酶法多肽的作用

酶法多肽的作用

基本信息：

用生物酶催化蛋白质的方法称为酶法，用酶法获得的多肽叫做"酶法多肽"。酶法多肽一词最早起源于1996年，是由邹远东创立的酶法多肽。酶法多肽服食进入循环系统和人体组织后，能刺激机体的免疫系统发生特异性免疫反应。

酶法多肽的应用：

酶法多肽现最具代表性的产品是三九蛋白肽口服液，三九蛋白肽具有免疫调节和抗辐射的两大主要功能，适用于减缓各类癌症放化疗的毒副作用。例如针对化疗后呕吐，掉头发，白细胞低等放化疗后的毒副作用怎么办？免疫力低怎么增强？身体不好如何治疗?等问题提供了一个辅助恢复的作用。

放化疗手术后的副作用

●免疫功能下降：化疗药物可损害患者的免疫系统，导致免疫功能缺陷或下降。

●身体衰弱：化疗患者会出现周身疲乏无力、精神萎靡、出虚汗、嗜睡等不良反应。

●炎症反应：发热、头晕、头痛、口干、口舌生疮等。还有可能引起静脉炎，膀胱炎等并发炎症。

●器官毒性：有些化疗药大剂量可引起肾功能、心脏功能、肝功能损害。导致器官的衰竭和损伤，以及头发的大量脱落等等。

●消化障碍：很多化疗药物通过刺激胃肠道粘膜都会引发食欲下降、饮食量减少、恶心、呕吐、腹胀、腹痛、腹泻或便秘等。

●白细胞水平下降：放化疗的目的就是杀死癌细胞，但是它是“无差别攻击”，在杀死癌细胞的同时，白细胞也会死亡，当白细胞水平过低时，人就会死亡。

这些副作用也让广大医患人员意识到：单一的化疗并不能减轻病人的病痛，需要配合其他产品来减轻放化疗的副作用，从而才能延长病人的生命。

放化疗期间常见问题解答

1、放化疗后白细胞低怎么治疗?

可将专业的抗放化疗药物搭配三九蛋白肽一起服用。三九蛋白肽能促进放化疗病人白细胞增值，提升白血球含量，提高白细胞水平，同时增强病人免疫功能。此外，放化疗人群应多吃些富含蛋白质、铁、维生素的食物和水果蔬菜，如鱼类、瘦肉、大枣等。

2、放化疗后免疫力低下怎么办?

服用三九蛋白肽口服液能修复病人整体的身体内系统，从根本上增强体质，三九蛋白肽还是一种新型的肽类免疫剂，病人不需要消化就可直接吸收，为病人补充少而精的蛋白营养物质。

3、化疗后恶心呕吐怎么办?

请记住病人在接受放射或化学治疗前2小时内，应避免进食，以防止呕吐。服用三九蛋白肽可以修复病人的胃肠道功能，帮助恢复饮食情况，为病人提供可以直接吸收的营养蛋白物质，恢复病人的身体机能状况。饮食方面也应注意少食多餐，避免空腹或腹胀。

4、如何减轻放化疗副作用?

除了成分输血、骨髓移植等方式外，三九蛋白肽能够全方位的缓解放化疗病人的毒副作用，尤其在抗辐射，提高免疫力方面，效果更为明显。服用三九蛋白肽还能缩短病人放化疗间隔时间，减少病人放化疗期间的痛苦，延长病人寿命。

5、放化疗期间掉头发怎么办?

防治放化疗脱发的办法较多，如药物治疗和物理降温，饮食方面需注意多补充维生素E，在营养品方面可选择服用三九蛋白肽口服液，能减轻放化疗副作用，预防脱发。

三九蛋白肽抗放化疗的六大自然优势

1、科技酶法萃取，天然无激素

人体的一切生理活动都需要多肽的参与，三九蛋白肽是运用蛋白质工程的分离技术，对全卵蛋白粉进行分离，运用生物工程的酶解技术，将大分子蛋白质直接酶解成小分子活性多肽，富含人体极易吸收的小分子活性多肽及20多种氨基酸。

