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植物凋亡细胞的形态学观察

植物凋亡细胞的形态学观察
植物凋亡细胞的形态学观察

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植物凋亡细胞的形态学观察

实验二植物凋亡细胞的形态学观察一、实验目的 1、掌握细胞凋亡的概念、生物学意义。

2、掌握细胞凋亡与细胞坏死的区别。

3、掌握诱导和观察细胞凋亡的方法。

二、实验原理(一)概念凋亡(apoptosis) 一词来自希腊语, apo 指分离, ptosis 指落下。

凋亡的原意是枯萎的树叶或花瓣自然凋落。

1972 年澳大利亚昆士兰大学的 kerr 等人在许多组织中发现了一种散在的自发的细胞死亡现象,认为这是一种不同于细胞坏死的细胞生理性死亡,并首次提出了细胞凋亡的新概念。

多细胞生物在发生、发展过程中,为了保持正常的生理机能,一部分的细胞发生自发性细胞死亡,这种细胞死亡是被细胞内一系列相关的分子所调控,并伴随有典型的形态学改变,这种现象被称为细胞凋亡。

细胞坏死是细胞受到化学因素(如强酸、强碱、有毒物质)、物理因素(如热、辐射)和生物因素(如病原体)等环境因素的伤害,引起细胞死亡的现象。

细胞凋亡和细胞坏死的区别区别细胞凋亡细胞坏死起因生理或病理性病理性变化或剧烈损伤范围少数散在细胞大片组织或成群细胞细胞膜保持完整破损染色质凝聚在核膜下呈半月

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状呈絮状细胞器无明显变化肿胀、内质网崩解细胞体积固缩变小肿胀变大凋亡小体有无基因组 DNA 有控降解,电泳图谱呈梯状随机降解,电泳图谱呈涂抹状蛋白质合成有无调节过程受基因调控被动进行(二)生物学意义①清除无用的、多余的细胞。

无用的细胞大多在发育早期阶段即发生凋亡。

如果发育过程中某些细胞产生过多,也会发生凋亡。

例如,人胚胎肢芽发育过程中指(趾) 间组织,通过细胞凋亡机制被清除而形成指(趾) 间隙。

②清除受损、突变或衰老的细胞。

受损不能修复的细胞通过凋亡而被清除。

受病毒感染的细胞通过凋亡使DNA发生降解,整合于其中的病毒 DNA也随之破坏,阻止了病毒复制。

(三)主要特征凋亡细胞的主要特征是:

①染色质聚集、分块、位于核膜上,胞质凝缩,最后核断裂,细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体;②凋亡小体内有结构完整的细胞器,还有凝缩的染色体,可被邻近细胞吞噬消化,因始终有膜封闭,没有内溶物释放,故不会引起炎症;③凋亡细胞中仍需要合成一些蛋白质,但是在坏死细胞中 ATP 和蛋白质合成受阻或终止;④核酸内切酶活化,导致染色质 DNA 在核小体连接部位断裂,形成约 200bp 整数倍的核酸片段,凝胶电泳图谱呈梯状;

⑤凋亡通常是生理性变化,而细胞坏死是病理性变化。

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三、实验试剂与器材 1、洋葱内表皮细胞 2、染色液(改良苯酚品红染液):

原液 A:

取 3 克碱性品红溶于 100 毫升 70%酒精中,此液可以长期保存。

原液 B:

取 A 液 10 毫升加入 90 毫升 5%苯酚(即石炭酸)水溶液中(2 周内使用)。

原液 C:

取 B 液 55 毫升加入 6 毫升的冰醋酸和 6 毫升 38%的甲醛(可长期保存)。

染色液:

取 C 液 10-20 毫升,加入 90-80 毫升 45%醋酸和 1.5 克山梨醇。

3、 0.5M GaCl2

4、光学显微镜、电炉、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片四、实验步骤 1、材料准备取新鲜洋葱室温下于清水中培养数小时,使其活化。

2、洋葱鳞茎内表皮细胞凋亡的诱导从培养好的洋葱鳞茎上切取 1 cm2 左右的内表皮,分成三组:

第一组是正对照,为正常细胞;第二组是试验组,取 10 片洋葱内表皮,于 0. 5 M CaCl2 中培养 10hr;第三组是负对照,

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为煮沸 5 min 的坏死细胞。

3、细胞凋亡的染色与观察上述三组材料采用改良苯酚品红染液染色, 20 min 后制片。

光学显微镜下观察细胞的形态变化。

五、思考题 1、简述细胞凋亡的概念和生物学意义。

2、细胞凋亡和和细胞坏死有什么区别?

细胞生物学实验细胞凋亡观察

实验目的: 1.了解凋亡细胞的形态学特征,加深对于细胞凋亡现象及本质的理解。 2.了解并掌握细胞凋亡检测的方法和基本原理。 实验原理: 细胞凋亡时,出现一系列形态学变化,包括凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状,染色质的DNA出现缺口甚至断裂,出现DNA碎片,并逐渐形成凋亡小体等,经相应的染色后可以在普通光学显微镜和荧光显微镜下观察到这些变化。从而把凋亡的细胞和正常的细胞区分开来。

细胞凋亡是指细胞对环境的生理、病理性刺激信号、环境条件的变化或缓和性损伤产生的应答有序变化的死亡过程。细胞凋亡是一个主动过程,涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用,它并不是病理条件下的自体损伤,而是为更好地适应生存环境的一种死亡过程。 1.细胞凋亡与细胞程序性死亡: 细胞程序性死亡的概念是指一个多细胞生物体中某些细胞的死亡是个体发育中一个预定的,并受到严格程序控制的正常组成部分。例如蝌蚪变成青蛙,其变态过程中尾部的消失伴随大量细胞死亡,高等哺乳类动物指间蹼的消失、颚融合、视网膜发育以及免疫系统的正常发育都必须有细胞死亡的参与。这些形形色色的在机体发育过程中出现的细胞死亡有一个共同特征:即散在的、逐个地从正常组织中死亡和消失,机体没有炎症反应,而且这种死亡对整个机体的发育是有利和必须的。因此认为动物发育过程中存在的细胞程序性死亡是一个发育学概念,而细胞凋亡则是一个形态学的概念,但是一般认为这两个概念可以交互使用,具有同等意义。2.细胞凋亡与坏死的区别: 虽然凋亡与坏死的最终结果极为相似,但它们的过程与表现却有很大差别。坏死是细胞受到强烈理化或生物因素作用引起细胞无序变化的死亡过程。表现为细胞胀大、胞膜破裂、细胞内容物外溢、核变化较慢、DNA降解不充分、有局部严重的炎症反应。坏死是一个被动的过程,其细胞及组织的变化与凋亡有明显的不同。

