目录
引言 (1)
第一章现代医学对帕金森病的认识…………………………………………………… .2
1.帕金森病的研究历史回顾 (2)
2.帕金森病的病因与发病机制 (2)
3.帕金森病的治疗 (3)
4.帕金森病的动物模型研究 (4)
第二章中医学对帕金森病的认识 (6)
1.帕金森病的中医病名及病因病机 (6)
2.辨证分型、常用方药及特色疗法 (6)
3.中药治疗帕金森病的药理研究 (7)
4.三甲止颤汤组方依据及特点 (8)
第三章实验研究 (9)
实验流程图 (9)
实验一鱼藤酮诱导PD大鼠模型的研究…………………………………………… ..10
1.实验目的 (10)
2.实验材料 (10)
3.实验过程 (10)
4.实验观察 (11)
5.统计学方法 (12)
6.实验结果 (12)
实验二三甲止颤汤对PD大鼠黑质TH、a-syn的影响 (17)
1.实验材料 (17)
2.实验过程 (17)
3.实验观察 (17)
4.统计学方法 (19)
5.实验结果 (19)
第三部分讨论 (26)
1.帕金森病动物模型的选择 (26)
2.三甲止颤汤现代药理研究 (27)
结语 (29)
参考文献 (30)
附录 (34)
致谢 (41)
三甲止颤汤对鱼藤酮致PD大鼠黑质TH、a-syn的影响
引言
帕金森病（Parkinson’s disease，PD），首次详细描述见于1817年的英国James Parkinson医生，因其症状表现又名震颤麻痹（shaking palsy）。该病发病趋势与年龄增加成正比，在我国患病人群集中在65岁以上男性，女性略少，患病率可达1000/10万，是继阿尔茨海默病之后的第二个最常见的神经变性疾病[1]。其病理改变重要是黑质纹状体多巴胺（dopamine，DA）神经元及DA递质的缺失，当黑质致密部DA能神经元丢失约50%，纹状体内DA浓度低于80%时呈现临床症状，运动症状包含运动缓慢、震颤、强直、姿势步态异常等，非运动相关症状有嗅觉阻滞、植物神经功能紊乱、睡眠障碍、抑郁状态、认知障碍等[2]。对于PD，治疗上多数医院利用左旋多巴进行替代性治疗，以补充DA的缺失；虽然患者临床症状得到改善，但疾病进展过程不能阻止，长久服用则会出现恶心、呕吐、腹痛等不良反应；因而PD被神经病学界视为不明原因、疗效不佳、预后不良的难治疾病。
PD在中医学界被归为“颤证”，在PD的防治、康复等方面中医优势独特，以整体观念和辨证论治为指导，对病因病机认识见解独到，全方位、多途径、多靶点治疗，疗效显著，且化学药物的引发的不良反应得到减轻，故成为治疗PD的研究热点。三甲止颤汤是导师经验用方，由龟板、鳖甲、生牡蛎、钩藤、生白芍、麦冬、生地、地龙、寄生、甘草10味中药组成，该方多年来临床疗效显著，具有滋阴潜阳、滋补肝肾、息风健脑之效，与颤证病机相吻合，但对其药理作用机制认识不足。研究发现PD发病与酪氨酸氢化酶（Tyrosine hydroxylase，TH）缺乏或减少相关，因为它是神经系统DA能神经元的蛋白标志，是DA合成的限速酶。本实验拟通过动物模型研究三甲止颤汤对PD大鼠中脑黑质TH、a-突触核蛋白（alpha-synuclein，a-syn）的影响，来探讨三甲止颤汤治疗PD的药理作用机制，为以后开发PD中成药，增加治疗手段提供实验依据。
高血压动物模型高血压病是全身小动脉痉挛引起血管外周阻力增加的直接后果,小动脉的痉挛与遗传/精神刺激、应激、肾脏缺血、肾上腺皮质的作用及钠的作用等诸多因素有关，目前动物高血压模型的复制多以不同角度模拟高血压这些易患因素而形成。所用动物模型有自发性高血压大鼠(SHR)、神经原型、肾外包扎型和醋酸脱氧皮质酮(DOCA)盐型高血压大鼠、肾血管型高血压狗、盐敏感性和盐抵抗性高血压大鼠等。（一）、神经原型高血压模型：可用狗、大白鼠和家兔等，通过机能性方法或物理方法作用于动物神经系统而诱发条件反射性高血压和皮层性高血压模型。 1、神经精神刺激：强烈的声、逛、电刺激，条件反射冲突等可以引起动物高级神经中枢强雷兴奋及血压升高。缺点是这种血压升高不能持久，同时，动物对相同刺激有适应的倾向，因此不能建立持久的高血压模型。 2、去除压力感受器神经：用电损伤动物的孤束或用6-羟多巴胺破坏孤束核的儿茶酚胺神经元，使减压反射中枢失去调整血压的功能，可建立慢性高血压模型，但是有一部分动物可能在手术后短期内死亡。（二）自发性高血压大鼠模型 Okamoto等将血压为~的雄性Wistar大鼠与血压为17，3~的同种雌鼠交配，其子代选择血压高者作为近亲交配，三代后，多数动物血压超过24KPa，他们称之为自发性高血压大鼠（SHR）。通过不断选种，到1969年获得了近交系SHR，至1986年该系已传到第80代。 SHR的后代100%发生高血压。一般在出生后血压随年龄而逐渐升高，据第30~32代统计，生后第10周雄鼠血压平均为±，雌鼠为±，此后还会继续升高，常可超过。血压升高机制：在高血压大鼠生长的早期，其血管阻力持续增加，血压升高，心肌肥大，机体的肾素-血管紧张素系统激活，这一过程持续到生存晚期，并发展为更严重的心肌肥大和充血性心功能衰退。随着高血压的持续发展，高血压大鼠出现了与人类高血压患者相似的并发症——脑和心肌损害，以及肾硬化。优点：自发性高血压大鼠从许多方面讲，如发病机制、高血压心血管并发症、外周血管阻力变化、对盐的敏感性等都与人类高血压患者相似，是目前国际公认最接近于人类原发性高血压的动物模型。故其广泛应用于医学基础试验研究中，如SHR高血压形成的电生瑰研究，在肾素血管紧张素系统的研究，在内皮素方面的研究，在丝裂素活化蛋白激酶方面的研究，血管结构与功能方面的研究，都已取得了一定的进展；又如，在受体水平阻断肾素-血管紧张素醛固酮系统，来探讨高血压性心肌重塑的可能机制，也在用自发性高血压大鼠模型。另外，该模型特别是用于人类高血压的研究及高血压药物筛选。如坎地沙坦在高血压大鼠脑缺血的神经保护作用的研究，亦用自发性高血压模型。