华南师范大学生科院微生物思考题二参考答案
2010年微生物复习思考题（二）
比较项目EMP途径ED途径PK途径HM途径
磷酸戊
糖酮解
酶途径
磷酸己
糖酮解
酶途径
ATP 2 1 1 2.5 0
还原力2（NADH+H+）NAD+H+
NADPH+H+
NADH+H+0 12(NADPH+H+)
特征性酶磷酸果糖激酶，它
的存在意味着该
微生物具有TMP
途径
2-酮-3-脱
氧糖酸-6-
磷酸裂解酶
磷酸戊
糖酮解
酶
磷酸己
糖酮解
酶
转酮(或醛)醇酶
主要特点绝大多数生物所
共有的代谢途径
少数EMP途
径不完整的
微生物特有
的糖酵解途
径，反应步
骤简单，但
产能低，可
独立存在
产能低以HMP
途径为
基础，
磷酸己
糖酮解
酶催化
两步反
应，产
能高
非产能途径，可为
生物合成大量的还
原力，其中间代谢
产物（如磷酸戊糖）
可作为重要物质
(如核酸)生物合成
原料，不可独立存
在
主要发酵产物
乙醇1，甘油2，乙
醇、乙酸、甘油3，
乙醇4，乳酸5，乳
酸、乙酸、甲酸、
乙醇、琥珀酸6，
丁二醇7，丙酮、
丁醇、乙酸8，丁
酸9
乙醇（细菌
乙醇发酵）
乳酸、乙
醇（异型
乳酸发
酵）
乳酸、
乙酸
（双岐
发酵）
参与双岐发酵
1分子果糖-6-磷酸由磷酸己糖酮解酶催化裂解为赤藓糖-4-磷酸和乙酰磷
酸；
另1分子果糖-6-磷酸则与赤藓糖-4-磷酸反应生成2分子磷酸戊糖，而其中1分子核糖-5-磷酸在磷酸戊糖酮解酶的催化下分解成甘油醛-3-磷酸和乙酰磷酸
1分子葡萄糖经磷酸己糖酮解酶途径生成1分子乳酸、1.5分子乙酸以及2.5分子ATP
3什么是Stickland反应，举例说明
Stickland反应是两个氨基酸之间的一个氨基酸作为氢（电子）供体，另一个氨基酸作为氢（电子）受体时的氧化-还原脱氨基反应。它是微生物在厌氧条件下将一个氨基酸的氧化脱氨与另一个氨基酸的还原脱氨相偶联的一类特殊发
酵。例如：甘氨酸和丙氨酸之间的Stickland反应总反应式为：
2H
2N-CH
2
COOH+CH
2
CH(NH
2
）COOH+ADP+Pi+2H
2
O→3CH
3
COOH+CO
2
+3NH
3
+ATP
4化能自养微生物是什么？化能自养细菌的能量代谢的特点
化能自养生物：以CO2为主要或唯一碳源，从还原态无机化合物（NH
4+、NO
3
-、
H
2S、S0、H
2
和Fe2+等）的生物氧化获的能量和还原力[H]的微生物。
能量代谢特点：1、无机底物上脱下的氢（电子）直接进入呼吸链通过氧化
磷酸化产能。2、由于电子可从多处进入呼吸链，所以有多种多样的呼吸链。3、产能效率，即氧化磷酸化效率（P/O值）通常要比化能异养细菌的低。所以代时长，生长缓慢，细胞产率低
5什么是亚硫酸氧化酶途径？什么是APS途径
硫化物氧化的第一个产物都是SO
3
2-，其通过亚硫酸氧化酶途径或腺苷磷酸硫
酸（APS）途径氧化为SO
4
2-和产能
亚硫酸氧化酶途径中，由细胞色素-亚硫酸氧化酶将SO
32-直接氧化成为SO
4
2-，
并通过电子传递磷酸化产能。大多数亚硫酸通过这条途径氧化。
APS途径中，亚硫酸与AMP反应放出2个电子生成APS，放出的电子经细胞色素系统传递给O
2
，此过程中通过电子传递磷酸化生成ATP。APS与Pi反应转
变成ADP与SO
4
2-的过程中通过底物水平磷酸化产能。在腺苷酸激酶的催化下，2
分子ATP转变成1分子ADP与1分子AMP，所以2分子SO
3
2-经APS途径氧化产生3分子ATP，其中2分子经电子传递磷酸化产生，1分子ATP通过底物水平磷酸
化形成，每氧化1分子SO
3
2-产生1.5分子ATP。
6什么是细菌沥滤（Bacterial leaching），举例说明细菌沥滤的过程？
细菌沥滤：人类利用氧化亚铁硫杆菌和氧化硫杆菌等嗜酸性氧化铁和硫的细菌，，具有氧化硫化物矿中的硫和硫化物的能力，从而将硫化矿中的重金属通过转化成水溶性重金属硫酸盐，从低品位矿中浸出的过程。
以蓝铜矿的细菌沥滤为例：1、氧化池中氧化亚铁硫杆菌将硫氧化成H
2SO
4
，
并与FeSO
4作用生成浸矿剂Fe
2
(SO
4
)
3
；2、低品位碎矿中的铜在细菌氧化生成的
浸矿剂Fe
2(SO
4
)
3
的作用下，以CuSO
4
的形式被浸出；3、用铁屑置换出CuSO
4
中的
铜并收集。
7如何理解细菌的光合作用?