2、不需消化，直接吸收

三九蛋白肽是合成小肽，不需降解，直接吸收，进入renti血液循环系统、器官及细胞组织、迅速发挥其生理作用和生物学功能。

3、抗癌防癌无副作用

三九蛋白肽有效的提高癌患者的康复几率，抑制癌细胞的生长，消灭癌细胞，防止癌细胞变异或转移，辅助放化疗，减少放化疗毒性，增加放化疗效果。

4、补充营养，提高患者免疫力

七种人体营养黄金：小肽、22种氨基酸、各种微量元素(铁、锌、硒、锰、锶、镉等)、大枣多糖、枸杞多糖、辅酶、卵磷脂，迅速补充renti所需各类营养。

5、天然排毒，减轻放化疗毒副作用

三九蛋白肽中的微量元素是天然的排毒剂，可以中和体内的有害物质排出体外，减轻放化疗药物的毒服作用。

6、防身体机能退化

三九蛋白肽是人工降解合成的小肽，有极强的活性，人服后，体内各种组织、细胞、器官的活性大大增强，身体氧化的程度大大减缓。

菲律宾蛤仔酶解多肽的分离及体外抗氧化作用研究【开题报告】

开题报告 药学 菲律宾蛤仔酶解多肽的分离及体外抗氧化作用研究 一、说明选题的依据和意义 菲律宾蛤仔（Ruditapes philippinarum），隶属于软体动物门（Mollusca）、双壳纲（Bivalvia）、帘蛤科（Veneridae）的海洋生物，俗称花蛤，是我国四大养殖贝类之一。花蛤肉组织蛋白含量高，脂肪含量低，并含有丰富的维生素和微量元素，具有良好的营养保健功能。中医认为，蛤肉有滋阴明目、软坚化痰之功效。近代研究表明，菲律宾蛤仔提取物具有提高免疫力、抑制细胞微核形成、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、抗菌等作用。传统医学与现代研究均证实了菲律宾蛤仔的医疗保健作用，但是至今还没有将其开发成产品投入市场。 海洋是全球生命支持系统的一个重要组成部分，也是一种有助于实现社会、经济可持续发展的宝贵财富。向海洋进军, 开发利用海洋资源, 成为扩大人类生存空间、增加资源储备的重要出路。海洋生物技术作为一个全新的学科，已经成为21世纪海洋研究开发的重要领域。当前世界各国对开发海洋药物和功能特殊的海洋生活活性物质都给予了高度关注。浙江省海洋生物资源丰富，发展海洋经济具有得天独厚的条件，本项目研究为促进浙江省的十一五规划建设、加快实现海洋经济大省的步伐、成为“海上浙江”，打破资源限制具有重要意义；为促进功能性产品开发和海洋药物产业化的发展也具有重要的意义。此外，菲律宾蛤仔是我国重要的养殖贝类，将其进行药物保健品的研究开发，不但不会破坏生态平衡，还将会为它的高值化利用寻找新的出路。 超氧化物阴离子（O2-）、过氧化氢（H2O2）、过氧化自由基（ROO）和羟自由基（-OH）等自由基是生物体在新陈代谢过程中产生的中间产物，具有很强的氧化作用。正常生理情况下，机体内的抗氧化酶及非酶类因子可以将自由基有效地清除，从而维持自由基产生与消除的平衡状态，但自由基多数不稳定，在病理情况下，可以迅速引起脂质的过氧化。自由基通过造成细胞膜、DNA和蛋白活性的损伤，并与动脉硬化、脑卒中、阿尔茨海默病、肥胖、白内障以及肝脏疾病等多种人类疾病相关。人体细胞膜上存在多种脂质，尤其脑细胞膜含有许多易被氧化的多不饱和脂肪酸，脂质的过氧化通过破坏细胞膜而造成细胞损伤，导致人体疾病的发生。因此，对体内自由基的清除是防御机体疾病发生的一个重要途径。由于合成的抗氧化剂多数存在安全隐患，因此，目前关于天然抗氧化剂的开发和应用成为了研究热点。已有研究表明，来源于多种蛋白的活性肽都具有抗氧化活性，这些多肽

南极磷虾酶解多肽的抑菌活性

第32卷第4期 渔　业　科　学　进　展　Vol.32,N o.4 2011年8月 PROGRESS IN FISH ERY SCIENCES Aug.,2011 南极磷虾酶解多肽的抑菌活性 赵　玲1,2　曹　荣2　刘　淇2＊　魏玉西1＊　薛　勇2 (1青岛大学生物系,266071) (2中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛266071) 摘　要 选用复合酶酶解南极磷虾,对酶解多肽进行多肽含量及相对分子质量分布测定。采用滤纸片法筛选南极磷虾酶解多肽及各分级级分对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、四联微球菌、大肠杆菌、啤酒酵母和副溶血弧菌6种菌的抑菌活性。结果表明,该法所得的南极磷虾酶解多肽的含量达 81.44%,相对分子质量范围为254～10000;酶解多肽对金黄色葡萄球菌有明显的抑菌活性,且分级 级分Ⅲ(1.0×103