缺点：饲养条件高，价格较贵，遗传育种麻烦，需要一定时间，且易变种或断种，若大量使用尚存在一定困难。（三）肾外包扎型高血压模型血压升高机制：肾外异物包扎，可致肾周围炎，在肾外形成一层纤维素性鞘膜，压迫肾实质造成肾组织缺血，使肾素形成增加，血压上升。选用120～150g的大鼠。麻醉后，呈俯卧位固定，背部下方垫一高约2～3cm的沙袋，剪去手术视野的毛，用％洗必太酒精消毒皮肤，从第10胸椎到第3腰椎处沿脊椎中线切开皮肤，在左侧季肋下～2cm和距脊椎1cm处用小血管钳分开肌肉，用两指从腹下部将肾脏自创口中挤出，小心地将肾脏与周围组织剥离，将双层乳胶膜剪成“X”形，绕肾门将肾脏交叉包扎，然后在相对侧切开，取出右肾，分离后切除，分别缝合肌肉和皮肤创口。皮下注射1～2万单位青霉素G。手术所用器械必须高压消毒，只要在75％乙醇中浸泡30min，临用时用煮沸过的生理盐水冲洗一下，用毕后仍浸入乙醇中。手术后可加饮1％氯化钠溶液作为促进因素。（四）、肾性高血压模型 Gold-blatt高血压模型有双肾及单肾模型。双肾模型是指动物保留两侧肾脏，但使一肾或二肾动脉狭窄，所以又称为二肾一夹或双肾双夹型。单肾模型为切除一侧肾脏，狭窄保留肾的肾动脉，及一肾一夹型。这三种模型的动物都能发生长期稳定的高血压。 1、一肾一夹（左侧肾动脉狭窄+右肾切除）血压升高机制主要是由于钠潴留和肾素血管紧张素系统激活以及交感神经活性增强。优点：该模型由于成功率较低，血压不能持续上升，限制了其使用范围，目前较少使用。 2、两肾一夹型（左
第一章、蛋白质的化学 肽键：一个氨基酸分子的α-羧基与另一个氨基酸分子的α-氨基经脱水缩合后形成的酰胺键。 氨基酸的等电点：在某一PH溶液中,氨基酸分子电离后带有相等正、负电荷时，此时溶液的PH值称为该氨基酸的等电点pI 结构域：指蛋白质多肽链在二级结构的基础上进一步卷曲折叠成几个相对独立的近似球形的组装体。 蛋白质复性：轻度变性的蛋白质在去除变性因素后，可恢复原有的构象和生物学活性。 Motif基序：基序又称超二级结构、模体或模序，是指在多肽内顺序上相邻的二级结构常常在空间折叠中靠近，彼此相互作用，形成有规律的、在空间上能辨认的二级结构聚集体。 蛋白质的分离方法：透析、沉淀（有机溶剂沉淀，盐析，免疫沉淀）、电泳、层析、超速离心。 第二章、核酸的结构与功能 简述Watson和Crick双螺旋结构特点。 （1）DNA分子由两条走向相反且平行的脱氧多核苷酸链共同围绕同一中心中心轴形成右手螺旋结构。 （2）磷酸与戊糖相间排列形成螺旋的骨架居于外侧，碱基位于螺旋的内侧。 （3）两条链上的碱基严格按照碱基互补配对的原则进行配对，即A ＝T，G＝C，配对的碱基处于同一平面，相邻的两个碱基平面距离为
0.34nm，螺旋一周包含10个碱基对，螺旋直径为两2nm，角度为36°。（4）氢键维持双螺旋的横向稳定，碱基堆积力维持双螺旋的纵向稳定。 （5）双螺旋结构上有两条螺旋凹沟，一条较深称为深沟（大沟），一条较浅称为浅沟。 tRNA二级结构有何特点。 （1）tRNA是分子最小，但含有稀有碱基最多的RNA，其稀有碱基的含量可多达20%。 （2）tRNA是单店核算，但其实分子中的某些局部也可形成双螺旋结构，形成茎环结构。 （3）tRNA的结构上有一反密码环，中间有一反密码子能与密码子配对。 （4）tRNA的3'末端有一柄部结构—CCA-OH，可携带氨基酸。 简述三种RNA的功能。 （1）mRNA的功能是作为指导蛋白质合成的模板。 （2）tRNA的功能是在蛋白质合成中起搬运氨基酸作用。 （3）rRNA的作用是蛋白质的合成提供场所。 真核生物mRNA与原核生物mRNA在结构上有何区别。 （1）真核生物mRNA的3'-末端有一个多聚腺苷酸尾，称poly（A）n 尾巴，原核生物没有 （2）真核生物mRNA的5'-端有帽子结构m7GpppN，原核生物没有（3）真核生物mRNA分子中有编码区和非编码区，原核生物没有
课程论文 课程名称：植物化学保护 题目：浅谈中国植物性农药的现状和进展学院：植物保护学院 专业：植物保护 姓名：张艳荣 学号：13044010 完成日期：2012 年06 月29 日
浅谈我国植物性农药的现状和进展 摘要：植物性农药是指利用植物所含的稳定的有效成分，按一定的方法对受体植物进行使用后，使其免遭或减轻病、虫、杂草等有害生物为害的植物源制剂。各种植物性农药通常不是单一的一种化合物，而是植物有机体的全部或一部分有机物质，成分复杂多变，但一般都包含在生物碱、糖苷、有毒蛋白质、挥发性香精油、单宁、树脂、有机酸、酯、酮、萜等各类物质中。由于植物性农药物质性质的特殊性，有害生物难以对其产生抗药性。另外，植物性农药对受体植物相对于化学农药来说更不容易造成药害，而且也容易与环境中其他生物相协调。植物性农药是非人工化学结构的天然化学物质，一般在自然界有天然的微生物类群对其进行自然分解，在保护生态平衡方面大大优于化学农药，特别是在无公害农产品的生产和保证农业的可持续发展中扮演着重要角色。本文综述了我国植物性农药的现状和研究进展，同时介绍几种应用前景比较好的植物性农药 关键字：植物性农药；合成化合物；杀虫植物 1植物性农药研究发展概况 1.1植物性农药的发展历史 植物性农药的发展具有悠久的历史,我国古代早就用菊科艾属的艾蒿茎、叶熏蚊蝇,一直流传至今。公元前7-5世纪的古籍中已有用嘉草、莽草、枚菊杀虫的记述。在《齐民要术》、《本草纲目》中都不乏用植物性农药杀虫、防病的记载。17世纪后,世界各地陆续发现了一些杀虫力较强的药用农药,其中最著名的是烟草、鱼藤、除虫菊。在长期的实践中,人们早已发现楝科植物中的印楝、苦楝、川楝等具有抑制昆虫取食和生长发育的活性,人们还先后发现卫茅科雷公藤,豆科槐属的苦参、大戟科的乌柏、茄科茄属的龙葵等植物均具有杀虫活性。 1.2植物性农药的发展现状 目前,对植物性农药的研究面窄、深度不够,缺少系统的、成熟的理论指导。在研究内容方面,作为杀虫剂研究的较多,杀菌剂则较少,而植物生长调节剂和除草剂研究的更少。基本研究模式是发现有某种生理活性的植物后,先分离出活性有效成分,确定化学结构,再以活性化合物结构作为靶标,合成该化合物,开发农药品种。如以除虫菊和毒扁豆碱为先导,开发出的拟除虫菊酯类和氨基甲酸酯类系列农药,但通过仿生合成的这些农药,实际则属于化学合成农药。植物性农药的应用现状则是发现有生物活性的植物不少,但以植物为原料开发应用的却不多。现在农药的主导仍然是化学合成农药,生物农药只占整个农药的2%~3%,而植物性农药所占的比重更小。植物性农药的发展现状与其悠久的发展历史与自然界丰富的植物资源的存在显然是不相称的。
