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植物组织培养技术专题复习典型例题：下图是植物组织培养的简略表示。
请据此回答：（1）①表示，它能被培养成为④的根本原因是。
（2）②表示，它的特点是。
（3）若想制作人工种子，应该选用（填编号）。
（4）若①是花粉则④是，这项技术可用在上。
（5）若①是胡萝卜根尖细胞，则培养成的④的叶片颜色是，这说明了根尖细胞。
（6）若用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物——紫草素，培养将进行到（填编号）。
【解析】本题考查植物组织培养的一般过程及应用。
植物的组织培养是用离体的植物器官、组织或细胞经脱分化使它们分裂增殖产生愈伤组织，愈伤组织经再分化，成为具有根、芽的幼体。
植物的组织培养所依据的原理是植物细胞具有全能性。
单倍体育种过程中，用花粉产生单倍体的过程是利用植物的组织培养，经秋水仙素处理成为纯合子，成为可育的个体。
紫草素是从大量的紫草的愈伤组织中提取的。
【答案】（1）离体的植物器官、组织或细胞细胞中含有发育成为完整个体所必需的全部基因（全能性）（2）愈伤组织高度液泡化的薄壁细胞组成，排列疏松而无规则（3）③（4）单倍体单倍体育种（5）绿色具有全能性（6）②模拟试题：1.下图表示水稻（体细胞有24条染色体）的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的培养过程，已知水稻的基因型为AaBb.（1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团，在愈伤组织形成过程中，必须从培养基中获得、和小分子有机物等营养物质。
（2）要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有和两类激素。
（3）愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再发育成具有根、茎和叶的植物体。
这一过程必须给予光照，其原因是利用光能制造有机物，供试管苗生长发育。
（4）试管苗的细胞中含有条脱氧核苷酸链。
（5）培育出的试管苗可能出现的基因型有。
（6）这种利用花药离体培养成的试管苗属于体。
要使它繁殖后代必须采取的措施是。
（7）从细胞工程角度看这种育种方法叫。
参考答案：1.（1）水矿质元素（2）生长素细胞分裂素（3）叶绿体（4）24 （5）AB、Ab、aB、ab （6）单倍用秋水仙素处理幼苗（7）植物的组织培养点击高考：1.（09上海36）．回答下列有关植物组织培养的问题。
植物组织培养14179植物组织培养：是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用人工培养基，对离体的植物胚胎、器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术。
又称为植物离体培养离体生态学：是指研究离体培养环境条件控制的科学，其研究对象是培养基、植物材料和人工环境条件外植体：用于离体培养的那部分植物器官、组织或细胞愈伤组织（callus）：是指外植体因受伤或在离体培养时，其细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织植物组织培养的特点1.组培技术是无菌操作技术。
2.组培材料处于完全的异养状态。
3.组培材料可以是离体状态的器官、组织、细胞或原生质体。
4.组织培养物可以形成克隆（clone，无性繁殖系），也可以进行茎芽增殖或生根5.组培容器内的气体和环境气体可通过封口材料进行交换，相对湿度通常是几乎100％，因此，组培苗叶片表面一般都无角质层或蜡质层，且气孔保卫细胞功能缺乏，气孔始终都是张开的。
6.组培的环境温度、光照强度和时间都是人为设定的，其参数可调植物组织培养的研究类型组织培养器官培养胚胎培养细胞培养原生质体培养植物组织培养的研究任务研究离体培养条件下，细胞、组织或器官所需营养条件和环境条件，细胞、组织或器官的形态发生和代谢规律，植物脱毒方法和机理，植物特别是一些难繁植物的大量快速繁殖方法，细胞融合方法和机理，再生个体的遗传和变异，种质资源的离体保存机理和方法等德国植物学家Schleiden和动物学家Schwann于1838-1839年提出的细胞学说德国植物学家Haberlandt于1902年提出了植物细胞具有全能性李继侗和沈同1933年成功培养了银杏的胚。