淋巴细胞分离和细胞凋亡诱导及形态学观察

细胞生物学实验报告 淋巴细胞分离和细胞凋亡诱导及形态学观察lymphocyte isolation and morphological observation of apoptosis induction 2012年6月2日

淋巴细胞分离和细胞凋亡诱导及形态学观察 lymphocyte isolation and morphological observation of apoptosis induction 摘要:目的了解细胞凋亡的原理,掌握离体诱导细胞凋亡的方法,及用普通光学显微镜和荧光显微镜观察凋亡细胞的形态学变化,并从观察结果初步推断和识别凋亡细胞具体阶段。方法实验所用Hoechst 33342/PI双染检测细胞凋亡、Giemsa染色。结果实验结束后得到了染色的结果以及照片。结论所提取的淋巴细胞发生凋亡。 Abstract:Objective Understand the principles of cell apoptosis, master the methods of cell apoptosis induced by in vitro, and by ordinary optical microscopy and fluorescence microscopy observation of morphological changes of apoptotic cells and preliminary inferred from observations and identifying apoptotic cells specific stages. Method Experimental method used in,Hoechst 33342/PI double dye test and the Giemsa stain. Results Be dyed after the end of the experiment results and photos. Conclusions The extraction of lymphocyte apoptosis. 关键词:细胞凋亡、Giemsa染色、Hoechst 33342/PI双染。 Keyword:cell apoptosis、Giemsa stain、Hoechst 33342/PI double staining 1.实验原理 1.1 关于淋巴细胞的分离 外周血中淋巴细胞比重约为1.070,而红细胞和粒细胞的比重较大,为1.902左右。因此,利用相对密度为1.077±0.002的淋巴细胞分离液(称为分层液)离心,可使一定比重的细胞按相应密度梯度分布(使比重中较大的红细胞和粒细胞沉于管底,淋巴细胞浮于分层液与血浆的界面上),从而将淋巴细胞分离出来。 1.2 关于细胞凋亡 细胞凋亡又称编程性死亡或程序性死亡。细胞凋亡是多细胞生物体在发育过程中或在某些环境因子的作用下发生的受基因调控的主动的死亡方式。细胞凋亡对于多细胞生物个体的正常发育、保持自稳平衡、抵御外界各种因素的干扰及多种病理过程具有极其重要的意义,起着非常重要的作用。细胞凋亡是多种生理、病理因子参与的由凋亡相关基因启动的细胞程序性死亡过程,其中由氧应激造成大量活性氧(reactive oxygen species, ROS)的产生以及继发性细胞损伤过程在细胞凋亡中起着重要作用,如电离辐射或紫外线照射产生大量H2O2、OH-等。 细胞凋亡的诱导因子包括三大类: 1.物理因子:包括射线、较温和的温度刺激(如热激或冷激)等; 2.化学因子:包括活性氧基团和分子、重金属离子等; 3.生物因子:肿瘤坏死因子、生物毒素、抗肿瘤药物、DNA和蛋白质合成的抑制剂等。 细胞凋亡的主要特征包括: 1.染色质凝集、质膜出芽、核裂解及凋亡小体的形成。 2.DNA特异性降解成200bp或其整数倍片断,通过凝胶电泳形成梯状条带,称为DNA Ladder。 3.由于DNA特异性降解而产生大量3’-OH末端,可被末端脱氧核糖核苷酸移换酶介导的dUTP 缺口末端原位标记法(TUNEL)标记,从而产生亮绿色荧光等。

观察植物细胞实验设计

《观察植物细胞》实验教学设计 一、设计理念: 以人为本,以人的发展为本的新课程理念下,充分发挥学生的主体作用,努力体现现代学习方式的自主性、合作性、体验性和问题性。引导学生能够从多角度、多层次、比较全面地认识植物细胞。增强学生的动手能力,观察能力,绘图能力等。 二、教材分析: 1、教学目标: ①认识玻片标本,学会制作临时装片的基本方法,使用显微镜观察自己制作的临时装片, ②认识并阐明植物细胞的基本结构,初步学会绘制植物细胞结构简图。 2、教学重点: ①植物细胞结构。②制作临时装片 3、教学难点: ①绘制植物细胞结构简图。②认识细胞是立体的。 4、教学用具:相关挂图。 5、教学方法:观察法、实验法和讲解法相结合。 6、课时划分:1课时 三、教学过程 引言:除病毒外,生物都是由细胞构成的,细胞是生物体的结构和功能有基本单位,细胞具有什么样的结构的功能? (一)、玻片标本 互动1:玻片标本制作时有何要求? 1、制作玻片标本的材料:薄而透明。 互动2:引导学生观察玻片标本,提问:常用的玻片标本有哪些类型? 2、种类: ⑴依据制作方法: 切片:用从生物体上切取的薄片制成的。 涂片:液体的生物材料经过涂抹制成的。 装片:用从生物体上撕下或挑取的少量材料制成的。 ⑵依据保存时间: 永久性玻片标本:可长期保存。 临时性玻片标本:不能长期保存。 互动3:如何制作玻片标本? (二)、临时装片的制作 1、准备: 擦:必须将载玻片、盖玻片擦拭干净,目的是避免杂质出现于视野中。 滴:滴加清水时应适量:过多,水会溢出;过少,制片容易产生气泡。 2、制片: 撕:撕取少量的洋葱表皮,不要将叶肉一起带下来。 展:充分将洋葱表皮展开,避免重叠。 盖:盖盖玻片时用力均匀,避免产生气泡。 3、染色:

