第五章黄酮类化合物
[学习要求]
掌握 1、黄酮类化合物的主要结构类型
2、黄酮类化合物的理化性质和显色反应
3、黄酮类化合物常用的提取和分离方法
4、色谱法和紫外光谱在黄酮类化合物结构鉴定中的应用
熟悉 1、黄酮类化合物苷中常见的单糖、二糖和三糖
2、一些有代表性的黄酮类化合物的生物活性
了解 1、氢核磁共振在黄酮类化合物结构鉴定中的应用
2、碳核磁共振在黄酮类化合物结构鉴定中的应用
[重点内容]
1、黄酮类化合物的基本结构类型：黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、
二氢黄酮醇类、异黄酮类、二氢异黄酮类、查耳酮类、二氢查耳
酮类、橙酮类、黄烷-3-醇、黄烷-3，4-二醇、花色素类、双苯吡
酮类和高异黄酮类。
2、黄酮类化合物的理化性质：①黄酮类化合物多为结晶性固体，少
数为无定形粉末，具有交叉共轭体系的黄酮类化合物多具有颜色；
②黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态不同而有很大差异，
黄酮、黄酮醇、查耳酮等平面性强的分子，难溶于水，而二氢黄
酮及二氢黄酮醇等，因系非平面性分子，溶解度稍大；③黄酮类
化合物分子中多具有酚羟基，故显酸性；④?-吡喃环上的1-氧原
子具有未共用的电子对，故表现微弱的碱性。
3、黄酮类化合物的显色反应：①还原反应：盐酸-镁粉（或锌粉）反
）反应为鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应。四氢硼钠（NaBH
4
应是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂；②金属盐类
试剂的络合反应：黄酮类化合物分子中常具有3-羟基4-羰基、5-
羟基4-羰基和邻二酚羟基的结构单元，故常可与铝盐、铅盐、锆
盐、镁盐等试剂反应，生成有色络合物；③硼酸显色反应：黄酮
类化合物分子中当具有3-羟基4-羰基和5-羟基4-羰基结构时，
在无机酸或有机酸存在条件下，可与硼酸反应生成亮黄色；④碱性试剂显色反应：用碱性试剂处理，观察颜色变化，对于鉴别黄酮类化合物有一定意义。
4、黄酮类化合物的提取：①黄酮苷类以及极性稍大的苷元一般可用
丙酮、醋酸乙酯、乙醇、水或某些极性较大的混合溶剂进行提取，一些多糖苷类则可以用沸水提取；②对得到的粗提取物可进行精制处理的常用方法有：溶剂萃取法、碱提取酸沉淀法和炭粉吸附法。
5、黄酮类化合物的分离：①柱色谱法：硅胶柱色谱主要适于分离异
黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化或乙醚化的黄酮及黄酮醇类。聚酰胺柱色谱是分离黄酮类化合物较为理想的吸附剂，其吸附强度主要取决于黄酮类化合物的分子结构类型、羟基的数目与位置。葡聚糖凝胶柱色谱对黄酮类化合物有很好的分离效果，分离游离黄酮时，主要靠吸附作用，其吸附程度取决于游离酚羟基的数目，但分离黄酮苷时，则分子筛的性质起主导作用；②梯度PH值萃取法：根据黄酮类苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强
弱也不同的性质，依次用5%NaHCO
3、5%Na
2
CO
3
、%NaOH及4%NaOH
溶液萃取，来达到分离的目的；③根据分子中某些特定官能团进行分离：黄酮类化合物分子中常具有3-羟基4-羰基、5-羟基4-羰基和邻二酚羟基的结构单元，故可以用一些沉淀试剂使之沉淀，来达到分离的目的。
6、黄酮类化合物的结构鉴定：①色谱法：纸色谱（PPC）适用于分离
各种天然黄酮类化合物及其苷类的混合物，根据其分离原理的不同，展开剂的种类也不相同。硅胶薄层色谱：此色谱法用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物，效果较好。聚酰胺薄层色谱：此色谱法特别适合于分离含游离酚羟基的黄酮及其苷类，由于聚酰胺对黄酮类化合物吸附能力较强，因而展开剂需要较强的极性；②紫外及可见光谱法：此法是鉴定黄酮类化合物结构的一种重要手段，一般程序为：首先测定样品在甲醇溶液中的UV光谱，其次，测定样品在甲醇溶液中加入各种诊断试剂后得到的UV及可见光
谱，常用的诊断试剂有甲醇钠（NaOMe）、醋酸钠（NaOAc）、醋酸
钠／硼酸（NaOAc／H
3BO
3
）、三氯化铝（AlCl
3
）及三氯化铝／盐酸
（AlCl
3
／HCl）等，此法对于确定黄酮及黄酮醇类化合物、异黄酮类化合物、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物、查耳酮和橙酮查类化合物有无羟基取代及羟基取代的位置，有重要的意义。
[习题]
一、名词解释
1、黄酮类化合物
2、碳苷
3、四氢硼钠反应
4、盐酸-镁粉反应
5、锆-枸橼酸反应
6、RDA裂解
7、Wessely-Moser重排
8、pH梯度萃取法
9、插烯酸
二、填空题
1、黄酮类化合物是指含有（）骨架的一类成分。
2、确定黄酮化合物结构具有5-OH的方法有（）、（）、（）。
3、黄酮类化合物因其结构的不同而在水中的溶解度不同。其中（）和（）等系非平面性分子，水中溶解度较大；( )和( )等系平面性分子，在水中溶解度较小；( )虽也具有平面性结构，但因以离子形式存在，亲水性最强，水溶度最大。
4、对黄酮醇类化合物和二氢黄酮醇类化合物来说，可用（）显色反应进行区分。
5、下列化合物混合在一起，现用Sephadex-LH20柱色谱进行分离，请写明它们的流出顺序为： ( )＞( ) ＞( ) ＞( ) ＞( ) ＞( )
O
HO
OH
OH
O
OH
O
HO
OH
OH
O
OH
O
gal
OH
rha
A B
O HO
OH
OH
O
OH
OH
O
HO
OH
OH
O
OH
OH
C D
O
HO
OH
OH
O
O
O
OH
OH
O
O
gal
glc
rha
E F
6、花青素类化合物的颜色随pH不同而不同，一般呈在pH＜7的条件下呈现（）色，在pH为的条件下呈现（）色，在pH＞的条件下呈现（）色。
7、有下面一组化合物，请写明其酸性强弱的先后顺序为( ) ＞( ) ＞( ) ＞( )。
O
HO
OH
OCH3
O
OH
O
H3CO
OH
OCH3
O
OH
OH
A B
O
HO
OH
OH
O
OH
O
H3CO
OH
OCH3
O
O
Glc
C D
8、有下列四个化合物，请比较它们酸性的强弱，( ) ＞( ) ＞( ) ＞( )。
O
HO OH
O
O
HO OH
O
A B
O
HO
OH
O
OH
O
HO OH
O
OH
C D
9、有下列四个化合物，请比较它们酸性的强弱，( ) ＞( ) ＞( ) ＞( )。
OH
HO
OH
O
OH
OH
OH
O
OH OH
A B
OH
HO
OH
O
OH
OH
OH
O
OH OH
C D
10、用硅胶柱色谱分离下列一组化合物，用CHCl 3-MeOH 进行洗脱，这四个化合物保留时间的大小顺序为：( ) ＞( ) ＞( ) ＞( )。
O
HO
OH
O OH
OH
O
O
OH
O
OH
Glc
A B
O
HO
OCH 3
O OH
OCH 3O
O
OH OH O OH
Glc
C D
11、用葡聚糖凝胶Sephadex-LH20分离黄酮苷化合物时，分离主要原理是( )，当用此凝胶分离黄酮苷元时，则主要是依靠( )作用，这种作用强度大小取决于( )。
12、纸色谱法是分离和鉴定黄酮苷类化合物的一种常用的方法，常采用双向展开方式，第一向展开剂常采用( )性溶剂，分离原理为( )，第二向展开剂常选用( )溶液，主要分离原理为( )。 13、有下列四种黄酮类化合物A 、B 、C 、D ，
O
O
HO
OH
OH
O
O
Rham-O
OH
OH
A B
O O
HO
OH
OH
O-Glc
O
O
Rham-O
OH
OH
O-Glc
C D
请比较其酸性和极性的大小：
酸性（ ）＞（ ）＞（ ）＞（ ） 极性（ ）＞（ ）＞（ ）＞（ ）
14、有下列四种黄酮类化合物A 、B 、C 、D ，请比较这四种化合物在如下三种色谱中Rf 值大小顺序：
O
O
Rham-O
OH
OH
O-Glc-Rham
O
O
HO
OH