1952年， Morel和Martin提出了植物脱毒（virus free）技术Guha和Maheshwari等——花药培养Cocking等-原生质体培养Carlson等——原生质体融合植物组织培养的应用快繁和脱毒育种次生代谢物生产种质保存在遗传、生理、生化、病理等研究上的应用离体快繁（试管苗和人工种子）试管苗特点繁殖系数大、速度快，苗木整齐一致，周年生产人工种子指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒体。
中学生物选修一植物组织培育学问点总结生物是高考考试中重要的科目之一，尤其是植物组织培育这个学问点，是高考考试中必考学问点。
下面是为大家整理的中学生物学问点，希望对大家有所帮助!中学生物选修一学问点课题一菊花的组织培育植物组织培育的基本过程细胞分化：在生物个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
离体的植物组织或细胞，在培育了一段时间以后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形态态的薄壁细胞。
由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。
脱分化产生的愈伤组织接着进行培育，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。
再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。
植物细胞工程具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成完整个体的实力，即每个生物细胞都具有全能性。
但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，这是因为在特定的时间和空间条件下，通过基因的选择性表达，构成不同组织和器官。
植物组织培育技术的应用有：实现优良品种的快速繁殖;培育脱毒作物;制作人工种子;培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。
细胞分化是一种长久性的变更，它有什么生理意义?使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向特地化，有利于提高各种生理功能的效率。
比较根尖分生组织和愈伤组织的异同影响植物组织培育的条件材料：不同的植物组织，培育的难易程度差别很大。
植物材料的选择干脆关系到试验的成败。
植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响试验结果。
菊花组织培育一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。
一般来说，简单进行无性繁殖的植物简单进行组织培育。
选取生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩枝生理状态好，简单诱导脱分化和再分化。
养分：离体的植物组织和细胞，对养分、环境等条件的要求相对特别，须要配制相宜的培育基。
常用的培育基是MS培育基，其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。
植物组织培养复习资料第一章绪论一、概念：植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官.组织，细胞以及原生质体. 培养在人1:培养基上和人工控制的环境中，使其生长，分化，增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。
外植体：在无菌条件下，离体培养于人工培养基上的，用于达到某种培养目的的原始植物材料C培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人匚配制的营养基质即为培养基。
细胞全能性：植物体每一个细胞都含有该植物全部的遗传信息，在合适的条件下，具有形成完整植株的能力。
