微生物复习思考题（三）
1.什么是定向育种，如何在生产中应用？
定向育种是指在某一特定条件下，长期培养某一微生物菌群，通过不断转接传代以积累其自发突变，并最终获得优良菌株的过程。
2.什么是诱变育种，结合微生物试验课的内容，物理诱变的原理及注意事项。
3. 诱变育种是通过人工方法处理微生物，使之发生突变，并运用合理的筛选程序和方法，把适合人类需要的优良菌株选育出来的过程。
4. 物理诱变的原理：通过紫外线，x射线和γ射线，快中子，激光和热的处理，使突变加速产生。
5.注意事项：
1.选择起始菌株时注意选取具有有利性状的菌株，以及对诱变剂的敏感性
2.敏感期和合适对象的选择
3.诱变剂要选取有效诱变剂，通常两种交替使用，诱变剂多致癌，使用小心
4.诱变剂使用量要注意，高剂量可能负突变率高，偏低的剂量中正突变率高
3.诱变育种的原则和营养型缺陷的筛选？
原则：出发菌株的挑选；敏感期和合适对象的选择；诱变剂的选择；诱变剂量的选择；初筛；复筛。
营养缺陷型：指某一菌株在诱变后丧失了合成某种营养成分的能力，主要是合成维生素，氨基酸及嘌呤，嘧啶的能力，使其在基本培养基中不能正常生长，
而必须在此培养基中加入相应物质才能生长的突变体。
筛选方法：中间培养，淘汰野生型，营养缺陷型检出（点种法，夹层检出法，限量补充培养基检出法，影印法），营养缺陷型鉴定（缺陷营养类别的确定，缺陷营养因子的确定）。
4.什么是基因工程，基因工程中的酶学及简要操作过程？
基因工程：指用人工合的方法，通过体外基因重组和载体的作用，使新构建的遗传物质组合进入新个体，并在新个体中得以稳定地遗传和表达的过程。
基因工程中的酶：限制性核酸内切酶，限制性核酸外切酶，反转录酶和连接酶。
操作过程：获目的基因；体外重组；载体传递；选择或筛选。（250页）
5.什么是合成生物学，什么是菌种退化和复壮及菌种保藏的原来喝方法？
合成生物学：通过设计和构建自然界中不存在的人工生物系统，以解决人类社会的重要问题。包括：一，设计和构建新的生物零件，组件和系统；二，对现有的，天然存在的生物系统进行重新设计和改造，以供人类利用。
退化：指群体中退化细胞在数量上占一定数值后，表现出菌种生产性能下降的现象。
复壮：因为在退化的菌种中仍有一些保持原有菌种特性的细胞，故有可能采取一些相应措施，使这些细胞生长、繁殖，以更新退化的菌株，称之为菌种的复壮。
原理：人为地创造合适的环境条件，使微生物的代谢处于不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态。这些人工环境主要从低温、干燥、缺氧三方面设计。
常用方法：斜面保藏法，液体石蜡覆盖保藏法，载体保藏法，悬液保藏法，寄主保藏法，冷冻干燥保藏法，液氮保藏法
6.谈谈淡水生境，海水生境的微生物？（265）
淡水区域的自然环境多靠近陆地，因此，淡水中的微生物主要来源于土壤、空气、污水或死亡腐败的动植物尸体等。
海水由于有机质的含量低，盐分较高，大部分海水温度较低，而且在深海处有很高的静水压等影响，使能在其中发展的微生物受到一定的限制。但海水内仍有一定种类和数量的微生物存在，如嗜盐菌等。化能自养菌多为硝化细菌微生物在海水中的垂直分布一般规律为：表层主要是好氧性异养菌，低层水体中，主要是厌氧腐生及硫酸还原菌，两层之间紫硫菌较多。在0~10米深的海水中，菌数较少，藻类和原生动物占较大比例，10~50米的海水中，菌数逐渐增加，50米以下，菌数逐渐减少，200米以下，菌数更少，在海底沉积物上，存在大量的微生物。
7.谈谈人体和工农业产品中的微生物？
8. 人体：集体在健康情况下与外界隔绝的组织和体液是不含菌的。在正常情况下生活健康个体各部分的微生物数量和种类相对稳定，且对机体是有益而无害的，称为正常菌群。
9. 工农业：主要有曲霉属，青霉属和链孢霉属
8什么是竞争，互生，共生、拮抗？
竞争：竞争关系是生活在一起的两种微生物，为了生长争夺有限的同一营养或其他共同需要的养料，其中最能适应特殊环境的那些种类将占优势。
互生：是指两种可以单独生活的生物，当它们生活在一起时，通过各自的代谢活动而有利于对方，或偏利于一方的一种生活方式。
共生：是指两种生物共居在一起，相互分工协作、甚至达到难分难解、合二为一的一种相互关系。一旦彼此分离两者就不能很好地生活。地衣是微生物间共生的典型例子，它是真菌和藻类的共生体。
拮抗：指一种微生物在其生命活动过程中，产生某种代谢产物或改变环境条件，从而抑制其他微生物的生长繁殖，甚至杀死其他微生物的现象。
9.微生物在氮素循环中的作用？
固氮作用，同化作用，氨化作用，硝化作用，异化硝酸盐还原与反硝化作用
10.微生物对污染物是如何降解与转化的？
1.农药（细菌、放线菌、真菌）
主要通过：脱卤作用、脱烃作用、对酚、胺、脂的水解作用、氧化作用、还原作用以及环裂解、缩合等方式把化学农药的分子结构改变
2.烃类化合物
主要途径：单末端氧化、双末端氧化、近末端氧化
3.其他有机化合物的微生物降解与转化
一些有机化合物如：表面活性剂、多氯联苯、氰等
微生物对重金属的转化
自然界存在多种重金属，例如，汞、砷、铅、镉、铬等，这些重金属并非生物生活所必需，但达到一定浓度时，会对生物产生抑制和致死作用。微生物虽不能降解重金属，但能通过改变其存在状态，从而改变其毒性。
11.在污水处理中，微生物如何发挥作用？
（一）好氧生物处理
微生物在有氧条件下，吸附环境中的有机物，并将有机物氧化分解成无机物，使污水得到净化，同时合成细胞物质。微生物在污水净化过程，以活性污泥和生物膜的主要成分等形式存在。
1.活性污泥法
又称曝气法。是利用含有好氧微生物的活性污泥，在通气条件下，使污水净化的生物方法。该法已成为处理有机废水的最主要的方法。
2.生物膜法
生物膜法是以生物膜为净化主体的生物处理法。
（二）厌氧生物处理
厌氧生物处理是在缺氧条件下，利用厌氧性微生物（包括兼性厌氧微生物）分解污水中有机物污染物的方法。又称厌氧消化或厌氧发酵法。因为发酵产物产生甲烷，又称甲烷发酵。此法既能消除环境污染，又能开发生物能源，所以备受人们重视。污水厌氧发酵是一个极为复杂的生态系统，它涉及多种交替作用的菌
群，各要求不同的基质和条件，形成复杂的生态体系。
12.什么是大肠菌群数，谈谈粪便中的肠道致病菌对水体污染？
大肠菌群数是水体受过粪便污染的指标。大肠菌群数量的表示方法有两种，其一是"大肠菌群数"，亦称"大肠菌群指数"，即1L水中含有的大肠菌群数量。其二是"大肠菌群值"，指水样中可检出一个大肠菌群数的最小水样体积（mL）。
粪便中肠道致病菌对水体的污染是引起霍乱、伤寒等流行病的主要原因。检测水体大肠杆菌群的方法有MPN法和滤膜法。
13.什么是生物修复？什么是发酵，发酵的基本过程。
生物修复也称生物整治、生物恢复、生态修复或生态恢复，指利用处理系统中的生物，主要是微生物的代谢活动来减少污染物的浓度或使得无害化的过程。
发酵是指微生物在厌氧条件下氧化有机物，并以不完全氧化的中间代谢产物为电子受体的产能代谢过程。
发酵的基本过程为：①菌种培养与扩大②培养基和发酵设备的灭菌③发酵过程控制（pH和氧的控制）④下游加工过程
14.什么是抗生素，抗生素的作用机制及细菌如何产生耐药性？
抗生素：微生物和其他生物产生的在低浓度抵抗它种微生物生长、寄生虫和肿瘤细胞的生长的物质。
抗生素的作用机制：①抑制细胞壁的合成②破坏细胞膜的功能③抑制蛋白质的合成。
细菌耐药性是细菌产生对抗生素不敏感的现象，产生原因是细菌在自身生存过程中的一种特殊表现形式。天然抗生素是细菌产生的次级代谢产物，用于抵御其他微生物，保护自身安全的化学物质。人类将细菌产生的这种物质制成抗菌药物用于杀灭感染的微生物，微生物接触到抗菌药，也会通过改变代谢途径或制造出相应的灭活物质抵抗抗菌药物。
耐药性产生的机制大致分为以下几种：1.产生灭活酶；2.改变靶部位；3.增加代谢拮抗物；4.改变通透性；5.加强主动外排系统；
15．什么是传染，什么是免疫，病原微生物的致病力包括哪些？
传染【infection】指病原微生物侵入机体后，克服机体的防御机能，在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理过程。
免疫【immune】是机体识别和排除抗原异物的一种保护反应。在正常情况下对机体有利，在异常情况下可能对机体有损害。
病原微生物的毒力或致病力主要包括一下几个方面：
1．抗吞噬性作用；2.病原体微生物胞外酶的致病作用（透明质酸酶、胶原酶、链激酶、血浆凝固酶、溶血素和凝血素、神经氨酸酶、磷脂酶和卵磷脂酶）；
3.毒素的致病作用（外毒素和内毒素）
16.免疫作用有哪些功能？
免疫作用有三大功能：
1.免疫保护作用：正常情况下，机体能排除和消灭侵入的病原微生物，称为抗传染免疫。但异常情况下则对机体有害，为超敏反应
2.免疫自身稳定：排除自身在代谢过程中产生的废物和破损的细胞，从而保持内环境的稳定。若此功能失调，会导致自身免疫病，如红斑狼疮
3.免疫监视作用：处理一些物理、化学、病毒以及遗传等因素作用下出现突变的细胞，若此功能不足或出现异常，就会导致突变细胞的增值蔓延而形成恶性肿瘤
17.有哪些免疫器官和免疫细胞，如何发挥作用。
免疫器官分为中枢免疫器官（骨髓、胸腺和法氏囊或类囊器官）和周边免疫器官（脾和淋巴结）。免疫细胞分为干细胞、淋巴细胞（T细胞、细胞毒T细胞、B细胞、NK细胞和K细胞）和抗原呈递细胞，还有其他免疫细胞（肥大细菌、树突状细胞、单核细胞和巨噬细胞等）。
如何作用可以阅读书本327—331.
