good口腔癌细胞被血小板诱导的聚集的信号通路

同为靶向药，贝伐珠单抗、安罗替尼、阿帕替尼有什么区别？在肿瘤治疗领域，靶向药物通过干扰癌细胞内特定的分子信号通路或蛋白质靶标来发挥作用，能更加精准地作用于癌细胞，以减少对正常细胞的损害。

贝伐珠单抗、安罗替尼和阿帕替尼目前在临床上使用广泛，虽都属靶向治疗范畴，但其作用机制、适应症和副作用等方面存在着显著区别。

接下来，我们将深入探讨这三种药物的特点，以便充分的认识它们在癌症治疗中的应用和区别。

1.贝伐珠单抗贝伐珠单抗是利用重组DNA技术制备的一种人源化IgG1单克隆抗体，其作用机制为抑制肿瘤血管生成。

在肿瘤生长期间，肿瘤细胞需要形成新的血管以供应充足的营养，这一过程涉及到一种叫血管内皮生长因子（VEGF）的蛋白质。

VEGF由人脑垂体前叶分泌，是一种高度特异性的促血管内皮细胞生长因子，其可通过与血管内皮细胞生长因子受体（VEGFR) 结合，直接刺激血管内皮细胞增值、分裂，从而刺激肿瘤新血管生成。

而贝伐珠单抗可与VEGF结合，阻止其与VEGFR受体结合，从而控制肿瘤生长。

目前，贝伐珠单抗已被广泛应用于多种肿瘤，包括结直肠癌、非小细胞肺癌、胶质母细胞瘤、肝癌、卵巢癌、宫颈癌等领域。

虽然贝伐珠单抗疗效显著，但其在使用过程中仍会出现毒副作用，常见的有出血、高血压、脓肿、蜂窝组织炎感染、电解质紊乱、外周感觉神经病变、胃肠道反应、心血管系统疾病、血栓等，其他潜在的不良反应则包括蛋白尿、蛋白质丢失性肠病等。

1.安罗替尼安罗替尼是由我国正大天晴药业研发，并于2018年获得中国国家药品监督管理局（NMPA）批准上市，是我国首个自主研发并上市的靶向抗癌药物。

安罗替尼应用广泛，目前被批准用于非小细胞肺癌、小细胞肺癌、甲状腺癌和软组织肉瘤，其作用机制与贝伐珠单抗相似，主要与抑制肿瘤新血管生成和抑制肿瘤细胞增殖有关。

研究表明，安罗替尼是一种小分子多靶点的受体络氨酸激酶抑制剂，不仅可抑制VEGFR1、VEGFR2、VEGFR3，还可抑制血小板衍生生长因子受体（PDGFR)、成纤维细胞生长因子受体和干细胞因子受体（c-KIT)等激酶的活性，进而发挥抗肿瘤作用。

研究刺五加黄芪片和雷公藤片治疗口腔扁平苔藓前后的血小板聚集率和血液流变性变化及临床疗效摘要目的探讨刺五加黄芪片与雷公藤片治疗口腔扁平苔癣前后的血小板聚集率与血液流变性变化情况与临床疗效。

方法97例口腔扁平苔藓患者，应用数字随机法分为甲（36例）、乙（31例）、丙组（30例）。

甲组患者应用刺五加黄芪片进行治疗，乙组患者应用雷公藤片进行治疗，丙组患者应用刺五加黄芪片联合雷公藤片进行治疗；同时选取30例正常人作为对照组，对比分析血小板的聚集率与血液流变性及口腔黏膜的变化指标。

结果与对照组比较，甲、乙、丙三组患者血小板聚集率、纤维蛋白原、红细胞聚集指数、红细胞压积、血浆粘度及全血粘度等血液流变性指标均明显增高，且甲、乙、丙三组患者的发作期指标高于治疗后的稳定期与消退期（P＜0.05）。

甲、丙两组患者的总有效率显著高于乙组（P＜0.05），但甲、丙两组总有效率比较差异无统计学意义（P>0.05）。

结论与正常人相比较，口腔扁平苔藓患者的血液流变性与血小板聚集率等指标明显增强，刺五加黄芪片在口腔扁平苔藓的治疗中疗效明显，刺五加黄芪片和雷公藤片对口腔扁平苔藓进行治疗，其临床疗效与血小板的聚集率有直接关联。

关键词口腔扁平苔藓；刺五加黄芪片；雷公藤片；血小板聚集率；血液流变性在口腔科口腔扁平苔藓是比较常见的疾病之一，该疾病具有病损难愈、慢性迁延的特点，临床疗效较差，在中老年女性中的发病率较高。

相关研究表明，近几年该疾病的发病率呈年轻化的趋势[1]，且发病率逐渐增高。

目前口腔扁平苔藓已经被世界卫生组织确定为癌前病变。

本院应用刺五加黄芪片与雷公藤片对口腔扁平苔藓进行治疗，取得了较好的临床疗效，现将详细情况报告如下。

1 资料与方法1. 1 一般资料选取本院2011年5月～2015年6月诊治的97例口腔扁平苔藓患者作为研究对象，其中女62例，男35例，年龄26～67岁，平均年龄（51.28±13.67）岁，病程58～719 d，平均病程（96.82±71.08）d。