细菌的光合作用：能将光能转换成为ATP形式化学能的细菌——光合细菌，以光为能源，利用CO
2
(光能自养)和有机碳化合物(光能异养)作为碳源，通过电子传递产生ATP(光和磷酸化)的作用。
固定CO
2
的途径自养微生物类
型
特点
卡尔文循环产氧光合细菌、不氧光合细菌中的紫色细菌及化能自养细菌
还原性三羧酸循环途绿色细菌每次循环固定3分子CO
2
，需要还原态铁氧还蛋白，产物为丙酮酸。
径
乙酰CoA途径产乙酸菌、产
甲烷菌与某些
硫酸盐还原细
菌
不是循环途径，关键酶是一氧化碳脱氢酶，需要THF
和类咕啉等辅酶，每次固定2分子CO
2
，产物为乙酸。
乙酸的甲基由1分子CO
2
经过THF和类咕啉参与的一系
列酶促还原反应而来；乙酸的羧基由另一分子CO
2
经一氧化碳脱氢酶作用而来。
固氮是还原分子氮合成氨的过程，需要大量能量和还原力。能量以ATP形式供应，还原力以NAD(P)H+H+或铁还原蛋白(Fd·2H)的形式提供，还原分子氮形成氨的作用由双组分固氮酶复合体催化。固氮酶组分I为固氮酶，是铁钼蛋白；固氮还原酶，是铁蛋白。
固氮分两个阶段：1、固氮酶的形成阶段：NAD(P)H+H+的电子经载体铁还原蛋白(Fd)或黄素氧还蛋白(Fld)传递到组分II的铁原子上形成还原型组分II，它先与ATP-Mg结合生成变构的组分II-Mg-ATP复合物；然后再与此时已与分子氮结合的组分I一起形成1：1的复合物——固氮酶。
2、固氮阶段：固氮酶分子的一个电子从组分II-Mg-ATP复合物转移到组分I的铁原子上，由此再转移给钼结合的活化分子氮。通过6次这样的电子转移，将1分子氮还原成2分子NH
3
。
10好氧固氮菌防止氧伤害其固氮酶的机制是什么？
1、固氮菌保护固氮酶的机制
(1)呼吸保护：以较强的呼吸强度迅速耗去固氮部位周围的氧，以使固氮酶处于无氧的微环境中
(2)构象保护：一种起着构象保护功能的蛋白质——Fe-S蛋白质II，在氧分压增高时与固氮酶结合，使其构象改变并失去固氮活力；一旦氧浓度降低，该蛋白从酶解离，固氮酶恢复原有的构象和固氮能力。
2、蓝细菌保护固氮酶的机制
(1)分化有异形胞的丝状细菌在异形胞中进行固氮作用。异形胞有很厚的细胞壁；缺乏产氧光合系统II；有高的脱氢酶和氢化酶活力，使得异形胞保持高度的无氧或还原状态；有高的超氧化物歧化酶活力，有解除氧毒害的功能；其呼吸强度也高于邻近的营养细胞。
(2)没有异形胞分化的蓝细菌有的将固氮作用与光合作用分开进行；有的在束状群体中央失去光合系统II的细胞中进行固氮；有的通过提高细胞内过氧化物酶或超氧化物歧化酶活力以解除氧毒害，保护固氮酶。
3、根瘤菌保护固氮酶的机制
根瘤菌以类菌体形式生活在豆科植物根瘤中。类菌体周围有类菌体周膜包着，膜上有一种能与氧发生可逆性结合的蛋白——豆血红蛋白(Lb)，它与氧的亲和力极强，起着调节根瘤中膜内氧浓度的功能，氧浓度高时与氧结合，低时则释放。
11细菌肽聚糖如何合成？青霉素、万古霉素、杆菌肽如何抑制肽聚糖的合成？
肽聚糖的合成：第一阶段：在细胞质中合成胞壁酸五肽。
(1)葡萄糖→N-乙酰葡糖胺-UDP(G-UDP) →N-乙酰胞壁酸-UDP(M-UDP)
(2) M-UDP→”Park”核苷酸(UDP-N-乙酰胞壁酸五肽)
第二阶段：在细胞膜上由N-乙酰胞壁酸五肽与N-乙酰葡糖胺合成肽聚糖单体——双糖肽亚单位。
细菌肽聚糖合成抑制物抑制机理
青霉素转肽作用被青霉素所抑制，青霉素是D-
丙氨酰-D-丙氨酸的结构类似物，两者
互相竞争转肽酶的活性中心。
万古霉素抑制肽聚糖单体合成中，焦磷酸-类脂
的解离
杆菌肽抑制肽聚糖单体合成中,磷酸与磷酸-
类脂的分解
方
法
机理
诱导法采用物理、化学因子使微生物细胞生长到某个阶段而停下来，使先到达该阶段的微生物不能进入下一生长阶段，待全部群体细胞都到达该生长阶段后，再出去该因子，是全部群体细胞同时进入下一个生长阶段，以达到诱导微生物细胞同步生长的目的。
选择法
对非分支的单细胞微生物来说，处于同一生长阶段的同步细胞，它们的体积和质量大致相等，处于不同生长阶段的细胞，体积和质量大小不等。因而可用膜过滤或密度梯度离心的方法，选择处于同一生长阶段的细胞。
连续培养：在一个恒定容积的流动系统中培养微生物，一方面以一定速率不
断加入新的培养基，另一方面以相同的速率流出培养物(菌体和代谢产物)，以使培养系统中的细胞数量和营养状态保持恒定，即处于稳态。
分批培养：将微生物至于一定容积的培养基中，经过培养生长，最后一次收获的培养方式。分批培养中，培养基依次加入，不予补充，不再更换，随着微生物活跃生长，培养基中的营养物质被逐渐消耗，代谢废物逐渐积累产生毒害作用，必然会是生长速率下降并最终停止生长，导致衰亡期的到来。
总细胞计数法血细胞计数法
涂片计数法
比浊法
活菌计数法涂布平板法
倒平板法
微生物生长量的测定方法湿重法
干重法
含氮量测定法
DNA含量测定方法
其他生理指标
丝状微生物菌丝长度的测定方法培养基表面菌体生长速率测定方法
培养料中菌体速率测定法
单个菌丝顶端生长速率测定法
丝状真菌的营养菌丝的生长主要以极性的顶端生长方式进行。菌丝生长所需要的蛋白质、脂肪核糖类主要在亚顶端区域合成，新生的微跑囊由内质网(或高
第一章 一.微生物有哪些主要类群？有哪些特点？ 答：类群：1.真核细胞型；2.原核细胞型：细菌，放线菌，衣原体，支原体，立克次式体； 3.非细胞型：病毒。 特点：1.体小，面积大 2.吸收多，转化快3.生长旺，繁殖快4.分布广，种类多 5.适应强，易变异二.你认为现代微生物学的发展有哪些趋势？ 答：研究领域有制药、治理环境污染等，微生物的基因科学，微生物病毒学，现代微生物学已发展出很多的分支学科，如病毒学，微生物基因组学，应用微生物（生物农药，浸矿微生物等），病源微生物（主要指细菌），海洋微生物，古细菌等，现代微生物学的研究主要集中在菌种的遗传背景，市场化应用等，食品微生物快速检测技术、食用菌的生产、功能性成分的提取等。 三.简述微生物与制药工程的关系。 答：1.人类除机械损伤外的疾病都是由微生物造成的 2.微生物又是人用来防治疾病的常用方法 3.微生物在自然环境中分布广泛来源很多 4.微生物的代谢产物相当多样，可用于生物制药 5.微生物和人之间的关系，涉及人、微生物、植物的协同进化 6.遗传学与生态学 名词对照： 古菌域：Archaea 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，古菌域为其中一大类别。（不确定）细菌域：bacteria 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，细菌域为其中一大类别。（不确定）真核生物域：Eukarya 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，真核生物域为其中一大类别。（不确定） 微生物：microorganism 是所有形态体积微小的单细胞或者个体结构简单的多细胞以及没有细胞结构的低等生物的通称。 第二章 一.比较下列各队名词 ①.原核微生物与真核微生物：原核微生物没有明显的细胞核，无核膜，核仁，无染色体，其细胞核为拟核，细胞内么有恒定的内膜系统，核糖体为70S型，大多为单细胞微生物。真核微生物有明显细胞核，有各种细胞器，核糖体为80S型。 ②.真细菌与古菌：相同点：以甲硫氨酸起始蛋白质的合成，核糖体对氯霉素不敏感，RNA聚合酶和真核细胞的相似，DNA具有内含子并结合组蛋白。 不同点：细胞膜中的脂质是不可皂化的，细胞壁不含肽聚糖等。 ③.原生质体与球形体：原生质体是脱去细胞壁的细胞，是由原生质分化而来，具体包括细胞膜和细胞质以及细胞器；球形体：指在螯合剂等存在的条件下用溶菌酶部分除去革兰氏阴性菌的细胞壁而形成的缺损型细胞。 ④.鞭毛、菌毛和性菌毛：鞭毛是一端连于细胞膜，一端游离的、细长的波形纤丝状物。菌毛为一些菌体表面的非鞭毛的细毛状物，菌毛是许多革兰氏阴性菌菌体表面遍布的比鞭毛更为细、短、直、硬、多的丝状蛋白附属器。其化学组成是菌毛蛋白，菌毛与运动无关；性菌毛在少数革兰阴性菌，比普通菌毛略微稍粗，一个菌体只有1～4根，通常由质粒编码。带有性菌毛的细菌具有致育能力。 ⑤.芽孢与孢子：芽孢是有些细菌（多为杆菌）在一定条件下，细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。孢子是细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。 二.比较革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构，并说明革兰氏染色的原理。