第23卷第2期西 南 农 业 大 学 学 报V ol.23,N o.2 2001年4月Journal of S outhwest Agricultural University Apr.2001 文章编号:1000-2642(2001)02-0140-04 鱼藤酮的研究进展 ① 徐汉虹,黄继光 (华南农业大学昆虫毒理研究室,广东广州 510642) 摘要:鱼藤酮是一种广谱性杀虫剂,对害虫高效且不易产生抗药性。该文对鱼藤酮的生物活性、作用机理以及组织培养技术在鱼藤酮类似物中的应用几个方面进行了比较详细的论述。关 键 词:鱼藤酮;研究进展 中图分类号:S 482.3+9 文献标识码:A ADVANCES I N THE RESE ARCH OF ROTE NONE XU H an -hong ,HUANG Ji -gu ang (Laboratory of Insect T oxicology ,S outh China Agricultural University ,G uangzhou ,G uangdong 510642,China )Abstract :A detailed review is presented in this paper of the advances in the research of the bioactivity ,pest -controlling mechanisms and tissue culture techniques of rotenone ,a broad -spectrum insecticide ,and its analogs.K ey w ords :rotenone ;advance in research 鱼藤酮是早期人们从鱼藤属等植物中提取分离出来的一种有杀虫活性的物质,是3大传统植物性杀 虫剂之一。它主要存在于豆科植物中,特别是在鱼藤属和灰叶属等植物中,且研究比较深入。其结构式如下: 鱼藤酮的作用方式较多。它对菜粉蝶幼虫等昆虫有强烈的触杀作用和胃毒作用,对日本甲虫有拒食作用,对某些鳞翅目害虫有生长发育抑制作用[1,2],鱼藤提取物能抑制某些病菌孢子的萌发和生长,或阻 止病菌侵入植株。 1 鱼藤酮的生物活性 鱼藤对15个目,137科的800多种害虫具有一定的防治效果,作用谱广,尤其对蚜螨类害虫效果突出。Nawrot 等[3]在室内测定了鱼藤酮及其5种衍生物对谷象(Sitophilus granatius )和杂拟谷盗(Tribolium con 2f usum )成虫以及杂拟谷盗和谷斑皮蠹(Trogoderma granarium )幼虫的拒食作用。结果表明,鱼藤酮对储 粮害虫有一定的拒食活性。当温度为26℃,相对湿度(RH )为64%时,发现鱼藤酮对这3种害虫的拒食活性最高,其类似物的拒食活性不如鱼藤酮本身,但表现出一定的选择性。Bloszyk 等[4]用6种拒食活性较高的化合物作为食品包装物,以防治贮粮害虫谷蠹(Rhyzopertha dominica )和谷象的危害,发现鱼藤酮对谷蠹的拒食活性比其他几种药剂都高。 斯里兰卡有一传统的植物药物“Pilamul ”,就是 ①收稿日期:2000-09-04 基金项目:中华农业科教基金(人才基金)和广东省自然科学基金(930841)资助项目 作者简介:徐汉虹(1961-),男,湖北仙桃人,华南农业大学教授,主要从事植物性杀虫剂和农药学研究。
高血压动物模型 高血压病是全身小动脉痉挛引起血管外周阻力增加的直接后果,小动脉的痉挛与遗传/精神刺激、应激、肾脏缺血、肾上腺皮质的作用及钠的作用等诸多因素有关，目前动物高血压模型的复制多以不同角度模拟高血压这些易患因素而形成。 所用动物模型有自发性高血压大鼠(SHR)、神经原型、肾外包扎型和醋酸脱氧皮质酮(DOCA)盐型高血压大鼠、肾血管型高血压狗、盐敏感性和盐抵抗性高血压大鼠等。 （一）、神经原型高血压模型： 可用狗、大白鼠和家兔等，通过机能性方法或物理方法作用于动物神经系统而诱发条件反射性高血压和皮层性高血压模型。 1、神经精神刺激：强烈的声、逛、电刺激，条件反射冲突等可以引起动物高级神经中枢强雷兴奋及血压升高。缺点是这种血压升高不能持久，同时，动物对相同刺激有适应的倾向，因此不能建立持久的高血压模型。 2、去除压力感受器神经：用电损伤动物的孤束或用6-羟多巴胺破坏孤束核的儿茶酚胺神经元，使减压反射中枢失去调整血压的功能，可建立慢性高血压模型，但是有一部分动物可能在手术后短期内死亡。 （二）自发性高血压大鼠模型 Okamoto等将血压为19.3~23.3KPa的雄性Wistar大鼠与血压为17，3~18.6KPa的同种雌鼠交配，其子代选择血压高者作为近亲交配，三代后，多数动物血压超过24KPa，他们称之为自发性高血压大鼠（SHR）。通过不断选种，到1969年获得了近交系SHR，至1986年该系已传到第80代。 SHR的后代100%发生高血压。一般在出生后血压随年龄而逐渐升高，据第30~32代统计，生后第10周雄鼠血压平均为24.5±2.3KPa，雌鼠为23.7±1.9KPa，此后还会继续升高，常可超过26.6KPa。 