酶法多肽的作用

酶法多肽的作用 基本信息： 用生物酶催化蛋白质的方法称为酶法，用酶法获得的多肽叫做"酶法多肽"。酶法多肽一词最早起源于1996年，是由邹远东创立的酶法多肽。酶法多肽服食进入循环系统和人体组织后，能刺激机体的免疫系统发生特异性免疫反应。 酶法多肽的应用： 酶法多肽现最具代表性的产品是三九蛋白肽口服液，三九蛋白肽具有免疫调节和抗辐射的两大主要功能，适用于减缓各类癌症放化疗的毒副作用。例如针对化疗后呕吐，掉头发，白细胞低等放化疗后的毒副作用怎么办？免疫力低怎么增强？身体不好如何治疗?等问题提供了一个辅助恢复的作用。 放化疗手术后的副作用 ●免疫功能下降：化疗药物可损害患者的免疫系统，导致免疫功能缺陷或下降。 ●身体衰弱：化疗患者会出现周身疲乏无力、精神萎靡、出虚汗、嗜睡等不良反应。 ●炎症反应：发热、头晕、头痛、口干、口舌生疮等。还有可能引起静脉炎，膀胱炎等并发炎症。 ●器官毒性：有些化疗药大剂量可引起肾功能、心脏功能、肝功能损害。导致器官的衰竭和损伤，以及头发的大量脱落等等。 ●消化障碍：很多化疗药物通过刺激胃肠道粘膜都会引发食欲下降、饮食量减少、恶心、呕吐、腹胀、腹痛、腹泻或便秘等。 ●白细胞水平下降：放化疗的目的就是杀死癌细胞，但是它是“无差别攻击”，在杀死癌细胞的同时，白细胞也会死亡，当白细胞水平过低时，人就会死亡。 这些副作用也让广大医患人员意识到：单一的化疗并不能减轻病人的病痛，需要配合其他产品来减轻放化疗的副作用，从而才能延长病人的生命。 放化疗期间常见问题解答

1、放化疗后白细胞低怎么治疗? 可将专业的抗放化疗药物搭配三九蛋白肽一起服用。三九蛋白肽能促进放化疗病人白细胞增值，提升白血球含量，提高白细胞水平，同时增强病人免疫功能。此外，放化疗人群应多吃些富含蛋白质、铁、维生素的食物和水果蔬菜，如鱼类、瘦肉、大枣等。 2、放化疗后免疫力低下怎么办? 服用三九蛋白肽口服液能修复病人整体的身体内系统，从根本上增强体质，三九蛋白肽还是一种新型的肽类免疫剂，病人不需要消化就可直接吸收，为病人补充少而精的蛋白营养物质。 3、化疗后恶心呕吐怎么办? 请记住病人在接受放射或化学治疗前2小时内，应避免进食，以防止呕吐。服用三九蛋白肽可以修复病人的胃肠道功能，帮助恢复饮食情况，为病人提供可以直接吸收的营养蛋白物质，恢复病人的身体机能状况。饮食方面也应注意少食多餐，避免空腹或腹胀。 4、如何减轻放化疗副作用? 除了成分输血、骨髓移植等方式外，三九蛋白肽能够全方位的缓解放化疗病人的毒副作用，尤其在抗辐射，提高免疫力方面，效果更为明显。服用三九蛋白肽还能缩短病人放化疗间隔时间，减少病人放化疗期间的痛苦，延长病人寿命。 5、放化疗期间掉头发怎么办? 防治放化疗脱发的办法较多，如药物治疗和物理降温，饮食方面需注意多补充维生素E，在营养品方面可选择服用三九蛋白肽口服液，能减轻放化疗副作用，预防脱发。 三九蛋白肽抗放化疗的六大自然优势 1、科技酶法萃取，天然无激素 人体的一切生理活动都需要多肽的参与，三九蛋白肽是运用蛋白质工程的分离技术，对全卵蛋白粉进行分离，运用生物工程的酶解技术，将大分子蛋白质直接酶解成小分子活性多肽，富含人体极易吸收的小分子活性多肽及20多种氨基酸。 2、不需消化，直接吸收 三九蛋白肽是合成小肽，不需降解，直接吸收，进入renti血液循环系统、器官及细胞组织、迅速发挥其生理作用和生物学功能。