观察植物细胞的结构教学设计

观察植物细胞的结构(一)教学设计 一、教材分析: 上节课练习了显微镜的使用,只有少数同学在教室里观察到了显微镜下的细胞。在学生初步具备使用显微镜技能的时候,一定要满足他们观察徽小细胞的愿望,为其主动探究学习作准备。观察植物细胞的结构是上初中以来的第一次全体同学都参加的具体操作实验,要保证实验的成功,让他们有成就感。为了保证实验的成功,本节课分两课时安排,第一课时在教室学习本实验的操作步骤和注意事项,第二课时再让同学们进行分组实验。 二、教学目标: 1、学会制作临时装片的基本方法。 2、认识植物细胞的基本结构,练习绘制植物细胞的结构简图。 三、教学重点和难点: 重点:制作临时装片。 难点:归纳植物细胞结构。 四、教学过程: (一)新课导入: 复习显微镜的使用步骤,引入新课. (二)讲授新课: 1、阅读课本第42页“实验”上方的文字,完成导学案第17页第2题。 常用的玻片标本有以下三种: 切片——用从生物体上切取的薄片制成。 涂片——用液体的生物材料经过涂抹制成。 装片——用从生物体上撕下或挑取的少量材料制成。 (有的生物非常微小,也可以直接做成装片)。 这些玻片可以做成永久的(可长期保存)或临时的(不能长期保存)。 教师展示玻片标本。 2、阅读教材42-43页,实验,了解制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片的步骤。看书本P42的材料用具,看看哪些材料不明白它们的作用,举手问老师。 (介绍稀碘液的作用是染色,载玻片作用是托载标本的玻璃片,盖玻片的作用是覆盖标本的玻璃片)。 教师演示制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片方法步骤:(用一个字总结各步骤) 〔1〕(擦)用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净。〔2〕、(滴)把载玻片放在实验台上,用滴管在载玻片的中央滴一滴清水。〔3〕、(取、展)用镊子把洋葱鳞片叶内侧撕取一小块透明薄膜——内表皮,把撕下的内表皮浸入载皮片上的水滴中,用镊子把它展平。〔4〕、(盖)用镊子夹起盖皮片,使它的一边先接触载玻片上的水滴,然后缓缓地放下,盖在要观察的材料上,这样才能避免盖玻片下面出现所泡而影响观察。〔5〕、(滴)把一滴稀碘液滴在盖玻片的一侧。〔6〕、(吸)用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使染液浸润标本的全部。 学生完成导学案17页第3题,教师巡视,了解学习情况。 3、植物细胞结构模式。 学生阅读教材45页,在作业本上临募植物细胞结构模式图,识记植物细胞各部分结构与功能。学生合作学习,完成导学案第18页第3题,教师巡视。

细胞凋亡检测方法

细胞凋亡检测方法 一、细胞凋亡的形态学检测 1 光学显微镜和倒置显微镜 (1)未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,全面皱缩,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体,凋亡小体为数个圆形小体围绕在细胞周围。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。 (2)染色细胞: 姬姆萨(Giemsa)染色、瑞氏染色等:正常细胞核色泽均一;凋亡细胞染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态;坏死细胞染色浅或没染上颜色。 苏木素-伊红(HE)染色:细胞核固缩碎裂、呈蓝黑色、胞浆呈淡红色(凋亡细胞),正常细胞核呈均匀淡蓝色或蓝色,坏死细胞核呈很淡的蓝色或蓝色消失。 2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的DNA特异性染料有:Hoechst 33342,Hoechst 33258,DAPI。三种染料与DNA 的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。 Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,能进入正常细胞膜而对细胞没有太大细胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡细胞中的荧光强度要比正常细胞中要高。 DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色。 PI和Hoechst33342双标:PI、Hoechst33342均可与细胞核DNA(或RNA)结合。但PI不能通过正常细胞膜,Hoechst则为膜通透性荧光染料,故细胞在处于坏死或晚期调

亡时细胞膜被破坏,这时可为PI着红色。正常细胞和中早期调亡细胞均可被Hoechst着色,但是正常细胞核的Hoechst着色的形态呈圆形,淡兰色,内有较深的兰色颗粒;而调亡细胞的核由于浓集而呈亮兰色,或核呈分叶,碎片状,边集。故PI着色为坏死细胞;亮兰色,或核呈分叶状,边集的Hoechst着色的为调亡细胞。 凋亡细胞体积变小,细胞质浓缩。细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;Ⅱb期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体(图1)。 3 透射电子显微镜观察 凋亡细胞体积变小,细胞质浓缩。凋亡Ⅰ期(pro-apoptosis nuclei)的细胞核内染色质高度盘绕,出现许多称为气穴现象(cavitations)的空泡结构(图2);Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;细胞凋亡的晚期,细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体。 二、磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin V法) 磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜内侧,但在细胞凋亡早期,PS可从细胞膜内侧翻转到细胞膜表面,暴露在细胞外环境中。磷脂酰丝氨酸的转位发生在凋亡早期阶段,先于细胞核的改变、DNA断裂、细胞膜起泡。体内的吞噬细胞可通过识别

观察植物细胞的结构

观察植物细胞的结构 教学目标: 1、学会制作临时装片的基本方法。 2、观察自己制作的临时装片,阐明植物细胞的基本结构,练习绘制植物细胞的 结构简图。 教学重点: 制作临时装片,归纳植物细胞结构。 教学难点: 以胆大心细的心理素质,成功地制作临时装片 以实事求是的科学态度,练习绘制植物细胞结构简图。 教学过程: 一、进入实验室先填好记录本,回实验实验过程。(取镜与安放,对光,观察)。 二、迅速拿出显微镜,对好光。 三、如果把一根头发、一张厚纸放在物镜下面,看看能否看清楚它们的结构? (不能)必须把玻片弄到薄而透明。为了做到这一点,需要对所观察的材料进行处理,制成玻片标本,然后进行观察。常用的玻片标本有以下三种: 切片——用从生物体上切取的薄片制成。 涂片——用液体的生物材料经过涂抹制成。 装片——用从生物体上撕下或挑取的少量材料制成。 (有的生物非常微小,也可以直接做成装片)。 这些玻片可以做成永久的(可长期保存)或临时的(不能长期保存)。 四、看书本P42的材料用具,看看哪些材料不明白它们的作用,举手问老师。 (介绍稀碘液的作用是染色,载玻片作用是托载标本的玻璃片,盖玻片的作用是覆盖标本的玻璃片)。 五、P43的制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片方法步骤:(用一个字总结各步 骤) 1、用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净。(擦) 2、把载玻片放在实验台上,用滴管在载玻片的中央滴一滴清水。(滴) 3、用镊子把洋葱鳞片叶内侧撕取一小块透明薄膜——内表皮,把撕下的内 表皮浸入载皮片上的水滴中,用镊子把它展平。(取、展) 4、用镊子夹起盖皮片,使它的一边先接触载玻片上的水滴,然后缓缓地放 下,盖在要观察的材料上,这样才能避免盖玻片下面出现所泡而影响观 察。(盖) 5、把一滴稀碘液滴在洋葱内表皮上,使染液浸润标本的全部。(染) 6、先用低倍镜观察,再用高倍镜观察。把高倍镜下看到的物像用铅笔画在 报告册P14第6题上。

