实验四黄连中小檗碱的提取、精制和鉴定
一、概述
黄连系毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eranch.）的干燥根茎。黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床。
主要化学成分的结构及理化性质：
小檗碱为黄色针状结晶，mp为154℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
O
3
3
NH
CHO
O
OCH3
OCH3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色）
N+
O
OCH3
OCH3
小檗碱（黄连素）
二、实验部分
（一）实验目的
1、掌握小檗碱的结构特点和理化性质，以及一般的提取精制方法。
2、掌握旋转蒸发仪的使用。
3、熟悉盐酸小檗碱的色谱鉴定和定性鉴定方法。
（二）实验原理
1、提取原理：小檗碱为异喹啉类小檗碱，结构中的氮原子以季铵盐形式存在，显一定程度的亲水性，因此游离小檗碱能溶与水(1:20)及乙醇(1:100)，热水或热乙醇中易溶，不溶于乙醚、氯仿、苯等有机溶剂。盐酸小檗碱在沸水中溶解，在冷水中析出。
2、分离原理：小檗碱与酸所成的盐在水中的溶解度不尽相同，如硫酸小檗碱为(1:30)，酸性硫酸小檗碱为(1:100)，枸橼酸小檗碱为(1:125)，而盐酸小檗碱为(1:500)。本实验就是据游离小檗碱在水和乙醇中的溶解度较大，而其盐酸盐难溶于水的性质进行提取和精制的。
（三）实验药材、仪器与试剂
1、药材：黄连50g（每组）。
2、仪器：回流装置、水浴锅、冰箱、旋转蒸发仪、烧杯（250ml）、抽滤装置、滤纸、层析缸、滤纸、试管、电炉。
3、试剂：75%乙醇、95%乙醇、蒸馏水、10%盐酸、氯化钠、乙醇、氯仿-甲醇-1/10盐酸（1:1:1）、10%硫酸、漂白粉、10%氢氧化钠、丙酮。
（四）实验内容
1、小檗碱的提取
取黄连粗粉50g，加入400ml75%的乙醇回流1.5h，四层纱布过滤，药渣用95%乙醇300ml回流1h，四层纱布过滤，并用少量蒸馏水洗涤药渣，合并两次滤液和洗液，放于冰箱中。
2、小檗碱的浓缩
用旋转蒸发仪将小檗碱提取液浓缩至糖浆状（小于50ml，无醇味）。
3、盐酸小檗碱的制备
将浓缩液倒入100ml沸水中（换成250ml烧杯）煮沸至溶解（10min），趁热抽滤，在滤液中加10%盐酸，调制pH=2，加入氯化钠10g，放入冰箱析晶。
4、盐酸小檗碱的精制
（1）抽滤，得到盐酸小檗碱粗品。
（2）取粗品放入100ml沸水中，搅拌溶解，继续加热10min，趁热抽滤，滤液放置过夜。（滤取结晶，先用少量1%盐酸洗一次，再用少量蒸馏水洗数次，抽干，干燥后得到小檗碱精品。）
5、鉴定
（1）化学检识
①取盐酸小檗碱少许，加10%的H
2SO
4
2ml，溶解后加漂白粉少许，即显樱红
色。
②取盐酸小檗碱约50mg，加蒸馏水5ml，水浴加热，溶解后加10%氢氧化纳试液2滴，显橙色。溶液放冷过滤，取澄清滤液，加丙酮4滴，即发生浑浊。放置后，生成黄色的丙酮小檗碱沉淀。
（2）纸层析鉴定
样品：1%醇溶液。（每组0.1g溶于10ml乙醇）
标准品：1%盐酸小檗碱醇溶液
展开剂：氯仿—甲醇—1/10MHCL(1:1:1下行)
显色：自然光下观察
（五）实验注意事项
1、提取时两次乙醇浓度不等，提醒学生不要加错。
2、漂白粉加少许即可，否则影响结果
3、纸条要保持平整，不靠壁。
（六）思考题
1、小檗碱为哪类生物碱，可以用什么方法提取？
2、回流与蒸馏的区别是什么？
3、小檗碱精制的原理是什么？
4、旋转蒸发仪使用时需注意哪些问题？
黄连中黄连素的提取及其紫外光谱分析 一、实验目的 1．通过从黄连中提取黄连素，掌握回流提取的方法。 2．比较索氏提取器与回流提取器的优异点。 3．学习掌握紫外吸收光谱的原理和应用范围 4．了解紫外可见分光光度计的工作原理，学习仪器的使用方法。 二、实验原理 黄连为我国名产药材之一，抗菌力很强，对急性结膜炎、口疮、急性细菌性痢疾、急性肠胃炎等均有很好的疗效。黄连中含有多种生物碱、除以黄连素（俗称小檗碱Berberine）为主要有效成分外，尚含有黄连碱、甲基黄连碱、棕榈碱和非洲防已碱等。随野生和栽培及产地不同，黄连中黄连素的含量约4%~10%。含黄连素的植物很多，如黄柏、三颗针、伏牛花、白屈菜、南天竹等均可作为提取黄连素的原料，但以黄连和黄柏含量为高。 黄连素是黄色针状体，微溶于水和乙醇，较易溶于热水和热乙醇中，几乎不溶于乙醚。 黄连素的结构式以较稳定的季铵碱为主，其结构式为： 在自然界黄连素多以季铵盐的形式存在，其盐酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐均难溶于水，易溶于热水，且各种盐的纯化都比较容易。 三、实验装置 四、实验试剂与仪器 试剂：黄连、乙醇、1%醋酸、浓盐酸。 器材：圆底烧瓶、球形冷凝管。 五、实验步骤 1．黄连素的提取：称取3g中药黄连粉末，放入小圆底烧瓶中，加入50ml乙醇，装上
回流冷凝管，热水浴加热回流30min，冷却,抽滤。滤渣重复上述操作处理两次，合并三次所得滤液，在减压下蒸出乙醇（回收），直到棕红色糖浆状。 2．黄连素的纯化：加入1%醋酸（约30~40ml）于糖浆状中。加热使溶解，抽滤以除去不溶物，然后于溶液中滴加浓盐酸，至溶液混浊为止（约需10ml），放置用冰水冷却，有黄色针状体的黄连素盐酸盐析出，抽滤，结晶用冰水洗涤两次，再用丙酮洗涤一次，自然干燥称量。产品待鉴定。 六、实验过程记录 产率：W=0.050/3*100%=1.67% 六、注意事项 1．黄连素的提取回流要充分 2．滴加浓盐酸前，不溶物要去除干净，否则影响产品的纯度。 七、实验讨论与心得 1．了解了黄连的要用价值。对黄连有了进一步的了解。 2．通过从黄连中提取黄连素，初步的掌握回流提取的方法。 3．了解了索氏提取器与回流提取器的各个优缺点。 4．对抽滤和结晶有了进一步的认识，掌握了操作的基本方法。此次实验对自己以后独立设计实验奠定了基础，对综合设计实验有了更进一步的认识。