18.激活补体的两条途径是怎么样的？
补体系统的激活是复杂的连锁反应过程，在人体天然防御机能中，普遍认为有两条激活途径。一是免疫复合物与C1q结合所启动的经典途径，又称C1激活途径。另一条则是由脂多糖（LPS）等物质直接激活C3而启动的替代途径,又称旁路激活途径。
19.什么是补体，补体的生物学作用有哪些？
人和动物血清中正常存在的一组与免疫相关的并有酶活性的蛋白质，因在抗原抗体反应中，有补充抗体的能力，称为补体。
一般情况下，补体在体液中以无活性的酶原状态存在，当抗原与特异性抗体
结合为抗原抗体复合物时，抗体构象发生变化，暴露出补体结合位点，从而激活补体。激活后的补体攻击侵入细胞，导致细胞（细菌）溶解。
生物学作用：1.溶解和杀伤细胞；2.中和病毒作用；3.趋化作用；4.免疫黏附作用；5.过敏毒素作用；6.补体与凝血。
20.什么是抗原、抗体，抗体IgG的结构是怎么样的？抗体的生物学作用？
抗原【antigen，Ag】又称免疫原，是一类能被机体特异性免疫系统所识别，能刺激机体产生免疫应答并能与应答物质发生反应的物质。因此抗原物质有两种能力：一种是抗原性或免疫原性；另一种是反应原性。具有免疫原性和反应性的抗原称为完全抗原，具有反应性，而没有免疫原性的抗原称为半抗原。抗原的基本特性有异物性、一定的大小、一定的分子结构和特异性。
抗体【antibody，Ab】是由抗原刺激人体或动物体的B细胞，由B细胞转化成浆细胞所产生的具有特异性的免疫球蛋白(immunoglobulin,缩写Ig)。血清中的抗体主要是IgG,，
IgM,，IgA，IgD和IgE这五种
抗体IgG的结构：由四条多肽链组成，其中两条相同的
长链叫做重链（H链），两条相同的短链叫做轻链（L链）。
两条重链籍二硫鍵连接起来，呈Y字形，两条轻链又通过二硫鍵连接在Y字形两侧，所以整个免疫球蛋白的分子结构是对称的。
生物学作用：
（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细
胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤.然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用.
（2）激活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体.
（3）结合细胞
（4）与相应抗原特异性结合形成沉淀或细胞集团,最后被吞噬细胞消化分解
21.干扰素的作用机制、干扰素的特性、干扰素的生物学作用？
干扰素：由干扰素诱导剂作用于活细胞后，由活细胞产生的一种蛋白质，当它再作用于其他细胞时，使其他细胞立即获得抗病毒和抗肿瘤等多方面的免疫力。
干扰素的作用机制：干扰素由被病毒感染的细胞产生后进入附近细胞，使其产生一种抗病毒蛋白质，这种蛋白质可干扰病毒mRNA的翻译，从而抑制了新病毒的合成。
干扰素的特性：干扰素具有很高的生物活性，1mg 即具有10亿个活性单位。其抗病毒作用无特异性，由一种诱导剂诱导细胞产生的干扰素可抑制多种病毒的复制，是广谱的抗病毒物质，其保护作用具有种属特异性。
干扰素的生物学作用：
1.抑制病毒的复制，增强天然杀伤细胞杀伤病毒感染细胞的作用。
2.抑制癌细胞的分裂，增强机体抗肿瘤的免疫力，如促进巨噬细胞对肿瘤细胞杀伤作用等。
22.什么是非特异性免疫，机体的屏障结构？
非特异性免疫：同一种的所有个体都具有；大多是机体的“常备”因素，有些是异物入侵后很快就出现的反应（炎症），因而能迅速发生防御作用；没有专一性，对所有入侵的病原微生物均发生作用。
机体的屏障结构：
1.皮肤和粘膜：机体的皮肤和粘膜等结构能起屏障作用以阻挡病原微生物的侵入，但当这一屏障中某个位置破损时病原微生物可入侵
2.血-脑屏障：脑毛细血管内皮细胞层连接紧密及微弱的胞饮作用可阻挡微生物进入脑组织或脑脊液
3.胎盘屏障：母体发生感染时的病原微生物和有害产物不能通过胎盘进入胎儿
23.什么是体液免疫、细胞免疫？
体液免疫：存在与血浆、淋巴和组织液等体液中的抗体与相应的抗原特异性结合，在补体参与下发挥免疫效应
细胞免疫：由活化的T细胞产生的特异性杀伤或免疫炎症称细胞免疫
24.什么是免疫应答，免疫应答的阶段，抗体形成的一般规律及实际应用？
特异性免疫是通过免疫应答实现的，免疫应答是抗原进入机体后，免疫活性细胞对抗原分子识别后而活化、增殖、分化以及最终通过产生抗体和致敏淋巴细
胞及淋巴因子发生免疫效应的一系列复杂的生物学反应过程。
免疫应答的阶段：
1.感应阶段：抗原通过某一途径进入机体，并被免疫细胞识别、递呈和诱导细胞活化的开始时期。
2.反应阶段：接受抗原刺激的淋巴细胞活化和增殖的时期
3.效应阶段：免疫效应细胞和抗体发挥作用将抗原灭活并从体内清除的时期抗体形成的一般规律及实际应用：
1.初次应答：抗原初次进入机体后，都要经过一段潜伏期，才产生抗体，抗体量一般不高，然后逐渐下降。
2.二次应答：一定时期以后，再次注射同样抗原时，抗体量迅速上升到最高水平，可达初次注射水平的10-100倍，在体内维持的时间也较长，抗原类别主要为IgG
3.回忆应答：当初次注射后所产生的抗体在体内完全消失时，如再接触抗原时，又可使该抗体突然上升，叫回忆反应。
几类抗体出现的顺序
如果某种抗原能刺激机体产生几类免疫球蛋白，其在血清中出现的先后顺序也有一定的规律。一般都是IgM最先出现，而后是IgG，IgA出现得最晚。IgA 在IgM及IgG出现两周至1-2个月才能在血流中测出，含量很低，但维持的时间较长。
上述抗体形成规律在预防措施和疾病的早期诊断上具有一定的意义。①预防接种，一般都采用二次或多次接种法，否则仅接种一次，所产生的抗体水平低，维持时间也短，不能达到预防的目的。通过动物制备抗体，也是需要注射多次抗原，才能得到高效价的抗血清；②IgM出现得到早，可用其作早期快速诊断。
25.生物制品
凡是人工免疫用的抗原和抗体制品以及诊断用的抗原和抗体制品均称为生物制品（biologic products）。基本上分为三大类：疫苗、类毒素和免疫血清。前两类用作人工自动免疫，后一类用作人工被动免疫。
（一）疫苗
疫苗是由病原微生物本身加以制备而成。细菌、病毒和立克次氏体等病原微生物制成疫苗，注射机体后，使机体产生特异抗体或致敏淋巴细胞，达到特异性免疫效果。一般由细菌、螺旋体等制成的预防用生物制品称为菌苗，而由病毒、立克次氏体制成的称为疫苗。
1.死菌（疫）苗
2.活菌（疫）苗
3.自身疫苗
4.亚单位疫苗
（二）类毒素
前面已经叙述过，某些病原菌的致病作用主要是由于它们能产生强烈的外毒素，而要使机体对外毒素产生自动免疫力，直接注射外毒素显然是不恰当的，用0.3%～0.4%甲醛液处理外毒素，可以使外毒素不再有毒，但仍保留抗原性，此种经处理的外毒素叫做类毒素。注射类毒素，可以使机体产生对外毒素的免疫力（即抗毒素），因而能预防疾病的发生。最常用的类毒素有白喉类毒素和破伤风类毒素。
（三）免疫血清
含有特异抗体的血清叫做免疫血清，利用免疫血清对人体进行人工被动免疫，使机体立即获得免疫力以达到治疗和应急预防。
25.常用的免疫学技术及应用？
（一）血清学反应：在体外进行的抗原抗体反应称为血清学反应。血清学反应既可用已知抗原检测未知抗体，又可用已知抗体检测未知抗原。
1.凝聚反应
细菌、红细胞等颗粒性抗原与其特异性抗体结合后，在有电解质存在时，互相凝集成肉眼可见的凝集小块，称为凝聚反应。参与凝聚反应的抗原称为凝集原，抗体称为凝集素。
在凝聚反应中，单个抗原体积大，而抗原总面积小，为使抗原和抗体间充分结合，常须稀释抗体（抗血清）。
2.沉淀反应
可溶性抗原，如细菌的外毒素、内毒素、血清、病毒的可溶性抗原和组织浸出液等与相应的抗体结合，在适量电解质存在下，聚合成肉眼可见的白色沉淀，称为沉淀反应。其抗原称为沉淀原，抗体称为沉淀素。在沉淀反应中，抗原分子较小，单位体积内所含的量多，与抗体结合的总面积大，为了使抗原抗体按比例结合，常稀释抗原。
3.免疫荧光技术
抗体与某些特定的荧光物质结合而成为荧光标记抗体，仍能特异性地结合抗
原成为荧光标记的抗体抗原复合物，在荧光显微镜下可被观察到。荧光素与抗体结合能侦察出抗原所在部位，故可用来进行抗原的定位或定性测定。