T H B S １在肿瘤中作用的研究进展包楠丁,贾永峰(内蒙古医科大学基础医学院,内蒙古呼和浩特０１０１１０)D O I :１０．１１７４８/b j m y ．i s s n ．１００６－１７０３．２０２１．０４．０３６收稿日期:２０２１Ｇ０３Ｇ２０;修回日期:２０２１Ｇ０３Ｇ２９基金项目:内蒙古自治区自然科学基金项目(编号:２０１９M S ０８１１８)作者简介:包楠丁,女,硕士.通讯作者:贾永峰.摘要:近年来,在多种类型的肿瘤中均发现了血小板凝血酶蛋白Ｇ１(t h r o m b o s p o n d i n Ｇ１,T H B S １)的异常表达,其是近年来肿瘤领域研究的热门靶点基因.T H B S １作为一种多功能蛋白,在肿瘤中的作用较为复杂,对肿瘤的影响机制尚不完全明确,功能及调控机制有待进一步深入研究.现对T H B S １在肿瘤中作用的研究进展作一综述,以期为肿瘤的临床研究提供参考.关键词:血小板凝血酶蛋白Ｇ１;㊀调控机制;㊀肿瘤中图分类号:R ４４６．６㊀㊀文献标识码:AT h eR e s e a r c hP r o gr e s s o fT H B S １i nT u m o r s B A O N a n d i n g ,J I A Y o n g f e n g(S c h o o l o fB a s i cM e d i c i n e ,I n n e rM o n g o l i aM e d i c a lU n i v e r s i t y,H o h h o t ０１０１１０,C h i n a )A b s t r a c t :I n r e c e n t y e a r s ,a na b n o r m a l e x p r e s s i o no f p l a t e l e t h r o m b o s p o n d i n Ｇ１(t h r o m b o s po n d i n Ｇ１,T H B S １)h a s b e e no b s e r v e d i nm a n y t y p e s o f t u m o r s ,w h i c h i s b e c o m i n g ah o t t a r g e t ge n e i n t h ef i e l d o f t u m o r r e s e a r c h ．A s am u l t i Ｇf u n c t i o n a l p r o t e i n ,t h e r o l eo fT H B S １i nt u m o r s i s v e r y c o m pl e xa n d t h em e c h a n i s mo f i t s e f f e c t o n t u m o r i s n o t c o m p l e t e l y c l e a r ．T h e f u n c t i o na n d r e g u l a t o r y me c h a n i s m of t h i sg e n e n e e d t ob e f u r th e r s t u di e d ．T h i s p a p e r r e v i e w s t h e r e s e a r c h p r o g r e s s o fT H B S １i n t u m o r s ,s oa s t o p r o v i d ea r e f e r e n c e f o r t h e c l i n i c a l r e s e a r c h ．K e y w o r d s :T h r o m b o s p o n d i n Ｇ１;㊀R e g u l a t o r y me c h a n i s m ;㊀T u m o r ㊀㊀血小板凝血酶蛋白家族(t h r o m b o s p o n d i n ,T H B S )又称血小板反应蛋白,是最初在血小板中发现的一种多结构和多功能的钙结合性糖蛋白,可以由许多细胞合成和分泌,包括血小板㊁白细胞与内皮细胞等.T H B S 家族由五个编码蛋白质的基因组成:T H B S １至T H B S ５,分为２个亚型:A 亚型为三聚体蛋白,包括T H B S １和T H B S ２,含有转录调控序列(t r a n s c r i p t i o n r e g u l a t i n g s e q u e n c e ,T S R s )序列;B 亚型为五聚体蛋白,包括T H B S ３㊁T H B S ４㊁T H B S ５,不含T S R s 序列[１].在人体中,T H B S １和T H B S ２常表达于多个器官,而T H B S ３至T H B S ５主要表达于软骨和骨组织中.T H B S 家族是组织发生和重塑期间调节细胞表型和细胞外结构的同源蛋白家族,对胚胎发育㊁血管生成㊁创伤修复和肿瘤的发生发展起重要的调控作用.T H B S １是该家族第一个被发现并确定的成员.目前,国内外已经开展大量关于T H B S １的相关研究,但T H B S １在肿瘤中的作用较为复杂,其对肿瘤的影响机制尚不完全明确.㊀㊀１㊀T H B S １的结构及生物学功能㊀㊀T H B S １是于１９７１年被发现的第一个T H B S 成员,被认为是由血小板在凝血酶的刺激下而产生的糖蛋白,因此而得名,但后续的研究证明T H B S １可由多种细胞合成分泌.T H B S １是一种相对分子质量约为４５０k D a 的三聚体同源复合物,由１８６个氨基酸残基组成,包括N 端球状结构域㊁原胶原同源区㊁备解区重复序列㊁表皮生长因子样重复序列㊁钙离子结合域及C 端球状结构域等.T H B S １可与纤维蛋白原㊁纤维连接蛋白㊁层粘连蛋白㊁V 型胶原㊁整合素㊁C D ４７及C D ３６等结合,介导细胞与细胞㊁细胞与基质之间的相互作用[２];T H B S １已被证明在血小板聚集㊁血管生成和肿瘤发生中发挥作用[３];T H B S １是首次报道的内源性抗血管生成因子,可抑制血管３０７标记免疫分析与临床㊀２０２１年４月第２８卷第４期生成和肿瘤发生[４Ｇ５],但最近的研究[６Ｇ７]发现T H B S１也有促进血管新生的作用,T H B S１还可通过抑制性调节血小板内c AM P信号来促进血小板活化,促进血栓形成,促进止血.T H B S１中的T S R s序列通过与内皮细胞膜蛋白C D３６㊁C D４７相互作用抑制内皮细胞迁移并促进细胞凋亡,进而抑制血管生成[８]. T H B S１可与粘多糖结合,在肿瘤的发展中可能支持肿瘤细胞与内皮细胞的黏附和侵袭.T H B S１与转化生长因子(t r a n s f o r m i n gg r o w t h f a c t o r b e t a,T G FＧβ)相互作用,在某些肿瘤中可以诱发凋亡,也可以通过刺激血管生成而促进肿瘤生长和转移[９Ｇ１１]. T H B S１还参与创伤修复,组织再生[１２Ｇ１３].由于T H B S１是具有一系列不同的结构域和功能域的复杂的大分子糖蛋白,每个特定的结构域和功能域与不同种类的细胞因子结合而发挥不同的生物学效应,T H B S１对肿瘤的影响机制尚不完全明确,仍需进一步研究证实.㊀㊀２㊀T H B S１在肿瘤中作用的研究进展㊀㊀２．１㊀T H B S１与黑色素瘤㊀㊀黑色素瘤是一类高转移㊁高复发及预后差的恶性肿瘤[１４],可通过淋巴和血行转移扩散至肝脏㊁肺㊁大脑等其他器官.上皮Ｇ间质转化(e p i t h e l i a lＧm e s e n c h y m a l t r a n s i t i o n,E MT)是黑色素瘤转移的一个决定性因素.B O R S O T T I等[１５]发现,原发性黑色素瘤和转移瘤中T H B S１的表达高于普通痣和发育异常痣,亚细胞定位主要为细胞质,且间质样细胞中T H B S１m R N A表达水平较高,而上皮样细胞几乎不表达.T S U C H I D A等[１６]的研究发现,沉默T H B S１可降低间质样黑色素瘤细胞的侵袭性.分子水平上,T H B S１被认为是T G FＧβ１在体内和体外的主要生理激活因子[１０,１７],T G FＧβ１在E MT进展中具有关键作用,T G FＧβ１以一种生物学上不活跃的潜伏形式分泌,三聚体形式的T H B S１在接触T G FＧβ１后可诱导上皮样表型.G A O等[１９]的研究显示, T H B S１和T G FＧβ１均可由黑色素瘤细胞表达和分泌,T H B S１与T G FＧβ１的表达呈正相关,且呈时间依赖性表达.以上研究提示,T H B S１的表达与黑色素瘤细胞的T G FＧβ１信号有关,T H B S１可能是通过激活潜伏的T G FＧβ１来促进E MT,进而促进黑色素瘤的进展.㊀㊀另外,N A T H等[２０]研究发现,在人类黑色素瘤中,C D４７m R N A与T H B S１m R N A的表达均上调, T H B S１作为C D４７的配体,两者结合后可抑制N K 细胞增殖,从而抑制了N K细胞抗肿瘤活性,进而促进了黑色素瘤的进展.㊀㊀２．２㊀T H B S１与胃癌㊀㊀成纤维细胞生长因子７(f i b r o b l a s t g r o w t h f a c t o r ７,F G F７)是一种间质特异性肝素结合生长因子,它结合成纤维细胞生长因子受体２(f i b r o b l a s t g r o w t h f a c t o r r e c e p t o r２,F G F R２)调节许多细胞和生理过程,包括增殖㊁侵袭㊁迁移和血管生成[２１].先前已有研究表明F G F７/F G F R２信号可能与胃癌的进展有关[２２].H U A N G等[２３]的研究发现,F G F R２主要表达于细胞质,而T H B S１主要表达于细胞质和细胞外基质.与癌旁正常组织相比,肿瘤组织中F G F R２和T H B S１的表达显著升高,且两者的表达量呈正相关.随后,周潇等[２４]的研究显示,F G F R２可上调胃癌细胞系T H B S１m R N A和蛋白质的表达.敲除T H B S１后,降低了胃癌细胞的侵袭和迁移能力.这提示,F G F７/ F G F R２可能通过T H B S１介导的途径来促进胃癌细胞的侵袭和迁移.随后,L I N等[２５]的研究发现,使用P I３K抑制剂(L Y２９４００２)和m T O R抑制剂(R A D００)对胃癌细胞T H B S１蛋白和m R N A的表达有明显的抑制作用,提示F G F７/F G F R２介导的T H B S１上调可能通过P I３K/A k t/m T O R途径发生,进而促进胃癌细胞的侵袭和迁移,进一步揭示了T H B S１对胃癌潜在的调控模式.另外,有研究[２６]报道在非癌组织中T H B S１的表达与胃癌发生之间存在相关性,特别是在多种癌前疾病㊁黏膜萎缩和幽门螺杆菌感染的状态下,T H B S１信号通路被激活.因此T H B S１有望成为肿瘤生物标志物,用于提高胃癌检测率.㊀㊀２．３㊀T H B S１与口腔鳞状细胞癌㊀㊀X I A O等[２７]的研究发现,与癌前和正常上皮细胞相比,口腔鳞状细胞癌细胞中T H B S１的m R N A表达和分泌水平更高.P A L等[２８]的研究发现,T H B S１特异性表达于细胞外基质中,并且在平滑肌肌动蛋白(s m o o t hm u s c l e a c t i n,S M A)阳性肿瘤间质细胞中上调,S M A是已知的癌相关成纤维细胞的标志物.细胞实验结果显示,T H B S１显著促进了人口腔鳞状细胞癌H S C３和H O１N１细胞的迁移,T H B S１可下调两种细胞系EＧ钙黏附蛋白(EＧc a d h e r i n,EＧc a)的表达,而上调波形蛋白(v i m e n t i n)的表达.EＧc a是一类介导细胞间粘连作用的糖蛋白,EＧc a表达下调或缺失,细胞间粘附力降低,造成细胞分散外向浸润性生长,而获得转移的条件.㊀㊀P A L等[２８]进一步研究发现T H B S１上调两种细胞系MM P３㊁MM P１１和MM P１３的表达,并上调成纤维S T２细胞MM P３㊁MM P９㊁MM P１１和MM P１３的表４０７L a b e l e d I mm u n o a s s a y s&C l i n M e d,A p r．２０２１,V o l．２８,N o．４达.基质金属蛋白酶(m a t r i x m e t a l l o p r o t e i n a s e, MM P)是一类能够降解细胞外基质和基底膜的蛋白酶,MM P s的失调能破坏肿瘤侵袭的组织屏障,通过促进基质的降解从而促进肿瘤细胞突破基底膜和细胞外基质,侵袭至周围组织和转移至远处,或间接通过释放与基质相关的生长因子来促进肿瘤的生长㊁侵袭和转移.