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无菌隔离检测系统
技
术
文
件
苏州东中机械设备有限公司
1目的
1.1本文件参照2015版新药典要求设计，并且满足2015版药典规划标准。
我公司的用户需求说明为依据进行的设计、制造、安装、验证，为将
来设备的良好使用提供文件性的保证。
2范围
2.1该文件适用于无菌检测隔离系统的技术资料，最终解释权为苏州东中
机械设备有限公司。
3设备规范语录
3.1GAMP ：生产自动化管理规范。
3.2GMP：药品生产质量管理规范。
3.3IQ：安装确认。
3.4OQ：运行确认。
3.5PQ：性能确认。
3.6HDS：硬件设计标准。
3.7SDS：软件设计标准。
3.8FAT：工厂接收测试。
3.9SAT：现场接收测试。
3.10HEPA：高效空气过滤器
4、技术要求：
1.功率：2500W.
2.外形尺寸：实验舱：长1800mm*宽950mm*高1900mm,缓冲舱：500*600*600mm
3.系统运行时最大工作噪声<68dB；
*4.SIP：过氧化氢蒸气（VHP））
，对嗜热脂肪芽孢杆菌达到6-log 的杀灭率；
5.CIP：人工擦拭，通过操作手套可实现对操作舱体人工冲洗。
6.通风排残：通风排残后舱体内VHP浓度<10ppm，此浓度条件对微生物检查结果无显著性影响；
7.洁净度：灭菌后，舱体内尘埃粒子，沉降菌，浮游菌测试结果符合静态A级标准；
*8.舱体密封性（压降试验）：舱体在1.5倍的工作压力下，小时泄漏率<0.5%；
9.压力维持：0~80Pa可调节，无菌操作时保持40~60Pa，静态条件下压力维持至设定值±5Pa；
10.汽化过氧化氢分布均匀性测试；
10.1控制系统操作处设置急停按钮；
10.2设备外表面温度不高于45℃；
10.3控制系统能够抵抗手持无线电设备和设备周围1米范围内的手机信号干扰；
*11.通风及空气过滤系统：
11.1隔离器内部为紊流式气流模型，送风与排风单元均位于隔离器的顶部；
11.2送风与排风均采用德国原装进口EBM风机，轴流风机（型号为12038B2）2只。均通过P LC 控制，在设定的舱内压力参数下，送风量与排风量均自动调节而无需任何人工干预；
11.3送风部分：
11.3.1采用室内取风，全新风并在经过H EPA 过滤前，通过初效过滤器预过滤；
11.3.2在风机与H EPA 之间安装一个由P LC 控制的电控蝶阀，无需人工干预；
；
11.3.3HEPA选用C amfil FARR，等级H14（过滤效率≥99.995%）
11.3.4HEPA 安装静压箱采用304 不锈钢制作，带有P AO/DOP 检测端口；
11.3.5系统含有送风H EPA 压差表，可提示用户H EPA 过滤效率；
11.4排风部分：舱内气体100%外排，在气体排出室外前，气体经过H EPA 过滤；
11.5西门子P LC 控制：运行参数实时显示；灭菌阶段联机控制；阶段之间自动切换；操作者权限控制；压力报警控制；工作状态下压力自动调节；
*12.隔离器主要部件材质
12.1舱架非接触过氧化氢部位采用304不锈钢
12.2操作平台采用316L不锈钢，表面抛光小于0.8um Ra，所有焊接处均为满焊处理；
12.3舱体采用304 材质，采用高频焊接
12.4手套与袖套：袖套选用H ypalon 材质，手套选用丁腈橡胶材质。
12.3 门采用气密封方式进行密封
13.用户界面及数据接口
13.1触摸显示屏（SIEMNES，型号为smart 700）1套，可编程控制器（SIEMNES，型号为6ES7216-2BD23-OXB8）1套
13.2用户登陆界面可设置不同的管理权限，具尘埃粒子、风湿度、压力实时监测功能，另外配置浮游菌采集器。
13.3操作界面实时显示系统运行参数；支持参数设置；
14.检测端口：PAO检测接口（304不锈钢）具有多功能组合检测接口。
*15.仪表
15.1 风速传感器为E+E 20M/S，
15.2 压力传感器：美国德威尔（0~500Pa），2个；
15.3 压差表：DUWEI压差表（0~500Pa），2个；
15.4 粒子计数器：宏瑞 1个；
15.5 浮游菌采样器：东中，1个；
*16.手套支架
隔离器每个操作口均配有1个手套支架，保证灭菌过程中，手套及袖套处于完全展开状态，避免灭菌死角。
*17.灭菌支架(304不锈钢)：2个
*18.内置式集菌仪
内置式集菌仪（型号暂定）
*19.汽化过氧化氢发生器
19.1尺寸：60cm×60cm×70cm（长×宽×高）；
19.2空气流量：≥20m3/h；
19.3注射速率：1～5g/min
19.4汽化温度：≤20-80℃
19.5湿度：≤50%RH
19.6灭菌剂：35%食品级过氧化氢溶液
19.7杀灭率：对嗜热脂肪芽孢杆菌达到6-log的杀灭率
19.8低温灭菌过程，室温即可；灭菌时间短；没有毒副产品；
19.9该过氧化氢发生器的气体循环连接管路为进口硅胶管，采用卫生级快接，可实现隔离器在线灭菌。
5.产品验证