26.单克隆抗体技术及应用？
将产生抗体的单个B淋巴细胞同骨髓瘤细胞杂交，获得既能产生抗体，又能无限增殖的杂交瘤细胞，并以此生产抗体。
应用：
1.器官移植：如用于肾移植受体的免疫抑制，用单抗OKT3治疗后，OKT3阳性细胞从血液中被有效清除，使肾中淋巴细胞减少
2.肿瘤治疗：单抗与化疗、放疗及手术相结合，是肿瘤治疗的一大发展方向。对弥散性肿瘤，用单克隆抗体治疗较有效
3.自身免疫病治疗：分体外和体内。体外治疗法即用单抗亲和层析柱除去血液中的自身抗体。体内治疗法为注射对自身产生细胞的单抗。
4.免疫缺陷病治疗：CD4为辅助性T细胞上的病毒受体，抗CD4的抗独特型抗体可中和病毒从而阻断其感染
5.解毒：有机磷中毒在农业生产中时有发生，本质为磷对乙酰胆碱酯酶的抑制作用，用抗毒物的单抗能中和此毒的毒性
微生思考题（一） 一、微生物在生物六界中的地位？ 病毒界 原核生物界 真核生物界 真菌界 动物界 植物界 二．微生物的主要特点？ 1．形态微小，结构简单 2．代谢旺盛，繁殖快速 3．适应性强，易变异 4．种类繁多，分布广泛 三．细菌的基本形态，细菌的染色观察 细菌的基本形态：球状 ：(a)单球菌 (b)双球菌 (c)四联球菌 (d)八叠球菌 (e)葡萄球菌 (f)链球菌 杆状： (a)球杆菌 (b)单杆菌 (c)双杆菌 (d)链杆菌 螺旋状：(a) 螺菌 (b)螺旋体 (c)弧菌
四．细菌细胞壁结构与功能？革兰氏染色机理如何区别革兰氏阳性和阴性细菌？ 细菌细胞壁结构 革兰氏阳性菌特点：细胞壁厚度大，20~80 nm；化学组分简单，一般含90%肽聚糖和10%磷壁酸。 革兰氏阴性菌特点：肽聚糖层很薄（仅2~3nm），在肽聚糖层外还有一个外膜，成分较复杂，个壁厚度较G+菌薄，机械强度较G+菌弱。 细胞壁功能：①固定细胞外形和提高机械强度，保护细胞免受外力的损伤；②为细胞生长、分裂和鞭毛运动所必需；③阻拦酶蛋白或抗生素等有害物质进入细胞； ④赋予细菌特有的抗原性和致病性(如内毒素)，并与细菌对抗生素和噬菌体的敏感性密切相关。 革兰氏染色机制 G-：细胞壁薄,肽聚糖含量少,交连程度低,网孔大.又由于有机物质含量高,乙醇溶解了脂类后,网孔更大.所以:结晶紫和碘易被从细胞中抽提出来,速度快,而呈复染沙黄的颜色-红色.
G+：细胞壁厚,肽聚糖含量高,网孔小,经乙醇脱水后,使网孔更小,结晶紫,碘不能被抽提出来,速度慢,而呈紫色. 五．细胞内膜系统，细胞质及其内含物 1．细胞内膜系统 间体——细胞膜向内延伸或折叠形成的一种管状、层状或囊状结构. 载色体——光合细菌的膜囊结构 羧酶体——某些硫杆菌细胞内散布着由单层膜围成的多角体，其内含1，5-二磷酸核酮糖羧化酶. 2.细胞质及其内含物 细胞质（cytoplasm）:是细胞质膜包围的除核区外的一切半透明、胶体状、颗粒状物质的总称，是进行物质代谢及合成核酸蛋白质的场所。 细胞质组成: 水分(约80％)、蛋白质、核酸、脂质、糖类、无机盐 细胞内含物（inclusion body）：储藏物、核糖体、羧酶体等。 1. 核糖体： 合成蛋白质的场所，每个细菌约有1万个70S的核糖体，由30S和50S两个亚基组成。 2. 贮藏性颗粒： 通常较大，为单层膜包围，营养物质过剩时积累，营养物质贫乏使动用。 ①多糖（糖原和淀粉）：碳源和能源贮藏物。细菌在碳源过量而氮源限量的条件下生长是会大量积累糖原。
第一章 一.微生物有哪些主要类群？有哪些特点？ 答：类群：1.真核细胞型；2.原核细胞型：细菌，放线菌，衣原体，支原体，立克次式体； 3.非细胞型：病毒。 特点：1.体小，面积大 2.吸收多，转化快3.生长旺，繁殖快4.分布广，种类多 5.适应强，易变异二.你认为现代微生物学的发展有哪些趋势？ 答：研究领域有制药、治理环境污染等，微生物的基因科学，微生物病毒学，现代微生物学已发展出很多的分支学科，如病毒学，微生物基因组学，应用微生物（生物农药，浸矿微生物等），病源微生物（主要指细菌），海洋微生物，古细菌等，现代微生物学的研究主要集中在菌种的遗传背景，市场化应用等，食品微生物快速检测技术、食用菌的生产、功能性成分的提取等。 三.简述微生物与制药工程的关系。 答：1.人类除机械损伤外的疾病都是由微生物造成的 2.微生物又是人用来防治疾病的常用方法 3.微生物在自然环境中分布广泛来源很多 4.微生物的代谢产物相当多样，可用于生物制药 5.微生物和人之间的关系，涉及人、微生物、植物的协同进化 6.遗传学与生态学 名词对照： 古菌域：Archaea 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，古菌域为其中一大类别。（不确定）细菌域：bacteria 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，细菌域为其中一大类别。（不确定）真核生物域：Eukarya 三域学说分为古菌域、细菌域、真核生物域，真核生物域为其中一大类别。（不确定） 微生物：microorganism 是所有形态体积微小的单细胞或者个体结构简单的多细胞以及没有细胞结构的低等生物的通称。 第二章 一.比较下列各队名词 ①.原核微生物与真核微生物：原核微生物没有明显的细胞核，无核膜，核仁，无染色体，其细胞核为拟核，细胞内么有恒定的内膜系统，核糖体为70S型，大多为单细胞微生物。真核微生物有明显细胞核，有各种细胞器，核糖体为80S型。 ②.真细菌与古菌：相同点：以甲硫氨酸起始蛋白质的合成，核糖体对氯霉素不敏感，RNA聚合酶和真核细胞的相似，DNA具有内含子并结合组蛋白。 不同点：细胞膜中的脂质是不可皂化的，细胞壁不含肽聚糖等。 ③.原生质体与球形体：原生质体是脱去细胞壁的细胞，是由原生质分化而来，具体包括细胞膜和细胞质以及细胞器；球形体：指在螯合剂等存在的条件下用溶菌酶部分除去革兰氏阴性菌的细胞壁而形成的缺损型细胞。 ④.鞭毛、菌毛和性菌毛：鞭毛是一端连于细胞膜，一端游离的、细长的波形纤丝状物。菌毛为一些菌体表面的非鞭毛的细毛状物，菌毛是许多革兰氏阴性菌菌体表面遍布的比鞭毛更为细、短、直、硬、多的丝状蛋白附属器。其化学组成是菌毛蛋白，菌毛与运动无关；性菌毛在少数革兰阴性菌，比普通菌毛略微稍粗，一个菌体只有1～4根，通常由质粒编码。带有性菌毛的细菌具有致育能力。 ⑤.芽孢与孢子：芽孢是有些细菌（多为杆菌）在一定条件下，细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。孢子是细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。 二.比较革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构，并说明革兰氏染色的原理。
微生物复习题 第一章原核微生物的形态、构造和功能 1、概念 磷壁酸、LPS、PHB、糖被、芽孢、伴孢晶体、菌落、菌苔、放线菌、原生质体、原生质球、原核微生物、真核微生物、支原体、立克次氏体、衣原体、鞭毛、菌毛、性毛、弧菌、黄原胶、基内菌丝 2、问答题 图解细菌的基本结构和特殊结构都包括那些？ 试述细菌的三种基本形态。 细菌细胞壁与细胞膜的主要生理功能有哪些？ G+和G-细菌细胞壁构造有何异同？ 缺壁细菌有哪些类型? 脂多糖的主要功能？ 细菌的芽孢有何实践重要性。产芽孢的细菌主要有哪几类？各举一例。 阐述溶菌霉和青霉素抑制细菌的机理？ 什么是革兰氏染色法？它的主要步骤是什么？ 试述革兰氏染色的机理 荚膜的化学成分如何？有何生理功能？ 渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制？ 如何理解“放线菌是介于细菌与丝状真菌间而更接近于细菌的一类微生物”？ 放线菌的菌体形态由哪几部分构成？它们之间有何联系？ 放线菌如何繁殖？ 放线菌的菌落有何特点？ 有一未知细菌培养物，请用本章所学的知识，阐述如何研究它的形态、构造和功能，所需要的知识和技术包括哪些内容？ 第二章真核微生物的形态、构造和功能 1、概念 假菌丝、真菌丝、菌丝体、霉菌 2、问答题 真菌和酵母菌有哪些特点？ 真核生物与原核生物在细胞结构和功能方面有何差异？ 霉菌的营养菌丝和气生菌丝分别能分化出那些特化构造？ 细菌、放线菌、酵母菌、霉菌四大类微生物的菌落有何不同？为什么？ 第三章病毒和亚病毒 1、概念 真病毒、亚病毒、病毒粒、噬菌斑、烈性噬菌体、温和噬菌体、多角体。 2、问答题 病毒有哪些特征？ 病毒核酸有哪些特点？ 典型病毒粒的基本结构。 病毒粒有哪几种对称形式？各举一例。 试述烈性噬菌体的繁殖过程。 一步生长曲线可分为几期，各期有什么特点？ 第四章微生物的营养和培养基