利用R G D肽(整合素受体功能抑制剂)可明显抑制T H B S１对H O１N１细胞MM P１１和MM P１３的刺激作用.T G FＧβ１可促进H S C３㊁H O１N１细胞T H B S１和S M A的表达,且呈剂量依赖性增加. T H B S１已被证实是整合素I T G A３㊁I T G A V和I T G B１的配体,并且I T G A３和I T G B１在口腔鳞状细胞癌H S C３和H O１N１细胞中均有表达.以上研究提示,在口腔鳞状细胞癌细胞和成纤维S T２细胞中T H B S１介导T G FＧβ１活化,可能是通过整合素信号刺激MM P s表达,既作用于口腔鳞状细胞癌的细胞,也作用于基质细胞,进而促进组织重构和肿瘤的侵袭生长.另有研究[２９]发现,下调c i r c R N AＧ０００４６７４通过m i RＧ３７７Ｇ３p/T H B S１轴延缓口腔鳞状细胞癌的进展.这提示T H B S１参与调控口腔鳞状细胞癌的机制并非单一,而是由多种通路共同调控而产生的效应.㊀㊀２．４㊀T H B S１与结直肠癌㊀㊀L I U等[３０]的研究发现,与非癌组织相比,结直肠癌组织中T H B S１表达明显上调,T H B S１表达上调与结直肠癌肝转移和预后不良显著相关.与口腔鳞状细胞癌一样,L I U等的体外细胞实验结果显示,敲除T H B S１基因上调了人结直肠癌S W４８０和L O V O细胞中EＧc a的表达水平,而抑制了V i m e n t i n的表达,敲除T H B S１基因后两种细胞迁移和侵袭能力比对照组细胞明显减弱.此外, G E P I A数据库[３１]的共表达分析结果显示,T H B S１与上皮细胞标志物C l a u d i nＧ１呈负相关,与NＧc a d h e r i n㊁V i m e n t i n㊁S n a i l１与T w i s t１等E MT标志物表达水平呈正相关.这些结果可以提示,T H B S１可能通过促进结直肠癌细胞的E MT,进而促进结直肠癌肝转移.另有研究[３２Ｇ３５]报道,某些小分子核糖核酸能够调节T H B S１,例如m i RＧ１８２㊁m i RＧ２０５㊁m i RＧ４０７㊁m i RＧ１９a和m i RＧ７等可结合T H B S１３ U T R区的相应位点,下调T H B S１的表达.一方面直接削弱了T H B S１抗血管生成的作用,另一方面减少了T H B S１与血管内皮生长因子(v a s c u l a r e n d o t h e l i a l g r o w t h f a c t o r,V E G F)的结合反应,游离V E G F相对增加,增强了V E G F的淋巴管和血管生成作用,进而促进了结直肠肿瘤的生长,并促进癌细胞通过新生淋巴管和血管的转移.㊀㊀２．５㊀T H B S１与乳腺癌㊀㊀乳腺癌是影响女性健康的最主要的恶性肿瘤之一,位居女性恶性肿瘤发病率及死亡率首位,转移是导致癌症致死的主要原因[３６].局灶性粘附(f o c a l a d h e s i o n,F A)是细胞迁移的重要决定因素,粘着斑激酶(f o c a l a d h e s i o nk i n a s e,F A K)作为F A的关键调节因子,在促进肿瘤细胞侵袭方面起着重要作用[３７Ｇ３８].Y A P蛋白(y e sa s s o c i a t e d p r o t e i n,Y A P)是H i p p o途径的主要效应者[３９],Y A P的过表达被证明是上皮Ｇ间质转化和肌动蛋白动力学的触发因素,Y A P与T E A D家族成员(T E A D)相互作用是肿瘤细胞侵袭性和局灶性粘附形成的关键[４０].L I U 等[４１]的研究发现,T H B S１与Y A P的表达在乳腺癌标本中呈正相关,Y A P可以上调T H B S１的表达.此外,先前已有报道提到T H B S１是F A KＧT y r３９７磷酸化的主要激活剂[４２],并被认为是H i p p o信号的直接转录靶点.以上研究提示,在乳腺癌中可能存在Y A PＧT E A DＧT H B S１这一途径,调控F A KＧT y r３９７磷酸化,并诱导乳腺癌局灶性粘附,促进乳腺癌细胞的浸润及侵袭,进而促进乳腺癌的发展进程.另外,C E N等[４３]的研究提示,T H B S１可能通过下调细胞间连接蛋白的表达和破坏内皮细胞的完整性,进而促进了乳腺癌细胞的跨内皮迁移.免疫组织化学法证实T H B S１在乳腺癌组织中的表达较正常乳腺组织异常增高[４４].T H B S１在正常乳腺组织或乳腺良性病变中低表达甚至不表达,在原位癌中仅表达于癌周基质细胞,而在浸润性小叶癌和浸润性导管癌的癌细胞胞质及间质中高表达,可以认为随着肿瘤侵袭性增加,早期T H B S１呈现抑制血管生成的作用,而当肿瘤细胞长时间暴露于大量T H B S１的环境中,T H B S１激活T G FＧβ１促进肿瘤E MT进展,并且促进肿瘤细胞分泌V E G F进而促进血管生成,覆盖了T H B S１本身抑制肿瘤血管生成的作用,进而促进乳腺癌细胞的侵袭过程.㊀㊀２．６㊀T H B S１与其他肿瘤㊀㊀T H B S１在高级别胶质瘤中的表达高于低级别胶质瘤,并且与预后不良有关,表达受T G FＧβ１通过S MA D３转录激活诱导[４５];在前列腺癌中T H B S１低表达,果蝇z e s t e基因增强子的人类同源物２(e n h a n c e r o f z e s t e h o m o l o g２,E Z H２)高表达,E Z H２由内皮细胞中的V E G F诱导,从而促进血管生成,促进前列腺癌生长及转移,T H B S１可能是前列腺癌细胞中E Z H２抑制的靶点,进而抑制前列腺癌的进５０７标记免疫分析与临床㊀２０２１年４月第２８卷第４期展[４６];β肾上腺素能信号通过组蛋白去乙酰化酶２(H D A C２)介导的T H B S１抑制,进而促进肿瘤血管生成和前列腺癌细胞异种移植瘤的生长[４７];T H B S１的表达降低与膀胱癌患者的高恶性潜能和低生存率有关,T H B S１的某些结构域和衍生肽可能对膀胱癌组织具有促血管生成作用,而另一些结构域可能具有抗癌作用[４８];T H B S１通过F A K依赖途径促进骨肉瘤细胞迁移㊁侵袭和肺转移[４９];在胶质母细胞瘤中T H B S１是一项预后的生物标志物,并且与胶质母细胞瘤的免疫微环境相关[５０].㊀㊀３㊀小结㊀㊀综上所述,T H B S１与多种肿瘤的发生发展密切相关,且在不同肿瘤中所发挥的生物学功能也不同,目前其对肿瘤的调控机制也不是十分清楚,甚至存在较多争议.基于T H B S１在肿瘤进展中的重要调控作用,其在肿瘤预测及靶向治疗方面可能具有非常广阔的应用前景,应对其进行更加深入的研究探索.参考文献[１]刁长英,王晓慧,谢艺林,等．上调T H B S１蛋白的表达对肺腺癌H１９７５细胞迁移能力的影响[J]．郑州大学学报(医学版),２０１９,５４(３):３８２Ｇ３８５．[２]B I S S I N G E RR O S I,P E T K O V AＧK I R O V A P O L I N A,M Y K H A I L O V A O L G A,e t a l．T h r o m b o s p o n d i nＧ１/C D４７s i g n a l i n g m o d u l a t e s t r a n s m e m b r a n e c a t i o nc o n d u c t a n c e,s u r v i v a l,a n dd e f o r m a b i l i t y o fh u m a nr e d b l o o dc e l l s[J]．C e l lC o mm u n S i g n a l,２０２０,１８(１):１５５．[３]P A T S O U R A S M,T S I K I E,K A R A G I A N N I P,e t a l．T h e r o l e o ft h r o m b o s p o n d i nＧ１i nt h e p a t h o g e n e s i so fa n t i p h o s p h o l i p i d s y n d r o m e[J]．J A u t o i mm u n,２０２０,１１５:１０２５２７．[４]J U Y A HA N,T A N G Z H I M I N,D A I X I A O C H A N,e t a l．P r o t e c t i o na g a i n s tl i g h tＧi n d u c e dr e t i n a ld e g e n e r a t i o n v i a d u a l a n t iＧi n f l a mm a t o r y a n d a n t iＧa n g i o g e n i c f u n c t i o n s o f t h r o m b o s p o n d i nＧ１[J]．B rJP h a r m a c o l,２０２０,d o i:１０．１１１１/ b p h．１５３０３．[５]C H I B A T A K U T O,C E R Q U E I R A DÉB O R A M,L IY A O,e t a l．m i RＧ１７~９２e n d o t h e l i a lＧd e r i v e d p r o m o t e sa n g i o g e n e s i st o p r o t e c t a g a i n s t r e n a l i s c h e m i aＧr e p e r f u s i o ni n j u r y[J]．JA m S o c N e p h r o l,２０２１,３２:５５３Ｇ５６２．[６]A B U R I M AA H M E D,B E R G E R M A R T I N,S P U R G E O NB E N J A M I N EJ,e ta l．T h r o m b o s p o n d i nＧ１p r o m o t e sh a e m o s t a s i st h r o u g h m o d u l a t i o no fc AM P s i g n a l l i n g i n b l o o d p l a t e l e t s[J]．B l o o d,２０２０,d o i:１０．１１８２/b l o o d．２０２０００５３８２．[７]J E A N N E A L B I N,S A R A Z I N T H O M A S,C H A R LÉM A G A L I E, e ta l．T o w a r d s t h et h e r a p e u t i c u s e o ft h r o m b o s p o n d i n１/C D４７t a r g e t i n g T A X２p e p t i d e a s a na n t i t h r o m b o t i c a g e n t[J]．A r t e r i o s c l e r T h r o m bV a s c B i o l,２０２１,４１:e１Ｇe１７．[８]C O U R A G E O T M A R I EＧP I E R R E,D U C A L A U R E N T,M A R T I N YL A U R E N T,e ta l．T h r o m b o s p o n d i nＧ１r e c e p t o rC D４７o v e r e x p r e s s i o nc o n t r i b u t e st oPＧg l y c o p r o t e i nＧm ed i a te d m u l t i d r u g r e s i s t a n c ea g a i n s td o x o r u b i c i n i nt h y r o i dc a r c i n o m aF T CＧ１３３ce l l s[J]．F r o n t O n c o l,２０２０,１０:５５１２２８．[９]HU A N G T,S U N L,Y U A N X,e t a l．T h r o m b o s p o n d i nＧ１i s a m u l t i f a c e t e d p l a y e r i n t u m o r p r o g r e s s i o n[J]．