工业微生物菌种的选育、保藏与培养 自然环境中的微生物是混杂生长的，要想得到生产某一目的产物的野生菌株，就需要采取一定的方法将它们分离出来。菌株分离（separation）就是将混杂着各种微生物的样品按照实际需要和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对它们进行分离、筛选，进而得到所需微生物的过程。菌株分离和筛选是获得目的菌种的两个重要环节。菌株的分离要根据生产实际需要、目的代谢产物的性质、可能产生所需目的产物的微生物种类、微生物的分布、理化特性及生活环境等，设计选择性高的分离方法，才能快速地从环境或混杂了多种微生物样品中获得所需菌种。筛选方法也很重要，在设计筛选方案时有两点必须注意，即所采用方法的选择性和灵敏度。微生物细胞内含物及其周围的培养基成分非常复杂，目标产物往往又含量极低。因此，需要建立灵敏度高、快速、专一性强的检测方法。 菌种收集和筛选途径： （1）向菌种保藏机构索取有关的菌株，从中筛选所需菌株。 （2）由自然界采集样品，如土壤、水、动植物体等，从中进行分离筛选。 （3）从一些发酵制品中分离目的菌株，如从酱油中分离蛋白酶产生菌，从酒醪中分离淀粉酶或糖化酶的产生菌等。该类发酵制品经过长期的自然选择，具有悠久的历史，从这些传统产品中容易筛选到理想的菌株。 发酵工业对菌种的要求如下：①能在廉价原料制成的培养基上生长，且生成目的产物产量高、易于回收；②生长较快，发酵周期短；③培养条件易于控制；④抗噬菌体及杂菌污染的能力强；⑤菌种不易变异退化，以保证发酵生产和产品质量的稳定；⑥对放大设备的适应性强；⑦菌种不是病原菌，不产生任何有害的生物活性物质和毒素。 菌种筛选主要步骤： 调查研究及查阅充分的资料筛选 ↓↓ 设计实验方案初筛（1株1瓶）↓确定采集样品的生态环境↓ 采样复筛（1株3～5瓶） ↓确定特定的增殖条件↓结合初步工艺条件摸索增殖培养再复筛（1株3～5瓶）↓确定特殊的选择培养基及可能的↓ ↓定性或半定量快速检出法3～5株平板分离↓ ↓单株纯种分离原种斜面↓生产性能试验及毒性试验↓确定发酵培养基础条件菌种鉴定 一、菌种的分离筛选 一）样品采集与预处理 总的原则是：样品的来源越广泛，获得新菌种的可能性越大。特别是在一些极端的环境中，如高温、高压、高盐等极端环境中，可找到能适应苛刻环境压力的微生物类群。 1、从土壤中采样 土壤由于具备了微生物所需的营养、空气和水分，是微生物最集中的地方。从土壤中几乎可以分离到任何所需的菌株，空气、水中的微生物也都来源于土壤，所以土壤样品往往是首选的采集目标。一般情况下，土壤中含细菌数量最多，且每克土壤的含菌量大体有如下的递减规律：细菌（108）>放线菌（107）>霉菌（106）>酵母菌（105）>藻类（104）>原生动物（103），其中放线菌和霉菌指其孢子数。但各种微生物由于生理特性不同，在土壤中的分布也随着地理条件、养分、水分、土质、季节而有很大的变化。因此，在分离菌株前要根据分离筛选的目的，到相应的环境和地区去采集样品。
微生物习题集 第一章绪论 一、术语或名词 1．微生物(microorganism)因太小，一般用肉眼看不清楚的生物。这些微小生物包括：无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒)；具原核细胞结构的真细菌、古生菌以及具真核细胞结构的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、单细胞藻类、原生动物等。但其中也有少数成员是肉眼可见的。 2．微生物学(microbiology)研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学，分离和培养这些微小生物需要特殊技术。 3．分子微生物学(molecularmicrobiology)在分子水平上研究微生物生命活动规律的科学。4．细胞微生物学(cellularmicrobiology)重点研究微生物与寄主细胞相互关系的科学。 5．微生物基因组学(microbic genomics)研究微生物基因组的分子结构、信息含量及其编码的基因产物的科学。 6．自生说(spontaneousgeneration)一个古老的学说，认为一切生命有机体能够从无生命的物质自然发生的。 7．安东·列文虎克(AntonyvanLeeuwenhoek，1632—1723)荷兰商人，他是真正看见并描述微生物的第一人，他利用自制放大倍数为50～300倍的显微镜发现了微生物世界(当时被称之为微小动物)，首次揭示了一个崭新的生物世界——微生物界。 8．路易斯·巴斯德(LouisPasteur，1822—1895)法国人，原为化学家，后来转向微生物学研究领域，为微生物学的建立和发展做出了卓越的贡献，成为微生物学的奠基人。主要贡献：用曲颈瓶实验彻底否定了“自生说”，从此建立了病原学说，推动了微生物学的发展；研究了鸡霍乱，发现将病原菌减毒可诱发免疫性，以预防鸡霍乱病；其后他又研究了牛、羊炭疽病和狂犬病，并首次制成狂犬疫苗，证实其
1.工业分析所用的分析方法,按其在生产上的应用及完成时间不同可分为标准分析法和快速分析法. 2.快速分析法的特点是分析速度快,分析误差往往比较大. 3.自然界的水称为天然水. 4.天然水可分为降水,地面水和地下水三大类. 5.用采样器从一个采样单元中一次采得的一定是物料叫子样. 6.含并所有采样的子样称为原始平均式样. 7.含有所有采取的子样称为原始平均式样. 8.应采取一个原始平均式样的物料的总量称为分析化学子样单位. 9.工业物料按其特性值的变异性类型可以分为两类即均匀物料和不均匀物料. 10.在一个采样对象中应布采集样品较好的个数称为子样数目. 11.在运输工具上斜线发布点.置,末个子择点至少距车角1cm. 12.在物料堆中采样,应将表层0.1m厚的部分用铲子锄去. 13.通过机械是人工发将大块的物料粉碎成一定细度物料的过程称为破碎. 14.将最大颗粒的物料分散至25cm左右,称为粗碎 15.将最大颗粒的物料分散至25cm左右,称为粗碎 16.将25cm左右的物料分散至5cm左右的称为中碎 17.将25cm左右的物料分散至5cm左右的称为中碎 18.将5cm左右的物料分散至0.15cm左右的称为细碎 19.将5cm左右的物料分散至0.15cm左右的称为细碎 20.将0.15cm左右的物料分散至0.074cm以下的称为粉碎 21.将0.15cm左右的物料分散至0.0745cm以下的称为粉碎 22.试样的制备一般经过破碎,过筛.混匀,缩分,四个工序 23.粉碎后的物料需经过筛分.使物料达到要求的粒度. 24.混匀的方法有人工混匀和机械混匀两种 25.在不改变物料平均组成的情况下,通过步骤,逐步减少试样的过程称为缩分. 26.常用的缩分的分析方法有分样器缩分法和四分法. 27.将试样与酸性熔剂混合,置于适当的容器中,早高温下进行分解,生成易溶于水的产物,称为熔融分解法. 28.常用的碱性熔剂有Na2NO2,K2CO3,NaOH等. 29.在硅酸盐系统分析中,常用采用Na2CO3,而不是K2CO3. 30.艾士卡试剂法测矿石中全硫量属于烧结分析法. 31.在用Na2CO3熔融时,应才采用铂坩埚 32.在用Na2CO3熔融时,应采用镍坩埚. 33.水质指标按其性质可分物理指标,化学指标和微生物指标三类.