我们的产品通过DQ（设计确认）、FAT(制造工厂测试)、IQ（安装确认）、OQ（运行确认）、PQ（性能确认）等一系列活动，提供的数据和结论能够证明该设备在生产中可以满足生产工艺需要，设备的性能符合设计要求，产品出厂标准符合国家新版GMP的要求。
DQ确认的目的：依据客户需求标准及生产工艺，对照合同配置，设计图纸资料审核设备的性能、材质、结构、附件、控制、仪表等方面进行确认，验证设计过程中产品的合理性和可靠性。
FAT确认的目的：在制作工厂通过一系列试验性测试证明该设备在装箱出厂之前产品质量的可靠性，并证明该设备能够满足设计确认的基本要求、产品出厂标准及国家GMP要求SAT确认的目的：在客户工厂通过一系列试验性测试证明该设备在安装之前产品质量的可靠性，并证明该设备能够满足设计确认的基本要求、产品出厂标准及国家GMP要求IQ确认的目的：通过现场安装、调试以及验证活动，提供一系列试验数据，证明产品
的安装文件资料和安装条件、安装结果符合设计要求，资料和文件符合GMP管理要求。
OQ确认的目的：首先检查验证方所提供的产品的检验报告，检查和测试设备的运行技术参数，确认产品的运行性能达到设计要求，并符合GMP的相关要求。
PQ确认的目的：在安装确认和运行确认的基础上，根据使用厂家的具体生产工艺加入相应的试验品进行试验，确认设备的运行性能符合设计要求，并符合新版GMP的相关要求详细文本资料在做现场验证时提供
6．售后服务
保修内容：设备质保期为1年，自设备安装调试验收合格之日起计算，质保期内公司提供免费维修服务。
(1) 在质保期内的保修内容
1) 公司按照双方签订的合同内容提供设备的安装、调试，验证合格后，提供现场操作
及维修、管理人员的培训；培训的具体时间、地点、人数由用户公司协商安排。
2) 质保期内技术人员将会跟踪设备的运行情况，如产品运行不正常，用户就产品问题
向公司技术部门咨询，判定是否属于质量问题。用户可以通过售后电话咨询有关技
术问题，并得到明确的解决方案。若在电话中不能解决的问题，我司将在1小时内
响应用户的服务需求，并在48小时内到现场。
3) 质保期内凡属于产品质量原因产生的故障，负责免费维修。
(2) 质量保证期满后的维保
质保期满后，承担设备的终身维护工作。包括设备的校验，校验周期一年，可以到现场校验。如需更换零件，只收取零配件费用，不收人工费。对于电话中不能解决的问题，我司将在1小时内响应用户的服务需求，并在48小时内到现场。
无菌隔离器用户需求说明 User Requirement Specification for Sterile Isolator Review and Approval审核和批准 版本修订索引Revision History
目录 1.介绍 (3) 2.目的 (3) 3.范围 (3) 4.职责 ................................................................................................................. 错误！未定义书签。 5.术语和缩略语 (3) 6.法规和指南 (4) 7.参考文件.......................................................................................................... 错误！未定义书签。 8.系统和设备描述 (4) 9.URS内容 (5)
1. 介绍 本用户需求说明（URS）是为了规定XX公司XX的XX系统的建造、运输、自动化控制系统等的技术要求，为该系统的招标提供技术依据，并作为后续验证工作的基础。 本文件作为供应商编制设备设计说明、建造要求、调试和服务技术条款的基础，供应商应根据本文件需求逐条做出响应，提供其技术要求是否满足本文件需求标准，如有偏差和不符合项应列出，并详细说明或提供解决方案。 2. 目的 用户需求说明是一系列的技术说明中的第一个。它是用户对项目范围的预期情况进行的高层次说明，是用户对XXX系统具体输出要求的详述，是设备设计的依据，决定了该设备的性能，同时为该设备的设计、测试、验证提供了可接受标准依据。 3. 范围 本URS用于规定XXX的XXXX系统的用户需求说明。本URS不包括以下内容：无菌隔离器系统运行所需的洁净及公用工程安装相关的管道、管件及管道设计与安装要求将在另外的URS进行单独编制。 4. 术语和缩略语 在下面的表格中规定了本文件中使用的术语和缩略语。
9206 无菌检查用隔离系统验证指导原则