十种常见的酶制剂

十种常见的酶制剂 （1）纤维素酶 纤维素酶，是由多种水解酶组成的一个复杂酶系，自然界中很多真菌都能分泌纤维素酶。习惯上，将纤维素酶分成三类：C1酶、Cx酶和β葡糖苷酶。C1酶是对纤维素最初起作用的酶，破坏纤维素链的结晶结构。Cx酶是作用于经C1酶活化的纤维素、分解β-1，4-糖苷键的纤维素酶。β葡糖苷酶可以将纤维二糖、纤维三糖及其他低分子纤维糊精分解为葡萄糖。自1906年Seilliere在蜗牛的消化液中发现纤维素酶至今已有一百余年了,随着在工业上的广泛应用,特别是在纺织工业、能源工业上的应用,纤维素酶已成为最近十几年酶工程研究的一个焦点。近年来有关纤维素酶的基础研究,包括酶的氨基酸序列、基因的克隆与表达、酶蛋白的空间结构与功能,以及酶蛋白的基因调控等诸多方面都取得显著进展。到目前为止,登记在Swiss2Protein数据库的纤维素酶的氨基酸序列有649条,基因序列有433条。我国对纤维素酶的研究始于上世纪50年代,迄今已有50多年的历史。在纤维素酶的菌种开发、发酵培养、基因的克隆与表达,以及纤维素酶在纺织、能源等方面的应用都取得较大进展. 进入21世纪,利用纤维素酶转化纤维素物质产生葡萄糖进而发酵获得生物乙醇,可以避免对粮食作物的大量损耗,引起了各国政府和研究机构的重视,这其中的关键是纤维素酶的成本问题。由于纤维素酶发酵活力较低,因此其应用成本也较高。同时纤维素酶相比其他糖苷水解酶类,比活力至少要低1～2个数量级,如滤纸酶的比活力为1IU/mg左右,CMC的比活力约为 10IU/mg[7],从而造成酶的作用效率较低。这是两个限制纤维素酶应用的瓶颈问题,也是纤维素酶研究的热点与难点。目前通过传统的菌种诱变和基因工程技术可以较大幅度地提高目的蛋白的表达量,从而提高酶的发酵水平.还可以通过改善发酵条件和工艺,如采用固体发酵来 大幅度降低发酵成本。但是提高酶降解天然纤维素的效率则需要,深入研究纤维素酶的结构与功能以及作用方式,进而对其进行有效改造;或者通过筛选新的产酶菌种,发现具有开发潜 力的新酶源. （2）脂肪酶 脂肪酶即三酰基甘油酰基水解酶，它催化天然底物油脂水解，生成脂肪酸、甘油和甘油单酯或二酯。脂肪酶基本组成单位仅为氨基酸，通常只有一条多肽链。它的催化活性仅仅决定于它的蛋白质结构。脂肪酶是一类具有多种催化能力的酶，可以催化三酰甘油酯及其他一些水不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯化及酯类的逆向合成反应，除此之外还表现出其他一些酶的活性，如磷脂酶、溶血磷脂酶、胆固醇酯酶、酰肽水解酶活性等（Hara；Schmid）。脂肪酶不同活性的发挥依赖于反应体系的特点，如在油水界面促进酯水解，而在有机相中可以酶促合成和酯交换。脂肪酶是最早的发现的酶之一，早在１８３４年就发现了脂肪酶至今已有一百年的历史，１８３４年就发现兔胰脂肪酶；１８５４年发现胃脂肪酶活性；１８７１年发现植物种子脂肪酶；微生物脂肪酶则在上世纪初才发现。目前，工业生产用脂肪酶高产菌株主要通过诱 变获得。以黏质沙雷菌8000为初发菌株，用甲基硝基亚硝基胍诱变处理，得到高产突变菌株

多肽的制备及其活性研究进展

多肽的制备及其功能活性的研究进展 摘要：科学研究发现生物体内存在多种具有生理活性的多肽物质，它们具有不同的结构和功能活性。人体摄入的蛋白质经酶水解后，主要以肽的形式被消化吸收。几乎所有细胞都受多肽调节，它具有调节机体生理功能和为机体提供营养的双重功效。人们已从包括人、植物、动物在内的各种生物体中分离出各类活性多肽，并且对多肽的性质、制备方法、分离纯化方法、鉴定技术、功能活性及应用等方面进行了大量的研究，并取得了一定的成效。本文介绍了活性多肽的制备方法及其活性研究现状，对多肽的多种功能活性进行了介绍，概述了不同来源多肽的制备方法和其功能活性研究进展。 关键词：多肽；功能活性；分离纯化 前言 近年来，多肽在生物体内的生理功能受到越来越多的重视。大量研究结果表明，蛋白质由于其分子量大，结构复杂，摄人人体后不易被消化吸收，从而影响了其生理功能和营养价值的有效发挥。多肽是比蛋白质结构简单，分子量小，由2～16个氨基酸通过肽键连接的一类化合物，按氨基酸组成数目可人为分为短肽(2～5个氨基酸)，多肽(6～16个氨基酸)。多肽是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质。科学发现，几乎所有细胞都受多肽调节，如：细胞分化、神经激素递质调节、免疫调节等均与活性多肽密切相关，它具有调节机体生理功能和为机体提供营养的双重功效。由于多肽具有调节植物神经系统、活化细胞免疫机能、改善心血管功能和抗衰老等生理活性，这为

