外泌体科学研究策略与方法

外泌体分离提纯草案By 朱旭峰一、以超高速离心的方法来分离外泌体（细胞上清）1.1细胞培养液(CM)是来自无菌的80%-90%的培植细胞，并用浓度比1:1.000的蛋白酶抑制剂混合。（sigma）1.2快速地将CM用0.22μm 的过滤筛(Millipore)过滤，来分离完整地细胞和残渣。超速离心于120,000_g (Sorvall WX ULTRA SE

外泌体提取

血清中外泌体的提取方法1.血清离心纯化：3000g，10mins，取上清液。2.按下表加入血清和提取试剂盒，混匀，静置30mins。3.离心：1500g，30mins，去上清液。4.纯化离心：1500g，5mins，去上清液。5.加入30无RNA酶的水，吹打，放于-80冻存。

外泌体与肿瘤转移外泌体（exosome）是Pan在研究网织红细胞多泡体胞外细胞质融合时首先发现的1，是细胞内多囊泡体与细胞膜融合后，释放到胞外基质中的一类直径约为30-100nm的膜性囊泡，其分布和来源广泛，可由多种细胞所分泌2, 3。且其内容物丰富，携带有蛋白、脂质、DNA 和非编码ＲNA等，参与了如免疫应答、抗原提呈、胞间通讯、蛋白质和RNA转运等多种生

外泌体是大多数细胞分泌的40 - 150nm的膜泡，存在于细胞培养基、血浆、血清、唾液、尿液、羊水和恶性腹水等生物液体中。越来越多的证据表明，这些囊泡充当细胞信使，将信息传递给身体内的细胞和组织。外泌体包含细胞特异性蛋白、脂质和RNA，它们被运输到其他细胞，并改变其他细胞的功能或生理作用。这些外泌体可能在介导对感染性病原体和肿瘤的适应性免疫反应、组织修复、神

1、细胞培养上清：即在4℃下，首先300×g离心10 min，吸取上清液，然后2 000×g离心10 min；吸取上清液后，10 000×g 高速离心30 min，吸取上清液；140000×g超速离心90 min；除去上清液，所获得的沉淀即为外泌体。用PBS缓冲液洗涤沉淀并重悬后，140 000×g 再次离心90 min，100 μL PBS缓冲液重悬沉淀，

血清外泌体来源的microRNA-221-3p在肝细胞癌中的表达及意义 吴俊艺

Open Journal of Nature Science 自然科学, 2017, 5(1), 24-30 Published Online February 2017 in Hans. /journal/ojns https:///10.12677/ojns.2017.51004文章引用: 郭德镔, 朱向情, 潘兴华. 外泌体——临床运用的潜在靶点[J]

临床检验杂志2016年12月第34卷第12期Chin J Clin LabSci,Dec.2016,V01.34,No.12DOI:10.13602/ki.jcls.2016.12.11外泌体蛋白质组学研究进展宰・927・・综述・覃思华,郑磊(南方医科大学南方医院检验科,广州510515摘要:外泌体(exosome是一类由体内多种活细胞分泌的纳米级的双层膜结

广东化工 2019年第2期第46卷总第388期-23 -大鼠血清外泌体不同提取方法的比较罗哲斯，钟成勇，秦转，李艳文，毛建文**［收稿日期］2018-11-28［基金项目］广东省高等学校“千百十工程”人才培养项目(2015cxqx214)［作者简介］罗哲斯(1992-),女，广东清远人，硕士研究生，主要研究方向为分子药理学。*为通讯作者：毛建文，男，湖南人，

QIAGEN外泌体提取快速操作规程Part I: 囊泡分离开始前提示本操作规程用于从0.1至1 ml血清或血浆中纯化外泌体或其他细胞外囊泡。本规程从细胞外囊泡分离总RNA（包括小RNA）（Part II）。如有必要，加热重溶RWT缓冲液中的所有组分。除了分离步骤（步骤11）之外，其他操作应该在室温（15-25°C）快速进行。RWT缓冲液和RPE缓冲液原液中在

Exosome简介，提取，分析（全）一，Exosome简介最近几年，一种叫做Exosome的小囊泡正受到大家广泛的关注。Exosome 是直径约为30-150nm，密度在1.13-1.21g/m1的小囊泡。Exosome天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，外泌体(Exosome)是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的膜性囊泡。Exoso

非试剂盒一、从人血清样本中提取外泌体1.250 μL无细胞血清样本在冰上融化；2.用11 mLPBS稀释；3.0.22 μm滤膜过滤；4.150 000 g 4度离心过夜；5.弃上清，用11 mLPBS重悬沉淀；6.150 000 g 4度离心2 h；7.弃上清，500 μL Trizol用于RNA提取，或者250 μL of lysis buffer用于蛋

外泌体分离提纯草案By 朱旭峰一、以超高速离心的方法来分离外泌体（细胞上清）1.1细胞培养液(CM)是来自无菌的80%-90%的培植细胞，并用浓度比1:1.000的蛋白酶抑制剂混合。（sigma）1.2快速地将CM用0.22μm 的过滤筛(Millipore)过滤，来分离完整地细胞和残渣。超速离心于120,000_g (Sorvall WX ULTRA SE

外泌体提取的具体步骤及方法外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm)，现今，其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。其主要来源于细胞内内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。现已证实可以分泌外泌体的细胞有：肥大细胞、淋巴细胞、树突状细胞、肿瘤细胞、间充质干细胞等。外泌体在免疫中抗原呈递、肿瘤的生

外泌体提取ppt课件

外泌体（Exosome）发现于1986年，是一种直径约30~100nm的双层膜囊泡状结构小体，可由机体内多种细胞如免疫细胞、干细胞、心血管细胞、网织红细胞、血小板、神经细胞和肿瘤细胞等主动分泌产生，广泛分布于外周血、尿液、唾液、乳汁、腹水、羊水等体液中。外泌体携带大量特异性的蛋白质（如细胞因子、生长因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物质，在

血清胞外囊泡提取1.加入PEG(终浓度8%+0.5MNacl)， 4℃孵育过夜2.3500g 离心30min，弃上清,沥干液体。加入500UL(按自己需要调整) ，1×PBS(PH:7.4)重悬.3.二次沉淀：用终浓度5%PEG再次沉淀，4℃孵育最少1h, 3500g 离心30min，弃上清,沥干液体。加入100UL ，1×PBS(PH:7.4)重悬. (根