观察植物细胞的教案

第二节植物细胞 课时:2课时课型:实验课 一教学目标 1、了解标本的类型 2、认识植物细胞的基本结构 3、使用显微镜观察植物细胞的基本结构,学会绘制植物细胞结构简图 4、学习制作植物细胞临时装片的基本方法。 二、教学重点:锻炼学生的动手能力, 学会制作临时装片,并知道植物细胞的各个结构和功能. 三、教学难点:在引导学生实验的过程中对装片的制作过程的控制, 四、教学过程 1、引入 2、老师板书课题,出示目标。 3、引导学生自学(6分钟) 自学内容:A玻片标本的种类有那些?怎么样才能看清楚。 B实验的过程中应该注意那些问题,及实验步骤。 C 植物细胞的各个结构和功能是什么? 4、自学方法 在学生自学的过程中,老师适时的巡视,并给学生以点拨。

5、学生自习完后,教师应该通过各种方式加以总结:首先以提问思考的形式让学生明白:我们使用的标本必须薄而透明。其次让学生了解标本的种类:装片、涂片、切片。(可以通过学生总结的形式) 6、学生实验:实验的过程中,教师应该引导学生做实验,分析实验的现象,指导学生进行生物作图,对实验的结果进行分析得与失。老师最后总结。 7、让学生明确植物细胞的各个结构和功能 五、检测学习的效果 1、制作临时装片时,染色会对细胞产生什么影响?在什么情况下应该使用不经过染色的临时装片? 2、怎样区别显微镜视野中的细胞和气泡? 3、挤压水果可以得到果汁,这些汁液主要来自细胞结构的哪一部分? 4、为了使临时装片内不产生气泡或少产生气泡,盖盖玻片时应该() 5、细胞的结构由外向里依次是() 6、在观察临时装片时,如在视野中看到中央发亮、周边黑暗的圆圈,该圆圈可能是() 7、植物细胞中,具有支持和保护细胞作用的结构是() 8、清洗青菜时,冷水没有变成青菜汤,而把青菜放入沸水中煮一下,就变成了青菜汤,这是因为活细胞中的某种结构阻止了物质外流,则这种结构是()

植物凋亡细胞的形态学观察

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 植物凋亡细胞的形态学观察 实验二植物凋亡细胞的形态学观察一、实验目的 1、掌握细胞凋亡的概念、生物学意义。 2、掌握细胞凋亡与细胞坏死的区别。 3、掌握诱导和观察细胞凋亡的方法。 二、实验原理(一)概念凋亡(apoptosis) 一词来自希腊语, apo 指分离, ptosis 指落下。 凋亡的原意是枯萎的树叶或花瓣自然凋落。 1972 年澳大利亚昆士兰大学的 kerr 等人在许多组织中发现了一种散在的自发的细胞死亡现象,认为这是一种不同于细胞坏死的细胞生理性死亡,并首次提出了细胞凋亡的新概念。 多细胞生物在发生、发展过程中,为了保持正常的生理机能,一部分的细胞发生自发性细胞死亡,这种细胞死亡是被细胞内一系列相关的分子所调控,并伴随有典型的形态学改变,这种现象被称为细胞凋亡。 细胞坏死是细胞受到化学因素(如强酸、强碱、有毒物质)、物理因素(如热、辐射)和生物因素(如病原体)等环境因素的伤害,引起细胞死亡的现象。 细胞凋亡和细胞坏死的区别区别细胞凋亡细胞坏死起因生理或病理性病理性变化或剧烈损伤范围少数散在细胞大片组织或成群细胞细胞膜保持完整破损染色质凝聚在核膜下呈半月 1 / 4

状呈絮状细胞器无明显变化肿胀、内质网崩解细胞体积固缩变小肿胀变大凋亡小体有无基因组 DNA 有控降解,电泳图谱呈梯状随机降解,电泳图谱呈涂抹状蛋白质合成有无调节过程受基因调控被动进行(二)生物学意义①清除无用的、多余的细胞。 无用的细胞大多在发育早期阶段即发生凋亡。 如果发育过程中某些细胞产生过多,也会发生凋亡。 例如,人胚胎肢芽发育过程中指(趾) 间组织,通过细胞凋亡机制被清除而形成指(趾) 间隙。 ②清除受损、突变或衰老的细胞。 受损不能修复的细胞通过凋亡而被清除。 受病毒感染的细胞通过凋亡使DNA发生降解,整合于其中的病毒 DNA也随之破坏,阻止了病毒复制。 (三)主要特征凋亡细胞的主要特征是: ①染色质聚集、分块、位于核膜上,胞质凝缩,最后核断裂,细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体;②凋亡小体内有结构完整的细胞器,还有凝缩的染色体,可被邻近细胞吞噬消化,因始终有膜封闭,没有内溶物释放,故不会引起炎症;③凋亡细胞中仍需要合成一些蛋白质,但是在坏死细胞中 ATP 和蛋白质合成受阻或终止;④核酸内切酶活化,导致染色质 DNA 在核小体连接部位断裂,形成约 200bp 整数倍的核酸片段,凝胶电泳图谱呈梯状; ⑤凋亡通常是生理性变化,而细胞坏死是病理性变化。

细胞凋亡的几种检测方法

细胞凋亡的几种检测方法 1、形态学观察方法 (1)HE(苏木精—伊红染色法)染色、光镜观察:凋亡细胞呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 (2)丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。 (3)台盼蓝染色:如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性,区别坏死细胞有一定的帮助。