粉末鉴别——xx，xx 2011级药学3班官梦歆1110307308 一．概述 1.来源： 黄连：本品为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连Coptis deltoidea C. Y.Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta Wall.的干燥根茎。 黄柏：本品为云香科植物黄蘖Phellodendron amurense Rupr.和黄皮树 P.chinense Schneid.的干燥树皮。前者习称“关黄柏”，后者习称“川黄柏”。 2.显微特征： 黄连粉末：棕黄色。⑴石细胞鲜黄色，类圆形、类方形、类多角形或稍延长，直径25~64μm，壁厚9~28μm。⑵木纤维众多，鲜黄色，直径10~13μm，壁具裂隙状纹孔。⑶韧皮纤维鲜黄色，纺锤形或长梭形，直径25~40μm，壁较厚，纹孔较稀。⑷导管主要为纹孔导管，少数为具缘纹孔、螺纹、网纹导管，直径7~19μm。⑸淀粉粒长圆形、肾形、类球形或卵形，直径1~10μm，复粒少数由2~4个分粒复合而成。⑹鳞叶表皮细胞绿黄色或黄棕色，略呈长方形，壁微波状弯曲。此外，有木栓组织、管胞、木薄壁细胞和细小草酸钙方晶等。 关黄柏粉末：鲜黄色。①纤维多成束，稀单个散在，鲜黄色，多碎断，直径10~20~40μm，壁甚厚，木化，孔沟短线形或不明显，胞腔狭细。纤维束周围细胞中含有草酸钙方晶，成行排列形成晶纤维；②射线多为切向纵切面，常数个相聚，稀单个散在，类圆形或分枝状，类圆形者直径30~130μm，壁甚厚，层纹明显，孔沟短线形或不明显；③草酸钙结晶较多，呈多面形、方形或棱形，直径5~13~30μm；④黏液细胞多散离，类球形，直径18~32~63μm；⑤筛管分子呈长筒形，时可察见，筛域矩圆形或椭圆形，端壁筛板具明显的多角形筛孔；⑥淀粉粒多存在于薄壁细胞中，单粒，类球形，直径2.5~10μm，脐点、层纹不明显；⑦稀由2~3个分粒组成复粒；木栓层碎片少见，木栓细胞壁薄，淡黄棕色，长方形或方形。
黄连中黄连素的提取及紫外光谱分析 【实验目的】 1.通过从黄连中提取黄连素，掌握回流提取的方法。 2.学习紫外吸收光谱的原理，了解紫外可见分光光度计的使用方法。 【实验原理】 黄连为我国名产药材之一，抗菌力很强，对急性结膜炎、口疮、急性细菌性痢疾、急性肠胃炎等均有很好的疗效。黄连中含有多种生物碱，黄连素的含量约4%~10%。黄连素结构式为： 分子吸收紫外或可见光后，能在其价电子能级间发生跃迁。有机分子中有三种不同性质的价电子：成 键的σσσπππ****→→→→、n 、、n 。不同分子因电子结构不同而有不同的电子能级和能级差，能 吸收不同波长的紫外光，产生特征的紫外吸收光谱。所以，紫外吸收光谱能用于有机化合物结构鉴定和定量分析。 【实验步骤】 1. 黄连素的提取：称取5 g 粉碎的中药黄连，放入50 mL 梨形烧瓶中，加入25 mL 水，在铁 架台上，依次放好垫板、电热包，固定好烧瓶的位置使梨形烧瓶中间半径最大部分与电热包 表面相平。梨形烧瓶上装上回流冷凝管，冷凝管中按照“下进上出”的原则通入自来水，冷 凝水流量以出口有水小量流出即可，水流量不可较大以防胶管迸裂。用垫板层数来调节使球 形冷凝管回流速度为1~2滴/秒，回流2 h ，静置稍冷后小心倒出上层溶液抽滤，下层药渣可 不过滤直接弃去（不得加水涮洗烧瓶后过滤，以免稀释溶液得不到结晶）。 2. 黄连素的纯化：滤液中加入3滴醋酸，若有不溶物须再次抽滤以除去不溶物，然后于溶液 中加入5 mL 浓盐酸，冷却至室温，即有黄色针状体的黄连素盐酸盐析出，抽滤，烘干产品用电子天平称重，计算产率。产品倒入回收杯中，不可随意乱扔。 3. 产品检测：产品在UV1100型紫外可见分光光度计中进行紫外吸收光谱的测定。黄连素的紫外可见吸收光谱图如下：
实验七黄连中盐酸小檗碱的提取分离及鉴定 黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。 黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。 黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。 [目的要求] 1．学习和掌握水溶性生物碱的提取方法。 2．学习和掌握生物碱的柱色谱分离方法。 3．学习和掌握生物碱的化学检识及薄层色谱的鉴定方法。 [实验原理] 小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。 小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
N +OH - O O OCH 3OCH 3N O O OCH 3 OCH 3 OH NH CHO O O OCH 3 OCH 3 季铵式（红棕色） 醇式（黄色） 醛式（黄色） N + O O OCH 3 OCH 3 小檗碱（黄连素） 掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、乙醚等有机溶剂。盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光。易溶于热水或热乙醇，在冷水中的溶解度也比盐酸小檗碱大。 N + H 3CO H 3CO OCH 3 OCH 3 掌叶防己碱 本实验是利用小檗碱和掌叶防己碱的硫酸盐在水中溶解度大的性质，用硫酸水提取出来总生物碱，再利用其盐酸盐难溶于水及盐析作用，使生物碱盐析出，以除去水溶性杂质。再利用两种生物碱极性不同，采用柱色谱分离。 [实验内容] 一、提取分离