微生物复习思考题（三） 1.什么是定向育种，如何在生产中应用？ 定向育种是指在某一特定条件下，长期培养某一微生物菌群，通过不断转接传代以积累其自发突变，并最终获得优良菌株的过程。 2.什么是诱变育种，结合微生物试验课的内容，物理诱变的原理及注意事项。 3. 诱变育种是通过人工方法处理微生物，使之发生突变，并运用合理的筛选程序和方法，把适合人类需要的优良菌株选育出来的过程。 4. 物理诱变的原理：通过紫外线，x射线和γ射线，快中子，激光和热的处理，使突变加速产生。 5.注意事项： 1.选择起始菌株时注意选取具有有利性状的菌株，以及对诱变剂的敏感性 2.敏感期和合适对象的选择 3.诱变剂要选取有效诱变剂，通常两种交替使用，诱变剂多致癌，使用小心 4.诱变剂使用量要注意，高剂量可能负突变率高，偏低的剂量中正突变率高 3.诱变育种的原则和营养型缺陷的筛选？ 原则：出发菌株的挑选；敏感期和合适对象的选择；诱变剂的选择；诱变剂量的选择；初筛；复筛。 营养缺陷型：指某一菌株在诱变后丧失了合成某种营养成分的能力，主要是合成维生素，氨基酸及嘌呤，嘧啶的能力，使其在基本培养基中不能正常生长，
而必须在此培养基中加入相应物质才能生长的突变体。 筛选方法：中间培养，淘汰野生型，营养缺陷型检出（点种法，夹层检出法，限量补充培养基检出法，影印法），营养缺陷型鉴定（缺陷营养类别的确定，缺陷营养因子的确定）。 4.什么是基因工程，基因工程中的酶学及简要操作过程？ 基因工程：指用人工合的方法，通过体外基因重组和载体的作用，使新构建的遗传物质组合进入新个体，并在新个体中得以稳定地遗传和表达的过程。 基因工程中的酶：限制性核酸内切酶，限制性核酸外切酶，反转录酶和连接酶。 操作过程：获目的基因；体外重组；载体传递；选择或筛选。（250页） 5.什么是合成生物学，什么是菌种退化和复壮及菌种保藏的原来喝方法？ 合成生物学：通过设计和构建自然界中不存在的人工生物系统，以解决人类社会的重要问题。包括：一，设计和构建新的生物零件，组件和系统；二，对现有的，天然存在的生物系统进行重新设计和改造，以供人类利用。 退化：指群体中退化细胞在数量上占一定数值后，表现出菌种生产性能下降的现象。 复壮：因为在退化的菌种中仍有一些保持原有菌种特性的细胞，故有可能采取一些相应措施，使这些细胞生长、繁殖，以更新退化的菌株，称之为菌种的复壮。
什么是微生物？有哪些主要类群？ 定义：微生物是所有形体微小、单细胞或结构较为简单的多细胞生物、甚至没有细胞结构的生物的通称。 种类：微生物类群十分庞杂，包括： 无细胞结构的病毒、类病毒、拟病毒等， 属于原核生物的细菌、放线菌、立克次氏体、衣原体等， 属于真核生物的酵母菌和霉菌，单细胞藻类、原生动物等。 非细胞：病毒、朊病毒 原核生物：细菌、支原体、放线菌 真核生物：酵母、真菌等 一些国家的微生物教学体系内容中还涉及藻、地衣、线虫、原生动物等 微生物有哪些主要特点？举例加以说明。 体形微小，结构简单 易变异，适应性强：变异率10－6 易于培养与繁殖：大肠杆菌20min/代 体积小，比表面积大：易于营养物质的吸收 种类多，分布广：海洋、硫矿、热泉 微生物的发展经历了几个阶段？各阶段的代表人物为谁？ 感性认识阶段（史前时期） 形态学发展阶段（初创时期）1664年，英国人虎克（Robert Hooke）曾用原始的显微镜对生长在皮革表面及蔷薇枯叶上的霉菌进行观察。 生理学发展阶段（奠基时期）法国人巴斯德（Louis Pasteur）（1822～1895）发现并证实发酵是由微生物引起的彻底否定了“自然发生”学说 德国人柯赫（Robert Koch））微生物学基本操作技术方面的贡献细菌纯培养方法的建立（1843～1910b）设计了各种培养基，实现了在实验室内对各种微生物的培养 微生物快速发展时期 青霉素的发现 大量抗生素的发现 发酵工业技术的发展 分子生物学发展阶段（成熟时期)微生物成熟时期 1950s DNA双螺旋的发现， 1970 基因工程技术、分子生物学发展 4.试述微生物学的奠基人及其贡献。 1676年，微生物学的先驱荷兰人列文虎克（Antonyvan leeuwenhoek）首次观察到了细菌他没有过大学，是一个只会荷兰语的小商人，但却在1680年被选为英国皇家学会的会员。巴斯德发现并证实发酵是由微生物引起的彻底否定了“自然发生”学说；免疫学——预防接种,首次制成狂犬疫苗巴斯德消毒法：60～65℃作短时间加热处理，杀死有害微生物 .柯赫（1）微生物学基本操作技术方面的贡献细菌纯培养方法的建立设计了各种培养基，实了在实验室内对各种微生物的培养流动蒸汽灭菌染色观察和显微摄影;对病原细菌的研究作出了突出的贡献,具体证实了炭疽杆菌是炭疽病的病原菌,发现了肺结核病的病原菌（1905年获诺贝尔奖,证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——著名的柯赫原则
微生物学复习题和参考答案（农学类) 涂国全编写 2010年05月 第一章绪论 一、复习题(30题） １.什么是微生物？简述其3大特点和所属类群。 ２.什么是马铃薯晚疫病?试述其在历史上对人类的一次严重危害。 3.如何理解“在近代科学中，对人类福利最大的一门科学要算是微生物学了”？ 4.人类认识微生物世界的主要障碍是什么？在微生物学发展早期,学者们是如何逐一克服的? 5．微生物学的发展经历了哪５个时期?各期的代表人物是谁? ６.试简介列文虎克(A．vanLeeuwｅｎhｏek，1６3２~17２3），并说明他对微生物学的贡献。 ７．巴斯德学派在微生物学发展中有何重大贡献? ８．科赫学派在微生物学发展中有何重大贡献？ 9.由巴斯德设计的著名曲颈瓶试验，有何重大的理论与实际意义？ 10.巴斯德、科赫等微生物学研究成果的“横向扩散”,产生了哪些分支学科?各学科的代表人物是谁？ 11.微生物学史上的“成熟期”始于何时、何人?试简述本期的特点。 12.在医疗保健事业的发展史中，与微生物学有关的“六大战役”是什么?它们对人类的进步起了什么作用? １３．在发酵工业和生物工程产业中有哪些关键性的工艺技术?试述青霉素的大规模生产对当代发酵工业和生物工程所产生的巨大影响。 １４.什么是生物工程(学)？它由哪5大具体工程组成？它们间的相互关系是怎样的？ 15．简述微生物在生态平衡和环境保护中的作用。 １６．微生物学对生物学基础理论的研究有何重大贡献?为什么微生物可以发挥这种作用？ 1７.为什么说微生物是基因工程的支柱?