O n c o t a r g e t,２０１７,８(４８):８４５４６Ｇ８４５５８．[１０]J I E M I M I,MA H E,Z H O U LI,e t a l．O r e o c h r o m i sn i l o t i c u s R e g u l a t i o no f F e m a l eF o l l i c u l o g e n e s i sb y T s p１a i n N i l eT i l a p i a (O r e o c h r o m i s n i l o t i c u s)[J]．I n t JM o l S c i,２０２０,２１(１６):５８９３．[１１]A N A S T A S I C Y R I L,R O U S S E L L E P A T R I C I A,T A L A N T I K I T E M A Y A,e t a l．B M PＧ１d i s r u p t sc e l l a d h e s i o na n de n h a n c e sT G FＧβa c t i v a t i o n t h r o u g h c l e a v a g e o f t h e m a t r i c e l l u l a r p r o t e i n t h r o m b o s p o n d i nＧ１[J]．S c i S i g n a l,２０２０,１３(６３９):e a b a３８８０．[１２]J I A N G D,G U O B,L I N F,e ta l．E f f e c to f T H B S１o nt h eB i o l o g i c a l F u n c t i o n o fH y p e r t r o p h i c S c a r F i b r o b l a s t s[J]．B i o m e dR e s I n t,２０２０,２０２０:８６０５４０７．[１３]L A IY UＧH U N G,L E EP OＧY E N,L UC H IＧY U,e t a l．T h r o m b o s p o n d i n１Ｇi n d u c e de x o s o m a l p r o t e i n sa t t e n u a t eh y p o x i aＧi n d u c e d p a r a p t o s i si n c o r n e a l e p i t h e l i a l c e l l s a n d p r o m o t e w o u n d h e a l i n g[J]．F A S E B J,２０２１,３５:e２１２００．[１４]F I S C H E R G M,V A S H I S H T G O P A LY N,M C Q U A D EJL, e ta l．M e t a b o l i cs t r a t e g i e s o f m e l a n o m ac e l l s:M e c h a n i s m s, i n t e r a c t i o n sw i t h t h e t u m o rm i c r o e n v i r o n m e n t,a n d t h e r a p e u t i c i m p l i c a t i o n s[J]．P i g m e n t C e l l M e l a n o m a R e s,２０１８,３１(１):１１Ｇ３０．[１５]B O R S O T T I P,G H I L A R D I C,O S T A N O P,e t a l．T h r o m b o s p o n d i nＧ１i s p a r to fa S l u gＧi n d e p e n d e n t m o t i l i t y a n d m e t a s t a t i c p r o g r a m i n c u t a n e o u sm e l a n o m a,i na s s o c i a t i o nw i t hV E G F RＧ１a n dF G FＧ２[J]．P i g m e n t C e l lM e l a n o m aR e s,２０１５,２８(１):７３Ｇ８１．[１６]T S U C H I D A R,O S AWA T,WA N G F,e t a l．B M P４/ T h r o m b o s p o n d i nＧ１l o o p p a r a c r i n i c a l l y i n h iＧb i t s t u m o r a n g i o g e n e s i sa n ds u p p r e s s e st h e g r o w t h o fs o l i dt u m o r s[J]．O n c o g e n e,２０１４,３３(２９):３８０３Ｇ３８１１．[１７]MU R P H YＧU L L R I C HJE,S U T O M J．T h r o m b o s p o n d i nＧ１r e g u l a t i o no f l a t e n tT G FＧβa c t i v a t i o n:A t h e r a p e u t i ct a r g e tf o r f i b r o t i c d i s e a s e[J]．M a t r i xB i o l,２０１８,６８Ｇ６９:２８Ｇ４３．[１８]A K A S A K AE I J I R O,K L E I S E RS V E N J A,S E N G L EG E R H A R D, e t a l．D i v e r s i t y o fm e c h a n i s m s u n d e r l y i n g l a t e n tT G FＧβA c t i v a t i o n i n r e c e s s i v ed y s t r o p h i ce p i d e r m o l y s i sb u l l o s a[J]．JI n v e s tD e r m a t o l,２０２０,d o i:１０．１０１６/j．j i d．２０２０．１０．０２４．[１９]G A OJ,A K S O Y B A,D O G R U S O Z U,e t a l．I n t e g r a t i v e a n a l y s i s o f c o m p l e xc a n c e r g e n o m i c sa n dc l i n i c a l p r o f i l e su s i n g t h e c B i oP o r t a l[J]．S c i S i g n a l,２０１３,６(２６９):p l１．[２０]N A T H PR,P A LＧN A T H D,MA N D A L A,e ta l．N a t u r a l k i l l e rc e l lr e c r u i t m e n ta n d a c t i v a t i o n a r er e g u l a t e d b y C D４７e x p r e s s i o n i n t h e t u m o rm i c r o e n v i r o n m e n t[J]．C a n c e r I mm u n o lR e s,２０１９,７(９):１５４７Ｇ１５６１．[２１]C H E N W,WU L,HU Y,e ta l．M i c r o R N AＧ１０７a m e l i o r a t e s d a m a g e i na c e l lm o d e l o fA l z h e i m e r s d i s e a s e b y m e d i a t i n g t h eF G F７/F G F R２/P I３K/A k t p a t h w a y[J]．J M o l N e u r o s c i,２０２０,７０(１０):１５８９Ｇ１５９７．６０７L a b e l e d I mm u n o a s s a y s&C l i n M e d,A p r．２０２１,V o l．２８,N o．４[２２]Z HA N GJ,WO N GCC,L E U N G K T,e t a l．F G F１８ＧF G F R２s i g n a l i n g t r i g g e r s t h e a c t i v a t i o no f cＧJ u nＧY A P１a x i s t o p r o m o t e c a r c i n o g e n e s i si n a s u b g r o u p o f g a s t r i c c a n c e r p a t i e n t s a n d i n d i c a t e s t r a n s l a t i o n a l p o t e n t i a l[J]．O n c o g e n e,２０２０,３９(４３):６６４７Ｇ６６６３．[２３]HU A N G T,WA N G L,L I U D,e ta l．F G F７/F G F R２s i g n a l p r o m o t e si n v a s i o n a n d m i g r a t i o n i n h u m a n g a s t r i c c a n c e r t h r o u g hu p r e g u l a t i o n o ft h r o m b o s p o n d i nＧ１[J]．I n tJ O n c o l,２０１７,５０(５):１５０１Ｇ１５１２．[２４]周潇,黄婷婷,邱红．F G F R２㊁T H B S１和T H B S４在胃癌组织中的表达及临床意义[J]．中国癌症防治杂志,２０１７,９(５):３６８Ｇ３７２．[２５]L I N XD,C H E N S Q,Q I Y L,e ta l．O v e r e x p r e s s i o n o f t h r o m b o s p o n d i nＧ１i ns t r o m a lm y o f i b r o b l a s t s i sa s s o c i a t e dw i t h t u m o r g r o w t ha n dn o d a lm e t a s t a s i s i n g a s t r i cc a r c i n o m a[J]．J S u r g O n c o l,２０１２,１０６(１):９４Ｇ１００．[２６]K A S H I H A R A H,S H I MA D A M,Y O S H I K AWA K,e ta l．C o r r e l a t i o n b e t w e e n t h r o m b o s p o n d i nＧ１e x p r e s s i o n i n n o nＧc a n c e r t i s s u ea n d g a s t r i cc a r c i n o g e n e s i s[J]．A n t i c a n c e r R e s,２０１７,３７(７):３５４７Ｇ３５５２．[２７]X I A O M,Z H A N G J,C H E N W,e t a l．M１Ｇl i k e t u m o rＧa s s o c i a t e d m a c r o p h a g e s a c t i v a t e d b y e x o s o m eＧt r a n s f e r r e dT H B S１p r o m o t e m a l i g n a n t m i g r a t i o ni n o r a ls q u a m o u s c e l l c a r c i n o m a[J]．J E x p C l i nC a n c e rR e s,２０１８,３７(１):１４３．[２８]P A LSK,N G U Y E N C T,MO R I T A K I,e ta l．