脱分化：一个成熟细胞恢复到分生状态或胚性细胞状态的现象。
再分化：是脱分化细胞重新恢复细胞分化能力，沿若正常的发育途径，形成具有特定结构和功能的细胞C二、组织培养的类型，不同分类依据（根据培养材料不同）可分为植株培养，胚胎培养，器官培养，组织或愈伤组织培养.细胞或原生质休培养5类：（根据培养目的）可分为试管嫁接，试管受精，试管加倍，试管育种等：（根据培养方法）可分为平板培养，微室培养，悬浮培养，单细胞培养等：（根据培养过程）可分为初代培养和继代培养：（根据培养基类型）可分为固体培养和液体培养。
三、三个发展阶段的关键人物1,haberlandt-一于1902年提出植物细胞全能性理论，被称为“组织培养之父”。
2,white—于1943年出版《植物组织培养手册》。
3,murashine和skoog -- 在1962年筛选出MS培养基。
四、植物全能性表达的过程培养一►脱分彳~再分化一培养五、组织培养的特点：1、植物基础学科研究的良好系统。
2、生物技术的基础。
3、经济高效.管理方便，利于自动化。
4、技术含量高，实验误差小，人工控制能力强。
5、生长周期短，生长速度快，实验重复性好。
6、实验材料经济，来源单一。
六、缺点：需要设备负复柴，投入资金多，电能消耗大：对人员技术水平要求高，对实验场所要求也高，不能代替田间试验。
第二章植物组织培养设备与培养条件一、实验室的组成及主要仪器和设备准备室：干燥箱，高压灭菌锅，电子天平，酸度计，水浴锅，冰箱。
堂清日结31、原生质是细胞内生命物质的总称。
原生质层指的是细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质。
去掉细胞壁的植物细胞就是原生质体，所以一个动物细胞就相当于一个原生质团。
2、原生质层的融合过程体现了细胞膜的流动性。
3、植物体细胞融合的实质：原生质体的融合，植物体细胞融合完成的标志：细胞壁的再生。
新细胞壁的产生与细胞内高尔基体相关。
4、植物组织培养中愈伤组织的形成是细胞分裂的结果。
5、植物细胞工程通常所采用的技术手段：植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术。
6、植物体细胞杂交的过程：1）酶解法去除细胞壁，获得原生质体2）利用物理或者化学法诱导原生质体的融合3）再生细胞壁，获得杂种细胞。
4）利用植物组织培养技术，通过脱分化和再分化获得杂种植物。
7、微型繁殖技术：也叫快速繁殖技术即快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
该技术与传统繁殖技术相比，具有：①繁殖速度快；②“高保真”（因为是无性繁殖）；③不受自然生长季节的限制（因为在具有一定人工设施的室内生产）等特点。
堂清日结41、作物脱毒材料：分生区细胞作物脱毒方法：进行植物组织培养作物脱毒结果：获得脱毒苗脱毒苗的特点：不会或极少感染病毒。
2、人工种子的组成：胚状体（或不定芽或顶芽或腋芽）+人工薄膜；要获得人工种子，需将离体的器官、组织或细胞培养至再分化阶段。
3、人工种皮中应具有的有效成分：适量的养分、无机盐、有机碳源、农药、抗生素、有益菌等，为了促进胚状体的生长发育，还可以向人工种皮中加入植物生长调节剂。
4、单倍体育种原理：染色体变异方法：花药离体培养采用的技术：植物组织培养技术优点：后代无性状分离、明显缩短育种年限突变体的利用育种原理：突变（基因突变、染色体变异）优点：能够产生新性状植物体细胞杂交育种原理：染色体变异优点：克服远缘杂交不亲和的障碍5、植物组织培养中易获得突变体的原因：培养的细胞一直处于分生的状态，易受培养条件和外界压力（如射线、化学物质等）的影响。
高考生物知识点：植物组织培养
植物组织培养是一种利用植物的细胞、组织、器官等进行无菌培养和繁殖的技术。
以
下是高考生物中与植物组织培养相关的知识点。
1. 组织培养的目的和应用：组织培养可以用于大规模繁殖植物，繁育优良植株，获得
大量无菌基质，研究植物生长发育、激素生物学等。
2. 组织培养的基本原理：组织培养利用植物细胞的无性繁殖能力，在无菌条件下培养
植物细胞、组织和器官，提供适当的养分和激素，创造适宜的生长环境，使其生长和
分化。
3. 组织培养的种类：包括无子繁殖、离体培养、植株再生等。
4. 无子繁殖：将植物的无性结构，如幼苗、叶片、叶柄、茎段、芽鳞等放入适宜的培
养基中，通过刺激其分裂增生和分化形成新的植株。