血压升高机制：在高血压大鼠生长的早期，其血管阻力持续增加，血压升高，心肌肥大，机体的肾素-血管紧张素系统激活，这一过程持续到生存晚期，并发展为更严重的心肌肥大和充血性心功能衰退。随着高血压的持续发展，高血压大鼠出现了与人类高血压患者相似的并发症——脑和心肌损害，以及肾硬化。 优点：自发性高血压大鼠从许多方面讲，如发病机制、高血压心血管并发症、外周血管阻力变化、对盐的敏感性等都与人类高血压患者相似，是目前国际公认最接近于人类原发性高血压的动物模型。故其广泛应用于医学基础试验研究中，如SHR高血压形成的电生瑰研究，在肾素血管紧张素系统的研究，在内皮素方面的研究，在丝裂素活化蛋白激酶方面的研究，血管结构与功能方面的研究，都已取得了一定的进展；又如，在受体水平阻断肾素-血管紧张素醛固酮系统，来探讨高血压性心肌重塑的可能机制，也在用自发性高血压大鼠模型。另外，该模型特别是用于人类高血压的研究及高血压药物筛选。如坎地沙坦在高血压大鼠脑缺血的神经保护作用的研究，亦用自发性高血压模型。 缺点：饲养条件高，价格较贵，遗传育种麻烦，需要一定时间，且易变种或断种，若大量使用尚存在一定困难。
鱼藤酮的应用现状及存在问题 姓名：郝瑶学号：20110801111 班级：11生工1班 摘要鱼藤酮是一种广谱性杀虫剂，对害虫高效且不易产生抗药性。它是一种天然的植物质杀虫剂和杀螨剂，为无公害农产品生产推荐使用品种，具有广阔的应用前景。该文简要介绍了鱼藤酮的产品及应用范围、鱼藤酮的应用开发现状以及应用过程中出现的问题和解决方法，并对今后进一步开发应用鱼藤酮提出建议。 关键词鱼藤酮；杀虫剂；应用现状；存在问题；综述 鱼藤酮 (rotenone) 具有触杀、胃毒、拒食和熏蒸作用，杀虫谱广，对果树、蔬菜、茶叶、花卉及粮食作物上的数百种害虫有良好的防治效果[1] ，对哺乳动物低毒，对害虫天敌和农作物安全，是害虫综合治理上较为理想的杀虫剂，被广泛应用于蔬菜、果树等农作物和园林害虫的防治。为了顺应绿色食品发展的要求，近年来我国鱼藤酮产品的发展十分迅速。本文就鱼藤酮的产品、应用开发现状及在应用过程中出现的一系列问题进行了综述。 1 鱼藤酮的产品及应用范围 近年来，鱼藤酮的产品的使用呈逐年递增的趋势，从1 9 9 1 年广东省广州农药厂从化市分厂登记第一个鱼藤酮产品到现在，共有11 家企业登记鱼藤酮产品18 个厂次，其中原药2 个，单剂4 个，复配制剂12 个。这些产品中，2.5%、7.5% 鱼藤酮乳油，3.5% 高渗鱼藤酮乳油，5% 除虫菊素·鱼藤乳油( 除虫菊素+ 鱼藤酮) 、18%辛·鱼藤乳油(辛硫磷+鱼藤酮)和 1.3%氰·鱼藤乳油 (氰戊菊酯+ 鱼藤酮) 用于防治十字花科蔬菜和番茄上的蚜虫；0.2% 苦参碱水剂+1.8% 鱼藤酮乳油桶混剂，25% 敌·鱼藤乳油 (敌百虫+ 鱼藤酮)、1.3% 氰·鱼藤乳油 (氰戊菊酯+ 鱼藤酮) 和2.5% 氰·鱼藤乳油 (氰戊菊酯+ 鱼藤酮) 用于防治菜青虫(Pieris rapae)，7.5%氰·鱼藤乳油 (氰戊菊酯+ 鱼藤酮) 和1.8% 阿维·鱼藤乳油 (阿维菌素+鱼藤酮) 用于防治小菜蛾 (Plutella xylostella)，25% 水胺·鱼藤乳油(水胺硫磷+ 鱼藤酮) 用于防治柑橘上的矢尖蚧 (Prontaspisyanonensis)，21%辛·鱼藤乳油 (辛硫磷+鱼藤酮) 防治棉花上的棉铃虫 (Heliothiszea ) 。[2]这些产品主要以鱼藤为材料，其中大部分是复配产品，防治面积达几千万公顷。经研究表明鱼藤酮与其他化学或生物农药混配[ 3 - 4 ]高效、低毒，可以有效地延缓害虫的抗药性，减少环境污染，还能刺激植物生长，对天敌无杀伤作用，有利于促进生态平衡。 2 鱼藤酮的作用机制 早期的研究表明鱼藤酮的作用机制主要是影响昆虫的呼吸作用，主要是与NADH脱氢酶与辅酶Q之间的某一成分发生作用。鱼藤酮使害虫细胞的电子传递链受到抑制，从而降低生物体内的ATP水平，最终使害虫得不到能量供应，然后行动迟滞、麻痹而缓慢死亡。许多生物细胞中的线粒体、NADH脱氢酶、丁二酸、甘露醇以及其他物质对鱼藤酮都存在一定的敏感性。Setayria cervi线粒体中从NADPH到NADH这一过程的电子传递可被鱼藤酮高度抑制。并且，丝虫寄生物Setaria digitata线粒体颗粒中的反丁烯二酸还原酶系统的活性对鱼藤酮敏感。鱼藤酮和水杨氧肟酸可抑制Trypanosoma brucei brucei线粒体内膜的电动势(EMT)，从而间
2006年5月第16卷 第5期 中国比较医学杂志 CHINESE J OURNAL OF COMPAR ATIVE MEDICINE May ,2006Vol .16 No .5 综述与专论 若干实验性高血压大鼠模型的介绍 程轶群,李晓辉 (第三军医大学基础医学部,重庆 400038) 【摘要】 高血压是我国最常见的心血管疾病,而实验性高血压大鼠模型在高血压研究中扮演着重要的角色.本文对目前若干实验性高血压大鼠模型建立的方法以及它们的主要特点和应用进行了综述。 【关键词】 高血压;大鼠;模型,动物 【中图分类号】R544.1 【文献标识码】A 【文章编号】1671-7856(2006)05-0305-04 Introduction of Some Models of Hypertension in Experimental Rats C HE NG Yi -Qun ,LI Xiao -Hui (The Basic Depart ment of The Third Military Medical University ,Chongq ing 400038,China ) 【Abstract 】 Hypertension is the most familiar cardiovascular disease in our country ,and the rat hypertens ion model play an important role in these studies .This text summarized the methods and characterics of some rat hypertension models . 