（生物科技行业）微生物实验思考题参考答案及知识 要点
微生物实验思考题参考答案及知识要点 （可能在整理时部分问题未能考虑全面，若有异议，请同学们自行从网络或课本上搜索查找）微生物实验思考题参考答案 一．酵母菌形态观察及死活细胞鉴别 1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 美蓝浓度高了，代谢不太活跃的活细胞也会被染色，从而使观察到的死细胞较多，活细胞较少；反之，则代谢微弱的细胞也能还原美蓝，不被染色，从而使观察到的死细胞较少，活细胞较多。 二.细菌的简单染色和革兰氏染色 1.革兰氏染色中那一步是关键?为什么？你是如何操作的？ 革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色（是脱色时间）。如果脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s）。2.固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同？ 自然死亡的菌体本身已经部分自溶，结构已经改变。固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。 3.不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？ 能。在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G＋），被酒精脱色为革兰
微生物习题集 第一章绪论 一、术语或名词 1．微生物(microorganism)因太小，一般用肉眼看不清楚的生物。这些微小生物包括：无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒(类病毒、拟病毒、朊病毒)；具原核细胞结构的真细菌、古生菌以及具真核细胞结构的真菌(酵母、霉菌、蕈菌等)、单细胞藻类、原生动物等。但其中也有少数成员是肉眼可见的。 2．微生物学(microbiology)研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学，分离和培养这些微小生物需要特殊技术。 3．分子微生物学(molecularmicrobiology)在分子水平上研究微生物生命活动规律的科学。4．细胞微生物学(cellularmicrobiology)重点研究微生物与寄主细胞相互关系的科学。 5．微生物基因组学(microbic genomics)研究微生物基因组的分子结构、信息含量及其编码的基因产物的科学。 6．自生说(spontaneousgeneration)一个古老的学说，认为一切生命有机体能够从无生命的物质自然发生的。 7．安东·列文虎克(AntonyvanLeeuwenhoek，1632—1723)荷兰商人，他是真正看见并描述微生物的第一人，他利用自制放大倍数为50～300倍的显微镜发现了微生物世界(当时被称之为微小动物)，首次揭示了一个崭新的生物世界——微生物界。 8．路易斯·巴斯德(LouisPasteur，1822—1895)法国人，原为化学家，后来转向微生物学研究领域，为微生物学的建立和发展做出了卓越的贡献，成为微生物学的奠基人。主要贡献：用曲颈瓶实验彻底否定了“自生说”，从此建立了病原学说，推动了微生物学的发展；研究了鸡霍乱，发现将病原菌减毒可诱发免疫性，以预防鸡霍乱病；其后他又研究了牛、羊炭疽病和狂犬病，并首次制成狂犬疫苗，证实其
什么是微生物？有哪些主要类群？ 定义：微生物是所有形体微小、单细胞或结构较为简单的多细胞生物、甚至没有细胞结构的生物的通称。 种类：微生物类群十分庞杂，包括： 无细胞结构的病毒、类病毒、拟病毒等， 属于原核生物的细菌、放线菌、立克次氏体、衣原体等， 属于真核生物的酵母菌和霉菌，单细胞藻类、原生动物等。 非细胞：病毒、朊病毒 原核生物：细菌、支原体、放线菌 真核生物：酵母、真菌等 一些国家的微生物教学体系内容中还涉及藻、地衣、线虫、原生动物等 微生物有哪些主要特点？举例加以说明。 体形微小，结构简单 易变异，适应性强：变异率10－6 易于培养与繁殖：大肠杆菌20min/代 体积小，比表面积大：易于营养物质的吸收 种类多，分布广：海洋、硫矿、热泉 微生物的发展经历了几个阶段？各阶段的代表人物为谁？ 感性认识阶段（史前时期） 形态学发展阶段（初创时期）1664年，英国人虎克（Robert Hooke）曾用原始的显微镜对生长在皮革表面及蔷薇枯叶上的霉菌进行观察。 生理学发展阶段（奠基时期）法国人巴斯德（Louis Pasteur）（1822～1895）发现并证实发酵是由微生物引起的彻底否定了“自然发生”学说 德国人柯赫（Robert Koch））微生物学基本操作技术方面的贡献细菌纯培养方法的建立（1843～1910b）设计了各种培养基，实现了在实验室内对各种微生物的培养 微生物快速发展时期 青霉素的发现 大量抗生素的发现 发酵工业技术的发展 分子生物学发展阶段（成熟时期)微生物成熟时期 1950s DNA双螺旋的发现， 1970 基因工程技术、分子生物学发展 4.试述微生物学的奠基人及其贡献。 1676年，微生物学的先驱荷兰人列文虎克（Antonyvan leeuwenhoek）首次观察到了细菌他没有过大学，是一个只会荷兰语的小商人，但却在1680年被选为英国皇家学会的会员。巴斯德发现并证实发酵是由微生物引起的彻底否定了“自然发生”学说；免疫学——预防接种,首次制成狂犬疫苗巴斯德消毒法：60～65℃作短时间加热处理，杀死有害微生物 .柯赫（1）微生物学基本操作技术方面的贡献细菌纯培养方法的建立设计了各种培养基，实了在实验室内对各种微生物的培养流动蒸汽灭菌染色观察和显微摄影;对病原细菌的研究作出了突出的贡献,具体证实了炭疽杆菌是炭疽病的病原菌,发现了肺结核病的病原菌（1905年获诺贝尔奖,证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则——著名的柯赫原则
微生物实验思考题参考答案及知识要点 一．酵母菌形态观察及死活细胞鉴别 1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同对酵母菌死细胞数量有何影响?是分析其原因。 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成为无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 美蓝浓度高了，代谢不太活跃的活细胞也会被染色，从而使观察到的死细胞较多，活细胞较少；反之，则代谢微弱的细胞也能还原美蓝，不被染色，从而使观察到的死细胞较少，活细胞较多。 二. 细菌的简单染色和革兰氏染色 1. 革兰氏染色中那一步是关键?为什么？你是如何操作的？ 革兰氏染色的关键步骤是：乙醇脱色（是脱色时间）。如果脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也可被脱色而被误认为是革兰氏阳性菌。脱色时间的长短还受涂片的厚薄，脱色是玻片晃动的快慢及乙醇用量的多少等因素的影响，难以严格规定（脱色是应当控制速度，脱色时间一般为20—30s）。 2. 固定的目的之一是杀死菌体，这与自然死亡的菌体有何不同？ 自然死亡的菌体本身已经部分自溶，结构已经改变。固定杀死细菌时细菌结构是保持死亡时的状态的。 3. 不经复染这一步能否区分革兰氏阳性菌和阴性菌？ 能。在酒精脱色后，不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G＋），被酒精脱色为革兰氏阴性菌。最后一步用番红染液复染，是为了让结果更清楚。 4. 涂片为什么要固定，固定适应注意什么问题？ a 杀死细菌并使菌体黏附与玻片上； b 增加其对染料的亲和力。 固定时应注意：手持玻片，菌膜朝上，在微火过3次（手指触摸玻片反面，不烫手为宜），固定时应尽可能维持细胞原有形态，防止细胞膨胀或收缩。 三. 霉菌、放线菌的形态观察 1. 镜检时，如何区分基内菌丝与气生菌丝？ 一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到