5. 离体培养：将植物的组织或器官，在无菌条件下切割并放入含有适宜养分和激素的
培养基中，促使其生长和分化成完整的植株。
6. 植株再生：通过植物体的某些部位（如气生根、愈伤组织等）培养和再生整个植株。
7. 组织培养的条件：无菌环境、适宜的培养基、适宜的温度、光照和湿度。
8. 组织培养中的植物激素：植物激素如生长素、赤霉素、细胞分裂素等，对植物的生
长和分化起到重要的调节作用。
9. 组织培养的影响因素：培养基的组成、激素浓度、光照条件、温度等都会对组织培养结果产生影响。
10. 组织培养的优点：可以大规模快速繁殖优良植株、修复植物、研究植物生理生化过程等，是种植业和植物繁育研究中的重要技术手段之一。
一．填空1、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、天平、显微镜、蒸馏水发生器、酸度计等。
2、培养基成分主要包括①无机营养成分（大量元素、微量元素和铁盐）、②有机营养成分（包括维生素、氨基酸等）、③植物生长调节物质、④碳水化合物、⑤其它物质。
3、培养基最常用的碳源是蔗糖，使用浓度在1%-5% 常用3 %。
4、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持培养基渗透压。
5、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物，一般用量为6-10g／L 之间。
6、驯化的目的：在于提高试管苗对外界环境条件的适应性，提高其光合作用的能力，促使试健壮，提高苗的移裁成活率。
7、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向，其比值高：有利于根的形成和愈伤组织的形成；低：有利于芽的形成。
8、培养基灭菌一般在108 kPa的压力下，锅内温度达121 ℃，维持20-30 min。
9、选择外植体时应选择①选择优良的种质、②选健壮的植株、③选最适的时期和④选取适宜的大小。
10、诱导胚状体比诱导芽的优点：(1)数量多、(2)速度快、(3)结构完整。
11、试管苗的生态环境：高温且恒温、高湿、弱光、无菌。
12、培养基中加入活性炭的目的：利用其吸附能力，减少一些有害物质的影响。
1植物组织培养按培养对象分为（）、（）、（）、（）、（）等几种类型。
2．一个已停止分裂的成熟细胞转变为（）状态，并形成（）的现象称为"脱分化"。
3．植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为（）培养和（）培养。
4 植物组织培养按培养的方式分为（）培养和（）培养。
5．目前植物组织培养应用最广泛的方面是（）和（）。
6．由脱分化的细胞再分化出完整植株有两种途径，一种叫做（），另一种叫做（）。
7．不同组织培养类型之间的相同点是（）。
8．进行植物组织培养时，外植体可以是（）、（）、（）、（）。
9．组织培养植株的再生途径有两条：一是（）发生，另一是（）发生。
植物组织培养期末复习题名词解释。
1、植物组织培养(plant tissue culture)：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养，并在人工控制的环境条件下，使其发育成完整植株的科学技术2、脱分化（dedifferentiation）：指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的细胞即愈伤组织的现象。
3、再分化（redifferentiation）：愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
4、外植体(explant)：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。
（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等）5、愈伤组织(callus)：原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。
在组培中，则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。