【Key words 】 Hypertension ;Rat ;Model ,ani mal [基金项目]重庆市自然科学基金重点项目及攻关项目(No .20027537、No .20048256) [作者简介]程轶群(1979-),女,在读药理学硕士生,研究方向:心血管药理。E -mail :chengyiqun269998@sina .com [通讯作者]李晓辉,教授,博导。E -mail :xhl @mail .tmmu .com .cn 高血压是我国最常见的心血管疾病,其发生率在成年人中高达20%,不仅发病因素复杂众多,并且常有许多并发症,如脑卒中、心肌梗死、心力衰竭、 冠心病、糖尿病等。为了更好的研究高血压的发病机制,阐明各种药物的作用机理,并且开发出更多有效的药物,研究人员不断地努力尝试建立和应用各种高血压的动物模型,其中以大鼠模型最多,本文综述了目前若干实验性高血压大鼠模型建立的进展,以及它们的主要特点和应用。1 自发性高血压大鼠模型 国际上常用的原发性高血压的大鼠模型有:自发性高血压大鼠(SHR ,京都)、卒中易感型自发性高血压大鼠(SHR SP ,京都)、新西兰遗传性高血压大鼠(GH ,达尼丁)、以色列高血压大鼠(SBH ,耶路撒冷)、米兰高血压大鼠(MHS ,米兰)、里昂高血压大鼠(L H ,里昂)等。其中SHR 是最广泛应用的模型动物之一 [1] 。SHR 是1963年东京Okamoto 用 Wistar 大鼠培育而成的,其被毛呈白色。此鼠高血 压发生率高,在16周龄时高血压已形成,收缩压>21.28kPa ,无明显原发性肾脏或肾上腺损伤,心血管疾病发生率高。SHR 与人类原发性高血压形成 机制有相似之处,血压的升高均与外周血管阻力的增加有关,且对抗高血压药物有反应,因此,它是人类原发性高血压的研究及高血压药物筛选的较为理想的动物模型 [2] 。 2 转基因高血压大鼠模型 高血压病发病率高且病因复杂。临床研究发现其具有明显的家族倾向性,因而可能与遗传因素有关。从基因水平研究高血压病的发病机制是揭示这一疾病病因的根本途径。现已发现若干基因与发病有关,如肾素基因、血管紧张素转换酶基因、血管紧张素原基因、心房利钠因子基因等。目前,应用高血压相关基因制作转基因小鼠的报道已不胜枚举,而制作转基因大鼠的报道却屈指可数。大鼠是实验高血压学中广泛应用的经典动物,制作转基因大鼠有着更重要的理论和实际意义,但同时也有着较高的技术要求。
目录 摘要 (1) 关键词 (1) 1 前言 (1) 2 应用开发现状 (1) 2.1 资源 (1) 2.2 化学成分 (1) 2.2.1 酚性类成分 (2) 2.2.2 萜类化合物 (2) 2.3 检测现状 (2) 3 杀虫机理 (2) 3.1 毒理学性质 (2) 3.2 致死过程 (3) 3.3 导致细胞凋亡 (4) 4 对人体的潜在危害 (4) 4.1 对人有致死性 (4) 4. 2 造成环境污染 (4) 4.3 对健康的危害 (4) 参考文献: (5)
论述鱼藤酮的杀虫机理 XXX 摘要:鱼藤酮是一种毒性极强的杀虫剂，本文论述了鱼藤酮的发展状况，分析了其化学成分，主要论述了其杀虫机理，也辩证的讨论了鱼藤酮对人类的潜在危害。 关键词:鱼藤酮杀虫机理农药 1 前言 鱼藤酮目前是一种比较完善的植物源生物杀虫剂，具有对害虫的广谱作用大，对天敌干扰少，在环境中易于降解，资源丰富等特点。且可防治的有害生物种类多[1]。对果树、蔬菜、茶叶、花卉及粮食作物上的数百种害虫有良好的防治效果，对哺乳动物低毒，对害虫天敌和农作物安全，是害虫综合治理上较为理想的杀虫剂，被广泛应用于蔬菜、果树等农作物和园林害虫的防治。其市场发展空间极其广阔，为了顺应绿色食品发展的要求，近年来我国鱼藤酮产品的发展十分迅速[2]。目前市场中销售制剂中大多是乳油，也有少数是可湿性粉剂。本文就鱼藤酮的应用开发现状进行了论述，主要论述了鱼藤酮的毒理学性质，以及在及在长期的应用过程中对人和生态系统的潜在危害。 2 应用开发现状 2.1 资源 鱼藤酮的资源十分丰富，目前发现的总共有68种豆科植物含有鱼藤酮，主要分布于鱼藤属、尖荚豆属和灰叶属植物中。生长于东南亚各国的豆科鱼藤属植物毛鱼藤，毛鱼藤的根、茎中的鱼藤酮含量都很丰富。是目前我国鱼藤酮相关产业的主要原料。此外，生长于非洲的山毛豆是鱼藤酮的一种新资源。其植株的叶片、豆荚、根、种子、茎秆等多个部位都含有活性成分，是豆科植物中一种优秀的杀虫植物，对很多害虫具有生物活性。对这种植物有许多地方进行了栽培，比较成功的有秘鲁尖荚豆属植物基地，是目前世界上面积最大的[3]。 2.2 化学成分 据很多国内外的文献报道，鱼藤酮的化学成分主要以黄酮、异黄酮，鱼藤酮为主，还有萜类，单苯环类和脂肪族类化合物。
