17动物组织蛋白提取

1.组织块迅速置于预冷的生理盐水中,洗去表面的血迹,将组织称量后切成较小的组织块(0.2-1.0g),放入组织匀浆器中,按组织100mg:提取试剂体积1ml的比例加入相应体积的蛋白提取试剂(需提前加入酶抑制剂)进行匀浆,至组织研磨完全。2.超声处理(同细胞蛋白样品的制备),处理完后置冰上裂解4-5小时。3.10000 g/min离心10min,取中层溶液,加

2019-12-20
总蛋白的提取

1.单层贴壁细胞总蛋白的提取:(1)倒掉培养液,并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液(或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走)。(2)每瓶细胞加3ml 4℃预冷的PBS(0.01M pH7.2~7.3)。平放轻轻摇动1min洗涤细胞,然后弃去洗液。重复以上操作两次,共洗细胞三次以洗去培养液。将PBS弃净后把培养瓶置于冰上。(3)按1

2019-12-12
植物组织蛋白提取方法

植物蛋白质提取方法总汇一、植物组织蛋白质提取方法1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清液,样品制备完成。蛋白质提取液:300ml1、1Mtr

2024-02-07
植物组织总蛋白提取(粗提)

一、植物组织蛋白质提取方法1.根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。2.把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。3.用离心机离心8000rpm,40min,4℃或11100rpm,20min,4℃4.提取上清夜,样品制备完成。蛋白质提取液:300ml1、1Mtris-HCl(

2024-02-07
组织蛋白提取

1. 提取蛋白裂解液配方:25 mM HEPEs PH:7.45 mM EDTA5 mM EGTA50 mM NaCl1 mM Na3VO3(矾酸钠)1 mM sodium phosphophate0.05% SDS0.05% sodium deoxycholate (脱氧胆酸盐)1% Triton-X 1005 mM NaF0.1% 2-mercaptoe

2020-01-19
总蛋白质提取方法

总蛋白质提取方法(1)在研钵中预先加入0.25 g PVPP交联聚维酮和少量石英砂,在电子天平上调零后称取5g 黄皮层组织样品,用液氮研磨至细粉末状,全部转移至50 mL压口离心管中;(2)依次加入30 mL 12.5% TCA/丙酮、2 mL 1 M DTT和1 mL 100 mM PMSF 苯甲基磺酰氟化物,充分振荡混匀后冰浴振荡提取15 min,然后4

2024-02-07
蛋白提取实验步骤

蛋白提取实验步骤:1、细胞总蛋白提取A、对于悬浮细胞: 离心收集细胞,每106细胞加250 ul RIPA (在使用前数分钟内加入蛋白酶抑制剂),振荡。如果需要提高蛋白浓度,可以适当减少细胞总蛋白提取试剂体积。B、对于贴壁细胞:a、用TBS冲洗细胞2-3次。最后一次彻底吸干残留液。b、加入适当体积的 RIPA(使用前数分内加入蛋白酶抑制剂)于培养板、瓶内3-

2024-02-07
提取蛋白的常规方法

1、原料的选择早年为了研究的方便,尽量寻找含某种蛋白质丰富的器官从中提取蛋白质。但至目前经常遇到的多是含量低的器官或组织且量也很小,如下丘脑、松果体、细胞膜或内膜等原材料,- 105 - 蛋白质提取与制备Protein Extraction and Preparation因而对提取要求更复杂一些。原料的选择主要依据实验目的定。从工业生产角度考虑,注意选含量高

2024-02-07
肝组织总蛋白提取的标准操作规程

肝组织总蛋白提取的标准操作规程(编号:025)1、目的及适用范围该SOP用来规范肝组织总蛋白提取的操作。2、主要仪器及试剂均质仪、铁架台、冷冻台式离心机、微量移液器、单去污剂裂解液(50mmol/L Tris·HCl pH8.0,150mmol/L NaCl,1%TritonX-100,100μg/mL PMSF)3、相关器皿的预处理剪刀和均质仪的转头需彻底