6、器官发生：胚胎时期由胚层器官原基发育成器官的过程。
包括细胞分化和器官形成。
7、胚状体发生：在植物细胞、组织或器官体外培养过程中，由一个或一些体细胞经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。
可进一步发育成植株。
8、细胞全能性（cell totipotency）：指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。
9、细胞分化：一个尚未特化的细胞发育出特征性结构和功能的过程。
10、极性：细胞（也可指器官或植株）内的一端与另一端在形态结构和生理生化上的差异。
11、试管苗：通过组织培养产生的植株。
12、看护培养：是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的一种培养方法。
这块愈伤组织被称为看护组织。
13、固相化培养：将细胞或原生质体固着在琼脂糖、藻（月元）酸盐或多聚赖氨酸中，然后将他们放入液体培养基中震荡培养。
这种培养方法既利用了振荡培养室营养物质和气体易于交换的优点，有利用了固相化使细胞免受振荡时剪切力的作用。
14、悬浮细胞培养：将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增值的技术。
一、什么叫植物组织培养技术？它有哪些类型？其理论依据是什么？（1）广义的植物组织培养（plant tissue culture）是指在无菌和人工预知的控制条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织或细胞进行离体培养，使其再生细胞或生长、分化成完整植株的技术。
狭义的植物组织培养仅指对植物的组织（如分生组织、表皮组织、薄壁组织等）及培养产生的愈伤组织（callus）进行离体培养的技术。
（2）类型：植株的培养；胚胎培养；器官培养；组织培养；细胞培养；原生质体培养。
（3）植物细胞全能性（totipotency）是植物组织培养的理论基础。
它是指一个生活的植物细胞，只要有完整的膜系统和细胞核，它就会有一整套发育成一个完整植株的全部遗传信息，在适当的条件下，这些信息可以表达，再生成一个完整植株。
三、试述目前植物组织培养的应用。
答：（1）植物离体快繁、（2）无病毒苗木培育、（3）培育新品种或创制新物种、（4）次生代谢物生产、（5）种质资源保存（6）人工种子。
一、简述培养基和器具的灭菌方法和技术。
培养基的灭菌方法：高压蒸汽灭茵法：培养基消毒灭菌时间不宜过长，也不可超过灭菌锅规定的压力范围（1.15kgf·cm-2或O.15MPa ，温度126 ℃)；否则，培养基中的蔗糖、有机物质，特别是维生素类物质就会分解，导致培养基变质、变色，甚至难以凝固。
过滤除菌法：过滤灭菌的原理是溶液通过滤膜后，细菌的细胞和孢子等因大于滤膜孔径而被阻。
器具的灭菌方法：（1）干热灭菌法干热灭菌法是将器具长时间放在高温下消除杂菌的一种方法。
其具体做法是将需要灭菌的器具(玻璃器皿或器械)先用铝箔包好，放入温度设定为150℃的恒温干燥箱内，保温2h，取出冷却后便可以使用。
（2）高压蒸汽灭茵法高压蒸汽灭菌法是将需灭菌的玻璃器皿、器械或培养基等放在高压蒸汽灭菌锅内，通过高温高压进行灭菌的一种方法。
一般在1.06 kg／cm2的压力下(121 ℃)下保持15～20min，就可达到灭菌效果。
1、概念： 组织培养：利用植物离体器官、组织或细胞(包括原生质体)，在适宜的人工培养基上和无菌条件下进行培养，使其生长、增殖、进而发育形成小植株的方法。也称之为离体培养（In vitro culture）。 愈伤组织：原指植物在受伤后，于伤口表面形成的一团薄壁细胞。 在组织培养中，指在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。 外植体：由活植物体上切取下来的可以用于组织培养的组织或器官
2、为什么说愈伤组织是最为常见的培养方式？ 原因：大部分组织培养经历callus再生途径长出植株；callus可以用于悬浮培养和原生质体培养。
3、组织培养的类型有哪些？ a按培养方法：固体培养、液体培养、看护培养、微室培养、包埋培养等 b按培养过程：初代培养、继代培养
4、组织培养在园艺业（农业）上的应用有哪些？ a倍性育种：花药培养、胚乳培养 b突变体筛选：愈伤组织培养 c创造新种质：细胞融合 d克服胚败育：胚培养 e植物性药物和生物制品的生产