从黄连中提取黄连素 教学要求: 1 掌握生物碱提取的原理和方法； 2 掌握减压蒸馏的装置、真空度控制和操作技术； 3 了解黄连素的应用及结构鉴定方法； 教学重点：通过索氏提取器提取生物碱的原理和方法。 教学难点：减压蒸馏的装置、真空度控制和操作技术 教学时数：8学时 一、实验目的 1.学习从中草药提取生物碱的原理和方法。 2.学习减压蒸馏的操作技术。 3.进一步掌握索氏提取器的使用方法，巩固减压过滤操作。 二、实验原理 黄连素（也称小檗碱），属于生物碱，是中草药黄连的主要有效成分。其中含量可达4%~10%。除了黄连中含有黄连素以外，黄柏、白屈菜、伏牛花、三颗针等中草药中也含有黄连素，其中以黄连和黄柏中含量最高。 黄连素有抗菌、消炎、止泻的功效。对急性菌痢、急性肠炎、百日咳、猩红热等各种急性化脓性感染和各种急性外眼炎症都有效。 黄连素是黄色针状体，微溶于水和乙醇，较易溶于热水和热乙醇中，几乎不溶于乙醚。黄连素的盐酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐均难溶于冷水，易溶于热水，故可用水对其进行重结晶，从而达到纯化目的。 黄连素在自然界多以季铵碱的形式存在，结构如下： 从黄连中提取黄连素，往往采用适当的溶剂（如乙醇、水、硫酸等）。在脂肪提取器中连续抽提，然后浓缩，再加以酸进行酸化，得到相应的盐。粗产品可以采取重结晶等方法进一步提纯。 黄连素被硝酸等氧化剂氧化，转变为樱红色的氧化黄连素。黄连素在强碱中部分转化为醛式黄连素，在此条件下，再加几滴丙酮，即可发生缩合反应，生成丙酮与醛式黄连素缩合产物的黄色沉淀。 三、实验步骤 1.称取10克中药黄连，切研碎磨烂，装入索氏提取器的滤纸套筒内，烧瓶内加入100ml 95%乙醇，加热萃取2~3小时，至回流液体颜色很淡为止。 2.在水泵减压下蒸馏，回收大部分乙醇，至瓶内残留液体呈棕红色糖浆状，停止蒸馏。
黄连中生物碱的提取分离及检识 （杨翊涵中药学一班 1302010138） 【摘要】黄连为多年生草本植物,是我国传统中药,在我国中西部地区分布广泛,具有清热燥湿,泻火解毒等功效,其根、茎味极苦,苦味源于所含的多种生物碱。本文总结整理了黄连中小檗碱提取分离实验过程的步骤方法，注意事项，并且整理了黄连中生物碱的有效成分、存在形式，生物碱的溶解性规律，以及实验过程中各种提取液，添加试剂的目的、原理与效果。【关键词】黄连生物碱小檗碱提取分离检识 1.1黄连有效成分 黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连（coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng）的干燥根茎。 黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。 黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存
在于黄连中。小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。 1.2小檗碱 小檗碱为黄色针状结晶，mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。 2.1实验原理 生物碱是植物中含氮的碱性有机化合物,大都有明显的生理活性,是许多中草药中的有效成分。它们是人类对植物研究得最早最多的一类有效成分,现已分离出有六千余种。这些生物碱在植物体内一般均与有机酸或无机酸结合成盐而存在,只有弱碱性生物碱往往呈游离状态,还有一些是与糖结合成苷而存在。小檗碱又名黄连素,是最先由毛莨科黄连（Coptis chinensis Fran）和芸香科黄柏(Phellodendron amurense Rup.)等植物中提出的一种黄色生物碱。黄连属植物的根茎、须根、叶中等都含有小檗碱、黄连
实验三黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定 小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。 黄连为毛茛科黄连属植物黄连（Coptis chinensis Franch。），三角叶黄连（C。deltoidea C。 Y。Cheng et Hsiao）或云连（C。teetoides C。Y。 Cheng）的根茎，含有小檗碱(1)、巴马汀(2)、黄连碱(3)、甲基黄连碱(4)、药根碱(5)等生物碱，其中以小檗碱含量最高，可达10%左右，小檗碱以盐酸盐的形式存在于黄连中。 目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料。三颗针来源于小檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，主要含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱。 R1 R2 R3 R4 R51 R1O R2O R5￡-OR3 OR4+3 CH3 HCH2CH3 CH3 CH3 CH3 HCH2CH2CH2CH23 H CH3 CH3 CH3 H 2345 小檗碱 (Berberine)属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色。Mp.145℃至160℃即分解。 OCH3 H3N H OCH3 O H 小檗胺 H3CO H CH3 游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。