第二章 1、为什么说Koch等建立的微生物纯培养技术是微生物学建立与发展的基石？一般可用哪些方法获得微生物的纯培养？ 2、微生物的最显著特征就是个体微小，通常只能通过显微镜进行观察。试列举在显微观察中通过改变样品的反差以改善观察效果的技术及方法。 第四章： 试比较营养物质进入微生物细胞的几种方式的特点。 第五章 不同营养类型的微生物在不同条件下产生ATP和还原力的方式与特点。 第六章 细菌的生长繁殖与高等动植物的有哪些异同？ 其典型生长曲线可分几期，其划分依据是什么？ 第七章 思考题：试结合一步生长曲线分析病毒的特点，并与细菌进行比较。 第八章 1、如果二个不同营养缺陷标记（a - b - c + d + 和 a + b + c - d -）的菌株经混合后能产生在基本培养基平板上生长的原养型重组菌株，请设计一个实验来决定该遗传转移过程是转化、转导还是接合? 2、自然遗传转化与人工转化之间有什么关系?为什么在一般情况下它们转化质粒的成功率有如此大的差别? 第十章 1）基因工程的基本步骤是怎样的？其中哪些需涉及到微生物的参与？ 2）为什么说微生物学不仅为基因工程提供了理论基础，同时也提供了操作技术？ 第十一章 1）试论微生物与水体富营养化作用，你认为对此类污染该如何进行防治？ 2）试用一些典型例子说明微生物与生物环境之间的相互关系。 第十二章 1. 为什么能用生物大分子作为衡量生物进化的标尺？有哪些选用原则？建立16 S r RNA 系统发育树的意义何在？ 2. 为什么在现代微生物分类中，任何能稳定地反映微生物种类特征的资料，都有分类学意义，都可以作为分类鉴定的依据？你知道有哪些项目已被用于细菌学分类和鉴定？
微生物学复习题和参考答案（农学类) 涂国全编写 2010年05月 第一章绪论 一、复习题(30题） １.什么是微生物？简述其3大特点和所属类群。 ２.什么是马铃薯晚疫病?试述其在历史上对人类的一次严重危害。 3.如何理解“在近代科学中，对人类福利最大的一门科学要算是微生物学了”？ 4.人类认识微生物世界的主要障碍是什么？在微生物学发展早期,学者们是如何逐一克服的? 5．微生物学的发展经历了哪５个时期?各期的代表人物是谁? ６.试简介列文虎克(A．vanLeeuwｅｎhｏek，1６3２~17２3），并说明他对微生物学的贡献。 ７．巴斯德学派在微生物学发展中有何重大贡献? ８．科赫学派在微生物学发展中有何重大贡献？ 9.由巴斯德设计的著名曲颈瓶试验，有何重大的理论与实际意义？ 10.巴斯德、科赫等微生物学研究成果的“横向扩散”,产生了哪些分支学科?各学科的代表人物是谁？ 11.微生物学史上的“成熟期”始于何时、何人?试简述本期的特点。 12.在医疗保健事业的发展史中，与微生物学有关的“六大战役”是什么?它们对人类的进步起了什么作用? １３．在发酵工业和生物工程产业中有哪些关键性的工艺技术?试述青霉素的大规模生产对当代发酵工业和生物工程所产生的巨大影响。 １４.什么是生物工程(学)？它由哪5大具体工程组成？它们间的相互关系是怎样的？ 15．简述微生物在生态平衡和环境保护中的作用。 １６．微生物学对生物学基础理论的研究有何重大贡献?为什么微生物可以发挥这种作用？ 1７.为什么说微生物是基因工程的支柱?
１８.在经典遗传学发展为分子遗传学的过程中，微生物起了什么作用?为什么能起这种作用? 1９.微生物学有哪６类分科？试简述分类依据并各举数例。 20.试列举10项起源微生物学研究的特有操作技术。 ２1.试列举微生物学中3项最重要的独特技术，并分别说出其创始人、基本原理及其对发展微生物学的贡献。 2２.何谓科赫法则（Ｋｏch￠s Pｏstulaｔes)? 23．微生物的“生长旺、繁殖快”特性对发酵生产有何实际意义?试举例说明之。 2４.为什么说在微生物的５大共性中,“体积小、面积大”这一条是最根本的? 2５.微生物的“生长旺、繁殖快”特性对生物学基础理论的研究有何意义？试举例说明之。 26.微生物界有哪几项特点可称得上是“生物界之最”?(应答10项) ２7．当前人类正面临哪５大危机?解决危机的关键是什么？为什么说在解决这些危机中微生物可以发挥其不可替代的作用? 28简述现代微生物学发展的6大趋势。 2９．为什么说“2１世纪是生物学世纪”？ ３0．简述微生物学在那几方面的突出贡献使人类的平均寿命延长了几十年。为什么？ 二、参考答案(５４小题） １．答案定义:一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。 特点:个体微小(＜0.1 mm）；构造简单；进化地位低。 类群：原核类：细菌,放线菌，蓝细菌;立克次氏体,支原体，衣原体。 真核类：真菌（酵母菌，霉菌)，原生动物,显微藻类。 非细胞类:病毒,类病毒,朊病毒。（注:也可用表解法解答) 2．答案一种由病原性真菌引起的严重植物病害。1９世纪中叶，在欧洲发生了一场马铃薯晚疫病大流行，毁灭了5/6的马铃薯,个别地方甚至颗粒无收，并引起爱尔兰等地大量居民饿死或逃往北美。 起因：当地过分强调种植单一高产粮食作物~马铃薯;当时连年气候异常,长期阴雨,温湿度过高，十分有利于病原真菌的生长繁殖和传播。 3.答案不同的人群或个人有其不同的幸福观或福利观。 一般都集中在追求钱、权、利、名、业、健(健康长寿)等几个方面。 健康在幸福观上应居首位；在近代多门科学中,对人类健康的关系最为密切、已作出了重要贡献并将进一步作出更大贡献的科学就是微生物学。 4.答案主要障碍有以下几点： 个体微小：列文虎克利用其自制的显微镜,克服了肉眼的局限性，首次观察到多种微生物的个体形态；
第一章细菌的形态与结构 1.细菌有哪3种形态 2.细菌的基本结构和特殊结构有哪些特殊结构各有何作用 +菌和G-菌细胞壁的结构由哪几部分组成 4.青霉素和溶菌酶为什么不能杀灭革兰阴性菌 5.简述革兰染色法操作步骤 参考答案 1 基本形态三种：球菌；杆菌；螺形菌 2基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞 荚膜功能：抗吞噬作用：是病原菌的重要毒力因子 抗杀菌物质损伤：如溶酶体、补体 粘附作用：形成生物膜与致病性有关 鞭毛功能；有鉴别意义, 鞭毛蛋白有抗原性：H抗原 某些细菌的鞭毛与致病有关 菌毛功能：细菌的黏附结构 介导细菌在局部定植 与细菌的致病性密切相关 性菌毛还能传递细菌的毒力和耐药性 芽孢功能：具有很强的抗高温、抗干燥、抗化学消毒剂和抗射线能力 3 革兰阳性菌：由肽聚糖和磷壁酸组成。其中肽聚糖又由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成三维立体结构。革兰阴性菌：由肽聚糖和外膜组成。肽聚糖仅由聚糖骨架、四肽侧链构成二维平面结构 4 G-有外膜阻止抗菌素进入；保护细胞壁组分肽聚糖不受溶菌酶分解 5 革兰染色法步骤： 涂片→固定→结晶紫初染→碘液媒染→95%酒精脱色→复红复染 观察结果：Ｇ＋菌：紫色Ｇ－菌：红色 第二章细菌的生理 2.细菌生长曲线分哪4个阶段 3.细菌根据对氧的需要程度分为哪几种类型 4.细菌合成代谢产物有哪几种 5.常用的消毒剂有哪些种类 6.简述化学消毒剂的杀菌机制 7简述紫外线杀菌的作用机制 8.在温度和时间相同的情况下，为什么湿热灭菌法的效果比干热法好 参考答案 2.迟缓期、对数期、稳定期、衰退期四阶段 3．专性需氧菌2）专性厌氧菌3）兼性厌氧菌4）微需氧菌 4．源质、毒素和侵袭性酶、抗生素、细菌素、维生素、色素等 5．①酚类②醇类③重金属盐类④氧化剂⑤表面活性剂 6.①使菌体蛋白质变性或凝固②破坏细菌的酶系统③改变细菌细胞壁或胞浆膜的通透性，导致细菌死亡7．其波长在200-300nm有杀菌作用，其中以265-266nm最强，这与细菌DNA吸收光谱一致。细菌DNA吸收紫外线后，使一DNA条链上两个相邻胸腺嘧啶公假结合成二聚体，改变了DNA分子构型，干扰了DNA 的复制和转录，导致细菌变异或死亡。