?基础研究?大鼠脑出血模型血肿周围继发损害及超微结构变化研究 赵性泉 周剑 王拥军 [摘要]目的探讨脑出血所引发的血肿周围组织继发性损害的病理生理过程和可能机制。方法制备SD雄性大鼠脑出血模型,实验组分成1h、3h、12h、24h、48h、72h及7d7个小组;对照组分成3h、24h及72h3个小组,每组5只大鼠。每实验小组取2只大鼠,2%氯四氮唑(TTC)染色,进行大体组织病理演变观察。另取3只大鼠,在血肿周边区及同侧皮层区分别取脑组织在透射电子显微镜及光学显微镜下观察。结果TTC染色显示,血肿呈黑褐色,血肿周围未见白色梗死区。光镜下观察,血肿区与正常脑组织间有一周围区,其中可见组织疏松,细胞不同程度水肿,星形细胞肿胀,神经细胞变性、坏死,出血灶周边毛细血管增生伴炎细胞浸润。电镜观察可见,血肿周围组织早期星形细胞胞体和周边足突肿胀,神经细胞改变不明显。注血后24h,星形细胞肿胀明显,部分变性、坏死;神经细胞轻度变性,血脑屏障破坏。注血后72h,星形细胞高度肿胀,神经细胞变性。结论脑出血血肿周围脑组织发生病理、超微结构的改变,血肿周围脑组织产生继发性损害。 [关键词]脑出血;脑水肿;电子显微镜;病理;大鼠 Second ary injury to perihem atom a in intracerebral haemorrhage rats ZHA O Xing2quan,ZHOU Jian,W A N G Yong2jun.Depart ment of Neurology,Beijing Tiantan Hospital,Beijing100050,China [Abstract]Objective To study possible mechanism through investigating the pathological and ultrastructural characters of secondary injury to perihematoma in intracerebral haemorrhage(ICH)rats.Methods Sprague2Dawley male rats were subjected to ICH models.They were randomly divided into test group and control group.The rats in the test group were divided into7subgroups at1h,3h,12h,24h, 48h,72h and7d after ICH;while those in control group were divided into3subgroups at3h,24h,72h after saline injection.Each subgroup contained5rats.2rats from each group were stained by2%triphenyltetrazolium chloride(TTC)to observe the pathological change.3rats were picked up from each group to do optical microscope and electric microscope investigation on perihematoma tissue and ip2 silateral cortex.R esults Hematoma tissue was demonstrated as black2brown by TTC staining,no white infarcted area was detected around hematoma.In addition,there was a transitional zone between hematoma and normal tissue under microscopy;the involved tissue looked loose with varied edematous cells.Astrocytes appeared swollen and neural cells looked degenerated and necrosis.Meanwhile,capillary hy2 perplasia around hematoma with foot2plate swollen were detected,no remarkable neural cells change was observed.24h after blood injec2 tion,astrocytes started to swell,part of them became degenerated and necrosis.Neural cells appeared mild degenerated and blood2brain bar2 rier were destroyed.72h after ICH,astrocytes showed highly swollen with neural cells degenerated.Conclusion Secondary injury to perihe2 matoma has been identified and the pathological and ultrastructural changes have been observed. [K ey w ords]intracerebral haemorrhage;cerebral edema;electric microscope;pathology;rat 中图分类号:R743.34文献标识码:A文章编号:100629771(2004)0820469203 [本文著录格式] 赵性泉,周剑,王拥军.大鼠脑出血模型血肿周围继发损害及超微结构变化研究[J].中国康复理论与实践, 2004,10(8):469—471. 脑出血是一种发病率很高的急性脑血管病,至今仍无特别有效的治疗方法[1]。脑出血后,血肿周围存在一个组织损伤和水肿形成进行性加重的区域,该区域内的病理改变在一定时间内是可逆性的,如果能在此时间窗内给予适当的治疗措施,可使受损组织恢复功能,此区域称血肿周边半影区或半暗带[2]。挽救脑出血后血肿周边半影区内潜在可逆性损伤脑组织是近几年来脑出血研究的重点[325]。本研究通过大鼠脑出血模型观察血肿周围继发性损害的病理过程和超微结构的改变,以期进一步明确脑实质出血所引发的周围组织继发性损伤的病理生理过程和可能的机制。 