贵州民族大学 2012届本科论文 从黄连中提取黄连素的研究 院系：化学与环境科学学院 年级： 2008 级 姓名：梁小英 学号： 200806010019 专业：应用化学 指导老师：张颂富 2012年5月
目录 摘要 (2) 关键词 (2) Abstract (2) Key words (2) 1绪论 (2) 2实验部分 (9) 2.1实验原理 (9) 2.2实验材料 (9) 2.3实验仪器 (9) 2.4 实验步骤 (9) 3实验结果与讨论 (10) 3.1提取率 (10) 3.2黄连素的鉴定 (11) 3.2.1标识反应 (11) 3.2.2 熔点测定 (12) 3.3讨论 (12) 4结论 (12) 成果申明 (12) 致谢 (12) 参考文献 (13)
从黄连中提取黄连素的研究 梁小英 （贵州民族学院化学与环境科学学院，贵州贵阳550025） 摘要：本文采用加热回流法，用川黄连在不同溶剂和不同时间下提取了黄连中的黄连素。并用熔点测定 仪对黄连素的物理性质进行了表征，测定了不同溶剂和不同时间下的黄连素的含量和提取率。实验结果 表明：黄连素在50%乙醇做溶剂，回流120分钟时的提取率最高，黄连素的熔点测定值和文献值相符合。关键词：加热回流法黄连黄连素产率 A study on Extracting berberine from coptis Liang Xiao Ying (Institute of Chemistry and Environment, Guizhou University for Nationalities; Guiyang, GuiZhou 550025) Abstract:In this paper, a method of hot reflux was used with different solvents and different time to extract the berberine from the coptis of Szechwan. Their melting points were determined by Melting point detector. The content and the extracting yield of berberine were determined under different solvents and different time.The experimental results indicated that the yield of the berberine was highest,when alcohol was as the solvent and it was refluxed 120 minutes, and the values of melting points for berberine were similar to the reference values reported. Key words:heating reflux method coptis solvent types extracting time berberine yield ⒈绪论 黄连是一种中草药，为毛莨科植物，是我国名贵中药材之一，并且享有“中药抗生素”的美称。黄连为清热类的药物，味极苦，性寒，具有清热燥湿，泻火解毒的功效。黄 连抗菌能力强，对急性结膜炎、口疮、急性细菌性痢疾、降热镇痛、抗肠道细菌感染等等 都有很好的疗效，在临床中也有较多的应用[1-3]。四川是黄连的主要产地，而且大多数都分 布在川西南海拔1700—2500米的盒周地区，亩产100—200公斤，这远远不能满足广大市 场的需求。所以，提高黄连素的提取率，减少黄连的废弃，是很有必要的。黄连素（又称 小檗碱、黄连素碱）是从黄连、黄柏、三颗针等植物中提取的生物碱。其中，黄连素在黄
黄连提取物 西安金绿生物工程技术有限公司 [产品名称-KinGreen]: 黄连提取物 [英文名称-KinGreen]: Chinese Goldthread Extract [拉丁名称-KinGreen]: Coptis chinensis Franch [原料别名-KinGreen]: 川连、姜连、川黄连、姜黄连、姜川连、姜制黄连、萸连、萸黄连、炒黄连、吴萸黄连、酒连、酒黄连、酒饮连、猪胆汁炒黄连、盐炒黄连、黄连炭、姜汁炒川连、尾连等。 [产品来源-KinGreen]: 黄连提取物来源为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连Coptis deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta Wall.的干燥根茎。以上三种分别习称“味连”、“雅连”、“云连”。秋季采挖，除去须根及泥沙，干燥，撞去残留须根。 [原料形态-KinGreen]: 属多年生草本。根茎黄色，常分枝，密生多数须根。叶全部基生；叶柄长5-12（-16）cm；叶片坚纸质，卵状三角形，宽达10cm，3全裂；中央裂片有细柄，卵状菱形，长3-8cm，宽2-4cm，顶端急尖，羽状深裂，边缘有锐锯齿，侧生裂片不等2深裂，表面沿脉被短柔毛。花葶l-2，高12-25cm，二歧或多歧聚伞花序，有花3-朵；总苞片通常3，披针形，羽状深裂，小苞片圆形，稍小；萼片5，黄绿色，窄卵形，长9-12.5mm；花瓣线形或线状披针形，