球菌 1,何谓SPA？简述其作用。 答:葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A,SPA)：90％以上金黄色葡萄球菌细胞壁表面的蛋白质；可与人及多种哺乳动物的IgG分子的Fc段非特异性结合,结合后的IgG分子Fab段仍能与抗原特异结合。 体内作用：SPA与IgG结合后所形成的复合物具有抗吞噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生物活性。 体外作用：协同凝集试验,广泛应用于多种微生物抗原检测。 2 ,金黄色葡萄球菌和乙型溶血性链球菌引起化脓性炎症的特点有何不同,为什么? 答：金黄色葡萄球菌临床特点：脓汁黄而黏稠、病灶界限清晰、感染局限化。 乙型链球菌临床特点：脓液稀薄、病灶界限不清、易扩散。 原因：金黄色葡萄球菌含有凝固酶,可以抵抗吞噬细胞的吞噬；保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏;感染局限化和形成血栓。 而乙型链球菌含有侵袭性酶,均是扩散因子,包括： （1）透明质酸酶：分解间质内透明质酸,利于病菌扩散。 （2）链激酶（SK）：溶解纤维蛋白、阻止血浆凝固,利于病菌扩散。 （3）链道酶（SD）：降解脓液中DNA ,使脓液稀薄,促进病菌扩散。 3.对脑膜炎奈氏菌应如何进行分离培养（为何需要床边接种） 答：营养要求较高,常用巧克力（色）培养基,专性需氧。对理化因素抵抗力很弱。 4.根据涂片染色镜检可作出微生物学初步诊断的病原性球菌有哪些? 4.金黄色葡萄球菌的致病物质和所致疾病？
答：(1)凝固酶：抵抗吞噬细胞的吞噬；保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏,感染局限化和形成血栓。(2)葡萄球菌溶素。损伤细胞膜的毒素(3)杀白细胞素攻击中性粒细胞和巨噬细胞,抵抗宿主吞噬细胞,增强细菌侵袭力(4)肠毒素引起急性肠胃炎（食物中毒）(5)表皮剥脱毒素引起金黄色烫伤样皮肤综合征,又称剥脱性皮炎(6)毒性休克综合征毒素-1引起多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征 肠道杆菌 5.引起胃肠炎的大肠埃希菌有哪几种？简述ETEC的致病机制. 答: 肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC）;肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC);肠致病型大肠埃希菌（EPEC）;肠出血型大肠埃希菌（EHEC）;肠集聚型大肠埃希菌（EAEC）ETEC致病机制：不耐热肠毒素(LT)耐热肠毒素(ST) 激活腺苷酸环化酶激活鸟苷酸环化酶 cAMP浓度升高cGMP浓度升高 过度分泌小肠液 腹泻 6.大肠埃希菌最常见的肠道外感染有哪些？ 以化脓性感染和泌尿道感染最为常见 （1）化脓性感染：腹膜炎、手术创口感染、败血症（死亡率高）、新生儿脑膜炎 （2）泌尿道感染：尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎常见上行性感染,女性患病率高于男性,由尿路致病性大肠埃希菌（UPEC）引起 3. 归纳志贺菌致病的主要特点。 答：包括侵袭力和内毒素,有的菌株（痢疾志贺菌）产生外毒素（志贺毒素） (1).致病物质
实验一、微生物的简单染色思考题 1油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注意些什么？ 答：油镜在使用时必须在载玻片与物镜之间滴加镜头油。油镜使用过程中要注意两点：（1）、使用后镜头的清洁：镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度，用完油镜必须进行“三擦”（观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯（或者乙醇乙醚溶液）擦去残留的油，最后用擦镜纸擦去残留的二甲苯，后将镜体全部复原）。 （2）、.观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜，最后用油镜。当目视接目镜时，特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器，以免压碎玻片或损伤镜面。 2、使用油镜时，为什么必须用镜头油？ 答：在使用普通显微镜时，当光线由反光镜通过玻片与镜头之间的空气时，由于空气与玻片的密度不同，使光线受到曲折，发生散射，降低了视野的照明度。若中间的介质是一层油（其折射率与玻片的相近），则几乎不发生折射，增加了视野的进光量，从而使物象更加清晰。 3、镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不是直接用高倍镜或油镜观察？ 答：低倍镜视野比较大，能看到的范围大，容易找到观察的目标，然后在用放大倍数高的高倍镜或油镜有目的的观察。 实验二、革兰氏染色 （1）为什么必须用培养24 h以内的菌体进行革兰氏染色？ 答：24h以内的菌体处于活跃生长期，菌体细胞壁具有典型特征，而处于老龄的革兰氏阳性细菌壁结构开始发生变化，染色时会被染成红色而造成假阴性 （2）要得到正确的革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？哪一步是关键步骤？为什么？答：应注意如下几点： 其一，选用活跃生长期菌种染色，老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性； 其二，涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性； 其三，脱色是革兰氏染色是否成功的关键，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性 （3）当你对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作正确，结果可靠？ 答：当要确证未知菌的革兰氏反应时，可用已知菌进行混合涂片，使二者染色条件保持一致，如果已知菌的结果与预期相符，则证明操作操作正确，结果可靠。 实验三、微生物的显微镜直接计数法 1、在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点？ 答：1）优点：直观、快速、操作简单。 2）缺点：
名词解释： 微生物、微生物学、纯培养、纯培养物无菌技术、灭菌、消毒、过滤富集培养 简答题： 1、微生物的特点有那些？ 2、Mullis的贡献对我们有什么启发？ 3、列文虎克对微生物学有什么贡献？4 、巴士德和柯赫对微生物学的发展有什么贡献？5、柯赫证病律的具体内容是什么？6 、拂来明对微生物学的贡献是什么？7 、我国著名的微生物学家有那些？分别作出了什么贡献？8、干热灭菌和高压蒸汽灭菌有什么差别？9、举出几种常用的消毒药品和方法？10、纯培养有几种方法？11、为什么活菌记数和直接记数有很大的差别？12、按照功能和营养成分培养基有几种类别？13、菌种保藏的基本原理是什么？1 4、保藏微生物的基本方法有那些？1 5、已发现的微生物的形态有几种？1 6、芽孢杆菌和芽孢梭菌有何异同？1 7、举例说明非芽孢杆菌的特点？1 8、古细菌有那三大类？1 9、根霉、曲霉和青霉的形态特征如何？20、吃什么食用菌可以预防感冒？21、吃什么食用菌可以增加智力？22、原核微生物和原核微生物的主要类群有那些？23、球菌的基本形态有几种？24、细菌的基本结构组成有那些？25、细菌的特殊结构有那些？26、细胞壁及其功能是什么？27、肽聚糖的基本组成是什么？28、G+ 和G-细胞壁的结构有和异同？29、Gram染色的基本过程如何？30、细菌为什么可以分为G+ 和G-两种？31、无壁细胞有那几种？32、聚-B-羟丁酸有什么功能？33、气泡有什么功能？34、什么是糖被、根据物理特征不同可以分为几类？35、糖被的化学组成和功能是什么？36、鞭毛有何功能和种类？37、鞭毛的一般结构和基体的组成如何？38、什么是芽孢、有何特点？39、芽孢耐热的分子机制如何？40、为什么放线菌介于真菌和细菌之间而更接近于细菌？41、放线菌的繁殖方式有几种？42、在什么条件下使用火焰灭菌？43、稀释倒平板法和涂平板法有什么差别？