本指导原则是为药典要求无菌的药品、生物制品、原料、辅料、 及其他品种无菌检查用隔离系统的验证提供指导。 无菌检查用隔离器是为产品无菌检查试验提供无菌环境的一种 设备。封闭式隔离器不直接与外界环境相连，使用无菌接口或快速转 移通道进行物质传递，一般用于无菌检查；开放式隔离器允许材料通 过舱门进入，舱门内有一定的压力阻止微生物的进入。物品可通过无 菌传递进入隔离器， 整个传递过程中可保持隔离器内部空间和外部环 境完全隔离。 隔离器内部能够反复进行灭菌， 内壁可用杀孢子剂处理， 以去除所有的生物负载，灭菌完成后，隔离器通过高效空气过滤器 （HEPA）或更高级别的空气过滤器向其内部输送洁净空气来维持内 部的无菌环境。 隔离器的使用从根本上避免了操作人员与实验用物品 的直接接触，操作人员无需穿着专用洁净服，而是通过隔离器上的操 作手套或半身操作服对舱内物品、仪器进行操作。手套-袖套组件或 半身操作服是隔离器舱体不可分割的一部分， 它们由柔软的材料制成 且与所采用的灭菌剂兼容。因此，使用隔离器进行无菌检验，可以避 免实验用物品和辅助设备被污染，提高了无菌试验结果的准确性。 一．无菌检查用隔离器的结构 隔离器一般是由不锈钢、玻璃、硬质塑料或软质塑料（如聚氯乙 烯）建成。隔离器的结构一般包括： 1.空气处理系统 用于无菌检测的隔离器应配备可截留微生物的高效空气过滤系
统（或更高级别的过滤系统） 。静态时，隔离器内部环境的洁净度要 求应达到我国药品生产质量管理规范(GMP)现行版中 A 级空气洁净 度的要求。当隔离器与外界环境有直接开口时，内部应通过持续足够 的正压来维持隔离器内部的无菌环境。 2. 传递接口及传递门 灭菌后的培养基、 稀释液和实验用品可以通过带传递功能的灭菌 器直接无菌传递到隔离器内。此外，不同的隔离器也可以通过专门设 计的快速传递门（RTP）连接，以实现将实验物品在两个或多个隔离 器之间进行无菌传递。 RTP 上未经灭菌的表面通过互锁环或法兰互相 叠合，并通过密封圈封闭，从而防止微生物进入隔离器内。 3.灭菌设备 灭菌气体发生器与隔离器之间气体管路的连接，应确保其密封 性。在接近隔离器的部位，进气与排气管路上应分别安装有阀门，当 气体发生器与隔离器的连接、分离或隔离器进行无菌维持时，进、排 气管路阀门应予以关闭。灭菌气体或蒸汽应通过高效空气过滤器 （HEPA）进入隔离器内。灭菌结束后须对灭菌气体进行排空，保证 在进行无菌检测前，隔离器内部的灭菌气体浓度低于一定值，消除灭 菌气体对无菌检测的影响。 4.配套设备与辅助设施 隔离器内部安装无菌检查使用的配套设备与辅助设施， 如无菌检 查过程中使用的蠕动泵、真空泵及连续环境监控设备，其运行不得对 隔离器的内部环境造成影响， 配套设备上的电机等关键部件及排气口
dzprc 无菌隔离检测系统 技 术 文 件 苏州东中机械设备有限公司
1目的 1.1本文件参照2015版新药典要求设计，并且满足2015版药典规划标准。 我公司的用户需求说明为依据进行的设计、制造、安装、验证，为将 来设备的良好使用提供文件性的保证。 2范围 2.1该文件适用于无菌检测隔离系统的技术资料，最终解释权为苏州东中 机械设备有限公司。 3设备规范语录 3.1GAMP ：生产自动化管理规范。 3.2GMP：药品生产质量管理规范。 3.3IQ：安装确认。 3.4OQ：运行确认。 3.5PQ：性能确认。 3.6HDS：硬件设计标准。 3.7SDS：软件设计标准。 3.8FAT：工厂接收测试。 3.9SAT：现场接收测试。 3.10HEPA：高效空气过滤器 4、技术要求： 1.功率：2500W. 2.外形尺寸：实验舱：长1800mm*宽950mm*高1900mm,缓冲舱：500*600*600mm 3.系统运行时最大工作噪声<68dB；
*4.SIP：过氧化氢蒸气（VHP）） ，对嗜热脂肪芽孢杆菌达到6-log 的杀灭率； 5.CIP：人工擦拭，通过操作手套可实现对操作舱体人工冲洗。 6.通风排残：通风排残后舱体内VHP浓度<10ppm，此浓度条件对微生物检查结果无显著性影响； 7.洁净度：灭菌后，舱体内尘埃粒子，沉降菌，浮游菌测试结果符合静态A级标准； *8.舱体密封性（压降试验）：舱体在1.5倍的工作压力下，小时泄漏率<0.5%； 9.压力维持：0~80Pa可调节，无菌操作时保持40~60Pa，静态条件下压力维持至设定值±5Pa； 10.汽化过氧化氢分布均匀性测试； 10.1控制系统操作处设置急停按钮； 10.2设备外表面温度不高于45℃； 10.3控制系统能够抵抗手持无线电设备和设备周围1米范围内的手机信号干扰； *11.通风及空气过滤系统： 11.1隔离器内部为紊流式气流模型，送风与排风单元均位于隔离器的顶部； 11.2送风与排风均采用德国原装进口EBM风机，轴流风机（型号为12038B2）2只。均通过P LC 控制，在设定的舱内压力参数下，送风量与排风量均自动调节而无需任何人工干预； 11.3送风部分： 11.3.1采用室内取风，全新风并在经过H EPA 过滤前，通过初效过滤器预过滤； 11.3.2在风机与H EPA 之间安装一个由P LC 控制的电控蝶阀，无需人工干预； ； 11.3.3HEPA选用C amfil FARR，等级H14（过滤效率≥99.995%） 11.3.4HEPA 安装静压箱采用304 不锈钢制作，带有P AO/DOP 检测端口； 11.3.5系统含有送风H EPA 压差表，可提示用户H EPA 过滤效率； 11.4排风部分：舱内气体100%外排，在气体排出室外前，气体经过H EPA 过滤； 11.5西门子P LC 控制：运行参数实时显示；灭菌阶段联机控制；阶段之间自动切换；操作者权限控制；压力报警控制；工作状态下压力自动调节； *12.隔离器主要部件材质 12.1舱架非接触过氧化氢部位采用304不锈钢 12.2操作平台采用316L不锈钢，表面抛光小于0.8um Ra，所有焊接处均为满焊处理； 12.3舱体采用304 材质，采用高频焊接 12.4手套与袖套：袖套选用H ypalon 材质，手套选用丁腈橡胶材质。 12.3 门采用气密封方式进行密封 13.用户界面及数据接口 13.1触摸显示屏（SIEMNES，型号为smart 700）1套，可编程控制器（SIEMNES，型号为6ES7216-2BD23-OXB8）1套