O-Glc-Rham
A B
O
O
HO
OH
O-Glc
O
O
HO
OH
OH
C D
① 硅胶薄层色谱，用CHCl 3-MeOH 4:1展开，Rf 值（ ）＞（ ）＞（ ）＞（ ）；
② 聚酰胺层色谱，用60%甲醇水展开，Rf 值（ ）＞（ ）＞（ ）＞（ ）；
③ 纸色谱，用8%醋酸水展开，Rf 值（ ）＞（ ）＞（ ）＞（ ）； 15、用聚酰胺柱色谱分离下列化合物，以不同浓度的乙醇－水进行梯度洗脱，流出柱外的先后顺序为：（ ）＞（ ）＞（ ）＞（ ）。
O
O
HO
OH
OH
OH
OH
O
O
Rham- Glc-O
OH
OH
A B
O
O
Glc-O
OH
OH
OH
O
O
OH
HO
C D 三、判断题
1、黄酮类化合物都是平面结构。
2、多数黄酮苷元具有旋光性，而黄酮苷则无。
3、黄酮分子中引入7，4’-位羟基，促进电子位移和重排，使其颜色加深。
4、硅胶、聚酰胺和Sephadex G 是分离黄酮类化合物常用的柱色谱填料。
5、用Sephadex-LH20分离黄酮苷时，主要靠分子筛作用。
6、聚酰胺对黄酮类化合物通常在水溶液中表现出最强的吸附能力。
7、黄酮碳苷在常规酸水条件下可以被水解。
8、硼氢化钠显色反应可以用来区分黄酮和二氢黄酮类化合物。 9、黄酮与二氢黄酮相比，黄酮在水溶液中的溶解性更大。 10、碱性氧化铝可以用来分离黄酮类化合物。 四、选择题
（一）A 型题（单项选择题）
1、pH?梯度法适合于下列______类化合物的分离。
A ．黄酮
B ．强心苷
C ．挥发油
D ．香豆素 2、下列化合物_______的醇溶液与NaBH 4反应，生成紫~紫红色。
A ．黄酮醇
B ．黄酮
C ．二氢黄酮类
D ．异黄酮类 3、在5%NaHCO 3水溶液中溶解度最大的化合物是______。
A ．3，5，7-三羟基黄酮
B ． 7，4′-二羟基黄酮
C ．3，6，-二羟基花色素
D ． 2′–OH 查耳酮
4、下列黄酮类化合物中的不同位置的取代羟基，酸性最强的是_______。
A ． 6-OH
B ．3-OH
C ． 5-OH
D ．7-OH
5、某黄酮类化合物的紫外吸收光谱中，加入诊断试剂NaOAc（未熔融）后，带
Ⅱ红移10nm，说明该化合物存在_______基团。
A．5-OH B．7-OH C．4′-OH D．7-OH和4′-OH
6、黄酮类化合物的紫外吸收光谱中，加入诊断试剂AlCl
3后的谱图与AlCl
3
/HCl
谱图完全一致，则示B环结构为______。
A．存在间二酚羟基 B．只存在4′-OH
C．不存在邻二酚羟基 D．存在邻二酚羟基
7、应用Sephadex-LH20分离下列化合物，最先洗脱出来的化合物为______。
A．黄酮二糖苷 B．黄酮单糖苷
C．黄酮苷元 D．黄酮三糖苷
8、下列苷类化合物，不能被常规酸催化水解的是______。
A．黄酮碳苷 B．香豆素酚苷
C．蒽醌酚苷 D．人参皂苷
9、下列化合物，在紫外光谱中，350nm以上没有吸收峰的化合物是______。
O
HO
OH
OH
O
OH
OH
OH
OH
O
OH
HO
A B
O
O CH OH
HO
OH
O
HO
OH
OH
O
OH
OH
C D
10、用活性炭对黄酮类化合物进行纯化，在下列______溶剂中的吸附力最强。 A．8%的酚水 B．8%的醇水
C．醇 D．水
11、黄酮结构中，三氯化铝与下列______基团与形成的络合物最稳定。
A．黄酮5-OH B．二氢黄酮5-OH
C．黄酮醇3-OH D．邻二酚羟基
12、聚酰胺对黄酮类化合物发生最强吸附作用时，应在______中。
A．85%乙醇 B．酸水
C．水 D．15%乙醇
13、黄酮类化合物的紫外光谱，在甲醇溶液中加入NaOMe诊断试剂，峰带Ⅰ红移
动40-60nm，强度不变或增强说明有______。
A．无4’-OH B．无3-OH
C．有4’-OH D．有4’-OH和3-OH
14、用聚酰胺色谱分离黄酮类化合物，它的原理是______。
A．离子交换 B．分子筛
C．分配 D．氢键缔合
15、与四氢硼钠反应呈阳性的为______。
A．黄酮醇 B．二氢黄酮
C．橙酮 D．异黄酮
16、在紫外光谱法中，用来判断7-OH 的诊断试剂是______
A．醋酸钠－硼酸 B．未熔融醋酸钠
C．甲醇钠 D．熔融醋酸钠
（二）X型题（多项选择题）
1、盐酸镁粉反应阳性为______。
A．黄酮醇 B．查耳酮
C．橙酮 D．异黄酮
E．二氢黄酮
2、黄酮类化合物的结构分类主要依据______
A．三碳链的氧化程度 B．是否连接糖链
C．植物来源 D．三碳链是否成环
E．B环的位置
3、下列化合物中，具有旋光性的黄酮类化合物是______。
A．黄烷醇 B．异黄酮
C．查耳酮 D．橙酮
E．二氢黄酮
4、下列化合物中难溶解于水的是______。
A．黄酮醇 B．二氢黄酮醇
C．查耳酮 D．黄酮
E．二氢黄酮
5、中药槐米中的主要成分______
A．可用水进行重结晶 B．能发生Molish反应
C．可用碱溶解酸沉法提取 D．槲皮素
E．芦丁
6、分离黄酮类化合物常用的方法有______
A．水蒸气蒸馏法 B．生华法
C．聚酰胺色谱法 D．葡聚糖凝胶色谱
E．硅胶色谱法
7、3，5，3’，4’-四羟基二氢黄酮可发生下列哪些反应______。
A．Molish反应 B．NaBH
4
反应
C．SrCl
2反应 D．ZrOCl
2
-枸橼酸反应
E．HCl-Mg反应
8、芦丁可发生下列哪些反应______。
A．HCl-Mg反应 B．ZrOCl
2
-枸橼酸反应
C．Molish反应 D．SrCl
2
反应
E．NaBH
4
反应
9、能溶解于5%Na
2CO
3
溶液的黄酮可能具有______。
A．5-OH B．3-OH
C．7，4’-OH D．7-OH
E．4’-OH
10、在紫外光谱法中，用来判断黄酮、黄酮醇有无邻二酚羟基的诊断试剂是
A．甲醇钠 B．醋酸钠/硼酸
C．醋酸钠 D．AlCl
3
/HCl
E．SrCl
2
五、写出下列黄酮类化合物的二级结构名称
O
O OH OH O O OH OH HO O O OCH 3OH HO OH O OH OCH 3HO OCH 3O OCH 3HO OH OCH 3O O HO OH OH (1)(2)(3)(4)(5)(6) O OH
OH
O
O OH
OH
HO
O
O OCH 3OH
HO
OH O OH
OCH 3HO
OCH 3O OCH 3HO
OH
OCH 3O O HO OH OH (1)(2)(3)(4)(5)
(6)
O
OH
OH
O
O OH
OH
HO
O
O OCH 3OH
HO
OH O OH
OCH 3HO
OCH 3
O OCH 3HO
OH
OCH 3O O HO OH OH (1)
(2)(3)
(4)(5)
(6)
O OH OH O O OH OH HO O O OCH
3OH HO OH O OH OCH 3
HO OCH 3
O OCH 3HO OH OCH 3O O HO OH OH (1)(2)(3)(4)(5)(6) O OH
OH O
O OH
OH HO
O
O
OCH 3OH HO
OH
O
OH OCH 3HO
OCH 3O OCH 3HO
OH
OCH 3O O HO OH OH (1)
(2)(3)(4)(5)
(6)
O
O
OCH 3
HO OCH 3
O O H 3CO OH OCH 3
OCH 3
O O H 3CO OH OCH 3OCH 3
OH O OCH 3
OH OH O
O C H OCH 3
OH (7)
(8)
(9)(10)
O
OCH 3
HO
OCH 3O
O
H 3CO
OH OCH 3
OCH 3
O
O
H 3CO
OH OCH 3
OCH 3
OH
O OCH 3
OH
OH O
O C H
OCH 3
OH (7)
(8)
(9)(10)
①
② ③
④ ⑤
⑥ ⑦
⑧
⑨
⑩
六、用适当方法区分下列化合物
1、用化学法
O
HO
OH
O OH OH
OH
OH
O
OH
HO
OH
A B
2、用化学方法
O
H3CO
OH
O
OH
O
H3CO
OH
O
OH
A B
O OH
H3CO
OH
C
3、用化学方法
O
HO
O OH
OCH3
O
HO