１８.在经典遗传学发展为分子遗传学的过程中，微生物起了什么作用?为什么能起这种作用? 1９.微生物学有哪６类分科？试简述分类依据并各举数例。 20.试列举10项起源微生物学研究的特有操作技术。 ２1.试列举微生物学中3项最重要的独特技术，并分别说出其创始人、基本原理及其对发展微生物学的贡献。 2２.何谓科赫法则（Ｋｏch￠s Pｏstulaｔes)? 23．微生物的“生长旺、繁殖快”特性对发酵生产有何实际意义?试举例说明之。 2４.为什么说在微生物的５大共性中,“体积小、面积大”这一条是最根本的? 2５.微生物的“生长旺、繁殖快”特性对生物学基础理论的研究有何意义？试举例说明之。 26.微生物界有哪几项特点可称得上是“生物界之最”?(应答10项) ２7．当前人类正面临哪５大危机?解决危机的关键是什么？为什么说在解决这些危机中微生物可以发挥其不可替代的作用? 28简述现代微生物学发展的6大趋势。 2９．为什么说“2１世纪是生物学世纪”？ ３0．简述微生物学在那几方面的突出贡献使人类的平均寿命延长了几十年。为什么？ 二、参考答案(５４小题） １．答案定义:一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。 特点:个体微小(＜0.1 mm）；构造简单；进化地位低。 类群：原核类：细菌,放线菌，蓝细菌;立克次氏体,支原体，衣原体。 真核类：真菌（酵母菌，霉菌)，原生动物,显微藻类。 非细胞类:病毒,类病毒,朊病毒。（注:也可用表解法解答) 2．答案一种由病原性真菌引起的严重植物病害。1９世纪中叶，在欧洲发生了一场马铃薯晚疫病大流行，毁灭了5/6的马铃薯,个别地方甚至颗粒无收，并引起爱尔兰等地大量居民饿死或逃往北美。 起因：当地过分强调种植单一高产粮食作物~马铃薯;当时连年气候异常,长期阴雨,温湿度过高，十分有利于病原真菌的生长繁殖和传播。 3.答案不同的人群或个人有其不同的幸福观或福利观。 一般都集中在追求钱、权、利、名、业、健(健康长寿)等几个方面。 健康在幸福观上应居首位；在近代多门科学中,对人类健康的关系最为密切、已作出了重要贡献并将进一步作出更大贡献的科学就是微生物学。 4.答案主要障碍有以下几点： 个体微小：列文虎克利用其自制的显微镜,克服了肉眼的局限性，首次观察到多种微生物的个体形态；
闪点：在规定条件下，易燃性物质受热后所产生的油蒸汽与周围空气形成的混合气体，在遇到明火时发生瞬间着火的最低温度。 苯胺点：是指石油产品与等体积的苯胺互相溶解成为单一溶液所需要的最低温度。 有效磷：在磷肥分析中，水溶性磷化合物和柠檬酸溶性化合物中的磷。 工业分析的任务是测定大宗工业物料的平均组成 简述题 1. 什么是工业分析? 其任务和作用是什么? 答：工业分析是分析化学在工业生产上的具体应用。 工业分析的任务是研究工业生产的原料、辅助材料、中间产品、最终产品、副产品以及生产过程中各种废物的组成的分析检验方法。 工业分析起着指导和促进生产的作用，例如，通过工业分析能评定原料和产品的质量，检查工艺过程是否正常。从而能够及时地、正确地指导生产，并能量经济合理的使用原料、燃料，及时发现、消除生产的缺陷，减少废品。提高产品质量。工业分析是国民经济的许多生产部门（如化工，冶金、环保、建材等等）中不可缺少的生产检验手段。 2.工业分析的特点是什么? 工业分析的方法是什么? 什么是允许差? 答：工业分析的特点是：○ 1 工业生产中原料、产品等的量是很大的，往往以千、万吨计，而其组成又很不均匀，但在进行分析时却只能测定其中很小的一部分，因此，正确采取能够代表全部物料的平均组成的少量样品，是工业分析中的重要环节，是获得准确分析结果的先决条件。 ○2 对所采取的样品，要处理成适合分析测定的试样。多数分析操作是在溶液中进行的；因此，在工业分析中，应根据测定样品的性质，选择适当的方法来分解试样。 ○ 3 工业物料的组成是比较复杂的，共存的物质对待测组份可能会产主干扰，因此，在研究和选择工业分析方法时，必须考虑共存组份的影响，并且采取相应的措施消除其干扰。 ○ 4 工业分析的一个重要作用，是用来指导和控制主产的正常进行，因此，必须快速、准确地得到分析结果，在符合生产所要求的准确度的前提下，提高分析速度也是很重要的，有时不一定要达到分析方法所能达到的最高准确度。 工业分析方法，按其在生产上完成分析的时间和所起的作用可以分为快速分析法和标准分析法。○ 1 快速分析法：主要用以控制生产工艺过程中最关键的阶段，要求能迅速得到分析结果，而对准确度则允许在符合生产要求的限度内适当降低，此法多用于车间生产控制分析。○2 标准分析法：标准分析法是用来测定生产原料及其产品的化学组成，并以此作工艺计算、财务核算和评定产品质量的依据，所以此法必须准确度高，完成分析的时间可适当长些。此项工作通常在中心试验室进行。该类方法也可用于验证分析和仲裁分析。 允许差：即允许误差又称公差，允许误差是指某一分析方法所允许的平行测定值间的绝对偏差。或者说，是指按此方法进行多次测定所得的一系列数据中最大值与最小值的允许界限即极差。 3、工业分析样品进行取样的基本原则是什么? 采样的基本原则就是使采得的样品具有充分的代表性。对于均匀物料的采样，原则上可以在物料任意部位进行，采样过程不应带进任何杂质，且尽量避免物料的变化（吸水、氧化等）。对于非均匀物料，应随机采样，对所得样品分别测定，汇总检测结果,得到总体物料的特性平均值和变异性的估计量。 5．简述氟硅酸钾容量法测定SiO2方法原理，写出反应方程式；计算式。 答：试样经NaOH熔融SiO2转为NaSiO3在强酸介质中过量的K+，F-的存在下生成K2SiF6 2K++H2SiO4+F-+4H+=K2SiF6+3H2O 用沸水将K2SiF6水解 K2SiF6+3H2O（沸水）=2KF+H2SiO3+4HF 用NaOH标定产生的HF W（SiO2）= [(CV)NaOH M SiO2]/(4M样)*100% 1、矿石试样通常需要分解制成溶液然后再进行分析，请简述试样分析的方法。 答:常用的分解方法大致可分为溶解和熔触两种:溶解就是将试样溶解于水、酸、碱或其它溶液 中，熔融就是将试样与固体溶剂混合，在高温下加热，使欲测组分转变为可溶于水或酸的化合物. 简述钢和生铁的主要区别。 答：钢和生铁因含碳量的不同，性质也有明显差异。钢是指含碳量低于2%的由铁、碳等元素组成的形变合金。除了碳、硅、锰、磷、硫五大元素外，为了使钢具有某些特殊性能，常加入铬、镍、铝、钨、铜、铌、钒等元素； 同时，锰和硅的含量也较高。生铁是含碳量高于2%的铁碳合金，其他的元素含量也与钢有所不同。常用的钢铁