开发肽药物、肽类保健食品提供了理论依据。可见，进行多肽的研究和开发有着十分重要的研究意义和应用前景【1】。 一，多肽的制备方法 目前，国内外制备多肽的方法主要有：蛋白酶水解法、化学合成法、基因重组法、分离提取法等。酶法生产功能性多肽应用较为普遍[2]。龚吉军等人[3]利用茶籽蛋白酶酶解制备菜籽多肽，确定了最佳条件，此条件下氨基酸态氮生成率可达34．64％，制备的茶籽多肽对超氧自由基和羟基自由基具有强烈的清除作用；李书国等人[4]研究了酶法生产大豆多肽的加工工艺，分离得到纯净的酸性水解物溶液，水解率高达95％；班玉凤等人[5]研究了Alcalase水解大豆蛋白制备大豆蛋白寡肽的方法，确定了酶解的最佳条件，其水解液的水解度达到了24．1％；刘大川等[6]也利用碱性蛋白酶对富硒菜籽分离蛋白酶解制备蛋白肽，水解度达32．51％，制得的富硒菜籽蛋白肽分子量分布较好，几乎完全是小分子多肽，分子量均在1500D以下。以下是几种方法优缺点的概述。 1，化学水解：酸解，碱解， 酸解法水解度不易控制，容易使氨基酸遭到破坏；碱解法能使L-氨基酸形成D-氨基酸，可能存在营养和毒理方面有害的效应，对于食品多肽的生产不足取。所以这两种方法都很少被使用破坏L型氨基酸，2，酶法水解：能在一定条件下进行定位水解产生特定的肽，且易于控制水解进程，并且具有高度的专一性，一般不会导致营养方面的损失，也不会产生毒理学上的问题，同时酶作用具有特异性，可在温和

复酶多肽纳豆红曲的调整反应

复酶多肽纳豆红曲的调整反应 服用纳豆红曲会有一部分人群出现瞑眩反应！ 《中医饮食疗法》云：“不起暝眩，症状不愈”。是指人的体质或身体机能由不好转好（如：酸性体质变为健康弱酸体质），或人体在排除毒素时（如药品、食物中农药、人工添加剂、饲料中的荷尔蒙、抗生素、人体产生的废物等残留）身体的反应，这种瞑眩反应又称为排毒反应或者调整反应、好转反应，这是人体迈向健康无病过程中最关键的一环。瞑眩反应是暂时性的，不是每一个人都会发生，也不是只发生一次。有的出现强烈好转反应的人，有的是逐渐地在不同部位发生，这些都只是显示其本身健康情形不佳而已，表明身体在做大调整修复，所以大可不必过于惊慌，切勿因一时难受而放弃。 主要症状 1、无瞑眩反应。睡眠品质提升，精神旺盛、生理时钟变规律、心肺功能增强、免疫力强、感冒减少。气色、皮肤、眼神都在变好。请提醒服用者前后之不同。这就是身体比较健康，好转反应几乎察觉不到的人。 2、一般人刚开始注意全身保健时的瞑眩反应. 3、其他的瞑眩反应显示出可能的身体机能异常，或身体的自愈力正自动地修补调节该机能。 -- 较轻度的瞑眩反应：有头晕、倦怠、酸痛、肩硬、拉肚子（一天数次软便）。 -- 较严重的瞑眩反应：有头痛、发肿、发烧、湿疹、关节痛、血压上升、喘不上气、呕吐、食欲不振等。 调整反应具体表现列举如下： 1.全身任何部位生疮，有时会带脓（有细菌），皮肤出现红疹、疹子，有些会痒，有些不会痒：肝功能不良或体内废物过多、身体排出血液中的毒素、排出体内的湿气，过敏体质。