OH
OH
O
OCH3
A B
O
HO
OH
O
OH
C
4、用化学方法
O
HO
OH
O
O
O
OH
O
HO
OH
O
OH
OH
A B
O
HO
OH
OH O
OH
C
5、用化学方法
O H3CO
OH
OCH3
O
OCH3
OH OCH3
O
H3CO
OH
OCH3
O
OCH3
O-Glc OCH3
A B
O
H3CO
OH
O
OH
O
H3CO
OH
OH
O
OH
OH
C D
6、用化学方法
O
O
HO OH
OCH 3
OH
O
O
HO
OH
OCH 3
OH
A B
7、用紫外光谱法
O
O
HO
OH
3
O
O
H 3CO
OH
OH
A B
七、问答题
1、黄酮类化合物根据中央三碳链的氧化程度、2-位是否有羟基、B 环连接位置和三碳链是否构成环状，可将主要的天然黄酮类化合物进行分类，请说明这些二级结构分类的名称
2、已知一个黄酮类化合物，先确定B 环3’，4’位有取代，并可确定3’，4’位其中之一取代基为羟基，另一取代基可能为-OH 或-OMe ，请用紫外光谱法说明另一取代基是-OH 还是-OMe
3、用Sephadex-LH20凝胶柱色谱，分离下列黄酮类化合物，以甲醇-水溶及系统进行洗脱，请写明流出柱的先后顺序，并说明其原理
O
O
Glc-O OH
O-Glc-Rham
O
O
HO
OH
OH
O-Glc-Rham
A B
O
O
HO OH
O-Glc
O
O
HO
OH
OH
OH
C D
O
O
HO
OH
OH
OH
O
O
HO
OH
OH
OCH 3
E F
4、梯度pH 萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离，黄酮苷元混合成份进行萃取分离时，分别用哪几种碱性溶液萃取并且这几种萃取液又能分别得到什么样的羟基取代黄酮
5、用聚酰胺柱色谱分离下列黄酮和黄酮苷类化合物，以乙醇-水溶及系统进行洗脱，请写明流出柱的先后顺序，并说明其原理
O O
Rham- Glc-O OH
OH
O
O
Glc-O
OH
OH
A B
O O
HO
OGlc
O
O
HO
OH
OH
OH
C D
O
O
Rham- Glc-O
OH
OH
O
O
HO OH
OH
OH
OH
E F
[习题答案]
一、名词解释（略） 二、填空题
1、C 6-C 3-C 6；
2、硼酸络合，锆-枸橼酸反应，紫外光谱AlCl 3/HCl ；
3、二氢黄酮，二氢黄酮醇，黄酮，黄酮醇，花色素；
4、硼氢化钠；
5、FBEADC ；
6、红色，紫色，蓝色；
7、CABD ；
8、DCBA ；
9、ABCD ；10、DBAC ；11、分子筛作用，吸附作用，羟基的数目和位置；12、醇性，分配，水性，吸附；13、ACBD ，DCBA ；14、DCBA ，ABCD ，DCBA ；15、BCDA ； 三、判断题
1.×
2.×
3.√
4.√
5.√
6.√
7.×
8.√
9.× 10.×
四、选择题
（一）A 型题（单项选择题）
（二）X 型题（多项选择题）
五、写出下列黄酮类化合物的二级结构名称
①黄酮；②二氢黄酮；③二氢黄酮醇；④异黄酮；⑤黄烷-3，4-二醇；⑥黄烷-3 -醇；⑦黄酮醇；⑧橙酮；⑨二氢异黄酮；⑩查耳酮；
六、用适当方法区分下列化合物
1、盐酸-镁粉反应：A（+），B（-）；
2、硼氢化钠反应：B（+），A（-），C（-）；锆-枸橼酸反应：A（-），C（+）；
3、硼氢化钠反应：B（+），A（-），C（-）；盐酸-镁粉反应：A（-），B（+）；
4、Labat反应：A（+），B（-），C（-）；硼氢化钠反应：B（-），C（+）；
5、硼氢化钠反应：D（+），A（-），B（-），C（-）；锆-枸橼酸反应：A（+），B（-），C（-）；Molish反应：B（+），C（-）；
6、锆-枸橼酸反应：A（-），B（+）；
7、UV光谱：加NaOMe，带Ⅰ红移40-60nm为A；加NaOAc，带Ⅱ红移5-20nm为B；
七、问答题（略）
黄酮类化合物习题 1.常见黄酮类化合物的结构类型可分为哪几类。 2. 试述黄酮类化合物的广义概念及分类依据。写出黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、异黄酮、查耳酮、橙酮的基本结构。 3. 试述黄酮（醇）、查耳酮难溶于水的原因。 4. 试述二氢黄酮、异黄酮、花色素水溶性比黄酮大的原因。 5. 如何检识药材中含有黄酮类化合物。 6. 为什么同一类型黄酮苷进行PC，以2%～6%醋酸溶液为展开剂，Rf 值大小依次为三糖苷＞双糖苷＞单糖苷＞苷元。 7. 为什么用碱溶酸沉法提取黄酮类化合物时应注意pH的调节。 8. 简述用碱溶酸沉法从槐米中提取芸香苷加石灰乳及硼砂的目的。 判断题 1.黄酮类化合物广泛分布于植物界，大部分以游离形式存在，一部分以苷的形式存在。 2. 黄酮分子中引入7,4′位羟基，促使电子位移和重排，使颜色加深。 3. 以BAW系统进行PC检识黄酮苷与其苷元，展层后苷元的Rf值大于苷。 4. 用2%～6%醋酸/水溶液为展开剂，对黄酮苷与其苷元进行PC，展层后苷元的Rf值大于苷。
提取与分离 中药黄芩中有下列一组化合物，经下述流程分离后，各出现在何部位？简述理由。 A. 黄芩苷（黄芩素-7-O-葡萄糖醛酸苷） B. 黄芩素（5,6，7-三OH黄酮） C. 汉黄芩苷（汉黄芩苷-7-O-葡萄糖醛酸苷） D. 汉黄芩素（5,7-二OH， 8-OCH3黄酮） E. 5，8，2-三OH，7-OCH3黄酮 F. 5,8，2-三OH，6,7-二-OCH3黄酮 G. 5,7，4′-三OH，6-OCH3二氢黄酮）H. 3,5，7,2′，6′-五OH二氢黄酮
结构鉴定题 从某中药中得一黄色结晶Ⅰ，分子式C21H21O11，HCl-Mg粉反应呈淡粉红色，FeCl3反应及α-萘酚-浓H2SO4反应均为阳性，氨性氯化锶反应阴性，二氢氧锆反应呈黄色，加枸橼酸后黄色不退.晶Ⅰ的光谱数据如下： UV λmax nm MeOH 267 348 NaOMe 275 326 398(强度不降) AlCl3274 301 352 AlCl3/HCl 276 303 352 NaOAc 275 305(sh) 372 NaOAc/H3BO3 266 300 353 IR:V KBr max cm-1 3401, 1655, 1606, 1504 1HNMR (DMSD-d6,TMS) δppm 3.2～3.9 (6H, m) 3.9～5.1 (4H, 加D2O后消失) 5.68（1H，d，J＝8.0） 6.12 (1H, d, J＝2.0) 6.42 (1H, d, J＝2.0) 6.86 (2H, d, J＝9.0) 8.08 (2H, d, J＝9.0) 请根据以上提供的信息填空，写出结晶Ⅰ的结构式，并指出 苷键的构型。
黄酮测定的研究进展 简要：黄酮类化合物（Flavonoids），又称生物黄酮（Bioflavon-oids）或植物黄酮，是植物在长期自然选择过程中产生的一些次级代谢产物，黄酮类化合物有着广泛的生物活性和多种药理活性，比如抗氧化、抗炎、抗诱变、抗肿瘤形成与生长等，特别是近年来关于黄酮在心血管、脑血管、肿瘤等方面的研究已经比较深入，此外黄酮类物质还有低毒性的特点，因此长期以来一直是天然药物和功能性食品研究开发的热点[1]。 关键词：黄铜，含量，测定方法，研究进展 前言：黄酮类物质是植物光合作用产生的一种天然有机物。植物界中分布广泛，主要分布于芸香料、唇形科、豆科、伞形科、银杏科、菊科等。根据化学方法定义黄酮类物质为含一个共同的苯基苯并二氢吡喃环结构，有一个或多个羟基取代基，包括其衍生物。在食物中，黄酮类物质一般以酯类、醚类或配糖类衍生物及混合物的形式存在，共有5000 多种化合物。对于哺乳动物，只能通过饮食获取黄酮物质，这些食物包括水果、蔬菜、谷物、坚果、茶及红酒。在日常膳食中，黄酮类物质通常表现为具有抗氧化性的羟基衍生物形态，显示出多种生物活性，对于一些疾病，例如癌症和心血管疾病，胃和十二指肠的病理性失调，以及病毒和细菌感染的预防和治疗。此外，类黄酮还被发现有广泛的药物特性，包括抗氧化性、抗过敏、抗病毒及预防糖尿病，对肝和胃的保护，抗病原体及抗瘤活性。除在医药工业上已广泛应用其生理活性外，目前也将黄酮类物质作为功能食品的添加剂[2] 。 （一）测定黄铜的几种方法 1 紫外分光光度法 紫外分光光度法具有重复性好、准确、简便、易掌握、不需要复杂的仪器设备, 加之所需试剂便宜易得, 因此该方法应用于测定植物中黄酮含量最为广泛[ 3]。 1.1 直接测定法 大多数黄酮类化合物分子中存在桂皮酰基和苯甲酰基组成的交叉共轭体系, 其MeOH 谱200 nm～400 nm的区域内存在两个主要的紫外吸收带, 峰带I(300 nm～400nm)和峰带Ⅱ( 220 nm～280 nm)[ 4]。 1.2 比色法 向供试样品中加入显色剂后测定吸光度以测定其含量, 这种方法称为比色法。黄酮类化合物分子中若具有3- 羟基、5- 羟基或邻二酚羟基, 易于与金属盐类如铝盐、锆盐、锶盐、镁盐等反应, 生成有色金属络合物。常用于黄酮类化合物含量测定的金属盐试剂有Al(NO3)3、A1Cl3等,这些络合物作用在光