【手把手教你】验证（六）—无菌隔离器 隔离器：以下是对于使用以及这些系统适用性的简要介绍，环境控制系统的主要目标之一是通过防止可能会改变产品纯度、含量与安全性的污染来保证工艺的完整性和质量。使用内置或附加灭菌系统的隔离技术能够提供高度的无菌保证水平，因为其消除了微生物污。染的主要来源之一：人。为达到此目的，这些单元设计应当取得实际效果。考虑所有这些要素内部的相互作用，需要在设计阶段审慎研究。对于使用无菌工艺的大容量产品尤其如此。机械设备的整合，监控设备，产品与容器的传递装置、灭菌装置，清洁装置以及人员，都需要仔细考虑。 一般情况下，这些单元是预先焊接、自我密闭的仓室或手套箱，对其能够进行原位灭菌，以防止无菌产品直接暴露到人员与周围环境中。为了能提供适当隔离，这些装置配备微生物过滤器（高效过滤器或更高）来保持仓室的压力以及完整性。输送装置设计用来避免在无菌工艺需要的部件进人或传出时周围环境直接地接触仓室。 所使用的建筑材料应当与清洁和灭菌程序兼容。周围环境不应直接影响隔离器保持内部环境条件的效率。制造后以及在操作的连续监测中，仓室的完整性必须核实。这些系统通常已经安装有接收在线灭菌(S IP )或在线清洁（C IP )所需要的无菌气体或液体，以及内部部件进人的装置。 隔离器原位灭菌的验证与确认的注意事项： 所使用的灭菌系统作为屏障或隔离器的一部分要用特定的验证程序来证明其能 够有适当的安装、运行与性能。虽然安装与运行的验证程序类似于空调净化系统，但性能确认需要使用适当的微生物进行挑战试验。为此目的，生物指示剂在内部受控环境中应有足够的数量，来证明所有关键单元内部灭菌的有效性(致死性）及灭菌剂的穿透性，特别是那些被认为难以达到的部位。 隔离器完整性确认： 有各种方法来测试与证实手套箱或隔离器的部件完整性。验证程序应当考虑挑战试验来证明所保护的产品与周围环境“直接隔离” ，以及达到隔离器工艺活动与周围环境（生物危害工艺）“ 反向隔离” 。使用化学试剂，以仓室压力作为标准来测试完整性。 隔离器的在线清洁系统确认： 该验证程序应当考虑具体的挑战，以证明在线清洁系统在清洁周期实施后满足预先规定的清洁度水平能力。在这里适用典型的“ 清洁验证方法” 。 生物危害污染控制： 随着生物技术工艺出现，需要考虑工艺区域的隔离的重要性了。一些考虑在这些设施的设计以及运行中充分考虑安全性以及无菌工艺要求。在某些情况下，这些因素的相关性可能因为工艺不同而不同，但他们通常密切相关（例如，涉及病毒灭活工艺，要求与上游的病毒灭活前的完全无病毒的物料完全隔离）。
无菌检验——隔离器系统验证 USP <1208>Sterility Testing—Validation of Isolator System/General informance 这部分是用于无菌检验隔离器系统的简明验证指南（注意：在这个章节中，“已灭菌”指的是物品或者表面的微生物被清除的状态）在19世纪80年代中期，建立一个无菌检验环境的隔离器就已经开始使用。隔离器可以通过密封的方法或者采用过滤除菌空气保持正压的方法，创造一个无菌的环境。当隔离器处于密闭状态时，仅仅能够在隔离器内部和快速传递仓传递物品；当隔离器打开时，允许通过一个特殊设计的并经过验证可以避免污染物进入的开口递出物品。隔离器采用柔软的塑料（例如聚氯乙烯）、硬塑料、玻璃或不锈钢制造。 由于隔离器系统从根本上避免了分析人员与物品的直接接触，因此在无菌检验操作时可以避免物品和辅助设备被污染。当隔离器内部与环境完全隔离时，隔离器内部的物品是无菌条件下的传递。操作者穿着半身衣在隔离器内部进行无菌操作，半身衣是连接在隔离器墙体上的柔软的部分，操作者穿着半身衣有足够的范围在隔离器内部进行操作，操作者也可以通过连接在隔离器墙体上的袖子和手套进行操作。在隔离器中，不要求操作者穿着特殊的无菌衣进行操作，允许操作者穿着标准的实验室服装进行操作。为确保隔离器内部无菌。使用杀孢子剂对隔离器内部进行灭菌处理。隔离器设计和建造 空气处理系统 用于无菌检验的隔离器需要配备除菌过滤器（HEPA过滤器是被要求的）。静态时，要求隔离器尘埃粒子符合美国联邦标准209E的100级空气质量要求（看洁净室微生物评价和其他环境控制《1116》）。动态时，不要