2.头痛头晕：改善头部供养，修复神经，溶解脑部血管内血脂或胆固醇，清理血管杂质，或是其本身有高、低血压的问题好转反应。 3.酸性体质：爱睡(白天也想睡)、身体困倦、喉乾舌燥、口臭、尿频、放屁多、夜睡有尿意。这都是体内环境改善的正常现象，20天左右恢复正常。 4.高血压者：会有头重如裹、眩晕头痛的现象，这是血液循环改善，但血管阻力未消失的缘故。有的会血压增高，这是修复血管壁、斑块脱落的反应。待巨噬细胞活化排出血管壁的中性脂肪后，血压就会下降。继续服用降血压药，但应每天量血压，注意其下降情形，随症减少降压药的剂量。此现象一般可持续1-2星期。 5.贫血者：会有轻微流鼻血，乏力加重。 6.胃炎（胃不好者）：胸脘发闷、发热的感觉、腹痛、食欲不佳、吃不下东西，可改为饭后服。 7.胃溃疡者：脘腹会有疼痛或闷闷的感觉，可改为饭后服用。8.胃下垂者：胃部觉得不适、想呕吐，可改为饭后服用。 9.肠炎者：有腹泻疼痛现象，依人而异。 13.糖尿病者：血糖有时会增高，个别手脚也有水肿的现象。这是肠道的吸收功能增强，在同样的饮食条件下，吸收进来的糖多了的缘故，一般不需做任何处理，2—3周后人体抗氧化能力增强，分解糖的能力增强，血糖自然下降。 14.青春痘者：初期会稍为增加，但很快就会消失。这是皮脂腺阻塞，停留在皮脂腺的脂肪或毒素被活化的细胞排除后，渐渐改善。二、三周后就好多了。 15.全身发热、发烧：重新调整免疫系统。 16.慢性支气管炎者：会有口干、呕吐、头昏、痰不易咳出等现象。 17.肺不好者：咳嗽时，痰增加，微带乳黄色。 18.鼻窦炎者：有时会增加排出鼻涕量且呈现浓稠状。19.皮肤过敏者:初期皮肤发痒加剧，几天后，即减缓，可采用间歇性食用。 20.神经官能症者:不能入睡出现兴奋现象,故夜晚不宜食用。 21.白血球过少者：觉得口干、多梦、乏力、胃不舒服等现象。 22.风湿痛者：患部会酸痛加重，但几天后，即消失。 23.痛风病者：会有乏力感或酸痛加重，小便混浊臊味加重，但几天后，即消失。 24.尿酸过多者：全身酸痛，依症状程度，出现不同的反应，这是体内尿酸正排出，改善后渐渐正常。 25.耳鸣：脑部血液循环不佳、耳部神经传导不良，改善以后就会渐渐消失。 26.昏睡：肝脏解毒功能不良，脑细胞抑制功能正在修复，恢复期需好好休息。随着细胞恢复，渐渐正常。

酶水解大豆多肽研究进展

食品酶学 课程论文 题目：酶水解大豆多肽的研究进展 组员： 指导教师：高向阳副教授 学院名称：食品学院专业名称：食品科学与安全 二零一四年六月三

酶水解大豆多肽研究进展 摘要：大豆多肽是大豆蛋白经水解所得的低聚肽混合物,其生产方式多种多样, 其中酶法生产大豆多肽以其特有的优势得到了广泛的关注.本文综述了水解大 豆复合酶的分类、方法、研究进展及应用。 关键词：大豆多肽酶水解三酶复合双酶复合 前言 关于酶法制备大豆多肽中酶的选择，在制备过程，正确选择和使用蛋白酶是关键。通常，可选用胰蛋白酶、胃蛋白酶等动物蛋白酶，也可使用菠萝和木瓜等植物蛋白酶，但目前应用较广主要是枯草杆菌1389、放线菌166、栖土曲霉3942、黑曲霉3350和地衣型芽孢杆菌2709等微生物蛋白酶。 目前酶水解大豆多肽主要有三种方式，一是单酶水解，二是双酶复合水解，三是三酶水解。单酶水解本身存在一定的缺陷，水解大豆多肽的效果未必能达到最优，于是引入了双酶复合水解，解决水解效率问题的同时解决单酶水解可能产生副产品或气味不佳的问题。另外，三酶复合能更大程度地优化水解效率。 1 蛋白酶 1.1 动物蛋白酶

来源于动物的蛋白酶一般是从动物的内脏中提取的，如胃蛋白酶主要采用联产工艺，将提取胃膜素留下的母液，经过一步处理提取出胃蛋白酶。可以说动物蛋白酶来源有限，加之提取工艺相对复杂，故价格一般比较高。例如，北京拜尔迪生技术有限公司销售的美国Sigma 公司生产的1 ∶10 000的胃蛋白酶价格为16 元/g , 美国Amresco公司生产的Try psin的胰蛋白酶(> 2 500U/mg)的价格则高达375 元/g。如此高的价格无疑限制了动物蛋白酶在大豆多肽工业生产上的应用。 1.2 植物蛋白酶 植物蛋白酶的原料比较丰富，从一些植物的成熟果实中就可以提取植物蛋白酶，生产工艺相对简单，价格低，例如北京拜尔迪生物技术有限公司销售的美国Sigma 公司生产的papain 木瓜蛋白酶(2 U/mg)的价格为12 元/g；国产的就更便宜，如北京玉林迈得生物技术有限公司销售的国产木瓜蛋白酶(300 U/mg)售价仅为6 元/g。 经过对酶的价格、酶解工艺条件及酶解产品特性的对比分析可发现，以微生物蛋白酶作为酶源是最为合适的。因为，以微生物蛋白酶作为酶源具有很多的优越性，如微生物种类繁多(自然界中存在的所有酶都可以在微生物中找到)、酶产量高(可通过人为改变微生物培养条件，加大目的酶的产量)、生长周期短(一般微生物的生长速度是农作物的500 倍，家畜的100 倍)、生产成本低(培养基原料大都比较廉价, 如麸皮、米糠、豆饼等)、生产易管理(目前多位自控发酵罐可根据需要随时改变培养条件),还可通过生物技术进行定向改造从而得到原本不能得到的酶或有特定效用的酶, 随着固定化酶技术的完善，微生物蛋白酶的应用成本必将得到进一步的降低，而水解效率则会得到大大的提升。