5、在组织培养技术的发展中做出巨大贡献的人。 6、一个正规的组织培养实验室应具备哪些基本仪器？有何用途？ 烘箱，冰箱，灭菌锅，超净工作台，酸度计，摇床，显微镜，天平，培养箱。玻璃器皿，微孔过滤器，细胞计数器，接种用具。
7、一个正规的组织培养实验室应具备哪些房间？ 洗涤室（区），制备室（区），灭菌室（区），贮放室（区），操作室（区），培养室（区），观察室（区），药品室（区）
8、详细叙述组织培养过程中的基本技术规程 洗涤，灭菌，无菌操作~
9、培养基的类型有哪些？ a按性质分：基本培养基，完全培养基 b按状态分：固体培养基，液体培养基
10、培养基的主要成分有哪些？各有何作用？ a无机营养成分：大量元素（氮，磷，钾，钙，镁，硫）微量元素（硼、锰、锌、钼、铜、钴、氯、铁） b有机营养成分：含氮有机物（维生素、氨基酸）碳源和能源，植物激素 c其他成分：活性炭，琼脂，抗生素，缓化剂
11、配制培养基的基本步骤及注意事项有哪些？ 选择，配置（取样，加成分，测PH）
12、什么是人工种子？有哪些特点与优点？ 人工种子：(artificial seeds)亦称体细胞种子。任何一种经人工种皮包被或裸露的，具有形成完整植株能力的繁殖体均可称之为人工种子。 优点：a可以固定杂种优势； b解决部分名贵植物自然繁殖难的问题； c可以迅速繁殖生物工程产生的新材料； d在包裹材料中，可以加入农药化肥激素等； e可以产生无毒苗，用于脱毒； f批量生产、成本低、发芽率和生长速率一致； g体积小、运输方便； h可以直接播种和机械化操作 13、如何获得高质量的人工种子？ 体胚发生过程与合子胚相似，经过原胚、心形胚、鱼雷形胚、子叶（成熟）胚等阶段
14、优良的愈伤组织通常必须具备基本特性有哪些？如何达到诱导优良的愈伤组织的目的？ 15、详细叙述影响器官分化的因素。 外植体，光照，温度，生长激素
16.什么是离体授粉？离体受精？ 把通过在培养的整个雌蕊的柱头上授粉而结实的方法称做“离体授粉” 把离体条件下通过在裸露的胚珠上授粉而结实的方法称做“试管受精”
17.离体授粉有什么意义和应用？ 1 克服自交不亲合性； 2克服杂交不亲合性； 3通过孤雌生殖产生单倍体。
18.离体授粉存在的困难？ 19、为什么培养植物体中的分生组织可以达到去病毒的目的？影响脱毒效果的因素有哪些？ 分生组织所以能逃避病毒的侵染，可能的原因是： （1）在一个植物体内，病毒易于通过维管系统而移动，但在分生组织中不存在维管系统。病毒在细胞间移动的另一个途径是通过胞间连丝，但它的速度很慢，难以追赶上活跃生长的茎尖； （2）在旺盛分裂的分生细胞中，代谢活性很高，使病毒无法进行复制； （3）在茎尖中存在高水平内源生长素，可以抑制病毒的增殖。 （4）茎尖培养不但可以去病毒，而且可以去掉所有的病原菌(包括细菌、真菌等） 因素： 培养基，外植体大小，培养条件，外植体的生理状态，
20、如何对植物进行热处理消除病毒？ 基本原理：在高于正常的某一温度范围（35－40℃)下，植物组织中的很多病毒可被部分地或完全钝化，但很少伤害甚至不伤害寄主组织。 热处理，可通过热水或热空气进行。热水对休眠芽效果较好；热空气对活跃生长的茎尖效果较好。处理时间的长短，可由几分钟到数周不等。例如，麝香石竹在38℃下处理2个月，从而消除了茎尖内的所有病毒。
21、如何进行茎尖培养（大概的步骤和方法）？ 茎尖（shoot tip),约0.1－1mm，多数是由茎尖培养得到去病毒植株。或者是茎的顶端分生组织（apical meristem)0.25mm以内。 解剖镜（体视显微镜），解剖针，解剖刀。为了防止茎尖变干，要在衬有无菌湿滤纸的培养皿内进行解剖。 茎尖外植体要用75％酒精浸蘸一下或0.1％的次氯酸钠消毒（10分钟）。 在剖取茎尖时，要把茎芽置于解剖镜下，一手用一把细镊子将其按住，另一手用解剖针将叶片和叶原基剥掉。当形似一个透明闪亮的半球形顶端分生组织暴露出来之后，用一个锋利的长柄刀片将分生组织切下来，上面可以带有叶原基，也可不带，然后用同一工具接种到培养基上。对于难以生根的要嫁接到健康的砧木上。 注意，不要太大，以免带有较老的组织。