T H B S１i s i n d u c e db y T G F B１i n t h e c a n c e r s t r o m aa n d p r o m o t e s i n v a s i o n o f o r a l s q u a m o u s c e l l c a r c i n o m a[J]．O r a lP a t h o lM e d,２０１６,４５(１０):７３０Ｇ７３９．[２９]Z HA N G X U E,C H E N GJ U N Y I N G,L I U S I R U I,e t a l．D o w nＧr e g u l a t i n g c i r c u l a rR N A_０００４６７４d e l a y s t h e p r o g r e s s i o no f o r a l s q u a m o u sc e l lc a r c i n o m at h r o u g h m i c r o R N AＧ３７７Ｇ３p/T H B S１a x i s[J]．L i f eS c i,２０２１,１１９２３６．[３０]L I U X,X U D,L I U Z,e ta l．T H B S１f a c i l i t a t e sc o l o r e c t a l l i v e r m e t a s t a s i s t h r o u g h e n h a n c i n g e p i t h e l i a lＧm e s e n c h y m a l t r a n s i t i o n[J]．JC l i nT r a n s lO n c o l,２０２０,２２(１０):１７３０Ｇ１７４０．[３１]T A N GZ,L IC,K A N G B,e ta l．G E P I A:A w e bs e r v e rf o r c a n c e ra n d n o r m a l g e n e e x p r e s s i o n p r o f i l i n g a n di n t e r a c t i v e a n a l y s e s[J]．N u c l e i cA c i d sR e s,２０１７,４５(１):９８Ｇ１０２．[３２]殷茜,王佩佩,彭睿,等．m i RＧ１９a调控血小板反应蛋白在结肠癌淋巴转移中的机制[J]．华中科技大学学报(医学版),２０１９,４８(１):４２Ｇ４７．[３３]F A N X,L I U M,T A N G H,e t a l．M i c r o R N AＧ７e x e r t s a n t i a n g i o g e n i c e f f e c t o n c o l o r e c t a l c a n c e r v i aE R Ks i g n a l i n g[J]．J S u r g R e s,２０１９,２４０:４８Ｇ５９．[３４]J I A N G D O N GW E N,G U OB I N G Y U,L I NF E N G,e t a l．m i RＧ２０５i n h i b i t s t h e d e v e l o p m e n t o f h y p e r t r o p h i c s c a r sb y t a r g e t i n g T H B S１[J]．A g i n g(A l b a n y N Y),２０２０,１２:２２０４６Ｇ２２０５８．[３５]G A J E T O NJ A S M I N E,K R U K O V E T S I R E N E,Y E N D A M U R I R E V A N T H,e ta l．m i RＧ４６７r e g u l a t e si n f l a mm a t i o na n db l o o d i n s u l i n a n d g l u c o s e[J]．J C e l lM o lM e d,２０２１,２５(５):２５４９Ｇ２５６２．[３６]S H E NJ,C A O B,WA N G Y,e ta l．H i p p oc o m p o n e n t Y A Pp r o m o t e s f o c a l a d h e s i o n a n d t u m o u r a g g r e s s i v e n e s s v i a t r a n s c r i p t i o n a l l y a c t i v a t i n g T H B S１/F A K s i g n a l l i n g i n b r e a s t c a n c e r[J]．J E x p C l i nC a n c e rR e s,２０１８,７(１):１７５．[３７]B U R R I D G EK．F o c a la d h e s i o n s:a p e r s o n a l p e r s p e c t i v eo na h a l f c e n t u r y o f p r o g r e s s[J]．F E B SJ,２０１７,２８４(２０):３３５５Ｇ３３６１．[３８]Z H O UJ,Y IQ,T A N G L,e ta l．T h er o l e so fn u c l e a rf o c a l a d h e s i o nk i n a s e(F A K)o n C a n c e r:af o c u s e dr e v i e w[J]．JE x pC l i nC a n c e rR e s,２０１９;３８(１):２５０．[３９]P F L E G E RC M．T h eh i p p o p a t h w a y:am a s t e r r e g u l a t o r y n e t w o r k i m p o r t a n t i nd e v e l o p m e n t a n dd y s r e g u l a t e d i nd i s e a s e[J]．C u r rT o pD e vB i o l,２０１７,１２３:１８１Ｇ２２８．[４０]Z A N C O N A T OF,C O R D E N O N S I M,P I C C O L O S,e t a l．Y A P/T A Za t t h e r o o t s o f c a n c e r[J]．C a n c e rC e l l,２０１６,２９(６):７８３Ｇ８０３．[４１]L I U Y,H EK,HU Y,e t a l．Y A Pm o d u l a t e sT G FＧβ１Ｇi n d u c e d s i m u l t a n e o u sa p o p t o s i sa n d E MTt h r o u g hu p r e g u l a t i o no ft h eE G Fr e c e p t o r[J]．S c i R e p,２０１７,７:４５５２３．[４２]HU C,W E NJ,G O N G L,e t a l．T h r o m b o s p o n d i nＧ１p r o m o t e s c e l l m i g r a t i o n,i n v a s i o n a n d l u n g m e t a s t a s i s o f o s t e o s a r c o m a t h r o u g hF A Kd e p e n d e n t p a t h w a y[J]．O n c o t a r g e t,２０１７,８(４４):７５８８１Ｇ７５８９２．[４３]C E NJ,F E N G L,K E H,e ta l．E x o s o m a l t h r o m b o s p o n d i nＧ１d i s r u p t st h ei n t e g r i t y o fe n d o t h e l i a li n t e r c e l l u l a r j u n c t i o n st o f a c i l i t a t eb r e a s t c a n c e r c e l lm e t a s t a s i s[J]．C a n c e r s(B a s e l),２０１９,１１(１２):１９４６．[４４]廖雪洪,郑雄伟,朱伟峰．乳腺癌中T H B SＧ１表达及与E M T的相关性[J]．现代肿瘤医学,２０１６,２４(２０):３２１９Ｇ３２２５．[４５]D A U B O N T,LÉO N C,C L A R K E K,e ta l．D e c i p h e r i n g t h e c o m p l e x r o l e o f t h r o m b o s p o n d i nＧ１i n g l i o b l a s t o m ad e v e l o p m e n t[J]．N a t C o m m u n,２０１９,１０(１):１１４６．[４６]Z H A N G Y,Z H E N G D,Z HO UT,e t a l．A n d r o g e n d e p r i v a t i o n p r o m o t e s n e u r o e n d o c r i n e d i f f e r e n t i a t i o n a n d a n g i o g e n e s i s t h r o u g hC R E BＧE Z H２ＧT S P１p a t h w a y i n p r o s t a t ec a n c e r s[J]．N a tC o mm u n,２０１８,９(１):４０８０．[４７]HU L S U R K A R M,L IZ,Z H A N G Y,e ta l．B e t aＧa d r e n e r g i c s i g n a l i n g p r o m o t e s t u m o r a n g i o g e n e s i s a n d p r o s t a t e c a n c e r p r o g r e s s i o n t h r o u g h H D A C２Ｇm e d i a t e d s u p p r e s s i o n o f t h r o m b o s p o n d i nＧ１[J]．O n c o g e n e,２０１７,３６(１１):１５２５Ｇ１５３６．[４８]N A K A M U R A Y,M I Y A T A Y,T A K E H A R A K,e ta l．T h e p a t h o l o g i c a l s i g n i f i c a n c e a n d p r o g n o s t i c r o l e s o f t h r o m b o s p o n d i nＧ１, a n dＧ２,a n d４N１KＧp e p t i d ei n b l a d d e rc a n c e r[J]．A n t i c a n c e r R e s,２０１９,３９(５):２３１７Ｇ２３２４．[４９]HU C,W E NJ,G O N GL,e t a l．T h r o m b o s p o n d i nＧ１p r o m o t e s c e l lm i g r a t i o n,i n v a s i o na n dl u n g m e t a s t a s i so fo s t e o s a r c o m a t h r o u g hF A Kd e p e n d e n t p a t h w a y[J]．O n c o t a r g e t,２０１７,８(４４):７５８８１Ｇ７５８９２．[５０]Q I C H U N X I A O,L E I L E I,H UJ I N Q U,e t a l．T h r o m b o s p o n d i nＧ１i sa p r o g n o s t i cb i o m a r k e ra n di sc o r r e l a t e d w i t ht u m o ri m m u n em i c r o e n v i r o n m e n t i n g l i o b l a s t o m a[J]．O n c o l L e t t,２０２１,２１(１):２２．７０７标记免疫分析与临床㊀２０２１年４月第２８卷第４期。