第一章细菌的形态与结构 1.细菌有哪3种形态 2.细菌的基本结构和特殊结构有哪些特殊结构各有何作用 +菌和G-菌细胞壁的结构由哪几部分组成 4.青霉素和溶菌酶为什么不能杀灭革兰阴性菌 5.简述革兰染色法操作步骤 参考答案 1 基本形态三种：球菌；杆菌；螺形菌 2基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞 荚膜功能：抗吞噬作用：是病原菌的重要毒力因子 抗杀菌物质损伤：如溶酶体、补体 粘附作用：形成生物膜与致病性有关 鞭毛功能；有鉴别意义, 鞭毛蛋白有抗原性：H抗原 某些细菌的鞭毛与致病有关 菌毛功能：细菌的黏附结构 介导细菌在局部定植 与细菌的致病性密切相关 性菌毛还能传递细菌的毒力和耐药性 芽孢功能：具有很强的抗高温、抗干燥、抗化学消毒剂和抗射线能力 3 革兰阳性菌：由肽聚糖和磷壁酸组成。其中肽聚糖又由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成三维立体结构。革兰阴性菌：由肽聚糖和外膜组成。肽聚糖仅由聚糖骨架、四肽侧链构成二维平面结构 4 G-有外膜阻止抗菌素进入；保护细胞壁组分肽聚糖不受溶菌酶分解 5 革兰染色法步骤： 涂片→固定→结晶紫初染→碘液媒染→95%酒精脱色→复红复染 观察结果：Ｇ＋菌：紫色Ｇ－菌：红色 第二章细菌的生理 2.细菌生长曲线分哪4个阶段 3.细菌根据对氧的需要程度分为哪几种类型 4.细菌合成代谢产物有哪几种 5.常用的消毒剂有哪些种类 6.简述化学消毒剂的杀菌机制 7简述紫外线杀菌的作用机制 8.在温度和时间相同的情况下，为什么湿热灭菌法的效果比干热法好 参考答案 2.迟缓期、对数期、稳定期、衰退期四阶段 3．专性需氧菌2）专性厌氧菌3）兼性厌氧菌4）微需氧菌 4．源质、毒素和侵袭性酶、抗生素、细菌素、维生素、色素等 5．①酚类②醇类③重金属盐类④氧化剂⑤表面活性剂 6.①使菌体蛋白质变性或凝固②破坏细菌的酶系统③改变细菌细胞壁或胞浆膜的通透性，导致细菌死亡7．其波长在200-300nm有杀菌作用，其中以265-266nm最强，这与细菌DNA吸收光谱一致。细菌DNA吸收紫外线后，使一DNA条链上两个相邻胸腺嘧啶公假结合成二聚体，改变了DNA分子构型，干扰了DNA 的复制和转录，导致细菌变异或死亡。
名词解释： 微生物、微生物学、纯培养、纯培养物无菌技术、灭菌、消毒、过滤富集培养 简答题： 1、微生物的特点有那些？ 2、Mullis的贡献对我们有什么启发？ 3、列文虎克对微生物学有什么贡献？4 、巴士德和柯赫对微生物学的发展有什么贡献？5、柯赫证病律的具体内容是什么？6 、拂来明对微生物学的贡献是什么？7 、我国著名的微生物学家有那些？分别作出了什么贡献？8、干热灭菌和高压蒸汽灭菌有什么差别？9、举出几种常用的消毒药品和方法？10、纯培养有几种方法？11、为什么活菌记数和直接记数有很大的差别？12、按照功能和营养成分培养基有几种类别？13、菌种保藏的基本原理是什么？1 4、保藏微生物的基本方法有那些？1 5、已发现的微生物的形态有几种？1 6、芽孢杆菌和芽孢梭菌有何异同？1 7、举例说明非芽孢杆菌的特点？1 8、古细菌有那三大类？1 9、根霉、曲霉和青霉的形态特征如何？20、吃什么食用菌可以预防感冒？21、吃什么食用菌可以增加智力？22、原核微生物和原核微生物的主要类群有那些？23、球菌的基本形态有几种？24、细菌的基本结构组成有那些？25、细菌的特殊结构有那些？26、细胞壁及其功能是什么？27、肽聚糖的基本组成是什么？28、G+ 和G-细胞壁的结构有和异同？29、Gram染色的基本过程如何？30、细菌为什么可以分为G+ 和G-两种？31、无壁细胞有那几种？32、聚-B-羟丁酸有什么功能？33、气泡有什么功能？34、什么是糖被、根据物理特征不同可以分为几类？35、糖被的化学组成和功能是什么？36、鞭毛有何功能和种类？37、鞭毛的一般结构和基体的组成如何？38、什么是芽孢、有何特点？39、芽孢耐热的分子机制如何？40、为什么放线菌介于真菌和细菌之间而更接近于细菌？41、放线菌的繁殖方式有几种？42、在什么条件下使用火焰灭菌？43、稀释倒平板法和涂平板法有什么差别？
《工业分析》考试试卷（A 卷） 一、单项选择（在备选答案中选出一个正确答案，并将其号码填在题干后的括号内。每题2分，共20分） 01．标准的有效期是 年。 （ ） A 、 三年 B 、四年 C 、 五年 D 、六年 02．分光光度法与 有关。 （ ） A 、入射光的波长 B 、液层的高度 C 、溶液的浓度 D 、溶液的多少 03． 对工业气体进行分析时，一般测量气体的（ ）。 A 、重量 B 、体积 C 、物理性质 D 、化学性质 04. 不能用于分析气体的的仪器是 。 （ ） A 、折光仪 B 、奥氏仪 C 、电导仪 D 、色谱仪 05. 在国家、行业标准的代号与编号GB 18883－2002中GB 是指（ ）。 A 、强制性国家标准 B 、推荐性国家标准 C 、推荐性化工部标准 D 、强制性化工部标准 06. 测定水样化学需氧量，取水样100mL ，空白滴定和反滴定时耗用的硫酸亚铁铵标准溶液分别为和,其浓度为L ，该水样的化学需氧量为（ ） A 40mg/L ； B 160mg/L ； C 80mg/L ； D 8mg/L 07、分析纯化学试剂标签颜色为： （ ） A 、绿色 B 、棕色 C 、红色 D 、蓝色 08、液态物质的粘度与温度的关系（ ）。 A 、温度越高，粘度越大 B 、温度越高、粘度越小 C 、温度下降，粘度增大 D 、没有关系 09、直接法配制标准溶液必须使用 （ ） A 、基准试剂 B 、化学纯试剂 C 、分析纯试剂 D 、优级纯试剂 10、使用碳酸钠和碳酸钾的混合熔剂熔融试样宜在______坩锅进行。 A 、银； B 、瓷； C 、铂； D 、金 二、填空（每空1分，共32分） 01．《中华人民共和国标准化法》将我国标准分为 、 、 、 。 02．煤的工业分析是指包括 、 、 、 四个分析项目的 总称。 03. 试样的制备过程大体分为 、 、 、 四个步骤。 04. 肥料三要素是指 、 、 。 05. 煤其中主要含有C n H m ，CO 2，O 2，CO ，CH 4，H 2，N 2等气体，根据吸收剂的性质，分析煤气时，吸收顺序应该为 吸收 ， 吸收 ， 吸收 ， 吸收 后再用燃烧法测定 和 ，最后剩余的气体是 。 06. 煤的发热量的表示方法有三种，即 、 、 。 07. 对于钢铁中碳的分析，通常都是采用转化为 的方式进行分离富集的。 08. 试样的分解方法一般有 和 。 三、简答题（每题6分，共24分） 01. 艾士卡－BaSO 4重量法测定煤中全硫所采取的艾士卡试剂的组成是什么？各个试剂的作用是什么？ 02. 彼得曼试剂的组成是什么？03. 用氯化铵重量法测定二氧化硅时，使用氯化铵的目的是什么？
《工业微生物育种》课后思考复习题 第一章 1．工业微生物育种在发酵工业中的作用如何？其目的是什么？ 2．工业微生物发展经历了哪几个阶段？ 3．用于工业微生物育种的菌种有哪些特点？ 第二章第三章 1．革兰氏阳性和阴性菌的细胞壁结构有何差异？它们对溶菌酶和青霉素的敏感有何不同？2．缺壁细菌有哪些类型和异同？制备缺壁细菌主要有哪些途径？ 3．在原生质体制备时，为什么不同微生物要选择不同的酶？举例说明。 4． F质粒。 5．准性生殖。 6．基因组、基因、密码子、简并、同义密码子的概念是什么？ 7．起始密码子和终止密码子有哪些？ 8．什么是可读框？密码子阅读的方向是沿着mRNA的什么方向进行？ 第四章 1、什么是基因突变、突变体、表型、基因型、野生型？ 2、突变可分为哪两大类？突变的分子机制是什么？ 3、基因突变（点突变）有哪些类型？它们有何不同？ 4、突变引起遗传性状改变包括那几个类型？它们如何定义？ 5、突变型的种类有哪些？ 6、微生物抗性的来源主要有哪三个方面？ 7、什么是选择性突变和非选择性突变？ 8、简单描述突变体形成的过程及其影响因素。 