中药虎杖雌激素活性组分的分离及活性测试

风利湿 、 癖 定 痛 、 咳 化 痰 等 功 效 … 。 虎 杖 中主 要 散 止 含有 蒽醌类 、 苯 乙烯 类 、 二 黄酮类 、 萘醌类 等 成分 ， 具有
抗 肿瘤 、 抗炎 、 衰 老 等药 理 作 用 Ｉ ， 其 是 其 中 的 抗 ３ 尤
胞株 Ｍ Ｆ一７细胞 的增 殖 ， 中大黄 素和 大黄 素 一８一 Ｃ 其
杖 中的雌 激素 活性 成分 ， 以期 对 虎杖 中 的雌 激 素 活性
的防治 作用 ， 并少 有雌 激素样 副作 用 的产生 ， 因此 正 日
收 稿 日期 ：０ ６—２０ ２ ０ １ －５
成 分进 行 比较 系统 的研究 。
修 回 日期 ：０ ７ ３ １ ２ ０ － ．２ ０
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具 有较 高的雌 激素 活性 。进 一 步对其 中的第三 个 活性组 分 利 用制 备 高 效液 相 色谱 进 行 了精 制 ， 对流 出
物按 ２分钟 间隔收集 ， 共得到 ２ ０个馏 分。转基 因酵母 法测 定其雌 激 素活性 的结果显 示 ， 在这 ２ ０个馏 分 当中 ， ５个馏 分具 有较 强 的雌 激素 活性 。分 别将 其雌 激 素 活性 与化 学组 成进 行 关联 ， 现其 中的 ｓｂ 有 发 ｕ
Ｏ—Ｂ—Ｄ一葡 萄 糖 苷是 虎杖 最 主 要 的 雌激 素 活性 成
分 。另外 ， 虎杖 中的二 苯 乙烯 类 化 合 物 一白藜芦 醇 也 被证 实具 有雌 激素 样活性 Ｉ 。而我 国在 虎 杖 的雌 ９ 激 素研究 方 面 尚无 报 道 。为 了更 加 深入 的研究 中药虎
蒽醌类 化合物 在抗 雌激 素缺 乏型肿 瘤方 面具有 突 出 的 效果 。 目前在 临床 上 ， 杖还 广 泛 被 用 于心 血 管 疾 病 虎
酸和尿 嘧 啶 ） １ ｐ一雌 二 醇 （ ｉ ） 酶反 应 底 物 Ｏ— ；７ ｓ ｍａ ； ｇ
ｎｔ ｐ ｅ ｏ — ｐ — Ｄ — ｇ１ｃ ｐｒｎｓ ｅ（ Ｎ Ｇ ）（ ｉ ｉｏｈ ｎ ｌ ｒ ａ ｔ ｙａ ｏｉ Ｏ Ｐ ａｏ ｄ ｓ— ｇ
１遮 ．
虎杖 ， 购于 大连 群 益 药 房 ， 地 山东 ，０ 乙 醇 冷 产 ７％
浸法 提取 。
性 测试 的结 果 ， 在利 用 高 效 液相 色 谱 进 行 了梯 度洗 脱
条 件优 化 以及考 察 了 上样 量 的基 础 上 ， 其 中 的高 活 对
用 于酵 母 生长 的培 养 基 为 ｓ ｃ培 养 基 （ 含 色 氨 不
８ ［ ｒ ｃ ｎｅ ｎ ｅｈ ｏ ｇ￣ ｄｒｉ ｔ ｎｏ ｒｄｔ ｎｌ ｈｎｓ Ｍｅｉｎ ｎ ｔ ｉ Ｍｅｉ ］ Ｗｏ ｄＳｉ ｃ ｄＴｃｎｌ ｙ Ｍｏｅ ｚ ｉ Ｔａｉｏａ Ｃ ｉ ｅ ｄ ｉｅａｄＭａ ｒ ｄｃ ｌ ｅ ａ ｏ ｎ ａｏ ｆ ｉ ｅ ｃ ｅ们 的重 视 。针 对 中药 虎 杖 的雌 激 素 活 性 ， 日本 的松 田久 司研 究证 实 虎杖 中 的雌 激素 活性 成分 主 要是 蒽醌 类 化 合 物 ； ｉ ｓｉＭａ ｕ ａ等 发 现 中药 虎 Ｈｓ ｈ ａ ｔｄ ｓ