(4)透射电镜观察:可见凋亡细胞表面微绒毛消失,核染色质固缩、边集,常呈新月形,核膜皱褶,胞质紧实,细胞器集中,胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和凋亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。 2、DNA凝胶电泳 细胞发生凋亡或坏死,其细胞DNA均发生断裂,细胞内小分子量DNA片断增加,高分子DNA减少,胞质内出现DNA片断。但凋亡细胞DNA断裂点均有规律的发生在核小体之间,出现180-200bpDNA片断,而坏死细胞的DNA断裂点为无特征的杂乱片断,利用此特征可以确定群体细胞的死亡,并可与坏死细胞区别。正常活细胞DNA 电泳出现阶梯状(LADDER)条带;坏死细胞DNA电泳类似血抹片时的连续性条带 3、酶联免疫吸附法(ELISA)核小体测定

凋亡细胞的DNA断裂使细胞质内出现核小体。核小体由组蛋白及其伴随的DNA片断组成,可由ELISA法检测。 检测步骤 1、将凋亡细胞裂解后高速离心,其上清液中含有核小体; 2、在微定量板上吸附组蛋白体’ 3、加上清夜使抗组蛋白抗体与核小体上的组蛋白结合‘ 4、加辣过氧化物酶标记的抗DNA抗体使之与核小体上的DNA结合’ 4、加酶的底物,测光吸收制。 用途 该法敏感性高,可检测5*100/ml个凋亡细胞。可用于人、大鼠、小鼠的凋亡检测。该法不需要特殊仪器,

生物实验报告观察植物细胞的有丝分裂》

精选范文:生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》(共2篇)一、实验目的1.观察植 物细胞有丝分裂的过程,识别有丝分裂的不同时期。2.初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片 的技能。3.初步掌握绘制生物图的方法。二、实验原理在植物体中,有丝分裂常见于根尖、 茎尖等分生区细胞,高等植物细胞有丝分裂的过程,分为分裂间期和分裂期的前期、中期、 后期、末期。可以用高倍显微镜观察植物细胞的有丝分裂的过程,根据各个时期细胞内染色 体(或染色质)的变化情况,识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期,细胞核内的染色体容易 被碱性染料着色。三、材料用具洋葱根尖、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、培养皿、 铅笔、质量分数为15%的盐酸、体积分数为95%的酒精、质量分数为ml的龙胆紫(或紫药水) 四、实验过程(见书p39) 1.洋葱根尖的培养(提前3—4天) 2.解离:5min 3.漂洗: 10min 4.染色: 5min 5.制片 6.镜检五、注意 1.解离充分是实验成功的必备条件。 解离充分,组织才能分散,细胞也不会重叠。 2 .漂洗时间一定要足够,否则细胞染不上色。 3 .染色时,染液的浓度和染色时间必须掌握好。特别是染色不能过深,否则镜下一片紫色, 无法观察。六、讨论1.制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键是什么谈谈你自己的体会。物理 实验报告 ·化学实验报告 ·生物实验报告 ·实验报告格式 ·实验报告模板2.在观察清楚有 丝分裂各个时期的细胞以后,绘出洋葱根尖细胞有丝分裂的简图,并标明时期。 [生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》(共2篇)]篇一:生物实验报告观察植物细胞的 有丝分裂实验报告 生物实验报告《观察植物细 胞的有丝分裂》_实验报告 [生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》(共2篇)] 一、实验目的 1.观察植物细胞有丝分裂的过程,识别有丝分裂的不同时期。2.初步掌握制作 洋葱根尖有丝分裂装片的技能。3.初步掌握绘制生物图的方法。 二、实 验原理在植物体中,有丝分裂常见于根尖、茎尖等分生区细胞,高等植物细胞有丝分裂的过 程,分为分 一、实 验目的 1.观 察 植 物 细 胞 有 丝

观察植物细胞的有丝分裂

实验五观察植物细胞的有丝分裂 一、目的要求 1.观察植物细胞有丝分裂的过程,识别有丝分裂的不同时期。 2.初步掌握制作洋葱根尖有丝分裂装片的技术。 3.初步掌握绘制生物图的方法。 二、材料用具试剂 1.材料:洋葱(可以用蒜、葱代替)。 2.用具:显微镜/载玻片/盖玻片/玻璃皿3个/镊子/剪刀/滴管。 3.试剂:质量分数为15%HCl、体积分数为95%的C2H5OH溶液、质量浓度为0.01g/mL龙胆紫溶液(or 醋酸洋红液)。 三、重点难点 重点:有丝分裂过程中各个期的特征、各期图形的辨认,有丝分裂实验过程。 难点:观察有丝分裂实验过程中应注意的问题。 四、实验步骤 1.洋葱根尖的培养和取材(上午11:00) 2.制装片(解离→漂洗→染色→制片) 3.观察 ①低倍镜找分生区; ②高倍镜观察各个时期。 五、结论: 在显微镜的一个视野中看到的细胞,多数处于细胞有丝分裂的间期,因为在一个细胞周期中,间期所占的时间占整个细胞周期的90%~95%,时间与细胞数目成正比。另外,在一个视野中,往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞,可以慢慢地移动装片,从邻近的分生区细胞中寻找。 六、注意事项 (1)培养产生洋葱根尖的材料是洋葱鳞茎。鳞茎底部接触水,不能离开水,也不能被水淹。一般一天至少一次,还要提供适宜的温度。 (2)剪取洋葱根尖材料时,应该在洋葱一天之中分裂最活跃的时间,一般在上午1l点左右。如果因气温影响或不在上述时间做实验的话,可以在细胞有丝分裂最盛时取材,放人盛有固定液的培养皿中固定,即浸泡半天到一天。固定后用70%乙醇冲洗几次,再放人盛有70%乙醇的小广口瓶中保存。注意要等根尖长到1~5cm时才能切取,而切取的洋葱根尖长度是2~3mm。 (3)根尖培养好以后,装片制作是否成功,关键的步骤是解离。解离不充分,细胞重叠;解离过度,细胞会腐烂,所以解离要适度。 (4)漂洗的目的是洗去根中多余的解离液。如果不把多余的解离液洗去,一方面会影响染色效果,因为解离液中含HCl,而用染色的染料呈碱性;另一方面还会腐蚀显微镜的镜头。(5)染色时,染色液的浓度和染色时间必须掌握好。特别是染色不能过深,否则镜下一片紫色,无法观察。也不能过浅,否则染色质和染色体的形态和数目不易辨清。 (6)制片时,一方面要用镊子把洋葱根尖弄碎,另一方面要压片,这样可以使细胞分散开来。压片时,在盖玻片上再加一片载玻片的目的,一是避免压碎和污染盖玻片。二是使压力均匀,从而使组织细胞均匀分散。同时用力必须恰当,过重时会将组织压烂,过轻则细胞未分散开,二者都将影响观察。