中药化学试题库 第六章黄酮类化合物 一、选择题 （一）A型题（每题有5个备选答案，备选答案中只有1个最佳答案） 1．黄酮类化合物的基本碳架是（） A．C6-C6-C3 B．C6-C6-C6 C．C6-C3-C6 D．C6-C3 E．C3-C6-C３ 正确答案：C ２．与２’-羟基查耳酮互为异构体的是（）A．二氢黄酮B．花色素 C．黄酮醇D．黄酮 E．异黄酮 正确答案：A ３．水溶性最大的黄酮类化合物是（） A．黄酮 B．黄酮醇C．二氢黄酮D．查耳酮 E．异黄酮 正确答案：C 6．酸性最强的黄酮类化合物是（） A．5-羟基黄酮 B．4’-羟基黄酮 C．3-羟基黄酮 D．3’-羟基黄酮 E．4’-羟基二氢黄酮
正确答案：B 7．酸性最弱的黄酮类化合物是（） A．5一羟基黄酮 B．7-羟基黄酮 C．4’-羟基黄酮 D．3’-羟基黄酮 E．6一羟基黄酮 正确答案：A 10．黄酮类化合物色谱检识常用的显色剂是（）A．盐酸-镁粉试剂B．FeCl3试剂C．Gibb’s试剂 D．2％NaBH4甲醇溶液 E．l％AlCl3甲醇溶液 正确答案：E 11．在碱液中能很快产生红或紫红色的黄酮类化合物是（） A．二氢黄酮B．查耳酮 C．黄酮醇D．黄酮 E．异黄酮 正确答案：B 13．将总黄酮溶于乙醚，用 5％NaHCO３萃取可得到（） A．5，7-二羟基黄酮B．5-羟基黄酮C．3’，4’-二羟基黄酮 D．5，8-二羟基黄酮 E．7，4’-二羟基黄酮正确答案：E 15．当药材中含有较多粘液质、果胶时，如用碱液提取黄酮类化合物时宜选用（）
A．5％Na2CO3 B．l％NaOH C．5％NaOH D．饱和石灰水 E．氨水 正确答案：D 17．下列化合物进行聚酰胺柱色谱分离，以浓度从低 到高的乙醇洗脱，最先被洗脱的是（） A．2’，4’-二羟基黄酮B．4’-OH黄酮醇C．3’，4’-二羟基黄酮 D．4’-羟基异黄酮 E．4’-羟基二氢黄酮醇 正确答案：A 18．黄芩苷可溶于（） A．水 B．乙醇C．甲醇 D．丙酮 E．热乙酸 正确答案：E 19.下列化合物属于黄酮碳苷的是 A、芦荟苷 B、葛根素 C、大豆苷 D、芦荟大黄素苷 E、橙皮苷 正确答案：B 20.与查耳酮互为异构体的是 A、黄酮 B、二氢黄酮 C、异黄酮 D、橙酮 E、花色 素 正确答案：B
第五章黄酮类化合物 一、选择题 （一）单项选择题（在每小题的五个备选答案中，选出一个正确答案，并将正确答案的序号填在题干的括号内） 1．构成黄酮类化合物的基本骨架是（） A. 6C-6C-6C B. 3C-6C-3C C. 6C-3C D. 6C-3C-6C E. 6C-3C-3C 2．黄酮类化合物的颜色与下列哪项因素有关（） A. 具有色原酮 B. 具有色原酮和助色团 C. 具有2-苯基色原酮 D. 具有2-苯基色原酮和助色团 E.结构中具有邻二酚羟基 3．引入哪类基团可使黄酮类化合物脂溶性增加（） A. -OCH3 B. -CH2OH C. -OH D. 邻二羟基 E. 单糖 4．黄酮类化合物的颜色加深，与助色团取代位置与数目有关，尤其在（）位置上。 A. 6，7位引入助色团 B. 7，4/-位引入助色团 C. 3/，4/位引入助色团 D. 5-位引入羟基 E. 引入甲基 5．黄酮类化合物的酸性是因为其分子结构中含有（） A. 糖 B. 羰基 C. 酚羟基 D. 氧原子 E. 双键 6．下列黄酮中酸性最强的是（） A. 3-OH黄酮 B. 5-OH黄酮 C. 5，7-二OH黄酮 D. 7，4/-二OH黄酮 E. 3/，4/-二OH黄酮 7．下列黄酮中水溶性性最大的是（） A. 异黄酮 B. 黄酮 C. 二氢黄酮 D. 查耳酮 E. 花色素 8．下列黄酮中水溶性最小的是（） A. 黄酮 B. 二氢黄酮 C. 黄酮苷 D. 异黄酮 E. 花色素 9．下列黄酮类化合物酸性强弱的顺序为（） （1）5，7-二OH黄酮（2）7，4/-二OH黄酮（3）6，4/-二OH黄酮 A.（1）＞（2）＞（3） B.（2）＞（3）＞（1） C.（3）＞（2）＞（1） D.（2）＞（1）＞（3） E.（1）＞（3）＞（2） 10．下列黄酮类化合物酸性最弱的是（）
第六章 黄酮类化合物 一、选择题 （一） A 型题（每题有 5 个备选答案，备选答案中只有 1 个最佳答案） 1．黄酮类化合物的基本碳架是（ ） -C A ．C-C -C 3 B ．C- C -C 6 C ．C-C 6 6 6 6 6 6 3 D ．C-C 3 E ．C -C -C 6 3 6 ３ 正确答案： C ２．与２’ - 羟基查耳酮互为异构体的是（ ） A ．二氢黄酮 B ．花色素 C ．黄酮醇 D ．黄酮 E ．异黄酮 正确答案： A ３．水溶性最大的黄酮类化合物是（ A ．黄酮 B ．黄酮醇 D ．查耳酮 E ．异黄酮 ） C ．二氢黄酮 正确答案： C 6．酸性最强的黄酮类化合物是（ A ．5- 羟基黄酮 B ．4’ - 羟基黄酮 基黄酮 D ．3’- 羟基黄酮 ） C ．3- 羟 E ．4’- 羟基二氢黄酮 正确答案： B
7．酸性最弱的黄酮类化合物是（A．5 一羟基黄酮B．7-羟基黄酮黄酮D．3’-羟基黄酮 E．6 一羟基黄酮） C．4’-羟基 正确答案：A 10．黄酮类化合物色谱检识常用的显色剂是（）A．盐酸-镁粉试剂 B ． FeCl3 试剂C．Gibb’s 试剂 ．l ％AlCl D．2％NaBH甲醇溶液E 甲醇溶液 4 3 正确答案： E 11．在碱液中能很快产生红或紫红色的黄酮类化合物 是（） A．二氢黄酮B．查耳酮C．黄酮醇D．黄酮E．异黄酮 正确答案： B 13．将总黄酮溶于乙醚，用 5 ％ NaHCO３萃取可得到（） A．5，7- 二羟基黄酮B．5- 羟基黄酮C．3’，4’- 二羟基黄酮 D．5，8- 二羟基黄酮E．7，4’- 二羟基黄酮正确答案：E 15．当药材中含有较多粘液质、果胶时，如用碱液提 取黄酮类化合物时宜选用（） C ． 5％NaOH A．5％ NaCO B ． l ％NaOH 2 3
一、填空题 3.中药红花在开花初期，由于主要含有无色的新红花苷及微量红花苷，故花冠呈淡黄色；开花中期主要含的是黄色的红花苷，故花冠显深黄色；开花后期则氧化变成红色的醌式红花苷，故花冠呈红色。 4.黄酮类化合物呈酸性，是由于其多数带有_酚羟基__；黄酮类成分也具有微弱的碱性，是由于其结构中_7－吡喃环上的1位氧原子的存在。 7.不同类型黄酮苷元中水溶性最大的是花色素类，原因是以离子形式存在，具有盐的通性；二氢黄酮的水溶性比黄酮大，原因是系非平面性分子，故分子与分子间排列不紧密，分子间引力降低，有利于水分子进入。 8.黄酮类化合物结构中大多具有酚羟基，故显一定的酸性，不同羟基取代的黄酮其酸性由强至弱的顺序为7，4’－二羟基、7或4'－羟基、一般酚羟基、5－羟基。 9.黄酮类化合物γ-吡喃酮环上的1位氧因有未共享电子对，故表现出微弱的碱性，可与强无机酸生成样盐。 10.锆盐-枸橼酸反应常用于区别3－羟基和5－羟基黄酮，加入2%二氯氧锆甲醇溶液，两者均可生成黄色锆络合物，再加入2%枸橼酸甲醇溶液后，如果黄色不减褪，示有3－羟基黄酮；如果黄色减褪，示有5－羟基黄酮。 11.黄酮类化合物常用的提取方法有水提法、溶剂萃取法、碱提取酸沉淀法等。 12.聚酰胺柱色谱分离黄酮苷和苷元，当用含水溶剂（如乙醇-水）洗脱时，黄酮苷先被洗脱；当用有机溶剂（如氯仿-甲醇）洗脱时，苷元先被洗脱。