实验一、微生物得简单染色思考题 1油镜与普通物镜在使用方法上有何不同？应特别注意些什么? 答:油镜在使用时必须在载玻片与物镜之间滴加镜头油。油镜使用过程中要注意两点：(１）、使用后镜头得清洁：镜面只能用擦镜纸擦，不能用手指或粗布，以保证光洁度，用完油镜必须进行“三擦”(观察完毕,上悬镜筒,先用擦镜纸擦去镜头上得油,然后再用擦镜纸沾取少量二甲苯（或者乙醇乙醚溶液)擦去残留得油,最后用擦镜纸擦去残留得二甲苯，后将镜体全部复原）。 (2)、、观察标本时，必须依次用低、中、高倍镜,最后用油镜。当目视接目镜时,特别在使用油镜时，切不可使用粗调节器,以免压碎玻片或损伤镜面. 2、使用油镜时,为什么必须用镜头油？ 答：在使用普通显微镜时，当光线由反光镜通过玻片与镜头之间得空气时，由于空气与玻片得密度不同,使光线受到曲折,发生散射，降低了视野得照明度。若中间得介质就是一层油（其折射率与玻片得相近）,则几乎不发生折射,增加了视野得进光量，从而使物象更加清晰。3、镜检标本时，为什么先用低倍镜观察，而不就是直接用高倍镜或油镜观察？ 答：低倍镜视野比较大，能瞧到得范围大，容易找到观察得目标,然后在用放大倍数高得高倍镜或油镜有目得得观察。 实验二、革兰氏染色 (１）为什么必须用培养2４ｈ以内得菌体进行革兰氏染色？ 答：24h以内得菌体处于活跃生长期，菌体细胞壁具有典型特征，而处于老龄得革兰氏阳性细菌壁结构开始发生变化，染色时会被染成红色而造成假阴性 （2）要得到正确得革兰氏染色结果，必须注意哪些操作？哪一步就是关键步骤?为什么? 答：应注意如下几点： 其一,选用活跃生长期菌种染色,老龄得革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性； 其二，涂片不宜过厚,以免脱色不完全造成假阳性; 其三,脱色就是革兰氏染色就是否成功得关键，脱色不够造成假阳性,脱色过度造成假阴性（3）当您对未知菌进行革兰氏染色时，怎样保证操作正确，结果可靠？ 答：当要确证未知菌得革兰氏反应时,可用已知菌进行混合涂片,使二者染色条件保持一致,如果已知菌得结果与预期相符，则证明操作操作正确，结果可靠。 实验三、微生物得显微镜直接计数法 1、在显微镜下直接测定微生物数量有什么优缺点? 答:1）优点:直观、快速、操作简单。 2）缺点: 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌得计数; 需要相对高得细菌浓度； 个体小得细菌在显微镜下难以观察； 实验四、微生物大小得测定 1、在不改变目镜与目镜测微尺，而改用不同放大倍数得物镜来测定同一细菌得大小时,其测定结果就是否相同?为什么？ 答:相同；目镜测微尺就是一块圆形玻片,其中央刻有精确等分得刻度，有把５毫米刻成为50等分或把10毫米长度刻成100等分.测量时,将其放在接目镜中得隔板上来测量经显微镜放大后得细胞物象。由于在不改变目镜与目镜测微尺，而改用不同放大倍数得物镜来测定同一细菌得大小时，物象得放大倍数与每小格目镜测微尺所代表得长度在变化比例上就是同步得，
微生物学教程(第二版周德庆)-复习思考题答案+微生物学练习题
微生物学复习思考题 绪论 1、什么叫微生物？微生物包括哪些类群？ 微生物是一切肉眼看不见或者看不清的微小生物的总称。包括属于原核类的细菌（真细菌和古生菌）、放线菌、蓝细菌（旧称蓝绿藻或蓝藻）、支原体、立克次氏体、衣原体；属于真核类的真菌（酵母菌、霉菌和蕈菌）、原生动物和显微藻类；以及属于非细胞类的病毒和亚病毒（类病毒、拟病毒和阮病毒）。 2、了解五界系统、六界系统、三域学说及其发展，说明微生物在生物界中的地位。 五界系统：动物界、植物界、原生生物界（包括原生动物、单细胞藻类和粘菌等）、真菌界和原核生物界（包括细菌蓝细菌等）。 六界系统：1949年Jahn提出包括后生动物界、后生植物界、真菌界、原生生物界、原核生物界和病毒界；1977年我国学者王大耜提出动物界、植物界、原生生物界（包括原生动物、单 2
细胞藻类和粘菌等）、真菌界和原核生物界（包括细菌蓝细菌等）、病毒界；1996年美国的P.H.Raven提出包括动物界、植物界、原生生物界、真菌界、真细菌界和古细菌界。 三域学说：细菌域、古细菌域、真核生物域。 3、了解微生物学的发展史，明确微生物学研究的对象和任务。 整个微生物学发展史是一部逐步克服认识微生物的重要障碍，不断探究它们生命活动规律，并开发利用有益微生物和控制、消灭有害微生物的历史。它分为：史前期、初创期、奠基期、发展期、成熟期。 对象：在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态结构、生理代谢、遗传变异、生态分布和分类进化等生命活动基本规律。 任务：发掘、利用、改善和保护有益微生物，控制、消灭或改造有害微生物，为人类社会的进步服务。 4、微生物的五大共性（特点）是什么？表示微 3
微生物学思考题总结 一、名词解释 1.病毒：病毒是在活细胞内增殖、遗传和变异的非细胞结构的微生物，是目前已知的体积最微小、结构最简单的生命形式 2.包涵体:病毒感染细胞后在细胞的细胞核和胞浆内形成的圆形或椭圆形的斑块，称为包涵体 3.噬菌斑；在涂有敏感宿主细胞的固体培养基表面，接种的噬菌体反复侵染和裂解大量细胞后，在菌苔上形成的具有一定形状、大小和边缘的透明区域 4.病毒粒子：成熟的或结构完整的有感染性的病毒个体 5.主动运输：当细胞内的营养物质浓度低于细胞外若干倍时，这些营养物质在能量的作用下通过逆浓度梯度向细胞内运送的过程 6.基因转位：由复杂运输酶系统参与的既需要载体蛋白又需要消耗能量的一种特殊主动运送方式 7.复制周期：在寄主活细胞中，以自身核酸为模板利用寄主细胞的原料、能量和生物合成场所，合成病毒核酸、蛋白质等成分，然后在寄主细胞的细胞质或细胞核内装配成许多新的、成熟的病毒体，再以裂解宿主细胞、出芽或其他方式释放到细胞外，又开始另一个感染周期，这整个过程称为复制周期。 8.细胞病变效应：病毒在细胞内增殖并对细胞产生毒害，引起细胞变形、坏死、破裂等，进而导致细胞死亡的现象。 9.合胞体：在病毒感染细胞后，相邻细胞间的细胞膜溶解，若干个细胞融合入形成具有多个核的大融合细胞 10.干扰现象：两种病毒共同感染一种细胞时，可能产生一种病毒增殖抑制另一种病毒增殖的现象，称为干扰现象【干扰现象是由于前一种病毒在细胞内增殖时产生了干扰素】 11.干扰素：脊椎动物受到病毒感染后产生的一种能够干扰病毒增殖的蛋白质，当释放到细胞外时，具有保护其他未感染细胞免受病毒感染的作用。 12.种：微生物分类上的一个基本分类单位。是一大群表型特征（形态和生理方面）高度相似、亲缘关系极其接近，与同属内其他种有明显差别的菌株的总称。 13.亚种：当某一个种内的不同菌株存在少数明显而稳定的变异特征或遗传形状，而又不足以区分成新种时，可以将这些菌株细分成两个或更多的小的分类单元——亚种 14.型：当同种或同亚种内不同菌株之间的性状差异不足以分为新的亚种时，可以细分为不同的型 15.菌株；一种微生物不同来源的纯培养物均可称为该菌种的一个菌株。 16.细菌：是一类形态细小、结构简单、细胞壁坚韧以二等分分裂方式进行繁殖的原核微生物 17.L型细菌：在实验室中形成的一种自发进行缺壁突变的缺壁细菌 18.质粒：是核体以外的呈环状闭合的双股DNA 19.伴孢晶体：少数芽孢杆菌，例如苏云金芽孢杆在其形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形或双锥形的碱溶性蛋白晶体——δ内毒素，称为伴孢晶体。 20.GF动物:用现在的检测技术,在动物体内外的任何部位都检测不到任何微生物的动物,称为无菌动物 21:SPF动物:指不存在某些特定的具有病原性或潜在病源性微生物的动物,称为无特定病原体动物 22:大肠菌群:一群在37℃培养24h能分解乳糖产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无