长5-7mm，中央有蜜槽；雄蕊多数，外轮雄蕊比花瓣略短或近等长；心皮8-12，离生，有短柄。蓇葖果6-12，长6-8mm，具细柄。种子7-8粒，长椭圆形，长约2mm，宽约0.8mm，褐色。花期2-4月，果期3-6月。根茎多集聚成簇，常弯曲，形如鸡爪，单枝根茎长3～6cm，直径0.3～0.8cm。表面灰黄色或黄褐色，粗糙，有不规则结节状隆起、须根及须根残基，有的节间表面平滑如茎杆，习称“过桥”。上部多残留褐色鳞叶，顶端常留有残余的茎或叶柄。质硬，断面不整齐，皮部橙红色或暗棕色，木部鲜黄色或橙黄色，呈放射状排列，髓部有的中空。气微，味极苦。 [原料分布-KinGreen]: 分布于陕西、湖北、湖南、四川、贵州等地；在四川东部。湖北西部和陕西南部有较大量栽培。[ Product—Brand ]: 西安金绿-Xi’an KinGreen [化学成分-KinGreen]: 含小檗碱（berberine)5. 56％- 7.25％，黄连碱（coptisine)，表小檗碱（epiberberine)，小檗红碱（berberrubine)，掌叶防已碱（palmatine)，非洲防己碱（columbamine)，药根碱（jatrorrhizine)，甲基黄连碱（worenine)，木兰花减（magnoflorine)，阿魏酸（ferulic acid)，黄柏酮（obakunone)，黄柏内酯（obakulactone)。[供应厂家-KinGreen]: 西安金绿生物工程技术有限公司[生产流程-KinGreen]: 选材，煎煮、渗漉、回流、蒸馏、沉淀、静置、过滤、浓缩、干燥等过程。
1、阐述生药鉴定的目的和任务是什么? 答:目的在于确定药材的真伪、评定药材品质的优劣和制定其质量标准，以保证生药品种的真实性和药用的安全性，同时发掘利用新药源。 任务：1、鉴定生药的真伪优劣。 2、考证发掘生药学遗产，整理生药品种。 2、制定生药质量标准，促进生药标准。 3、保护和寻找利用新药资源，发展生药事业。 2、味连、雅连、云连三种商品药材在来源、产地、性状及显微特征上有何区别？ 答：1、来源：都来源于毛茛科植物，味连来源于黄连的干燥根茎，雅连来源于三角叶黄连的干燥根茎，云连来源于云连的干燥根茎。 2、产地：味连主产四川石柱县，雅连主产四川洪雅、峨眉等地，云连主产云南德钦、碧江。 3、性状：味连多分枝，聚集成簇，形如鸡爪，表面粗糙，有“过桥”。雅连多单枝，微弯曲，“过桥” 较长，顶端有残茎。云连多单枝，弯曲呈钩状，较细小，“过桥”较短。 4、显微特征：味连和雅连的皮层、中柱鞘部位均有石细胞散在，雅连髓部含石细胞，而云连不含石细 胞。 3、叙述生药麻黄的植物来源、药用部位、主要活性成分？ 答：麻黄来源于麻黄科植物草麻黄、中麻黄和木贼麻黄的干燥草质茎。 主要活性成分含生物碱，有左旋麻黄碱和右旋伪麻黄碱。 4. 描述生药的性状主要包括哪些内容？ 答：主要包括有生药材的性状、大小、色泽、表面、质地、断面、气味、水试、火试等。 5. 试述商品黄连的种类、原植物来源、主要的有效成分以及粉末鉴定特征？ 答：主要有三种，分别为：味连来源于黄连的干燥根茎，雅连来源于三角叶黄连的干燥根茎，云连来源于云连的干燥根茎。 主要的有效成分有小檗碱、无机元素、酚类物质如阿魏酸、绿原酸。 粉末鉴定特征：1、石细胞类圆形、方形、多角形；2、中柱鞘纤维；3、木纤维细长；4、木薄壁细胞不规则形； 5、鳞叶表皮细胞； 6、具网纹、孔纹导管； 7、多单淀粉粒。 6、阐述生药采收、加工和贮藏与生药品质的关系？ 答：1、生药的采收，药用植物中的有效成分的含量可因其生长发育阶段或季节的不同而有所不同，因此直接影响生药的品质。 2、生药的加工：生药的加工便于包装、运输和贮藏，达到医疗用药的目的，应当严格保证生药的品质。 3、生药的贮藏：为了防止生药的发霉、虫蛀、变色、走油等严重影响生药品质的现象，生药的贮藏十分重要。 7、试述冬虫夏草的来源、性状及含有的主要有效成分？ 答：冬虫夏草来源于麦角菌科真菌冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体。 性状：虫体似蚕，外表深黄色至黄棕色，有环纹20到30条，头部红棕色，有足8对，其中部4对最明显，质脆，易折断，断面叫平坦，淡黄白色；子座单枝，呈细长圆柱型，有细纵皱纹，基部长将虫头包被，质柔韧，断面类白色；气微腥，味微苦。 主要有效成分：核苷类如腺苷、嘌呤，虫草酸如D-甘露醇，氨基酸类如谷氨酸，虫草多糖如D-甘露糖。 8、黄连、黄柏粉末显微特征有何异同？ 答：相同点：均具有木栓层细胞，射线细胞，石细胞，淀粉粒等。 不同点：黄连皮层较宽，中柱鞘纤维成束，维管束外韧型环列，木质部细胞木化，具有鳞叶表皮细胞，导管等。 黄柏皮层较窄，草酸钙方晶较多，具有纤维及晶纤维，黏液细胞，筛管等。 9.黄柏药材分为川黄柏和关黄柏，二者性状鉴别的主要特征是什么？哪一种质量最佳？ 答：川黄柏呈板片状，黄褐色至黄棕色，表皮具有细密的纵棱纹，断面纤维性，呈片状分层，嚼之有粘性，可使唾液染成黄色。 关黄柏外表皮黄绿色至淡黄棕色，较平坦，具不规则的纵棱纹，皮孔痕小而少见，偶有灰白色粗皮残留，断面鲜黄色或黄绿色。
实验二从黄连中提取小檗碱 一、实验原理： 黄连为我国名产药材之一，抗菌力很强，对急性结膜炎、口疮、急性细菌性痢疾、急性肠胃炎等均有很好的疗效。黄连中有多种生物碱，除以小檗碱（黄连素）为主要有效成分外，尚含有黄连碱、甲基黄连碱、棕榈碱和非洲防己碱等。随野生和栽培产地的不同，黄连中的小檗碱含量约4%~10%。含小檗碱的植物很多，如黄柏、伏牛花、南天竹等，但以黄连和黄柏的含量最高。 小檗碱是黄色针状体，微溶于水和乙醇，易溶于热水和热乙醇中，几乎不溶于乙醚。小檗碱存在3种互变异构体，其结构如下： 自然界以季胺碱的形式存在。小檗碱的酸式盐、硫酸盐、硝酸盐均难溶于冷水，易溶于热水，其各种盐的纯化都比较容易。 二、主要仪器与试剂 1、仪器：旋转蒸发仪，250ml圆底烧瓶，回流冷凝管，水浴锅，布式 漏斗，抽滤瓶。 2、试剂：黄连，1%乙酸，浓盐酸，丙酮。 三、操作步骤 1、提取。称取10g中药黄连，切碎、磨烂，放入250ml圆底烧瓶，加 入100ml 95%乙醇，装上回流冷凝管，热水浴加热回流40 min，静置浸泡，过滤或抽滤，滤渣重复上述操作处理两次，合并3次的滤液。 2、浓缩。上述滤液在水循环真空泵减压下蒸馏出乙醇和水，回收，直 到呈棕红色糖浆状为止。 3、产生结晶。再加入1% 乙酸（约20~30ml），加热溶解，抽滤以除 去不溶物，然后于溶液中滴加浓盐酸至溶液浑浊为止（约需10ml），冰浴冷