一氧化氮治疗肿瘤的研究进展作者：王丽凯，田娅，吴惠霞来源：《上海师范大学学报·自然科学版》2022年第04期摘要：一氧化氮（NO）是一种半衰期很短的气体分子，对细胞膜具有高穿透性，能在人体内传递重要信息，并具有调节细胞的功能.NO气体分子既能维持正常细胞的生理功能和活性，又能选择性地快速耗尽肿瘤细胞的能量，诱导肿瘤细胞凋亡.研究表明：NO可以通过多种机制實现肿瘤治疗.已有一些NO供体药物表现出良好的抗肿瘤活性，精确控制NO在肿瘤部位的释放，可杀死肿瘤细胞.因此，NO气体疗法作为一种肿瘤治疗策略具有一定的应用前景.文章简述了NO的生理学特性和几种典型的NO供体，以及释放NO的生物材料在生物医学领域的应用进展.关键词：一氧化氮（NO）; NO供体; 肿瘤; 气体治疗; 生物材料中图分类号： O 613.6 文献标志码： A 文章编号： 1000-5137（2022）04-0443-09Research progress of nitric oxide in the treatment of tumorWANG Likai， TIAN Ya， WU Huixia*（College of Chemistry and Materials Science， Shanghai Normal University， Shanghai 200234， China）Abstract： Nitric oxide （NO） is a ubiquitous gas molecule with a short half-life. It is highly permeable to cell membranes and can transmit important information and regulate cellular functions in the human body. NO molecules can not only maintain the physiological function and activity of normal cells， but also selectively and rapidly deplete the energy of tumor cells and induce their apoptosis. Studies have shown that NO may achieve tumor therapy through a variety of mechanisms. Some NO donor drugs have shown good anti-tumor activity and can be used to precisely control the release of NO at tumor sites and kill tumor cells. Therefore， NO gas therapy is a promising tumor treatment strategy. This review covers the physiological characteristics of NO， several typical NO donors， and the application progress of NO releasing biomaterials in biomedical field.Key words： nitric oxide（NO）; NO donors; tumor; gas therapy; biomaterials0 引言一氧化氮（NO）是一氧化氮合酶（NOS）作用产生的半衰期仅为3-5 s的分子.NO分子中有一个未成对电子，可形成自由基，对多种生物分子具有很高的反应性.NO具有脂溶性，可以快速透过生物膜扩散，在体内极不稳定，能迅速被血红蛋白、氧自由基或氢醌等灭活.NO可以对血管生成和舒张、细胞周期、细胞凋亡、侵袭和转移等过程进行调节，从而影响细胞功能.NO还能与二氧化氮（NO2）反应生成三氧化二氮（N2O3），并能与超氧化物反应生成过氧亚硝酸盐（ONOO-）.N2O3和ONOO-这2种分子均可通过亚硝化或氧化应激引起DNA损伤：N2O3可以通过胺的亚硝化作用导致N‒亚硝胺的形成，进而损伤DNA;过氧亚硝酸盐可以氧化和硝化DNA，并导致单链DNA断裂[1].NO的生物效应通常取决于分子的形成、代谢、NOS的类型和NO的浓度等.在过去的几十年中，人们一直在努力研究NO对癌生物学的影响.多年来，NO在致癌和抗肿瘤进展中有着较大的误解和争议，因为它同时具有促进肿瘤细胞生长和杀死肿瘤细胞的能力.然而，确定哪种作用占优势是很复杂的，包括但不限于NO存在的时间、位置、浓度和肿瘤微环境[2].NO生成过多或者生成不足都会引起基因突变、肿瘤等.近年来，许多气体纳米发生器已经能够通过被动或主动靶向聚集在肿瘤部位，在内源性或外源性刺激下有效控制气体分子的释放.因此，无论是单独使用NO还是与其他治疗方式联合使用，这些发现都使NO广泛应用于抗癌剂[3].目前，气体治疗已成为一种新兴的、安全有效的抗癌治疗策略.1 NO的生理学特性1.1 NO的生物合成细胞合成NO的主要途径是通过NOS的酶促作用将L‒精氨酸转化为L‒瓜氨酸，并释放出NO，如图1所示[4].NOS是一种同工酶，选择性分布在不同脑区的神经元中，其同工酶有3种亚型，即神经型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）.其中，eNOS和nNOS在细胞处于生理状态下即可组成性表达，并可因细胞内钙增加而被钙调蛋白激活;iNOS是非钙依赖型的，当细胞受到内源性或外源性刺激时，可在较短的时间内产生高浓度的NO[4].此外，还可以通过硝酸盐→亚硝酸盐→NO途径合成NO.体内的硝酸盐主要来自膳食和自身合成.在生物体内，循环的硝酸盐被唾液腺主动摄取，并被口腔中的细菌还原为亚硝酸盐，在血液和组织中进一步代谢为NO和其他生物活性氮氧化物[5].亚硝酸盐是氮氧化物的氧化还原过程中的中间产物，在血液和组织中比较稳定，且可被多种物质还原成NO，包括肌红蛋白、血红蛋白、抗坏血酸、黄嘌呤氧化还原酶、质子和多酚[5].这些途径产生的NO会因缺氧和酸中毒条件而增加，因而可以保证NO的产量.1.2 NO的生物学作用NO可以自由地通过生物膜并参与一系列生理和病理过程，如神经信号传递、血管扩张、血小板黏附和聚集等，在生物体内发挥着至关重要的作用.NO的生物学作用是通过直接或间接的化学反应产生的.例如，NO直接与不同蛋白质的金属配合物结合形成金属亚硝酰基配合物来调节靶蛋白的生物学活性.NO还可以与多种内源性自由基反应，产生活性氮氧化合物，这些强毒性的活性氮氧化合物将导致线粒体损伤，进而诱导细胞凋亡.NO在生物体内像一把双刃剑，因为它既具有杀死肿瘤细胞的作用，又具有促进肿瘤细胞生长的作用.在低生理水平下，NO可作为抗氧化剂，减少芬顿反应，终止自由基链式反应，并抑制过氧化物酶和氧化酶的活性.较高浓度的NO能够舒张血管，改善组织缺氧状态，有利于化疗药物的渗透，对肿瘤细胞具有杀伤作用[6].但是，持续过量的NO将产生神经毒性，影响体内平衡和改变蛋白质功能，从而导致基因突变，最终使正常黏膜癌变[7].不同组织中的生理过程对NO的需求量各不相同，浓度过高或者过低都会对组织造成一定的损伤，引起疾病的发生[8].只要将适当浓度的NO递送至肿瘤部位，NO的靶向释放也可能增强化学疗法和放射疗法的疗效.因此，如何将适当浓度的NO靶向释放至肿瘤，已成为近年来生物医学领域的研究重点.2 NO供体直接使用外源性或内源性NO的缺点是其半衰期极短，且易受各种谷胱甘肽（GSH）、超氧化物和血红蛋白等物质的影响.