1材料与方法 作者单位:1.100050北京市,首都医科大学附属北京天坛医院神经内科(赵性泉,王拥军);2.100050北京市,武警总医院影像科(周剑)。作者简介:赵性泉(19672),男,山东郓城县人,副主任医师,主要研究方向:神经病学。1.1实验动物及分组 健康成年雄性Sprague2Dawley 大鼠(由中国医学科学院动物室提供)50只,体重300—350g。采用随机数字抽样法将大鼠分为实验组和对照组,实验组分成1h、3h、12h、24h、48h、72h 及7d7个小组;对照组分成3h、24h及72h3个小组,每小组5只大鼠。 1.2脑出血模型制备 在2次注血法制备脑出血模型基础上进行改良,采用1次低压、缓慢注血法制备大鼠脑出血模型。对照组注入等量生理盐水,手术过程同实验组。 1.3标本及病理切片制作 每实验小组取3只大鼠行心脏插管、4%多聚甲醛(p H7.4)灌流固定,断头取脑,于尾状核血肿周边区及同侧皮层区分别取1mm3脑组织2块,置于 2.5%戊二醛溶液中固定;逐级脱水、包埋、切片、铅铀染色,透射电子显微镜(简称电镜)下观察。将剩余脑组织置于4%多聚甲醛溶液中固定,脱水、透明、石蜡包埋、组织切片及HE染色,在光学显
第一节虾蟹类养成的几种方式 第二节池塘生态学 第三节池塘的处理 第四节虾蟹类饵料生物的培养 第五节池塘水质与底质的调控 第一节虾蟹类养成的几种方式 从饵料来源、养殖形式、放养密度及机械化程度等分为依靠天然饵料为主的粗养（如港养、鱼塭养殖、生态养殖）、以投饵为主的半精养（如池塘养殖、网箱、网笼和拦网养殖）、利用现代技术人工充气、控温、调节水质的集约化精养。 第二节池塘生态学 讨论池塘生态条件与养殖生物之间的相互关系，讨论池塘生产力以及提高生产力的途径。一池塘的物理因子 太阳辐射；池塘的补偿深度（光照强度至池塘的某一深度，浮游植物的光合作用产氧量恰好等于浮游生物呼吸作用的消耗量，此深度即为补偿深度，其以上的水层称增氧层，一下的水层为耗氧层）；水温；池水的运动（混合和对流）和分层（使用增氧机）。 二池塘的化学因子 盐度：淡水（低于1），低盐度（1-10），半咸水（10-25），海水（25-34）。确定海水池塘可养殖的对象，由海水的渗透压及该种生物对渗透压的调节能力而定。在养殖过程中，尽量调节池水的渗透压在养殖对象的等渗点附近，以减少能量损耗，使其迅速生长。 海水的pH及二氧化碳平衡系统：最低出现在早上日出之前，最高在下午日落之前。 海水中溶解气体：溶解氧（来源是通过换水、空气溶入和浮游植物的光合作用，消耗是水中浮游生物、细菌和水中池底淤泥中有机物氧化分解。溶解氧的水平分布与风向、风力有密切关系，一般情况下下风处的氧气条件好于上风处，鱼虾首先出现在上风头附近；溶解氧具有明显的垂直分布，静水池塘水过深有害；溶解氧的昼夜变化很明显，白天逐渐增多，夜间迅速下降至黎明前降至很低。）；氨（来源是含氮有机物分解产生，水中缺氧时含氮化合物被反硝化细菌还原，水生动物的代谢产物一般以氨气形式排出，池塘施尿素后分解。氨也有昼夜和垂直变化，主要与池水溶解氧、水温、pH变化有关，pH升高或温度升高，氨气增多，白天中午前后开增氧机搅水）；硫化氢（缺氧条件下含硫有机物经厌氧细菌分解产生。有毒性，应保持池底有充足的氧气，在池底污染情况下经常加入氧化铁减少其产生。） 池塘中营养盐类：水中氮化合物包括有机氮（氨基酸、蛋白质、核酸和腐植酸等物质中含的氮）和无机氮（溶解氮气、铵态氮、亚硝态氮和硝态氮最先利用铵氮，其次是硝态氮，最后是亚硝酸氮）；磷酸盐存在形式有溶解的无机磷（以磷酸根和亚磷酸根形式存在）、溶解的有机磷（如卵磷脂等，在水中最终水解为磷酸和磷酸盐）和颗粒磷（悬浮于水中颗粒状的各种磷酸酯），直接利用的是溶解的无机磷盐（称为有效磷）。池塘中磷的来源主要由施肥、投饵、换水、动物排泄、生物尸体分解和淤泥中释放而来。碳酸盐类（包括碳酸氢盐和碳酸盐，水中重要的营养要素，也是保持水环境平衡的重要因子）。 三池塘的生物环境 人工控制的生态系，由生产者、消费者和分解者三部分组成。 生产者：植物，主要是浮游藻类和底栖藻类。浮游藻类：第一类是微型蓝球藻类为优势种的池水（蓝绿色或黄绿色，繁殖过盛发生藻败时常引起虾发病和死亡），第二类是以硅藻为优势种的类群（高盐度池塘，水色呈黄褐色或褐绿色，利于鱼虾生长），第三类是以金藻为优
鱼藤酮杀虫活性及其应用研究 摘要：鱼藤酮是一种广谱性杀虫剂,对害虫高效且不易产生抗药性。本文对鱼藤酮的来源分布、杀虫活性及其在防治害虫的应用现状、存在问题和展望等几个方面进行了比较详细的论述。 关键字：鱼藤酮；杀虫活性；应用研究 Abstract:Is a broad spectrum insecticide rotenone,resistance to pests is efficientand easy.This paper on the distribution of sources of rotenone,insecticidal activity and its application in pest status,problems and prospects,and other aspects are discussed in detail. Key words:rotenone;insecticidal activity;applied research 前言 鱼藤酮主要来源于豆科的鱼藤属、灰毛豆属、合生果属、鸡血藤属、紫槐属、黄檀属、毒鱼豆属和蝶豆属等植物，迄今已发现的鱼藤酮类化合物在74种以上[1]-[3]。鱼藤酮是一种抑制神经组织和肌肉组织的选择性植物源杀虫剂，具有广谱的杀虫活性、良好的生态效益，并在自然界大量存在，而被广泛应用于蔬菜、果树等农作物害虫的防治[4]。 1 鱼藤酮的来源与分布 鱼藤，别名毒鱼藤。为豆科鱼藤属（Derris Lour.）豆科蝶形花亚科多年生木质藤本植物，产于亚洲热带和亚热带地区，如东印度半岛，菲律宾群岛，马来半岛等地。