多肽类药物

多肽类药物 多肽和蛋白质类生物药物按药物的结构分类可分为：氨基酸及其衍生物类药物、多肽和蛋白质类药物、酶和辅酶类药物、核酸及其降解物和衍生物类药物、糖类药物、脂类药物、细胞生长因子和生物制品类药物。 结构分析 多肽的定性至少应包括氨基酸分析、序列分析及质谱分析。纯肽的氨基酸分析可提供该多肽的氨基酸组成和数量。序列分析则提供氨基酸残基的精确排列顺序。基于多种技术的质谱, 如快原子轰击、电喷雾、激光解吸, 经常用于提供多肽的相对分子量及其序列信息。肽谱是蛋白质或多肽通过酶解得到的肽片段经分离和分析所得到的“指纹图谱”。当多肽含有20 个以上的氨基酸残基时, 肽谱分析对多肽结构研究和特性鉴别具有重要意义。 2. 1 氨基酸分析 用于氨基酸分析的水解方法主要是酸水解, 同时辅以碱水解。酸水解中使用最广泛的是盐酸(一般浓度为6mo l?L )。多肽于110 ℃真空或充氮的安瓿瓶内水解10～ 24 h, 然后除去盐酸。水解过程中氨基酸遭破坏的程度与保温时间有线性关系, 因此该氨基酸在多肽中的真实含量可通过以不同的保温时间对相应时间的样品中该氨基酸的含量作图, 用外推法求出。高氨基酸分析仪的使用使氨基酸的分析越来越准确, 如W aters 公司的氨基酸分析系统的检出限已达100 fmo l。 2. 2 序列分析 氨基酸测序主要为化学法, 酶法也有一定的意义。化学法以Edman 降解法最为经典, 它对所有氨基酸残基具有普适性和近乎定量的高产率, 是近50年N 2端顺序分析技术的基础。Edman 机理的液相(旋转杯) 自动蛋白顺序分析仪在1967 年推出。近年来不断对其改进, 其灵敏度已达到可以对0. 1pmo l 的样品进行常规分析。 2. 3 质谱(mass spect romet ry,M S) 质谱以质量分析为基础, 可提供化合物的分子量以及一些结构信息。1980 年代以后发展了许多新的“软电离”技术, 使其在蛋白质多肽分析中的应用越来越广。目前应用较多的有原子轰击、电喷雾和基质辅助激光解吸质谱。质谱测序是对Edman 降解的一个很好补充, 它可对N 2端封闭的多肽进行测序; 并可以通过碰撞诱导断裂(C ID ) 得到部分至完全的序列信息后, 作出M S2肽谱, 这可对修饰的氨基酸残基定性, 并确证其位臵。而且质谱技术与分离技术如HPLC、HPCE 直接相连可相互验证, 同时还可对混合肽进行测序。 2. 3. 1 快原子轰击质谱(fast atom bombardmen t2mass spect romet ry, FAB2M S)FAB2M S 克服了传统质谱中样品必须加热气化的限制, 可对热不稳定、难挥发的蛋白质多肽进行分析。与其他质谱技术相比, FAB2M S 更适合于小分子多肽的检测[6 ]。FAB2M S 测定肽的氨基酸序列具有用量少、方便和快速的优点。一些寡肽, 特别是人工合成的有保护基的寡肽在遇到N 2端封闭不宜用氨基酸序列仪测定其结构的情况下, 有可能用少量样品采用FAB2M S 直接获得寡肽的分子量和氨基酸序列。俞振培等[7 ]用FAB2M S 对7 个带有不同保护基的3～5 肽成功地进行了氨基酸序列研究。串联FAB2M S 将第一次轰击得到的分子离子进行再一次惰性原子轰击, 使肽链在不同部位断裂, 从而得到一组片段的质谱信息, 使多肽测序得以实现 2. 3. 2 电喷雾质谱(elect ro sp ray ion izat ion2massspect romet ry, ES I2M S)