附件一无菌操作用隔离器 APPENDIX 1: ASEPTIC PROCESSING ISOLATORS 无菌操作用隔离器将无菌操作生产线和外部的洁净室环境隔离，并且将无菌生产过程中操作者直接接触（无菌生产线或产品）的可能性降到最低。一个设计良好的保持正压的隔离器，在有适宜的规程维持、监测、控制的情况下，与传统的无菌操作相比，有显著的优势。尤其在操作过程中微生物污染的机会极低。然而，使用者仍然需要注意操作中潜在的风险。应当意识到建立一个新的针对隔离器使用的规程是必须的。 A 维护 1.通则 与传统的非隔离器无菌操作相比，隔离器系统的维持在一些侧重点上是不同的。虽然隔离器在形式上没有绝对的密封，但一个设计良好的隔离器单元可以达到很高的完整性。然而，隔离器系统上的一个位置的泄露就能够破坏其完整性。除了手套、半身衣、衔接处的完整性应当通过全面的预防维护程序进行日常关注和记录之外。对于隔离器的各部位，要有一个定期更换的书面规定，以确保这些部位在破损或老化之前被更换。传递系统、垫圈和密封处以及其他部位的维护要包括在书面维护程序中。 2.手套完整性 一个有缺陷的手套或袖子（长手套）会形成污染的通道，也是隔离器完整性的一个关键的破损。手套完整性的预防性维护程序应当被建立。选择持久耐用的手套材料、进行周期性适宜的更换，是保持手套完整性，维持优良生产操作的关键。每次使用，应当对手套目视检查肉眼可见的破损。物理性的完整性测试也应当周期性进行。手套破损能够产生严重后果。合适的监控和维护程序能够识别手套的完整性，并且能够更换任何破损的手套，从而将无菌产品的风险降到最低。 由于手套上可能存在潜在的可以通过微生物的孔洞，同时缺乏高灵敏度的完整性检测方法。我们建议对于隔离器上安装的手套内表面消毒质量引起关注，同时配合使用第二副薄手套。 B．设计 1.气流 有两种类型的无菌操作隔离器：开放型和密闭型。密闭型隔离器使用辅助设备进行连接，解决材料的传递问题。开放型隔离器对周围环境有开放口，采用谨慎的技术通过正压的方式使隔离器内部环境和背景房间环境隔离。 对于密闭的隔离器系统，湍流是可以接受的，密闭隔离器通常尺寸紧凑并且没有大的房间类型的生产线。另一种无菌过程隔离器应用单向流吹扫和保护暴露的无菌材料，要避免暴露的无菌原材料、产品和密闭容器上出现乱流或者气流停滞情况。在大多数合理的设计中，无菌空气吹过关键区域一次，然后就被排除出（隔离器）系统之外。空气处理系统要有能力维持隔离器内部的环境条件要求。 2.建筑材料 象任何无菌过程设计一样，选用的材料要基于耐用性、容易清洁并且容易去除污染。例如：坚硬的一体化的不锈钢和玻璃材料被广泛使用于制造墙体结构。 3.压差 向外开口隔离器设计时应当能够确保隔离器和外界环境完全分离。一个合适的正的压差应当应用在隔离器上，实现对隔离器内部和外界环境的隔离，正的压差数值要有对隔离器运行状况研究的支持。正的压差范围一般从从17.5Pa到50Pa。最小微压差的制定依赖于系统设计和隔离器所用的出口舱门。隔离器和其他接口的分界面（例如干热隧道）的气流平衡应当被验证。
无菌检测风险控制 无菌检测的风险 假阳性：结果呈阳性，但污染不是产品所带来的，而是其他方面，比如测试环境、方法、人员、操作等方面所带来的污染。这种结果带来的后果往往是企业花费大量的人力、物力和财力去进行长时间的调查，调查后却找不到污染的根本原因，整批产品遭到报废，并且法规禁止不以发现造成污染的根本原因为目的而只是重复测试的行为。 假阴性：结果呈阴性，但产品本身是存在微生物污染的，是由于微生物受到抑制或伤害没有恢复出来才没有生长。这种情况下，厂家会释放产品，导致的后果有可能是，给药后，微生物在合适的环境下大量增殖，病人遭受严重的伤害甚至危害到患者的生命。而企业则会面临产品召回，品牌受损甚至工厂关闭风险。 无菌检测环境因素 关于环境因素，主要是防止在试验过程中的外来污染对于检测过程的影响，防止假阳性的出现。尤其是针对于直接接种法和开放式薄膜过滤法的无菌检测方法，外部环境的污染问题就成为无菌试验假阳性的最大可能。因此目前封闭式薄膜过滤法应用的越来越多。即便如此，外部环境的影响仍然对于样品检测是非常大的风险。目前对于环境控制的方法主要有两个：B级下的局部A级（万级下的局部百级——2010版）操作区域，或者隔离器中进行无菌操作。如果操作正确的话，两种方式均能够给我们的实验室实现“近似”无菌的操作环境。 洁净室中进行无菌检测 对于B级下的A级（国内通常是万级下的百级）操作区域，通常是由层流台来实现的，无论是垂直层流还是水平层流都能够满足我们的无菌检验需求。但是从工作原理上看，生物安全柜并不适合进行无菌试验。应该定期对于层流台进行检测，尘埃粒子、风速、沉降菌、浮游菌等关键技术指标以保证该系统处于正常的工作状态之中。对于万级设施，应该将其等同视为生产区洁净室进行控制，给局部百级一个较好的外部环绕环境，能够更好地保证局部百级的运行。 在实验过程中，无菌的保持也非常重要，特别是防止交叉污染，人员的操作和物品的位置移动都会造成这样的情况。这就对人员的要求非常高，特别是对于“无菌意识”的提高，通常是最容易讲但是也最难培训的技能和意识。整个检测过程中一定要注意几个原则：1．物品可以从洁净的“高级别”到“低级别”转移，但是不可以从“低级别”到“高级别”转移。进入洁净室的人员必须经过无菌穿衣验证，只有有资质的人员才可以进入洁净室。 2．手作为交叉污染的媒介，应该及时定期对手套使用消毒剂进行清洁，如果有微生物污染风险较高的操作，应该及时对手套和无菌衣进行更换。 3．所有需要进入实验操作区域的物品必须在经过适当处理后才进行操作。 4．试验过程中一定要注意人的操作对于气流和待试验物品的污染。所有物品的去污染化，主要指的是物品的灭菌处理和转移方式。对于可以进行高温高压进行过度灭菌的物品，应尽量采取使用这种方式（如果有双门消毒锅可以直接从无菌室将灭菌完毕的产品取出，如果没有双门消毒锅，则需要将灭完菌的物品再次通过传递窗传入洁净室），如果该物品无法