制作并观察植物细胞临时装片 实验报告

制作并观察植物细胞临时装片实验报告目的要求: 1.制作植物细胞临时装片,学习制作临时装片的基本方法。 2.认识植物细胞的基本结构。 3.练习画细胞结构简图 材料用具:洋葱鳞片叶,镊子,刀片,载玻片,盖玻片,清水,稀碘液,滴管,纱布,吸水纸,显微镜方法步骤: 制作洋葱表皮细胞的临时装片并观察: 1、准备: (1)用洁净的卫生纸把载玻片和盖玻片擦拭干净,把载玻片平放在实验台上,用滴管在载玻片的中央滴一滴清水。 (2)用刀片在洋葱鳞片内表皮上,轻轻划出边长为2㎜~5㎜的小方格;然后用镊子从小方格内的内侧撕取一小块透明表皮,并将其浸入载玻片的水滴,用镊子将表皮展平。 (3)用镊子夹起盖玻片,使它的一边先接触载玻片上的水滴中,然后轻轻地盖在表皮上,避免盖玻片下面有气泡。 2、染色: (1)用滴管在盖玻片的一侧滴一滴稀碘液。 (2)用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使染液浸润到整个标本。 3、观察洋葱的表皮细胞: (1)取显微镜(右手握住镜臂,左手托住镜座,将显微镜放在实验台距边缘7厘米左右,略偏左)并安装好目镜和物镜。 (2)转动转换器使低倍镜对准通光孔(物镜前端与载物台保持2厘米距离)。 (3)调节光圈和反光镜,通过目镜能够看到白亮的圆形视野。 (4)将装片放到载物台上,用压片夹压住,标本正对通光孔中心。 (5)转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片为止(注意:眼睛一定看着物镜)。 (6)两眼同时睁开,用一只眼看目镜,另一只眼随时准备画图,同时逆时针方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升直到看清物像为止,再略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。 (7)在显微镜中看到的表皮细胞结构特点如下:细胞整齐排列;每个细胞近似长方体;有明显的细胞壁、细胞质、细胞核和液泡等结构。 实验结果:

细胞凋亡的形态学检测1

荧光显微镜下检测细胞凋亡 作者:2010级生物技术许春燕 摘要: 细胞凋亡是生命科学目前的一个研究热点.检测细胞凋亡的方法和技术取得了很大的进步.从早期细胞内某些基因转录表达的变化、代谢生理的变化,到晚期细胞形态的确诊、细胞内代谢物质的转变,从定性、定量到原位定性定量等,都发展了相对成熟的检测技术.相比于其他检测方法,荧光染色法检测细胞凋亡具有经济、快速、敏感等特点。 关键词:细胞凋亡荧光显微镜观察法 正文: 下面是荧光显微镜下检测细胞凋亡的四种方法: 1、吖啶橙染色法 用吖啶橙溴化乙锭混合染色法。吖啶橙对DNA有特异的亲和力。结果判定。荧光显微镜下,可见到活细胞核染色质呈现均匀分布的黄绿色荧光,胞质呈橘黄色或者橘红色荧光,出现凋亡细胞时,核染色质的黄绿色荧光浓聚在核膜内侧,凋亡细胞核的特征性形态可被清晰地辨认。坏死细胞的细胞质内黄绿色或者橘黄色荧光减弱,有的甚至消失。具体方法如下: (1).制备活细胞悬液,浓度约为107/ml。 (2).取95μl的细胞悬液,加5μl的吖啶橙贮存液混匀。(3).吸一滴混合液点洁净玻片上,直接用盖玻片封片。

(4).荧光显微镜选用激发滤片BG 12或BV等,阻断滤片用515nm 或。对体外培养的活细胞经荧光素处理后,可在荧光显微镜下直接观察细胞形态的改变. 结果;用吖啶橙染色后正常细胞核DNA呈黄色或黄绿色的均匀荧光,细胞质和核仁的RNA呈桔黄或桔红色荧光;凋亡细胞的细胞核或细胞质内有致密浓染的黄绿色荧光,甚至有黄绿色碎片;坏死细胞的细胞质内的荧光较弱或无。 2、Hoechst33258染色法 Hoechst33258能够穿过完整的细胞膜,所以可以用来染活细胞,在活细胞中DNA聚AT序列富集区域的小沟处与DNA结合。在荧光显微镜紫外光激发时,Hoechst-DNA发出亮蓝色荧光。具体方法如下: (1).原代细胞培养,细胞学涂片或细胞甩片机制备的单细胞片。 (2).细胞固定液4℃固定5min。 (3).蒸馏水稍洗后,点加Hoechst33258染色液,10min。 (4).蒸馏水洗片后,用滤纸沾去多余液体。 (5).封片剂封片后荧光显微镜观察。 结果:用Hoechst 33258染色后活细胞核呈弥散均匀的荧光,凋亡细胞内可见浓染致密的颗粒状荧光或块状荧光.该方法方便易行,应用较多,但定量和定性方面较差。故在实际应用中极少被单独使用。 3、Hoechst33342染色法

植物细胞实验报告_1

植物细胞实验报告 篇一:观察植物细胞的实验报告 七年级生物实验报告 篇二:观察植物细胞生物实验报告单 生物实验报告单 篇三:制作并观察植物细胞临时装片实验报告 制作并观察植物细胞临时装片实验报告目的要求: 1. 制作植物细胞临时装片,学习制作临时装片的基本方法。 2. 认识植物细胞的基本结构。 3. 练习画细胞结构简图 材料用具:洋葱鳞片叶,镊子,刀片,载玻片,盖玻片,清水,稀碘液,滴管,纱布,吸水纸,显微镜方法步骤:制作洋葱表皮细胞的临时装片并观察: 1、准备: (1)用洁净的卫生纸把载玻片和盖玻片擦拭干净,把载玻片平放在实验台上,用滴管在载玻片的中央滴一滴清水。 (2)用刀片在洋葱鳞片内表皮上,轻轻划出边长为2㎜~5㎜的小方格;然后用镊子从小方格内的内侧撕取一小块透明表皮,并将其浸入载玻片的水滴,用镊子将表皮展平。 (3)用镊子夹起盖玻片,使它的一边先接触载玻片上

