03第三章实验动物的微生物学和寄生虫学控制

四、 无菌动物 （Germ free animals, GF）
无菌动物是指体内、外无任何可检测出的活 的微生物和寄生虫的动物。来源于无菌手术剖腹 取胎，饲养在无菌隔离器内，人工哺乳或保姆代 养培育而成。 悉生动物（Gnotobiotes animals, GA）体内 携带有已知微生物的动物。这种动物来源于无菌 动物，人为的投给已知的单菌、双菌、三菌或多 菌。这些均为已知菌，与无菌动物一样，饲养在 隔离器中。
第三章 实验动物 微生物学质量控制
实验动物微生物学质量控制是实验动物 标准化的主要内容之一。 实验动物按微生物学质量控制标准或微 生物净化程度，目前我国将实验动物分 为普通级动物(CV)、清洁级动物(CL)、 无特定病原体动物(SPF)、无菌动物(GF), 其中包括悉生动物(GA)。
一、 普通动物 （Conventional animals,CV）
普通级实验动物（一级实验动物）是在微 生物学控制上，要求最低的动物，它要求不携 带人畜共患病和动物烈性传染病的病原。普通 级实验动物（主要指大、小鼠）对实验结果反 应性较差，因而国际上普遍认为仅可作生物医 学示教之用，或作某些科学研究为探索方法而 从事的予试验之用，不可供科研、生产和检定 之用。
饲养管理要求：
清洁级实验动物（二级实验动物）除普通级动物应 排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究 干扰大的病原。 清洁级实验动物是根据我国国情而 设定的等级动物。目前在我国已成为适用于科研的 标准的实验动物，其种群来源于SPF动物或剖腹产 动物。 清洁级动物比普通级动物要求排除的微生物和 寄生虫多，但比SPF动物少。清洁级动物除肉眼观 察无病外，尸体解剖时主要脏器、组织无论是眼观 还是病理组织切片均没有病变。
目前国际上对SPF动物的要求不同，质量标 准也不一样。部分学者认为某种实验动物没有某 种病原体，不影响其实验要求就可称为SPF动物， 另有学者认为必须将常见的病原体全部排除才算 是真正的SPF动物。前者要求太低，后者要求太 高。结合我国的实际情况以既排除对动物群有危 害的病原体，又排除对动物实验有干扰的微生物 和寄生虫为原则。由此可见，我国的SPF动物微 生物学质量控制标准高于国外的控制标准。 国际上公认SPF动物适用于所有科研实验， 是目前国际标准级别的实验动物，各种疫苗生产 所采用的应为SPF动物。

1.实验动物: 实验动物（Laboratory Animals）特指的是人工饲养，对其携带的微生物实行控制，遗传背景明确或者来源清楚的，用于科学研究、教学、生产、检定及其它科学实验的动物。

2.实验动物三大特点: 人为遗传限定、携带的微生物和寄生虫得到控制、应用于科学实验5实验动物的标准化包括哪些内容它有什么意义实验动物学的核心内容：是实验动物的标准化，它包括实验动物的遗传学控制标准、微生物学和寄生虫学控制标准、设施环境控制标准、饲料营养控制标准。

意义: 在符合标准化的实验动物及其环境条件下，所做的动物实验无论在时间的先后上，还是在世界的不同实验室里，其实验结果应该具有可重复性和可对比性。

8、动物福利: 动物福利是指动物在整个生命过程中应得到人类的保护，其基本原则是要善待动物，保证动物的健康和快乐。

9.针对动物保护主义，科技界的对策是:1.为动物福利立法，号召“善待动物”。

2.坚持原则、坚持科学、坚持动物实验。

3.进行动物实验伦理审查提倡动物实验的“3R”原则。

Replacement 替代Reduction 减少Refinement 优化10.国际上对动物实验伦理有哪些要求1.动物居住空间应符合标准，注意日常饲养管理，不使动物陷入饥饿、缺水和患病。