微生物思考题及参考答案 １、用油镜观察时应注意哪些问题？在载玻片与镜头之间加滴什么油？起什么作用？ 答：应该先用擦镜纸将镜头擦干净,以防上次实验得污染、操作时，先低倍再高倍、用完要擦掉油、加香柏油,作用就是增加折光率,也就就是增加了显微镜得分辨率、油得折光率与分辨率成反比（有公式)，同时与波长成正比、 ２、什么就是物镜得同焦现象？它在显微镜观察中有什么意义? 答:在一般情况下，当物像在一种物镜中已清晰聚焦后，转动物镜转换器将其她物镜转到工作位置进行观察时，物像将保持基本准焦得状态，这种现象称为物镜得同焦。利用这种同焦现象，可以保证在使用高倍镜或油镜等放大倍数高、工作距离短得物镜时仅用细调节器即可对物像清晰聚焦，从而避免由于使用粗调节器时可能得误操作而损坏镜头或载玻片。 3、影响显微镜分辨率得因素有哪些? 答：物镜得NA值(物镜得数值孔径）与照明光源得波长、 ４、美蓝染色液作用时间得不同,对酵母菌死细胞数量有何影响，试分析原因 答：会造成更多得死细胞，在显微镜下观察,活得就是透明无色，衰老得就是淡蓝色，死亡得就是蓝色,如果美蓝染色液作用时间过长,会造成细胞脱水死亡并渗透染液，影响实验结果。 5、镜检时如何区分放线菌基内菌丝，气生菌丝以及孢子丝 一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮,可瞧到横隔膜,继而断裂成球状或杆状小体. 6、在进行细菌涂片时应注意哪些环节 １、载玻片应该冷却后再涂片. 2、如果就是涂布液体，可以用毛细管或接种环滴一小滴，然后轻轻抹开,一圈足够. ３、如果就是涂布菌落或菌苔,应该在载玻片上先滴一滴水,再将菌落或菌苔涂布上去，接种环得尖蘸一点点即可。 4、为了节省时间，可以将干燥与热固定合并成一步。但就是应该避免高温,因为温度一高，细菌会变形。 5、染色时间视染色液种类而定。如结晶紫只需几十秒，亚甲基蓝则需一到两分钟。 6、冲洗时，水流不能太大,而且尽量避免水流直接冲在涂片上。 7、冲洗后干燥，可以用酒精灯加热以节省时间,同样得，应该避免高温,因为温度一高,细菌会变形. ７、进行细菌制片时为什么要进行加热固定?在加热固定时应注意什么? 固定得目得有三个：
《微生物学》复习思考题 第1章绪论 1.名词解释：微生物，微生物学 2.用具体事例说明人类与微生物的关系。 3.微生物包括哪些类群？它有哪些特点? 4.为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人? 5.试根据微生物的特点，谈谈为什么说微生物既是人类的敌人，更是人类的朋友？ 6.简述21世纪微生物学发展的主要趋势。 第2章原核微生物 1.名词解释：肽聚糖、溶菌酶、核区、异形胞 2.根据革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁通透性来说明革兰氏染色的机制。 3.什么是芽孢？它在什么时候形成？试从其特殊的结构与成分 说明芽孢的抗逆性。渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢耐热机制的？ 4.立克次氏体有哪些与专性活细胞内寄生有关的特性？它们有什么特殊的生活方式？衣 原体与立克次氏体都为专性活细胞内寄生，两者有何差别？ 5.螺旋体和螺旋菌有何不同？ 6.什么是缺壁细菌？试简述四类缺壁细菌的形成、特点和实践意义。 7.举例说明细菌的属名和种名。 8.试述古生菌和细菌的主要区别。 9.试根据细菌和古生菌细胞结构的特点，分析并举例说明为什么它们能在自然界中分布 泛。 10.细菌（狭义）、放线菌、霉菌、酵母在繁殖方式上各有什么特点？ 第三章真核微生物 1.名词解释：真菌、霉菌、酵母菌、真酵母、假酵母。 2.举例说明霉菌与酵母菌与人类的关系。 3.试列表说明真核微生物与原核微生物的主要区别。 4.试图示真核生物“9+2型”鞭毛的横切面构造，并简述其运动机理。 5.细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌的菌落有何不同？ 6.试比较细菌(狭义)、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并讨论它们的原生 质体的制备方法。 7.丝状真菌的营养菌丝和气生菌丝各有何特点？它们可以分化出哪些特殊结构？ 8.试述真菌的孢子类型和特点。 第4章病毒 1. 名词解释：病毒粒子、烈性噬菌体、温和噬菌体、溶源性转变、前噬菌体、溶源性细菌、 裂解量、类病毒、朊病毒。 2. 病毒区别于其他生物的特点是什么? 根据你的理解，病毒应如何定义? 3. 试述病毒的主要化学组成及其功能。 4. 病毒壳体结构有哪几种对称形式? 毒粒的主要结构类型有哪些?
食品微生物学技术思考题答案1.如何区别高倍镜和油镜 答：（1）油镜更接近标本片（2）油镜与标本间的介质是香柏油（3）油镜刻有“oil”或“Hi”字样，也刻有一圈红线或黑线为标记。 2．为什么在使用高倍镜及油镜是应特别注意避免粗调节器的错误操作答：使用高倍镜及油镜时镜头距离标片很近，而粗调节器的调节幅度较大，粗调节器的错误操作会使镜头大幅度向标本移动，很容易损坏标本和镜头。一般先用低倍镜找到物象后换到高倍镜，就只需要用细调节器了。 3.用油镜观察时应注意哪些问题在载破片和镜头之间加滴什么油起什么作用 答：（1）应该先用擦镜纸将镜头擦干净，以防止上次实验的污染，操作时，先低倍再高倍，用完要擦掉油。（2）在转换油镜时，从侧面水平注视镜头注视镜头与玻片的距离。使镜头浸入油中而不以压破载玻片为宜。（3）从目镜内观察，把孔径光阑开到最大，使其明亮。然后用微调将镜台下降，直至视野内物象清晰。如油镜已离开油面仍未见物象，需重复操作。加的是香柏油。作用是增加折光率，增加显微镜的分辨率。 4.在调节焦距时，往往出现一些疑似观察标本的物象点，物象点可能是目镜或物镜上的杂质，也可能是标本片上的观察对象，如何通过操作判断这些物象点是否在标片上 答：移动标本片，看物象点是否移动，如果不移动，则不在标本片上。 5．如果涂片未经热固定或固定温度过高、时间过长，会出现什么现象答：固定时间是杀死菌体，使菌体蛋白质凝固黏附于载玻片上，增加菌体对染色剂的结合力，易于着色。但是如果没固定，不容易着色，且容易被清水冲走。
温度过高会使细胞收缩变形，时间过长会导致菌体变形或形态破坏，难以着色，从而导致难以着色。 6.为什么要培养18-24h的细菌菌体进行革兰氏染色 答:此时菌体进入比较活泼的繁殖生长期，细胞壁比较好着色。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应，关键在于细胞壁的通透性的改变。如果菌龄过老，不便于显微镜下观察时阴性还是阳性菌。 7．如何操作才能保证革兰氏染色结果正确，其中的关键环节是什么答：具体操作步骤为（1）涂片，与简单染色法相同，要求薄而均匀。（2）干燥、固定，在空气中自然晾干，或将涂面朝上，在酒精灯微小火焰上干燥；在酒精灯火焰上通过3-4次，温度不宜过高。（3）染色，用结晶紫进行初染1min,然后水洗。用碘液进行媒染，用碘液覆盖染色部位1min,水洗。在涂有细菌的部位连续滴加95%乙醇，约30s，水洗脱色。用番红溶液复染1min,水洗。（4）干燥，自然干燥或用吸水纸吸干，也可以用电吹风吹干。（5）镜检。 关键环节是酒精脱色。 8．为何常用插片法培养放线菌观察个体形态 答：放线菌的营养菌丝生长在培养基表面或插入培养基里面，不易被接种针挑取制片。采用插片法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长时期的形态。 9.在显微镜下，如何区分基内菌丝和气生菌丝 答：一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到隔膜，继而断裂成球状或杆状小体。 10.放线菌与细菌的菌落最显着的差异是什么