的水滴中,然后轻轻地盖在表皮上,避免盖玻片下面有气泡。 2、染色: (1)用滴管在盖玻片的一侧滴一滴稀碘液。 (2)用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使染液浸润到整个标本。 3、观察洋葱的表皮细胞: (1)取显微镜(右手握住镜臂,左手托住镜座,将显微镜放在实验台距边缘7厘米左右,略偏左)并安装好目镜和物镜。 (2)转动转换器使低倍镜对准通光孔(物镜前端与载物台保持2厘米距离)。 (3)调节光圈和反光镜,通过目镜能够看到白亮的圆形视野。 (4)将装片放到载物台上,用压片夹压住,标本正对通光孔中心。 (5)转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物 镜接近玻片为止(注意:眼睛一定看着物镜)。 (6)两眼同时睁开,用一只眼看目镜,另一只眼随时准备画图,同时逆时针方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升直到看清物像为止,再略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。

参考答案 实验报告单:制作并观察植物细胞临时装片

莒县桑园镇中心初级中学生物学科学生分组实验报告单 20____级____年级____班____组实验组长:______ 实验合作者:________ 实验名称:制作并观察植物细胞临时装片 实验目的: 1、学习制作临时装片的基本方法。 2、制作并观察植物细胞临时装片,认识植物细胞的基本结构。 3、学会并练习画植物细胞的结构简图。 材料用具:洋葱鳞片叶、清水、稀碘液、镊子、刀片、滴管、纱布、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜、擦镜纸。 实验步骤: 1、检查材料用具是否完好、齐全。 2、制作洋葱鳞片叶内表皮细胞临时装片: (1)擦:用洁净的纱布将载玻片和盖玻片擦拭干净。 (2)滴:将载玻片放在实验台上,用滴管在载玻片的中央滴一滴清水。 (3)撕:用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取一小块内表皮。 (4)放:把撕下的内表皮浸入载玻片的水滴中。 (5)用镊子将浸入清水的洋葱鳞片叶内表皮展平。 (6)盖:用镊子夹起盖玻片,使它的一边先接触载玻片上的水滴,然后缓缓的放下,盖在要观察的洋葱鳞片叶内表皮上,避免盖玻片下面出现气泡。 (7)染:把一滴碘液滴在盖玻片的一侧。 (8)吸:用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引,使碘液浸润标本的全部。 3、观察临时装片: 在低倍显微镜下仔细观察制成的植物细胞临时装片,辨认细胞的各种结构。 洋葱鳞片叶内表皮细胞的基本结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、液泡等。 4、画图: 依照在低倍显微镜下观察到的物像,选取其中的 一个细胞,画出观察到的各部分结构,周围的细胞只 勾画出轮廓。 5、整理还原: 实验完毕,清洁桌面,清点实验材料并摆放整齐; 将显微镜外表擦拭干净放进镜箱,送回原处。 讨论:怎样区分显微镜视野中的气泡和细胞? 答:气泡在视野中是圆形或椭圆形的,有黑而粗的边缘,用镊子或是解剖针按压盖玻片,气泡会变形、移动;而细胞不会变形、也不会移动,并且细胞有细胞膜、细胞质、细胞核之分,形态多样。

制作并观察植物细胞临时装片实验报告

制作并观察植物细胞临时装片实验报告 班级姓名实验时间 实验目的: 1、学习制作临时装片的基本方法。 2、制作并观察植物细胞临时装片,认识植物细胞的基本结构。 3、学会并练习画植物细胞的结构简图。 实验材料用具:洋葱鳞片叶、清水、稀碘液、镊子、刀片、滴管、纱布、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜、擦镜纸。 实验步骤: 1、检查材料用具是否完好、齐全。 2、制作洋葱鳞片叶内表皮细胞临时装片:(1)擦:用洁净的纱布将载玻片和盖玻片擦拭干净。(2)滴:将载玻片放在实验台上,用滴管在载玻片的________滴一滴________。(3)撕:用镊子从洋葱鳞片叶____侧撕取一小块内表皮。(4)放:把撕下的内表皮浸入载玻片的________中。(5)用镊子将浸入清水的洋葱鳞片叶内表皮_______。(6)盖:用镊子夹起盖玻片,使它的一边先接触载玻片上的_______,然后缓缓的放下,盖在要观察的洋葱鳞片叶内表皮上,避免盖玻片下面出现_______。(7)染:把一滴_______滴在盖玻片的一侧。(8)吸:用_______从盖玻片的另一侧吸引,使_______浸润标本的全部。 3、观察临时装片:在低倍显微镜下仔细观察制成的植物细胞临时装片,辨认细胞的各种结构。洋葱鳞片叶内表皮细胞的基本结构包括___________、___________、___________、___________、___________等。 4、画图:依照在低倍显微镜下观察到的物像,选取其中的一个细胞,画出观察到的各部分结构,周围的细胞只勾画出轮廓。 5、整理还原:实验完毕,清洁桌面,清点实验材料并摆放整齐;将显微镜外表擦拭干净放进镜箱,送回原处。

观察植物细胞的基本结构

《观察植物细胞的基本结构》说课稿 一、教材分析 《观察植物细胞的基本结构》是北师大版生物学七年级上册第3章第1节第3课时的内容。本节课属于实验探究课,是在探究了人和动物细胞的基本结构之后,继续对植物细胞的基本结构的探究,内容主要包括:制作植物细胞临时装片、用显微镜观察植物细胞的基本结构、归纳植物细胞的结构和功能等三个方面。 教材在介绍了动、植物细胞结构和功能之后,再从微观到宏观,逐步介绍动、植物体的组织、器官和系统,因此,学习本节课是学习后面知识的基础。而在探究过程中,对学生动手操作能力的锻炼,科学探究态度和创新思维的培养,在本章乃至在整个初中生物学教学中,都有着至关重要的作用。 二、学情分析 1、知识掌握上:学生在第2课时的探究学习中,已经初步掌握了临时装片的制作与观察方法, 以及生物绘图的基本要求,并认识了动物细胞的基本结构,为本节课的继续探究奠定了基础。 2、学习障碍:由于光学显微镜本身条件的限制,以及观察水平、技巧的不足,学生可能看不 到细胞膜、液泡、叶绿体等结构,教师应及时给予方法指导及讲解。 3、学生思维水平及心理特点:七年级学生普遍活泼好动、求知欲望强烈,对实验探究兴趣浓 厚!但只观其表、不究其里是他们的一大特点,教师应注重引导其对知识进行总结归纳。另外,结合我校学生学习水平参差不齐,部分学生动手能力较差的特点,实验中,应进行合理分组,通过小组合作的形式培养其与人合作的能力。 三、教学目标 通过对教材、学情等综合因素的分析,结合新课程标准要求,我为本节课确定了以下目标:1、知识与技能:练习制作植物细胞临时装片,并利用显微镜进行观察,认识植物细胞的基本 结构; 2、过程与方法:在实验、观察的过程中,提高动手操作的能力,学会探究学习的一般步骤; 3、情感态度和价值观:在观察识别的基础上,尝试绘制出植物细胞的结构简图,培养实验记 录的习惯,养成实事求是的科学态度。 四、教学重、难点 1、教学重点:①制作植物细胞临时装片②观察并识别植物细胞的基本结构 2、教学难点:制作植物细胞临时装片 依据:细胞是生物体结构和功能的基本单位!认识植物细胞的基本结构,是学习后面知识的基础。因此,观察并识别植物细胞的基本结构是本节课的教学重点!观察的前提,是