9、突变体修复有哪几种主要类型？它们如何定义？ 10、什么是表型延迟？为什么诱变后要进行后培养（中间培养）再分离？ 11、诱变剂主要有哪三类？ 12、简述紫外线照射诱变育种的原理、方法和基本步骤。 13、化学诱变剂主要有哪四类？ 14、烷化剂的作用机制是什么？ 15、简述亚硝基胍诱变育种的原理、过程和安全注意事项。 16、生物诱变剂按照诱变方式主要分为哪三类? 第六章 1、什么是菌株分离和筛选？ 2、分离筛选的基本步骤有哪些？ 3、抑制不需要菌类的常用方法有哪些？ 4、好气微生物分离的常用方法有哪些？它们的原理如何？ 5、平皿生化反应分离有哪些主要方法？原理如何？ 6、如何用焦性没食子酸法分离厌气菌？ 7、初筛和复筛的要求有什么不同？ 2、第七章 3、1、育种的准备工作有哪些？ 2、诱变育种的基本路线是怎样的？ 3、试设计诱变选育营养缺陷型菌株、产蛋白酶细菌、产有机酸霉菌的整个方案，并做出说明。 4、什么是增变菌株？ 5、诱变剂的最适剂量如何选择？ 6、诱变剂对产量性状的诱变趋势是怎样的？ 7、影响突变率有哪几个因素？ 8、一般筛选程序是怎样的？ 9、简述琼脂块大通量筛选方法的过程和特点。 10、什么是营养缺陷型？原养型？野生型？ 11、什么是完全培养基？基本培养基？补充培养基？限量补充培养基？ 12、试述营养缺陷型选育、分离、筛选、鉴定的过程。 13、营养缺陷型检出有哪几种常用方法？原理如何? 14、营养缺陷型缺陷类型测定和生长谱测定的基本原理是什么？ 15、什么是温敏突变株？ 4、第八章 1、什么是初级代谢和次级代谢？ 2、初级代谢调节最有效的手段是什么？ 3、酶合成调节与酶活性调节的区别。 4、反馈阻遏和反馈抑制的区别。 5、什么是诱导和阻遏？ 6、什么是末端产物阻遏和分解代谢物阻遏？ 7、反馈抑制有哪6种基本类型？ 8、什么是代谢调节控制育种？其常用方法有哪些？ 9、组成型突变株和抗分解调节突变株选育的基本方法有哪些？ 10、抗反馈调节突变株选育有哪三种常用方法？ 11、真正的回复突变和基因抑制突变有何不同？ 12、代谢控制育种的常用手段有哪些？ 第九章 1、什么是杂交？杂交育种主要包括哪三类方法？微生物杂交的本质是什么？ 2、霉菌的杂交主要是通过什么途径来实现？酵母的杂交主要通过什么途径？
实验一、微生物的简单染色思考题 1油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注意些什么？ 答：油镜在使用时必须在载玻片与物镜之间滴加镜头油。油镜使用过程中要注意两点： （1）、使用后镜头的清洁：镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度，用完 油镜必须进行“三擦” （观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜 纸沾取少量二甲苯（或者乙醇乙醚溶液）擦去残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯， 后将镜体全部复原）。 （2）、 .观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。当目视接目镜时，特别 在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。 2、使用油镜时，为什么必须用镜头油？ 答：在使用普通显微镜时，当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。 3、镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？ 答：低倍镜视野比较大，能看到的范围大，容易找到观察的目标，然后在用放大倍数高的高倍镜或油镜有目的的观察。 实验二、革兰氏染色 （1）为什么必须用培养24 h 以内的菌体进行革兰氏染色？ 答： 24h 以内的菌体处于活跃生长期，菌体细胞壁具有典型特征，而处于老龄的革兰氏阳 性细菌壁结构开始发生变化，染色时会被染成红色而造成假阴性 （2）要得到正确的革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？哪一步是关键步骤？为什么？ 答：应注意如下几点： 其一，选用活跃生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性； 其二，涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性； 其三，脱色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性 （3）当你对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作正确，结果可靠？ 答：当要确证未知菌的革兰氏反应时，可用已知菌进行混合涂片，使二者染色条件保持一致，如果已知菌的结果与预期相符，则证明操作操作正确，结果可靠。 实验三、微生物的显微镜直接计数法 1、在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点？ 答： 1）优点：直观、快速、操作简单。 2）缺点：
微生物学教程(第二版周德庆)-复习思考题答案+微生物学练习题
微生物学复习思考题 绪论 1、什么叫微生物？微生物包括哪些类群？ 微生物是一切肉眼看不见或者看不清的微小生物的总称。包括属于原核类的细菌（真细菌和古生菌）、放线菌、蓝细菌（旧称蓝绿藻或蓝藻）、支原体、立克次氏体、衣原体；属于真核类的真菌（酵母菌、霉菌和蕈菌）、原生动物和显微藻类；以及属于非细胞类的病毒和亚病毒（类病毒、拟病毒和阮病毒）。 2、了解五界系统、六界系统、三域学说及其发展，说明微生物在生物界中的地位。 五界系统：动物界、植物界、原生生物界（包括原生动物、单细胞藻类和粘菌等）、真菌界和原核生物界（包括细菌蓝细菌等）。 六界系统：1949年Jahn提出包括后生动物界、后生植物界、真菌界、原生生物界、原核生物界和病毒界；1977年我国学者王大耜提出动物界、植物界、原生生物界（包括原生动物、单 2
细胞藻类和粘菌等）、真菌界和原核生物界（包括细菌蓝细菌等）、病毒界；1996年美国的P.H.Raven提出包括动物界、植物界、原生生物界、真菌界、真细菌界和古细菌界。 三域学说：细菌域、古细菌域、真核生物域。 3、了解微生物学的发展史，明确微生物学研究的对象和任务。 整个微生物学发展史是一部逐步克服认识微生物的重要障碍，不断探究它们生命活动规律，并开发利用有益微生物和控制、消灭有害微生物的历史。它分为：史前期、初创期、奠基期、发展期、成熟期。 对象：在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态结构、生理代谢、遗传变异、生态分布和分类进化等生命活动基本规律。 任务：发掘、利用、改善和保护有益微生物，控制、消灭或改造有害微生物，为人类社会的进步服务。 4、微生物的五大共性（特点）是什么？表示微 3