却即有黄色针状体的小檗碱盐酸盐析出（晶体不好可用水重结晶一次），抽滤。结晶用水洗涤两次，再用丙酮洗涤一次，加速干燥，烘干后称重。 4、测定熔点。熔点文献值为200℃左右。 思考题： 1.黄连用95%乙醇在热水浴中加热回流浸泡后，应如何进行抽滤（趁热 抽滤、冷却后抽滤、或是冷热抽滤都可以）？为什么？ 2. 在小檗碱的整个提取过程中，影响产品得率的因素有哪些？
掌握植物的基本类群及其主要特点 昆布 【基源】海带科植物海带的干燥叶状体 冬虫夏草 【基源】麦角菌科真菌冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体性状特征：由虫体与从虫头部长出的真菌子座相连而成。虫体似蚕，表面棕黄色或灰褐色，有多条环纹，足8对。头部生有细长棒球棍状子座，表面灰褐色，具纵皱纹。 茯苓 【基源】多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核 【粉末】菌丝无色或淡棕色，菌丝团块不规则分枝状，无草酸钙结晶【猪苓粉末：菌丝粘成团，正八面体形草酸钙方晶】 灵芝 【基源】多孔菌科真菌灵芝的干燥子实体 绵马贯众（镜检可见间隙腺毛） 【基源】鳞毛蕨科植物粗茎鳞毛蕨的干燥根茎及叶柄残基 银杏叶 【基源】银杏科植物银杏的干燥叶 【主要成分】黄酮类 【药理作用】对心血管系统的作用 麻黄 【基源】麻黄科植物草麻黄、中麻黄或木贼麻黄的干燥草质茎 【茎节间横切】 草麻黄：类圆形，边缘有波状细棱脊 表皮：外被厚的角质层，细胞外壁增厚，壁上有细小草酸钙砂晶。两棱脊间有下陷气孔，保卫细胞切面呈三角形，内外壁均增厚木化 皮层：宽，棱脊处有非木化的下皮纤维束。薄壁细胞中含有草酸钙砂晶与方晶，纤维束散在 维管束：中柱鞘维管束新月形，韧皮部窄，束内形成层明显，木质部三角形，木化，偶见麻黄式穿孔板 髓：薄壁细胞中含红棕色物质，偶见环髓纤维 中麻黄：髓薄壁细胞微木化，环髓纤维较多，成束或单个散在 木贼麻黄：髓薄壁细胞木化，无环髓纤维 【粉末（草麻黄）】 表皮碎片：黄棕色，表皮细胞表面观长方形，壁上布满草酸钙砂晶，有的可见气孔 气孔：多位于表皮碎片上，表面观内陷，长圆形，保卫细胞多个，似话筒状 皮层纤维：黄色，成束或单个散在，壁极厚，壁上布满砂晶（嵌晶纤维） 导管：多成束，多为螺纹和孔纹导管，偶见麻黄式穿孔板 色素块：红棕色，散在，形状不规则 【主要成分】有机胺类生物碱（麻黄碱） 【理化鉴定】粉末微量升华，得细小针状或颗粒状结晶
实验十黄连中盐酸小檗碱的提取分离与检识 (一)目的要求学习提取精制和检识黄连中的小檗碱,通过实验要求： 1.掌握小檗碱的结构特点和理化性质。 2.熟悉浸渍法、盐析法、结晶法和薄层色谱法的基本操作过程及注意事项。 3.了解盐酸小檗碱的检识方法。 (二)主要化学成分的结构及性质黄连为毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch.、三角叶黄连CoptisdeltoideaC.Y.ChengetHsiao、峨嵋野连Coptisomeiensis(Chen)C.Y.Cheng或云连CoptisteetaWall.的根茎。黄连的根状茎含多种生物碱,主要为小檗碱(黄连素),约5%~8%,其次为黄连碱、甲基黄连碱、掌叶防己碱、药根碱、木兰碱等。叶含小檗碱1.49%。 小檗碱(berberine):分子式(C20H18NO4) +,分子量336.37。系季铵生物碱。游离小檗碱为黄色针状结晶(乙醚),mp.145℃,能缓缓溶于冷水(1∶20),可溶于冷乙醇(1∶100),易溶于热水或热乙醇,难溶于丙酮、氯仿、苯,几乎不溶于石油醚。盐酸小檗碱(C20H17NO4·HCl·2H2O),为黄色结晶,微溶于冷水(1∶500),易溶于沸水,几乎不溶于冷乙醇、氯仿和乙醚。硫酸小檗碱((C20H18NO4) 2·SO4·3H2O),溶于水(1∶30),溶于乙醇。重硫酸小檗碱(C20H18NO4·HSO4)为黄色结晶或粉末,溶于水(1∶150),微溶于乙醚。 NOCH3OCH3OO+N+HOCH3OHOCH3OCH3CH3小檗碱木兰碱(三)实验原理根据小檗碱的盐酸盐在水中溶解度小,而小檗碱的硫酸盐水中溶解度较大。 因此,从植物原料中提取小檗碱时常用稀硫酸水溶液浸泡或渗漉,然后向提取液中加入10%的食盐,在盐析的同时,也提供了氯离子,使其硫酸盐转变为氯化小檗碱(即盐酸小檗碱)而?1?7?1?7?1?7出。 (四)实验内容1.盐酸小檗碱的提取、精制略2.盐酸小檗碱的检识(1)浓硝酸或漂白粉试验:取盐酸小檗碱少许,加4ml稀硫酸溶解,分置于两支试管中。一支试管滴加浓硝酸数滴,即显樱红色。另一支试管加少许漂白粉,也立即显樱红色。 (2)丙酮试验:取盐酸小檗碱约50mg,加蒸馏水3ml缓缓加热溶解后,加氢氧化钠试剂2滴,显橙色。溶液放冷后,加丙酮4滴振摇,即发生混浊。放置后析出黄色丙酮小檗碱沉淀。 (3)没食子酸试验:取盐酸小檗碱约20mg,置白瓷皿中,加硫酸1ml溶解后,加5%没食子酸的乙醇溶液5滴,置水浴上加热,即显翠绿色。 (4)薄层色谱检识薄层板:中性氧化铝(软板)试样:自制盐酸小檗碱乙醇溶液对照品:盐酸小檗碱对照品乙醇溶液展开剂:氯仿-甲醇(9∶1)显色:自然光下观察黄色斑点或紫外灯下观察荧光(5)纸色谱检识支持剂:新华层析滤纸(中速、20cm×7cm)试样:自制盐酸小檗碱乙醇溶液对照品:盐酸小檗碱对照品乙醇溶液展开剂:正丁醇-醋酸-水(4∶1∶1)显色:紫外灯下观察荧光(五)实验说明及注意事项1.浸泡黄连粗粉的硫酸水溶液,一般为0.2%~0.3%为宜。若硫酸水溶液浓度过高,小檗碱可成为重硫酸小檗碱,其溶解度(1∶150)明显较硫酸小檗碱(1∶30)小,从而影响提取效果。硫酸水溶液浸出效果与浸渍时间有关,有报道,浸渍12小时约可浸出小檗碱80%,浸渍24小时,可浸出92%。常规提取应浸渍多次,使小檗碱提取完全,本实验中只收集第一次浸出液。 2.进行盐析时,加入氯化钠的量,以提取液量的10%(g/v)计算,即可达到析出盐酸小檗碱的目的。氯化钠的用量不可过多,否则溶液的相对密度增大,造成?1?7?1?7?1?7出的盐酸小檗碱结晶呈悬浮状态难以下沉。盐析用的氯化
实验十 黄连中盐酸小檗碱的提取分离与检识 （一）目的要求 学习提取精制和检识黄连中的小檗碱，通过实验要求： 1．掌握小檗碱的结构特点和理化性质。 2．熟悉浸渍法、盐析法、结晶法和薄层色谱法的基本操作过程及注意事项。 3．了解盐酸小檗碱的检识方法。 （二）主要化学成分的结构及性质 黄连为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao 、峨嵋野连Coptis omeiensis (Chen)C.Y.Cheng 或云连Coptis teeta Wall.的根茎。黄连的根状茎含多种生物碱，主要为小檗碱（黄连素），约5％～8％，其次为黄连碱、甲基黄连碱、掌叶防己碱、药根碱、木兰碱等。叶含小檗碱1.49％。 小檗碱(berberine)：分子式(C 20H 18NO 4)＋，分子量336.37。系季铵生物碱。游离小檗碱为黄色针状结晶（乙醚），mp.145℃，能缓缓溶于冷水（1∶20），可溶于冷乙醇（1∶100），易溶于热水或热乙醇，难溶于丙酮、氯仿、苯，几乎不溶于石油醚。盐酸小檗碱(C 20H 17NO 4·HCl ·2H 2O)，为黄色结晶，微溶于冷水（1∶500），易溶于沸水，几乎不溶于冷乙醇、氯仿和乙醚。硫酸小檗碱( (C 20H 18NO 4)2·SO 4·3H 2O)，溶于水（1∶30），溶于乙醇。重硫酸小檗碱(C 20H 18NO 4·HSO 4)为黄色结晶或粉末，溶于水（1∶150），微溶于乙醚。 N O C H 3 O C H 3O O + N + H O C H 3O H O C H 3O C H 3C H 3 小檗碱 木兰碱 （三）实验原理 根据小檗碱的盐酸盐在水中溶解度小，而小檗碱的硫酸盐水中溶解度较大。因此，从植物原料中提取小檗碱时常用稀硫酸水溶液浸泡或渗漉，然后向提取液中加入10％的食盐，在盐析的同时，也提供了氯离子，使其硫酸盐转变为氯化小檗碱（即盐酸小檗碱）而析出。
设计性实验 黄连中小檗碱的提取和鉴定 教学院：化工与材料工程学院 专业班级：化工1006 前沿 一、目的与要求 1.通过对黄连中小檗碱的提取，掌握天然产物的提取技术。 2.通过对小檗碱的鉴定，掌握一般生物碱的鉴别方法。 3.通过查阅资料并结合所学知识，初步了解并完成实验方案的设计。
二、基本原理 黄连主含小檗碱，含量为5.20%-7.69%，还含黄连碱，甲基黄连碱、掌叶防己碱等，由于它们有相似结构，常统称为黄连生物碱。小檗碱异名为黄连素，在水或稀乙醇中结晶所得小檗碱为黄色针状结晶。游离小檗碱微溶于冷水，易溶于热水，几乎不溶于冷乙醇、氯仿和乙醚。小檗碱和大分子有机酸生成的盐在水中的溶解度都很小。小檗碱有季铵式、醛式、醇式，3种能互变的结构式，以季铵式最稳定。小檗碱的盐都是季铵盐，于硫酸小檗碱的水溶液中加入计算量的氢氧化钡，生成棕红色强碱性游离小檗碱，易溶于水，难溶于乙醚，称为季铵式小檗碱。如果于水溶性的季铵式小檗碱水溶液中加入过量的碱，则生成游离小檗碱的沉淀，称为醇式小檗碱。如果用过量的氢氧化钠处理小檗碱盐类则能生成溶于乙醚的游离小檗碱，能与羟胺反应生成衍生物，说明分子中有活性醛基，称为醛式小檗碱。小檗碱的提取方法主要有溶剂法（包括水或水－有机溶剂法、醇－酸水－有机溶剂法、碱化有机溶剂法）、离子交换树脂法、沉淀法等，通过生物碱特有的沉淀反应和显色反应对其进行鉴别。 小檗碱的结构式 O C H3 C H3 N H C H O O O O C H3 O C H3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色） N+ O O O C H3 O C H3 小檗碱（黄连素） 三、仪器和试剂 1.仪器与材料
西南民族大学学报?自然科学版第33卷第5期 Journal of Southwest University for Nationalities ?Natural Science Edition Oct. 2007___________________________________________________________________ ___________________________ 收稿日期：2007-03-25 作者简介：陈小全(1972-), 男, 泰山医学院化学与化学工程学院讲师. 文章编号：1003-2843(2007)05-1121-03 黄连素提取方法的改进 陈小全1, 翟虎1, 邵辉莹1, 周秀艳2, 左之利3 (1. 泰山医学院化学与化学工程学院, 山东泰安 271000；2. 四川大学化工学院, 四川成都 610065； 3. 