杖 的 甲醇 提取 物 （ ０～１ ０ Ｉ ／ Ｌ 可促 进 人乳 腺 癌 细 ３ ０ ｚ ｍ ） ． ｇ
和肝 病 等症 的治疗 。
近年来 ， 物雌 激 素 由于 其 对 激 素依 赖 性 疾 病如 植 乳 腺癌 、 前列 腺癌 、 血管疾 病及 骨质疏 松等 具有 广泛 心
杖 的雌 激素 活性成 分 ， 同时 发 现 新 的 具有 雌 激 素 活 性
的微 量成 分 ， 文 采用 制备 效率 高 、 复性好 的高效 液 本 重 相色 谱制 备手 段和 具有 高通 量特 性 的转基 因酵母 雌激 素活性 测 试方法 相 结合 ， 即活 性 跟 踪 分 离 法 来 研究 虎
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２０ 第九卷 ０７
第二 期
★Ｖ １９Ｎ ． ｏ． ｏ２
摘 要 ： 药材虎 杖 用 ７ ％ 乙醇冷浸 法进行 提取 。 对虎杖 中蒽醌 类化 合 物 集 中分布 的 乙酸 乙酯 分 配 ０
组 分首先进 行硅 胶柱 分 离 ， 到 ６个 组分 ， 用 转基 因酵母 法 测定 其 雌激 素 活性 ， 果表 明前 三 个组 分 得 利 结
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ｆ ｃｉ ｒ ｔ ｎ一１ ａ ｏ ３中可能存 在非 大黄 素的雌 激素 活性 成分 。 关 键词 ： 虎杖 制备 高效液相 色谱 雌激 素 活性 转基 因酵母
中药 虎 杖 为蓼 科 蓼 属 多 年 生 草 本 植 物 虎杖 （ ｏ Ｐ— ｌ ｏ ｕ ｕｐｄ ｔｍ Ｓｅ ．ｔ ｕ ｃ ） ｙ ｎ ｍ ｃｓｉａｕ ｉ ｅ Ｚ ｃ 、 的根 及根 茎 ， ｇ ｂ 主要分 布于 江苏 、 广东 、 四川 等省 区 。虎杖 味苦 、 寒 ， 有祛 性 具
世 界 科 学 技 术 一 中 医 药 现 代 化 ★基 础 研 究
一
、
实 验
隔收集 ， 共得 到 ３ 一 ３个 小组 分 ， 据 薄层 跟 踪 分 析结 根
果 ， 后合 并得 到 ６个组 分 ， 最 分别 命 名 为 Ｈ ０ １— １一 ｚ０ ０
Ｈｚ０ — ６ ０ １ ０ 。这 ６个 组分 旋转 蒸发 浓缩 后 ， 别称 取等 分 量 样 品用 Ｄ Ｓ Ｍ Ｏ溶 解 用 于 生 物 测 试 。根 据 雌 激 素 活
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ｑ国科 学 院知 识 创 新 工 程 重 要 方 向 项 目（ Ｇ Ｘ ．Ｗ一１ ） “ 于 现代 理 论 和技 术 的 复 方 ｑ 药 系统 研 究 ” 负责 人 ： 鑫 淼 。 － Ｋ Ｇ ２Ｓ ２ ３ ：基 － ， 梁
联 系人 ： 鑫 淼 ， 究 员 ， 刊 编委 ， 要研 究 方 向 ： 分 中 药研 究 ，ｅ：４ １８３ ９ １ ， － ａｌｌ ｎ】 ＠ ｄ ．ｃ ｃ 。 梁 研 本 主 组 Ｔ ｌ０ １．４ ７ ５ ９ Ｅ ｍ ｉ ｉ ｇｍ ｉｐ ａ－ｎ ：ａ 【