⒊酶和细胞的固定化方法
B、离子结合法:
酶通过离子键结合于具有离子交换基的水不 溶性载体上。
优点:操作简单,处理条件温和,酶的高级结 构和活性中心的氨基酸残基不易被破坏。
缺点:载体和酶的结合力弱,易受缓冲液种类 或pH的影响,离子强度高时,酶易脱落。
⒊酶和细胞的固定化方法
C、共价结合法: 酶以共价键结合于载体上。即将酶分
〔2〕包埋法制备技术:
凝胶包埋:先将凝胶材料与水混合, 加热使之溶解,再降至其凝固点以下的温度, 然后假设预保稳的酶液,混合均匀,最后冷 却凝固成型和破碎即成固定化酶。
5、固定化酶的制备技术
微囊化包埋:将酶定位于具有半透膜的微小囊内。半透 膜厚约20nm,膜孔径40 nm ,其外表积与体积比很大, 包埋酶量也多。
〔2〕对酸碱有一定的耐受性;
〔3〕有一定的机械强度; 有一定的亲水性和稳定性;
〔4〕
〔5〕有一定的疏松网状结构,颗粒均匀;
〔6〕共价结合时有可活化基团;
〔7〕有耐受酶和微生物细胞的能力:
〔8〕廉价易得。
5、固定化酶的制备技术
〔1〕吸附法制备技术:将酶的水溶液与具有 高度吸附能力的载体混合,然后洗去杂质和 未吸附的酶即得固定化酶。
固定化细胞的缺点:
(1)必须保持菌体的完整,防止菌体自溶, 否那么,将影响产品纯度。 (2)必须防止细胞内蛋白酶对所需酶的分解, 同时,需抑制胞内其他酶的活性止副产物 的形成。 (3)细胞膜、壁会阻碍底物渗透和扩散。
⒊固定化细胞的制备技术
⑴载体结合法 是将细胞悬液直接与水不溶性的载体 相
结合的固定化方法。 载体:主要为阴离子交换树脂、阴离子交 换纤维素、聚氯乙烯。 优点:操作简单,符合细胞的生理条件, 不影响细胞的生长及酶活性。 缺点:吸附容量小结合强度低。