因此，将NO供体载入纳米平台中，直接和精确地控制NO的靶向释放，有很好的应用前景.NO供体是指在体内经酶促反应或非酶促反应释放NO的一类化合物，如有机硝酸盐、有机亚硝酸盐、S‒亚硝基硫醇（RSNO）、金属配合物等多种化学物质已被用作NO供体，用于各种生物或医学领域[9]，如图2所示.2.1 有机硝酸酯（RONO2）及有机亚硝酸酯类RONO2是醇的硝酸酯，是最早的、目前最常用的NO供体.它们可以通过相应醇的酯化反应或烷基卤化物与AgNO3的反应来合成，如图3所示[10].这类供体的优点是给药途径比较广，但容易产生耐药性.硝酸甘油（GTN）和单硝酸异山梨酯（ISMN）是临床研究中使用最广泛的NO供体类药物.它们有几个既定的临床应用：GTN是一種廉价又有效的、能快速逆转与急性心绞痛有关疼痛的药物;ISMN是RONO2中释放NO较慢的一种，已被用于治疗慢性心绞痛[11].与RONO2类似，有机亚硝酸酯是醇类和亚硝酸酯化形成的酯.它们主要通过醇与亚硝酰氯（NOCl）反应或醇与NO和氧气（O2）经过酯化反应来合成，如图3所示[12].有机亚硝酸酯的主要作用是舒张静脉和降低血压，例如，亚硝酸丁酯（BN）、亚硝酸异丁酯（ISBN）和亚硝酸叔丁酯（TBN）已在临床上用作血管扩张剂[13].与GTN等RONO2相比，它们对酶的依赖性更低、作用效力更高，且不易引起耐药性.但是，它们缺乏选择性和生物利用度，以及细胞毒性和致癌性较高，因此不如RONO2常用[14].2.2 RSNO类RSNO是贮存、运输和释放NO的重要载体，在生物体内具有重要的生理作用.RSNO普遍存在于生物体的血液和组织中，只需要一个电子就能引发NO的释放，因此，可通过光、热、碱性pH值、过渡金属离子、抗坏血酸和酶等促使RSNO自发均裂反应产生NO[15].人工合成的RSNO是新型的NO供体类药物，通过静脉等途径进入体内后，可以参与呼吸、心血管、消化等多个系统疾病的诊断和治疗[16].2.3 金属-一氧化氮配合物NO是金属配合物中的强配体，它的结合常数比一氧化碳（CO）和O2高得多，具有多种氧化态，氧化价态的高低决定了配合物中NO的反应性.NO调节信号通路的主要机制是与金属中心原子（如铁（Fe）、钌（Ru）等）结合，如图4所示[12]，如血红素基团或蛋白质的铁硫簇.硝普钠（SNP）已经广泛应用于急性降压药物和动静脉血管扩张剂，其血管舒张作用是由NO的产生而造成的[17].SNP晶体在避光且干燥的条件下可以长时间保存，光和O2会促使其水溶液分解，并释放出NO和氰化物，从而导致“氰化物毒性”，对机体造成伤害[18].除了Fe之外，Ru对NO也有很高的亲和力，且Ru对NO的亲和力可以随着其他配体的改变而变化，以便调节NO的释放.光活性Ru配合物热稳定性好，且能在紫外光照射下释放NO.然而，NO的有效释放需要使用对组织有害的高功率紫外线，这一缺陷阻碍了该类NO供体的临床应用[19].2.4 其他供体1956年MAGEE等[20]发现了二甲基亚硝胺和亚硝胺二甲胺均可致大鼠肝癌.其致癌作用是由于N-亚硝基化合物会导致蛋白质和核酸的烷基化.但是，N-亚硝胺却是一种能舒张血管的NO供体.链脲霉素（STZ）含有N-亚硝胺基团，具有抗肿瘤、致糖尿病和致癌作用[21].胰腺β细胞具有低水平的活性氧（ROS）清除酶，对NO和ROS比较敏感，STZ能在胰岛β细胞中释放NO，使细胞的DNA受到损害[22].因此，可将此类NO供体作为抗癌药物进行研究.偶氮二醇烯鎓盐（NONOates）释放NO的机制遵循动力学且不受细胞代谢产物或酶的催化.它们以固体形态稳定存在，但在生理条件下会自发分解生成NO，分解速率会因结构、温度和pH值而改变[23].因此，可以通过它们在体外的分解速率直接预测药物的持续作用时间.研究证明：NONOates能够降低多种肿瘤细胞的增长速率，抑制肿瘤细胞的生长[24].此外，还可以通过硝酸盐→亚硝酸盐→NO途径合成NO.体内的硝酸盐主要来自膳食和自身合成.在生物体内，循环的硝酸盐被唾液腺主动摄取，并被口腔中的细菌还原为亚硝酸盐，在血液和组织中进一步代谢为NO和其他生物活性氮氧化物[5].亚硝酸盐是氮氧化物的氧化还原过程中的中间产物，在血液和组织中比较稳定，且可被多种物质还原成NO，包括肌红蛋白、血红蛋白、抗坏血酸、黄嘌呤氧化还原酶、质子和多酚[5].这些途径产生的NO會因缺氧和酸中毒条件而增加，因而可以保证NO的产量.1.2 NO的生物学作用NO可以自由地通过生物膜并参与一系列生理和病理过程，如神经信号传递、血管扩张、血小板黏附和聚集等，在生物体内发挥着至关重要的作用.NO的生物学作用是通过直接或间接的化学反应产生的.例如，NO直接与不同蛋白质的金属配合物结合形成金属亚硝酰基配合物来调节靶蛋白的生物学活性.NO还可以与多种内源性自由基反应，产生活性氮氧化合物，这些强毒性的活性氮氧化合物将导致线粒体损伤，进而诱导细胞凋亡.NO在生物体内像一把双刃剑，因为它既具有杀死肿瘤细胞的作用，又具有促进肿瘤细胞生长的作用.在低生理水平下，NO可作为抗氧化剂，减少芬顿反应，终止自由基链式反应，并抑制过氧化物酶和氧化酶的活性.较高浓度的NO能够舒张血管，改善组织缺氧状态，有利于化疗药物的渗透，对肿瘤细胞具有杀伤作用[6].但是，持续过量的NO将产生神经毒性，影响体内平衡和改变蛋白质功能，从而导致基因突变，最终使正常黏膜癌变[7].不同组织中的生理过程对NO的需求量各不相同，浓度过高或者过低都会对组织造成一定的损伤，引起疾病的发生[8].只要将适当浓度的NO递送至肿瘤部位，NO的靶向释放也可能增强化学疗法和放射疗法的疗效.因此，如何将适当浓度的NO靶向释放至肿瘤，已成为近年来生物医学领域的研究重点.2 NO供体直接使用外源性或内源性NO的缺点是其半衰期极短，且易受各种谷胱甘肽（GSH）、超氧化物和血红蛋白等物质的影响.因此，将NO供体载入纳米平台中，直接和精确地控制NO的靶向释放，有很好的应用前景.NO供体是指在体内经酶促反应或非酶促反应释放NO的一类化合物，如有机硝酸盐、有机亚硝酸盐、S‒亚硝基硫醇（RSNO）、金属配合物等多种化学物质已被用作NO供体，用于各种生物或医学领域[9]，如图2所示.2.1 有机硝酸酯（RONO2）及有机亚硝酸酯类RONO2是醇的硝酸酯，是最早的、目前最常用的NO供体.它们可以通过相应醇的酯化反应或烷基卤化物与AgNO3的反应来合成，如图3所示[10].这类供体的优点是给药途径比较广，但容易产生耐药性.硝酸甘油（GTN）和单硝酸异山梨酯（ISMN）是临床研究中使用最广泛的NO供体类药物.它们有几个既定的临床应用：GTN是一种廉价又有效的、能快速逆转与急性心绞痛有关疼痛的药物;ISMN是RONO2中释放NO较慢的一种，已被用于治疗慢性心绞痛[11].与RONO2类似，有机亚硝酸酯是醇类和亚硝酸酯化形成的酯.它们主要通过醇与亚硝酰氯（NOCl）反应或醇与NO和氧气（O2）经过酯化反应来合成，如图3所示[12].有机亚硝酸酯的主要作用是舒张静脉和降低血压，例如，亚硝酸丁酯（BN）、亚硝酸异丁酯（ISBN）和亚硝酸叔丁酯（TBN）已在临床上用作血管扩张剂[13].与GTN等RONO2相比，它们对酶的依赖性更低、作用效力更高，且不易引起耐药性.但是，它们缺乏选择性和生物利用度，以及细胞毒性和致癌性较高，因此不如RONO2常用[14].2.2 RSNO类RSNO是贮存、运输和释放NO的重要载体，在生物体内具有重要的生理作用.RSNO普遍存在于生物体的血液和组织中，只需要一个电子就能引发NO的释放，因此，可通过光、热、碱性pH值、过渡金属离子、抗坏血酸和酶等促使RSNO自发均裂反应产生NO[15].人工合成的RSNO是新型的NO供体类药物，通过静脉等途径进入体内后，可以参与呼吸、心血管、消化等多个系统疾病的诊断和治疗[16].2.3 金属-一氧化氮配合物NO是金属配合物中的强配体，它的结合常数比一氧化碳（CO）和O2高得多，具有多种氧化态，氧化价态的高低决定了配合物中NO的反应性.NO调节信号通路的主要机制是与金属中心原子（如铁（Fe）、钌（Ru）等）结合，如图4所示[12]，如血红素基团或蛋白质的铁硫簇.