无菌检测隔离器再确认方案 目录 1 再确认目的 2 再确认依据 3 再确认判断标准 4 再确认小组人员及职责 5 再确认过程的培训 6 再确认条件 7.1性能确认 7.2尘埃粒子测试再确认 7.3除湿性能确认 7.4过氧化氢气体浓度及分布状态再确认 7.5过氧化氢气体排空效果再确认 7.6沉降菌测试再确认 8.再确认 9再确认结论 正文： 仪器名称：无菌检测隔离器 型号及编号： 生产厂家： 2 再确认依据 《药品生产质量管理规范》（2010年） GB/T 16292-2010 医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法GB/T 16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法 3 再确认判断标准符合再确认项目的标准规定 4 再确认小组人员及职责
5 再确认过程的培训 5.1.1 培训内容 本再确认方案 5.1.2 培训人员名单 6、再确认条件 6.1 测试所用仪器仪表、检验仪器已校验且在有效期内 7.再确认内容 7.1性能确认 7.1.1低压报警功能再确认 7.1.1.1再确认方法： 开启无菌隔离器，进入手动运行界面，开启手动通风程序，当压力显示高于95Pa时，观察蜂鸣器是否鸣叫，显示屏报警状态显示是否正常；
开启无菌隔离器，进入手动运行界面，设置保压压力40Pa,开启手动保压，稳定3min；缓慢开启物料大门，使舱内压力缓慢下降，当压力显示低于12.5Pa 时，观察蜂鸣器是否鸣叫，显示屏报警状态显示是否正常； 7.1.1.2再确认结果： 7.1.1.3结论： 7.1.2压差维持能力再确认 7.1.2.1再确认方法： 所有手套支架安装到位，开启设备，进入手动运行界面，设置保压压力20Pa，启动压力保持，稳定2min以上后，观察压力波动的最高值和最低值3min 以上，于工作表中记录相应设定压力值的压力波动范围； 将保压压力设置为40Pa,重复以上操作； 将保压压力设置为60Pa，重复以上操作。 注:记录过程中，不得进行手套操作，不得对舱体进行挤压，否则须重新稳定后再记录。 7.1.2.2再确认结果 实验舱 7.1.2.3结论： 7.1.3舱体密闭性再确认
2014-10-10
隔离器在无菌检查中的应用 Isolator Used for Sterility Testing
USP <1208>无菌检查–隔离器系统验证
1
Regulations 法规要求
l 中国药典 Chinese Pharmacopoeia l USP l PIC/S
用于实施药典所规定无菌检查的隔离器从1980年代中期就开始使用了。 使用隔离器的操作者无需穿着特殊的洁净服来操作无菌检查，标准的实 验室服就足够了。
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2014-10-10
PIC/S PI 012-3, Recommendation on Sterility Testing, 2007
无菌检查应该在无菌条件下进 行，无菌检查的操作环境要求 和无菌药品的生产环境一致。 …… ……无菌检查应该在B级条件 下的A级层流下进行，或在受 控环境下的隔离器中进行。 ……
无菌检查隔离器不一定要放置于定级的洁净室中，重要的是放置隔离器的区域要 对非必要人员的进出限制管理。 房间里无需进行环境监控。
PIC/S PI 014-3 无菌生产和无菌检查的隔离器 ，2007
中国药典Chinese Pharmacopoeia, 2010
附录XI H 无菌检查法 无菌检查应在环境洁净度10 000级下的局部洁净度100级 的单向流空气区域内或隔离系统中进行，……
当隔离器用于无菌检查时，没有正式要 求他们被放置在D级环境。这个环境应 当受到控制，例如只允许受过培训的员 工进入，但不一定需要定级别。