实验一 细菌的简单染色和细菌形态的观察 一、实验原理 简单染色采用一种染料对菌体进行染色，常用结晶紫、美蓝、碳酸复红等碱性染料。染色后，菌体与 背景形成鲜明对比，在显微镜下很容易被识别。通过简单染色方法可以观察细菌的菌体形态特征和菌 体的排列方式。 观察菌体形态 简单染色 （只用一种染料） 观察菌体排列方式 染色方法 革兰氏染色 鉴别 鉴别染色 抗酸性染色 （利用两种染料） 芽孢染色 观察特殊结构 荚膜染色 鞭毛染色 二、实验步骤： 涂片 干燥 固定 染色 水洗 干燥 镜检 三、思考题 1、制备细菌染色标本时，应该注意哪些环节？ 答；（1）涂片：开始所加无菌水液滴不要太大，否则不易干燥； 取菌量要适宜且要涂抹均匀，避免过大造成堆积，而难以看清细 胞个体形态 同时也应避免取菌量太少而难以在显微镜视野中找到细胞。 （2）无菌操作取菌：一定要等接种换冷却后再取菌，以免高温使菌体变形； （3）干燥固定：否则细胞会破裂或变形； （4太长，否则菌体形态则会发生改变。 （5）水洗：倾去染色液后，用水沿着菌膜四周冲洗，注意勿使水流直接冲洗菌膜 部位，水流不宜过急，过大，至流出水无色为止； 2、为什么要求制片完全干燥才能用油镜观察？ 答：使用油镜时，物镜与标本间的介质为香柏油（N=1.515），不仅增加了透明度，
而且会提高了分辨率。 若制片不完全干燥后，就用油镜观察，则N会减小，分辨率D也会变小。而且还会造成油水两相不互溶，所以制片要求完全干燥后才能用油镜观察。 3、如果涂片未经加热固定，将会出现什么问题？如果加热温度过高，时间太长，又会怎样呢？ 答：加热固定的作用是使细胞质凝固，使细胞固定在载玻片上，这种加热处理还可以杀死大多数细菌而且不破坏细胞形态，而且还可增加细胞对染料亲和力。（1）如果图涂片未经加热固定，则细胞无法固定在载玻片上，在染色水洗后会被水流冲走。 （2）如果加热温度过高，时间太长，则会使细菌形态发生变化甚至破裂。 4、为什么细菌染色常用碱性染料？什么情况下用酸性染料？ 答：（1）细菌染色常用碱性染料，原因在于微生物细胞在碱性、中性及弱酸性溶液中通常带负电荷，而碱性染料电离后染色部分带正电荷，很容易与细胞结合使其着色。 （2）当细胞处于酸性条件下（如细菌分解糖类产酸）所带正电荷增加时，可采用酸性染料染色。 实验二细菌的革兰氏染色法 一、实验原理 革兰氏染色是细菌染色中重要的鉴别染色方法之一。通过革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性菌（G+）和革兰氏阴性菌(G-)。 G+和G-主要是由于细胞壁结构和化学成分的差异引起脱色能力的不同。 ①结晶紫初染和碘液媒染:在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的化合物。 ②乙醇脱色：细胞壁较厚结晶紫与碘液复合物留在细 G+ 肽聚网层次多和交联致密且不含类脂 细胞壁较薄结晶紫与碘复合物溶出，细 G- 胞壁退成无色 肽聚网层薄和交联差，外膜层类脂含量高
《微生物学》复习思考题 第1章绪论 1.名词解释：微生物，微生物学 2.用具体事例说明人类与微生物的关系。 3.微生物包括哪些类群？它有哪些特点? 4.为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人? 5.试根据微生物的特点，谈谈为什么说微生物既是人类的敌人，更是人类的朋友？ 6.简述21世纪微生物学发展的主要趋势。 第2章原核微生物 1.名词解释：肽聚糖、溶菌酶、核区、异形胞 2.根据革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁通透性来说明革兰氏染色的机制。 3.什么是芽孢？它在什么时候形成？试从其特殊的结构与成分 说明芽孢的抗逆性。渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制的？ 4.立克次氏体有哪些与专性活细胞内寄生有关的特性？它们有什么特殊的生活方式？衣 原体与立克次氏体都为专性活细胞内寄生，两者有何差别？ 5.螺旋体和螺旋菌有何不同？ 6.什么是缺壁细菌？试简述四类缺壁细菌的形成、特点和实践意义。 7.举例说明细菌的属名和种名。 8.试述古生菌和细菌的主要区别。 9.试根据细菌和古生菌细胞结构的特点，分析并举例说明为什么它们能在自然界中分布 泛。 10.细菌（狭义）、放线菌、霉菌、酵母在繁殖方式上各有什么特点？ 第三章真核微生物 1.名词解释：真菌、霉菌、酵母菌、真酵母、假酵母。 2.举例说明霉菌与酵母菌与人类的关系。 3.试列表说明真核微生物与原核微生物的主要区别。 4.试图示真核生物“9+2型”鞭毛的横切面构造，并简述其运动机理。 5.细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同？ 6.试比较细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并讨论它们的原生 质体的制备方法。 7.丝状真菌的营养菌丝和气生菌丝各有何特点？它们可以分化出哪些特殊结构？ 8.试述真菌的孢子类型和特点。 第4章病毒 1. 名词解释：病毒粒子、烈性噬菌体、温和噬菌体、溶源性转变、前噬菌体、溶源性细菌、 裂解量、类病毒、朊病毒。 2. 病毒区别于其他生物的特点是什么? 根据你的理解，病毒应如何定义? 3. 试述病毒的主要化学组成及其功能。 4. 病毒壳体结构有哪几种对称形式? 毒粒的主要结构类型有哪些?
第四章微生物的营养和培养基 A部分习题 一、选择题 1. 大多数微生物的营养类型属于：（） A. 光能自养 B. 光能异养 C. 化能自养 D. 化能异养 2. 蓝细菌的营养类型属于：（） A．光能自养 B. 光能异养C．化能自养 D. 化能异养 3. 碳素营养物质的主要功能是：（） A. 构成细胞物质 B. 提供能量 C. A，B 两者 4. 占微生物细胞总重量70%-90% 以上的细胞组分是：（） A. 碳素物质 B. 氮素物质 C. 水 5. 能用分子氮作氮源的微生物有：（） A. 酵母菌 B. 蓝细菌 C. 苏云金杆菌 6. 腐生型微生物的特征是：（） A. 以死的有机物作营养物质 B. 以有生命活性的有机物作营养物质 C. A，B 两者 7. 自养型微生物和异养型微生物的主要差别是：（） A. 所需能源物质不同 B. 所需碳源不同 C. 所需氮源不同 8. 基团转位和主动运输的主要差别是：（） A. 运输中需要各种载体参与 B. 需要消耗能量 C. 改变了被运输物质的化学结构 9. 单纯扩散和促进扩散的主要区别是：（） A. 物质运输的浓度梯度不同 B. 前者不需能量，后者需要能量 C. 前者不需要载体，后者需要载体 10. 微生物生长所需要的生长因子（生长因素）是：（） A. 微量元素 B. 氨基酸和碱基 C. 维生素 D. B，C二者 11. 培养基中使用酵母膏主要为微生物提供：（） A. 生长因素 B. C 源 C. N 源 12. 细菌中存在的一种主要运输方式为：（） A. 单纯扩散 B. 促进扩散 C. 主动运输 D. 基团转位 13. 微生物细胞中的C素含量大约占细胞干重的：（） A. 10% B. 30% C. 50% % 14. 用牛肉膏作培养基能为微生物提供：（） A. C 源 B. N 源 C. 生长因素 D. A，B，C 都提供