硝普钠（SNP）已经广泛应用于急性降压药物和动静脉血管扩张剂，其血管舒张作用是由NO的产生而造成的[17].SNP晶体在避光且干燥的条件下可以长时间保存，光和O2会促使其水溶液分解，并释放出NO和氰化物，从而导致“氰化物毒性”，对机体造成伤害[18].除了Fe之外，Ru对NO也有很高的亲和力，且Ru对NO的亲和力可以随着其他配体的改变而变化，以便调节NO的释放.光活性Ru配合物热稳定性好，且能在紫外光照射下释放NO.然而，NO的有效释放需要使用对组织有害的高功率紫外线，这一缺陷阻碍了该类NO供体的临床应用[19].2.4 其他供体1956年MAGEE等[20]发现了二甲基亚硝胺和亚硝胺二甲胺均可致大鼠肝癌.其致癌作用是由于N-亚硝基化合物会导致蛋白质和核酸的烷基化.但是，N-亚硝胺却是一种能舒张血管的NO供体.链脲霉素（STZ）含有N-亚硝胺基团，具有抗肿瘤、致糖尿病和致癌作用[21].胰腺β细胞具有低水平的活性氧（ROS）清除酶，对NO和ROS比较敏感，STZ能在胰岛β细胞中释放NO，使细胞的DNA受到损害[22].因此，可将此类NO供体作为抗癌药物进行研究.偶氮二醇烯鎓盐（NONOates）释放NO的机制遵循动力学且不受细胞代谢产物或酶的催化.它们以固体形态稳定存在，但在生理条件下会自发分解生成NO，分解速率会因结构、温度和pH值而改变[23].因此，可以通过它们在体外的分解速率直接预测药物的持续作用时间.研究证明：NONOates能够降低多种肿瘤细胞的增长速率，抑制肿瘤细胞的生长[24].此外，还可以通过硝酸盐→亚硝酸盐→NO途径合成NO.体内的硝酸盐主要来自膳食和自身合成.在生物体内，循环的硝酸盐被唾液腺主动摄取，并被口腔中的细菌还原为亚硝酸盐，在血液和组织中进一步代谢为NO和其他生物活性氮氧化物[5].亚硝酸盐是氮氧化物的氧化还原过程中的中间产物，在血液和组织中比较稳定，且可被多种物质还原成NO，包括肌红蛋白、血红蛋白、抗坏血酸、黄嘌呤氧化还原酶、质子和多酚[5].这些途径产生的NO会因缺氧和酸中毒条件而增加，因而可以保证NO的产量.1.2 NO的生物学作用NO可以自由地通过生物膜并参与一系列生理和病理过程，如神经信号传递、血管扩张、血小板黏附和聚集等，在生物体内发挥着至关重要的作用.NO的生物学作用是通过直接或间接的化学反应产生的.例如，NO直接与不同蛋白质的金属配合物结合形成金属亚硝酰基配合物来调节靶蛋白的生物学活性.NO还可以与多种内源性自由基反应，产生活性氮氧化合物，这些强毒性的活性氮氧化合物將导致线粒体损伤，进而诱导细胞凋亡.NO在生物体内像一把双刃剑，因为它既具有杀死肿瘤细胞的作用，又具有促进肿瘤细胞生长的作用.在低生理水平下，NO可作为抗氧化剂，减少芬顿反应，终止自由基链式反应，并抑制过氧化物酶和氧化酶的活性.较高浓度的NO能够舒张血管，改善组织缺氧状态，有利于化疗药物的渗透，对肿瘤细胞具有杀伤作用[6].但是，持续过量的NO将产生神经毒性，影响体内平衡和改变蛋白质功能，从而导致基因突变，最终使正常黏膜癌变[7].不同组织中的生理过程对NO的需求量各不相同，浓度过高或者过低都会对组织造成一定的损伤，引起疾病的发生[8].只要将适当浓度的NO递送至肿瘤部位，NO的靶向释放也可能增强化学疗法和放射疗法的疗效.因此，如何将适当浓度的NO靶向释放至肿瘤，已成为近年来生物医学领域的研究重点.2 NO供体直接使用外源性或内源性NO的缺点是其半衰期极短，且易受各种谷胱甘肽（GSH）、超氧化物和血红蛋白等物质的影响.因此，将NO供体载入纳米平台中，直接和精确地控制NO的靶向释放，有很好的应用前景.NO供体是指在体内经酶促反应或非酶促反应释放NO的一类化合物，如有机硝酸盐、有机亚硝酸盐、S‒亚硝基硫醇（RSNO）、金属配合物等多种化学物质已被用作NO供体，用于各种生物或医学领域[9]，如图2所示.2.1 有机硝酸酯（RONO2）及有机亚硝酸酯类RONO2是醇的硝酸酯，是最早的、目前最常用的NO供体.它们可以通过相应醇的酯化反应或烷基卤化物与AgNO3的反应来合成，如图3所示[10].这类供体的优点是给药途径比较广，但容易产生耐药性.硝酸甘油（GTN）和单硝酸异山梨酯（ISMN）是临床研究中使用最广泛的NO供体类药物.它们有几个既定的临床应用：GTN是一种廉价又有效的、能快速逆转与急性心绞痛有关疼痛的药物;ISMN是RONO2中释放NO较慢的一种，已被用于治疗慢性心绞痛[11].与RONO2类似，有机亚硝酸酯是醇类和亚硝酸酯化形成的酯.它们主要通过醇与亚硝酰氯（NOCl）反应或醇与NO和氧气（O2）经过酯化反应来合成，如图3所示[12].有机亚硝酸酯的主要作用是舒张静脉和降低血压，例如，亚硝酸丁酯（BN）、亚硝酸异丁酯（ISBN）和亚硝酸叔丁酯（TBN）已在临床上用作血管扩张剂[13].与GTN等RONO2相比，它们对酶的依赖性更低、作用效力更高，且不易引起耐药性.但是，它们缺乏选择性和生物利用度，以及细胞毒性和致癌性较高，因此不如RONO2常用[14].2.2 RSNO类RSNO是贮存、运输和释放NO的重要载体，在生物体内具有重要的生理作用.RSNO普遍存在于生物体的血液和组织中，只需要一个电子就能引发NO的释放，因此，可通过光、热、碱性pH值、过渡金属离子、抗坏血酸和酶等促使RSNO自发均裂反应产生NO[15].人工合成的RSNO是新型的NO供体类药物，通过静脉等途径进入体内后，可以参与呼吸、心血管、消化等多个系统疾病的诊断和治疗[16].2.3 金属-一氧化氮配合物NO是金属配合物中的强配体，它的结合常数比一氧化碳（CO）和O2高得多，具有多种氧化态，氧化价态的高低决定了配合物中NO的反应性.NO调节信号通路的主要机制是与金属中心原子（如铁（Fe）、钌（Ru）等）结合，如图4所示[12]，如血红素基团或蛋白质的铁硫簇.硝普钠（SNP）已经广泛应用于急性降压药物和动静脉血管扩张剂，其血管舒张作用是由NO的产生而造成的[17].SNP晶体在避光且干燥的条件下可以长时间保存，光和O2会促使其水溶液分解，并释放出NO和氰化物，从而导致“氰化物毒性”，对机体造成伤害[18].除了Fe之外，Ru对NO也有很高的亲和力，且Ru对NO的亲和力可以随着其他配体的改变而变化，以便调节NO的释放.光活性Ru配合物热稳定性好，且能在紫外光照射下释放NO.然而，NO的有效释放需要使用对组织有害的高功率紫外线，这一缺陷阻碍了该类NO供体的临床应用[19].2.4 其他供体1956年MAGEE等[20]发现了二甲基亚硝胺和亚硝胺二甲胺均可致大鼠肝癌.其致癌作用是由于N-亚硝基化合物会导致蛋白质和核酸的烷基化.但是，N-亚硝胺却是一种能舒张血管的NO供体.链脲霉素（STZ）含有N-亚硝胺基团，具有抗肿瘤、致糖尿病和致癌作用[21].胰腺β细胞具有低水平的活性氧（ROS）清除酶，对NO和ROS比较敏感，STZ能在胰岛β细胞中释放NO，使细胞的DNA受到损害[22].因此，可将此类NO供体作为抗癌药物进行研究.偶氮二醇烯鎓盐（NONOates）释放NO的机制遵循动力学且不受细胞代谢产物或酶的催化.它们以固体形态稳定存在，但在生理条件下会自发分解生成NO，分解速率会因结构、温度和pH值而改变[23].因此，可以通过它们在体外的分解速率直接预测药物的持续作用时间.研究证明：NONOates能够降低多种肿瘤细胞的增长速率，抑制肿瘤细胞的生长[24].此外，还可以通过硝酸盐→亚硝酸盐→NO途径合成NO.体内的硝酸盐主要来自膳食和自身合成.在生物体内，循环的硝酸盐被唾液腺主动摄取，并被口腔中的细菌还原为亚硝酸盐，在血液和组织中进一步代谢为NO和其他生物活性氮氧化物[5].亚硝酸盐是氮氧化物的氧化还原过程中的中间产物，在血液和组织中比较稳定，且可被多种物质还原成NO，包括肌红蛋白、血红蛋白、抗坏血酸、黄嘌呤氧化还原酶、质子和多酚[5].这些途径产生的NO会因缺氧和酸中毒条件而增加，因而可以保证NO的产量.1.2 NO的生物学作用。