.二．单选题： 1．黄酮类化合物的基本碳架是（ E ） A ．C 6-C 6-C 3 B ． C 6-C 6-C 6 C ．C 6-C 3-L 6 D ．C 6-C 3 E ．C 3-C 6-C ３ ２．与２ˊ-羟基查耳酮互为异构体的是（ A ） A ．二氢黄酮 B ．花色素 C ．黄酮醇 D ．黄酮 E ．异黄酮 ３．水溶性最大的黄酮类化合物是（C ） A ．黄酮 B ．黄酮醇 C ．二氢黄酮 D ．查耳酮 E ．异黄酮 4．酸性最强的黄酮类化合物是（ E ） A ．5-羟基黄酮 B ．4’-羟基黄酮 C ．3-羟基黄酮 D ．3’-羟基黄酮 E ．4’-羟基二氢黄酮 5．黄酮类化合物色谱检识常用的显色剂是（A ） A ．盐酸-镁粉试剂 B ．FeCl 3试剂 C ．Gibb’s 试剂 D ．2％NaBH 4甲醇溶液 E ．l ％AlCl 3甲醇溶液 6．在碱液中能很快产生红或紫红色的黄酮类化合物是（ B ） A ．二氢黄酮 B ．查耳酮 C ．黄酮醇 D ．黄酮 E ．异黄酮 7．将总黄酮溶于乙醚，用 5％NaHCO ３萃取可得到（ E ） A ．5，7-二羟基黄酮 B ．5-羟基黄酮 C ．3’，4’-二羟基黄酮 D ．5，8-二羟基黄酮 E ．7，4’-二羟基黄酮 8．下列化合物进行聚酰胺柱色谱分离，以浓度从低到高的乙醇洗脱，最先被洗脱的是（ D ） A ．2’，4’-二羟基黄酮 B ．4’-OH 黄酮醇 C ．3’，4’-二羟基黄酮 D ．4’-羟基异黄酮 E ．4’-羟基二氢黄酮醇 8．盐酸-镁粉反应鉴别黄酮类化合物，下列哪项错误（ D ） A ．多数查耳酮显橙红色 B ．多数黄酮苷显橙红-紫红色 C ．多数二氢黄酮显橙红-紫红色 D ．多数异黄酮不显红色 9．用于鉴别二氢黄酮类化合物的试剂是（A ） A ．ZrOCl 2 B ．NaBH 4 C ．HCl-Mg 粉 D ．SrCl 2 10．下列化合物按结构应属于（ D ） A. 黄酮类 B. 异黄酮类 C. 查耳酮类 D. 二氢黄酮类 O O OH CH 3 HO H 3C
黄酮类化合物 黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与B-环）通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物黄酮类化 合物结构中常连接有酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。此外，它还常与糖结合成苷。多数科学家认为黄酮的基本骨架是由三个丙二酰辅酶A和一个桂皮酰辅酶A生物合成而产生的。经同位素标记实验证明了A环来自于三个丙二酰辅酶A，而B环则来自于桂皮酰辅酶A[1]。1、分类：根据中央三碳链的氧化程度、B-环连接位置（2-或3-位）以及三碳链是否构成环状等特点，可将主要的天然黄酮类化合物分类：黄酮类(flavones)、黄酮醇(flavonol)、二氢黄酮类(flavonones)、二氢黄酮醇类(flavanonol)、花色素类(anthocyanidins)、黄烷-3，4二醇类(flavan-3,4-diols)、双苯吡酮类(xanthones)、查尔酮(chalcones)和双黄酮类(biflavonoids)等十五种。另外，还有一些黄酮类化合物的结构很复杂，其中包括榕碱及异榕碱等生物碱型黄酮。2、理化性质：天然黄酮类化合物多以苷类形式存在，并且由于糖的种类、数量、联接位置及联接方式不同可以组成各种各样黄酮苷类。组成黄酮苷的糖类包括单糖、双糖、三糖和酰化糖。黄酮苷固体为无定形粉末，其余黄酮类化合物多为结晶性固体。黄酮类化合物不同的颜色为天然色素家族添加
了更多色彩。这是由于其母核内形成交叉共轭体系，并通过电子转移、重排，使共轭链延长，因而显现出颜色。黄酮苷一般易溶于水、乙醇、甲醇等级性强的溶剂中；但难溶于或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。糖链越长则水溶度越大。黄酮类化合物因分子中多具有酚羟基，故显酸性。酸性强弱因酚羟基数目、位置而异。3、显色：1.盐酸-镁粉（或锌粉） 反应为鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应，反应机理现在认为是因为生成了阳碳离子缘故[1]。2.四氢硼钠（NaBH4）是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂，产生红～紫色。而与其它黄酮类化合物均不显色。3. 黄酮类化合分子中常含有下列结构单元，故常可与铝盐、铅盐、锆盐、镁盐、锶盐、铁盐等试剂反应，生成有色络合物。与1%三氯化铝 或硝酸铝溶液反应，生成的络合物多为黄色（λmax=415nm），并有荧光，可用于定性及定量分析。4、黄酮对身体的好处黄酮广泛存在自然界的某些植物和浆果中,总数大约有4千 多种,其分子结构不尽相同,如芸香苷、橘皮苷、栎素、绿茶 多酚、花色糖苷、花色苷酸等都属黄酮。不同分子结构的黄酮可作用于身体不同的器官，如山楂--心血管系统，兰梅-- 眼睛，酸果--尿路系统，葡萄--淋巴、肝脏，接骨木果--免疫系统，平时我们可以通过多食葡萄、洋葱、花椰莱、喝红酒、多饮绿茶等方式来获得黄酮，作为身体的一种补充。 黄酮的功效是多方面的，它是一种很强的抗氧剂，可有效清
黄酮类化合物的生理功能 黄酮类化合物广泛存在于植物中，实际上存在于植物的所有部分，包括根、心材、树皮、叶、果实和花中，光全作用中约有2%的碳源被转化成类黄酮。早在30年代人们就发现了黄酮类化合物具有维生素C样的活性，曾一度被视为是维生素P。至今法国与俄罗斯仍继续称黄酮类化合物为维生素P。Pratt等人研究了黄酮类化合物的抗氧化性质，认为黄酮是作为一级抗氧化剂而起作用的，它们具有显著的抗氧化性能。黄酮抗油脂过氧化的作用早在60年代就已经被证实了。80年代以来，对黄酮类化合物的研究逐渐转向其清除自由基的能力、抗衰老及对老年病的防治功效上。 黄酮类化合物中含有消炎、抑制异常的毛细血管通透性增加及阻力下降、扩张冠状动脉、增加冠脉流量、影响血压、改变体内酶活性、改善微循环、解痉、抑菌、抗肝炎病毒、抗肿瘤具有重要生物活性的化合物，有很高的药用价值。中草药含黄酮类化合物的很多，已经证明类黄酮是许多中草药的有效成份。例如满山红中的杜鹃素、小叶枇杷中的小叶枇杷素、矮地茶中的槲皮苷、铁包金中的芦丁、白毛夏枯草和青兰中的木犀草素、红管药中的槲皮素、葛根中的黄豆苷与葛根素、毛冬青与银杏叶中的黄酮醇苷、黄芩中的抗菌成分黄芩素和解热有效成分黄芩苷等。此外，还有很多中草药富含黄酮类成分，如槐米、陈皮、射干、红花、甘草、蒲黄、枳实、芫花、金银花、菊花、山楂、淫羊藿、桎木和地锦等。除了药用价值外，其中的部分黄酮类化合物（特别是来源自药食两用的中草药）显然可应用在功能性食品。 黄酮和黄酮醇是植物界分布最广的黄酮类化合物，广泛存在于食用蔬菜及水果中，在沙棘、山楂、洋葱等中含量较高，茶叶、蜂蜜、果汁、葡萄酒中含量丰富。椐估计人体每天从食物中摄入这类物质可达1g，产生有益的生理作用。黄酮类化合物无显著毒性，大鼠对槲皮素的经口LD50为10～50g/kg ，小鼠一次口服15g/kg，观察7d无一死亡。临床病人摄取芦丁2.25g持续7d或60mg/d连续5年，均无任何副反应。在其他一系列大剂量、长时间的动物试验中，均未发现有致癌性。显性致死试验、细胞姐妹染色体试验、微核试验证明槲皮素类衍生物无致突变作用。 黄酮类化合物的生理功能可概括为： ⑴调节毛细血管的脆性与渗透性。 ⑵是一种有效的自由基清除剂，其作用仅次于维生素E。 ⑶具有金属螯合的能力，可影响酶与膜的活性。 ⑷对维生素C有增效作用，似乎有稳定人体组织内维生素C的作用。 ⑸具有抑制细菌和抗生素的作用，这种作用使普通食物抵抗传染病的能力相当高。 ⑹在两方面表现有抗癌作用，一方面是对恶性细胞的抑制（即停止或抑制细胞的增长），另一方面是从生化方面保护细胞免受致癌物的损害。 尽管对黄酮类化合物的看法尚有矛盾的方面，但它目前仍被应用来防治下列一些疾病： ⑴毛细血管的脆性和出血。 ⑵牙龈出血。 ⑶眼的视网膜内出血。