2024-02-07
脂肪组织蛋白的提取方法.doc

①用液氮研磨的方法更佳,具体方法可以联系本公司****@***.c*m索取详细资料。beibokit - 2 -产品说明书相关产品:产品总蛋白提取试剂盒核蛋白提取试剂盒膜/胞浆/核蛋白分步提取试剂盒Bradford蛋白定量试剂盒ECL化学发光检测试剂盒细胞蛋白提取试剂盒组织蛋白提取试剂盒细菌蛋白提取试剂盒酵母蛋白提取试剂盒昆虫蛋白提取试剂盒磷酸化蛋白提取试

2024-02-07
不同组织的蛋白提取方法99

不同组织的蛋白提取方法2017-07-18不同组织的蛋白提取方法一、植物组织蛋白质提取方法1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜,样品制备

2021-03-21
肝组织蛋白提取

1肝组织蛋白的提取准备物品:PBS (提前消毒,4℃过夜备用),平皿,眼科剪,小镊子,匀浆器,枪头,EP管(以上物品需高压消毒备用),冰盒(所有操作均在冰上)1)取出肝组织块于平皿中,加入PBS漂洗,切下约黄豆大小的肝组织放入手动匀浆器中,在冰上迅速碾磨直至呈现云雾状2)加入组织裂解液约500μL(裂解液:PMSF=100:1),冰上作用20~30min3)

2024-02-07
肝组织蛋白提取

1肝组织蛋白的提取准备物品:PBS (提前消毒,4℃过夜备用),平皿,眼科剪,小镊子,匀浆器,枪头,EP管(以上物品需高压消毒备用),冰盒(所有操作均在冰上)1)取出肝组织块于平皿中,加入PBS漂洗,切下约黄豆大小的肝组织放入手动匀浆器中,在冰上迅速碾磨直至呈现云雾状2)加入组织裂解液约500μL(裂解液:PMSF=100:1),冰上作用20~30min3)

2024-02-07
研磨组织 提取蛋白

Number DatePurpose: 提取蛋白,用于Western blot检测Material: 组织裂解液Procedure:1.取米粒大小组织,放入研钵中,加入液氮研磨(反复加液氮研磨)2.研磨充分后加入RIPA裂解液ul(RIPA中裂解液与蛋白酶抑制剂PMSF比例为100:1)3.继续研磨至裂解液化为液体后,吸出裂解液放入1.5ml离心管中,裂解1

2024-02-07
脂肪组织蛋白的提取方法

脂肪组织蛋白的提取方法

2024-02-07
蛋白提取方法

蛋白质提取的方法总汇 2005-4-15 23:00:00 来源:生命经1、植物组织蛋白质提取方法1、根据样品重量(1g样品加入3.5ml提取液,可根据材料不同适当加入),准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上静置(3-4小时)。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜,

2024-02-07
固体组织蛋白提取

固体组织蛋白提取1. 每100mg固体组织剪碎后加入0.5 ml裂解液,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次;或用高速机械匀浆器12,000 rpm 破碎组织。注意:初始组织的量应在10-100mg范围。肝肾组织蛋白含量高,提取时应加较少量的组织,否则形成的蛋白膜厚、致密且难溶。2. 取0.5ml组织匀浆液转移到1.5ml离心管,加2倍体积的(1 ml)抽提试剂充分

2024-02-07
动物固体组织蛋白提取-.

动物固体组织蛋白提取-Protocol2017-07-18动物固体组织蛋白提取 Protocol1、前夜将磁珠及匀浆管洗净置入75%乙醇中浸泡。早晨取出磁珠和匀浆管,自然晾干;也可放入烤箱中,速度较快。2、裂解液配制:RIPA:PMSF=100:1,现配现用。(1000ulRIPA+10ulPMSF)。置入4℃冰上。3、抽蛋白(应冰上进行):a、适量组织(最

2024-02-07
组织蛋白提取方法

组织蛋白提取方法

2024-02-07
甲醛固定组织蛋白提取方法

甲醛固定组织蛋白提取方法

2024-02-07