中国科学院上海药物研究所, 上海 201203) 摘 要: 采用有机溶剂从黄连中提取黄连素, 对不同温度、不同时间下的色素提取率进行测试, 以确定最佳提取条件; 同时在微波作用下从黄连中提取黄连素, 以黄连素的收率为指标, 运用正交法确定了乙醇微波辅助提取黄连素的最佳 条件为:液固比(V/m)为100:1, 微波辐射时间为10min, 微波辐射功率为600W. 与浸提法比较, 微波提取极大地缩短了提 取时间, 而且收率有明显提高. 关键词: 黄连素; 黄连; 正交实验; 微波 中图分类号: R284.2 文献标识码: A 目前, 天然色素的生产仍以传统的直接提取为主, 传统提取方法主要有:溶剂浸提法、压榨法、过滤法等[1], 其生产的色素产品普遍存在产率小、着色力低、产品稳定性能较差、生产成本高等缺陷. 微波协助提取技术是近年以传统溶剂浸提法原理为基础发展的新型萃取技术, 该技术具有选择性高、耗时少、能耗低、排污量少等优点, 可克服传统提取方法的缺陷, 与超临界流体萃取、高速逆流液相色谱等技术相比, 适用面更广, 且设备投资低, 是目前国内外天然产物提取的研究热点. 黄连为毛茛科植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根茎, 主要含有黄连素、黄连碱、药根碱、甲基黄连碱等生物碱成分；其中黄连素是含有结晶水的、黄色的针状结晶, 是中药黄连等的主要有效成分, 其抗菌能力很强, 对急性结膜炎, 口疮, 急性细菌性痢疾, 急性肠胃炎等均有很好的疗效, 近几年来又发现了一些新的用途, 如治疗原发性高血压、心律失常、高血脂症、消化性溃疡、Ⅱ型糖尿病等, 可以说是老药新用[2-3]. 黄连素经较高温度干燥时, 易失去结晶水而转为棕红色. 提取黄连素比较成熟的工艺为硫酸法, 石灰水法, 但该法的时间长, 代价高, 产品纯度低,产率低, 溶剂消耗多, 易造成环境污染等问题[4-12]. 采用微波技术萃取天然色素[13-18]例如橘黄色素、玫瑰茄红色素、茄子红色素、柿子红色素、天仙果色素已取得一定研究进展, 但目前尚未见采用微波技术萃取黄连素的研究报道, 因此本研究以黄连为原料, 采用正交设计法对微波提取黄连素进行研究, 可望对黄连中黄连素的综合开发利用起一定的推动作用. 1 材料与仪器 原料：黄连(市售), 粉碎成80目粉末. 试剂:甲醇(天津巴斯夫化工有限公司, A.R.)、乙醇(天津鑫达医药化工试剂有限公司, A.R.)、正丁醇(天津北辰方正试剂厂, A.R.)、正戊醇(天津博迪化工有限公司, A.R.)、正辛醇(华东试剂供销公司经销张泾化工厂, A.R.)、乙醚(天津市大茂化学试剂厂A R.) 、石油醚(天津巴斯夫化工有限公司, A.R.)、丙酮(淄博市临淄天德精细化工研究所, A.R.) 、四氯化碳(徐州试剂二厂A R.)、环己烷(天津巴斯夫化工有限公司, A.R.). 实验仪器：NJL07-3实验专用微波炉(南京杰全微波设备公司)；TOL-5-A 离心机(上海安亭科学仪器厂); 索氏提取器;旋转蒸发器RE-52A(上海亚荣生化仪器厂)；JA3003型电子天平 (精度0.001g, 上海天平仪器厂);UV751GB 型紫外/可见分光光度计(上海欣益仪器有限公司);
实验四黄连中小檗碱的提取、精制和鉴定 一、概述 黄连系毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eranch.）的干燥根茎。黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床。 主要化学成分的结构及理化性质： 小檗碱为黄色针状结晶，mp为154℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。 小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。 O 3 3 NH CHO O OCH3 OCH3季铵式（红棕色）醇式（黄色）醛式（黄色） N+ O OCH3 OCH3 小檗碱（黄连素） 二、实验部分 （一）实验目的 1、掌握小檗碱的结构特点和理化性质，以及一般的提取精制方法。 2、掌握旋转蒸发仪的使用。
3、熟悉盐酸小檗碱的色谱鉴定和定性鉴定方法。 （二）实验原理 1、提取原理：小檗碱为异喹啉类小檗碱，结构中的氮原子以季铵盐形式存在，显一定程度的亲水性，因此游离小檗碱能溶与水(1:20)及乙醇(1:100)，热水或热乙醇中易溶，不溶于乙醚、氯仿、苯等有机溶剂。盐酸小檗碱在沸水中溶解，在冷水中析出。 2、分离原理：小檗碱与酸所成的盐在水中的溶解度不尽相同，如硫酸小檗碱为(1:30)，酸性硫酸小檗碱为(1:100)，枸橼酸小檗碱为(1:125)，而盐酸小檗碱为(1:500)。本实验就是据游离小檗碱在水和乙醇中的溶解度较大，而其盐酸盐难溶于水的性质进行提取和精制的。 （三）实验药材、仪器与试剂 1、药材：黄连50g（每组）。 2、仪器：回流装置、水浴锅、冰箱、旋转蒸发仪、烧杯（250ml）、抽滤装置、滤纸、层析缸、滤纸、试管、电炉。 3、试剂：75%乙醇、95%乙醇、蒸馏水、10%盐酸、氯化钠、乙醇、氯仿-甲醇-1/10盐酸（1:1:1）、10%硫酸、漂白粉、10%氢氧化钠、丙酮。 （四）实验内容 1、小檗碱的提取 取黄连粗粉50g，加入400ml75%的乙醇回流1.5h，四层纱布过滤，药渣用95%乙醇300ml回流1h，四层纱布过滤，并用少量蒸馏水洗涤药渣，合并两次滤液和洗液，放于冰箱中。 2、小檗碱的浓缩 用旋转蒸发仪将小檗碱提取液浓缩至糖浆状（小于50ml，无醇味）。 3、盐酸小檗碱的制备 将浓缩液倒入100ml沸水中（换成250ml烧杯）煮沸至溶解（10min），趁热抽滤，在滤液中加10%盐酸，调制pH=2，加入氯化钠10g，放入冰箱析晶。 4、盐酸小檗碱的精制 （1）抽滤，得到盐酸小檗碱粗品。