我国有20多种，产于西南部经中部至东南部。它是我国三大传统杀虫植物之一，其根部含有鱼藤酮，是主要的杀虫成分[5]。 2 鱼藤酮的产品和应用范围 近年来，鱼藤酮的产品的使用呈逐年递增的趋势，从1991年广东省广州农药厂从化市分厂登记第一个鱼藤酮产品到现在，共有11家企业登记鱼藤酮产品18个厂次，其中原药2个，单剂4个，复配制剂12个。这些产品中，7.5%氰·鱼藤乳油（氰戊菊酯+鱼藤酮）和1.8%阿维·鱼藤乳油（阿维菌素+鱼藤酮）用于防治小菜蛾（Plutella xylostella），25%水胺·鱼藤乳油（水胺硫磷+鱼藤酮）用于防治柑橘上的矢尖蚧(Prontaspis yanonensis)，21%辛·鱼藤乳油（辛硫酸+鱼藤酮）防治棉花上的棉铃虫（Heliothiszea）。这些产品主要以鱼藤为材料，其中大部分是复配产品，防治面积达几千公顷[6]。经研究表明鱼藤酮与其他化学或生物农药混配[7]-[9]高效、低毒，可以有效地延缓害虫的抗药性，减少环境污染，还能刺激
自体血注入大鼠脑出血模型的造模体会 目的应用立体定位仪通过抽取自体鼠尾血回注大鼠大脑的方法造大鼠脑卒中的模型，研究和掌握造出血性脑卒中动物模型的方式和方法。方法SD雌性大鼠90只，在立体定位仪的辅助定位下，抽取鼠尾动脉血50 μL注入大鼠左侧尾状核，应用Longa 五级评分法对大鼠行为学观察评分，对大鼠脑出血模型进行评价。结果对90只SD大鼠制作脑出血模型，86只存活大鼠均有神经功能缺损。结论应用自体鼠尾血回注大脑的方法可构建稳定的出血性脑卒中动物模型。 标签：自体血注入法；脑出血；模型；大鼠 出血性脑卒中是原发于脑实质内的非外伤性出血，致残及致死率高较高，该病严重危害着人类的健康。对脑出血的实验研究一直受到广泛重视，脑出血造模的稳定性、同患者发病表现的接近性直接关系到实验研究的科学性和实用性。本实验研究通过鼠尾动脉血分次回注自体大鼠脑组织内，建立脑出血的大树模型。 1资料与方法 1.1实验仪器脑立体定向仪（日本）；100 μL微量注射器，涡轮牙钻机；手术相关器械 1.2一般资料近交成年雌性SD大鼠90只，体重（300±20）g。由河北医科大学实验动物中心提供，标准普通饲料喂养和自由饮水，昼夜自然节律，饲养环境为河北大学医学部动物实验中心多层层流架。 1.3方法大鼠脑出血模型的制备：应用10%水合氯醛对大鼠腹腔注射量为300 mg/Kg进行麻醉，头部备皮并应用碘伏常规消毒后，俯卧位固定于定向仪上，前囟抬高1 mm，取长度约为2 cm正中纵形切口，小型扩皮器牵开切口，取前囟点中线右侧旁开3.0 mm，沿矢状面向后1.5 mm，牙钻钻透颅骨，深及骨膜。在消毒后在鼠尾腹侧正中做一纵行切口，抽取尾动脉不加抗凝剂的动脉血液约60～70 μL。将针头垂直于颅骨骨孔的方向，进针约6 mm，缓慢注入50 μL自体动脉血液，注血时间以两分钟为宜，为防止鼠血反流，将针留置10 min。缓慢退针，骨蜡封闭颅骨骨孔，缝合手术创口。 1.4行为学的分级评估参照Longa 五级评分法[1]，对大鼠进行神经功能缺损评分：0级：无体征，记0分；Ⅰ级：动物不能完全伸直其前肢，记1分；Ⅱ级：动物一侧肢体瘫痪，有追尾现象，记2分；Ⅲ级：动物不能站立/ 打滚，记3分；Ⅳ级：无自发性活动，有意识障碍，记4分。 2结果 大鼠实验脑出血造成后，进行行为学评分，每只大鼠均采用Longa方法，反应其行为学变化。根据对实验动物的观察，在大鼠大脑注射自体鼠尾动脉血液后，
植物化学保护题库 绪论 一、名词解释 植物化学保护学、IPM、持久性有机污染物（POPs）、事先知情同意程序（prior informed consent procedure）二、简答题： 简述农药的发展史 三、论述题 试述化学防治的利与弊及如何认识农药的一些弊病。 第一章植物化学保护基本概念 内容提要 1.农药、毒力、药效、毒性的概念。 2.农药按原料的来源及成分分类、按用途分类、按作用方式分类。 3.农药的毒力、药效、毒性。影响药害的农药因素、植物因素、环境因素。 4.农药中毒的急救办法。 同步练习题 一、单项选择题 1. 下列哪种农药属于无机农药（）。 A 乐果 B 氯菊酯 C 硫磺 D 西维因 2. 下列哪种农药属于有机农药（）。 A 石灰 B 波尔多液 C 磷化铝 D 敌敌畏 3. 杀虫剂、杀菌剂和除草剂按照（）来分类。 A 原料的来源 B 成分 C 用途 D 机理 4. 下列哪种不属于植物性农药（）。 A 除虫菊素 B 烟草 C 鱼藤酮 D 苏云金杆菌 5. 下列哪种农药属于杀虫剂（）。 A 乐果 B 大隆 C 百菌清 D 2.4-滴 6. 下列哪种农药属于除草剂（）。 A 草甘膦 B 功夫 C 硫磺 D 克百威 7. 下列哪种农药属于杀菌剂（）。 A 敌敌畏 B 功夫 C 代森锰锌 D 呋喃丹 8. 低毒农药的LD50值（）mg/ml。 A 小于50 B大于50 C小于500 D大于500 9. 下列哪类农药属于负温度系数的农药（）。 A 有机磷 B 氨基甲酸酯 C 拟除虫菊酯 D 苯氧羧酸 10. 害虫（）对农药敏感。 A 卵期 B 幼虫期 C 蛹期 D 成虫期 11. 慢性毒性的测定方法为（） A．大白鼠口服LD50 B. 三致试验 C. Ames试验 D. 迟发性神经毒性试验 二、判断题（正确打“√”，错误打“×”） 1. 防治刺吸式口器的害虫使用胃毒剂效果好（）。 2. 防治咀嚼式口器的害虫使用内吸剂效果好（）。 3. 高温天气使用农药容易产生药害（）。 4. 天敌生物、转基因生物属于农药管理的范畴（）。 5. 调节植物、昆虫生长的物质属于农药，性引诱剂则不属于农药（）。 6. 安全性指数K值越大，说明农药对作物越安全（）。 7. LD50值越大，农药毒性越低（）。 8. 施用农药24小时内下雨需要重新补喷。（） 9. 内吸性药剂是指有害生物体吸收农药导致死亡的药剂。（）