22、如何进行脱毒效果的检验？ 最简单的方法，是检验叶和茎是否有该种病毒所特有的可见病症。 病毒的汁液感染法（saptransmission)是一种用于检验病毒的所有方法中最为敏感的方法，由受检植株上取下叶片，置于等容积（W/V）的缓冲液（0.1mol/L 磷酸钠）中，用研钵和研杆将叶片研碎。 在指示植物（对某种或某些特定病毒非常敏感的植物）的叶片上撒上少许600号金刚砂，然后用受检植物的叶汁轻轻涂于其上。适当用力摩擦，以使指示植物叶表面细胞受到感染，但又不要受伤叶片。 大约5min后，用水轻轻洗去接种叶片上的残余汁液。把接过种的指示植物放在一间温室或防蚜虫罩内，株间以及与其他植物间都要隔开一定距离。
23、灭菌和消毒有何区别？为什么？ a灭菌：用物理或化学方法，杀死物体表面和孔隙内一切微生物或生物体，即所有生命的物质全部杀死。 b消毒：杀死、消除或抑制部分微生物，使之不发生作用。
24、常用的灭菌方法各有哪些优缺点？ a干热灭菌：160-180℃,1.5-2.0h b湿热灭菌：121℃, 20-40min c接种前用酒精棉球擦试，并在酒精灯火焰上灼烧灭菌。 d紫外灯照射(接种室、超净台、接种箱)：波长260nm，距离小于1.2m，20-30min。 e臭氧灭菌机：1-2h f熏蒸灭菌：5-8ml/m3甲醛+5g/ m3 高锰酸钾；冰醋酸；1-3%高锰酸钾或3%来苏儿。 g接种台喷雾消毒：75%酒精。
25、采用高压蒸汽灭菌时，应注意哪些事项？ 26、根据发育方向，初代培养可分为几种类型？ a丛生芽的发育 b不定芽的发育 c胚状体的发育 d原球茎的发育 27、组培成苗途径有几条
28、理解无菌无菌操作含义 29、污染、褐变和玻璃化产生的原因及预防对策是什么？ 污染：在组培过程中培养基和培养材料滋生杂菌，导致培养失败的现象。 a污染原因：细菌、真菌为病源菌；污染途径有外植体带菌，培养基及器皿灭菌不彻底，操作人员未遵守操作规程，环境不清洁。 b预防对策： （1）防止材料带菌：避免阴雨天在室外采集外植体；春秋组培；材料预培养。 （2）严格外植体灭菌 （3）接种用具灭菌彻底 （4）严守无菌操作规程 （5）保持培养室清洁
褐变 a原因：（1）植物品种（基因型） （2）生理状态 （3）培养基成分 （4）培养条件 （5）材料转移时间 b防止措施: （1）选择适宜的外植体 （2）选择合适的培养条件 （3）连续培养 （4）加抗氧化剂（VC、PVP、牛血清、牛蛋白） （5）加0.1－0.5%活性炭
玻璃化：离体培养物的嫩茎或叶呈半透明水渍状。为生理失调症。 a原因：细胞过程中的环境变化引起。导致玻璃化的因素有以下几方面： （1）激素浓度（尤其CTK）增加或CTK╱IAA高 （2）琼脂浓度低 （3）光照时间大于15h （4）温度低 （5）通风条件不好 （6）培养基离子种类及比例不适宜 3.预防措施： （1）适当控制培养基中无机盐成分，适当提高蔗糖和琼脂浓度，减少含氮化合物的用量，降低培养基的水势。 （2）适当降低CTK和GA的浓度。考虑加入适当的脱落酸。 （3）增加自然光照，控制光照时间；增加容器通气，控制温度。 （4）加入其他物质（如活性炭、多效唑、CCC）。
30、组培有些什么不同的叫法？ a离体无性快速繁殖 b试管苗繁殖 c植物快速繁殖 d植物克隆 e植物组织培养（组培） f细胞工程（包括细胞培养、细胞融合、组织培养、器官培养、转基因）
31、组培有些什么用途？ 在植物育种上的应用 a创造单倍体和三倍体 b快速获得纯合材料 c克服远缘杂交不亲和 d克服杂种胚早期夭折 e导入外源基因 f细胞水平上筛选突变体 g种质资源保存 h种苗脱毒与快速繁殖 i细胞培养生产次生产物 j植物遗传，生理生化及病理研究
32、组培大概的过程可分为哪几个阶段？ 阶段Ⅰ，无菌培养物的建立； 阶段Ⅱ，增殖阶段（继代培养）； 阶段Ⅲ，诱导长芽或生根； 阶段IV，植株的移栽。
33、如何进行壮苗？如何进行试管苗的移栽？ 生根与壮苗：在材料增殖到一定数量后，就使部分培养物分流，进入壮苗和生根阶段。一般认为矿物质浓度较高时有利于发展茎叶，而较低时有利于生根，所以多采用1/2或1/4的MS（生根）培养基，全部去掉或仅用很低浓度的细胞分裂素，并加入适量的生长素，如NAA，一般2－4周即可长根。通过生根可以达到壮苗的目的，如果还不行出现弱苗，可以考虑用PP333或降低湿度，增加光照、加入有机营养。 移栽： a水分和湿度 b适当的栽培基质：泥炭、粗砂、谷壳、锯木屑、珍珠岩等等；透气性好。提供一定营养。 c防治微生物滋生。用800－1000倍的百菌灵、多菌灵、托布津等，在种植后喷雾。洗去琼脂。 d环境：适当的光照、温度、营养，当生长良好时适当施肥。