多肽类药物

多肽类药物

多肽类药物 多肽和蛋白质类生物药物按药物的结构分类可分为：氨基酸及其衍生物类药物、多肽和蛋白质类药物、酶和辅酶类药物、核酸及其降解物和衍生物类药物、糖类药物、脂类药物、细胞生长因子和生物制品类药物。 结构分析 多肽的定性至少应包括氨基酸分析、序列分析及质谱分析。纯肽的氨基酸分析可提供该多肽的氨基酸组成和数量。序列分析则提供氨基酸残基的精确排列顺序。基于多种技术的质谱, 如快原子轰击、电喷雾、激光解吸, 经常用于提供多肽的相对分子量及其序列信息。肽谱是蛋白质或

多肽通过酶解得到的肽片段经分离和分析所得到的“指纹图谱”。当多肽含有20 个以上的氨基酸残基时, 肽谱分析对多肽结构研究和特性鉴别具有重要意义。 2. 1 氨基酸分析 用于氨基酸分析的水解方法主要是酸水解, 同时辅以碱水解。酸水解中使用最广泛的是盐酸(一般浓度为6mo l?L )。多肽于110 ℃真空或充氮的安瓿瓶内水解10～24 h, 然后除去盐酸。水解过程中氨基酸遭破坏的程度与保温时间有线性关系, 因此该氨基酸在多肽中的真实含量可通过以不同的保温时间对相应时间的样品中该氨基酸的含量作图, 用外推法求出。高氨基酸分析仪的使用使氨基酸的分析越来越准确, 如W aters 公司的氨基酸分析系统的检出限已

达100 fmo l。 2. 2 序列分析 氨基酸测序主要为化学法, 酶法也有一定的意义。化学法以Edman 降解法最为经典, 它对所有氨基酸残基具有普适性和近乎定量的高产率, 是近50年N 2端顺序分析技术的基础。Edman 机理的液相(旋转杯) 自动蛋白顺序分析仪在1967 年推出。近年来不断对其改进, 其灵敏度已达到可以对0. 1pmo l 的样品进行常规分析。 2. 3 质谱(mass spect romet ry,M S) 质谱以质量分析为基础, 可提供化合物的分子量以及一些结构信息。1980 年代以后发展了许多新的“软电离”技术, 使其在蛋白质多肽分析中的应用越来越广。目前应用较多的有原子轰击、电喷雾和基质辅助激光解吸质谱。质谱测序

蛋白酶活性的测定

实验四蛋白酶活力得测定 一、实验目得 1、了解蛋白酶活力测定得原理; 2、掌握蛋白酶活力测定得方法。 二、实验原理 蛋白酶在一定条件下不仅能够水解蛋白质中得肽键,也能够水解酰胺键与酯键,因此可用蛋白质或人工合成得酰胺及酯类化合物作为底物来测定蛋白酶得活力、 本实验选用酪蛋白为底物,测定微生物蛋白酶水解肽键得活力。酪蛋白经蛋白酶作用后,降解成相对分子质量较小得肽与氨基酸,在反应混合物中加入三氯醋酸溶液,相对分子质量较大得蛋白质与肽就沉淀下来,相对分子质量较小得肽与氨基酸仍留在溶液中,溶解于三氯醋酸溶液中得肽得数量正比于酶得数量与反应时间。在２８0ｎm波长下测定溶液吸光度得增加,就可计算酶得活力。 三、实验试剂 ①微生物蛋白酶萃取液(0、01g/ml):称取１。0ｇ酶制剂,加１00ｍl蒸馏水搅拌30min,在4℃下离心分离后,将上层清夜置于冰箱中保存,使用前稀释一定倍数; ② 0。０2mol/L磷酸盐缓冲液(ｐH7.5); ③ 1％酪蛋白溶液:取1、0g酪蛋白,加10０ml 0。2mｏl/L磷酸盐缓冲液(PＨ7。５),加热并搅拌使它完全分散,然后置于冰箱中保存; ④ 5%三氯醋酸(TCA)溶液。 四、实验步骤 1、将5％TCA溶液与1％酪蛋白溶液在37℃下保温。 ２、取四支1５ml具塞试管,分别标上记号A1、Ａ０、Ｂ1与B０、在A１与A ０试管中各吸入0、20ml酶液,在Ｂ１与B0试管中各吸入0.４0ml酶液,分别用0.2mｏl/L磷酸盐缓冲液定容至２、00ml。在A0与B0试管中各吸入6.00ml5%三氯醋酸溶液,上述四支试管都置于37℃水浴中保温、 3、在各试管中吸入2。00mｌ1％酪蛋白溶液,在３7℃下保温10ｍin(准确计时)