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一、目的 为了保持设备设施的良好使用状态，确保产品满足使用的要求。 二、范围 适用于设备设施、设备的正常运行。车间或库房的称量操作 三、职责 1、工程部是设备维护保养的管理部门。负责设备实施的管理。 2、设备的实际情况，负责建立管理档案，制订《设备维护和保养记录》，对设施、 设备实施全过程的管理。 3、工程部负责所有的设施、设备进行维修、保养及运行操作管理。 四、工作程序 设备在使用过程中，随着运行工时的增加，各部机构和零件由于受到摩檫、腐蚀、磨损、振动、冲击、碰撞及事故等诸多因素的影响，技术性能逐渐变坏。 1、保养作业内容 按照保养作业性质可分为：清洁，检查，紧固，润滑，调整，检验。检验由 本工程部专职检验人员负责进行。 1清洁、检查、紧固、调整、润滑、电气作业由设备操作及维修工人员执行。 2 过滤器更换清洗，控制系统复位。 五、保养制度 设备保养制度是以预防为主，定运行工时进行保养的原则，分为例行保养，一级保养，二级保养，三级保养，季节性保养。 设备保养的分级和作业内容是根据实际使用中技术情况的变化；设备的结构；使用的条件；环境条件等确定。是根据零件磨损规律，老化规律，把程度相近的项目集中起来，在达到正常磨损，老化将被破坏前进行保养，保持设备整洁，发现和消除故障隐患，防止设备早期损坏，达到设备维持正常运行的目的。
1、设备的例行保养 设备的例行保养是各级保养的基础，直接关系到运行安全，能源的消耗，机件的使用寿命。例行保养作业由设备操作人负责执行，其作业中心内容以清洁、补给、安全、检视为主，坚持开工之前、运行中、收工后的三检制度。检查操纵机构、运行机件、安全保护装置的可靠性，维护整机和各总成部位的清洁，润滑必须润滑到位，紧固松动件等。 2、设备启动前的工作项目。 1) 清洁设备，清除与生产无关的杂物，更换或清洗进风口和新风机前端的空气过滤网。 2) 检查各指示仪器，仪表，操作按钮和手柄以及紧急停止按钮是否正常。 3) 检查各部位有堵塞，漏风，漏电的现象。 3、设备运行中的检查。 1) 注意各仪器仪表的工作情况，及各部位有无异常的声响。 2) 运行中注意安全部件是否正常。 3) 遇异常情况要及时向工程部负责人报告。 4、收工后的作业项目 1) 清洁设备外部，内部的剩余生产用料，清洁各种零部件。 2) 排除运行中发现的缺陷和故障。 5、设备的维修保养 设备的维修保养是合理使用设备的重要环节，必须用强制性的保养制度取代那些随坏随修，以修代保，进行频繁的大拆大卸的做法。 设备的维修保养就是在以预防为主的思想指导下，把设备保养作业项目按其周期长短分别组织在一起，分级定期执行，设备的定期保养分为：一级保养，二级保养，三级保养。 5.1一级保养 一级保养是各级技术保养的基础，各级技术管理部门必须十分重视一级保养工作的质量。由专业维修工负责执行。主要作业内容以清洁、润滑、紧固为主，检查操纵、指示用仪器、仪表、安全部位、各种阀门、润滑油油平面。 5.2二级保养
Draft 起草人 设备工程师signature签名Date日期 Review审核人 工程设备部经理signature签名Date日期 Review审核人 生产部经理signature签名Date日期 Review审核人 QA经理signature签名Date日期 Approve批准人 副总经理signature签名Date日期
Index 目录 1. Purpose目的 (3) 2. Scope 范围 (3) 3. Responsibilities 职责 (3) 4. Regulation and Guidance 法规和指南 (3) 5. System Description 系统/设备描述 (3) 6. Production Capacity生产能力的要求 (4) 7. Quality Requirements质量要求 (4) 8. Structure and Component结构与组件要求 (5) 9. Control system requirement控制系统要求 (9) 10. Instruments and valves仪表与阀门 (12) 11. Material and Process材料与加工 (12) 12. Public Service公用系统要求 (13) 13. Installation安装要求 (13) 14. EHS环境保护、健康与安全要求 (14) 15. Supplier/User Responsibilities供应商/用户责任（安装、调试和验证） (14) 16. File and Certificate文件和证书要求 (16) 17. Abbreviation缩略语 (18) 18. Revision History修订历史 (19)
9206无菌检查用隔离系统验证指导原则 本指导原则是为药典要求无菌的药品、生物制品、原料、辅料、及其他品种无菌检查用隔离系统的验证提供指导。 无菌检查用隔离器是为产品无菌检查试验提供无菌环境的一种设备。封闭式隔离器不直接与外界环境相连，使用无菌接口或快速转移通道进行物质传递，一般用于无菌检查；开放式隔离器允许材料通过舱门进入，舱门内有一定的压力阻止微生物的进入。物品可通过无菌传递进入隔离器，整个传递过程中可保持隔离器内部空间和外部环境完全隔离。隔离器内部能够反复进行灭菌，内壁可用杀孢子剂处理，以去除所有的生物负载，灭菌完成后，隔离器通过高效空气过滤器（HEPA）或更高级别的空气过滤器向其内部输送洁净空气来维持内部的无菌环境。隔离器的使用从根本上避免了操作人员与实验用物品的直接接触，操作人员无需穿着专用洁净服，而是通过隔离器上的操作手套或半身操作服对舱内物品、仪器进行操作。手套-袖套组件或半身操作服是隔离器舱体不可分割的一部分，它们由柔软的材料制成且与所采用的灭菌剂兼容。因此，使用隔离器进行无菌检验，可以避免实验用物品和辅助设备被污染，提高了无菌试验结果的准确性。一．无菌检查用隔离器的结构 隔离器一般是由不锈钢、玻璃、硬质塑料或软质塑料（如聚氯乙烯）建成。隔离器的结构一般包括： 1.空气处理系统 用于无菌检测的隔离器应配备可截留微生物的高效空气过滤系