第六章黄酮类化合物 本章是本教材的重点，因此考试也是重点。 学习和复习时，对黄酮化合物的分类、检识和提取分离部分重点掌握，并可以通过紫外方法对简单黄酮类化合物进行结构解析。熟悉槐米和黄芩两味中药的实例。 第一节概述 的含义：黄酮类化合物是广泛存在于自然界的一大类化合物。由于这类化合物大多呈黄色或淡黄色，且分子中亦多含有酮基因此被称为黄酮。黄酮类化合物经典的概念主要是指基本母核为2-苯基色原酮的一系列化合物。现在，黄酮类化合物是泛指两个苯环（A与B环）通过三个碳原子相互联结而成的一系列化合物。其基本碳架为：C6-C3-C6。 了解黄酮类化合物也是中药中一类重要的有效成分，具有多方面的生物活性。 第二节黄酮类化合物的结构与分类 这一节要掌握黄酮的分类原则，根据黄酮类化合物A环和B环中间的三碳链的氧化程度、三碳链是否构成环状结构、3位是否有羟基取代以及B环（苯基）连接的位置（2或3位）等特点，可将主要的天然黄酮类化合物分类。 结合中药实例槐米和黄芩进行学习。 第三节黄酮类化合物的理化性质 这一节内容为黄酮类化合物物理和化学性质学习，也是黄酮化合物难点部分也是重要考点，因此必须掌握，复习时将影响黄酮颜色，酸性强弱的因素归纳总结便于记忆，并牢记颜色反应和金属盐类试剂的络合反应，能熟练应用显色反应区分相似结构的化合物。 黄酮类化合物颜色主要与分子中是否存在交叉共轭体系有关，助色团（-OH、-OCH3等）的种类、数目以及取代位置对颜色也有一定影响。
花色素的颜色可随pH不同而改变 二氢黄酮及二氢黄酮醇等，因分子中的C环具有近似于半椅式的结构系非平面型分子，有利于水分子进入，故在水中溶解度稍大。花色素类虽具有平面型结构，但因以离子形式存在，具有盐的通性，故亲水性较强，水溶度较大。 黄酮类化合物的酸性强弱与酚羟基数目的多少和位置有关。以黄酮为例其酚羟基酸性由强至弱的顺序是：7，4′-二OH＞7-或4′-OH＞一般酚羟基＞5-OH，黄酮类化合物的颜色反应主要是利用分子中的酚羟基及γ-吡喃酮环的性质。 盐酸-镁粉反应此为鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应。 与金属盐类试剂的络合反应：黄酮类化合物分子中若具有3-羟基、4-羰基，或5-羟基、4-羰基或邻二酚羟基，则可以与许多金属盐类试剂如铝盐、锆盐、锶盐等反应，生成有色的络合物或有色沉淀，有的还产生荧光。 第四节黄酮类化合物的提取与分离 黄酮类化合物的提取可以分为溶解提取法、热水提取法、碱性水或碱性稀醇提取法各有利弊，可根据药材和提取条件选择。 黄酮类化合物的分离是本节的重点，尤其是聚酰胺色谱发洗脱规律和应用。 聚酰胺色谱的分离机理，一般认为是“氢键吸附”，即聚酰胺的吸附作用是通过其酰胺羰基与黄酮类化合物分子上的酚羟基形成氢键缔合而产生的，其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中酚羟基的数目与位置等及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。溶剂分子与聚酰胺或黄酮类化合物形成氢键缔合的能力越强，则聚酰胺对黄酮类化合物的吸附作用将越弱。黄酮类化合物在聚酰胺柱上洗脱时大体有下列规律： 1、首先看黄酮不同类型，被吸附强弱的顺序为：黄酮醇＞黄酮＞二氢黄酮醇＞异黄酮。 2、相同母核条件下：酚羟基数目，越多则吸附力越强，在色谱柱上越难以被洗脱；当分子中酚羟基数目相同时，易于形成分子内氢键，则其与聚酰胺的吸附力减小，易被洗脱下来；分子内芳香化程度越高，共轭双键越多，则吸附力越强 3、游离黄酮与黄酮苷的分离若以含水移动相（如甲醇-水）作洗脱剂，黄
第五章黄酮类化合物 一、判断理（正确的在括号内划“ √ ” 厂铝的划“ Ｘ” ）１、多数黄酮苷元具有旋光活性，而黄酮苷则无。（）２、所有的黄酮类化合物都不能用氧化铝色谱分离。（）３、纸层析分离黄酮类化合物，以８％乙酸水溶液展开 时，苷元的Ｒ ｆ值大于昔的Ｒ ｆ 值．（） ４、黄酮化合物，存在３，７—二羟基，ＵＶ光谱： （１）其甲醇溶液中加入ＮａＯＭｅ时，仅峰带Ｉ位移，强度不减．（） （２）其甲醇溶液中加入ＮａＯＡｃ时，峰带ＩＩ红移５—２０ｎｍ．（ 二、选择题（将正确答案的代号填在题中的括号内）１、聚酰胺对黄酮类化合物发生最强吸附作用时，应在（）中． Ａ、９５％乙醇Ｂ、１５％乙醇Ｃ、水Ｄ、酸水Ｅ、甲酰胺苷元的苷化位移规律是（）． ２、黄酮苷元糖苷化后，苷元的苷化位移规律是（）Ａ、ａ－Ｃ向低场位移Ｂ、ａ－Ｃ向高场位移 Ｃ、邻位碳不发生位移 ３、黄酮类化合物的紫外光谱，ＭｅＯＨ中加入ＮａＯＭｅ诊断试剂峰带Ｉ向红移动４０—６０ｎｍ，强度不变或增强说明（）． Ａ、无４—ＯＨＢ、有３—ＯＨ Ｃ、有４—ＯＨ，无３—ＯＨＤ、有４—ＯＨ和３—ＯＨ４、聚酰胺色谱的原理是（）。 Ａ、分配Ｂ、氢键缔合Ｃ、分子筛Ｄ、离子交换三、填空
１、确定黄酮化合物具有５—０Ｈ的方法有———————，————————，————————————————。 ２、某黄酮苷乙酰化后，测定其氢谱，化学位移在１．８—２．１处示有１２个质子，２．３、２．５处有１８个质子，说明该化合物有＿＿个酚羟基和＿＿个糖． ３、已知一黄酮Ｂ环只有４＇—取代，取代基可能为—ＯＨ或—ＯＭｅ．如何判断是４＇—ＯＨ，还是４＇—ＯＭｅ，写出三种方法判断。 四、用化学方法区别下列化合物： O HO O OCH3 O HO O OH O HO OH O OH OH OH OH A B C 五、分析比较 有下列四种黄酮类化合物 O R2O OH O OH OR1 Ａ、Ｒ １＝Ｒ ２ ＝Ｈ Ｂ、Ｒ １＝Ｈ，Ｒ ２ ＝Ｒｈａｍ Ｃ、Ｒ １＝Ｇｌｃ，Ｒ ２ ＝Ｈ Ｄ、Ｒ １＝Ｇｌｃ，Ｒ ２ ＝Ｒｈａｍ 比较其酸性及极性的大小： 酸性（）＞（）＞（）＞（）
黄酮类化合物提取分离纯化及其活性的研究进展姓名常姣专业微生物学 摘要文章综述了黄酮类化合物的结构特征及提取、分离纯化技术介绍了黄酮类化合物的生物活性，并对其开发利用进行了展望。旨在为黄酮类化合物的研究、开发以及应用提供参考。 关键词黄酮；提取；分离纯化；生物活性 民以黄酮类化合物也称黄碱素, 是广泛存在于自然界的一大类化合物, 在植物体内大多与糖结合成甙的形式存在, 也有部分以游离状态的甙元存在。由于最先发现的黄酮类化合物都具有一个酮式羰基 结构, 又呈黄色或淡黄色, 故称黄酮[ 1]。 目前对天然黄酮类化合物的提取方法较多,如溶剂提取法、微波提取法、超声波提取法、酶解法、超临界流体萃取法、双水相萃取分离法及半仿生提取法等, 每种方法都有它各自的优点和点。用上述方法提取的黄酮类化合物仍然是一个混合物, 不仅是含有其它杂质的粗品, 而且是几种黄酮类成分的混合物, 需进一步分离纯化, 常用的方法有柱层析法、重结晶法、铅盐沉淀法和高效液相色谱法等。 黄酮类化合物具有降低血管脆性及异常的通透性、降血脂、降血压、抑制血小板聚集及血栓形成、抗肝脏病毒、抗炎、抗菌、解栓、抗氧化、清除自由基、抗衰老、抗癌、防癌、降血糖、镇痛和免疫等生理活性[ 2-5]。这些生理活性已被关注，对该类化合物的研究成为医药界的热门课题。人体自身不能合成黄酮类化合物而只能从食物中摄取，因此多年来科学家都在积极研究探讨从植物体中分离 纯度高、活性强的黄酮类化合物[6]。 1黄酮类化合物的理化性质 黄酮类化合物是以2-苯基色原酮为母核而衍生的一类通过三碳链相互连接而成的大多具有基本碳 架的一系列化合物，且母核上常有羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等助色取代基团。黄酮类化合物多为晶体固体，多数具有颜色，少数（如黄酮苷类）为无定形粉末，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇有旋光性外，其余则无旋光性) 黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态（苷或苷元、单糖苷、双糖苷或三糖苷）不同而有很大差异) 一般游离态苷元难溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有机溶剂) 其中，黄酮、黄酮醇、查儿酮等平面型分子，因堆砌较紧密，分子间引力较大，故更难溶于水；而二氢黄酮及二氢黄酮醇等，因系非平面型分子，故排列不紧密，分子间引力降低，有利于水分子进入，水中溶解度稍大。 2黄酮类化合物的提取分离及纯化 黄酮类化合物在花、叶、果等组织中多以苷元的形式存在，而在根部坚硬组织中，则多以游离苷元形式存在。因此，不同来源、部位、种类黄酮提取所采取的方法不同[6]。分离黄酮类化合物的方法很多，根据黄酮类化合物与混入其他化合物的极性不同可采用溶剂萃取法，根据黄酮化合物在酸性水中难溶、碱性水中易溶的特点可采用碱提酸沉法等。 2.1溶剂法 2.1.1 热水提取法
