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浙江省第七届大学生生命科学学科竞赛 实验记录 序号: 81
实验时间: 9 月 1 日 08:00 - 12:00 请勿透露学校、教师和个人信息
细胞上板
【实验目的】
为了进一步验证目的基因是否整合至细胞基因组并表达,我们将提取CHO-K1细胞与
CHO-PMSG细胞RNA,反转录后PCR扩增基因来验证目的基因是否表达。同时通过提取
CHO-K1细胞RNA来验证该目的基因是否是转染得到的。
【实验仪器】
HH-2数显恒温水浴锅 国华电器有限公司
TE2000-S荧光倒置显微镜 Nikon japan
HFsafe-1200生物安全柜 力康发展有限公司
BB15 CO2细胞培养箱 Thermo
【实验过程】
1)
37℃预热 PBS、F12培养基及胰蛋白酶。
2) 取出CHO-K1、CHO-PMSG细胞放入无菌操作台中,弃去培养基。
3) 用 PBS 洗涤细胞两遍,加入胰蛋白酶消化细胞。
4) 消化后加入细胞培养,用滴管将成团的细胞吹打成单个细胞。
5) 取出新的六孔板,将两种细胞分别加到六孔板中,并标记。
6) 将六孔板放入 37℃二氧化碳为 5%的恒温箱中培养。
浙江省第七届大学生生命科学学科竞赛 实验记录 序号: 81
实验时间: 9 月 1 日 08:00 - 12:00 请勿透露学校、教师和个人信息
【实验后续安排】
待细胞都贴壁并汇合度大于80%时,提取各孔细胞的RNA,RT-PCR得到cDNA后扩增目
的基因并电泳观察目的基因的表达量。