统（或更高级别的过滤系统）。静态时，隔离器内部环境的洁净度要求应达到我国药品生产质量管理规范(GMP)现行版中A级空气洁净度的要求。当隔离器与外界环境有直接开口时，内部应通过持续足够的正压来维持隔离器内部的无菌环境。 2. 传递接口及传递门 灭菌后的培养基、稀释液和实验用品可以通过带传递功能的灭菌器直接无菌传递到隔离器内。此外，不同的隔离器也可以通过专门设计的快速传递门（RTP）连接，以实现将实验物品在两个或多个隔离器之间进行无菌传递。RTP上未经灭菌的表面通过互锁环或法兰互相叠合，并通过密封圈封闭，从而防止微生物进入隔离器内。 3.灭菌设备 灭菌气体发生器与隔离器之间气体管路的连接，应确保其密封性。在接近隔离器的部位，进气与排气管路上应分别安装有阀门，当气体发生器与隔离器的连接、分离或隔离器进行无菌维持时，进、排气管路阀门应予以关闭。灭菌气体或蒸汽应通过高效空气过滤器（HEPA）进入隔离器内。灭菌结束后须对灭菌气体进行排空，保证在进行无菌检测前，隔离器内部的灭菌气体浓度低于一定值，消除灭菌气体对无菌检测的影响。 4.配套设备与辅助设施 隔离器内部安装无菌检查使用的配套设备与辅助设施，如无菌检查过程中使用的蠕动泵、真空泵及连续环境监控设备，其运行不得对隔离器的内部环境造成影响，配套设备上的电机等关键部件及排气口
假阳性的终结者－无菌检查隔离器 -隔离技术在无菌检查中的应用 Abstract: As the change and update of the China GMP and Pharmacopeia, the requirement of the aseptic process and sterility testing is higher and higher. And the Isolation technology is widely used in pharmaceutical in China. More and more attentions are paid to Sterility Testing Isolator by the pharmaceutical industry. Although the sterility testing has the limitation itself, but it still will be the regulatory required test for release the sterile products. In this paper, the related regulations in the world are introduced. And advantages of apply isolator technology to sterility testing, structure and distinguishing features are also listed. Keywords: Sterility Testing Isolator ，Gas Hydrogen Peroxide Generator，false positive 摘要：随着中国GMP、中国药典相关行业法规的改版，对于无菌生产、无菌检查等要求的提高，隔离技术已经在国内得到了广泛的应用。无菌检查隔离器近些年来也逐渐被越来越多的制药企业所关注。虽然无菌检查本身有着许多局限性，但是目前仍然是法规强制要求的一项重要测试。本文主要介绍与无菌检查隔离器相关的国内外法规，以及隔离器应用于无菌检查的优点, 无菌检查隔离器的结构、应用特点与使用注意事项。 关键词：无菌检验隔离器、气化过氧化氢灭菌器，假阳性 从1980年代中期，无菌检查隔离器，当时也被称为实验室隔离器，首先在欧洲发展起来。隔离器被证实能够提供微生物测试一个最可靠的环境，该环境能够很好的防止微生物对测试用品的污染，并且避免假阳性的产生。并且在全球制药行业得到了广泛的应用。 随着中国药典、GMP的发展，无菌检查隔离器也更多的被国内制药企业关注。本文针对无菌检查隔离器的法规要求，发展技术背景以及设备特点进行了说明。 1 无菌检查隔离器的法规与技术背景 1.1 与无菌检查隔离器相关的法规 在2010年《中国药典》中的《附录XI H 无菌检查法》[1]中规定“无菌检查应在环境洁净度10 000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行，…… 而2014年，《中国药典》对微生物实验室的增补征求意见《附录XVIII G 药品微生物实验室质量管理指导原则》中说明，“无菌检查应在B级背景下的A级单向流洁净区域或D 级背景下的隔离器中进行，……”