第七章 黄酮类化合物 黄酮类化合物（flavonoids ）是广泛存在于自然界的一大类化合物，大多具有颜色。这一类化合物主要存在于双子叶植物和裸子植物中，在菌类、藻类、地衣类等低等植物中较少见。此类化合物在植物体中大部分与糖结合成苷，一部分以游离状态存在。 黄酮类化合物有多方面的生物活性。例如在心血管系统方面，槐米中的芸香苷和陈皮中的橙皮苷等成分有调节血管通透性和维生素P 样作用，可用作防治高血压及动脉硬化的辅助药物；银杏中的银杏黄酮、葛根中的葛根素等成分有明显的扩张冠状动脉作用。在抗肝脏毒方面，水飞蓟素有护肝的作用，可用作治疗急慢性肝炎、肝硬化及多种中毒性肝损伤。在抗菌作用方面，黄芩中的黄芩苷、黄芩素等成分有一定程度的抗菌作用。此外，黄酮类化合物在镇咳、祛痰、解痉等方面也有一定治疗作用。因此黄酮类化合物是天然药物中的一类重要的有效成分。 第一节 黄酮类化合物的结构与分类 以前，黄酮类化合物主要是指基本母核为2-苯基色原酮类化合物，现在则是泛指两个苯环（A 环与B 环）通过中央三碳链相互连接而成，具有6C-3C-6C 基本骨架的一系列化合物。 O O O O H 1 234 5 6 78A B C 1 / 2/ 3/4/ 5/ 6/ 根据中央三碳链的氧化程度、三碳链是否成环及B 环连接位置等特点，可将黄酮类化合物进行分类（表7-1）。 色原酮(苯并-γ-吡喃酮) 2-苯基色原酮(黄酮)
黄酮类化合物多为上述基本母核的衍生物，在A环和B环上常有羟基、甲氧基、异戊烯基等取代基。组成苷的糖类常有D-葡萄糖、D-半乳糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-木糖及D-葡萄糖醛酸等。也有双糖和三糖，如芸香糖、龙胆二糖、龙胆三糖等。糖多结合在C3、C5、C7位，其它位置也有连接。 下面将黄酮类化合物的主要类型举例如下： 一、黄酮和黄酮醇类 基本结构： O R O R=H 黄酮R=OH 黄酮醇
黄酮类化合物 黄酮类化合物是自然界存在的最大类别的酚类化合物之一，它广泛存在于植物的各个部位，尤其是花叶部位，主要存在于芸香科、唇形科、豆科、伞形科、银杏科、与菊科等。有文献记载约有20％药中含有黄酮类化合物，可见其资源之丰富。许多研究已表明黄酮类化合物具有多种生物活性，除利用其抗菌、消炎、抗突变、降压、清热解毒、镇静、利尿等f乍佣外，在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪氧化酶等方面也有显著效果。他是大多数氧自由基的清除剂，因而能提高SOD(过氧化物歧化酶)的活力，减少MDA(脂质过氧化物丙二醛)及OX —LDL(氧化低密度脂蛋白)的生成。他可以增加冠脉流量：对实验性心肌梗塞有对抗作用，对急性心肌缺血有保护作用，对治疗冠心病、心绞痛、高血压等有显著效果，对降低舒张压，防治心律失常、心血管病和活血化瘀也起重要作用。由于黄酮类化合物的这些生物活性使他的研究进入了—个新的阶段，掀起了黄酮类化合物研究、开发；f0用热潮，促使其在化妆品、医药、食品等工业中有广泛的应用。目前发现的黄酮类化合物已达5000多种，但研究亦发现，在这众多的黄酮类化合物中却因其结构的不同，有的表现出生物活性，有的却没有生物活性，而且生物活性亦因其结构的差异而不同。所以提取分离出具有较高生物活性的黄酮类化合物对医药及食品工业是十分重要的。 一、国内外研究现状 邢秀芳研究了纤维素酶在葛根总黄酮提取中的应用，结果显示在纤维素的作用下，葛根总黄酮的收率提高了130／0。廖亮研究了银杏叶中总黄酮提取方法结果表明乙醇提取较好。方桂珍正交实验研究仙鹤草中总黄酮的提取工艺，考察浸提液浓度、浸提温度、浸提时间、浸提次数、液科比等5个因素对f山鹤草总黄酮含量的影响，确立了仙鹤草总黄酮最佳提取条件为：浸提液体积分数40％，液料比10：1，浸提温度7d℃，回流提取3次，每次0.5h。 高红宁采用紫外分光光度法测定苦参中总黄酮的含量，研究大孔树脂AB一8对苦参总黄酮的吸附性能及原液浓度、pH、流速、洗脱剂的种类对树脂吸附性的影响，结果表明原液浓度为0285mg／ml，pH值为4，流速为3BVm洗脱剂用50％乙醇时，AB一8树脂，吸效果较好。康纯研究了微乳薄层色谱对黄酮类层分分离鉴定，以6种SDS一正丁醇一正庚烷一水徽乳液作为展开剂，通过聚酰胺薄层层析，分离和检测14种中药材、饮片及中成
一、填空题： 1.黄酮类化合物是泛指（）的一系列化合物，其基本母核为（）。 2.酮类化合物的颜色与分子中是否存在（）和（）有关，如色原酮本身无色，但当2位引入（），即形成（）而显现出颜色。 3.一般黄酮、黄酮醇及其苷类显（）；查耳酮为（）；而二氢黄酮为（）。 4.黄酮、黄酮醇分子中，如果在（）位或（）位引入（）或（）等供电子基团，能促使电子移位和重排而使化合物颜色（）。 5.花色素及其苷的颜色特点是（），pH﹤7时显（），pH为8.5时显（），pH﹥8.5时显（）。 6.游离黄酮类化合物一般难溶或不溶于水，易溶于（）、（）、（）、（）等有机溶剂。 7.黄芩根中的主要有效成分是()，其水解后生成的苷元是（），分子中具有（）的结构，性质不稳定，易被氧化成（）衍生物而显（）色。 8.不同类型黄酮苷元中水溶性最大的是（），原因是（）；二氢黄酮的水溶性比黄酮（），原因是（）。 9.黄酮类化合物结构中大多具有（），故显一定的酸
性，不同羟基取代的黄酮其酸性由强至弱的顺序为（）、（）、（）、（）。 10.黄酮类化合物γ-吡喃酮环上的（）因有未共享电子对，故表现出微弱的碱性，可与强无机酸生成（）。 11.具有（）、（）或（）结构的黄酮类化合物，可与多种金属盐试剂反应生成络合物。 12.锆盐-枸橼酸反应常用于区别（）和（）黄酮，加入2%二氯氧锆甲醇溶液，两者均可生成黄色锆络合物，再加入2%枸橼酸甲醇溶液后，如果黄色不减褪，示有（）或（）黄酮；如果黄色减褪，示有（）黄酮。 13.用pH梯度萃取法分离游离黄酮时，先将样品溶于乙醚，依次用碱性由（）至（）的碱液萃取，5%NaHCO3可萃取出（），5%Na2CO3可萃取出（），0.2%NaOH可萃取出（），4%NaOH 可萃取出（）。 14.聚酰胺的吸附作用是通过聚酰胺分子上的（）和黄酮类化合物分子上的（）形成（）而产生的。不同类型黄酮类化合物与聚酰胺的吸附力由强至弱的顺序为（）、（）、（）、（）。
第五章黄酮类化合物 [学习要求] 掌握1、黄酮类化合物的主要结构类型 2、黄酮类化合物的理化性质和显色反应 3、黄酮类化合物常用的提取和分离方法 4、色谱法和紫外光谱在黄酮类化合物结构鉴定中的应用 熟悉 1、黄酮类化合物苷中常见的单糖、二糖和三糖 2、一些有代表性的黄酮类化合物的生物活性 了解1、氢核磁共振在黄酮类化合物结构鉴定中的应用 2、碳核磁共振在黄酮类化合物结构鉴定中的应用 [重点内容] 1、黄酮类化合物的基本结构类型：黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、 二氢黄酮醇类、异黄酮类、二氢异黄酮类、查耳酮类、二氢查耳 酮类、橙酮类、黄烷-3-醇、黄烷-3，4-二醇、花色素类、双苯吡 酮类和高异黄酮类。 2、黄酮类化合物的理化性质：①黄酮类化合物多为结晶性固体，少 数为无定形粉末，具有交叉共轭体系的黄酮类化合物多具有颜色； ②黄酮类化合物的溶解度因结构及存在状态不同而有很大差异， 黄酮、黄酮醇、查耳酮等平面性强的分子，难溶于水，而二氢黄 酮及二氢黄酮醇等，因系非平面性分子，溶解度稍大；③黄酮类 化合物分子中多具有酚羟基，故显酸性；④ -吡喃环上的1-氧原 子具有未共用的电子对，故表现微弱的碱性。 3、黄酮类化合物的显色反应：①还原反应：盐酸-镁粉（或锌粉）反 应为鉴定黄酮类化合物最常用的颜色反应。四氢硼钠（NaBH4） 反应是对二氢黄酮类化合物专属性较高的一种还原剂；②金属盐 类试剂的络合反应：黄酮类化合物分子中常具有3-羟基4-羰基、 5-羟基4-羰基和邻二酚羟基的结构单元，故常可与铝盐、铅盐、 锆盐、镁盐等试剂反应，生成有色络合物；③硼酸显色反应：黄 酮类化合物分子中当具有3-羟基4-羰基和5-羟基4-羰基结构时，