细胞凋亡的研究方法

一、定性和定量研究 只定性的研究方法:常规琼脂糖凝胶电泳、脉冲场倒转琼脂糖凝胶电泳、形态学观察(普通光学显微镜、透射电镜、荧光显微镜) 进行定量或半定量的研究方法:各种流式细胞仪方法、原位末端标记法、ELISA定量琼脂糖凝胶电泳。 二、区分凋亡和坏死 可将二者区分开的方法:琼脂糖凝胶电泳,形态学观察(透射电镜是是区分凋亡和坏死最可靠的方法),Hoechst33342/PI双染色法流式细胞仪检测,AnnexinV/PI双染色法流式细胞仪检测等。 不能将二者区分开的方法:原位末端标记法、PI单染色法流式细胞仪检测等。 三、样品来源不同选择 组织:主要用形态学方法(HE染色,透射电镜、石蜡包埋组织切片进行原位末端标记,ELISA 或将组织碾碎消化做琼脂糖凝胶电泳)。 四、细胞凋亡检测 1、早期检测: 1) PS(磷脂酰丝氨酸)在细胞外膜上的检测 2)细胞内氧化还原状态改变的检测 3)细胞色素C的定位检测 4) 线粒体膜电位变化的检测 2、晚期检测: 细胞凋亡晚期中,核酸内切酶在核小体之间剪切核DNA,产生大量长度在180-200 bp 的DNA 片段。 对于晚期检测通常有以下方法: 1) TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记) 2) LM-PCR Ladder (连接介导的PCR检测) 3) Telemerase Detection (端粒酶检测) 3、生化检测: 1)典型的生化特征:DNA 片段化 2)检测方法主要有:琼脂糖凝胶电泳、原位末端标记(TUNEL)等 3)TUNEL(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记) 4)通过DNA末端转移酶将带标记的 dNTP (多为dUTP)间接或直接接到DNA片段的3’-OH 端,再通过酶联显色或荧光检测定量分析结果。可做细胞悬液、福尔马林固定或石蜡处理的组织、细胞培养物等多种样本的检测。 4、LM-PCR Ladder (连接介导的PCR检测) 当凋亡细胞比例较小以及检测样品量很少(如活体组织切片)时,直接琼脂糖电泳可能观察不到核DNA的变化。通过LM-PCR,连上特异性接头,专一性地扩增梯度片段,从而灵敏地检

观察植物细胞的基本结构优秀教案.

观察植物细胞的基本结构 一、教学目标: 知识与技能:1.说出植物细胞的结构。 2.学会制作洋葱表皮细胞和番茄果肉细胞的临时装片。 过程与方法:尝试绘制植物细胞,并标注结构。 情感态度价值观:通过对不同类型的植物细胞的观察总结归纳出植物细胞的基本结构。 二、教学重点: 1.制作洋葱表皮细胞和番茄果肉细胞的临时装片。 2.植物细胞的基本结构。 三、教学难点: 有关细胞结构的基本概念。 四、教学准备: 1.收集有关细胞的结构与功能的资料,包括图片,视频以及动画等。 五、教学方法和过程: (一)知识引入 与动物体一样,植物体也是有植物细胞构成的.那么构成植物体的细胞结构有怎样的特点呢?我们通过用显微镜观察植物细胞来探讨问题的答案. (二)新课学习 1.制作和观察洋葱表皮细胞临时装片 【图片展示】:制作和观察洋葱表皮临时装片的材料用具。 【学生活动】:①认识实验的材料用具. ②清点材料用具. 【视频展示】:制作和观察洋葱表皮临时装片的方法步骤. ①用纸巾将载玻片、盖玻片擦拭干净(擦)。 【学生活动】擦拭载玻片和盖玻片。 ②在载玻片中央滴一滴清水(滴)。注意清水不要滴太多。 【学生活动】在载玻片中央滴一滴清水。 ③用刀片切取一块洋葱鳞片叶,用镊子撕取鳞片也的内表皮(撕)。注意切取的 洋葱鳞片叶不易过大,大约为0.5cmx0.5cm 【学生活动】撕取洋葱鳞片叶内表皮 ④将鳞片内表皮至于载玻片的清水中清水中,并用牙签将表皮展平(展)。【学生活动】将鳞片内表皮至于载玻片的清水中清水中,并用解剖针将表皮展平。 ⑤盖上盖玻片(盖)。注意盖的时候避免出现气泡。 【学生活动】盖上盖玻片。 ⑥将一滴碘液滴在盖玻片的一侧,用吸水纸从对侧引流,使碘液扩散到整个标 本(染)。 【学生活动】对玻片标本进行染色,然后在显微镜下观察洋葱表皮细胞的结构,尝试在学案上绘制细胞结构的简图。 【总结】:制作洋葱表皮细胞临时装片的方法步骤:擦→滴→撕→展→盖→染【小结】:洋葱表皮细胞的结构包括有最外层的细胞壁、紧贴细胞壁的细胞膜、细胞核以及细胞核和细胞膜之间的细胞质;细胞质中还能找到泡状结构:液泡。【过渡】:那么其他植物细胞是否也有类似的结构呢?

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