性(左旋性)。蛋白质含量较高的样品，如高蛋白营养米粉，用旋光法测定时结果偏低，误差较大。 思考题： 1.样品加盐酸处理时，煮沸时间少于或多于15分钟会对测定结果产生什么影响 答：因为淀粉水解成葡萄糖才有旋光，控制加热时间是为了水解完全保证测定的准确性。若煮沸时间少于15min ，淀粉可能水解不完全；如果煮沸时间多于15min ，会发生副反应，产生糊精，也会影响实验结果。 2.为什么过滤时要弃取初始滤液15mL 答：一是因为本小组在用滤纸做漏斗时未用蒸馏水先弄湿滤纸，直接倒需要过滤的浑浊液，因此会有部分未通过滤纸，直接从滤纸与漏斗的缝隙处流入烧杯；二是为了在滤纸表面形成滤饼层，此样液固体含量较高，适合使用滤饼层过滤，通常，过滤开始阶段得到的是浑浊液，对实验结果会有影响，所以要舍弃前15ml 。