江苏畜牧兽医职业技术学院 毕业论文（设计） 专业药品质量检测技术班级药检071 学号200703123124 论文 (设计) 题目：银杏叶中黄酮类化合物的含量测定 学生姓名：刘江南 设计地点：江苏畜牧业兽医职业技术学院 指导教师：赵丽职称讲师 论文完成时间： 2010年5月20日
银杏叶中黄酮类化合物的含量测定 刘江南 药品质量检测技术 摘要：黄酮类化合物是银杏叶的主要药用成分，其黄酮含量在很大程度上决定着银杏叶的利用价值。以十二烷基硫酸钠(SDS)一正丁醇一正庚烷一水 微乳系统为流动相，预制聚酰胺薄层板为固定相，通过调节微乳系统的 极性，较好地分离出十几种银杏叶黄酮。与传统的流动相系统—有机溶 液系统相比，微乳系统显示出较强的分离优势。通过对大龄银杏叶不同 生长时期黄酮含量的测定与比较，分析银杏叶中黄酮含量随生长期的变 化规律，揭示出大龄银杏树采摘叶片的最佳时期。试验结果表明：不同 生长时期的银杏叶黄酮含量变化幅度较大,在1年中黄酮含量出现2次峰 值，8月份出现第1个峰值，黄酮含量为0.884%, 以后下降较快,10月叶 色发黄后又上升到最高值 0.977%。 关键词：银杏叶黄酮含量薄层色谱生长时期高效液相色谱 Title：In Gingko leaf flavonoid content determination Liujiangnan Drug quality testing technology Abstract：Flavonoids are the main medicinal components of ginkgo biloba,its flavonoid content to a large extent determines the value of ginkgo biloba use. Sodium dodecyl sulfate (SDS) 1-butanol 1-heptane microemulsion system of water as the mobile phase, pre-polyamide thin-layer plate as the stationary phase, by adjusting the polarity of the microemulsion system, well separated a dozen of flavonoids. Mobile phase with the traditional system - the organic solution systems, the microemulsion system showed strong separation advantage.Leaves of Ginkgo biloba on older growth and flavonoids content during the comparison, analysis of flavonoids of Ginkgo biloba in the variation with growth phase, revealing the older leaves of ginkgo trees picking the best time. The results showed that: different growth stages of the content of flavonoids in a significant reduction in 1 year in the flavonoid content of 2 times the
黄酮类化合物练习题 参考答案 一、选择题 （一）单项选择题 1．D 2．D 3．A 4．B 5．C 6．D 7．D 8．A 9．B 10．B 11．E 12．D 13．B 14．E 15．E 16．D 17．B 18．C 19．A 20．B 21．B 22．E 23．C 24．B 25．C 26．A 27．B 28．A 29．A 30．C （二）多项选择题 1．BDE 2．ABCDE 3．ABDE 4．ABD 5．AE 6．ABD 二、名词解释 1．黄酮类化合物：指两个苯环（A环和B环）通过中间三碳链相互联结而成的（6C-3C-6C）一系列化合物。 2．碱提取酸沉淀法：利用某些具有一定酸性的亲脂性成分，在碱液中能够溶解，加酸后又沉淀析出的性质，进行此类成分的提取和分离。 三、填空题 1．2-苯基色原酮；三碳链；6C-3C-6C。 2．2位引入苯基；灰黄色至黄色；黄色至橙黄色；交叉共轭体系。 3．交叉共轭体系；助色团；助色团；加深；7以下；8.5左右；＞8.5。 4．甲醇；乙醇；醋酸乙酯；乙醚；亲水性（水溶性）；亲水性；亲脂性；酚羟基。 5．7，4/-二羟基；7或4/ 羟基-；一般酚羟基；C5-OH；C4位羰基；ρ～π共轭效应；分子内氢键。 6．橙红色至紫红；异黄酮；查耳酮；四氢硼钠（钾）；紫色至紫红色。 7．C3 、、C5-羟基；邻二酚羟基；配合物；沉淀。 8．C3；C5；鲜黄色；C5-OH黄酮；C3-OH黄酮。 9．花；叶；果实；苷；苷元。 10．溶剂提取；碱提取酸沉淀；叶绿素；油脂；色素；蛋白质；多糖。 11．活性炭吸附；pH梯度萃取；聚酰胺色谱。 12．酰胺基；游离酚羟基；氢键缔合；羟基数目和位置；水和醇；异黄酮；二氢黄酮；黄酮；黄酮醇。 13．芦丁；槲皮素；芸香糖；1:10000；1:200；1:300；1:30。 14．离子型，非平面。 四、鉴别题 1． 颜色不褪颜色减褪
天然黄酮类化合物分离纯化及鉴定研究概况 摘 要 黄酮类化合物是一类在植物中分布广泛、具有多种生物活性的多酚类化合物。在人类的营养、健康和疾病防治有着广阔的应用前景。本文介绍了天然黄酮类化合物的结构特点、提取分离、纯化及鉴定研究方法，综述了部分国内外近年来分离纯化鉴定黄酮类化合物的文献报道，并对其研究和应用前景进行展望。 关键词 黄酮类化合物 分离纯化 鉴定 研究方法 研究概况 黄酮类化合物又称黄碱素或黄酮体，是一类存在于植物中的天然产物,在自然界中广泛分布,属于植物次级代谢产物,在植物的叶子和果实中少部分以游离形式存在,大部分与蔗糖合成苷类,以配基的形式存在。到目前为止，已经发现5000多种植物中含有黄酮类化合物，黄酮类化合物主要存在于芸香科、唇形科、豆科、伞形科、银杏科与菊科等植物中。许多研究已表明黄酮类化合物具有显著的生理药理活性，除具有抗菌、消炎、抗突变、降压、清热解毒、镇静、利尿等作用外，在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等方面也有显著效果。它是大多数氧自由基的清除剂，对冠心病、心绞痛等疾病的治疗效果显著[1]。黄酮类化合物安全、无毒，即是药品又是食品，在医药、食品加工等方面已被广泛应用。此外,黄酮类化合物还具有保鲜和护肤美容等作用。因此，黄酮类化合物的功用引起了人们的广泛重视，对该类化合物的研究已成为国内外研究的热门课题。 1 黄酮类化合物的结构和种类 黄酮类化合物，又名生物类黄酮化合物，是色原酮或色原烷的衍生物。黄酮类化合物以前主要是指基本母核结构为2- 苯基色原酮类化合物，目前则泛指 2 个具有酚羟基的苯环（A 和 B ） 通过中央三碳链相互连结而成的一系列化合物。它们一般是由二个苯环(A -环与B -环)通过中央三碳链(C -链)相互连接而成,即具有C6-C3-C6基本骨架。黄酮类化合物的基本结构见图1。 O O O O A C 23456 7 8B 1' 2'3'4'5'6'O 原酮C 6C 3C 612-苯基色原酮 根据三碳链氧化程度、B 环 （苯基） 联结位置（2 位或 3 位） 以及三碳链是否呈环状等特点，可将黄酮类化合物大致分为：黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类、异黄酮类、二氢异黄酮类、黄烷- 3-醇、查尔酮类 、黄图1 黄酮类化合物的基本结构