2.尽可能的采用替代法最少地使用和牺牲动物。

3.在必须使用犬、猫和猴时，在实验前应进行训练，尽可能地减少动物的恐惧和不安。

4.实验结束和动物不可能恢复时，应采取安乐死。

5.要爱护动物和对由于试验死亡的动物应持有怜悯和感激之情。

动物实验的“3R原则”:1替代（Replacement）替代是指用其它实验方法替代用哺乳类动物进行实验研究。

2. 减少（Reduction）减少是指某一研究必须要使用实验动物，而又没有可靠的替代方法时，应考虑把使用动物的数量减少到实验研究目的所必需的最少数量。

3 优化（Refinement）优化是指通过改进和完善实验程序、利用先进仪器设备，减轻或避免给动物造成痛苦和不安，提高动物福利的同时，获得可靠的实验结果。

三、应用 目前国际上公认SPF动物适用于所有科研
实验，是国际标准级别的实验动物。它的应 用价值在于它无人畜共患病，无主要传染病， 无对实验研究可能产生干扰的微生物。
第四节 无菌动物
一、无菌动物（Germfree animals ,GF） 是指不能检出一切生命体的动物。即用
现有的检验技术在动物体内外的任何部位均 检不出任何活的微生物和寄生虫。
3.饲养管理
SPF动物必须饲养在温湿度恒定的万级空 气净化的屏障系统中，实行严格的微生物控 制。
屏障系统：
主要是用于SPF级动物的饲育。有正压屏障构造、负压屏 障构造（生物安全屏障系统）也有用层流架（正压/负压）或 隔离器作SPF级屏障系统。空气经三级过滤净化后才进入屏障 设施之内，空气洁净度为1万级。出风口设有防空气倒流装置。 屏障系统设有清洁和污染走廊，进入系统的笼具、饲料、饮水、 垫料、器械等一切物品都要经过严格的消毒灭菌，人员进入要 经淋浴、更衣，使用专用的服装，进入的动物要有专用包装， 也经严格的消毒处理。系统内的人员、物品和空气等采用单向 固定的流通路线，有呼吸系统疾病和皮肤病的人员不能进入系 统内。结构要求和进入系统内的人、动物和物品的运行等与亚 屏障系统基本相同，但要求更为严格。
二、特点 1、微生物学特点
要求不携带所规定的人兽共患病原体和动物烈性传染 病的病原。
2、饲养管理 为了预防人和动物共理中必须采取一定的防护措施。 如饲料、垫料要消毒；饮水要符合城市饮用水卫生标准； 青饲料应经清洗干净晾干后再喂；外来动物必须严格隔离 检疫；房屋要有防野鼠、防昆虫的设施；要坚持经常性的 环境卫生及笼器具的清洗消毒，严格处理淘汰及死亡动物 以及限制无关人员进入动物室。
进入清洁区的人员、动物和物品要分别遵循一 定的运行路线： 1. 人员：更衣--淋浴--更衣--清洁走廊--饲养室或动物 实验室--污染走廊--洗刷消毒室--更衣--外部区域。

实验动物的微生物学、寄生虫学的检验检疫一、实验动物的微生物学、寄生虫学质量控制分类根据国家标准GB14922.1和GB14922.2，我国实验动物按微生物和寄生虫学控制分类，分为四个等级，即：①普通级动物（Conventional Animal, CV）；②清洁级动物（Clean Animal, CL）；③无特定病原体级动物（Specific Pathogen Free Animal, SPF）；④无菌级动物（Germ Free Animal, GF）。

现行标准中，大小鼠无普通级，犬、猴无清洁级及无菌级。

二、实验动物的微生物学、寄生虫学质量监测如何控制微生物和寄生虫，是实验动物标准化的主要内容之一。

一般而言，实验动物中，其微生物学和寄生虫学的控制等级越高、不确定因素和干扰因素越少，其实验结果就越准确、越可靠。

（一）监测意义1. 保证实验研究的顺利进行和工作人员的身体健康在人工饲养环境中实验动物被集中饲养，由于活动空间相对狭小，动物繁殖快、数量多、互相影响大，当受到外界或动物间各种病原体感染时，极易导致传染病的发生与流行。

实验动物疾病的发生与流行，除造成动物死亡外，还会干扰实验的顺利进行，引起生物制品的污染，对人类健康产生危害。

2. 确保实验数据的准确性和可重复性定期对实验动物和动物实验的环境设施、饲料、垫料和饮水等的监测，为确保实验动物符合控制等级要求提供了基础；对各级实验动物群进行微生物学、寄生虫学监测，可以确定各级实验动物是否符合原定级别，有利于排除不确定因素，保证实验动物和动物实验的质量可控，从而确保实验数据的准确性和可重复性。

也可以对实验动物不应有的病原体的入侵，及早采取措施，以免疫情扩大，导致动物的死亡，实验的终止而造成更大的损失，（二）监测方法实验动物的微生物、寄生虫检测具体操作方法详见《国家标准实验动物微生物学和寄生虫学的检测方法>>(GB/T 14926.1-14926.64；GB/T 18448.1～18448.10 ),检测方法归纳起来有病原学检测和血清学检测。